坐骨神经神经冲动传导速度的测定
大鼠坐骨神经传导速度测定的方法学考察
姚鸿萍＊，封卫毅#，魏友霞，董海燕（西安交通大学医学院第一附属医院药学部，西安市 710061）
中图分类号 R965.2
文献标识码 A
文章编号 1001-040（8 2011）01-0018-03
摘 要 目的：比较 3 种测定大鼠外周运动神经传导速度（MNCV）方法的结果。方法：采用在体直接测定、在体间接测定、离体直 接测定考察正常大鼠坐骨神经 MNCV 值，并将研究结果在链脲佐菌素引起的糖尿病模型大鼠以及用降糖药格列奇特进行治疗的 模型大鼠上进行验证。结果：在体间接测定和离体直接测定正常大鼠坐骨神经 MNCV 值均与在体直接测定值有显著性相关关系 （r＝0.832 8、0.978 1，P＜0.01）；在体直接测定和在体间接测定模型大鼠坐骨神经 MNCV 值有相关关系（r＝0.879 7，P＜0.05）。结 论：3 种方法测得的大鼠 MNCV 值间均具有一致性，均能反映 MNCV 的变化情况。 关键词 神经传导速度；在体直接测定；在体间接测定；离体直接测定；大鼠；糖尿病模型
S1
S1：坐骨切迹处刺激电极
S（2 R1）：踝关节处刺激或记录电极
E
R2：足趾第一骨间肌肉处记录电极
S（2 R1） E
E：参考电极
R2
图 1 大鼠 MNCV 测定部位图 Fig 1 The determination site of MNCV in rats
用波宽 0.1 ms 的单脉冲方波刺激，逐渐增大刺激强度，可 以从记录电极上开始记录到双相的复合动作电位，逐渐减小 刺激强度，所记录的复合动作电位逐渐消失，反复调整刺激强 度，以复合动作电位出现或消失时的刺激强度为刺激阈值，记 录刺激阈值。以 1.5 倍阈值作为刺激强度进行测定，并记录测 定的肌电图或神经电位图，每 2 个刺激之间间隔 5 s 以上。将 双相复合动作电位的峰值至峰谷之间的电位值作为波幅值。 严格控制室温（20±0.5）℃，保持大鼠体温 37 ℃。计算机记录 刺激开始到动作电位出现的时间作为兴奋信号的传导时间， 重复测定 7～10 次，计算平均值。将大鼠后足以自然肢体状态 与脊柱成 45°夹角向斜后方拉直，沿坐骨神经经过部位和方 向，在大鼠体表准确测定刺激电极至记录电极之间的距离。 代入公式：MNCV（m·s－1）＝刺激电极与记录电极间的距离/传 导时间，计算测定部位的 MNCV。 2.2.2 在体间接测定：将直接测定方法中的刺激电极和记录 电极均作为刺激电极，于大鼠足趾第一骨间肌肉处用双针电 极记录，参考电极放置方法、刺激参数、记录方法及其他条件 同在体直接测定（见图 1）。计算机分别记录兴奋传导潜伏 期。重复测定 7～10 次，计算平均值。分别准确测定大鼠体表 2 刺激电极到记录电极之间的距离。代入公式：MNCV（m· s－1）＝2 刺激电极与记录电极之间距离差/2 刺激电极与记录电 极之间潜伏期之差，计算 MNCV。 2.2.3 离体直接测定：进行 MNCV 在体直接测定之后，标记电 极放置部位。剪开坐骨结节处和踝关节坐骨神经经过部位的 皮肤，小心分离坐骨神经，将电极对分别置于在体测定时所标 记部位的坐骨神经干上，闭合手术部位皮肤。以坐骨结节部 位电极对为刺激电极，远端电极为负极；踝关节部位电极作为 记录电极；参考电极置于刺激电极与记录电极之间、与记录电 极相距 1 cm 处的皮下（见图 1）。刺激参数、记录方法及其他实 验条件控制与在体直接测定相同，计算机记录神经冲动传导 时间。重复测定 7～10 次，计算平均值。然后分离坐骨神经， 测定刺激电极到记录电极之间的坐骨神经长度。代入公式： MNCV（m·s－1）＝刺激电极与记录电极间的坐骨神经长度/神 经传导时间，计算刺激电极与记录电极间的 MNCV。
【实验报告】骨骼肌的单收缩与复合收缩及神经干动作电位、神经冲动传导速度、神经干不应期的测定
实验二：骨骼肌的单收缩与复合收缩及神经干动作电位、神经冲动传导速度、神经干不应期的测定实验人：同组人：【实验目的】✧了解肌肉收缩过程的时相变化✧观察刺激强度和频率对骨骼肌收缩形式的影响✧掌握离体神经干动作电位的细胞外记录法及其基本波形的判断和测量。
✧掌握神经干动作电位传导速度及其不应期的测定方法。
【实验原理】✧骨骼肌的单收缩与复合收缩肌肉兴奋的外在表现是收缩。
当其受到一个阈上强度的刺激时，爆发一次动作电位，迅速发生一次收缩反应，叫单收缩。
单收缩曲线分为潜伏期、收缩期、舒张期三个时期。
在一定范围内，肌肉收缩的幅度随刺激强度的增加而增大。
当相继受到两个以上同等强度的阈上刺激时，因频率不同，下一次刺激可能落在前一刺激所引起的单收缩的不同时期内，造成：✓几个分离的单收缩：频率低于单收缩频率，间隔大于单收缩时间✓收缩的总和（强直收缩）：不完全强直收缩：后一收缩发生在前一收缩的舒张期完全强直收缩：后一收缩发生在前一收缩的收缩期内，各收缩不能分开，肌肉维持稳定的收缩状态。
✧神经干动作电位、神经冲动传导速度、神经干不应期的测定⏹神经干是由许多神经纤维组成的，神经兴奋的标志是动作电位。
在一定范围内神经干动作电位的幅度随刺激强度的增加而增大，这是由于各神经纤维兴奋性的不同，虽然每条纤维动作电位产生都遵守“全或无”的方式，但神经干动作电位记录到的是多个兴奋阈值、传导速度和振幅各不相同的动作电位的总和，为一个复合动作电位，所以不存在阈强度，也不表现为“全或无”的特征。
根据引导方法的不同（双极引导或单极引导），可分别得到双相、单相动作电位。
⏹动作电位在神经纤维上的传导有一定的速度。
不同类型的神经纤维其传导速度各不相同，主要取决于神经纤维的直径、有无髓鞘、环境温度等因素。
