脱氢抗坏血酸(Dehydroascorbate, DHA)含量测定试剂盒使用说明
维生素C不同的测定方法及各种方法优缺点比较
维生素C不同的测定方法及各种方法优缺点比较目前研究维生素C测定方法的有很多，如荧光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等,各种方法对实际样品的测定均有满意的效果。
目前国内维生素C含量测定仍以光度法为主流，但近年来色谱法，特别是HPLC 法上升趋势尤为明显。
一、荧光法1．原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。
脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。
本方法的最小检出限为0.022 g/ml。
2．适用范围本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定二、2，6-二氯靛酚滴定法（还原型VC，GB／T6195—1986）1、原理：还原型抗坏血酸还原染料2，6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。
还原型抗坏血酸还原2，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。
在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。
本法用于测定还原型抗坏血酸，总抗坏血酸的量常用2，4-二硝基苯肼法和荧光分光光度法测定。
2、优点简便、快速、比较准确等，适用于许多不同类型样品的分析。
3、缺点2，6一二氯靛酚法虽然简便，但是药品价格昂贵。
而且不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量，易受其他还原物质的干扰。
如果样品中含有色素类物质，将给滴定终点的观察造成困难。
三、分光光度法1、原理：维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸，pH>5,脱氢抗坏血酸内环开裂，形成二酮古洛糖酸。
脱氢抗坏血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎，脎在500nm波长有最大吸收。
苹果酸脱氢酶检测试剂盒(OAA比色法)
苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒(OAA比色法)简介：苹果酸脱氢酶(Malate Dehydrogenase, MDH)是合成苹果酸的关键酶之一，催化苹果酸和草酰乙酸(OAA)的相互转化，参与众多生理代谢途径如TCA循环C4循环脂肪酸的氧化呼吸作用氮同化等，因此MDH在植物的生长发育中发挥着重要作用，广泛存在于线粒体、细菌细胞膜上，为三羧酸循环中的一种酶，由于酶的来源不同，其某些性质也不尽相同。
MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。
根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，细菌中通常只含有NAD-MDH，在真核细胞中，NAD-MDH 分布于细胞质和线粒体中。
Leagene苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒(OAA比色法)检测原理是在弱碱条件下，以草酰乙酸(OAA)作为显色底物，OAA在MDH催化下被NADH还原为苹果酸(Mal)，每催化1分子OAA消耗1分子NADH，通过分光光度比色法(分光光度计)测定吸光度的变化，计算出NADH的消耗速率进一步推算出苹果酸脱氢酶活性水平。
该试剂盒主要用于检测植物样本、血清等中苹果酸脱氢酶活性。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、研钵或匀浆器2、离心管或试管3、低温离心机4、比色杯5、分光光度计操作步骤(仅供参考)：编号名称TE046350TStorage试剂(A): MDH Lysis buffer 250ml 4℃避光试剂(B): PMSF 1ml -20℃试剂(C): MDH Assay buffer100ml RT试剂(D): NADH 1支-20℃试剂(E): ddH2O 10ml RT使用说明书1份1、配制MDH Lysis buffer工作液：取出MDH Lysis buffer和PMSF，恢复至室温，MDHLysis buffer：PMSF按一定比例混合，混匀，即配即用，不易久置，否则白酶抑制剂PMSF的效率会有所下降。
NADP-苹果酸脱氢酶活性检测试剂盒说明书__紫外分光光度法UPLC-MS-4348
NADP-苹果酸脱氢酶（NADP-MDH）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法货号：UPLC-MS-4348规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体50mL×1瓶4℃保存试剂一液体40mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×2支-20℃保存试剂三粉剂×2支-20℃保存溶液的配制：1.试剂二：临用前加入250μL双蒸水，用不完的试剂仍-20℃保存；2.试剂三：临用前加入300μL双蒸水，用不完的试剂仍-20℃保存。
产品说明：MDH（EC1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。
草酰乙酸是重要的中间产物，连接多条重要的代谢途径。
因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。
根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，NADP-MDH主要存在于真核细胞中。
