杀虫剂生物测定技术.pptx
杀虫剂生物测定技术
叶片浸液法 玻片浸液法 叶片残毒法
叶片浸液法
1 用盆栽豆苗（大豆苗）繁殖叶螨（如棉叶
螨），测定时用成螨，且发育时间（日龄）一
致。
2 将成螨转到无虫豆苗上，每株40头左右。
3 将待测药剂（乳油或可湿性粉剂）用水稀 释成系列浓度，每一浓度可配40~50ml，置 于小烧杯中。
4 将接上螨的豆苗浸入药液6s，取出后用吸 水纸吸去多余药液。处理时先用清水处理对 照 (CK)，再由低浓度至高浓度处理，每一浓 度重复4~5次。
浸玻片法示意图
编号＿＿＿ 浓度＿＿＿ 。。。 。。。 。。。 。。。 。。。 。。。
名称＿＿＿
日期＿＿＿
注：。表示为成螨
叶片残效法
此法适用于测定卵、若螨
及背部刚毛过长的雌成螨（不易用浸玻片法）。
1 在直径为9cm的培养皿内放入保温的叶片 2 在叶片上接20头雌成雌成螨，让其在叶片上产卵， 24h后移去成螨，保留螨卵。 3 将待测药剂用水稀释成5个系列浓度
第二章 杀虫剂生物测定技术
标准试虫 杀虫剂生物测定方法 毒力的表示方法
杀螨剂生物测定方法
杀虫剂田间药效试验
一、标准试虫
标准试虫是指数种被普遍采用的具有一定 代表性和经济意义及耐药能力较稳定而均匀的 昆虫群体。标准试虫的大量供应与质量均匀是 影响生物测定结果正确、稳定与可靠的最基本
因子，同时也是保证顺利地开展和完成生物测
4 将有螨卵的叶片在待测药液中浸5s，每一 药液浓度重复5次，对照用清水处理。
5 将培养皿保持在22℃，相对湿度95％恒温 箱内，每天观察记载卵的孵化数及若螨存活 数，直至对照组全部孵化成若螨。 6 计算药剂各浓度的杀卵或杀死若虫的效果。 求出药剂杀卵或若虫的毒方程及LC50。
第一章 生物测定
农药第一节第二节第三节第四节10棉铃虫Cotton bollworm玉米螟Corn borers22二化螟Chilo supperssalisStriped stem borer小菜蛾Diamondback moth棉蚜Cotton aphid棉红蜘蛛Two spotted spider mite烟粉虱27赤拟谷盗Red flour beetle米象Rice weevil家蝇Housefly黄粉虫(Tenebrio molitor）30冈比亚按蚊埃及伊蚊Aedes aegypti Yellow fever mosquito2012-12-0333德国小蠊German cockroach34果蝇Fruit flyRho86Fb ♂Rho86Fb ♀Rho86Fb♂Rho58A ♀Rho58A ♂86Fb♀86Fb♂86Fb♀86Fb♂58A♀58A♂58A♀58A♂一、杀虫药剂毒力测定步骤二、杀虫药剂毒力测定方法Potter spraying tower BURKARD 公司产POTTER 精密实验室喷雾塔浸液一定时间后取出晾干，或用吸水纸吸去多余药液；移入干净器皿中并提供饲料，置于处理前的饲养环境中；隔一定时间（5h，24h或48h）观察记载死亡情况，计算死2012-12-03522012-12-0353玻片浸渍法⑴贴双面胶：将双面胶带剪成2cm长，贴在载玻片的一5d龄雌成螨，并将其背部贴在胶带上（注意螨足、触须及口器不要被粘着），每片⑶饲虫：放于干净塑料盒（或大培养皿）内，并放入湿30℃温度下；⑷镜检：经4h后，在双目解剖镜下逐个检查，如有死亡个体应挑出弃去，重新粘上健康雌螨。
⑸浸药：将粘有雌螨的玻片一端浸入待测的不同浓度的药液中，并轻轻摇动玻片，浸5s后取出，用吸水纸吸去多余⑹再培养：放在塑料盒内，置于27℃条件下培养；⑺检查：24h后在双目解剖镜下检查死亡数及存活数。