蛙类坐骨神经干传导是速度约为35-40 m/S, 神经纤维在一次兴奋过程中，其兴奋性可发生周期性变化，包括绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期。
⏹为了测定神经一次兴奋之后兴奋性的变化，可先给神经施加一个条件性刺激，引起神经兴奋，然后再用一个检验性刺激在前一兴奋过程的不同时相给予刺激，检查神经对检验性刺激反应的兴奋阈值，以及所引起的动作电位的幅度变化，来判断神经组织兴奋性的变化。
牛蛙坐骨神经干复合动作电位及其传导速度、不应期测定
牛蛙坐骨神经干复合动作电位及其传导速度、不应期测定【实验原理】：（1）动作电位：用电刺激神经，在刺激电极的负极下神经纤维膜内产生去极化，当去极化达到阈电位，膜上产生一次可传导的快速电位反转，即动作电位。
（2）神经干由许多神经纤维组成。
其动作电位是以膜外记录方式记录到的复合动作电位。
经干引导所获得复合动作电位（compound action potential (CAP）与单神经纤维引导的动作电位的性质有所不同。
（3）双向动作电位：如果两个引导电极置于兴奋性正常的神经干表面，兴奋波先后通过两个电极处，便引导出两个方向相反的电位波形，称双相动作电位。
（4）单向动作电位：如果两个引导电极之间的神经纤维完全损伤，兴奋波只通过第一个引导电极，不能传至第二个引导电极，则只能引导出一个方向的电位偏向波形，称单向动作电位。
神经干受刺激后，以膜外记录方式可记录到一个双相动作电位，在两个引导电极间损伤神经其动作电位变为单相。
在两引导电极间夹伤神经，神经冲动传导被阻断，双相动作电位负相波消失，形成一相正波，于此可见，双相动作电位是神经冲动先后通过两个引导电极形成的，冲动通过第1个电极，形成动作电位的正相波，冲动通过第2个电极，形成动作电位的负相波。
（5）刺激伪迹(Stimulus artifact)：刺激伪迹是刺激电流通过导电介质扩散至两引导电极而形成的电位差信号。
（6）动作电位传导速度的测定：（7）不应期：神经组织在接受一次刺激产生兴奋后，其兴奋性将会发生规律性的变化，依次经过绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期，然后回到正常水平。
采用两次脉冲，通过调节两次脉冲间隔，可测得坐骨神经的绝对不应期和相对不应期。
【注意事项】：①神经尽可能分离得长一些。
②标本制备时要注意保持标本的湿润。
③标本制备时尽量避免使用尖锐的器械，以免损伤神经。
④使用电刺激时，刺激强度不宜太大，否则可能导致神经的损伤。
⑤注意接地，防止干扰。
1、末梢引导：条件为刺激电压1.2V ，刺激波宽0.1ms 。
实验3神经干动作电位及神经冲动传导速度的测定-精选文档
1.观察坐骨神经干单相、双相动作电位 的基本波形，并了解其产生的基本原理。 2.学习用电生理学的方法测定蟾蜍坐骨 神经的神经冲动传导速度。
动作电位的传导 (Conduction of AP)
实 验 原 理
－＋ －＋ －＋ －＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋＋＋＋ －－－－ ＋－ ＋－ ＋－ ＋－ － － － － － － － －
局部电流
＋－ ＋－ ＋－ ＋－ － － － － － － － － －－－－ －＋ －＋ －＋ －＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋＋＋＋ ＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋ －－－－－－－－－－－－－－－
－－－－－－－－－－－－－－－ ＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋ 动作电位以局部电流的形式传导， 且神经纤维的动作电位是以“全”或“无”的方式发生的。
动作电位传导速度的测定
Measurement of Conduction Velocity of AP
+
S
Δt AC ———
传导速度测定 υ=
S Δt
刺激伪迹
刺激伪迹是刺激电流通过导电介质扩散至两引导电极而形成 的电位差信号。由于膜上离子通道的开放需要时间，因此刺 激伪迹的起点到动作电位起点有一段距离。
•
•
综合分析与描述
刺激电极
引导电极
实 验 步 骤
1.保持频率为某一数值（16Hz）时观察神经干动作电位的幅度 在一定范围内随刺激强度变化而变化的现象。 2.给予神经干最大强度刺激（1.5V），观察形成的双相动作电位 波形。分别测量两个动作电位起始点的时间，求出它们的时 间差值。两对引导电极之间的距离S=10cm。 3.用镊子依次将第二对引导电极、第一对引导电极以及刺激电 极处的神经干标本夹伤，荧屏上呈现电位变化。读出不同电刺激 强度时单相动作电位幅度和电位持续时间数值。
4神经干动作电位的引导及神经兴奋传导速度的测定
4神经干动作电位的引导及神经兴奋传导速度的测定西安交通大学医学院教案, 引导蟾蜍坐骨神经动作电位，并观察其基本波形（包括双相和单相动作电位）。
, 学习和掌握神经干动作电位传导速度测定的原理和方法。
, 学习和掌握蟾蜍坐骨神经-腓神经标本制备方法。
, 复习讲解神经干动作电位和神经纤维动作电位的区别、神经干动作电位形成的过程及神经干兴奋传导速度的测定原理等。
, 制备坐骨神经—腓神经标本。
, 引导单、双相动作电位及测定兴奋传导速度。
, 神经干双相动作电位的形成机制。
, 兴奋传导速度的测定原理。