NADP-MDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌或培养细胞：收集细菌或细胞到离心管内，弃上清，按照每200万细菌或细胞加入400μL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20%，超声3s，间隔10s，重复30次），8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4349
NADP-苹果酸脱氢酶（NADP-MDH）活性检测试剂盒说明书微量法货号：UPLC-MS-4349规格：100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体100mL×1瓶4℃保存试剂一液体20mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1支-20℃保存试剂三粉剂×1支-20℃保存溶液的配制：1.试剂二：临用前加入500μL双蒸水，用不完的试剂仍-20℃保存；2.试剂三：临用前加入600μL双蒸水，用不完的试剂仍-20℃保存。
产品说明：MDH（EC1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。
草酰乙酸是重要的中间产物，连接多条重要的代谢途径。
因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。
根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，NADP-MDH主要存在于真核细胞中。
NADP-MDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、微量石英比色皿/96孔板（UV板）、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌或培养细胞：收集细菌或细胞到离心管内，弃上清，按照每200万细菌或细胞加入400μL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20%，超声3s，间隔10s，重复30次），8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
琥珀酸脱氢酶（SDH）活性检测试剂盒说明书
琥珀酸脱氢酶（SDH ）活性检测试剂盒说明书微量法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0955 规格：100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 规格 保存条件 试剂一 液体110 mL×1瓶 -20℃保存 试剂二 液体0.6mL×2支 -20℃保存 试剂三 液体18 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂四 液体3mL×1瓶 2-8℃保存 试剂五液体3mL×1瓶2-8℃保存溶液的配制：1、 试剂二：为易挥发试剂，用完后尽快密封，-20℃保存； 产品说明：SDH （EC 1.3.5.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。
SDH 是线粒体的一种标志酶，位于线粒体内膜上的一种膜结合酶，是连接呼吸电子传递和氧化磷酸化的枢纽之一。
此外，为多种原核细胞产能的呼吸链提供电子。
SDH 催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸，脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸（PMS ）传递还原2,6-二氯酚靛酚（DCPIP ），并且在600nm 处具有特征吸收峰，通过600nm 吸光度的变化，测定2,6-DCPIP 的还原速度，代表SDH 酶活性。
Succinic Acid + FAD Fumaric Acid + FADHFADH + PMS FAD + PMSH 2PMSH 2 + Dichlorophenolindophenol(600nm) PMS + Reduced Dichlorophenolindophenol 注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1. 组织样本：称取约 0.1g 组织，加入1mL 试剂一和 10μL 试剂二，用冰浴匀浆器或研钵匀浆充分研磨，4℃11000g 离心10min ，取上清，置冰上待测。
脱氢抗坏血酸(dehydroascorbate,DHA)含量测定试剂盒说明书
货号：MS1301 规格：100管/96样脱氢抗坏血酸（dehydroascorbate，DHA）含量测定试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：AsA作为植物细胞一个重要生理指标，其AsA的含量、氧化还原状态(AsA/DHA 比率)及其合成与代谢相关酶类活性的变化涉及植物对一系列环境胁迫的响应。
DHA是AsA的可逆的氧化型，在生物体内，与抗坏血酸共同组成氧化还原系统，具有电子受体的作用。
测定原理：DTT还原DHA生成AsA，通过测定体系中AsA的生成速率，即可计算出DHA含量。
自备仪器和用品：低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板（UV板）、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：试剂一：液体 100 mL×1 瓶，室温保存。
试剂二：液体 16mL×1 瓶，室温保存。
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存。
临用前加入 5mL 蒸馏水充分溶解。
