同种异体及异种组织修复材料：如何选用适宜的病毒灭活工艺

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血液制品去除灭活病毒技术方法及验证指导原则

血液制品去除灭活病毒技术方法及验证指导原则LT血液制品去除/灭活病毒技术方法及验证指导原则目前已知经血液制品传染的病毒主要有HBV、HCV、HIV-1、HIV-2、HTLV和细小病毒B19。

尚未发现经血液制品传染CJD。

但有少数研究报告发现有实验性传染现象，因此要密切关注CJD，特殊是vCJD的发展动向。

为了提高血液制品安全性，生产工艺要具有一定的去除/灭活部份病毒能力，生产过程中应有特定的去除/灭活病毒方法。

本技术指导原则是对血液制品（指以人血浆为原料制备的制品）生产过程以及特定的去除/灭活病毒方法验证的指导原则，包括指示病毒和病毒去除/灭活方法的选择、验证方案的设计、结果判定以及附录所列技术验证申报的程序。

一、去除/灭活病毒方法的选择由于不同类血液制品潜在的污染病毒的可能性不同，为此选择病毒去除/灭活方法的侧重点也应有所不同：（一）凝血因子类制品生产过程中应有特定的能去除/灭活脂包膜和非脂包膜病毒的方法，可采用一种或者多种方法联合去除/灭活病毒。

（二）免疫球蛋白类制品对于免疫球蛋白类制品（包括静脉注射用人免疫球蛋白、人免疫球蛋白和特异性人免疫球蛋白）生产过程中应有特定的灭活脂包膜病毒方法。

但从进一步提高这种制品安全性考虑，提倡生产过程中加入特定的针对非脂包膜病毒的去除/灭活方法。

（三）白蛋白采用低温乙醇生产工艺和特定的去除/灭活病毒方法，如巴斯德消毒法等。

二、常用的去除/灭活病毒方法评价（一）巴斯德消毒法（巴氏消毒法）1．人血白蛋白制品几十年临床应用结果表明，白蛋白的巴氏消毒法对HIV和肝炎病毒是安全的。

其病毒灭活条件已很完善，可不要求进行病毒灭活验证。

但是必须对巴氏消毒法所用设施进行验证，使巴氏消毒各参数符合要求（包括制品内温度分布的均一性和灭活时间）。

首先，应该选择经血液传播的相关病毒（如：HIV），不能用相关病毒的，要选择与其理化性质尽可能相似的指示病毒；第二，所选择的病毒理化性质应有代表性（病毒大小、核酸类型以及有无包膜），其中至少应包括一种对物理和/或者化学处理有明显抗性的病毒。

病毒灭活去除验证指南

Days
HCV markers
HCV RNA
Anti-HCV
0 10
20 30 40
50 60 70 80 90 100
Days
HIV markers
HIV RNA (plasma) HIV antibody
11 16 22
HIV p24 antigen
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
S/D法(Solvent/Deterdent) IgG、凝血因子、血浆
低pH孵放法(pH4
IgG
incubation)
干热(Dry-heat treatment) 凝血因子
纳米膜过滤法 (Nanofiltration)
凝血因子、 IgG
制造过程病原体（病毒）灭活和去除
• 血浆蛋白纯化 -去除不需要的蛋白质 -去除潜在的病毒污染 -纯化步骤乙醇沉淀乙醇/PEG沉淀层析/免疫亲和层析纳米膜过滤
1319无犬细小病毒canineparvovirus猪细小病毒porcineparvovirus病毒灭活与去除的方法1化学方法溶剂去污剂有机溶剂磷酸三丁酯tnbp去污剂tween80tritonx100对脂包膜病毒有效对非脂包膜病毒无效b丙内酯法2光化学方法甲基蓝加上甲基蓝然后进行光照导致灭活临床用血浆mb血浆3物理方法去除纳米膜过滤层析法免疫亲和层析沉淀法酒精硫酸鞍加热灭活干热法冻干终产品蒸汽处理热的水蒸汽巴氏消毒法60c10小时病毒灭活工艺灭活工艺产品类型巴氏消毒法60c10hrpasteurization
1%TNBP和1%TritonX-100， 30℃孵育4小时处理血浆灭活病毒情况
病毒种类
VSV
灭活病毒（log 10）灭活病毒时间（小

