4细胞生物学研究方法答案
第三章细胞生物学研究方法习题及答案
第三章细胞生物学研究方法习题一、选择题1 正常细胞培养的培养基中长需加入血清，主要是因为血清中含有（C ）A. 氨基酸B. 核酸C.生长因子D.维生素2 冷冻蚀刻技术主要用于（A ）。
A.电子显微镜B. 光学显微镜C.原子力显微镜D.激光共聚焦显微镜3 建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞是通过下列哪种技术构建的？（A ）A. 细胞融合B. 核移植C. 病毒转化D. 基因转移4 关于光镜的使用，下列哪项有误？（C ）A. 观察标本时，应双眼同时睁开、双手并用B. 按照从低倍镜到高倍镜到油镜的顺序进行操作C. 使用油镜时，需要在标本上滴上香柏油，将聚光器降至最低，光圈全部开放。
5 为了实现细胞内某种蛋白质的亚细胞精细定位，可对该蛋白进行标记，下面哪种标记可行（C）A. GFP标记B. 免疫荧光标记C. 免疫电镜技术D. 荧光染料直接染色6 为了提高雌性乳牛出生的比例，可在体外将携带X染色体和Y染色体的镜子分离开，进行人工授精。
最好的分离方法使（A ）A. 流式细胞分选术B. 离心技术C. 细胞电泳D. 层析7 为了观察病毒，可通过何种方法进行观察（B ）A. 相差显微镜观察B. 负染色后用电镜观察C. 激光共聚焦显微镜观察D.以上都错8 以下哪些技术一般不用于分离活细胞？（CD ）（可多选）A. 流式细胞技术B. 细胞电泳C. 超速离心D.差速离心9 某研究生为了研究一特定膜蛋白的胞质结构域的功能，需要制备和分离外翻的细胞膜泡，为了获得无污染的外翻膜泡，下列选项中，哪些是他在实验中有可能使用到的?（BD ）（可多选）A. SDSB. 凝集素C.流式细胞仪D. 柱层析10 绿色荧光蛋白GFP（Green Fluorescent Protein）基因与目的基因融合后，转入细胞后可以（ABD ）（可多选）A. 检测融合蛋白在细胞中的准确定位B. 检测目的基因所编码的蛋白在细胞中的含量C. 检测目的基因所编码的蛋白在细胞中的分子结构D. 检测目的蛋白质在细胞中的表达量E. 以上答案都不对二、填空题1 流式细胞仪可以定量测定细胞中的DNA，RNA或某种特异蛋白的含量及细胞群体中上述成分含量不同的细胞数量。
细胞生物学研究方法
一、填空题1.透射电子显微镜由、、三部分所组成。
2.在酵母人工染色体制备过程中，要使用酶脱去酵母的细胞壁，使之成为，并且进行观察和计数。
3.观察贴壁生长的培养动物细胞可用。
4.电子显微镜使用的是透镜，而光学显微镜使用的是透镜。
5.物质在紫外光照射下发出的荧光可分为和两种，其中需要将被照射的物质进行染色。
6.用紫外光为光源观察物体比用可见光的分辨率要高，这是因为。
7.相差显微镜与普通显微镜的区别是用替代可变光阑，用代替普通物镜。
8.倒置显微镜与普通显微镜的不同在于其。
9.显微镜的分辨本领是指能够能力，用来表示。
10.电子染色是用来增强电子的散射能力。
11.在光学显微镜下见到的结构称为，在电子显微镜下见到的结构称为。
12.细菌质膜的多功能性主要表现在:具有的呼吸作用，具有的分泌作用，具有的信号传导作用。
13.显微镜的分辨率约等于光波长的，通常把这一数值看成是光学显微镜分辩力的。
14.在同位素追踪技术中，用于研究DNA的同位素标记的前体物是。
15.单克隆抗体技术是将与无限繁殖的肿瘤细胞杂交的技术。
16.可用技术来研究质膜结构的不对称性。
17.乙醇沉淀DNA的主要原理是。
18.动物细胞培养所用的合成培养基中除含多种、和外，一般还需加入。
19.用荧光显微镜观察细胞时，经吖啶橙染色的细胞中的DNA发荧光，而RNA发荧光。
20.适于观察活细胞的光学显微镜有、和等。
21.分辨率是指人的肉眼或显微镜在25cm处能够分辨到的相邻两个物体间最近距离的能力。
人眼为，普通光学显微镜为，透射电子显微镜为，扫描隧道显微镜为，以紫外光为光源的光学显微镜为。
22.光学显微镜的组成主要分为、和三大部分，光学显微镜的分辩率由、和三种因素决定。
23.用紫外光为光源观察物体比用可见光的分辨率要高，这是因为。
24.荧光显微镜是以为光源，而电子显微镜则以作为光源。
25.电子显微镜按工作原理和用途的不同可分为和。
26.利用超速离心机对细胞组分进行分级分离的常用方法有和。
细胞生物学课后习题解答
作业一：1．根据细胞生物学研究的内容与你所掌握的生命科学知识，客观地、恰当地估价细胞生物学在生命科学中所处的地位，以及它与其他学科的关系。
答：细胞生物学是研究细胞基本生命活动规律的科学。
它在显微水平、亚显微水平和分子水平三个层次上研究细胞结构与功能，细胞增殖、分化、衰老与凋亡，细胞信号传递，真核细胞基因表达与调控，细胞起源与进化等内容。
由于细胞生物学运用了近代物理、化学和分子生物学方法，它主要研究细胞各种组成部分的结构、功能及其相互作用；研究细胞总体的和动态的功能活动，包括细胞生长分裂、发育分化、遗传变异和演化，以及研究这些相互关系和功能活动的分子基础。
因此，现代细胞生物学实际上是分子生物学与细胞生物学的结合，即细胞分子生物学。
可见，细胞生物学的兴起是与分子生物学的发展不可分割的。
从生命结构层次来看，细胞生物学介于分子生物学与个体生物学之间，同它们相互衔接、相互渗透。
因此，细胞生物学是一门承上启下的学科，和分子生物学一起同是现代生命科学的基础。
在我国基础科学发展规划中，细胞生物学与分子生物学、神经生物学和生态学并列为生命科学的四大基础学科。
它广泛渗透到遗传学、发育生物学、生殖生物学、神经生物学和免疫生物学等的研究中，并同农业、医学和生物高技术发展有极其密切的关系。
以医学为例。
医学作为一门维持人类健康、防治人体疾病的应用性学科同细胞生物学有着密切的关系。