⑴微量点滴器的种类微量点滴仪微量点滴仪微量点滴仪千分尺微量点滴器微量点滴仪Burkard Auto MicroapplicatorBurkard Hand MicroapplicatorDrop sizes from 0.1 to 1 µl and 1µl to 10 µl in ten equal stepsHamilton dispenser 2012-12-0375)图根系及叶部吸收及传导的装置a.根部内吸b.叶部内吸（四）杀虫药剂的熏蒸毒力测定图1-14广口瓶熏蒸器图1-13二重皿法图1-16三角瓶熏蒸法图1-15药纸熏蒸法昆虫特异性控制剂：一、昆虫拒食剂的活性测定一、昆虫拒食剂的活性测定（一）叶碟法一、昆虫拒食剂的活性测定（二）电讯号法图1-17电讯号法测定拒食活性示意图1.稻苗2.铝箔3.湿滤纸4.烧杯5.记录仪一、昆虫拒食剂的活性测定图1-18记录的取食电讯号A.未取食B.分泌唾液C.吸食三、抗蜕皮激素（几丁质合成抑制剂）的活性测定图1-20电极插入胡萝卜蝇触角位置IE.参考电极RE.记录电极EA.触角H.茎蝇头部图1-21家蝇的触角电位图⏹一、毒力表示方法⏹二、杀虫药剂毒力测定的统计分析第五节杀虫药剂药室内毒力测定结果的统计分析一、毒力表示方法（一）目标昆虫对杀虫药剂反应标准的确定（二）死亡率和校正死亡率死亡率（%）＝试虫死亡个数（包括自然死亡）试虫总个数×100校正死亡率（%）＝处理死亡率－对照死亡率1－对照死亡率×100Abbort（1975）校正死亡率公式，以去除自然死亡对结果的影响（二）死亡率和校正死亡率（三）杀虫药剂毒力的表示方法（三）杀虫药剂毒力的表示方法二、杀虫药剂毒力测定的统计分析50（一）统计分析原理50二、杀虫药剂毒力测定的统计分析二、杀虫药剂毒力测定的统计分析二、杀虫药剂毒力测定的统计分析二、杀虫药剂毒力测定的统计分析（三）致死中量及毒力回归式的计算方法二、杀虫药剂毒力测定的统计分析（三）致死中量及毒力回归式的计算方法毒力回归方程，也称剂量－反应曲线，斜率二、杀虫药剂毒力测定的统计分析（四）致死中量及毒力回归式的适合性检验二、杀虫药剂毒力测定的统计分析（四）致死中量及毒力回归式的适合性检验二、杀虫药剂毒力测定的统计分析（四）致死中量及毒力回归式的适合性检验二、杀虫药剂毒力测定的统计分析（四）致死中量及毒力回归式的适合性检验ProbitSAS-probitDPS (Data Process System)三、杀虫药剂混用的联合作用计算法三、杀虫药剂混用的联合作用计算法为什么杀虫药剂要混合应用？129三、杀虫药剂混用的联合作用计算法三、杀虫药剂混用的联合作用计算法⏹1、Sakai公式法三、杀虫药剂混用的联合作用计算法（二）联合作用计算方法（二）联合作用计算方法（二）联合作用计算方法（二）联合作用计算方法SakaiFinney四、抗药性监测及调查统计分析法2012-12-03141四、抗药性监测及调查统计分析法四、抗药性监测及调查统计分析法四、抗药性监测及调查统计分析法（四）抗性监测——抗性程度的调查及判定指标抗性倍数(R/S,RF)＝敏感品系的LD50或LC50抗性群体的LD50或LC50一般认为抗性倍数RF＞5为轻度抗药性；RF＞10为明显抗药性。
实验4 杀虫剂毒力测定ppt课件
• 无限取食法：饲料混药喂虫法、培养基混药法、土壤混药法 • 定量取食法：叶片夹毒法、 液点食喂法、口腔注射法
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毒饲料喂虫法
1. 将称好的药粉同谷物等饲料混合均匀，或将药剂溶于有机溶剂 中（如丙酮），再将一定量的药液同食物混匀，待溶剂挥发后 供试。
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死亡率-几率值表
.
农药室内生物测定统计分析的步骤：
1、剂量浓度转换成为对数使偏常态分布变成正态分布变成对称的 “S”曲线。
2、 死亡率转换成机率值 ：
（1） 首先：5-7个剂量——死亡率的点来确定“S”型曲线，可以画 出很多条适应这5~7点的曲线；（2）S曲线的特点是两端平缓，中 间一段陡峭，因此在死亡率靠近50%时，剂量对数变化不大，图为 剂量对数—死亡率机率指表。写成Y = bx + a的直线，从机率值为5处 做一条与横坐标平行的直线与回归线相交的对数值，查反对数，即 为致死中量。
• 立即将喷过药的棉铃虫放在干净培养皿中，喂以人工饲料饲养， 于2、24、48小时后记录棉铃虫死亡情况。
.
胃毒毒力测定
• 胃毒毒力测定指通过试虫吞食带药食料，引起消化道中毒致死的 反应，以测定胃毒毒力杀虫剂生物测定方法。
• 杀虫剂对昆虫的胃毒毒力测定方法因靶标昆虫的种类和杀虫剂的 剂型不同而有所不同。
实验四
杀虫剂毒力测定
吴顺凡
农药科学系 杀虫剂毒理与害虫抗药性监测课题组
邮箱：wusf@；办公室：理科楼B828
.