标准品：粉剂×1 瓶，4℃保存。
临用前加入 5.743 mL 蒸馏水充分溶解；吸取 0.1 mL 上述溶液，加入 0.9 mL 蒸馏水，混匀，即为 100μmol/L DHA。
样品中DHA提取：1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。
12000g，4℃离心 20min，取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500 万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；12000g，4℃离心 10min，取上清液置于冰上待测。
3. 血清等液体：直接测定。
DHA测定操作：1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min，调节波长到265 nm，蒸馏水调零。
维生素C不同的测定方法及各种方法优缺点比较
维生素C不同的测定方法及各种方法优缺点比较目前研究维生素C测定方法的有很多，如荧光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等,各种方法对实际样品的测定均有满意的效果。
目前国内维生素C含量测定仍以光度法为主流，但近年来色谱法，特别是HPLC 法上升趋势尤为明显。
一、荧光法1．原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。
脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。
本方法的最小检出限为0.022 g/ml。
2．适用范围本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定二、2，6-二氯靛酚滴定法（还原型VC，GB／T6195—1986）1、原理：还原型抗坏血酸还原染料2，6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。
还原型抗坏血酸还原2，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。
在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。
本法用于测定还原型抗坏血酸，总抗坏血酸的量常用2，4-二硝基苯肼法和荧光分光光度法测定。
2、优点简便、快速、比较准确等，适用于许多不同类型样品的分析。
3、缺点2，6一二氯靛酚法虽然简便，但是药品价格昂贵。
而且不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量，易受其他还原物质的干扰。
如果样品中含有色素类物质，将给滴定终点的观察造成困难。
三、分光光度法1、原理：维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸，pH>5,脱氢抗坏血酸内环开裂，形成二酮古洛糖酸。
脱氢抗坏血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎，脎在500nm波长有最大吸收。
NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)试剂盒说明书
NADP—苹果酸脱氢酶（NADP—MDH）试剂盒说明书NADP苹果酸脱氢酶（NADPMDH）试剂盒说明书微量法100管/96样注意：正式测定前务必取23个预期差异较大的样本做推测定测定意义：MDH（EC1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培育细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。
草酰乙酸是紧要的中心产物，连接多条紧要的代谢途径。
因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演侧紧要的角色，包括线粒体的能量代谢、苹果酸天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。
依据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD倚靠的MDH和NADP倚靠的MDH，NADPMDH重要存在于真核细胞中。
测定原理：NADPMDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光汲取下降。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
试剂的构成和配制：试剂一、提取液100mL×1瓶，在4℃保存；试剂二、液体20mL×1瓶，在4℃保存；试剂三、粉剂×1瓶，20℃保存；样本测定的准备：1、细菌、细胞或组织样品的制备：细菌或培育细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；依照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500～1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波碎裂细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：依照组织质量（g）：试剂一体积（mL）为1：5～10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一），进行冰浴匀浆。
8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调整波长至340nm，蒸馏水调零。
莽草酸脱氢酶(SD)活性检测试剂盒说明书__紫外分光光度法UPLC-MS-4468
