兽药残留免疫检测技术应用进展
农兽药多残留免疫分析检测方法研究进展
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兽药残留检测技术应用现状及发展方向
2021年第11期现阶段兽药残留检测技术已经成为控制药物残留的主要手段及途径，是畜禽产品质量安全的基础保障。
针对兽药残留的检测，常见的手段一般为快速筛查，这种初筛的方式要求容易使用、流通量较高、运行成本较低及能在短时间内获得结果。
通过兽药残留检测技术的应用，能最大程度上检测出动物产品中的残留兽药，规避和预防危害消费者身体健康甚至生命安全的一系列中毒、过敏等反应的出现。
1兽药残留检测技术的应用现状在畜禽养殖过程中较为常见的兽药包括杀菌剂、杀虫剂、镇静剂、β-受体激动剂、雌性激素、肾上腺受体激动剂、糖皮质激素及生长促进剂等。
而兽用药按照化学结构有包括大环内酯类、喹诺酮类、四环素类、氯霉素类、氨基糖苷类等不同类型。
虽然兽药能预防治疗疾病、改善畜禽产品的品质，提高畜禽产品的生长效率，但多数养殖户用药缺乏合理性、对安全用药知识的认知不够，在经济效益的驱动下滥用药物、不按规定剂量用药甚至添加违禁药物等现象时有发生，导致兽药残留在畜禽产品中，影响消费者的身体健康，出现一系列食品安全问题。
因此，实施兽药残留检测技术显得尤为重要。
2兽药残留检测技术的发展方向以前高效液相色谱检测技术是检测食品中残留兽药的主要手段，我国关于高效液相色谱-紫外检测技术的应用也呈现多元化的发展趋势，能结合不同的前处理净化方式对食品中的残留兽药进行检测。
其中二极管阵列检测器是比较常见的，由于其成本低、灵敏度较高并具有较好的选择性等特点，所以其适用范围较广，使用人数较多。
但该法主要能检测出磺胺类及喹诺酮类兽药的残留，对可见光吸收的兽药检测缺乏敏感度。
受大多数复杂基质因素的影响，极易导致假阳性结果。
高效液相色谱-荧光检测技术比紫外检测技术具有更高的灵敏度及选择性。
由于喹诺酮类具有一定的荧光反应，所以本法经常被用于检测食物中残留的喹诺酮类药物，其他兽药则需要添加相应的衍生环节，具有较为复杂的检测过程。
对大部分兽药来说，本身不具备荧光反应，如果通过荧光检测器进行检测只有增加了衍生反应后才能检测出来，操作流程过于复杂，限制了检测的应用和发展。
食品中农兽药残留快速检测技术研究进展
食品中农兽药残留快速检测技术研究进展首先，基于生物传感的快速检测技术在食品中农兽药残留的检测中发挥了重要作用。
生物传感技术利用生物体如细胞、酶等具有高度特异性和敏感性的生物分子作为传感器材料，可以实现对农兽药残留的高效检测。
例如，利用抗体或核酸等生物材料构建的免疫传感器和核酸传感器可以实现对农兽药残留物的选择性和高灵敏度检测。
其次，化学传感技术也是食品中农兽药残留快速检测的重要手段之一、化学传感技术主要包括色谱、质谱、电化学和光学等方法。
其中，色谱和质谱技术由于其高分离能力和灵敏度，被广泛应用于农兽药残留的分析检测。
电化学方法基于农兽药残留物与电极表面的电化学反应特性，通过测量电流、电势等电化学信号实现残留物的检测。
光学方法则利用农兽药残留物与特定光子材料之间的相互作用，通过监测光学信号的变化实现对农兽药残留物的检测。
此外，物理传感技术也有一定的应用前景。
物理传感技术主要包括表面增强拉曼光谱（SERS）和纳米技术等。
表面增强拉曼光谱技术通过在基底表面引入金属纳米颗粒，使分子的拉曼信号得到增强，实现对农兽药残留的高灵敏度检测。
纳米技术可以利用纳米颗粒的特殊性质，如表面增强效应、荧光效应等，实现对农兽药残留物的高灵敏度检测。
例如，利用金纳米颗粒的表面增强效应可以实现对一些农兽药残留物的快速定性和定量分析。
需要指出的是，目前食品中农兽药残留快速检测技术还存在一些挑战和问题，例如样品前处理的复杂性、检测灵敏度和特异性等方面。
因此，未来的研究方向还包括发展更加简便、高效、经济的样品前处理方法，提高检测灵敏度和特异性，提高检测速度和准确性等。
综上所述，食品中农兽药残留快速检测技术在食品安全监管中具有重要的应用前景。
基于生物传感、化学传感和物理传感等多种技术手段的不断发展，将为食品中农兽药残留的快速检测提供更加可靠、高效的方法。
兽药残留免疫检测技术应用进展
以及 Ｇ ＭＳ、 Ｃ ＭＳ等联 用技 术 的飞 速发 展大 大地 １ ６的 Ｉ ｓ Ｃ／ Ｌ ／ １ Ｃｏ 分别 为 ３ ｇ ｋ ２￣ ／ ｇ和 ｏ ３ ｇ ｋ 。其 检测 限 ３＞ ／ ｇ
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免疫 检测 技 术是 以抗原 与 抗 体 的特 异 性 、 可逆 性
１ 药物免疫检测技 术应 用进展
１１ ＿ 内酰胺 类 适用 于抗 菌 药物 的残 留测定 ， 不易 筛 选 到特 别 敏感 但 Ｒ ｓ 用 头孢 噻 呋 的水 解 产 物 去 呋 哺 羰 基 头孢 ｏｅ等
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文献标识码 ； Ａ
文章 编号 ：０ ７５ ３ （Ｏ ２ ０ —０ ５ １０ ０ ８ ２ Ｏ ） ２０ ２加４
并 ９ ７年诺 贝尔生 物 医 摘 要 ： 疫检 测技 术 （ 免 Ｉ ｍｍｕ ｏｓ ｙ ，Ａ ）是 学方 面 的重 大突破 ， 为 此荣 获 １ ７ ｎａｓ ｓＩ ｓ ａ 。由于放免 有 一定 的危 险性 ， 目前普遍 应 用于兽 利用抗原与抗体在体 外的特异性反应建立起来 学 奖 ］
动物源性食品中兽药多残留快速检测技术及精确质量数据库的建立