【】1. 引导蟾蜍坐骨神经动作电位，并观察其基本波形（包括双相和单相动作电位）。
2. 学习和掌握神经干动作电位传导速度测定的原理和方法。
3. 学习和掌握蟾蜍坐骨神经-腓神经标本制备方法。
【】动作电位是神经细胞兴奋的客观标志，当神经纤维或神经干受到有效刺激时，必然会产生可传导的动作电位，也称为神经冲动。
由于神经干动作电位是许多单根神经纤维动作电位的复合，所以它的特征不同于单根神经纤维的动作电位。
本实验采用离体细胞外记录法，记录神经干兴奋时两个记录电极之间的电位变化。
动作电位可沿神经纤维进行双向传导，其传导速度取决于纤维直径、内阻、有无髓鞘等因素。
通过测定动作电位传导的距离和时间，可算出动作电位在神经纤维上的传导速度。
【】1. 动物蛙或蟾蜍。
2. 试剂和药品任氏液3. 装置和器材计算机、蛙类手术器械、神经屏蔽盒、直尺、圆规、培养皿。
【】1. 神经干动作电位的引导1）制备坐骨神经-腓神经标本制备方法与制备坐骨神经-腓肠肌标本基本相同，只是当把坐骨神经游离至膝关节后，在腓肠肌一侧继续分离腓神经至足趾，用线结扎，并在结扎线远端剪断。
将制备好的坐骨神经-腓神经标本浸入盛有任氏液的培养皿内备用。
2）将神经标本置于神经屏蔽盒的电极上。
将神经的近中枢端置于刺激电极一侧，外周端置于记录电极侧。
3）进入BL-410生物信号采集、处理系统，单击菜单栏中实验项目，在肌肉、神经实验中选择神经干动作电位的引导。
实验一神经干动作电位的引导,兴奋传导速度及不应期的测定
神经干动作电位、传导速度及不应期的测定【目的和原理】神经纤维的兴奋表现为动作电位的产生和传导，神经纤维上传导的动作电位通常称为神经冲动。
在神经细胞外表面，已兴奋部位带“负电”，未兴奋部位带“正电”，用引导电极引导出此电位差，输入到示波器，则可记录到动作电位的波形。
本实验用细胞外记录法，可引导出坐骨神经的复合动作电位。
神经纤维兴奋的标志是产生一个可以传导的动作电位，它依局部电流或跳跃传导的方式沿神经纤维传导。
其传导速度取决于神经纤维的直径、内阻、有无髓鞘等因素，可用电生理学方法来记录和测量。
神经纤维在一次兴奋过程中，其兴奋性可发生周期性变化，包括绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期。
本实验主要目的是学习电生理仪器的使用方法，掌握离体神经干动作电位的细胞外记录法及其基本波形的判断和测量。
掌握神经干动作电位传导速度及其不应期的测定方法，通过调整条件刺激和测试刺激之间的时间间隔，来测定坐骨神经干的绝对不应期。
【实验对象】蟾蜍或蛙。
【实验器材和药品】蛙类手术器械一套、电子刺激器、示波器（或计算机实时分析系统）、神经屏蔽盒、任氏液。
【实验步骤】1．制备坐骨神经——胫、腓神经标本操作方法详见3．8。
2．连接装置（见图8-1-1）。
3．准备仪器：（1）刺激器：调节刺激器各项参数：刺激方式连续刺激，频率16Hz，刺激强度0.5v，波宽0.1ms。
调节延迟使动作电位的图像位于示波器荧光屏的中央。
（2）示波器：灵敏度：1～2mv/cm，扫描速度：1～2ms/cm，引导电极输入到示波器的“AC”端，双边输入，刺激器的“同步输出”接示波器“外触发输入”，触发选择设置为“同步触发”。
4．观察项目：图8-1-1 神经干动作电位引导装置图（1）测量单、双相动作电位的潜伏期、时程和振幅，填入下表：（2）测算动作电位的传导速度：V=S/△t （米/秒）式中：S为R1到R3的神经干长度，以米为单位。
t为上、下线动作电位起点的时间差，以秒为单位。
蟾蜍坐骨神经干动作电位传导速度和兴奋性不应期的测定实验报告
神经干双向动作电位的引导传导速度及不应期的测定组员：陈良鹏肖瑶伍思静袁果曼罗冰清实验目的：观察蟾蜍坐骨神经动作电位的基本波形，掌握坐骨神经制备方法与引导动作电位的方法，理解与刺激和最大刺激强度的概念测定潜伏期时程和波幅，学会通过潜伏期法和潜峰法测定神经冲动的传导速度，通过测定神经干不应期理解兴奋性在兴奋过程中的变化过程。
实验对象：蟾蜍实验药品和器材:蛙类手术器械，BL-410生物信号记录分析系统，神经屏蔽盒，任氏液等。
实验原理：1、神经动作电位是神经兴奋的客观标志。
当神经受到有效刺激时，处于兴奋部位的膜外电位负于静息电位；当动作电位通过后，兴奋处的膜外电位又恢复到静息时水平。
神经干兴奋过程所发生的膜电位变化称神经复合动作电位。
如果将两个引导电极置于神经干表面时（双极引导），动作电位将先后通过两个引导电极处，可记录到两个相反的电位偏转波形，称为双向动作电位。
2、神经纤维兴奋的标志是产生一个可传播的动作电位。
测定神经干上的神经冲动的传导速度，可以了解神经的兴奋状态。
在示波器上测量动作电位传导一定距离所耗费的时间，便可计算出兴奋的传导速度。
3、神经与肌肉等可兴奋组织兴奋性在一次兴奋过程中可发生系列变化，即绝对不应期相对不应期超常期和低常期，组织的兴奋性才逐渐恢复。
为了测定神经干在兴奋过程中的兴奋性变化，可先给一个条件刺激以引起神经兴奋，然后再用另一检验性刺激，检查神经对检验性刺激反应的兴奋阈值以及所引起的动作电位（AP)幅度，即可观察到神经组织兴奋性的变化过程。
在本次实验中，主要观察的是不应期的变化，而非整个兴奋性的周期性变化。
实验对象：蟾蜍实验步骤及方法:1.坐骨神经—腓神经标本的制备。
2.将标本放入神经屏蔽盒，（注意刺激电极端为神经干的中枢端）。
3.仪器连接。
4.BL-410的操作。
实验内容：1、刺激坐骨神经时诱发产生的动作电位由在最适刺激强度时动作电位原图上进行区间测量可知，潜伏期为0.32ms，时程t1为 1.92ms ，波幅为11.08mV。