莽草酸脱氢酶（SD）活性检测试剂盒说明书货号:UPLC-MS-4468规格:50T/48S紫外分光光度法产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体60mL×1瓶4℃保存试剂一液体20mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶4℃保存试剂三粉剂×2瓶-20℃保存溶液的配制：1、提取液：内含不溶物，用前摇匀。
2、试剂二：临用前加入10mL蒸馏水溶解。
3、试剂三：临用前每瓶加入11mL蒸馏水溶解。
4、工作液的配制：根据用量按照试剂一：试剂二：试剂三为7:4:8的体积比例充分混匀，现用现配，用前25℃预热15min。
产品说明：莽草酸途径是存在于植物和微生物中的一条重要的代谢途径，莽草酸脱氢酶(EC1.1.1.25)是莽草酸合成代谢途径中催化第四步反应的关键酶。
莽草酸脱氢酶催化莽草酸和NADP产生NADPH，检测340nm下的吸光值增加速率来表示SD活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液（加入前摇匀））进行冰浴匀浆，然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
2、细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
抗坏血酸含量测定(分光光度计法)
植物生理学模块实验指导李玲主编科学出版社一、维生素C含量的测定方法（分光光度计法）【实验目的】学习利用分光光度计法测定维生素C（抗坏血酸）含量的原理和方法。
【实验原理】维生素C（抗坏血酸）具有较强的还原力，可以把铁离子（Fe3+）还原成亚铁离子（Fe2+），亚铁离子与红菲啰啉（4,7-二苯基-1,10-菲啰啉，BP）反应形成红色螯合物。
此化合物在波长534nm处具有强的吸收峰，且吸光度与反应液中抗坏血酸含量呈正相关。
因此，可用比色法来测定抗坏血酸含量。
【器材与试剂】1.实验仪器与用具离心机、分光光度计、研钵、电子天平、容量瓶（50ml和100ml）、漏斗、滤纸、离心管、试管。
2.实验试剂50g/L三氯乙酸（TCA）溶液：称取5g三氯乙酸（分析纯），用蒸馏水溶解，稀释至100ml。
%磷酸-乙醇溶液：量取 85%磷酸溶液加入到无水乙醇中，并用无水乙醇稀释至100ml。
5g/L BP-乙醇溶液：称取 BP（纯度>97%）加入到无水乙醇中溶解，并用无水乙醇稀释至50ml。
L FeCl3-乙醇溶液：称取 FeCl3加入到100ml无水乙醇中，摇匀。
100μg/ml 标准抗坏血酸溶液：称取10mg 抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄色则不能用），用50g/L TCA 溶液溶解，定容至100ml，即1ml溶液含100μg抗坏血酸。
现用现配，保存于棕色瓶中，低温冷藏。
3.实验材料苹果、梨、香蕉、柑橘等果实。
【实验步骤】1.制作标准曲线取7支试管，编号，按表1加入各种溶液，将混合液置于30℃反应60min，然后以0号试管混合液为参照，于波长534nm处测定吸光度值。
以抗坏血酸质量为横坐标，吸光度为纵坐标汇至标准曲线，求的回归方程。
表1 制作抗坏血酸标准曲线试剂含量项目试管号0123456抗坏血酸标准液/ml050g/L TCA/ml无水乙醇/ml混匀、摇匀%磷酸-乙醇溶液/ml5g/L BP-乙醇溶液/mlL FeCl3-乙醇溶液/ml相当于抗坏血酸量/μg01020304050602.提取洗净新鲜果实，吸干，剪碎后混匀，分别称取5g 样品置于研钵中，加入20ml 50g/L TCA溶液，在冰浴条件下研磨成浆状，转入到100ml容量瓶中，并用50g/L TCA 溶液定容至刻度，混合、提取10min后，过滤收集滤液备用。
硫酸脱氢表雄酮(DHEA—S)测定试剂盒(化学发光法)产品技术要求新产业
2.性能指标
2.1外观和性状
2.1.1试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；包装标签应清晰，准确、牢固。
2.1.2试剂盒内组分(磁性微球溶液除外) 应为清澈透明的液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物。
2.2净含量
净含量应符合表1的要求。
表1 净含量要求
2.3精密度
2.3.1批内精密度
批内变异系数(CV)应≤10%。
2.3.2批间精密度
批间变异系数(CV)应≤15%。
2.4准确度
回收率应在90%～110%范围内。
2.5空白限
空白限应小于 1.0 μg/dL。
2.6线性
在(20.0-1000.0）μg/dL 浓度范围内，线性相关性系数（r）应大于0.9800。
2.7质控品准确度
测量结果在质控范围（可接受区间）内。
2.8质控品均一性
瓶间重复性CV%应≤10%。
1 / 1。
α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)测定试剂盒(α-酮丁酸底物法)产品技术要求sainuopu
α-羟丁酸脱氢酶（HBDH）测定试剂盒（α-酮丁酸底物法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中α-羟丁酸脱氢酶的活性。
1.1试剂盒包装规格试剂1：1×25ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×60ml，试剂2：2×12ml；试剂1：3×40ml，试剂2：3×8ml；试剂1：4×60ml，试剂2：4×12ml；试剂1：2×400ml，试剂2：1×160ml；试剂1：1×10L，试剂2：1×2L；试剂1：2×40ml，试剂2：2×8ml；试剂1：2×60ml，试剂2：2×15ml；试剂1：2×40ml，试剂2：2×10ml。
校准品(选配，冻干品)：1×1ml，1×3ml，1×5ml。
1.2试剂盒主要组成成分2.1 外观液体双试剂：试剂1无色澄清液体；试剂2无色至浅黄色澄清液体。
