杀虫剂生物测定技术.pptx

常用的供试昆虫有：
（1）粘虫（Leucania separate Walker），代表 鳞翅目咀嚼式口器食叶性害虫。（可人工饲养） （2）玉米螟（Ostrinia nubilalis），代表为害杂 粮作物的钻蛀性害虫。（可人工饲养） （3）二化螟（Chilo suppressalis）,代表钻蛀性 水稻害虫。（可人工饲养）
液滴饲喂法 （Feeding of measured drops）
对于舐吸式口器的昆虫不宜用夹毒叶片法， 如家蝇、果蝇、蜜蜂等昆虫喜欢食糖液，可将一 定量的杀虫剂加入到糖液中，用微量注射器形成 一定大小的液滴（0.001~0.01ml），直接饲喂昆 虫。
口腔注射法
一般适用个体较大的咀嚼式昆虫，如家蚕， 鳞翅目幼虫等，处理时，将药剂溶解后用微 量注射器或手细管点滴定量的药液注入试虫 口器中，昆虫吞食药液后，转入放有新鲜饲 料的容器中培养观察。这种方法由于从口腔 注入药液时易刺破口腔内软组织，技术难以 掌握。因此，应用较少。
某些药剂有内吸性如许多有机磷和氨基甲酸 酯类杀虫剂可以通过植株的根、茎、叶等部位 吸收到植株的内部，随着植物体液在体内的传 导，当害虫取食或刺吸植物时，药剂也随之进 入害虫的体内并将其杀死。
内吸杀虫剂毒力的测定方法分为直接测定 法和间接测定法2种。直接法包括茎或叶的局 部涂药、根际施药及种子处理等。间接法是 用处理后的植物，取其叶片研磨成为水剂， 加在水中，测定对水生昆虫的毒力。
浸液法
对于水生昆虫（蚊幼虫、螨类和蚜虫） 将药剂配成5~7个不同浓度有药液，摘取有一 定数量蚜虫的豆苗叶片，在不同药液中浸 3~5s，取出后，用吸水纸吸去多余的药液， 统计叶片上的蚜虫数量，对照用清水处理。 保湿24h，检查蚜虫的死亡数，计算死亡率及 校正死亡率，求出LC50。
内吸作用（Systemic action）的试验方法
第二章 杀虫剂生物测定技术
标准试虫 杀虫剂生物测定方法 毒力的表示方法 杀螨剂生物测定方法 杀虫剂田间药效试验
一、标准试虫
标准试虫是指数种被普遍采用的具有一定 代表性和经济意义及耐药能力较稳定而均匀的 昆虫群体。标准试虫的大量供应与质量均匀是 影响生物测定结果正确、稳定与可靠的最基本 因子，同时也是保证顺利地开展和完成生物测 定最基本的条件之一。
滴药量(µl)/试虫平均体重(g)X100
LD50的计算方法
作图法 Excel法 最小2乘法
例：用点滴法测定辛硫磷对玉米螟5龄幼 虫的毒力，试虫平均体重为0.046g/头，每 头试虫点滴0.8μl药剂丙酮液，48h检查试 虫死亡率，结果如表1-1。试计算辛硫磷对 玉米螟5龄幼虫的LD50。
用微量点样器在供试昆虫的前胸背板上点一定体积 的药量，24~48h后检查死亡虫数。统计死亡率，计算 LD50。
LD50（LC50）的计算
死亡率（%）＝死虫数/供试虫数X100% 校正死亡率（%）＝处理组死亡率－对照组死亡
度/100－对照组死亡率X100 单位体重受药量（µg/g）＝处理浓度（ppm）X点
根据取食面积、单位面积上的着药量（µg/g）， 根据单位体重受药量，由小至大顺序排列，由于 在取食量较小时试虫无死亡；随着取食量加大， 出现死、活均有出现的剂量范围；再加大取食量， 试虫全部死亡。这三种表现自然分成三组：（1） 生存组（2）生死组（3）死亡组。如实验中三组 数值均出现，则说明实验成功，如缺其中一组， 应重做。生存组和死亡组是划分生死组（中间组） 界线的。
将中间组死虫的每项单位体重药量累加， 除以总死虫数得A；中间组活虫的每项单位体 重相加除以活虫数得B。将A＋B除2即得致死中 量（µg/g），计算公式为
致死中量（LD50）＝（A＋B）/2
触杀毒力结果检查
供试药剂设计5~6个浓度梯度，每个浓度为一个处理， 每个处理40~60头，重复4~6次，每个重复10头。
（4）还有三化螟、棉铃虫、地老虎农业 害虫等。
（5）卫生害虫（如蚊、蝇类） （6）仓库害虫（米象、赤拟谷盗等） （7）刺吸性害虫（蚜螨类）
供试昆虫的要求
（1）在分类上或经济上有一定的代表性的不同 种类的昆虫；
（2）对药物敏感性符合要求； （3）容易饲养，能终年提供试材，使测定工作
不受地区或季节的限制； （4）在试验中便于控制操作。
触杀作用（contact action）测定方法
点滴法 药膜法或残膜法 浸液法
点滴法
室内定量测定触杀毒力最常用的方法。在测定 触杀毒力时，应尽量避免药剂从口器或气孔进入虫 体。直接将药液点滴到昆虫的某一部位。多为幼虫 的前胸背板，溶剂迅速挥发，药剂在体壁上形成药 膜而侵入体内。
药膜法或残膜法
用喷雾法及喷粉法将药剂定量地分布于一 定表面上，如滤纸、玻璃容器内壁及植物叶片 等而形成一层均匀的药膜。使昆虫在药膜上接 触一定时间（4~24h），检查击倒率或死亡率。 求出药剂对试虫的毒力。
毒力的表示方法及计算
致死中量（LD50：Median lethal dose）或致死 中浓度（LC50：Median lethal concentration）： 药剂杀死某种生物群体50％所需的剂量 （LD50）或浓度（LC50）。
结果检查与LD50计算
胃毒作用 触杀作用
以夹毒叶片法为例
昆虫取食后放在干净容器中，加 入新鲜的植物叶片，在24~72h后检 查死亡率。由于各昆虫的取食量不 同，因此必须单独观察记录。
二、杀虫剂生物测定方法
（1）胃毒作用 （2）触杀作用 （3）熏蒸作用 （4）内吸作用
胃毒作用（stomach action）的测定方法
ห้องสมุดไป่ตู้夹毒叶片法 液滴饲喂法 口腔注射法
夹毒叶片法（sandwich method）
叶片夹毒法适合于植食性、取食量大的 咀嚼式口器的昆虫，如鳞翅目幼虫、蝗虫 等。其基本原理是用2张叶片，中间均匀地 分布一层杀虫药剂，饲喂试虫，按吞食叶 片的面积计算吞食药量。
熏蒸作用（fumigation action）测定方法
定义 杀虫药剂以气体的方式通过害 虫的呼吸系统进入虫体，而起到毒杀的作 用称熏蒸作用。
目的 熏蒸作用毒力的测定的目的主 要有2个：一是用鉴别杀虫剂有无熏蒸作 用；二是测定熏蒸剂的杀虫毒力。
注意 要求在一个密闭的条件下进行， 且药剂不与试虫接触。