实验报告：蟾蜍坐骨神经干动作电位引导及传导速度测定
一、蟾蜍坐骨神经干动作电位引导及传导速度测定实验目的：加强理解兴奋传导的概念，掌握测定神经干动作电位传导速度的方法。
熟悉仪器设备的操作。
实验原理：通过测出示波器上动作电位传导的距离和传导所需的时间，计算传导速度。
1.潜伏期法：测量第一个通道动作电位潜伏期的时间t，输入刺激电极到第一个引导电极间的距离s，v=s/t。
2.潜峰法：测量两个通道的动作电位波峰间的时间差和两对引导电极间的距离，v=(s2-s1)/(t2-t1)。
实验步骤：1.制备坐骨神经-腓神经标本，放入神经屏蔽盒。
2.连接仪器，引导动作电位波形。
3.剪裁编辑图形，计算传导速度。
实验结果：1.图形2.计算S=10mm, t=0.33ms, v=10mm/0.33ms=33m/s分析讨论：1. 当刺激端和记录端离得较远时，引导的复合动作电位波形会发生什么改变，为什么？2.用什么方法可使复合动作电位传导速度的测量更准确？实验结论：神经干动作电位的传导速度为33m/s.二、兴奋性不应期的测定实验目的：了解测定不应期的方法和原理，并加深对兴奋性在兴奋过程中的变化过程的理解。
实验原理：神经纤维受到适宜刺激后，产生兴奋，即动作电位。
一次兴奋产生后，必须经绝对不应期、相对不应期、超常期等变化后，兴奋性才能恢复。
本实验通过生物电放大器引导并记录神经干复合动作电位，验证和测量动作电位的不应期。
先给一个条件刺激，再用另一个检验刺激在兴奋的不同时期给予刺激，检查兴奋未阈值及所引起动作电位的幅度。
实验步骤：1．制备坐骨神经-腓神经标本，并浸在任氏液中约5分钟，待其兴奋性稳定后实验。
2.连接仪器，设置实验参数，观察并测量神经干的不应期。
实验结果：（见图）分析讨论：1.为什么要先引导神经纤维的单向复合动作电位，然后再测量其兴奋性的不应期？2.神经干不应期与单根神经纤维的不应期有何不同？实验结论：兴奋性的不应期包括绝对不应期、相对不应期、超常期、低常期。
神经干动作电位及其传导速度的测定
神经干动作电位及其传导速度的测定1.实验目的：应用微机生物信号采集处理系统和电生理实验的方法，测定蛙类坐骨神经干双相、单相动作电位，测定神经冲动的传导速度。
2.实验材料和方法：⑴材料：蟾蜍；任氏液；BB-3G标本屏蔽盒，微机生物信号采集处理系统。
⑵方法：2.1系统连接和参数设置启动RM6240系统：点击“实验”菜单，选择“神经干动作电位”项目。
仪器参数：1、2通道时间常数0.02s、滤波频率3kHz、灵敏度5mV，采样频率40～100kHz，扫描速度1.0ms/div。
单刺激模式，刺激宽度0.1ms，延迟1ms，同步触发。
2.2制备蟾蜍坐骨神经干标本2.2.1毁蟾蜍脑脊髓和下肢标本制备2.2.2剥皮的下肢标本俯卧位于蛙板上，并剪除其骶骨。
用玻璃分针分离脊柱两侧的坐骨神经，穿线，紧靠脊柱根部结扎，近中枢端剪断神经干，用尖头镊子夹结扎线将神经干从骶部剪口处穿出。
2.2.3用分针循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟，纵向分离暴露坐骨神经大腿部分，直至分离至腘窝胫腓神经分叉处，并用分针将腓浅神经、胫神经与腓肠肌和胫骨前肌分离。
2.2.4提起一侧结扎神经的线头，置剪刀于神经与组织之间，紧贴股骨，腘窝，顺神经走向，剪切至跟腱并剪断跟腱和神经。
剥离附着在神经干上的组织，完成后将其浸入盛有任氏液培养皿中待用。
2.3实验观察2.3.1神经干标本兴奋性将神经干移入标本屏蔽盒内，中枢端置于刺激电极处。
在刺激器功能框，选中触发选项，选择单刺激，波宽0.1ms，刺激电压1.0V，按“开始刺激”，观察屏幕上是否有动作电位，若神经干标本兴奋性良好，继续下一项目。
2.3.2中枢端引导动作电位神经干末梢置于刺激电极处，刺激电压1.0V，波宽0.1ms，按“开始刺激”，测定第1对引导电极引导的双相动作电位正相波和负相波的振幅和时程。
2.3.3末梢端引导动作电位和测定动作电位传导速度神经干中枢端置于刺激电极处，刺激电压1.0V，波宽0.1ms，按“开始刺激”，测定第1对引导电极引导的双相动作电位正相波和负相波的振幅和时程。
影响蟾蜍坐骨神经冲动传导速度的因素
影响蟾蜍坐骨神经冲动传导速度的因素【目的要求】1.学习测定蟾蜍离体坐骨神经干上神经冲动传导速度的方法和原理。
2.观察温度（37℃）、3%KCl、5%NaCl、2%普鲁卡因对蟾蜍离体坐骨神经冲动传导速度的影响。
【基本原理】神经干在受到有效刺激后可以产生复合动作电位，标志着神经发生了兴奋。
如果在离体神经干的一端施加刺激，从另一端引导传来的兴奋，可以记录到双相动作电位。
如果在引导的两个电极之间将神经干麻醉或损坏，阻断兴奋的传导，这时记录到的动作电位就是单相动作电位。
单个神经细胞的动作电位是以“全或无”方式发生的，而神经干复合动作电位的幅值在一定的刺激强度下是随刺激强度的增加而增大的。
如果在原理刺激点的不同距离处分别引导离体神经干动作电位，两引导点之间的距离为m，在两引导点分别引导出的动作电位的时差为s，即可按照公式v=m/s来计算兴奋的传导速度。
神经兴奋的发生和传导有赖于细胞膜上Na＋内流。
其客观指标是神经兴奋时产生的动作电位。
普鲁卡因等局麻醉药可阻滞Na离子内流，从而抵制神经冲动的发生与传导速度的减慢。
神经纤维的静息电位接近K离子的平衡电位，故细胞外液K离子浓度升高可使细胞膜内外浓度差减小，K离子平衡电位减小，膜发生去极化。
在此基础上，由于Na离子通道受到抑制，神经干传导速度降低；当细胞外夜Na离子内流减弱，也可以使神经干传导速度减慢。