校准品：冻干品，溶解后为淡黄色液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不小于1.1。
2.3.2试剂空白吸光度变化率在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，用生理盐水作为样品加入试剂测试时，试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）应不大于0.002。
2.4 分析灵敏度测定活性为100U/L的样本时，吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.010。
2.5 线性范围测试血清样本，试剂线性在[25,750]U/L（37℃）区间内：a)线性相关系数|r|应≥0.990；b)[25,100]U/L区间内，线性绝对偏差不超过±10U/L；（100，750）U/L区间内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的重复性（变异系数，CV%）应不大于5%。
食品中脱氢乙酸的检测方法概述
T logy科技食品科技脱氢乙酸（简称DHA）具有抗菌性，常被作为食品生产中的防腐剂使用。
随着人们对食品安全的重视，各类研究者也开始关注食品添加剂对人体健康的危害问题。
戴有金等[1]通过脱氢乙酸钠对于大小鼠的急性毒性试验研究确认了脱氢乙酸及其钠盐属于WHO 化学物毒性分级标准中的低毒级别，对人体健康存在潜在威胁。
国家标准GB 2760-2014《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》中规定了脱氢乙酸的使用范围和最大使用量，但是仍有部分食品生产企业超范围或超量使用脱氢乙酸。
因此，快速准确的定性定量检测脱氢乙酸的含量尤为重要。
目前常用的方法包括高效液相色谱法、气相色谱法、紫外分光光度计法等。
本文就此类方法进行简要分析总结。
1 脱氢乙酸的检测方法1.1 高效液相色谱法脱氢乙酸难溶于水，易溶于碱性水溶液，故在液相色谱法检测脱氢乙酸的前处理过程中常用浓度为 20 g/L的NaOH溶液来调节样品溶液的pH值，使得溶液呈弱碱性，从而提取出样品中的脱氢乙酸，然后进行检测。
对于富含蛋白质的样品，使用不同的沉淀剂对结果有不同的影响。
杨海昕等[2]使用硫酸铜溶液和氢氧化钠溶液作为沉淀剂，代替国家标准GB 5009.121-2016中推荐的乙酸锌和亚铁氰化钾溶液，实验结果良好，回收率在87%～92%。
吴宁宁等[3]研究了不同流动相对脱氢乙酸检测结果的影响。
结果表明，甲醇+0.1%磷酸水溶液(55+45)作为流动相可以将脱氢乙酸的峰宽从1.5 min降低至 0.5 min，明显改善色谱峰拖尾问题。
样品在低、中、高浓度加标回收实验中的加标回收率也都在90%以上。
磷酸替代流动相中的乙酸铵，增强了流动相的酸性，改善了色谱图中目标峰拖尾的问题，提高了定量的准确度。
1.2 气相色谱法气相色谱法检测脱氢乙酸主要是利用其在酸性条件下会发生水解这一原理，将脱氢乙酸钠盐水解成脱氢乙酸，再利用乙酸乙酯提取，然后用气相色谱仪分析检测。
国家标准GB5009.121-2016的气相色谱法中有推荐的检测条件，但是并不是最优条件。
抗坏血酸含量实验报告
1. 掌握抗坏血酸含量的测定方法。
2. 了解抗坏血酸的性质及其在食品、药品中的应用。
3. 培养实验操作技能，提高分析问题、解决问题的能力。
二、实验原理抗坏血酸（维生素C）是一种水溶性维生素，具有抗氧化、增强免疫力等生理功能。
本实验采用2，6-二氯酚靛酚滴定法测定抗坏血酸含量。
该方法基于抗坏血酸具有还原性，可以将2，6-二氯酚靛酚还原成无色物质，从而通过滴定终点颜色变化来确定抗坏血酸的含量。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：电子分析天平、滴定管、锥形瓶、研钵、漏斗、容量瓶、吸管等。
2. 试剂：2%草酸溶液、1%草酸溶液、标准抗坏血酸溶液、0.1%2，6-二氯酚靛酚溶液、待测样品等。
四、实验步骤1. 样品预处理：将待测样品进行研磨、过筛，准确称取一定量的样品，加入适量1%草酸溶液，搅拌均匀，提取抗坏血酸。
2. 标准溶液的配制：准确称取一定量的标准抗坏血酸，溶解于1%草酸溶液中，配制成一定浓度的标准溶液。
3. 滴定：将提取的抗坏血酸溶液置于锥形瓶中，加入适量的2，6-二氯酚靛酚溶液，搅拌均匀。
用标准抗坏血酸溶液进行滴定，直至溶液颜色由红色变为无色，记录滴定所用标准溶液的体积。
4. 计算抗坏血酸含量：根据滴定所用的标准溶液体积和浓度，计算待测样品中抗坏血酸的含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果：根据实验数据，计算出待测样品中抗坏血酸的含量为X mg/g。
2. 分析：与国家标准或文献报道的抗坏血酸含量进行比较，分析实验结果的准确性。
1. 实验过程中可能存在的误差：样品预处理过程中可能存在抗坏血酸的损失；滴定过程中可能存在滴定终点判断不准确等。
2. 误差分析及改进措施：针对实验过程中可能存在的误差，提出相应的改进措施，以提高实验结果的准确性。
七、结论本实验采用2，6-二氯酚靛酚滴定法测定抗坏血酸含量，实验操作简便、准确。
通过实验，掌握了抗坏血酸含量的测定方法，提高了分析问题、解决问题的能力。
八、实验报告总结本次实验通过对抗坏血酸含量的测定，了解了抗坏血酸的性质及其在食品、药品中的应用。
植物脱氢抗坏血酸还原酶（D H A R）研究进展
status of discovery, functions, molecular biology and other aspects of dehydroascorbate reductase was summarized to
provide reference for in-depth study and reasonable utilization of the enzyme.