新冠疫苗的灭活工艺

新冠疫苗的灭活工艺新冠疫苗的灭活工艺是一种制备疫苗的方法，通过将新冠病毒进行灭活处理，使其失去活性但仍能激发免疫系统产生抗体，达到预防感染的目的。

一般来说，制备新冠疫苗的灭活工艺主要分为以下几个步骤：1. 病毒培养：首先需要选取适宜的细胞系作为病毒培养基质，毕竟病毒需要寄生在细胞内才能生存和繁殖。

目前制备新冠疫苗的灭活工艺主要采用的是Vero 细胞系（绿猴肾细胞）或其他哺乳动物细胞系。

2. 病毒分离：从感染新冠病毒的患者样本中，如痰液、咽拭子等，分离出并纯化出新冠病毒。

病毒的纯化过程主要通过超速离心、滤过、浓缩等技术实现。

3. 病毒灭活：在病毒分离和纯化完毕后，需要使用灭活剂将病毒失去活性。

常用的灭活剂包括β-普鲁阿拉宁（β-propiolactone）和二甲亚砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）。

这些灭活剂能够与病毒的核酸或蛋白质结合，破坏其功能和结构。

4. 病毒检验：经过灭活处理后的病毒需要进行检验，确保病毒已经完全失去活性。

常用的检验方法包括免疫荧光法、电子显微镜观察等，以确保病毒完全灭活，不再具有传染性。

5. 制备疫苗：灭活的新冠病毒经过检验合格后，可以进一步进行制备疫苗。

研究人员将灭活的病毒进行分装、稀释等操作，制备出疫苗剂型，如注射液、冻干粉等。

6. 免疫接种：制备好的新冠疫苗剂型可以用于临床免疫接种。

接种后，疫苗中的灭活病毒能够刺激人体免疫系统产生特异性的抗体，并形成免疫记忆，为日后遇到真实的新冠病毒感染提供保护。

总体来说，灭活工艺是一种传统而成熟的制备疫苗的方法。

然而，灭活疫苗的制备工艺相对较复杂，需要掌握病毒培养和灭活技术，确保病毒彻底失去活性，同时也需要进行严格的质量控制和病毒检验。

此外，灭活疫苗可能存在较高的副作用风险，比如接种后可能出现发热、局部不适等不良反应。

因此，在灭活疫苗的制备和使用过程中，要做好充分的安全性评估和监测工作，以确保疫苗的有效性和安全性。

同种异体植入性医疗器械病毒灭活工艺验证技术审查指导原则

同种异体植入性医疗器械病毒灭活工艺验证技术审查指导原则（2019年修订）（征求意见稿）一、前言同种异体植入性医疗器械是以同种来源组织为原料经加工或组成的产品。

我国目前对同种异体植入性医疗器械产品组织供体的病毒筛选多采用检测血清中病毒特异性抗体或抗原的方法，其中对人免疫缺陷病毒（HIV）还要求检测血清中的病毒核酸。

但是，尽管对供体进行了严格的筛选，仍然存在漏检和未知病毒污染的风险，以及生产过程中带入外源病毒的风险。

因此，要求同种异体植入性医疗器械产品在生产过程中采用有效的病毒灭活工艺，并对病毒灭活工艺的有效性进行科学的验证。

本指导原则是对同种异体植入性医疗器械生产过程中特定病毒灭活工艺的效果进行验证的一般要求，申请人应依据具体产品的特性对注册申报资料的内容进行充实和细化，如采用的病毒灭活工艺及相关参数等，并依据具体产品的特性确定其中的具体内容是否适用。

本指导原则是对申请人和审评人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供详细的研究资料和验证资料。

应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。

本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将进行适时的调整。

本指导原则为2011年发布的《同种异体植入性医疗器械病毒灭活工艺验证技术审查指导原则》的修订版。

主要修订内容包括：修改指导原则中相关语言描述；完善指示病毒类型及举例的相关描述；调整病毒灭活/去除有效性验证的原则。

二、适用范围本指导原则适用于需要对生产过程中特定病毒灭活工艺的效果进行验证的同种异体植入性医疗器械。

三、基本要求（一）常用的病毒灭活方法同种异体植入性医疗器械的病毒灭活有多种方法，企业应根据产品的特性选择合适的病毒灭活工艺。

采用病毒灭活工艺应综合考虑以下问题，包括病毒灭活效果的验证；病毒灭活工艺对产品性能的影响；病毒灭活工艺本身的公认性、可靠性、重现性、易放大性及经济性。

同种异体植入性医疗器械病毒灭活工艺验证指导原则(2020年修订版)