细胞生物学的新理论、新发现、新技术在医学方面的应用，极大地促进了医学的进步。
如单克隆抗体的应用，使很多疾病的诊断简单而精确，使癌症等复杂疾病的治疗效果大大提高。
2．通过学习细胞学发展简史，你如何认识细胞学说的重要意义?答：从细胞的发现到细胞生物学的建立，大约经历了300多年的时间。
这段历程一般分为以下五个阶段：①细胞的发现；②细胞学说的建立；③细胞学说的经典时期；④实验细胞学时期；⑤细胞生物学学科的形成与发展。
细胞学说是1838—1839年间由德国的植物学家施莱登和动物学家施旺所提出，直到1858年才完善。
细胞生物学第四版课后题答案全
细胞生物学（第四版）课后思考题答案仅供参考目录第一章绪论 (1)1、根据细胞生物学研究的内容与你掌握的生命科学知识，恰当的评价细胞生物学在生命科学中所处的地位，以及它与其他学科的关系。
(1)2、如何认识细胞学说在细胞学乃至生物学发展简史中的重要意义？ (1)3、试简明扼要地分析细胞生物学学科形成的客观条件，以及它今后发展的主要趋势。
..14、当前细胞生物学研究的热点课题中你最感兴趣的是哪些？为什么？ (1)第二章细胞的统一性和多样性 (1)1、如何理解“细胞是生命活动的基本单位”这一概念？ (1)2、为什么说支原体可能是最小最简单的细胞存在形式？ (2)3、怎样理解“病毒是非细胞形态的生命体”？试比较病毒与细胞的区别并讨论其相互的关系。
(2)4、试从进化的角度比较原核细胞。
古核细胞及真核细胞的异同。
(2)第三章细胞生物学研究方法 (3)1、举例说明电子显微镜技术与细胞分子生物学技术的结合在现代细胞生物学研究中的应用。
(3)2、光学显微镜技术有哪些新发展?它们各有哪些突出优点? 为什么电子显微镜不能完全代替光学显微镜? (3)3、为什么说细胞培养是细胞生物学研究的最基本的技术之一？ (3)4、研究细胞内大分子之间的相互作用与动态变化涉及哪些实验技术？他们各有哪些优缺点？ (3)5、什么是模式生物？举例说明模式生物的使用在细胞生物学研究中的作用。
(3)6、功能基因组学的基本研究思路与基本方法是什么？为什么说它与细胞生物学的发展密切相关？ (4)第四章细胞质膜 (4)1、从生物膜结构模型的演化，谈谈人们对生物膜的认识过程。
(4)2、膜脂有哪几种基本类型？他们各自的结构特征和功能是什么？ (4)3、何谓内在膜蛋白? 内在膜蛋白以什么方式与膜脂相结合? (4)4、生物膜的基本结构特征是什么？这些特征与它的生理功能有什么联系？ (4)膜的流动性：生物膜的基本特征之一，细胞进行生命活动的必要条件。
完整最新细胞生物学第四版课后习题答案
答1838-1839年，德国植物学家施莱登和德国动物学家施旺提出一切动植物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成；每个细胞作为相对独立的单位，但也与其他细胞相互影响。1858年Virchow对细胞学说做了重要的补充，强调细胞只能来自细胞。
病毒与细胞的区别：
（1）病毒很小，结构极其简单；
（2）遗传载体的多样性
（3）彻底的寄生性
（4）病毒以复制和装配的方式增殖
4.试从进化的角度比较原核细胞﹑古核细胞及真核细胞的异同。
要 点 原 核 细 胞 真 核 细 胞 细胞核 无膜包围，称为拟核 有双层膜包围 染色体形状
数目
组成
1．根据细胞生物学研究的内容与你所掌握的生命科学知识，客观、恰当地评价细胞生物学在生命科学中所处的地位，以及它与其他学科的关系。
答细胞生物学是一门从细胞的显微结构、超微结构和分子结构的各级水平研究细胞的结构与功能的关系，从而探索细胞生长、发育、分化、繁殖、遗传、变异、代谢、衰亡及进化等各种生命现象规律的科学。
2.载体蛋白参与的有主动运输和协助扩散，在运输过程中与相应的分子结合，并且会移动。在主动运输过程中由低浓度侧向高浓度运动，且消耗代谢能量；在协助扩散过程中，由高浓度侧向低浓度侧运动，不消耗代谢能。（注;协助扩散也属于被动运输）
载体蛋白：通透酶
多次跨膜蛋白
通过构象改变进行跨膜转运
高度特异性，可饱和性，存在竞争性及非
功能：实现红细胞质膜的刚性与韧性，维持红细胞的形态
第五章
1.比较载体蛋白与通道蛋白的特点。
相同点：化学本质均为蛋白质、分布均在细胞的膜结构中、都有控制特定物质跨膜运输的功能
第二章细胞生物学研究方法
第二章细胞生物学研究方法1．举例（3～5个）说明研究方法的突破对细胞生物学发展的推动作用。
答：①细胞培养技术，…②离心分离技术，…③流式细胞分离技术，…④基因敲除技术，…⑤干细胞培养技术，…⑥……2．为什么说细胞培养是细胞生物学研究的最基本技术之一？3．用什么方法追踪活细胞中蛋白质合成与分泌过程？包括哪几个步骤？答：追踪活细胞中某种蛋白质合成与分泌的过程一般采用同位素示踪技术。
其基本步骤是：①将放射性同位素标记的氨基酸(3H－亮氨酸)加到细胞培养基中，在很短时间内使这些与未标记的相应氨基酸化学性质相同的标记分子进入细胞(称为脉冲标记)；②除去培养液并洗涤细胞，再换以未标记氨基酸的培养基培养细胞，已进入细胞的标记氨基酸将被蛋白质合成系统作为原料加以利用，掺入到某种新合成的蛋白质中；③每隔一定时间取出一定数量的细胞，利用电镜放射自显影技术探查被标记的特定蛋白质在不同时间所处的位置。
通过比较不同时间细胞取样的电镜照片就可以了解细胞中蛋白质合成及分泌的动态过程。
4. 图2-3的解释。
答：两个儿童共同振动一根绳子产生的波动类似于光子光子和电子形成的波，以此说明物体的大小对波的干扰。
(a)两个儿童振动绳子产生的特征波长;(b)向绳子波中扔进一个球或一个物体，如果扔进物体的直径与绳子波长相近，就会干扰绳子波的移动;(3)如果扔进一个垒球或其他物体比绳子波长小得多，对绳子波的移动只有很小或没有干扰;(d)如果将绳子快速振动，波长就会大大缩短;(e)此时扔进垒球就会干扰绳子波的移动。