2014-4-18
基本概念
• 杀虫剂的生物测定：是度量杀虫剂对昆虫及螨类产生效应大小 的农药生物测定方法。广义的说，就是利用生物（昆虫、螨） 对杀虫剂的反应来鉴别某一种农药或化合物的生物活性的一种 基本方法;
农药生物测定杀虫剂生物测定方法介绍
• 3.3.2.5注意控制正常的环境条件
• 3.3.2.6点滴处理后保持时间：大多为48小时，少数为24小 时或72小时，一般以正常条件下没有生理反应为死亡。
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• 3.4药膜接触法：（局部主要是足部）
• 对强大接触毒性的农药以及爬行昆虫，可以用这种方法测 定，特别是用储粮保护及测定仓库害虫毒力时，主要采用 药膜法。
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• 其具体操作步骤： • Ⅰ制夹毒叶片（直径0.4-0.8cm） • Ⅱ 将待测目标昆虫称重编号（饥饿3-12小时） • Ⅲ接入培养皿中饲喂（一般是让昆虫将叶片取食完，
取食的培养条件一定要进行保湿）
• Ⅳ试虫重新饲喂培养（48小时后检查结果） • Ⅴ根据生死反应计算LD50或LC50。（每一个昆虫都
• ④种子内吸法 药剂浸种法（药液量是种子量的两倍）或拌种法而使 药剂附着在种子上，将之插入土中。随种子吸收水分而吸收药剂，待 幼苗长出真叶后，在其上接虫或采回叶片饲喂昆虫，以测定药剂的内 吸杀虫作用。
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• 7.拒食活性的生物测定
• 选择性取食试验和非选择性取食试验
没有 加药
加有 药剂
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2.2定量取食 法
• 基本原理是使供试目标昆虫按预定杀虫剂的剂量取 食，或在供试目标昆虫取食后能准确地测定其含量。 主要方法有（经典的）：
• 2.2.1 叶片夹毒法（sandwich method） • 适用于植食性，取食量大的咀嚼式目标昆虫（粘虫、
蝗虫、玉米螟、菜青虫等）。
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• 吞食药量（μg/g）=[吞食面积mm2 ×每mm2药量（μg)]/昆虫体重（g/头） • 或吞食药量（μg/g）=药液浓度（μg/ml）×滴加量μl×10-3 )/昆虫体重（g/头）
杀虫剂PPT课件
3
第一节 杀虫剂的作用方式
二、触杀作用（从体壁进入） 药剂与昆虫体壁接触后，穿透体壁到达作用部
位，使昆虫中毒的作用方式。 具有触杀作用的杀虫剂称为触杀剂。 影响触杀作用的因素主要是昆虫体壁的构造与
杀虫剂的理化性质。 杀虫剂的触杀毒力一般用点滴法或喷雾法测定 毛细管微量点滴器 Potter喷雾塔
（鞣化蛋白）、内表皮（几丁质和蛋白质） 昆虫的表皮是油/水两相结构。
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一、杀虫剂对体壁的穿透作用
表皮
血腔
血液循环 神经系统 气管系统 微气管 神经系统
表皮蜡层
气管系统
微气管
神经系统
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影响杀虫剂对体壁穿透的因素
1、杀虫剂的理化性质 （1）杀虫剂分配系数（P）
P=杀虫剂在油相的量/杀虫剂在水相的量 P值可反映出一个化合物 脂溶性的大小。 P值越大，脂溶性越强
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一、杀虫剂对体壁的穿透作用
大多数杀虫剂都是触杀剂。触杀剂要进入昆虫 体内，首先面临的问题就是怎样穿透体壁。
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一、杀虫剂对体壁的穿透作用
体壁：表皮层、皮细胞层和底膜 表皮层：上表皮、原表皮 上表皮（无几丁质） ：护蜡层（类脂）、蜡层
（蜡质）、角质精层（ 鞣化蛋白和类脂） 原表皮（几丁质蛋白质复合物）：外表皮
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影响杀虫剂对体壁穿透的因素
根据化学的相似相溶原理，杀虫剂的脂溶性 大，穿透上表皮的能力就强，但在穿透上表皮后， 则需要有一定的水溶性才能穿透原表皮。因此， 一个良好的触杀剂要具有一个适中的分配系数。 亲水性太强，不能溶于表皮蜡层，不能穿透表皮， 触杀作用小，如杀虫双。脂溶性太强，药剂就会 全部被保留在上表皮中，不能穿透原表皮。