附件4同种异体植入性医疗器械病毒灭活工艺验证技术审查指导原则（2020年修订版）同种异体植入性医疗器械是以同种来源组织为原料加工或组成的产品。

我国目前对同种异体植入性医疗器械产品组织供体的病毒筛选多采用检测血清中病毒特异性抗体或抗原的方法，其中对人免疫缺陷病毒（HIV）还要求检测血液中的病毒核酸。

但是，尽管对供体进行了严格的筛选，仍然存在漏检和未知病毒存在的风险，以及生产过程中带入外源病毒的风险。

因此，要求同种异体植入性医疗器械产品在生产过程中采用有效的病毒灭活工艺，并对病毒灭活工艺的有效性进行科学的验证。

本指导原则是对同种异体植入性医疗器械生产过程中特定病毒灭活工艺的效果进行验证的一般要求，注册申请人应依据具体产品的特性对注册申报资料的内容进行充实和细化，如采用的病毒灭活工艺及相关参数等，并依据具体产品的特性确定其中的具体内容是否适用。

本指导原则是对注册申请人和审评人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供详细的研究资料和验证资料。

应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。

—1 —本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将进行适时的调整。

本指导原则为2011年发布的《同种异体植入性医疗器械病毒灭活工艺验证技术审查指导原则》的修订版。

主要修订内容包括：修改指导原则中部分语言描述，如常用病毒灭活方法、染毒方法、病毒灭活效果判定、其他需考虑的问题、病毒灭活工艺的再验证等；完善指示病毒类型选择及举例的相关描述；增加病毒灭活/去除有效性验证的原则。

一、适用范围本指导原则适用于需要对生产过程中特定病毒灭活工艺的效果进行验证的同种异体植入性医疗器械。

二、基本要求（一）常用的病毒灭活方法同种异体植入性医疗器械的病毒灭活有多种方法，企业应根据产品的特性选择合适的病毒灭活工艺。

人的体细胞治疗申报临床试验指导原则

人的体细胞治疗申报临床试验指导原则序言自1993年5月卫生部公布《人的体细胞治疗及基因治疗临床研究质控要点》，体细胞治疗的研究与应用进展很快，涌现了许多新的技术方法；应用范围进一步扩大。

为了促进我国体细胞治疗的正常开展并利于管理，特制定本指导原则。

体细胞治疗是指应用人的自体，同种异体或异种（非人体）的体细胞,经体外操作后回输（或植入)人体的治疗方法。

这种体外操作包括细胞在体外的传代、扩增、筛选以及药物或其它能改变细胞生物学行为的处理.经过体外操作后的体细胞可用于疾病的治疗，也可用于疾病的诊断或预防.体细胞治疗具有多种不同的类型，包括体内回输体外激活的单核白细胞如淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）、肿瘤浸润性淋巴细胞（TIL）、单核细胞、巨噬细胞或体外致敏的杀伤细胞（IVS）等等；体内移植体外加工过的骨髓细胞或造血干细胞;体内接种体外处理过的肿瘤细胞（瘤苗）；体内植入经体外操作过的细胞群如肝细胞、肌细胞、胰岛细胞、软骨细胞等等。

由于体细胞治疗的最终制品不是某一种单一物质而是一类具有生物学效应的细胞，其制备技术和应用方案具有多样性、复杂性和特殊性，固此不能象一般生物制品那样制订出适合于每一种方案的具体标准，本指导原则只提出一个共同的原则,具体的申报资料和应用方案应根据本文件加以准备、申请和实施.对每个方案的整个操作过程和最终制品必须制定并格执行（实施）标准操作程序，以确保体细胞治疗的安全、有效。

申报资料一、体细胞治疗制剂的名称、选题目的与依据、国内外研究现状或生产使用情况（一）申请表(二）体细胞治疗制剂的名称及命名依据（三）选题的目的和立题依据（四）国内外有关该制剂的研究现状、生产及临床应用情况（包括专利查询情况）二、体细胞的采集、分离和检定(一）体细胞类型和供体的情况1.体细胞类型须指出细胞来源是属于自体、同种异体还是异种。