目前袁发现的 d h ar 基因主要有两种袁分别为 d h ar1 和 d h ar2袁一种存在于胞质中袁另一种为质体酶遥 在同一物种 中袁两种基因的差别主要是其 5爷端核苷酸序列不同袁而不 同物种间同一 d har 基因的 3爷端核苷酸序列不同袁这可能 与基因所在细胞尧物种进化及不同物种的生长环境及对环 境胁迫的响应程度有关遥 邹礼平等[1 1 ]从番茄中获得了这两 种 d h ar 基因袁同时推测 d h ar1 和 d h ar2 分别存在于胞质体 和质体中袁 并证明它们的氨基酸序列仅有 59% 的相似性曰 但他同时发现袁 相同的 d h ar 基因在不同物种间保守性较 高袁番茄 d h ar1 编码的氨基酸序列与水稻尧小麦尧拟南芥尧 烟草中的胞质 d har 基因的氨基酸序列同源性较高袁 均达 到 7 0% 以上曰番茄 d h ar2 编码的氨基酸序列与菠菜尧芥菜尧 青花菜尧 拟南芥中的质体 d h ar 基因的氨基酸序列同源性 也达到了 65% 以上遥 牛歆雨等[1 2]研究也发现袁猕猴桃与苹 果的 dh ar 基因核苷酸序列相似性高达 99% 袁与烟草尧番茄 和土豆的相似性也达到 7 5% 以上遥 可见袁相同来源的 d h ar 基因有较高保守性遥 3 .3 d h a r 基因的表达与调控
28 窑调查研究窑
文章编号院1 6 7 3 - 8 8 7 X (2 0 1 7 )0 2 - 0 0 2 8 - 0 3
DHA、EPA、DPA检测方法
海狗油
GC-MS
DHA、EPA、 DPA
——
取油样约0.2 mL于10mL具塞比色管中。加入1 ml 0.5ml/L 氢氧化钾-甲醇振摇，于50℃水浴保温30min并经常振 海狗油脂肪酸的气相 色谱-质谱分析. 汪东 摇；加入正己烷1mL，振摇1min；加蒸馏水至10mL刻 成，等.分析化学， 度，放置分层后取上层正己烷液于3mL具塞刻度离心管 2002，5（30）：634 中；加无水硫酸钠少许，充氨保存于冰箱中。及时分 析，进样0.2μ L。
海狗油
外标法
EPA甲酯 DHA、EPA、 、DHA乙 DPA 酯、DPA 甲酯
海狗油中化学成分的 气相色谱分析.林兰， 等。江苏药学与临床 研究，2001，9 （3）：23-24 毛细管气相色谱法测 定海狗油保健品中有 效成分EPA、DPA及 DHA。牟志春，等。 检验检疫科学， 2003，13（2）：16-8
深海鱼油中EPA，DHA 的气相色谱分析研究. 徐世民，等。粮油加 工与食品机械， 2005，10：54-7。
检测物质 检测方法
检测成分
标准品
样品酯化方法
文献
备注
鱼油
内标法
EPA、DHA
称取25mg深海鱼油样品于具塞试管中，加入1.5ml DHA甲酯 0.5mol/L NaOH甲醇液，使试管中充满N2，旋紧盖子， 、EPA甲 并混合均匀，在100℃水浴中加热15min，冷却至30~40℃ 酯、 。加入1.0ml内标溶液，充满N2，旋紧盖子，振荡30s， C17：00 立即加入饱和NaCl5ml，充N2保护，加盖再振摇一次。 甲酯 冷却至室温，待分层后取出正己烷层，水层再用正己烷 提取一次，合并正己烷层，在适当的条件进行分析。
鱼油
α—羟丁酸脱氢酶(HBDH)测定试剂盒(α—酮丁酸底物法)产品技术要求derui
α-羟丁酸脱氢酶（HBDH）测定试剂盒
（α-酮丁酸底物法）
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。
表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白
2.2.1试剂空白吸光度
试剂以生理盐水为空白时，在温度37℃、波长340nm，光径1.0 cm 条件下，吸光度≥ 1.1。
2.2.2试剂空白吸光度变化率
试剂以生理盐水为空白时，在温度37℃、波长340nm，光径1.0 cm 条件下，吸光度变化率≤0.002。
2.3分析灵敏度
试剂盒测试浓度为100U/L被测物时，吸光度变化率≥0.003。
2.4线性范围
2.4.1试剂盒在25 ~750U/L区间（范围）内，其回归系数r≥0.990。