农药生物测定杀虫剂生物测定方法介绍
张永强
西南大学植物保护学院
第三节 杀虫剂室内生物测定的主要方法
1.杀虫剂毒杀作用的方式
根据杀虫剂进入虫体的部位及途径的不同,杀 虫剂毒杀作用的方式可分为
胃毒 拒食 忌避 抑制生长发育 不育 内吸 内吸杀虫作用：凡是可以通过植物根茎叶以及种子等部位渗入植物内部组织， 随着植物体液传导植株，不妨碍植物的生长发育，而对害虫具有很高毒效的 化学物质，称为内吸杀虫剂。昆虫由于受内吸杀虫剂的毒杀作用而致死亡的 2013-7-20 2 过程，称之为内吸杀虫作用。 触杀
2013-7-20
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• 7.拒食活性的生物测定
• 选择性取食试验和非选择性取食试验
没有 加药
加有 药剂
都加有药剂
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选择性拒食试验
非选择性拒食试验
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• 8.微生物杀虫剂的生物测定
• 关键是创造一个杀虫剂与供试生物接触的平台。如真菌类杀虫剂对蚜 虫的毒力测定。
• 采用“孢子浴”(spore shower)方法,对若蚜进行接种。
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• 2.2.2改进夹毒叶片法： • 是把药液的浓度数量增加，用微量注射器注射或点滴到叶 片上，仅把圆叶片取食完毕的试虫作有效试虫，因此，每次测 定时应增加试虫数量。致死中量的计算方法同上。 • 另外胃毒作用的测定还有液滴饲喂法和口腔注射法等，但都 比较麻烦，不常采用。 • 重要的，而且非常实用的方法是改进夹毒叶片法，效果很好 • 另外还有离体叶片法，24孔板法等
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• 3.3.2.4点滴方法：
•
先将试虫稳定，然后快速点滴 ，吸取药液--不要让玻璃 管或橡胶管进入药液中， 轻轻点滴，刚好接触，不要接触 后再点滴，不要用力太猛，不要不接触就点滴。 对于活动性强的昆虫，可先冷冻或用CO2麻醉后再点滴处 理。
杀虫剂生物测定技术
杀虫剂生物测定技术摘要：杀虫剂的生物测定是利用昆虫、螨类对杀虫剂的反应，来鉴别某种农药或化合物的生物活性。
是测定农药对昆虫、螨类毒力与药效的一种基本方法。
它涉及靶标生物、测试物质(药剂)、反应症状及强度、测试环境条件等多方面的因素。
一个好的生物测定技术或方法应具备易于操作、结果反应灵敏、重现性好、且使用物质的剂量与反应之间有良好的相关性。
关键词：杀虫剂测定农药生物测定技术随着农药科学及其农药工业的迅速发展，农药生物测定作为新农药创制和合理科学使用农药以及农药药理学、毒理学及环境毒理学等研究的重要手段，得到了极大的丰富和发展。
杀虫剂的生物测定是利用昆虫、螨类对杀虫剂的反应，来鉴别某种农药或化合物的生物活性。
是测定农药对昆虫、螨类毒力与药效的一种基本方法。
它涉及靶标生物、测试物质(药剂)、反应症状及强度、测试环境条件等多方面的因素。
一个好的生物测定技术或方法应具备易于操作、结果反应灵敏、重现性好、且使用物质的剂量与反应之间有良好的相关性[1、2]。
1、杀虫剂生物测定的基本原理和方法在杀虫剂生物测定研究中，靶标生物的种类、发育阶段和生理状态等对农药的毒力或药效影响很大；药剂本身的理化特性、加工剂型、助剂种类与含量等也影响药效；而测试环境条件对靶标生物以及靶标生物对药剂的反应程度也存在根大的影响。
环境条件、供试药剂、靶标生物三者之间相互作用，相互影响。
所以，在进行杀虫剂生物测定试验时，必须严格控制各种影响因子，以确保试验结果的可靠性，可比性以及重现性。
在设计和进行杀虫剂生物测定试验研究时，必须掌握和了解以下基本原则[3]：1.1标准化靶标试材的选择及繁育不同靶标生物对药剂的反应各不相同，原则上任何生物体或其活体器官、组织、细胞等均可以作为生测靶标选择或用于测试。
在杀虫剂生物测定研究中，靶标生物的选择应具备以下几个条件：①在分类学上，经济上或地域上有一定代表性的昆虫。
②对药剂敏感性符合要求，且对药剂的反应以及程度便于定性、定量测定，且与剂量有良好的相关性。
第二章 杀虫剂生物
饲料混药喂虫法 培养基混药法 土壤混药法
• 2、定量取食法
液滴饲喂法； 口腔注射法； 叶片夹毒法； 机率值分析法（改进叶片夹毒法）
三、杀虫剂内吸作用毒力测定
•根部内吸法
•茎部内吸法 •种子内吸法 •叶部内吸法
四、 杀虫剂熏蒸作用毒力测定
熏蒸时，毒剂主要以气态从昆虫的气门进入气管， 再分布到全身的气管，然后到达神经作用部位。