【实验对象及器材】实验对象：蟾蜍实验器材：常用手术器械（手术剪，手术镊，手术刀，金冠剪，眼科剪、镊，毁髓针，玻璃分针）、娃板、纱布（卫生纸）、粗棉线、恒温箱、3%KCl、5%NaCl、2%普鲁卡因、PC机、信号采集处理系统、电子刺激器、神经屏蔽盒、Ringer’s液【方法与步骤】1.蟾蜍坐骨神经干的标本制备取蟾蜍1只，双毁髓后在尚难部用粗剪将脊柱剪短，撕下皮肤和内脏。
将带有部分脊柱、后肢的标本用任氏液洗净，置于娃解剖盘上。
在神经出脊柱处，用粗棉线结扎一侧坐骨神经，并于结扎点与脊柱之间将神经剪断。
人体机能_蟾蜍坐骨神经干动作电位传导速度和兴奋性不应期的测定实验报告
神经干双向动作电位的引导传导速度及不应期的测定作者：2011222681宋利婷组员：2011222702曾惜 2011222709张芮 2011222698杨袁虹一、实验对象：蟾蜍二、实验目的：观察蟾蜍坐骨神经动作电位的基本波形，掌握坐骨神经制备方法与引导动作电位的方法，理解与刺激和最大刺激强度的概念测定潜伏期时程和波幅，学会通过潜伏期法和潜峰法测定神经冲动的传导速度，通过测定神经干不应期理解兴奋性在兴奋过程中的变化过程。
三、实验内容图一：阈刺激和最大刺激强度的测定由上图可知，以0.100v为起始刺激强度，在0.100到0.300v的刺激时，不产生动作电位，逐渐增大强度，一直到当刺激强度为0.4V时，刚好引产生动作电位，即阈刺激为0.4V，当刺激强度达到1.4V后，即使再增加刺激强度，动作电位的幅也不再改变，即最大（适）刺激强度为1.4V.图二：潜伏期波幅时程及速度的测定由在最适刺激强度时动作电位原图上进行区间测量可知，潜伏期为0.60ms，时程t1为 2.84ms ，波幅为 2.72mV，输入刺激电极到第一个引导电极间距离s＝1.3cm,以传导速度和根据速度的公式计算传导速度v1=s/t1,求得的速度v1=45m/s图三：潜峰法测量速度如图是通过测量两个通道的动作电位波峰间的时间差，为（t1-t2）,测量并输入两对引导电极间的距离为（s2-s1），s2=4.7cm,s1=3.8cm,t1-t2=0.28ms,由传导速度和用公式计算传导速度：v2=(s2-s1)/(t1-t2),v2=321m/s图四：绝对不应期和相对不应期的测定由上图可知当刺激间隔为4.3mS时，第二个刺激引起的动作电位幅度刚好开始降低，的第二个刺激已经落入第一次兴奋的相对不应期，当刺激间隔为1.6mS时,第二个动作电位完全消失，几次是第二个刺激落入第一个刺激的绝对不应期期。
相对不应期=总不应期-绝对不应期=4.3ms-1.6ms=2.7ms四、实验讨论1、为什么在一定范围内，用电刺激神经，动作电位随刺激强度增大而增大，并没有出现“全或无”的现象？答：一根神经纤维在受到阈值以上刺激产生动作电位不随着刺激强度增大而增大，但是坐骨神经干是有许多神经纤维组成的，在受到阈值以上刺激时，由于引起不同数目神经纤维产生动作电位，但是每个神经对刺激的兴奋性，随着刺激强度增大，神经纤维产生动作电位的数目也越多，动作电位的幅度也就越大，当全部神经纤维都产生动作电位时，动作电位的幅度就不会增大了．故在一定范围内,坐骨神经干动作电位的幅度为何随着刺激强度增大而增大．2、为什么兴奋上神经上出现单向传导？答：因为在一个神经纤维细胞上，当某点受到刺激时，形成产生动作电位，形成局部电流，双向传导，当电流传导到两个神经纤维细胞相接触的部位，即神经突触时，但是兴奋只能从突触前膜穿到突触后膜，所以兴奋上神经上是单向传导的。
蟾蜍坐骨神经干动作电位传导速度和兴奋性不应期的测定实验报告
神经干双向动作电位的引导传导速度及不应期的测定组员：陈良鹏肖瑶伍思静袁果曼罗冰清实验目的：观察蟾蜍坐骨神经动作电位的基本波形，掌握坐骨神经制备方法与引导动作电位的方法，理解与刺激和最大刺激强度的概念测定潜伏期时程和波幅，学会通过潜伏期法和潜峰法测定神经冲动的传导速度，通过测定神经干不应期理解兴奋性在兴奋过程中的变化过程。
实验对象：蟾蜍实验药品和器材:蛙类手术器械，BL-410生物信号记录分析系统，神经屏蔽盒，任氏液等。
实验原理：1、神经动作电位是神经兴奋的客观标志。
当神经受到有效刺激时，处于兴奋部位的膜外电位负于静息电位；当动作电位通过后，兴奋处的膜外电位又恢复到静息时水平。
神经干兴奋过程所发生的膜电位变化称神经复合动作电位。
如果将两个引导电极置于神经干表面时（双极引导），动作电位将先后通过两个引导电极处，可记录到两个相反的电位偏转波形，称为双向动作电位。
2、神经纤维兴奋的标志是产生一个可传播的动作电位。
测定神经干上的神经冲动的传导速度，可以了解神经的兴奋状态。
在示波器上测量动作电位传导一定距离所耗费的时间，便可计算出兴奋的传导速度。
3、神经与肌肉等可兴奋组织兴奋性在一次兴奋过程中可发生系列变化，即绝对不应期相对不应期超常期和低常期，组织的兴奋性才逐渐恢复。
为了测定神经干在兴奋过程中的兴奋性变化，可先给一个条件刺激以引起神经兴奋，然后再用另一检验性刺激，检查神经对检验性刺激反应的兴奋阈值以及所引起的动作电位（AP)幅度，即可观察到神经组织兴奋性的变化过程。
在本次实验中，主要观察的是不应期的变化，而非整个兴奋性的周期性变化。
实验对象：蟾蜍实验步骤及方法:1.坐骨神经—腓神经标本的制备。
2.将标本放入神经屏蔽盒，（注意刺激电极端为神经干的中枢端）。
3.仪器连接。
4.BL-410的操作。
实验内容：1、刺激坐骨神经时诱发产生的动作电位由在最适刺激强度时动作电位原图上进行区间测量可知，潜伏期为0.32ms，时程t1为 1.92ms ，波幅为11.08mV。
神经干动作电位及传导速度的测定-实验指导.