动物源性食品中兽药多残留快速检测技术及精确质量数据库的建立一、本文概述随着畜牧业的快速发展，兽药在动物源性食品生产中的应用日益广泛，兽药残留问题逐渐凸显，对食品安全和人体健康构成了潜在威胁。
建立一种快速、准确的兽药多残留检测技术，并构建精确的质量数据库，对于保障动物源性食品的安全性和提升兽药监管水平具有重要意义。
本文旨在探讨动物源性食品中兽药多残留快速检测技术的研究进展，并阐述精确质量数据库的建立方法与应用价值。
文章首先综述了目前国内外兽药多残留检测技术的现状和发展趋势，包括免疫分析法、色谱法、质谱法等多种检测方法的优缺点和适用范围。
在此基础上，文章重点介绍了几种新型的快速检测技术，如基于纳米材料的检测技术、生物传感器技术等，这些技术具有快速、灵敏、高通量等优点，为兽药多残留检测提供了新的思路和方法。
本文还详细阐述了精确质量数据库的建立过程，包括数据采集、数据处理、数据存储和数据挖掘等方面。
通过整合各种兽药残留数据，建立全面、准确、可靠的兽药残留数据库，为兽药监管和食品安全风险评估提供有力支持。
文章对兽药多残留快速检测技术和精确质量数据库的建立进行了展望，认为未来应加强技术创新和跨学科合作，推动兽药残留检测技术的进一步发展和完善，为保障动物源性食品的安全性和促进畜牧业的可持续发展做出更大贡献。
二、动物源性食品中兽药多残留问题的现状与挑战随着养殖业的快速发展，动物源性食品中兽药多残留问题逐渐凸显，成为全球性的食品安全难题。
兽药多残留不仅会对动物和人类健康产生直接危害，还会影响生态环境安全。
建立快速、准确、灵敏的兽药多残留检测技术及精确质量数据库至关重要。
目前，动物源性食品中兽药多残留问题的现状严峻。
一方面，养殖过程中为预防和治疗动物疾病，大量使用抗生素、激素等兽药，导致兽药残留问题日益严重。
另一方面，一些不法养殖者为了追求经济利益，滥用兽药，甚至使用违禁药物，进一步加剧了兽药多残留问题。
由于兽药种类繁多，不同药物之间的残留代谢规律复杂，也给兽药多残留检测带来了巨大挑战。
动物抗病毒药残留检测方法研究进展
动物抗病毒药残留检测方法研究进展随着现代畜牧业的发展和对动物生产的需求不断增长，动物抗病毒药的使用也越来越广泛。
然而，抗病毒药使用过量会对动物和人体健康造成严重威胁，因此对抗病毒药残留的检测变得愈发重要。
本文将对动物抗病毒药残留检测方法的研究进展进行综述。
一、高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法（HPLC）是目前应用最广泛的抗病毒药残留检测技术之一。
它利用高效液相色谱仪对样品中的药物成分进行分离和检测。
HPLC法检测的优点是高灵敏度、高精度、快速、有效。
然而，HPLC法对样品的前处理步骤要求非常严格，对装置的维护和保养也非常重要，否则容易出现误差。
气相色谱法（GC）也是一种常见的抗病毒药残留检测技术。
它利用气相色谱仪对样品中的有机成分进行分离和检测。
GC法的优点是灵敏度高、分辨率高、特异性强。
但是，它对温度、湿度等环境因素的影响较大，操作和维护过程也较为复杂。
三、质谱法（MS）质谱法（MS）是一种高分辨率、高精度的分析技术，可以对样品中的分子进行定量和鉴定。
将MS与色谱法结合起来，可以得到更加准确和可靠的分析结果。
同时，质谱法对样品的前处理步骤要求较低，适用于对样品量较少的检测。
四、免疫学检测法免疫学检测法是指利用抗体与抗原相互作用的原理，对样品中的目标物质进行检测。
免疫学检测法的优点是快速、简便、易于自动化，同时适用于大规模样品的检测。
目前，免疫学检测法已广泛应用于动物抗病毒药残留的检测。
综合来看，动物抗病毒药残留检测的技术越来越成熟，同时各种检测方法各有优缺点，因此在实际应用中要根据具体情况选择合适的检测方法。
在未来，随着科技的不断进步，相信会出现更加灵敏、准确、高效的检测技术。
免疫分析技术在兽药残留检测中的应用
72免疫分析技术在兽药残留检测中的应用宫秀杰(新疆兽药饲料监察所830063)摘要:食品中的抗生素、驱肠虫剂、类固醇等兽药残留物对人体健康造成危害。
本文利用免疫分析技术对化合物展开筛查,减少以往常规分析方法的取样需求量,提升兽药残留检测效果,维护人体健康。
关键词:免疫分析技术;兽药残留检测;胶体金层析法为提升动物生产量,大量化学合成物作为兽药,被用于动物疾病治疗和诊断,虽然大多数兽药没有强烈毒性,但残留物也会损害人体健康。
氯霉素、硝基呋喃类兽药带有致癌性,这种化合物已被禁止使用,通过免疫分析技术的应用,加强对兽药的残留检测,检测饲料和食品内兽药残留成分,从而保护人体与动物健康。
1免疫分析技术基本原理根据抗原抗体的特异性结合反应,免疫分析技术可以检测各类物质。
当前免疫分析技术已被用于化合物的检测,不仅价格便宜,还可高通量筛查,不需要使用高科技设备,能够直接用于兽药残留的现场检测。
常见的免疫分析技术主要有酶联免疫吸附分析法、胶体金免疫测定法、量子点荧光免疫分析法。
分析抗原发生结合反应,形成分析物—抗体复合物,随后通过示踪剂的标记与测定作用,这就是免疫分析法在兽药残留检测中的应用。
标记抗原与抗体能够提升免疫分析技术灵敏度,标记属于发光物,可以使发射性或荧光性的[1]。
2免疫分析技术在兽药残留检测中的应用2.1酶联免疫吸附分析法用于酶联免疫吸附分析法的测试,标记物主要有辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶和丙酮酸脱氢酶。
酶促反应会引发基质降解,产生有色生成物,利用分光光度计可以检测生成物。