• 药纸熏蒸法
• 三角瓶法
五 昆虫拒食活性的测定
• 昆虫拒食剂，简单地讲，就是可以干扰或抑 制昆虫取食行为的物质。
近年来，拒食作用机理的研究进展很快。昆虫的 嗜食性基本上是由位于昆虫的触角、下颚须、下 唇须上的感化器功能所决定的，感化器将食物的 特性转变成电信号传入中枢神经系统，从而决定 取食与否。拒食剂的作用可能正是干扰了这些感 化器的正常功能。
药膜法主要有以下几种方法：
• 滤纸药膜法 • 培养皿药膜法 • 玻璃容器药膜法
• 蜡纸药膜法
二、 杀虫剂胃毒作用毒力测定
• 昆虫在取食正常食物的同时将药剂摄入消化道， 经肠壁细胞吸收进入血液，随血液循环到达作 用部位而使昆虫中毒。它利用昆虫的贪食性， 因此要尽量避免药剂与昆虫体壁接触而产生其 它毒杀作用。测定方法有
• 目前，国内外广泛采用的测定拒食活性的主 要方法有4种：叶碟法及改良叶碟法、体重 法、排泄物质法及电讯号法。
• 选择拒食活性：将处理叶碟和2张对 照叶碟交错放入一个培养皿；在培养 皿中央放进一头饥饿的试虫。要求试 虫龄期一致、个体大小近似。。 • 非选择拒食活性：将处理叶碟放在一 个培养皿内，将对照叶碟放在另一培 养皿内。在培养皿中央放进一头饥饿 2~4h的试虫。
六 杀螨剂对螨类的毒力测定
常见杀虫剂的配比及有效浓度测定ppt
（二）有机磷类
合成于40年代，具有广谱、高效、低残 留、合成简单、价格便宜的特点，50年代 被推广应用于卫生害虫防制，是使用量最 大的一类杀虫剂。
主要品种：敌百虫、马拉硫磷、杀螟硫磷、 乙酰甲胺磷、倍硫磷、辛硫磷。
乙酰甲胺磷对蜚蠊具有良好的防制效果， 其使用量正逐年增多，主要用于杀灭蜚蠊 毒饵。
其中防治蚊虫产品约占卫生用农药的55%， 剂型超过了20多种。
卫生用农药各类剂型分布图
粉剂
杀虫有效成分与填料按一定比例混合， 方便，击倒力强，残效期长。
室内虱、蚤、蜚蠊、蚂蚁等卫生害虫。 常用1.5%马拉硫磷粉剂、0.5%溴氰菊
酯粉剂、1%残杀威粉剂。
可湿性粉剂
有效成分与填料、湿润剂及其它助剂 按比例混合，使用水稀释为悬浮液进 行喷洒。
便携式超低容量喷雾机：室内蚊虫速 杀，以及室外车辆进不去地方的成蚊 速杀，是车载超低容量喷雾机的补充。
烟雾机穿透力强，适合大型仓储、建 筑、密闭空间和树林、竹林、灌木丛 等植物比较密集的地方蚊虫速杀。
超低容量喷雾杀虫剂的剂型
应选：水乳剂（EW）、乳油（EC） 或超低容量制剂（UL）进行喷雾。
防制室内外卫生害虫最常用的一种剂 型，主要用于滞留喷洒。
常用品种：奋斗呐、一闪净、凯素灵、 利箭、沙飞克、爱克宁、无敌粉、高 灭灵等。
胶悬剂
将杀虫有效成分与各种辅料配合，研磨 而呈悬浮状分散的可流动的胶状体剂型。
药效高、持效长、污染小。 适用场所：宾馆、饭店、居室、娱乐场
所、学校。
常用品种：拜虫杀（12.5%氟氯氰菊 酯）、克敌（2.8%溴氰菊酯）、奋斗呐 胶悬剂。
（四）拟除虫菊酯类
是近年来发展最迅速的一类杀虫剂，也是品种最 多的一类。
《农药生测杀虫剂》课件
作用效果
农药生测杀虫剂对不同种类的昆虫具有 不同的作用效果。
对于一些敏感的昆虫种类，低剂量的杀 虫剂即可产生致死效果；而对于一些抗 药性较强的昆虫种类，需要加大剂量或 采用复配药剂才能达到理想的防治效果
。
此外，农药生测杀虫剂的作用效果还受 到环境因素的影响，如温度、湿度、光 照等。在适宜的环境条件下，杀虫剂的
特性
具有高效、低毒、低残留等特点 ，对环境友好，对人类安全。
农药生测杀虫剂的种类ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ分类
种类
根据作用机理和成分，农药生测杀虫 剂可分为生物源农药、化学合成农药 等。
分类
按照防治对象和用途，可分为杀虫剂 、杀菌剂、除草剂等。
农药生测杀虫剂的发展历程
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起源
农药生测杀虫剂的起源可 以追溯到古代，人们使用 天然的植物和矿物作为农 药。
人体健康影响
研究农药生测杀虫剂对人体健 康的潜在影响，如神经毒性、
免疫毒性和生殖毒性等。
环境影响评价
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土壤污染
评估农药生测杀虫剂在土壤中 的残留和降解情况，以及对土
壤微生物和植物的影响。
水体污染
研究农药生测杀虫剂在水体中 的残留和迁移情况，以及对水
生生物的影响。
大气污染
评估农药生测杀虫剂在大气中 的挥发和迁移情况，以及对人
水生害虫防治
水生害虫是指那些在水域环境中发生的害虫，如孑孓、水蜈蚣等。
农药生测杀虫剂可以有效控制水生害虫的种群数量，防止水生害虫对水域生态环境的破坏和 对人类健康的影响。