2.4.2相对偏差或绝对偏差应符合表3 要求。
表3 相对偏差或绝对偏差
2.5精密度
2.5.1试剂盒重复性CV 值应≤5.0%。
1
2.5.2试剂盒批间相对极差（R）应≤10.0%。
2.6准确度
采用比对试验，相关系数r2≥0.95，相对偏差应在±10%范围内。
2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。
2。
质谱 脱氢乙酸
质谱脱氢乙酸
质谱（Mass Spectrometry）是一种用于分析物质分子结构和组成的技术。
它通过将样品中的分子转化为离子，并根据离子的质量和相对丰度来确定分子的质量和结构。
脱氢乙酸（Dehydroacetic Acid，简称DHA）是一种常用的防腐剂，常见于食品、化妆品和药品等产品中。
质谱可以用于分析脱氢乙酸的结构和特性。
在质谱分析中，通常会先将样品中的脱氢乙酸分子转化为带电离子，这可以通过不同的方法实现，如电喷雾（Electrospray Ionization，简称ESI）或化学电离（Chemical Ionization，简称CI）。
接着，离子将进入质谱仪器，通过加速器和质量分析器进行质量分析。
质谱仪器中的质量分析器可以根据离子的质量/电荷比（m/z）进行分析，并生成质谱图。
在质谱图中，可以通过峰的位置、强度和相对丰度等信息来确定脱氢乙酸的分子质量和结构。
质谱分析除了可以确定脱氢乙酸的分子质量和结构外，还可以用于定量分析、质量指纹图谱比对和寻找其他化合物的附加信息等。
因此，质谱是一种广泛应用于科学研究和实际生产的分析技术。
脱氢乙酸实验报告
一、实验目的本实验旨在研究脱氢乙酸（DHA）在食品中的含量检测方法，了解其检测原理、操作步骤及注意事项。
通过本实验，掌握脱氢乙酸的检测技术，为食品安全监管提供技术支持。
二、实验原理脱氢乙酸（DHA）是一种高效防腐、防霉剂，广泛应用于食品、饮料、医药等领域。
由于DHA对人体有一定的毒性，过量摄入会对健康产生危害。
因此，对食品中的DHA含量进行检测具有重要意义。
本实验采用气相色谱法（GC）对食品中的DHA进行检测。
气相色谱法（GC）是一种分离、检测和定量化合物的方法。
其原理是将待测样品注入色谱柱，在柱内与流动相（载气）进行分配，根据各组分的保留时间进行分离。
检测器将分离后的组分转化为电信号，经数据处理系统得到各组分的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：（1）食品样品：选取市售的果汁、酱菜、糕点、淀粉制品、肉制品、发酵豆制品、复合调味料等食品。
（2）脱氢乙酸标准品：纯度≥99%。
（3）色谱柱：SH-Polar D。
（4）流动相：乙酸乙酯。
（5）其他试剂：甲醇、氢氧化钠、盐酸等。
2. 实验仪器：（1）气相色谱仪（GC）：Shimadzu GC-2030。
（2）色谱柱：SH-Polar D。
（3）移液枪：SHIMSEN Pipet。
（4）容量瓶：10 mL。
（5）锥形瓶：50 mL。
（6）分析天平。
四、实验步骤1. 标准溶液的制备：（1）准确称取0.01 g脱氢乙酸标准品，置于10 mL容量瓶中。
（2）加入少量乙酸乙酯，溶解后用乙酸乙酯定容至刻度线。
（3）配制浓度为1.0 g/mL的标准溶液。
（4）依次配制浓度为10.0 g/mL、50.0 g/mL、100 g/mL和200 g/mL的标准溶液。
2. 样品前处理：（1）准确称取10.0 g食品样品，置于50 mL锥形瓶中。
（2）加入10 mL甲醇，充分振荡，使DHA溶解。
（3）加入0.5 g氢氧化钠，搅拌均匀。
（4）室温下静置30 min，使DHA充分转化为钠盐。
一种快速测定食醋和酱油中脱氢乙酸含量的高效液相色谱法
一种快速测定食醋和酱油中脱氢乙酸含量的高效液相色谱法梁健华;谢珊婷;陈雪明【期刊名称】《中国食品添加剂》【年(卷),期】2023(34)1【摘要】建立一种简单、高效、准确测定食醋和酱油中脱氢乙酸(DHA)的液相色谱法。
探讨了样品前处理的提取溶剂、蛋白沉淀剂、提取温度和净化方式等参数对提取的回收率和精密度的影响。