有研究人员使用阳离子牛血清白蛋白的免疫原和氯丙嗪缀合,支撑了单克隆抗体,同时研发出对抗型酶联免疫吸附分析法,以此检测猪肝和鸡肝中是否带有氯丙嗪成分。
抗体灵敏度较高,监测数据稳定,IC50平均值可以达到0.73μg·L-1。
随后,研究人员制作出专门针对培氟沙星与加替沙星兽药残留成分的抗体,用来检测牛奶和鸡肝食品是否安全。
兽药残留免疫分析及其进展
第18卷第4期中 国 兽 医 学 报Vol.18,No.4 1998年7月Chinese Journal of Veter inary Science July1998兽药残留免疫分析及其进展李俊锁 (中国农业大学动物医学院,北京100094)钱传范 (中国农业大学应用化学系) 免疫分析是以抗原与抗体的特异性、可逆性结合反应为基础的分析技术。
免疫反应涉及抗原与抗体分子间的立体化学、电荷、氢键和偶极间的综合作用,因而具有常规理化分析技术无可比拟的选择性和很高的灵敏度,非常适用于复杂基质中痕量组分的分析,如动物组织中兽药残留的分离与检测。
Yelow等[1]于1959年创立的放射免疫测定法(RIA)被公认为有机痕量分析化学方面的重大突破[1],并为此荣获1977年诺贝尔生物医学奖。
尽管这种分析方法的免疫学和化学方面的理论基础早已[2,3]并在药物临床化学和生物医学中的应用获得巨大成功[4],但直到80年代才逐渐应用于兽药残留分析。
其主要原因是:(1)80年代以前气相色谱法(GC)已经广泛应用,可满足大多数兽药残留的测定;(2)近十几年来,兽药的种类和应用规模剧增,化学结构日益复杂,并日趋高效或低剂量化,特别是人们对长期摄入低水平兽药及其他化学污染物所致的各种慢性和远期效应的关注,以及国际间贸易等原因,使分析对象、样本数量和测定难度大大增加。
常规的理化分析方法,主要是样本前处理过程通常十分复杂,效率低,分析成本高,难以满足实际测定需求,迫切需要发展简便、快速和灵敏的分析技术,免疫分析无疑是最有发展和应用潜力的技术之一;(3)兽药残留的免疫分析是免疫学与分析化学相结合的一项技术,涉及免疫化学、分析化学和合成化学等学科,研究工作较复杂。
另外,残留分析不同于临床化学分析,如基质复杂性、待测物水平、分析目的及分析策略等。
90年代初,美国化学学会(ACS)出版了2本食品和环境中化学污染物免疫分析方面的论文 本文收到日期:1996-10-10集,标志着免疫分析技术作为一种分析手段正日趋成熟并为分析化学界接受[5,6]。
食品中农兽药残留检测新技术进展分析
食品中农兽药残留检测新技术进展分析发布时间：2021-09-01T03:43:07.037Z 来源：《科学与技术》2021年第29卷第4月第12期作者：王小红[导读] 农兽药在现阶段的农业生产中主要作用就是防治病虫草害的，可以有效提升王小红西藏山南市农产品质量安全检验检测中心 856000摘要：农兽药在现阶段的农业生产中主要作用就是防治病虫草害的，可以有效提升农作物产量。
但实际上，农兽药撒到农作物上之后，在消灭病虫害的同时也会残留极少的农药。
人们长时间摄食带有残留农药的农作物就会导致身体出现问题。
近几年，因为大部分的农户不注重正确、合理的使用农药，致使在粮谷、水果蔬菜以及茶叶等农作物上出现残留农药的现象比较常见，并且残留量严重超标，每年都在加速增加。
所以，相关技术人员必须要重视对食品中农兽药残留检测技术的研究，促进我国种植业健康稳定发展。
关键词：食品；农兽药；残留检测技术食品的安全对于人们的健康有着至关重要的影响，在检测果蔬类食品的过程中，农药残留是最主要的检测环节，所以在进行检测之前，将食品上的残留农药清理干净是提升食品安全的主要工作。
在当前的社会中经常由于农药残留处理不细致而致使食品中含有较多的农药残留，最后出现食品安全事故。
在农药中含有较多并且复杂的化学成分，所以相应的检测处理技术必须要有极高的精准度，进而确保可以全面的检测出食品中残留的农药，作者根据食品中农兽药残留检测展开相关的分析探究。
一、农兽药残留检测的重要性在当前的社会中，食品安全事故是比较常见的，对社会的秩序产生了非常严重的影响，同时食品安全问题也成为所有人重点关注的话题。
在人们的日常生活中，食品是必不可少的，食品的安全直接影响着人们的健康，所以我们必须要重视食品安全问题。
造成食品安全事故有很多的原因，当中最为主要的就是农兽药残留，这样是我国食品监管单位现阶段重点开展的工作。
在农业以及畜牧业生产活动中，大量使用农药会导致在食品中残留过多，人们长期食用这些了食品就会出现耐药性，时间一长就导致体内堆积大量农兽药毒素，严重威胁人们的生命安全。
关于兽药残留检测技术研究进展
X u m u s h o u y i近年人们对食品安全越来越重视，这也对食品检测工作提出了非常高的要求，尤其是兽药检测，在这样的背景下需积极应用各种高效检测技术，不断提升检测效果，因此才能为食品安全提供有力保障。
基于此，本文首简单阐述了兽药残留检测的重要性，随后分析了当前兽药残留检测技术的研究进展。
一、兽药残留检测的重要性近年我国出现了很多次和食品安全有关的事故，严重影响了人们的身体健康，同时也造成了极其恶劣的社会影响。
食品安全问题和很多因素有关，其中兽药残留是非常关键的一项，因此做好兽药残留检测是保障食品安全的有效手段。
近年我国家兽药残留检测方面有了非常显著的进展，极大提升了是要材料检测水平，主要体现在生物学检测和理化检测两方面，因此为了推动兽药残留检测的不断发展，还需要从这两方面出发展开分析。
二、兽药残留检测技术的研究进展1、生物学检测当前的生物学检测中主要应用的有免疫分析和生物学分析两种方法，接下来本文将分别对这两种方法进行分析。