杀虫剂室内生物测定PPT课件
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毒力测定的仪器
1. 喷粉器 3）转盘沉淀喷粉器：原理同上。
两个改进（1）在喷洒接受粉剂的 表面上，加一玻璃板；喷粉之后， 粉剂开始降落时，不是立即落在被 处理物件上，而是落在玻璃板上。 由于先沉淀的粉粒都是比较重大的 颗粒，因而在沉降一定时间后(1— 2分钟)，将玻璃板抽出，使细小均 匀而后来沉降下来的粉粒落在被处 理的物件上。(2)喷粉桌的中央作 为转盘，可以徐徐旋转(每分钟812转)，这样可以校正了喷出不完 全垂直的不均匀情况。
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二、影响杀虫剂毒力测定的因素
• 2-3、昆虫的生理因素 • 越冬虫：耐药性较高 • 体内脂肪含量影响敏感性 • 新陈代谢率越高，呼吸率越高，对杀
虫剂的敏感性越大。
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二、影响杀虫剂毒力测定的因素
• 2-4、昆虫的种群异质性 • A、自然耐药力 • B、健壮耐药力 • C、杀虫剂的抗药性 • 在毒力测定中，应选择异质性小的种
• 鳞翅目幼虫，一般三龄以上，饥饿4~8小时，选取50头，电子天平称重，计算 平均体重。
• 2、药剂： • 原药，水溶性原药先用蒸馏水溶解，再用丙酮等有机溶剂稀释；水不溶性原药
选用丙酮（或乙醇，二甲基亚砜等）按等比（或等差）稀释成5-7个浓度。
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毒力测定的仪器 2. 喷雾器
1）轻便手提喷塔：
由龚坤元等（1962）设计的，
是由卵形玻璃喷头和喷塔两
部分组成。
卵形玻璃喷头，是喷雾设备的主
要部分，也是喷雾质量好坏
的关键，由颈、身腔、水管、
卵形玻璃喷头
气管、柄组成。 喷塔：高40cm，直径22cm。
第一章 生物测定
影响熏蒸剂在空气中的分布与性质，湿度越低，死亡率越高。
3、光照 光照一般影响不大，但可促进某些昆虫活动，增加新陈代谢 及能量消耗，因而增强杀虫药剂的毒力。 光活性杀虫药剂：如光学活性拟除虫菊酯、植物活性毒素只有在光
照条件下才有作用。
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第一节
（二）环境因素
杀虫药剂生物测定的基本概念
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第一节
（二）环境因素
杀虫药剂生物测定的基本概念
二、影响杀虫药剂生物测定的因素
5、虫口密度和容器 根据不同昆虫种类，具体确定。 容器：大小、密闭程度
控制措施：尽可能地相同的环境条件下进行同一系列的 生物测定。
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第一节
杀虫药剂生物测定的基本概念
二、影响杀虫药剂生物测定的因素 （三）生物测定技术方面
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1、直接施药法
1.1 喷雾法
原理：
将目标昆虫置于液体喷布器底部，将定量的药液均
匀喷撒到目标昆虫上，待药液稍干后，再将目标昆虫移
入处理前的生长环境中恢复l~2h后，放入无药的新鲜饲
料饲养，间隔一定时间（24h或48h）后记录各浓度下
目标昆虫的死亡率。
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2015/8/20
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二化螟 Chilo supperssalis
Striped stem borer
2015/8/20
22
小菜蛾 Diamondback moth
2015/8/20 23
棉蚜
2015/8/20
Cotton aphid
24
2015/8/20
棉红蜘蛛Two spotted spider mite
《杀虫剂分析》PPT课件_OK
Br
O CN O
O
=
O
Br
氰菊酯(敌200杀4年秋死20）04年秋 丁)
O CN
Cl 第五张 戊合成菊药毒酯物 （速灭杀 ‹#›
拟除虫菊酯类的理化性状
• 纯品多为白色或无色结晶，有一定熔点，少数为粘稠液体，如氰戊菊酯、氯氰菊酯； 工业品多为黄色至棕色的油状液体。
• 极性相对较小，可溶于乙醇、丙酮、醋酸乙酯、氯仿、苯等常用溶剂，微溶或不溶于 水。
敌抗磷乳剂
30%敌百虫、20%马拉硫磷