5．为什么电子显微镜需要真空系统(vacuum system)?答：由于电子在空气中行进的速度很慢，所以必须由真空系统保持电镜的真空度，否则，空气中的分子会阻挠电子束的发射而不能成像。
用两种类型的真空泵串连起来获得电子显微镜镜筒中的真空，当电子显微镜启动时，第一级旋转式真空泵(rotary pump)获得低真空，作为二级泵的预真空；第二级采用油扩散泵(oil diffusion pump)获得高真空。
《细胞生物学》学习题解答
第一章：绪论1、填空题：1、细胞生物学是细胞整体、超微结构和分子水平上研究及其规律的科学。
、2、名词解释：1、细胞学说（cell theory）3、选择题：1、现今世界上最有影响的学术期刊是。
a：Natune b: Cell c: PNAS d: Science2、自然界最小的细胞是（a）病毒（b）支原体（c）血小板（d）细菌4、是非题：1、现代细胞生物学的基本特征是把细胞的生命活动和亚细胞的分子结构变化联系起来。
…………………………………（）5、问答题：1. 当前细胞生物学研究的热点课题哪些？2. 细胞学说的基本要点是什么？细胞学说在细胞学发展中有什么重大意义？3. 细胞生物学的发展可划分为哪几个阶段？各阶段的主要特点是什么？第二章：细胞基本知识概要1、名词解释：1. 血影（Ghost）2. 通道形成蛋白（Porin）3. 纤维冠（fibrous corona）2、选择题：1、立克次氏体是（a）一类病毒（b）一种细胞器（c）原核生物（d）真核生物2、原核细胞的呼吸酶定位在（a）细胞质中（b）质膜上（c）线粒体内膜上（d）类核区内3、最小的细胞是（a）细菌（b）类病毒（c）支原体（d）病毒4、在英国引起疯牛病的病原体是：（a）朊病毒（prion）（b）病毒（Virus）（c）立克次体（rickettsia）（d）支原体（mycoplast）5、逆转病毒（retro virus）是一种（a）双链DNA病毒（b）单链DNA病毒（c）双链RNA病毒（d）单链RNA病毒6、英国疯牛病病原体是（a） DNA病毒（b） RNA病毒（c）类病毒（d）朊病毒7、线虫基因组的全序列测定目前已接近尾声，发现其一共约有（）种的编码基因（a） 6000（b） 10000（c） 20000（d） 500008、原核细胞与真核细胞虽有许多不同，但都是（a）核仁（b）核糖体（c）线粒体（d）内质网9、前病毒是（a） RNA病毒（b）逆转录RNA病毒RNA病毒（c）整合到宿主DNA中的逆转录DNA（d）整合到宿主DNA中的DNA病毒3、是非题：1.类病毒仅由裸露的DNA所构成，不能制造衣壳蛋白。
细胞生物学课后练习题及答案
第一章：绪论1．细胞生物学的任务是什么？它的范围都包括哪些？1) 任务：细胞生物学的任务是以细胞为着眼点，与其他学科的重要概念兼容并蓄，来阐明生物各级结构层次生命现象的本质。
2) 范围：(1) 细胞的细微结构；(2) 细胞分子水平上的结构；(3) 大分子结构变化与细胞生理活动的关系及分子解剖。
2. 细胞生物学在生命科学中所处的地位，以及它与其他学科的关系1）地位：以细胞作为生命活动的基本单位，探索生命活动规律，核心问题是将遗传与发育在细胞水平上的结合。
2）关系：应用现代物理学与化学的技术成就和分子生物学的概念与方法，研究生命现象及其规律。
3. 如何理解所说的“一切生物学问题的答案最终要到细胞中去寻找”。
1) 细胞是一切生物体的最基本的结构和功能单位。
2) 所谓生命实质上即是细胞属性的体现。
生物体的一切生命现象，如生长、发育、繁殖、遗传、分化、代谢和激应等都是细胞这个基本单位的活动体现。
3) 生物科学，如生理学、解剖学、遗传学、免疫学、胚胎学、组织学、发育生物学、分子生物学等，其研究的最终目的都是要从细胞水平上来阐明各自研究领域中生命现象的机理。
4) 现代生物学各个分支学科的交叉汇合是21世纪生命科学的发展趋势，也要求各个学科都要到细胞中去探索生命现象的奥秘。
5) 鉴于细胞在生命界中所具有的独特属性，生物科学各分支学科若要研究各种生命现象的机理，都必须以细胞这个生物体的基本结构和功能单位为研究目标，从细胞中研究各自研究领域中生命现象的机理。
4. 细胞生物学主要研究内容是什么？1）细胞核、染色体以及基因表达2）生物膜与细胞器3）细胞骨架体系4）细胞增殖及其调控5）细胞分化及其调控6）细胞的衰老与凋亡7）细胞起源与进化8）细胞工程5. 当前细胞生物学研究中的基本问题以及细胞基本生命活动研究的重大课题是什么？研究的三个根本性问题：1）细胞内的基因是如何在时间与空间上有序表达的问题2）基因表达的产物――结构蛋白与核酸、脂质、多糖及其复合物，如何逐级装配行使生命活动的基本结构体系及各种细胞器的问题3）基因表达的产物――大量活性因子与信号分子，如何调节细胞最重要的生命活动的问题生命活动研究的重大课题：1）染色体DNA与蛋白质相互作用关系――非组蛋白对基因组的作用2）细胞增殖、分化、凋亡（程序性死亡）的相互关系及其调控3）细胞信号转导――细胞间信号传递；受体与信号跨膜转导；细胞内信号传递4）细胞结构体系的装配6．你认为是谁首先发现了细胞？1) 荷兰学者 Leeuwenhoek，而不是。
细胞生物学习题答案
《细胞生物学》习题及解答第一章绪论本章要点：本章重点阐述细胞生物学的形成、发展及目前的现状和前景展望。
要求重点掌握细胞生物学研究的主要内容和当前的研究热点或重点研究领域，重点掌握细胞生物学形成与发展过程中的主要重大事件及代表人物，了解细胞生物学发展过程的不同阶段及其特点。