实验二神经干动作电位及传导速度的测定【实验目的】学习神经干动作电位的测定方法，观察动作电位的波形、时程、幅度，学会测定动作电位的传导速度。
【实验原理】神经干在受到有效刺激后，可以产生动作电位，标志着神经发生兴奋。
如果在神经干另一端引导传来的兴奋冲动，可以引导出双相的动作电位，如在两个引导电极之间将神经麻醉或损坏，则引导出的动作电位即为单相动作电位。
神经细胞的动作电位是以“全或无”方式发生的。
坐骨神经干是由很多不同类型的神经纤维组成的，所以，神经干的动作电位是复合动作电位。
复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的变化而变化的。
用蟾蜍坐骨神经-胫腓神经标本来观察神经干动作电位及其传导，测定神经兴奋传导速度。
【实验对象】蟾蜍或蛙【实验材料】生物机能实验系统、神经标本屏蔽盒、蛙类手术器械、剪刀、手术剪、镊子、探针、玻璃分针、滴管、培养皿、烧杯、锌铜弓、棉花、缝线、任氏液。
【方法和步骤】1.制备蟾蜍坐骨神经干标本（1）破坏脑和脊髓取蟾蜍一只，用水洗净。
左手握住蟾蜍，用示指压住头部前端使头前俯。
右手持探针从枕骨大孔垂直刺入，左右划动，横断脑和脊髓。
再将探针刺入颅腔，左右搅动捣毁脑髓。
然后将探针撤回向后伸入椎管破坏脊髓。
当脑和脊髓完全破坏时，此时蟾蜍的呼吸停止，四肢松软。
（2）剪除躯干上部及内脏在骶髂关节水平以上1.5～2.0cm处剪断脊柱。
左手握蟾蜍后肢，使蟾蜍头与内脏下垂，右手持普通剪刀，沿脊柱断端两侧剪除内脏及头胸部，仅留下后肢、骶骨、脊柱及由它发出的坐骨神经。
（3）剥皮左手握脊柱断端，右手捏住其上的皮肤边缘，向下剥掉全部后肢的皮肤，将标本放在盛有任氏液的培养皿中。
（4）分离左右两腿用镊子将标本提起，剪去向上突出的骶骨，梨状肌（注意勿损伤坐骨神经），然后沿正中线用普通剪刀将脊柱分为两半，并从耻骨联合中央剪开两侧大腿，放在盛有任氏液的培养皿中。
（5)制作坐骨神经-胫腓神经标本取出一侧下肢，用蛙钉固定于蛙板上。
-II神经干动作电位及其传导速度的测定
神经干动作电位及其传导速度的测定摘要：目的学习并掌握坐骨神经干标本的制备方法，观察神经干复合动作电位的波形、幅度、潜伏期及时程，并初步掌握电生理实验的方法，学习和掌握神经干动作电位传导速度测定的原理和方法。
方法制备蛙的坐骨神经标本，在原有实验设计的基础上，就记录距离、损伤阻滞对神经干复合动作电位的波形、幅度、潜伏期及时程的影响，传导速度的计算方法等问题进行深入分析。
结果增大两记录电极距离，在一定范围内第一相峰值逐渐升高，持续时间延长，第二相峰值逐渐减小，电位持续时间逐渐延长；记录电极间用镊子夹伤神经干，动作电位的波形第二相消失形成单相动作电位。
结论讨论分析该实验结果能更好地理解神经干复合动作电位的原理，牢固掌握基本的电生理知识关键词：动作电位；刺激伪迹；双相电位；单相电位；神经干神经干在受到有效刺激后，可以产生动作位，标志着神经发生兴奋。
如果在神经干另一端引导传来的兴奋冲动，可以引导出双相的动作电位，如在两个引导电极之间将神经麻醉或损坏，则引导出的动作电位即为单相动作电位。
神经细胞的动作电位是以“全或无”方式发生的。
坐骨神经干是由很多不同类型的神经纤维组成的，所以，神经干的动作电位是复合动作电位。
复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的变化而变化的。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 实验动物蛙1.1.2器材和药品蛙类手术器械1套，刺激电极，引导电极，神经屏蔽盒，棉球，培养皿，小烧杯，滴管，生物信号采集处理系统，任氏液。
1.2方法1.2.1 坐骨神经干标本制备1.2.1.1破坏脑与脊髓取蛙一只，用自来水冲洗干净，左手持蛙，用食指下压其吻部，拇指按压在其骶髂关节下方，使其头尽量前俯，右手持探针沿两眼之间中线向后方轻划，至触及头颈部正中的凹陷处，即为枕骨大孔的位置。
用探针在凹陷处垂直刺入枕骨大孔，再将其针尖转向前刺入颅腔，左右搅动探针，彻底捣毁脑组织；然后缓慢地把探针退至枕骨大孔处，将其转向后方，与脊柱平行捻动探针使其刺入整个椎管，彻底捣毁脊髓。
神经冲动测定实验报告
一、实验目的1. 理解神经冲动产生和传导的基本原理；2. 掌握神经冲动测定实验的基本方法；3. 学习神经冲动的传导速度、不应期等参数的测定；4. 分析实验结果，探讨神经冲动传导的规律。
二、实验原理神经冲动是指神经元在受到刺激后，产生的电信号在神经纤维上的传播过程。
神经冲动的产生和传导是神经活动的基础。
神经冲动传导速度和不应期是衡量神经纤维功能的重要指标。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：牛蛙坐骨神经标本、任氏液、2%普鲁卡因、玻璃分针、粗剪刀、眼科剪、眼科镊、培养皿、烧杯、滴管、蛙毁髓探针、BL-420N系统等；2. 实验仪器：生理信号采集处理系统、神经电生理实验箱、刺激器、示波器等。
四、实验方法1. 制备坐骨神经标本：将牛蛙处死后，取出坐骨神经，用任氏液冲洗，并用眼科剪剪成约2cm的神经段；2. 分离坐骨神经：用眼科剪和眼科镊分离出坐骨神经，去除周围的脂肪和结缔组织；3. 安放引导电极：将引导电极插入坐骨神经的两端，用生理盐水湿润电极，确保电极与神经纤维紧密接触；4. 安放刺激电极：将刺激电极插入坐骨神经的近端，用生理盐水湿润电极，确保电极与神经纤维紧密接触；5. 启动试验系统：打开生理信号采集处理系统，设置刺激参数，开始实验；6. 观察记录：观察示波器上的神经冲动波形，记录神经冲动的传导速度、不应期等参数；7. 重复实验：重复上述步骤，多次记录实验数据，以提高实验结果的可靠性。