久敌磷粉剂
3%敌百虫、1%久效磷
812复合乳油
8%久效磷、32%甲拌磷
叶胺磷乳剂
甲胺磷、异丙威
氧乐氰菊乳油
18%氧乐果、2%氰戊菊酯
溴马乳油
0.25%溴氰菊酯、36%马拉硫磷
菊杀乳油
6%氰戊菊酯、14%杀螟硫磷
对辛氯乳油
对硫磷、辛硫磷、氯氰菊酯
甲辛丹乳油
甲基对硫磷、辛硫磷、硫丹
检时最好同时提取相关农药品种作对照。
2004年秋2004年秋
第五张 合成药毒物
‹#›
杀虫药的检验
方法
体外检材预试
鉴别和确证
化学反应
色谱和色/质连用
2004年秋2004年秋
第五张 合成药毒物
‹#›
常见杀虫药种类
种类 有机磷酸酯类 氨基甲酸酯类 拟除虫菊酯类 其它
2004年秋2004年秋
第五张 合成药毒物
2004年秋2004年秋
第五张 合成药毒物
‹#›
有机酯类杀虫药提取液的浓缩
• K.D.浓缩器
• 有些挥发性较大，回 流可减少毒物损失。
• 抽气可增大气体流通 量，降低浓缩温度， 加快浓缩速度，缩短 浓缩时间。
杀虫剂生物测定技术PPT课件
4 将有螨卵的叶片在待测药液中浸5s，每一 药液浓度重复5次，对照用清水处理。
5 将培养皿保持在22℃，相对湿度95％恒温 箱内，每天观察记载卵的孵化数及若螨存活 数，直至对照组全部孵化成若螨。
6 计算药剂各浓度的杀卵或杀死若虫的效果。 求出药剂杀卵或若虫的毒方程及LC50。
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液滴饲喂法 （Feeding of measured drops）
对于舐吸式口器的昆虫不宜用夹毒叶片法， 如家蝇、果蝇、蜜蜂等昆虫喜欢食糖液，可将一 定量的杀虫剂加入到糖液中，用微量注射器形成 一定大小的液滴（0.001~0.01ml），直接饲喂昆 虫。
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口腔注射法
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注意事项
（1）死亡率的校正：一般情况，若有 对照死亡，需要校正，若对照死亡超过 20%，应重做；如对照死亡率小于5%时， 也可不必校正。 （2）死亡率的范围：一般，至少有4个 浓度处理试虫的死亡率应在10－90%。 这样计算得到的LD50更可靠。 （3）相关系数R：一般应在0.9以上。
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熏蒸作用（fumigation action）测定方法
定义 杀虫药剂以气体的方式通过害 虫的呼吸系统进入虫体，而起到毒杀的作 用称熏蒸作用。
目的 熏蒸作用毒力的测定的目的主 要有2个：一是用鉴别杀虫剂有无熏蒸作 用；二是测定熏蒸剂的杀虫毒力。
注意 要求在一个密闭的条件下进行， 且药剂不与试虫接触。
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毒力的表示方法及计算
致死中量（LD50：Median lethal dose）或致死 中浓度（LC50：Median lethal concentration）： 药剂杀死某种生物群体50％所需的剂量 （LD50）或浓度（LC50）。
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毒力的表示方法及计算
致死中量（LD50：Median lethal dose）或致死 中浓度（LC50：Median lethal concentration）： 药剂杀死某种生物群体50％所需的剂量 （LD50）或浓度（LC50）。
结果检查与LD50计算
胃毒作用 触杀作用
以夹毒叶片法为例
昆虫取食后放在干净容器中，加 入新鲜的植物叶片，在24~72h后检 查死亡率。由于各昆虫的取食量不 同，因此必须单独观察记录。
液滴饲喂法 （Feeding of measured drops）
对于舐吸式口器的昆虫不宜用夹毒叶片法， 如家蝇、果蝇、蜜蜂等昆虫喜欢食糖液，可将一 定量的杀虫剂加入到糖液中，用微量注射器形成 一定大小的液滴（0.001~0.01ml），直接饲喂昆 虫。
口腔注射法
一般适用个体较大的咀嚼式昆虫，如家蚕， 鳞翅目幼虫等，处理时，将药剂溶解后用微 量注射器或手细管点滴定量的药液注入试虫 口器中，昆虫吞食药液后，转入放有新鲜饲 料的容器中培养观察。这种方法由于从口腔 注入药液时易刺破口腔内软组织，技术难以 掌握。因此，应用较少。
熏蒸作用（fumigation action）测定方法
定义 杀虫药剂以气体的方式通过害 虫的呼吸系统进入虫体，而起到毒杀的作 用称熏蒸作用。