（1）免疫分析检测法免疫分析检测法建立在抗原抗体特性以及可逆性结合反应的基础上，可以快速筛查食品中的兽药残留物质。
一般兽药都有着非常小的分子量，无法通过免疫原性对生物机体的免疫应答进行刺激，所以只能通过人工合成抗原的形式，检测生物体内的兽药含量，当前免疫分析检测法主要有以下几种。
①酶免疫检测法这种检测方法发展于上世纪70年代，可以利用酶对兽药进行标记，操作过程非常简单，通过这种方法可以准确检测出猪肾内氮哌醇、氮哌酮、乙酰丙嗪等药物的残留量，也可以对牛奶中四环素类药物的残留量进行精确判断。
目前这项技术早已商品化，且已经被广泛应用到兽药残留检测当中。
②荧光免疫检测法这种检测法的标记物为荧光物质或潜荧光物质，过去在使用过程中激发荧光所使用的是普通光，但容易受到干扰，近年号荧光偏振、荧光猝灭、时间分辨荧光等荧光免疫检测法逐渐得到了广泛应用，极大提升了这项技术的灵敏度。
③胶体金免疫检测法这种检测方法将胶体金颗粒作为的标记物，可以快速检测出兽药残留。
兽药残留免疫学快速检测技术研究进展
第7期（总第435期) 2017年7月农产品加工Farm Products ProcessingNo.7Jul.文章编号：1671-9646 (2017) 07a-0053-02兽药残留免疫学快速检测技术研究进展吕春晖(天津现代职业技术学院，天津300350)摘要：兽药在畜牧业中的使用能够有效降低兽类的得病率和死亡率，极大地提高畜牧业的生产效益，但是兽药的使 用随之带来很大问题，一些对兽药的不当使用会严重影响人类健康甚至会对生态环境造成破坏，因此兽药残留的检 测技术已经成为重大研究课题之一。
为了解决这类问题，研究者提出了免疫学快速检测技术方法，旨在介绍免疫学 快速检测技术的思想方法和其未来的发展趋势，从而加深人们对于此项技术的认识。
关键词：兽药残留；免疫学检测技术；快速检测技术；研究进展中图分类号：S851 文献标志码：A doi：10.16693/ki.l671-9646(X).2017.07.018Research Progress of Rapid Immunological Detection Technology forVeterinary Drug ResiduesLV Chunhui(Tianjin Modern Vocational Technology College，Tianjin 300350，China)Abstract：The use of veterinary drugs in animal husbandry can effectively reduce the disease rate and mortality of the beast，and greatly improve the efficiency of the animal husbandry production, but the use of veterinary drugs will bring a lot of problems. The improper use of veterinary drugs will seriously affect human health and even cause damage to the ecological environment. Therefore，detection of veterinary drug residues has become one of the major research topic. In order to solve this problem，researchers propose the method of rapid immunological detection technology. The purpose is to introduce the idea and development trend of rapid detection technology of immunology，so as to deepen the understanding of this technology.Key words：veterinary drug residues；immunological detection technique；rapid detection technology；research progress〇引言兽药残留对人类和环境的影响变得越来越不可 忽视，所以研究和发展有效的技术来减轻甚至消除 这种影响成为当今我国生物学家探讨的重点话题，以至于在20世纪80年代出现高效率免疫学分析的 方法成为研究重点，科学家正在为推进这种免疫学 快速检测方法的发展做出不懈努力，使得这种方法 得到不断地完善和发展，此方法在兽药残留检测的 过程中扮演着更加重要的角色。
动物源性食品中兽药残留快速检测技术研究进展
动物源性食品中兽药残留快速检测技术研究进展随着畜牧业规模化和产业化，为了防止群体染病事件的发生，同时为了追求利益的最大化，养殖过程中兽药的使用量和使用范围逐渐被扩大化，国家对于兽药的安全使用有很多规定，但因为养殖者对法律法规及相关标准的不了解或受到利益的驱动，滥用、误用兽药，极易造成兽药残留超标。
食品安全监控体系不断发展完善，但兽药残留依然是动物源性食品中安全监管的重点和热点。
我国国家标准中兽药残留的检测方法有气相色谱法、液相色谱法、薄层色谱法、气相色谱-质谱联用法、液相色谱-质谱联用法等[1]，但是这些方法存在预处理复杂、需要配备昂贵的大型仪器、操作繁琐、对人员素质要求高、试验成本高等缺点，不利于进行食品安全监管的现场快速检测；而一些快检技术具有快捷、简便、成本低等特点，被广泛运用。
