浙江大学生物化学实验甲 酶的基本性质(3)-温度对酶活力的影响

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示反应速度)为纵坐标,绘制温度-酶活力曲线,
并根据该曲线判断蔗糖酶的最适温度。
酶的基本性质(3)-温度对酶活力的影响
2、蔗糖酶活力的测定原理
蔗糖
蔗糖酶
H2O
葡萄糖 + 果糖
HO
CH2OH O OH +
CH2OH O HO CH2OH
OH HO OH OH
还原糖 + 3,5-二硝基水杨酸
(DNS试剂)
OH△
糖酸 + 氨基化合物
红 棕色, 540nm处 具特征光吸收, OD540值与还原糖 含量成正比,可据 此进行比色测定。
酶的基本性质(3)-温度对酶活力的影响 1.3、材料与试剂
1、实验材料 干酵母粉,新鲜唾液,淀粉,蔗糖 2、试验试剂
蔗糖酶液,唾液淀粉酶液的配制及注意事项参
P104 3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂,使用时的注
意事项参P104
1.4、操作方法
酶的基本性质(3)-温度对酶活力的影响
操作过程及各步注意事项参P104 1.5、实验结果及处理
温度对酶催化的反应有双重影响,一方面,在
一定范围内,随温度的升高酶促反应速度加快,
直至到达最大值; 另一方面,由于酶是蛋白质,随温度的升高, 酶蛋白逐渐变性,反应速度越来越小。高温, 则酶变性失活。
1.2、原理
酶的基本性质(3)-温度对酶活力的影响
1、唾液淀粉酶活力的测定原理
淀粉酶 淀粉酶 淀粉酶 淀粉酶 淀粉酶 淀粉 紫色糊精 红色糊精 无色糊精 麦芽糖 葡萄糖 H2O H 2O H2O H 2O H2 O I2 I2 I2 I2 I2 I2 蓝色 紫色 红色 不显色 (碘色) (金黄色) 不显色 (碘色) 不显色 (碘色)
1、唾液淀粉酶最适温度的测定 仔细观察记录各管颜色,以反应液温度为横坐
标,反应液颜色的深浅程度(代表酶活力的大
小)为纵坐标,绘制温度-酶活力酶的最适温 度。
酶的基本性质(3)-温度对酶活力的影响
2、蔗糖酶最适温度的测定 以反应温度为横坐标,相应的OD540的值(表
酶的基本性质(3)-温度对酶活力的影响 1.1、最适温度的概念
酶的最适温度:酶活力最大(或酶促反应速度 最大)时的温度。高于或低于最适温度,酶活 力均降低。
如用酶活力对温度作图,则通常具有钟罩形曲
线的特征。 酶的最适温度不是酶的 特征常数,底物、作用 时间、pH等对其有影响。
最适T T v
酶的基本性质(3)-温度对酶活力的影响
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