一、名词解释1、细胞生物学cell biology2、显微结构microscopic structure3、亚显微结构submicroscopic structure4、细胞学cytology5、分子细胞生物学molecular cell biology二、填空题1、细胞生物学是研究细胞基本规律的科学，是在、和三个不同层次上，以研究细胞的、、、和等为主要内容的一门科学。
2、年英国学者第一次观察到细胞并命名为cell；后来第一次真正观察到活细胞有机体的科学家是。
3、1838—1839年，和共同提出：一切植物、动物都是由细胞组成的，细胞是一切动植物的。
4、19世纪自然科学的三大发现是、和。
5、1858年德国病理学家魏尔肖提出的观点，通常被认为是对细胞学说的一个重要补充。
6、人们通常将1838—1839年和确立的；1859年确立的；1866年确立的，称为现代生物学的三大基石。
7、细胞生物学的发展历史大致可分为、、、和分子细胞生物学几个时期。
三、选择题1、第一个观察到活细胞有机体的是（）。
a、Robert Hookeb、Leeuwen Hoekc、Grewd、Virchow2、细胞学说是由（）提出来的。
a、Robert Hooke和Leeuwen Hoekb、Crick和Watsonc、Schleiden和Schwannd、Sichold和Virchow3、细胞学的经典时期是指（）。
a、1665年以后的25年b、1838—1858细胞学说的建立c、19世纪的最后25年d、20世纪50年代电子显微镜的发明4、（）技术为细胞生物学学科早期的形成奠定了良好的基础。
细胞生物学课件及答案
第一章绪论1.细胞生物学是研究细胞基本（生命活动）规律的科学，是在（显微）、（亚显微）和（分子水平）三个不同层次上，以研究细胞的结构功能、重大生命活动等过程的一门学科。
2.细胞生物学是研究细胞基本（生命活动）规律的科学,是在（显微）、（亚显微）和（分子水平）三个不同层次上,以研究细胞的（结构与功能）、（重大生命活动规律）、细胞起源与进化和细胞工程等为主要内容的一门科学3.1838-1839年，（施莱登）和（施旺）共同提出：一切植物、动物都是由细胞组成的。
4.1858年德国病理学家魏尔肖提出（一切细胞来源于细胞）的观点，通常被认为是对细胞学说的一个重要补充。
1.下列属于细胞学说的描述有（ABCD ）A.有机体是由细胞构成的B.细胞是构成有机体的基本单位C.细胞通过细胞分裂繁殖后代D.一切细胞来源于细胞2.美国人J. D. Watson 和英国人F. H. C. Crick提出DNA双螺旋模型是（B ）年？A.1950B.1953C.1956D.19603.第一个观察到活细胞有机体的是( B )。
A.Robert HookeB.Leeuwen HoekC.GrewD.Virchow4.细胞学说是由( B )提出来A.Robert Hooke和Leeuwen HoekB.Schleiden和SchwannC.Crick和WatsonD.Sichold和Virchow5.1665年英国学者(A )第一次观察到细胞并命名为cell。
A.Robert HookeB.Leeuwen Hoek .C.GrewD.Virchow6.在1953年首先提出DNA双螺旋结构模型的学者是(B )。
A.AveryB.Waston和CrickC.BratchetD.Casperson[E]Feulgen7.细胞生物学是研究细胞基本结构的科学（A）A.正确B.错误8.细胞的亚显微结构是指在光学显微镜下观察到的结构（B）A.正确B.错误9.细胞是生命体的结构和生命活动的基本单位（A）A.正确B.错误10.细胞学说的建立构成了细胞学的经典时期（B）A.正确B.错误1.细胞学说的主要内容是什么？有何重要意义？答：细胞学说的内容：（1）有机体是由细胞构成的;（2）细胞是构成有机体的基本单位;（3）细胞通过细胞分裂繁殖后代。
细胞生物学题库第3章(含答案)
《细胞生物学》题库第三章细胞生物学研究方法一、名词解释1．Resolution2. fluorescence3. Fluorescence microscope4. Phase contrast microscope5. autoradiography6. scanning electron microscopy，SEM7. scanning transmission electron microscopy，STEM8. high-voltage electron microscopy，HVEM9. negative stainning10. shadow casting11. scanning tunneling microscope，STM12.enzyme cytochemistry13. immunofluorescence14. immunoelectron microscopy15. chromosome sorting16. microspectrophotometry17. microfluorometry18. nuclear magnetic resonance，NMR19. cell engineering20. primary culture21. callus，culli22. cell fusion23. monoclonal antibody technique24. micromanipulation25. differential centrifugation26. isodensity centrifugation27. chromatography28. gel filtration chromatography29. affinity chromatography30. gene engineering31. gene cloning32. gene knockout33.karyoplast34.cytoplast35.cell culture36.贴壁生长37.contact inhibition38.mass culture39.clonal culture40. primary culture41.subculture42.单层细胞培养：43.转鼓培养44.primary cell45.subculture cell46.cell strain47.cell line49.clone50.explant二、填空题1. 物质经过紫外线照射后发出荧光的现象可分为两种情况，第一种是，如叶绿素、血红素等经紫外线照射后，能发出红色的荧光；第二种是，即物体经荧光染料染色后再通过紫外线照射发出荧光。