对近几年动物源性食品中兽药残留快速检测技术进行综述，重点介绍了酶联免疫技术、生物芯片技术、生物传感器技术、拉曼光谱检测技术等快速检测技术，并对快速检测技术在食品分析领域中，尤其是动物源性食品中兽药残留的应用前景进行了展望。
1 免疫技术酶联免疫技术酶联免疫技术是由免疫技术与现代测试手段相结合而建立的一种超微量测定技术[2]，对于兽药残留的检测一般采用3种竞争分析模式，即抗体包被直接竞争、抗原包被直接竞争和间接竞争[3]。
Wang L等人[4]进行胶体金吸附和酶联免疫吸附交叉试验，这种方法获得良好的相关性，可以快速测试动物源食品中14种磺胺残留。
王忠斌等人[5]建立了氨基糖苷类抗生素多残留的直接竞争ELISA分析方法，快速检测新霉素、卡那霉素、庆大霉素、链霉素等兽药中常用的氨基糖苷类抗生素。
王自良等人[6]研制的苯巴比妥ELISA试剂盒，线性检测范围广，达～ng/mL，灵敏度高，检测限低。
王选年等人[7]研制的盐酸克伦特罗ELISA试剂盒，线性检测范围为～ng/mL，与肾上腺素、去甲肾上腺素、莱克多巴胺及多种抗生素均无交叉反应性。
兽药残留免疫学快速检测技术研究进展
％ ～１ ０ ． ９％，可 以替代 传统 的Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 方法 应 用于 牛奶 中氧 氟沙 星抗 生 素 残 留 的实 际测 定 中 ，具有 特 异性 强 、灵 敏度 高 、操作 简单 、 便 于推 广等 优 点 ，是一种 可 用于不 同药 物残 留 的多重 测定 技术 。
７ 胶 体金免疫层析 法
中国畜牧 兽医文摘
２ ０ １ ５ 年
３ １ 卷
第７ 期
基 础 研 究
兽药 残 留免疫 学快 速检 测技术研究进展
张华成
（ 浙江富 阳科兴生物化 工有限公司 ，浙江富阳
兽 药 在 降低 畜 禽发 病 率 与死 亡 率 ，提 高 畜 禽养 殖 经 济效 益 方 面 发挥 了 巨大作 用 ，但 随着 兽 药 品种 和数 量 不 断增 加 ，以及 兽 药 甚 至违 禁 药 品在 临床 中 的大 量 滥用 ，兽药 蓄积 在动 物 机 体及 其 动 物产 品 中造 成兽 药 残 留 ， 由兽 药残 留导致 的微 生物 耐 药性 、生 态 环境 毒 性 、食 品安全等 问题 日益受 到重视 。故 加强兽 药残 留检测 技 术 的研 究 与应用 对保 障食 品安 全和人 类健 康均具 有 十分重要 的现 实 意义 。 随着现 代免疫 学技 术 的快速发 展 ，兽药 残 留免 疫学 检测技 术 日臻 完善 ，本 文就 近年来 针对兽 药残 留 的酶联 免疫法 、放射 免疫 分 析法 、电化学 免疫方 法 、胶体 金免疫 层析 法等免 疫学 检测 技术做 一 简要 综 述 ，以期 为 我 国兽药 残 留的 快速 检测 提供 参 考 。
１ 酶联免疫 法 （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ ）
Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 是 将 抗 原 或抗 体 结 合 在 固 相载 体 表 面 ，并 使 其 保 留免 疫 活性 ，再加入抗体或抗原与酶结合成的偶联物，该偶联物既有 酶 的活 性 特 异性 又 具有 与 固相 载体 表 面抗 原 或抗 体 特 异性 结 合 的 活性 ，再 加 入 酶 的底 物 即可 呈 现 出颜 色反 应 。王 鹤 佳等 川 利 用 尼 卡 巴嗪 残 留标 志 物 作 为抗 原 免疫 动 物 获得 特 异 性抗 体 ，建 立 了 鸡 肉 中尼 卡 巴嗪 残 留 的Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检 测 方 法 ，该 方 法 对 鸡 肉 中检 测 限 为 ９ ． ２ ｇ ／ ｋ ｇ ，在 灵 敏 度 、精 密 度 、准确 度方 面均 能 满 足 兽 药 残 留 快 速筛 选 的检 测要 求 。Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 方 法 检 测快 速 、操 作 简单 ，敏 感 性 高 、特异 性 强 ，已广 泛应 用 于常 见兽 药残 留的快 速检 测 。
兽药残留分析技术进展资料课件
致癌风险
部分兽药被认为有致癌性， 长期接触可能增加患癌风 险。
国内外兽药残留监管现状
国内监管
我国已制定一系列兽药残留标准， 加强养殖、屠宰等环节的监管力度。
国际监管
许多国家和地区都有严格的兽药 残留限量标准和监管措施。
兽药残留分析技术发展历程
02
传统兽药残留分析技术
微生物法
利用微生物抑制法或生化 试验检测兽药残留。
02
基因工程技术具有高灵敏度和特异性，能够检测出极低浓度的药物残留，有助 于及时发现和防止药物滥用。
03
基因工程技术需要专业的技术和设备支持，成本较高，目前尚未广泛应用于兽 药残留检测中。
色谱技术
色谱技术是一种分离和分析复杂混合物中各组分的方法。在兽药残留分析中，色谱 技术可用于分离和鉴定动物组织中的药物残留。
色谱技术具有高分离效能和灵敏度，能够同时分离和测定多种药物残留，提高了检 测效率。
色谱技术需要使用有机溶剂，对环境和人体有一定的危害，需要采取相应的安全措施。
生物传感器技术