五、实验结果与分析1. 观察到一个双相动作电位波形，即动作电位的上升支和下降支；2. 记录神经冲动的传导速度：根据引导电极间的距离和动作电位传导时间，计算传导速度；3. 记录神经冲动的绝对不应期和相对不应期：观察动作电位波形，分析动作电位上升支和下降支的潜伏期，确定绝对不应期和相对不应期；4. 分析实验结果，探讨神经冲动传导的规律。
六、实验结论1. 通过实验，我们成功观察到了神经冲动的产生和传导过程；2. 实验结果表明，神经冲动的传导速度与神经纤维的类型、直径和温度等因素有关；3. 实验结果还表明，神经冲动的传导具有绝对不应期和相对不应期，说明神经纤维在兴奋传导过程中具有一定的保护机制。
实验一神经干不应期及神经冲动传导
两对引导电 极间距离应 尽可能大。
用刚能使神 经干产生最 大动作电位 的最大刺激 强度刺激神 经。
01
02
03
04
05
06
1
盖上神经盒的盒盖，并接 地，防止干扰。
2
在观察双相动作电位时， 如果第二相动作电位波幅 太小，可将两个刺激电极 的距离保持在最小，但不 能碰在一起，引导电极2 与 刺激电极的距离保持 在2 cm左右，逐渐加大 引导电极2与正负极之间 的距离，则第二相动作电 位的振幅可逐渐增大。
神经细胞的动作电位是以“全或无”方式发生的。坐骨神经 干是由很多不同类型的神经纤维组成的，所以，神经干的动 作电位是复合动作电位。复合动作电位的幅值在一定刺激强 度下是随刺激强度的变化而变化的。
神经干不应期的测定原理 神经在一次兴奋的过程中，其兴奋性也发生一个周期性的变化， 而后才恢复正常。兴奋性的周期变化，依次包括绝对不应期、相 对不应期、超常期和低常期4个时期。为了测定坐骨神经在一次 兴奋后兴奋性的周期变化，首先要给神经施加一个条件刺激（S1） 引起神经兴奋，然后再用一个测试性刺激（S2），在前一兴奋过 程的不同时相给以刺激，用以检查神经阈值以及所引起的动作电 位的幅值，以判定神经兴奋性的变化。当刺激间隔时间长于 25ms时，S1和S2分别所引起动作电位的幅值大小基本形同。当 S2距离S1接近20ms左右时，发现S2 所引起的第二个动作电位 幅值开始减小。在逐渐使S2 向S1 靠近，第二个动作电位的幅值 则继续减小。最后可因S2落在第一个动作电位的绝对不应期内而 完全消失。
08
蒸馏水加至(ml) 1000
成份
浓度(％) 任氏溶液 乐氏溶液 台氏溶液
氯化钠(NaCl) 20 32.5毫升 45.6毫升 40.0毫升
坐骨神经神经冲动传导速度的测定
坐⾻神经神经冲动传导速度的测定坐⾻神经神经冲动传导速度的测定XXX,YYY,ZZZ(版权所有，仅限个⼈)⼀、实验⽬的：1．学习、巩固蟾蜍坐⾻神经⼲标本的制备⽅法。
2．进⼀步学习电刺激器、计算机处理系统的使⽤⽅法。
3．了解神经⼲动作电位传导速度测定的基本原理和⽅法以及电路原理。
⼆、实验原理：（1）神经冲动传导速度：神经纤维的⽣理特性之⼀是具有⾼度的传导性。
不同类型的神经纤维传导速度不同，其传导速度主要受神经纤维的直径、内阻及有⽆髓鞘的影响。
如测得神经冲动在神经⼲上传导的距离与时间，可根据速度（v）＝距离（s）／时间（t）求出神经冲动传导速度。
两栖类的坐⾻神经是混合神经，包含多种粗细不等的神经纤维，其直径约为3-29µm。
坐⾻神经中以A类纤维为主，传导速度约为35-40m/s。
三、实验器材与试剂：（⼀）实验动物及器材：蟾蜍、常⽤蛙类⼿术器械（如：毁髓针、剪⼑、解剖⼑等）、蛙板、玻璃划针、固定针、培养⽫、滴管、棉花、粗棉线、刺激电极、神经屏蔽盒、数据采集系统等。
（⼆）实验试剂：任⽒液。
四、实验⽅法与步骤：1、制备神经⼲标本：按照实验⼀中的操作⽅法将蟾蜍毁髓处死、去除躯⼲上部和内脏、剥⽪、均分两后肢。
然后将两后肢放⼊任⽒液中浸泡。
约30~40s后，取出⼀侧后肢，固定在蛙板上。
制备坐⾻神经神经⼲要求将⽩⾊的坐⾻神经完全、单独地分离出来，不留任何肌⾁或⾻。
2、神经冲动传导速度的测定：测得神经冲动在神经⼲上传导的距离与时间，可根据速度（v）＝距离（s）／时间（t）求出神经冲动传导速度。
两栖类的坐⾻神经是混合神经，包含多种粗细不等的神经纤维，其直径约为3-29µm。
坐⾻神经中以A类纤维为主，传导速度约为35-40m/s。
【图⼀】两电极之间的距离：2.05cm，穿导时：50.00us，传导速度：410m/s【图⼆】两电极之间的距离：2.05cm，穿导时：50.00us，传导速度：410m/s【图三】两电极之间的距离：2.05cm，穿导时：50.00us，传导速度：410m/s【图四】两电极之间的距离：2.05cm，穿导时：50.00us，传导速度：410m/s分析：图⼀⾄图四可知：（1）神经⼲的传导速度约为410m/s。
神经干传导速度的测定与神经干
实验四神经干传导速度的测定与神经干不应期的测定（一）神经冲动传导速度的测定【原理】神经干受到有效刺激发生兴奋后，产生的动作电位将以一定的速度沿神经传导。
对不同的神经纤维，其传导兴奋的速度也不同，一般来说直径大、有髓的神经纤维比直径小、无髓的神经纤维传导速度快。