获得了样品前处理的最佳条件:水为提取溶剂,硫酸锌和亚铁氰化钾(v/v=1∶1)联合使用作为蛋白沉淀剂,30~50℃超声提取20 min。
该方法效率高、重现性好,回收率高,在5.0 mg/kg~100 mg/kg的加标水平下,食醋和酱油中DHA的加标回收率为96.91%~99.59%,相对标准偏差(RSD)小于5%(n=3)。
该方法在1.0~100μg/mL浓度范围线性关系良好,相关系数大于0.999。
方法的检出限和定量限分别为0.24 mg/kg和0.73 mg/kg。
在实际样品的检测中,该方法与国标方法的检测结果无显著性差异,结果表明,该方法适用于食醋和酱油样品中DHA的检测。
【总页数】7页(P313-319)【作者】梁健华;谢珊婷;陈雪明【作者单位】阳江市检测检验中心【正文语种】中文【中图分类】O657.72;TS202.3【相关文献】1.高效液相色谱法测定酱油及食醋中的苯甲酸和山梨酸2.高效液相色谱法同时测定食醋和酱油中的6种防腐剂和甜味剂3.高效液相色谱法测定酱油和食醋中4种对羟基苯甲酸酯4.食醋和酱油中苯甲酸钠和山梨酸钾含量的高效液相色谱法测定5.中空纤维膜液相微萃取-高效液相色谱法测定酱油、食醋及碳酸饮料中苯甲酸和山梨酸的含量因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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脱氢抗坏血酸（Dehydroascorbate,DHA）含量测定试剂盒使用说明规格:50T/48S
产品简介：
AsA作为植物细胞一个重要生理指标，其AsA的含量、氧化还原状态(AsA/DHA比率)及其合成与代谢相关酶类活性的变化涉及植物对一系列环境胁迫的响应。
DHA是AsA的可逆的氧化型，在生物体内，与抗坏血酸共同组成氧化还原系统，具有电子受体的作用。
DTT能将DHA还原成AsA，通过测定体系中AsA的生成速率，即可计算出DHA含量。
试验中所需的仪器和试剂：
低温离心机、紫外分光光度计、1ml石英比色皿、可调式移液器、研钵、冰、双蒸水产品内容：
试剂一：液体50ml×1瓶，室温保存；
试剂二：液体40ml×1瓶，室温保存；
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加入10ml蒸馏水充分溶解。
标准品：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加入5.743ml蒸馏水充分溶解；吸取0.1ml上述溶液，加入0.9ml蒸馏水，混匀，即100μmol/L DHA。
操作步骤：
一、样品中DHA提取：
按照组织质量（g）：提取液体积（ml）为1:5-10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml试剂一），进行冰浴匀浆；16000g，4℃离心20min，取上清置冰上待测。
二、DHA测定操作：
分光光度计预热30min，调节波长到265nm，蒸馏水调零。
试剂二在25℃水浴锅中预热30min以上。
标准管：在1ml石英比色皿中依次加入100μl标准液、800μl预热的试剂二和100μl试剂三，迅速混匀后于265nm比色，记录10s和130s的吸光值A1和A2，计算ΔA空白管=A2-A1。
测定管：在1ml石英比色皿中依次加入100μl上清液、800μl预热的试剂二和100μl试剂三，迅速混匀后于265nm比色，记录10s和130s的吸光值A3和A4，计算ΔA测定管=A4-A3。
DHA含量计算：
（1）按样本蛋白浓度计算：
DHA(μmol/mg prot)=(C标准液×△A测定管÷△A标准管×V标准)÷（Cpr×V样）
=0.1×△A测定管÷△A标准管÷Cpr
（2）按样本质量计算：
DHA(μmol/g)=(C标准液×△A测定管÷△A标准管×V标准)÷（W×V样÷V样总)
=0.1×△A测定管÷△A标准管÷W
C标准液:100μmol/L；V标准)：标准液体积，0.1ml；V样总：上清液总体积，1.0ml=0.001L；V样：加入反应体系中上清液体积，0.1ml；W：样品质量（g）。