第三章 细胞生物学研究方法
越强。 15. 用 Triton 等去垢剂可以抽提细胞中的微管、微丝等蛋白质结构。 16. 相差显微镜可以用来观察活细胞和未染色的标本。
18. 当前在光镜水平对特异蛋白质等生物大分子定性定位最有力的工具是： A. 暗视野显微镜 B．荧光显微镜 C．倒置相差显微镜 D．普通光学显微镜
19. 关于相差显微镜下列说法错误的是： A. 基本原理是以样品密度差别为基础，将光程差转换成振幅差，形成明暗区别 B．样品不需要染色 C．可以观察活细胞 D．可以对细胞的生物大分子进行定位和定性分析
25. 建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞是通过下列哪项技术构建的： A. 细胞融合 B．核移植 C．病毒转化 D．基因转移
三、判断题
1. 对显微镜来说，最重要的性能参数是放大倍数。 2. 普通光镜的应用原理是：不同的染料对某种细胞组分有特异的吸附，形成足够的反差或
产生不同波长的光谱以区分细胞组分。 3. 亚显微结构即超微结构。 4. 经冷冻蚀刻技术处理后的样品，在电子显微镜下所观察到的图像是样品本身所形成的。 5. 经过流式细胞仪分离出来的细胞不能继续培养。 6. 体外培养的细胞一般均保持体内原有的细胞形态。 7. 透射或扫描电子显微镜不能用于观察活细胞，而相差或倒置显微镜可以用于观察活细胞。 8. 扫描隧道显微镜是具有原子显像力的显微镜。 9. 提高显微镜的分辨率，可通过缩短波长，或给标本染色。 10. 在光学显微镜下观察到的细胞结构称为亚显微结构，在电子显微镜下观察到的结构称为
细胞生物学(第三版)复习课后题答案总结
细胞生物学（第三版）复习课后题答案总结第一章大题（细胞基本知识）1、试论述当前细胞生物学研究最集中的领域。
答：当前细胞生物学研究主要集中在以下四个领域：⑴细胞信号转导；⑵细胞增殖调控；⑶细胞衰老、凋亡及其调控；⑷基因组与后基因组学研究。
人类亟待通过以上四个方面的研究，阐明当今主要威胁人类的四大疾病：癌症、心血管疾病、艾滋病和肝炎等传染病的发病机制，并采取有效措施达到治疗的目的。
2、细胞生物学的概念和研究内容答：概念：细胞生物学是以细胞为研究对象, 从细胞的整体水平、亚显微水平、分子水平等三个层次，以动态的观点, 研究细胞和细胞器的结构和功能、细胞的生活史和各种生命活动规律的学科。
细胞生物学是现代生命科学的前沿分支学科之一，主要是从细胞的不同结构层次来研究细胞的生命活动的基本规律。
从生命结构层次看，细胞生物学位于分子生物学与发育生物学之间，同它们相互衔接，互相渗透。
研究内容：细胞生物学的主要研究内容主要包括两个大方面：细胞结构与功能、细胞重要生命活动。
涵盖九个方面的内容：⑴细胞核、染色体以及基因表达的研究；⑵生物膜与细胞器的研究；⑶细胞骨架体系的研究；⑷细胞增殖及其调控；⑸细胞分化及其调控；⑹细胞的衰老与凋亡；⑺细胞的起源与进化；⑻细胞工程；⑼细胞信号转导。
3、细胞的基本共性答：所有的细胞都有相似的化学组成；脂-蛋白体系的生物膜；DNA-RNA的遗传装置；蛋白质合成的机器―核糖体；一分为二的分裂方式。
4、细胞生存所需的最基本的细胞结构和功能。
答：细胞的生存必须具备细胞膜、核糖体、一套完整的遗传信息物质和结构。
功能：①细胞膜为细胞生命活动提供了相对稳定的环境；为DNA、RNA、蛋白质的复制、转录翻译提供了结合位点，使代谢反映高效而有序的进行；又为代谢底物的输入与代谢产物的排除提供了选择性物质运输的通道，其中伴随能量的传递。
②细胞核是遗传信息储存和表达的重要场所和指挥部，细胞的分裂、生长、分化、增值等一切生命活动均受细胞核遗传信息的指导调控。
翟中和第四版细胞生物学1~9章习题及答案.
翟中和第四版《细胞生物学》习题集及答案第一章绪论一、名词解释细胞生物学：是研究和揭示细胞基本生命活动规律的科学，它从显微、亚显微与分子水平上研究细胞结构与功能、细胞增殖、分化、代谢、运动、衰老、死亡，以及细胞信号传导，细胞基因表达与调控，细胞起源与进化等重大生命过程。
二、填空题1、细胞分裂有直接分裂、减数分裂和有丝分裂三种类型。
2、细胞学说、能量转化与守恒和达尔文进化论并列为19世纪自然科学的“三大发现”。
3、细胞学说、进化论和遗传学为现代生物学的三大基石。
4、细胞生物学是从细胞的显微、亚显微和分子三个水平，对细胞的各种生命活动展开研究的科学。
5、第一次观察到活细胞有机体的人是荷兰学者列文虎克。
三、问答题：1、当前细胞生物学研究中的3大基本问题是什么？答：①基因组是如何在时间与空间上有序表达的？②基因表达产物是如何逐级组装成能行使生命活动的基本结构体系及各种细胞器的？这种自组装过程的调控程序与调控机制是什么？③基因及其表达的产物，特别是各种信号分子与活性因子是如何调节诸如细胞的增殖、分化、衰老与凋亡等细胞最重要的生命活动过程？2、细胞生物学的主要研究内容有哪些？答：①生物膜与细胞器②细胞信号转导③细胞骨架体系④细胞核、染色体及基因表达⑤细胞增殖及其调控⑥细胞分化及干细胞生物学⑦细胞死亡⑧细胞衰老⑨细胞工程⑩细胞的起源与进化3、细胞学说的基本内容是什么？答：①细胞是有机体，一切动植物都是由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成。