必须提供细胞的组织来源及细胞类别的确证资料，其中包括形态、生化或表面标志等。

病毒灭活工艺

低温乙醇法生产血液制品五变参数：温度、pH、蛋白浓度、乙醇浓度、离子强度我公司血液制品生产过程中的病毒灭活工艺：巴氏灭活、S/D灭活、干热灭活、低pH孵放各个产品的病毒灭活工艺：一、人血白蛋白——巴氏灭活1.1 巴氏灭活要求步骤：组分Ⅴ精制及超滤后进行调制要求：按每1g蛋白质加入0.14～0.18mmol辛酸钠，按成品规格以注射用水稀释至规定的蛋白质含量，并控制氯化钠含量不超过160mmol/L，pH值为6.60～7.20。

参数：60±0.5℃、10小时。

1.2 后加温步骤：分装完成后参数：57.5±0.5℃水浴中连续加温至少2小时1.3 放孵要求分装后，应置20～25℃至少4周或30～32℃至少14天后，逐瓶检查外观二、静注人免疫球蛋白（pH4）——巴氏灭活、低pH孵放2.1 巴氏灭活要求步骤：组分Ⅱ沉淀（可以合并批次）溶解后，经澄清过滤、透析脱醇后调制要求：调整制品蛋白质含量为20±5g/L，加入甘氨酸至终含量为100±30g/L，调整制品pH至7.10～7.50参数：60±0.5℃、10小时。

2.2低pH孵放步骤：分装完成后参数：23～25℃至少21天三、人免疫球蛋白、特免——巴氏灭活步骤：组分Ⅱ沉淀（可以合并批次）溶解后，经澄清过滤、透析脱醇后调制要求：蛋白质含量为20±5g/L，加入甘氨酸至终含量为100±30g/L，调整制品pH至7.10～7.50 参数：60±0.5℃、至少10小时四、人凝血因子Ⅷ——S/D灭活、干热灭活4.1 S/D灭活步骤：聚乙二醇沉淀后上清调制要求：聚山梨酯80终含量为10.0±3.0g/L，磷酸三丁酯终含量为3.0±0.3g/L，pH值6.60～7.20，水浴升温制品至24.0℃时开始计时灭活参数：24.0～26.0℃条件下，搅拌灭活至少6小时4.2 干热灭活步骤：冻干完成后参数：沸水浴99.5±0.5℃连续加温至少30分钟五、人凝血酶原复合物——S/D灭活、干热灭活5.1 S/D灭活步骤：超滤后调制要求：蛋白质含量至10～30g/L，聚山梨酯80终含量为10.0g/L，磷酸三丁酯的终含量为3.0g/L，加完后复校制品pH为6.50～7.50，升温制品至24～26℃参数：24～26℃条件下搅拌灭活不低于6小时5.2 干热灭活同4.2六、人纤维蛋白原——S/D灭活、干热灭活6.1 S/D灭活步骤：组分Ⅰ沉淀溶解及过滤后调制要求：聚山梨酯80含量达到10.0g/L，磷酸三丁酯含量达到3.0g/L，复校制品pH至7.00±0.20，水浴升温制品至24℃时开始计时灭活参数：24～26℃条件下，搅拌灭活至少6小时6.2 干热灭活6.2.1 一次乙醇沉淀步骤：冻干后参数：沸水浴99.5±0.5℃连续加温至少30分钟6.2.2 二次乙醇沉淀步骤：分装、冻干后参数：沸水浴99.5±0.5℃连续加温至少30分钟。