生物传感器技术是一种利用生物分子识 别元件对特定物质进行检测和测量的方 法。在兽药残留分析中，生物传感器技 术可用于快速检测动物组织中的药物残
仪器检测方法具有准确度高、灵 敏度高等优点，但需要昂贵的仪
器设备和专业的操作人员。
仪器检测方法主要应用于实验室 内的精确测定和确证。
新型兽药残留分析技术介绍
04
基因工程技 术
01
基因工程技术是一种利用重组DNA技术对基因进行操作和修饰的方法。在兽药 残留分析中，基因工程技术可用于检测和鉴定特定基因的表达，从而确定动物 组织中是否存在特定药物的残留。
灵敏度与特异性难以平衡
兽药残留检测技术应用现状及发展方向
段与技术也取得很大进步。相继出现高效薄层色谱法、 兽药残留的检测上受到很大限制。
酶联免疫分析法、电化学法、毛细管电泳法、气相色谱法、
液相色谱法、气相色谱 - 质谱联用法和液相色谱 - 质谱 2.3 液相色谱 - 质谱联用法
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Veterinary drug residue; Detection method; Screening technique
中图分类号：S859.84
１ 兽药残留污染现状
随着经济快速发展，人们生活水平不断提高，也 越来越关注食品安全问题。近些年出现的“速成鸡” “瘦肉精”事件等都使动物源食品（肉、蛋、奶、水 产及其制品）中的兽药残留成为人们关注的热点。
行业综述 Modern Food ｄｏｉ：１０．１６７３６／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｎ４１－１４３４／ｔｓ．２０１７．１４．００５
兽药残留检测技术应用现状及发展方向
Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ Ｓｔａｔｕｓ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｄｉｒｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｒｕｇ Ｒｅｓｉｄｕｅ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
也建立多个以高效液相色谱 - 紫外检测器的检测方法， 更高的质量分辨率、质量准确度和扫描速度的质谱。常
结合不同的前处理净化方法，检测食品中兽药残留。 见的高分辨质谱包括飞行时间质谱、四级杆 - 飞行时间
二极管阵列检测器也属于紫外检测器，由于检测成本 质谱、傅立叶变换静电场轨道阱质谱和傅里叶变换离子
低，同时又具有选择性好和灵敏度高的特点，适用范 回旋共振质谱等。由于高分辨质谱在全扫描模式下不需 围非常广泛，用户数量庞大。郭萌萌 [2] 等采用高效液 要考虑目标化合物的数量，能够筛查大量目标化合物，
兽药残留免疫检测技术应用进展
兽药残留免疫检测技术应用进展
蔡勤仁;曾振灵;杨桂香
【期刊名称】《动物医学进展》
【年(卷),期】2002(023)002
【摘要】免疫检测技术(Immunoassays,IAs)是利用抗原与抗体在体外的特异性反应建立起来的检测技术.兽药属于小分子物质(MW＜1000D),没有免疫原性,必须与大分子物质交联成人工抗原才能获得免疫原性.本文从兽药人工抗原的制备、抗体的制备、免疫检测方法的建立等三个方面对免疫技术在兽药残留检测的应用进行了综述,并展望了兽药免疫检测技术的发展趋势和前景.
【总页数】4页(P25-28)
【作者】蔡勤仁;曾振灵;杨桂香
【作者单位】华南农业大学动物医学院,广州 510640;华南农业大学动物医学院,广州 510640;华南农业大学动物医学院,广州 510640
【正文语种】中文
【中图分类】S852.4
【相关文献】
1.兽药残留免疫学快速检测技术研究进展 [J], 吕春晖
2.免疫学检测技术在真菌毒素及兽药残留检测中的应用 [J], 张勇法;杨建英
3.兽药残留免疫学快速检测技术研究进展 [J], 张华成
4.乳品中兽药残留荧光检测技术的应用进展 [J], 方芳;郑君杰;孙志伟;李蓉蓉;刘薇;
杨柳
5.兽药残留免疫学快速检测技术研究进展 [J], 吕春晖
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免疫技术在动物源性食品快速检测中的研究进展
免疫技术在动物源性食品快速检测中的研究进展随着人们生活水平的提高，对于食品安全的重视程度也越来越高。
动物源性食品中可能存在的细菌、病毒、寄生虫和化学残留等问题给食品安全带来了挑战。
如何快速、准确地检测动物源性食品中的各类污染物成为了食品安全领域的重要课题之一。
免疫技术在动物源性食品快速检测中的应用，为解决这一难题提供了新思路，并取得了不少研究进展。
免疫技术是利用生物体内免疫反应的特异性和高度选择性来检测目标物质的一种方法。
在动物源性食品中，免疫技术主要应用于抗生素、激素、细菌、寄生虫和病毒等有害物质的快速检测。
经过多年的研究和实践，免疫技术在动物源性食品检测中已经取得了一些显著的成果。
针对抗生素、激素等残留物的检测，研究人员利用免疫技术开发了一系列快速检测方法。
ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种常用的抗生素残留检测方法，通过特异性的抗体与目标抗生素结合，然后测定结合物的浓度来判断食品样品中的抗生素残留水平。
还有基于免疫层析技术的检测方法，能够快速、准确地检测出食品样品中的激素残留。