②每个细胞作为一个相对独立的单位，既有它自己的生命，又对与其他细胞共同组成的整体的生命有所助益。
③新的细胞可以通过已存在的细胞繁殖产生。
第二章细胞的统一性与多样性一、名词解释1、细胞：生命活动的基本单位。
2、病毒（virus）：非细胞形态生命体，最小、最简单的有机体，必须在活细胞体内复制繁殖，彻底寄生性。
3、原核细胞：没有核膜包裹的和结构的细胞，细菌是原核细胞的代表。
4、质粒：细菌的核外DNA。
细胞生物学第三、四、五章 习题
第二章细胞基本知识概要本章要点：本章对细胞的基本概念和基本共性作了简要概括，重点阐述原核细胞和真核细胞的特点。
要求重点掌握细胞的基本概念，重点掌握真核细胞与原核细胞的异同，了解制约细胞大小的因素及细胞的形态结构与功能的相关性。
第三章细胞生物学研究方法本章要点：本章对细胞生物学的一些研究方法作了简要介绍。
要求学生重点掌握细胞形态结构的观察方法（主要是光学显微镜、电子显微镜），细胞培养、细胞工程的基本技术，了解细胞组分的分析方法。
一、名词解释1、分辨率2、细胞培养3、细胞系4、细胞株5、原代细胞培养6、传代细胞培养7、细胞融合8、单克隆抗体二、填空题1、光学显微镜的组成主要分为、和三大部分，光学显微镜的分辨率由、和三个因素决定。
2、荧光显微镜是以为光源，电子显微镜则是以为光源。
3、倒置显微镜与普通光学显微镜的不同在于。
4、电子显微镜按工作原理和用途的不同可分为和。
5、电镜超薄切片技术包括、、、等四个步骤。
6、细胞组分的分级分离方法有、和。
7、利用超速离心机对细胞组分进行分级分离的常用方法有和。
8、电子显微镜使用的是透镜，而光学显微镜使用的是透镜。
9、杂交瘤是通过和两种细胞的融合实现的，由此所分泌的抗体称为。
10、观察活细胞的内部结构可选用显微镜，观察观察细胞的形态和运动可选用显微镜，观察生物膜的内部结构可采用法。
11、体外培养的细胞，不论是原代细胞还是传代细胞，一般不保持体内原有的细胞形态，而呈现出两种基本形态即和。
三、选择题1、由小鼠骨髓瘤细胞与某一B细胞融合后形成的细胞克隆所产生的抗体称（）。
A、单克隆抗体B、多克隆抗体C、单链抗体D、嵌合抗体2、要观察肝组织中的细胞类型及排列，应先制备该组织的（）A、滴片B、切片C、涂片D、印片3、提高普通光学显微镜的分辨能力，常用的方法有（）A、利用高折射率的介质（如香柏油）B、调节聚光镜，加红色滤光片C、用荧光抗体示踪D、将标本染色4、适于观察培养瓶中活细胞的显微镜是（）A、荧光显微镜B、相差显微镜C、倒置显微镜D、扫描电镜5、观察血细胞的种类和形态一般制备成血液（）A、滴片B、切片C、涂片D、印片6、冰冻蚀刻技术主要用于（）A、电子显微镜B、光学显微镜C、微分干涉显微镜D、扫描隧道显微镜7、分离细胞内不同细胞器的主要技术是（）A、超速离心技术B、电泳技术C、层析技术D、光镜技术8、利用差速离心法可从动物组织匀浆中分离出下列哪种细胞器（）A、溶酶体B、细胞核C、线粒体D、质膜9、Feulgen反应是一种经典的细胞化学染色方法，常用于细胞内（）A、蛋白质的分布与定位B、脂肪的分布与定位C、DNA的分布与定位D、RNA的分布与定位10、要探知细胞内某一蛋白质的表达水平，可通过（）实现。
《细胞生物学》 习题集参考答案
《细胞生物学》习题集参考答案第一章绪论一．填空题1．胡克，1665，原生动物，红细胞2．细胞的发现，细胞学说的建立，细胞学经典时期，实验细胞学时期3．能量守恒定律，细胞学说，达尔文进化论4．遗传信息的形成，膜的形成5．细胞内基因选择性表达特异功能蛋白质, 生物发育6．碱基互补配对7．全能性8．体细胞9．染色体DNA与蛋白质相互作用关系；细胞增殖、分化、凋亡（程序性死亡）的相互关系及调控；细胞信号转导研究或细胞结构体系的组装二．选择题1．C 2：D 3：C 4：D 5. Ｂ三：判断题1．√2。
√3。
√4：×（原生质包括细胞内所有的生活物质）5．×四．名词解释1．细胞生物学是应用现代物理学与化学的技术成就和分子生物学的概念与方法，以细胞作为生命活动的基本单位的思维为出发点，探索生命活动规律的学科，其核心问题将遗传与发育在细胞水平上结合起来。
2．生物大分子是指细胞中存在的那些分子质量巨大、结构复杂、具有生物活性的有机化合物，如以蛋白质、核酸、多糖及脂类等四大类为典型的生物大分子，它们是由多个氨基酸或核苷酸等小分子聚合而成的，具有广泛的生物活性，既是细胞的结构成分，又是细胞和种生命活动的执行者或体现者。
五．简答题1．Science Nature /Nature Cell Biology /Cell /Molecular Cell/ Developmental Cell /Cancer Cell/ Neuron/Journal of Cell Biology /Gene and Biology /Journal of Cell Science（参看课本P14）国内的相关学术刊物《中国科学》.《科学通报》.《分子细胞生物学报》.《细胞生物学杂志》.《遗传学报》.《动物学报》.《微生物学报》等（参看课本P14-15）2．（1）细胞结构功能→细胞生命活动。
细胞生命活动的研究，将进一步加深对细胞结构与功能的了解；（2）细胞中单一基因与蛋白→基因组与蛋白质组及在细胞生命活动中的协同作用，特别是复合体的相互作用；（3）细胞信号转导途径→信号调控网络；（4）体外（in vitro）研究→体内（in vivo）研究；（5）静态研究→活细胞的动态研究；（6）实验室研究为主→计算生物学更多地介入并与之结合；（7）细胞生物学与生物学其他学科的渗透→与数、理、化及纳米科学等多学科的交叉。