生物制药技术在病原体灭活与去除中的关键实践

生物制药技术在病原体灭活与去除中的关键实践随着生物技术的发展和进步，生物制药技术在病原体灭活与去除中扮演着重要角色。

病原体灭活与去除是制药过程中至关重要的步骤，它确保了生产的药物安全有效。

本文将介绍生物制药技术在病原体灭活与去除中的关键实践。

病原体灭活与去除是生物制药过程中非常关键的环节，它旨在通过一系列的处理步骤来消灭病原体的活性，从而确保药物的安全性。

这也是生物制药技术的核心之一，常用于疫苗和抗体等生物制药产品的生产中。

首先，病原体灭活与去除的方法多种多样，其中最常用的方法是化学灭活和物理灭活。

化学灭活是使用特殊的化学物质来杀死病原体，例如使用甲醛或乙醛等试剂。

物理灭活则是通过一系列的物理操作，如热处理或辐射等来杀死病原体。

这些方法不仅能够有效地灭活病原体，还能保持药物的相关活性。

其次，病原体灭活与去除的实践中，需要严格控制各个步骤的条件和参数。

在病原体灭活过程中，关键的因素包括温度、时间、浓度等。

针对不同的病原体，需要进行针对性的优化。

例如，对于某些病毒，需要在高温下进行灭活，而对于细菌则可能需要较长时间的低温处理。

此外，在物理灭活中，辐射剂量和照射时间也需要精确控制，以确保病原体完全被灭活。

此外，病原体灭活与去除中的实践还需要进行有效的监测和验证。

在生物制药过程中，监测病原体的活性和去除效果是至关重要的。

常用的方法包括细菌培养、病毒扩增等。

通过这些监测方法，可以及时发现并解决灭活过程中可能出现的问题，确保产品的质量和安全性。

另外，病原体灭活与去除的实践中还需要合理的设备和工艺。

生物制药企业需要配备先进的设备和合适的工艺流程来保证灭活与去除的效果。

例如，高温灭活需要具备高压高温的反应釜，而辐照灭活则需要具备高能量的射线源。

此外，不同的病原体可能需要不同的设备和工艺，因此企业需要根据产品和病原体的特点进行适当选择和调整。

综上所述，生物制药技术在病原体灭活与去除中的关键实践非常重要。

通过合理选择和优化方法，严格控制参数和条件，有效地监测和验证灭活效果，以及配备合适的设备和工艺，可以确保生产出安全有效的药物。

热力及紫外线对鼠诺如病毒的消毒作用分析

• 466 •国际病毒学杂志 2020 年12 月第27 卷第6 期International Journal of Virology, December 2020, Vo丨.27, No. 6•基础研究•热力及紫外线对鼠诺如病毒的消毒作用分析李伯阳1李慧莹2章青2孔翔羽2庞立丽2裴银辉1段招军21华北理工大学基础医学院，唐山063000; 2国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，北京10220(5通信作者：庞立丽，Email:cactusea@【摘要】目的检验热力及紫外线对鼠诺如病毒（murine norovirus，MNV)的消毒效果，完善预防人诺如病毒（human norovirus，HuNV)感染的消毒措施。

方法通过半数组织培养感染剂量（median tissue culture infective dose,TCID5Q)检测在不同温度、不同作用时间等条件下热力及紫外线对MNV的消毒效果。

结果MNV在4 T、25^下可以稳定存在14 d，在37 T：下可以维持5 d。

在56 X：下30 m in、58丈下5 m in、60丈下1min作用MNV均可达到消毒效果。

在距离紫外光源15〇1«或3〇€111处|§射7.5!11丨11，以及在距离紫外光源1〇1或2 111处$§射6〇11^11，均可对\11^产生消毒效果。

结论通过热力及紫外线均可对MNV进行有效消毒，为消毒和灭活HuNV提供了参考方法和依据。

【关键词】诺如病毒；物理消毒；紫外线；热力基金项目：国家科技重大专项课题（项目号：2018ZX10734401 )DOI：10.3760/cma.j.issn.1673-4092.2020.06.006Disinfection effects of heating and ultraviolet on murine norovirusLi Boyang , Li Huiying2, Zhang Qing2, Kong Xiangyu2, Pang Lili2, Pei Tinhui1, Duan Zhaojun2'School o f Elementary Medicine, North China University o f Science and Technology, Tangshan 063000,China;W//C Key Laboratory o f M edical Virology and Viral Diseases, National Institute for Viral DiseaseControl and Prevention, Chinese Center f or Disease Control and Prevention, Beijing 102206, ChinaCorrespondingauthor:PangLili,Email:****************,Tel*************【Abstract 】Objective To test the disinfection effects of heating and ultraviolet on murinenorovirus (MNV),so as to improve disinfection measures to prevent human norovirus (HuNV)infection.Methods The disinfection effects of heating and ultraviolet on MNV under different temperatures,different action times and other conditions were tested by median tissue culture infective dose (TCID50).Results MNV remained active at4 °C and25 °C for 14 d,or at 37 °C for5 d.Effective disinfectionof MNV can be achieved by heating at 56 0C for 30 min,at 58 °C for 5 min,or at 60 °C for 1min.Irradiation of MNV for7.5 min at a distance of15 cm or30 cm from the ultraviolet light source,or for60min at a distance of1m or2 m from the ultraviolet light source generated the same disinfection effects.Conclusions Both heating and ultraviolet had effective disinfection capability of MNV,and can providereference methods and evidences for disinfection and inactivation of HuNV.【Key words 】Norovirus;Physical disinfection;Ultraviolet ray;HeatingFund program: National Science and Technology Major Project(2018ZX10734401)DOI：10.3760/cma.j.issn.1673-4092.2020.06.006人诺如病毒（human norovirus,HuNV)属于杯状病毒科诺如病毒属，是无包膜单股正链RNA 病毒。