针对细菌、寄生虫和病毒等微生物的检测，免疫技术也发挥了重要作用。
利用抗体检测大肠杆菌O157、沙门氏菌等食品中的致病菌。
还有针对食品中寄生虫卵的快速检测方法，通过免疫技术能够在短时间内对食品样品中的寄生虫卵进行检测，大大提高了检测效率和准确性。
而在禽流感等病毒的检测方面，免疫技术也能够提供一种快速、可靠的检测手段。
免疫技术在动物源性食品中的快速检测中还有许多其他应用。
对于过敏原的检测，利用免疫技术可以快速检测食品中是否存在过敏原，并且可以检测多种过敏原的混合情况。
对于转基因食品的检测，免疫技术也可以提供一种快速检测手段。
免疫技术在动物源性食品快速检测中的研究进展为食品安全提供了强有力的技术支持，但同时也面临着一些挑战。
目前免疫技术在快速检测中的灵敏度和特异性仍然有待提高，同时需要不断完善快速检测装置和试剂盒的研发。
免疫技术在动物源性食品中的检测方法也需要进一步标准化，以确保其结果的准确性和可比性。
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和 70、80 年代后的质谱( MS) 和高效液相色谱( HP LC) 立了 检测头 孢噻 呋的 Ci-ELISA 方 法, cef-68 和 cef-
以及 GC/ MS、LC/ MS 等联用技术的飞速发展大大地 116 的 IC50分别为 32 Lg/ kg 和 0. 33 Lg/ kg。其检测限
的苯并咪唑类药物、亚砜和砜等代谢产物时, 阿苯达唑 和芬苯达唑的检测限分别为 58 Lg/ kg 和 120 Lg/ kg。 单抗 对 苯 并 咪 唑 类 抗 蠕 虫药 有 很 高 的 选 择 性[ 18] 。
Holtzapple 等用碳二亚胺法, 戊二醛修饰载体法和巯基
蔡勤仁等: 兽药 残留免疫检测技术应用进展
托氟沙星 52. 5 21. 1 8. 7
9. 6
9. 8
123
恩诺沙星 8. 2 34. 0 141
154
248 3307
诺氟沙星
81
115
163
154
253
921
奈啶酸
32
300
704
625
698 1038
Duan 等制备了环丙沙星多克隆抗体, 并建立了检 测 环丙 沙星 残留 的 Ci-ELISA 方法, 检 测 限为 0. 32 ng/ mL, 标准曲线在 0. 32 ng/ mL～5000 ng/ mL 范围 内线性关系良好, 批内和批间变异系数分别为 5. 81% 和 11. 23% 。环丙沙星在猪肉, 鸡肉及牛乳中的回收率 分别为 75. 58% 、81. 2% 和 84. 50% 。抗血清与恩诺沙 星的交叉反应率为 69. 8% , 与金霉素、庆大霉素、青霉 素、新霉素、喹乙醇和磺胺等无交叉反应[ 5] 。蔡勤仁等
制备了恩诺沙星单克隆抗体, Ci-ELISA 的最低检测限 为 0. 13 ng/ mL, 标准曲线在 0. 13 ng/ mL～10 000 ng/ mL 范围内线性关系良好( r= - 0. 9 782) [ 6] 。
1. 3 磺胺类
李喜旺等制备了 6 种模拟磺胺类药物母核结构的 人工抗原和 3 种多克隆抗体, 并对抗体的选择性与亲 和性, 免疫原与靶物质的免疫相关性和免疫反应条件 进行了探讨。部分抗体对参试的 9 种磺胺类药物显示 了高度的选择性和亲和性, 其中 7 种药物 Ci-ELISA 抑 制曲线的 IC50为 0. 2～2. 2 Lg/ mL, 检测限低于 0. 01 Lg/ mL, 并 在 pH4. 4 ～5. 4 的 介质 中亲 和性 最强[ 7] 。 Sheth 等制备了多种模拟磺胺类药物母核结构的人工 抗原和多克隆抗体, 并以之建立了检测磺胺类药物的 Ci-ELISA 方法[ 8] 。吴定等以 BSA 为载体合成两种不 同摩尔比值( 1∶13 和 1∶42) 磺胺甲基嘧啶人工抗原, 并比较其免疫原性。免疫家兔后获得抗 SMD 多克隆抗 体, 并以之建立了乳中磺胺甲基嘧啶残留的 Ci-ELISA 方法, 标准曲线的工作浓度为 5～20 ng/ mL, 检测限为 2. 4 ng/ mL, 回收率为 88% ～118% 。抗血清与磺胺二 甲基嘧啶和磺胺 噻唑交叉反应率分别为 6. 0% 和 0. 84% , 而与其它磺胺类药物无交叉反应。研究结果还表 明半抗原与载体蛋白的结合比在 1: 10～1: 25 为宜[ 9] 。 刘智宏等用戊二醛法合成了 SQ-BSA 人工抗原并用其 免疫家 兔制备了 SQ 多克隆抗 体, 并以 之建立 了 CiELISA 方法, 标准曲线的线性关系良好, 检测限为 100 LL/ L, 回收率为 93. 7% , 批间变异系数 CV= 6. 4% 。抗 血清对 SQ 有很高的选择性, 在 12 种磺胺类和非磺胺
药残留分析的是酶免疫检测法。其研究过程一般包括 人工抗原的合成, 抗体的制备以及检测方法的建立等 步骤。但绝大多数药物是小分子物质, 分子量< 1 000 D, 没有免疫原性, 必须把它交联到大分子蛋白质上制 备人工抗原来获得免疫原性。因此兽药的免疫检测有
其自身的特点。国外的兽药残留免疫检测多用单克隆 抗体, 而国内多数还只停留在多克隆抗体水平。单克隆 抗体在灵敏度和交叉反应方面都优于多克隆抗体, 且
CV= 10. 8% ( n= 3) 。检测限为 2 Lg/ kg。组织样品在 10、50、100 Lg/ kg 的添加水平下回收率分别为 132% 、 78% 和 81% 。交叉反应数据表明单抗对沙拉沙星有很 高的选择性( 结果见表 1) [ 3, 4] 。