细胞生物学题库(含答案)
细胞生物学题库（含答案）1、胡克所发现的细胞是植物的活细胞。
x2、细胞质是细胞内除细胞核以外的原生质。
√3、细胞核及线粒体被双层膜包围着。
√一、选择题1、原核细胞的遗传物质分散在细胞的一个或几个区域中，密度高，与周围的细胞质并无明晰的界限，称为（b）a、核质b拟核c核液d核孔2、原核生物与真核生物最主要的差别是（a）a、原核生物无定形的细胞核，真核生物则存有b、原核生物的dna是环状，真核生物的dna是线状c、原核生物的基因mRNA和译者就是耦联的，真核生物则就是分离的d、原核生物没细胞骨架，真核生物则存有3、最轻的原核细胞就是（c）a、细菌b、类病毒c、支原体d、病毒4、哪一项不属于细胞学说的内容（b）a、所有生物都就是由一个或多个细胞形成b、细胞就是生命的最简单的形式c、细胞就是生命的结构单元d、细胞从起始细胞分裂而去5、下列哪一项不是原核生物所具有的特征（c）a、固氮作用b、光合作用c、有性产卵d、运动6、以下关于病毒的叙述不恰当的就是（a）a、病毒可完全在体外培养生长b、所有病毒必须在细胞内寄生c、所有病毒具备dna或rna做为遗传物质d、病毒可能将源于细胞染色体的一段7、关于核酸，以下哪项描述有误（b）a、是dna和rna分子的基本结构单位b、dna和rna分子中所含核苷酸种类相同c、由碱基、戊糖和磷酸等三种分子构成d、核苷酸分子中的碱基为含氮的杂环化合物e、核苷酸之间可以磷酸二酯键相连8、保持核酸的多核苷酸链的化学键主要就是（c）a、酯键b、糖苷键c、磷酸二酯键d、肽键e、离子键9、下列哪些酸碱对在生命体系中作为天然缓冲液？d－－2－a、h2co3/hco3b、h2po4/hpo4＋c、his/hisd、所有上述各项10、以下哪些结构在原核细胞和真核细胞中均存有存有？bcea、细胞核b、质膜c、核糖体d、线粒体e、细胞壁11、细胞的度量单位是根据观察工具和被观察物体的不同而不同，如在电子显微镜下观察病毒，计量单位是（c）a、毫米b、微米c、纳米d、埃四、简答题1、简述细胞学说的主要内容1、有机体就是由细胞形成的○2、细胞就是形成有机体的基本单位○3、新细胞来源于已存在细胞的分裂○2、详述细胞学发展的四个主要阶段1）细胞的发现阶段2）细胞学说的创立和细胞学的形成阶段3）细胞生物学的出现4）分子细胞生物学的兴起5、流动方形模型的主要特点就是：流动性和不对称性，不足之处就是忽略了pr对流动性的管制和流动的不能。
细胞生物学研究方法
细胞生物学研究方法一、填空题1.透射电子显微镜由、、三部分所组成。
2.在酵母人工染色体制备过程中，要使用酶脱去酵母的细胞壁，使之成为，并且进行观察和计数。
3.观察贴壁生长的培养动物细胞可用4.电子显微镜使用的是透镜，而光学显微镜使用的是透镜。
5.物质在紫外光照射下发出的荧光可分为和两种，其中需要将被照射的物质进行染色。
6.用紫外光为光源观察物体比用可见光的分辨率要高，这是因为7.相差显微镜与普通显微镜的区别是用替代可变光阑，用代替普通物镜。
8.倒置显微镜与普通显微镜的不同在于其9.显微镜的分辨本领是指能够能力，用来表示。
10.电子染色是用来增强电子的散射能力。
11.在光学显微镜下见到的结构称为，在电子显微镜下见到的结构称为12.细菌质膜的多功能性主要表现在:具有的呼吸作用，具有的分泌作用，具有的信号传导作用。
13.显微镜的分辨率约等于光波长的，通常把这一数值看成是光学显微镜分辩力的14.在同位素追踪技术中，用于研究DNA的同位素标记的前体物是15.单克隆抗体技术是将与无限繁殖的肿瘤细胞杂交的技术。
16.可用技术来研究质膜结构的不对称性。
17.乙醇沉淀DNA的主要原理是18.动物细胞培养所用的合成培养基中除含多种、和外，一般还需加入19.用荧光显微镜观察细胞时，经吖啶橙染色的细胞中的DNA发荧光，而RNA发荧光。
20.适于观察活细胞的光学显微镜有、和等。
21.分辨率是指人的肉眼或显微镜在25cm处能够分辨到的相邻两个物体间最近距离的能力。
人眼为，普通光学显微镜为，透射电子显微镜为，扫描隧道显微镜为，以紫外光为光源的光学显微镜为22.光学显微镜的组成主要分为、和三大部分，光学显微镜的分辩率由、和三种因素决定。
23.用紫外光为光源观察物体比用可见光的分辨率要高，这是因为24.荧光显微镜是以为光源，而电子显微镜则以作为光源。
25.电子显微镜按工作原理和用途的不同可分为和26.利用超速离心机对细胞组分进行分级分离的常用方法有和27.DNA/RNA、DNA/DNA杂交的分子基础是和28.对染色体上特异DNA序列进行分析的方法是二、判断题1.透射或扫描电子显微镜不能用于观察活细胞，而相差或倒置显微镜可以用于观察活细胞。
细胞生物学研究方法第四部分
视紫红质C端多位点的Ser/Thr残基磷酸化 抑制蛋白识别光受体的上述磷酸化位点
胞内受体 细胞表面受体
不同细胞对同一信号可能有不同受体，例如乙酰胆碱的骨骼 肌受体引起收缩，心肌受体则降低收缩频率。
同一信号在不同细胞可能引起不同的反应。
不同信号与各自受体结合后可能引起相同的反应。例如肝细 胞肾上腺素或胰高血糖素激活各自受体后，都能使糖元降解
通过细胞内受体介导的信号传递
以上功能并不是由Ca2+单独实施的，而是必需依赖于各
种钙结合蛋白。
CALMODULIN
钙调素广泛存在于动 植物细胞和原生动物， 是真核细胞的保守蛋 白之一。
Ca2+-CaM 复合体 可以 与蛋白激酶,离子通道, 或质膜的钙转运体系 相互作用。