蛙类的坐骨神经干属于混合型神经，其中直径最粗的有髓神经为A类纤维，正常室温下的传导速度约为35~40m/s。
测定神经纤维兴奋的传导速度v时，在远离刺激点的不同距离处分别用两组引导电极引导动作电位，测出两引导点之间的距离m和分别引导出的动作电位的时相差s，根据v = m / s即可计算出其传导速度。
图1：神经干兴奋传导速度的测定用尺子测量搭在前后两组引导电极之间的神经干长度m约为12mm，又由图6可测量得两个动作电位起始点的时间间隔s为0.40ms，故由公式v = m / s可计算实验用的神经干标本的兴奋传导速度约为：v = m / s = 12 / 0.40 = 30 mm/ms = 30 m/s。
【结果讨论】实验测得搭在两组引导电极之间的神经干长度m约为12mm，两个动作电位起始点的时间间隔s为0.40ms，由公式v = m / s计算得实验用的蛙坐骨神经干标本的兴奋传导速度约为30m/s，比理论值35-40m/s稍稍偏低。
估计计算结果比理论值偏低可能与剥制标本过程中的对神经干的损伤有关，也可能是仪器和信息处理系统的误差所致，另外在各数据测量中人眼读数也不可避免的存在误差。
（三）神经干不应期的测定神经纤维的主要功能是传导兴奋，即传导动作电位，而神经冲动是指延神经纤维传导的兴奋或动作电位。
神经细胞的电现象是生理学研究的重点之一，也是生理学学习的难点。
本次实验的动物材料为青蛙，我组所取的为两只雄性蛙，体重均为70g，体型较小。
进行实验前先用双毁髓法处死青蛙，剥制坐骨神经干标本，置于盛有任氏液的培养皿中备用。
神经在一次兴奋的过程中，其兴奋性也发生周期性变化，依次包括了绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期4个阶段。
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坐骨神经神经冲动传导速度的测定
XXX,YYY,ZZZ
(版权所有，仅限个人)
一、实验目的：
1．学习、巩固蟾蜍坐骨神经干标本的制备方法。
2．进一步学习电刺激器、计算机处理系统的使用方法。
3．了解神经干动作电位传导速度测定的基本原理和方法以及电路原理。
二、实验原理：
（1）神经冲动传导速度：
神经纤维的生理特性之一是具有高度的传导性。
不同类型的神经纤维传导速度不同，其传导速度主要受神经纤维的直径、内阻及有无髓鞘的影响。
如测得神经冲动在神经干上传导的距离与时间，可根据速度（v）＝距离（s）／时间（t）求出神经冲动传导速度。
两栖类的坐骨神经是混合神经，包含多种粗细不等的神经纤维，其直径约为3-29μm。
坐骨神经中以A类纤维为主，传导速度约为35-40m/s。
三、实验器材与试剂：
（一）实验动物及器材：
蟾蜍、常用蛙类手术器械（如：毁髓针、剪刀、解剖刀等）、蛙板、玻璃划针、固定针、培养皿、滴管、棉花、粗棉线、刺激电极、神经屏蔽盒、数据采集系统等。
（二）实验试剂：任氏液。
四、实验方法与步骤：
1、制备神经干标本：
按照实验一中的操作方法将蟾蜍毁髓处死、去除躯干上部和内脏、剥皮、均分两后肢。
然后将两后肢放入任氏液中浸泡。
约30~40s后，取出一侧后肢，固定在蛙板上。
制备坐骨神经神经干要求将白色的坐骨神经完全、单独地分离出来，不留任何肌肉或骨。
2、神经冲动传导速度的测定：
测得神经冲动在神经干上传导的距离与时间，可根据速度（v）＝距离（s）／时间（t）求出神经冲动传导速度。
两栖类的坐骨神经是混合神经，包含多种粗细不等的神经纤维，其直径约为3-29μm。
坐骨神经中以A类纤维为主，传导速度约为35-40m/s。
【图一】两电极之间的距离：2.05cm，穿导时：50.00us，传导速度：410m/s
【图二】两电极之间的距离：2.05cm，穿导时：50.00us，传导速度：410m/s
【图三】两电极之间的距离：2.05cm，穿导时：50.00us，传导速度：410m/s
【图四】两电极之间的距离：2.05cm，穿导时：50.00us，传导速度：410m/s
分析：
图一至图四可知：
（1）神经干的传导速度约为410m/s。
（2）神经干的传导速度与刺激强度无关。
资料显示：两栖类的坐骨神经中以A类纤维为主，坐骨神经传导速度约为35-40m/s，而实验测得的速度为理论值的10倍。
原因之一可能是过多的任氏液导电所
致。
原因之二可能是实验中所用的神经干直径约为0.8mm，远较资料中的
材料粗从而使阻抗下降，传导速度上升。
五、注意事项：
1.坐骨神经的后端有分支，要取一直延伸到脚踝的主干。
主干采得越长越好。
2.一定要将神经干粗端放于刺激电极一侧。
（实验中没注意这点。
）
3.如果发现动作电位图形倒置，将引导电极位置交换即可。
4.标本应平直地放在电极上与电极密切接触。
5.制备的神经干要不断用任氏液润湿，绝不可让其发干，以致神经机能受损。
但要用滤
纸吸去过多的任氏液，以防短路。
六、思考题：
1、为什么实验要求两对引导电极之间的距离愈远愈好？
答：距离远可以减少互相干扰（如短路）的机会，从而使两个刺激的时间间隔准确，在测定神经冲动传导速度时，利于提高实验精度。
七、实验小结：
通过本次实验，我组同学巩固了蟾蜍坐骨神经干标本的制备方法，实验中还了解了神经干动作电位传导速度测定的基本原理和方法以及电路原理；对蟾蜍神经干的传导速度进行了测定，分析了实验值与文献值差异的原因。
基本上达到了本次实验的目的和要求。