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动物医学进展 2002 年 第 23 卷 第 2 期( 总第 118 期)
净化、浓缩和衍生化) 和测定两部分。最初, 残留分析技 对兽药残留免疫检测技术有一个全面的了解。
术仅限于化学分析法、比色法和微生物法, 化学分析法 1 药物免疫检测技术应用进展
和比色法缺乏专一性和敏感性, 而微生物法虽然普遍 1. 1 B-内酰胺类
适用于抗菌药物的残留测定, 但不易筛选到特别敏感
Rose 等用头孢噻呋的水解产物去呋喃羰 基头孢
表 1 沙拉沙星单克隆抗体的交叉反应: IC50值 ( Lg/ kg)
化合物
Sara Sara Sara Sara Sara Sara
-5
-55
-67
-95
-96
-131
沙拉沙星 48. 3 12. 3 10. 0 8. 2
7. 3
9. 0
二氟沙星 2. 4
6. 6
6. 9
5. 7
5. 8
7. 0
的菌株, 方法常受到其它抗菌药物的影响。薄层色谱 噻呋作为半抗原, 将其原位 交联到载体蛋白 BSA 和
( T LC) 操作简单, 结果可靠, 但仍需要复杂的样品前处 KLH 上制备了两种人工抗原, 免疫 BALB/ C 小鼠后最
理, 灵敏度不高。20 世纪 60 年代后的气相色谱( GC) 终筛选出两株单克隆抗体, cef-68 和 cef-116, 并以之建
分析费时而不易推广。同时它还需要复杂烦琐的样品 应[ 2] 。
前处理且不能同时筛选大量的样品, 这对药物残留的 1. 2 氟喹诺酮类
及时监控无疑是不适的。九十年代后的免疫检测技术
Holtzapple 等先将载体蛋白 BSA, OVA 用过量的
的飞速发展大大推动了兽药 残留检测技术发展的进 乙 二 胺 处 理 后 碳 二 亚 胺 法 合 成 了 cOVA-Sara 和
株单 克 隆抗 体, 并以 之 建立 了 检测 沙 拉沙 星 的 CiELISA 方法。标准曲线的 IC50范围为 7. 3～48. 3 Lg/
的放射免疫分析方法( RIA ) 被公认为有机痕量分析化 kg. 批内变异系数 CV = 11. 0% ( n= 3) , 批间变异系数
收稿日期: 2001-10-23 基金项目: 广东省自然科学基金资助项目( 994162) 。 作 者简介: 蔡 勤仁( 1974- ) , 男, 湖北麻 城人, 华 南农业 大学 动 物医学院硕士, 主要从事兽医药理学与毒理学方面的研究。
1. 6 抗蠕虫药
Brandon 等制备了苯并咪唑株 单克隆抗体, 并 建 立了检测苯并咪唑类抗蠕虫药的 Ci-ELISA 方法。该 方法可检测出 1～8 Lg/ kg 浓度范围的苯并咪唑类抗
蠕虫药及其代谢产物和甲基苯并咪唑的残留。且该方
法与 HPLC 方法在检测用芬苯达唑处理的奶牛肝组织 残留时有很好的相关性。当在牛肝脏样品中添加等量
蔡勤仁等: 兽药 残留免疫检测技术应用进展
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兽药残留免疫检测技术应用进展
蔡勤仁, 曾振灵, 杨桂香
( 华南农业大学动物医学院, 广州 510640)
中图分类号: S 852. 4 文献标识码: A
文章编号: 1007-5038( 2002) 02-0025-04
摘 要: 免疫检测技术( Immunoassays, IAs) 是 学方面的重大突破, 并为此荣获 1977 年诺贝尔生物医 利用抗原与抗体在体外的特异性反应建立起来 学奖[1]。由于放免有一定的危险性, 目前普遍应用于兽
类药物中, 最大交叉反应率仅为 0. 1% [ 10] 。
1. 4 生长激素类
陈继明等分别以偶氮方法和碳二亚胺法将 B2 受 体激动剂克仑特 罗( CL) 和塞曼特罗( CIM) 交 联到载 体蛋白 BSA 和 OVA 上制成人工抗原, 免疫家兔后分 别制备了兔抗 CL 和 CIM 抗血清, 并在此基础上建立 了 CL 和 CIM 残留的免疫检测方法。两种抗血清的工 作浓度分别为 1∶10 000 和 1∶5 000。CL 和 CIM 的检 测范围分别为 1. 9～15. 6 ng/ mL 和 0. 477～1. 85 ng/ mL[ 1 1] 。何方洋等用重氮化法制备了克仑特罗人工抗原 并获得了 一株稳定 分泌抗克 仑特罗 单克隆 抗体[ 12] 。 Shelver 等制备了莱克多巴胺单克隆抗体[ 13] 。Elliott 等 在山羊体内获取了莱克多巴胺多抗, 并建立了分析牛 尿液样品中莱克多巴胺残留的 ELISA 方法, 该研究表 明 ELISA 方法与 LC-MS-MS 方法的相关性很好( R2 = 0. 73) [ 14] 。
的检 测技 术。兽药 属于 小分 子物 质( MW < 1000D) , 没有免疫原性, 必须与大分子物质交 联成人 工抗原才能获得免 疫原性。本文从兽 药 人工抗原 的制备、抗体的制 备、免疫检测方法 的
建立等三 个方面对免疫技 术在兽药残留检测 的 应用进行了综述, 并展望了兽药免疫检测技术 的发展趋势和前景。
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修 饰 载 体法 合 成 了 多 个潮 霉 素 B 人 工 抗 原, 免 疫 BALB/ C 小鼠后最终筛选出 7 株抗潮霉素 B 单克隆抗
程, 一系列免疫检测试剂盒的生产与应用加快了兽药 cBSA-Sara 两种沙拉沙星人工抗原。以 cBSA-Sara 免
残留分析的标准化。