动物组织样本灭活方法

动物组织样本灭活方法
嘿，咱今儿就来聊聊动物组织样本灭活这档子事儿。

你说这动物组织样本，就像是一个个小秘密等待着我们去揭开呢！
要让这些样本乖乖听话，灭活可是关键一步。

就好像给它们施了个小魔法，让它们稳定下来。

比如说高温灭活吧，就像把样本放进一个超级热的烤箱里，让那些可能捣乱的家伙们都没法蹦跶啦！这种方法直接又有效，能快速解决问题呢。

还有化学灭活，就像是给样本喂了一种特别的“药”，让它们安安静静的。

这就好比给调皮的小朋友一颗糖果，他就不闹腾了。

再说说辐射灭活，听着有点高大上吧？就好像给样本来了一道神秘的光线，让它们变得服服帖帖的。

可别小看了这些方法呀，用得好那可是大功臣呢！要是没用对，那不就白折腾啦。

就好像你想去一个地方，走对路了很快就到，走错路了那可就绕圈圈喽。

咱得根据不同的样本特点和需求来选择合适的灭活方法。

这就跟穿衣服一样，得合身才行呀！有的样本适合高温，有的适合化学，得好好琢磨琢磨。

而且在操作的时候可得小心谨慎，就像走钢丝一样，稍不注意可能
就出岔子了。

这可不是闹着玩的呀！要是不小心弄错了，那之前的努
力不就白费了嘛。

想象一下，如果灭活没做好，那后面的研究不就乱套啦？那可不行！所以咱得重视起来，把这一步做好做扎实。

总之呢，动物组织样本灭活这事儿可不简单，需要我们认真对待，
仔细选择方法，小心操作。

这样才能让我们的研究顺利进行，解开那
些关于动物的神秘面纱呀！这就是我对动物组织样本灭活方法的一些
看法，你觉得咋样呢？。

灭活病毒疫苗的原理与制备方法

灭活病毒疫苗的原理与制备方法疫苗是一种强大的预防疾病的工具。

它首先被使用于减轻天花、小儿麻痹症、脊髓灰质炎等疾病的传播和影响。

正如我们现在看到的那样，疫苗是防止新冠病毒和其他疾病传播的最有效方法之一。

灭活病毒疫苗是其中一个开发和生产的方法。

灭活病毒疫苗主要是用于预防病毒病的疾病，并且对于预防缺陷较大和高毒性的病毒也是非常有效的。

举个例子，现在广泛应用于世界各地的灭活狂犬病疫苗是一种保护狂犬病的病毒。

灭活病毒疫苗的制备方法有多种，但是基本上都包括以下步骤：1. 病毒的收集和纯化从疾病患者的体液，如口腔、鼻腔、尿液、血液等，收集含病毒的样本。

然后在实验室中，通过各种方法从样本中分离出病毒，并将其纯化。

此过程将得到高浓度的病毒悬液，常用叫做病毒种苗。

2. 病毒的灭活此过程是采用化学药物或物理学方法来破坏病毒的生命周期和病原性，同时保留其抗原性，使其能引发免疫系统产生免疫应答。

化学方法常用乙醛、形胜、氧化氯、碘等，物理学方法则包括辐照（紫外线、伽马线等）、高温加压等。

通过特定的灭活方法，病毒的病原性就能被破坏，但其抗原性则保留完好，使其成为健康安全的注射物。

3. 病毒的接种和免疫应答该过程中，灭活病毒接种到实验动物或人体中。

一般情况下，实验动物或人体在接种后会产生免疫应答，进而产生抗体，从而将其体内的病毒被消灭，预防疾病发生。

通过这一过程，最终生产出适用于人体接种的灭活病毒疫苗。

灭活病毒疫苗虽然安全有效，但是也存在一些挑战。

其中最大的挑战之一是病毒的灭活会减弱其抗原性。

如果抗原性太弱，那么灭活病毒疫苗将不能产生足够的免疫应答，也就不能足够的预防感染。

因此，需要精心地控制病毒的灭活方法，以确保其抗原性的保留。

另一个挑战是灭活病毒的发展周期似乎相对较长。

所以在疾病如新冠病毒（COVID-19）等急需疫苗的发展中，灭活病毒疫苗的生产可能需要额外时间和资源。

因此，我们需要在其他有效预防这些急需疫苗的传播的方法上注入更多精力。

医用器具的病毒灭活技术考核试卷

A.浓度
B.时间
C.温度
D.所有上述因素
9.下列哪种方法不适用于核酸类病毒的灭活？（）
A.辐射
B.高温
C.（）
A.高效
B.安全
C.经济
D.所有上述选项
11.下列哪种情况需要对医用器具进行再次灭活处理？（）
A.使用过程中污染
B.灭活后存放时间过长
四、判断题（本题共10小题，每题1分，共10分，正确的请在答题括号中画√，错误的画×）
1.所有的医用器具都可以使用高温灭活方法进行消毒。（）
2.化学消毒剂对病毒灭活效果与浓度成正比。（）
3.紫外线消毒可以穿透物体，对物体内部进行消毒。（）
4.辐射消毒对人体没有危害。（）
5.灭活后的医用器具可以直接使用，无需其他处理。（）
6.医用器具在灭活前需要进行______、______和______等预处理。
7.灭活效果的验证通常包括______测试和______测试。
8.我国对医用器具病毒灭活技术的监管主要依据______和______。
9.病毒灭活技术的研发方向之一是寻找更高效且______的灭活剂。
10.在进行病毒灭活操作时，应穿戴适当的个人防护装备，如______、______和______。
A.灭活剂的选择
B.灭活效果的监测
C.从业人员培训
D.所有上述选项
二、多选题（本题共20小题，每小题1.5分，共30分，在每小题给出的四个选项中，至少有一项是符合题目要求的）
1.病毒灭活技术的目的是什么？（）
A.消除病毒的感染性
B.保证医用器具的安全使用
C.提高医疗服务的质量
D.降低医疗成本
2.常用的物理灭活方法有哪些？（）
D.灭活剂

灭活操作规程

灭活操作规程灭活操作规程为了确保实验室的安全和实验的准确性，灭活操作在实验室中非常重要。

下面是一份灭活操作规程，可供参考：一、灭活操作的定义和目的灭活操作是指在实验过程中对生物样品、培养物或实验物质进行杀灭处理，以防止生物体或病原体的传播和实验过程中的污染。