目的 熏蒸作用毒力的测定的目的主 要有2个：一是用鉴别杀虫剂有无熏蒸作 用；二是测定熏蒸剂的杀虫毒力。
注意 要求在一个密闭的条件下进行， 且药剂不与试虫接触。
某些药剂有内吸性如许多有机磷和氨基甲酸 酯类杀虫剂可以通过植株的根、茎、叶等部位 吸收到植株的内部，随着植物体液在体内的传 导，当害虫取食或刺吸植物时，药剂也随之进 入害虫的体内并将其杀死。
内吸杀虫剂毒力的测定方法分为直接测定 法和间接测定法2种。直接法包括茎或叶的局 部涂药、根际施药及种子处理等。间接法是 用处理后的植物，取其叶片研磨成为水剂， 加在水中，测定对水生昆虫的毒力。
常用的供试昆虫有：
（1）粘虫（Leucania separate Walker），代表 鳞翅目咀嚼式口器食叶性害虫。（可人工饲养） （2）玉米螟（Ostrinia nubilalis），代表为害杂 粮作物的钻蛀性害虫。（可人工饲养） （3）二化螟（Chilo suppressalis）,代表钻蛀性 水稻害虫。（可人工饲养）
滴药量(µl)/试虫平均体重(g Excel法 最小2乘法
例：用点滴法测定辛硫磷对玉米螟5龄幼 虫的毒力，试虫平均体重为0.046g/头，每 头试虫点滴0.8μl药剂丙酮液，48h检查试 虫死亡率，结果如表1-1。试计算辛硫磷对 玉米螟5龄幼虫的LD50。
用微量点样器在供试昆虫的前胸背板上点一定体积 的药量，24~48h后检查死亡虫数。统计死亡率，计算 LD50。
LD50（LC50）的计算
死亡率（%）＝死虫数/供试虫数X100% 校正死亡率（%）＝处理组死亡率－对照组死亡
度/100－对照组死亡率X100 单位体重受药量（µg/g）＝处理浓度（ppm）X点
第二章 杀虫剂生物测定技术
标准试虫 杀虫剂生物测定方法 毒力的表示方法 杀螨剂生物测定方法 杀虫剂田间药效试验
一、标准试虫
标准试虫是指数种被普遍采用的具有一定 代表性和经济意义及耐药能力较稳定而均匀的 昆虫群体。标准试虫的大量供应与质量均匀是 影响生物测定结果正确、稳定与可靠的最基本 因子，同时也是保证顺利地开展和完成生物测 定最基本的条件之一。
根据取食面积、单位面积上的着药量（µg/g）， 根据单位体重受药量，由小至大顺序排列，由于 在取食量较小时试虫无死亡；随着取食量加大， 出现死、活均有出现的剂量范围；再加大取食量， 试虫全部死亡。这三种表现自然分成三组：（1） 生存组（2）生死组（3）死亡组。如实验中三组 数值均出现，则说明实验成功，如缺其中一组， 应重做。生存组和死亡组是划分生死组（中间组） 界线的。
浸液法
对于水生昆虫（蚊幼虫、螨类和蚜虫） 将药剂配成5~7个不同浓度有药液，摘取有一 定数量蚜虫的豆苗叶片，在不同药液中浸 3~5s，取出后，用吸水纸吸去多余的药液， 统计叶片上的蚜虫数量，对照用清水处理。 保湿24h，检查蚜虫的死亡数，计算死亡率及 校正死亡率，求出LC50。
内吸作用（Systemic action）的试验方法
触杀作用（contact action）测定方法
点滴法 药膜法或残膜法 浸液法
点滴法
室内定量测定触杀毒力最常用的方法。在测定 触杀毒力时，应尽量避免药剂从口器或气孔进入虫 体。直接将药液点滴到昆虫的某一部位。多为幼虫 的前胸背板，溶剂迅速挥发，药剂在体壁上形成药 膜而侵入体内。
药膜法或残膜法
用喷雾法及喷粉法将药剂定量地分布于一 定表面上，如滤纸、玻璃容器内壁及植物叶片 等而形成一层均匀的药膜。使昆虫在药膜上接 触一定时间（4~24h），检查击倒率或死亡率。 求出药剂对试虫的毒力。
（4）还有三化螟、棉铃虫、地老虎农业 害虫等。
（5）卫生害虫（如蚊、蝇类） （6）仓库害虫（米象、赤拟谷盗等） （7）刺吸性害虫（蚜螨类）
供试昆虫的要求
（1）在分类上或经济上有一定的代表性的不同 种类的昆虫；
（2）对药物敏感性符合要求； （3）容易饲养，能终年提供试材，使测定工作
不受地区或季节的限制； （4）在试验中便于控制操作。
二、杀虫剂生物测定方法
（1）胃毒作用 （2）触杀作用 （3）熏蒸作用 （4）内吸作用
胃毒作用（stomach action）的测定方法
夹毒叶片法 液滴饲喂法 口腔注射法
夹毒叶片法（sandwich method）
叶片夹毒法适合于植食性、取食量大的 咀嚼式口器的昆虫，如鳞翅目幼虫、蝗虫 等。其基本原理是用2张叶片，中间均匀地 分布一层杀虫药剂，饲喂试虫，按吞食叶 片的面积计算吞食药量。
将中间组死虫的每项单位体重药量累加， 除以总死虫数得A；中间组活虫的每项单位体 重相加除以活虫数得B。将A＋B除2即得致死中 量（µg/g），计算公式为
致死中量（LD50）＝（A＋B）/2
触杀毒力结果检查
供试药剂设计5~6个浓度梯度，每个浓度为一个处理， 每个处理40~60头，重复4~6次，每个重复10头。