赤霉素(GA)的生物测定技术

一、水稻幼苗叶鞘伸长“点滴” 法
原理： 原理： • 赤霉素可以促进幼嫩植物节间伸长。 赤霉素可以促进幼嫩植物节间伸长。 • 在一定浓度范围内,叶鞘的伸长与赤霉 在一定浓度范围内, 素的浓度成正比。 素的浓度成正比。
具 体 步 骤
一、水稻幼苗叶鞘伸长“点滴”法 水稻幼苗叶鞘伸长“点滴”
第一歩 第一歩 水稻种子漂白、浸泡、水洗 黑暗发芽2d 黑暗发芽2d 芽长2 种子排在1%琼脂 芽长2mm种子排在1%琼脂 糖凝胶上恒温光照培养2d 糖凝胶上恒温光照培养2d
-13 3*10 mol/L -13
-12 3*10 mol/L
-12
-11 10 mol/L
-11
-12 3*10 mol/L
-12
-9 3*10 mol/L
-9
3*10-10mol/L
-10
第二节 赤霉素（GA）的生物测 定技术
水稻幼苗叶鞘伸长“点滴” 一、水稻幼苗叶鞘伸长“点滴”法 二、大麦胚乳试法 三、矮生玉米叶鞘法
二、大麦胚乳试法
大麦胚乳法测定赤霉素的标准曲线
三.矮生玉米叶鞘法
矮生玉米生长与GA3浓度的关系曲线
第二步
第
步
% 第一 •
芽
第
步
恒温光照培养3d, 恒温光照培养3d, 长
第二
法
一 、 水 稻 幼 苗 叶 鞘 伸 长 “点 滴 ”
a.将1μLGA3丙酮液滴于胚芽鞘与第1叶之间 b.实验终了时测第2叶叶鞘长度
一、水稻幼苗叶鞘伸长“点滴”法 水稻幼苗叶鞘伸长“点滴”
水稻第2叶叶鞘伸长与GA3浓度关系曲线
第二节 赤霉素（GA）的生物 测定计术
赤霉素促进结实
http://amuseum.cdstm.cn/AMuseum/agricul/2_2_14_zhiwyycms.html
赤霉素促进器官伸长
http://amuseum.cdstm.cn/AMuseum/agricul/2_2_14_zhiwyycms.html
赤霉素能延缓花的瓶插寿命
http://flower.intopet.com/122277_2.shtml
赤霉素促进开花
http://www.cnhm.net/news/detail.cfm?id=22307
第二节 赤霉素（GA）的生物测定 计术
赤霉素的生理效应：
• 促进器官伸长（节间、胚轴、禾谷类的芽 鞘wenku.baidu.com叶片） • 打破休眠、促进发芽、坐果、开花、单性 结实
二、大麦胚乳试法
实验步骤： 实验步骤：
1.溶液配制 1.溶液配制 2.选籽粒饱满大小一致的大麦种子50粒 选籽粒饱满大小一致的大麦种子50 2.选籽粒饱满大小一致的大麦种子50粒 3.淀粉酶活力测定 3.淀粉酶活力测定
二、大麦胚乳试法 优点：
① α-淀粉酶的释放是和赤霉素原初作用位点 淀粉酶的释放是和赤霉素原初作用位点 关系较为密切的步骤之一 ②α-淀粉酶的释放不受溶剂中杂质的影响， 淀粉酶的释放不受溶剂中杂质的影响， 淀粉酶的释放不受溶剂中杂质的影响 而且对赤霉素是极其专一的 ③α-淀粉酶的释放不受植物天然提取物中其 淀粉酶的释放不受植物天然提取物中其 他非赤霉素类物质的影响
赤霉素的生物测定法
方法 水稻幼苗叶鞘生长“点滴法” 水稻幼苗叶鞘生长“点滴法” 矮生豌豆下胚轴试法 矮生玉米叶鞘试法 黄瓜下胚轴法 莴苣下胚轴试法 大麦胚乳试法 苋红素抑制法 指标 叶鞘长度 下胚轴长度 第一， 第一，第二叶鞘法 下胚轴长度 下胚轴长度 还原糖释放或-淀粉酶活性增加 还原糖释放或色素减少 GA3 最低检测浓度
一、水稻幼苗叶鞘伸长“点滴”法 水稻幼苗叶鞘伸长“点滴”
• 优点 优点：
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• •
需时短 需样品量少 灵敏度高
二、大麦胚乳试法
• 原理： 原理： • 大麦种子吸水萌动后，胚中产生的赤 大麦种子吸水萌动后， 霉素激发胚乳最外的糊粉层中α 霉素激发胚乳最外的糊粉层中α-淀粉 酶活性 • 注意： 注意： • 无胚的大麦半粒种子不能产生赤霉素， 无胚的大麦半粒种子不能产生赤霉素， 因此没有α 淀粉酶活性。 因此没有α-淀粉酶活性。它被成功应 用于赤霉素类物质的测定