灭活操作的目的是保护实验人员的健康和实验室环境的安全，同时确保实验结果的准确性和可靠性。

二、灭活操作的原则和方法1. 灭活操作应根据实验样品和实验物质的特性选择合适的灭活方法，如高温灭活、化学灭活或放射灭活等。

2. 灭活操作应在专用的灭活区域进行，确保实验室内其他区域不受污染。

3. 灭活操作前应了解实验样品或实验物质的特性、病原性和潜在危险，制定相应的灭活方案。

4. 灭活操作前应使用个人防护装备，如实验衣、手套、口罩和护目镜等。

5. 严格遵守实验室内的安全操作规程和政策，确保灭活操作符合法律法规和实验室的要求。

三、高温灭活高温灭活是一种常用的灭活方法，适用于灭活细菌、病毒和真菌等生物样品。

具体操作步骤如下：1. 使用带防护装置的工具将生物样品放置在高温灭活器或高压灭菌器中。

2. 根据实验需要设置合适的温度和时间，一般推荐使用121°C的高温灭活器。

3. 注意安全，避免烫伤和高压爆炸等事故发生。

4. 完成灭活后，将灭活器冷却到安全温度后再取出样品。

四、化学灭活化学灭活是一种利用化学药剂对生物样品进行灭活的方法，适用于有机物或化学敏感的生物样品。

具体操作步骤如下：1. 根据实验需要选择合适的化学灭活剂，如醋酸、乙醛、过氧乙酸等。

2. 在灭活操作区域将生物样品浸泡在适量的化学灭活剂中，确保完全浸润。

3. 根据化学灭活剂的浓度和反应时间控制灭活效果，注意不要超出安全限度。

4. 灭活结束后，将化学灭活剂充分稀释或中和后进行合理处理。

五、放射灭活放射灭活是一种利用辐射对生物样品进行灭活的方法，适用于很小剂量的生物样品。

具体操作步骤如下：1. 确定放射灭活设备和辐射源的种类和能量，确保设备正常工作和辐射源的安全。

佐剂及灭活疫苗的制作

佐剂及灭活疫苗的制作一、选取病毒株在制备灭活疫苗时，需要选择合适的病毒株。

通常情况下，选择病毒株需要考虑以下几个方面：病毒的毒力、流行性和稳定性等。

二、繁殖病毒繁殖病毒是生产灭活疫苗的关键步骤之一、病毒可以在细胞培养物中繁殖，通常选择猴肾细胞等。

此外，还可以使用鸡胚等进行病毒繁殖。

三、灭活病毒通过将繁殖好的病毒暴露于灭活剂，如甲醛、β-普鲁兰、二乙二硫磷等，可以灭活病毒。

灭活剂的选择需要考虑到其能够有效灭活病毒同时又不破坏病毒表面抗原。

四、纯化病毒将灭活的病毒经过纯化处理，可以去除不必要的杂质，提高灭活疫苗的纯度。

常用的方法有超速离心、凝胶过滤和柱层析等。

五、选择佐剂佐剂是用于增强灭活疫苗的免疫原性的物质。

常见的佐剂有铝盐和油水乳剂等，它们可以激活免疫系统，促进抗原的吸收和提高抗原的持久性。

六、灭活疫苗将灭活的病毒与佐剂混合后，可以制备灭活疫苗。

灭活疫苗在注射给人体后，通过刺激免疫系统产生抗体和记忆性T细胞等免疫应答，从而提高人体对病毒的免疫能力。

七、灭活疫苗的质量控制灭活疫苗的质量控制是确保疫苗安全有效的重要环节。

常见的质量控制方法有：病毒滴度测定、病毒变异性测定、灭活效果检测、病毒残留测定等。

总结起来，制作灭活疫苗主要包括选取合适的病毒株、繁殖病毒、灭活病毒、纯化病毒、选择佐剂、灭活疫苗以及进行质量控制等一系列步骤。

这些步骤的顺序和操作方法都需要精确控制，以确保最终产品的质量和安全性。

同时，不同的灭活疫苗也可能会有一些差异性，因此实际制备时需要根据具体的病毒株和制备工艺进行调整。

生物制药灭活工艺

生物制药废水灭活工艺简介1 背景2020年初我国爆发了传染性肺炎，主要诱导因就是新型冠状病毒，而生物制药行业主要工艺就是细菌的培养、提纯，过程中会产生很多变异菌类，不进行严格的消毒灭菌处理，将有可能污染外界环境、引起传染病流行，因此生产过程中的废水需要经严格的处理再经第三方检测达标后才能排放到外网中。

我司施工的XXX药业激素楼为国内最大的重组人生长激素粉剂生产车间，其主要工艺为：构建成表达重组人生长激素的大肠杆菌→种子培养LB培养液→发酵→诱导和补料发酵→分析检测→纯化和纯度鉴定→产品。

XXX工艺生产的发酵、层析、超滤、盐析等生产过程中，设备本身并不带有灭菌装置，因此排出的废水中含有很多活性菌，故生产废水的处理必须严格、谨慎，因此需对废水进行集中收集处理后再进行排放。

处理杂菌及病毒的主要方式有两种，一是灭菌，二是灭活。

灭活是指用物理或化学手段使病毒蛋白的高级结构受到破坏，蛋白不再有生理活性，所以失去感染，致病和繁殖能力，但是常规的灭活不影响病毒蛋白的一级结构，意思就是病毒蛋白的序列没有变化。

而灭菌是指采用强烈的理化因素使任何物体内外部的蛋白序列甚至DNA全部破坏的过程。

灭活的最大特点是不损害细菌体内有用抗原，由于车间的废水还会经过废水站的统一处理，因此第一步处理我们只需使病毒失去感染性即可，故本项目对废水采用灭活的工艺。

2 灭活设备选型及介绍2.1 设备选型目前常用的灭活方式有三种：（1）破坏包膜：包膜含有脂类物质，因此有包膜的病毒可迅速被脂溶剂破坏，如乙醚、氯仿或去氧胆酸钠可使病毒灭活。

物理因子，如渗透压改变、冻融、热和干燥等都可引起包膜破坏。

（2）病毒蛋白质变性：能使蛋白质变性的化学制剂都能使病毒灭活，如酚、甲醛、次氯化物、酸和碱等。

加热引起变性也是有效灭活的方法（3）病毒核酸的损害：X线、γ线等电离辐射可切断核酸，紫外线可使核苷酸链上相邻的嘧啶碱基形成二聚物,而破坏病毒基因的功能。

另外吖啶橙或中性红等染料可与病毒核酸结合，暴露于光线之下，可使核酸分解，从而使病毒灭活。