细胞中某一微区Ca2+探针Fluo-3的荧光强度骤升一倍， 随后又在20ms内消失，故称钙火花。
IgE-抗体复合物、f-蛋氨酸多肽、乙酰胆碱等 G蛋白偶联的受体介导的细胞信号通路
cAMP信号通路 磷脂酰肌醇信号通路
G 蛋白
GTP结合蛋白 有小分子G蛋白（Ras）和异源三聚体G蛋白。前者
为单一肽链，在受体酪氨酸激酶的信号转导通路中 作为分子开关；后者由αβγ亚基组成，α亚基具 GTP酶活性。 具分子开关作用：α-GDP为“关”；α-GTP为“开”
为什么硝酸甘油能用于治疗心绞痛患者？
由 神经元产生的NO刺激突触前末梢使谷氨酸递 质不断释放，导致记忆的增强
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第二章细胞生物学研究方法一、名词解释1、resolution：分辨力是指显微镜或人眼在25cm的明视距离处，能清楚地分辨被检物体细微结构最小距离的能力。
能够区分的两点间的距离越小，表示分辨力越高。
2、显微结构：通过光学显微镜所观察到的样品的各种结构，如细胞的大小、外部形态以及细胞核、线粒体、高尔基复合体、中心体等内部构成都属于显微结构。
3、超微结构：也称亚显微结构。
指在电子显微镜下所观察到的细胞结构，如细胞核、线粒体、高尔基复合体、中心体、核糖体、微管、微丝等细胞器的微细结构。
4、细胞培养：指活细胞在体外的培养技术，即在无菌条件下，从机体中取出组织或细胞、模拟机体内正常生理状态下生存的基本条件，让它在培养皿中继续生存、生长和繁殖的方法。
5、原代培养：指从机体组织中取材后接种到培养基中所进行的细胞培养，即直接取材于机体的细胞培养。
所形成的细胞称原代细胞，它是在体外培养任何一种体细胞所必须经历的阶段和传代培养的基础。
6、传代培养：指当原代培养的细胞在培养瓶中生长、增殖到一定密度后，一分为二或以其他比例分装或转移到2个以上的培养瓶中所进行的再培养。
7、细胞融合：又称为细胞杂交，指细胞彼此接触时，2个或2个以上的细胞合并成为一个细胞的现象。
8、cell line ：原代培养首次传代成功后，则称之为细胞系。
如细胞系的生存期有限，则称之为有限细胞系；已获无限繁殖能力，能持续生存的细胞系，则称为连续细胞系或无限细胞系。
二、选择题【A1型题】1、A；2、B；3、B；4、A；5、C；6、D；7、A；8、D；9、C；10、D；11、C；12、A；13、A；14、B；15、C；16、A；17、E；18、A；19、C；20、D；21、C；22、E；23、A；24、D；25、B；26、E 【A2型题】1、E；2、D；3、C；4、D；5、A；6、B；7、C；8、D；9、D；10、A 【X型题】1、ACE；2、CDE；3、AE；4、CE；5、ABCD；6、ABC；7、ABCED；8、ACD；9、ABCD 三、填空题1、普通显微镜相差显微镜暗视野显微镜荧光显微镜 2、照明系统光学放大系统机械装置系统 3、电子照明系统电磁透镜成像系统真空系统记录系统电源系统 4、物镜和照明系统的位置颠倒5、扫描电子显微镜透射电子显微镜6、0.1μm 0.1mm 3nm 7、差速离心法密度梯度离心法8、0.2μm R=0.61λ／N.A. N.A.=n·sinα／2 9、细胞化学法荧光细胞化学和免疫荧光镜检术放射自显影技术细胞显微分光光度测定技术流式细胞计量术细胞组分的分级分离法10、冰冻蚀刻11、原代培养传代培养 12、单层生长形态变成多态性具有接触抑制现象13、体外环境不能与体内的条件完全等同四、判断题1、√；2、×；3、√；4、×；5、√；6、×；7、√；8、√；9、√；10、×；11、√；12、×；13、×；14、×五、简答题1、光学显微镜上调节光线强弱的装置有反光镜、聚光镜和光阑。
（1）反光镜：反光镜是安装在镜台下面、镜柱前方的—面可转动的圆镜。
用来调节光线，能将来自不同方向的光线收集起来反射到聚光镜中。
（2）聚光镜：聚光镜是位于镜台下方的—组透镜，用以汇集光线使其成束，增强照明度和视野的亮度。
（3）光阑：光阑是位于聚光镜底部的一个圆环状结构，装有多片半月形的薄金属片，叠合在中央形成弧形孔。
圆环外源的突起小柄可调节金属片的分开或合拢，作用是调节光线强弱，使物像变得清晰。
2、电镜和光镜从光源、透镜、成像和分辨力四方面不同。
（1）光源的不同：光学显微镜利用可见光作为光源，照明部分包括反光镜、聚光镜和光阑，可对入射光线进行集光并调节其强弱。
电镜是以电子束代替光源，以一根钨丝作为阴极发射电子，电子受到阳极吸引而加快速度，加速的电子通过阳极的微孔形成电子束，构成照明源。
（2）透镜的不同：光学显微镜的透镜由物镜、目镜组成，每种镜头由2～3个玻璃透镜构成，由于可见光能在空气中直线前进，所以玻璃透镜可直接在空气中工作。
电子显微镜使用产生轴对称磁场的精密线圈作为电磁透镜，以电磁场透镜代替玻璃透镜，但因为电子撞击空气分子将发生散射而不能直线前进，所以，镜筒中的空气必须抽出，保持高度真空。
（3）成像的不同：光学显微镜是通过物镜和目镜的—组玻璃透镜将标本上的微小物体放大成像。
在电子显微镜下，标本通过一个气闸送入真空镜筒，经聚光镜汇聚的平行电子束被物镜、中间镜和投影镜多级放大，最后在荧光屏上成像即时观察，或投射到照相底片上成像使底片感光作为永久记录。
（4）分辨力不同：光学显微镜分辨力可达200nm（油镜），电子显微镜分辨力为0.1 nm。
3、如果含有很多的其他分子，会与电子发生碰撞，使电子散射，引起眩光，影响成像质量；碰撞也会使电子束不稳定，产生闪烁现象；灼热的灯丝遇气体也易腐蚀和断裂。
4、因为电镜是电子成像。
肉眼无法观察带有“样品信息”的电子束。
所以要有记录系统来记录成像结果。
5、照明方式通常为落射式，即光源通过物镜投射于样品上；光源为紫外光，波长较短，分辨力高于普通显微镜；有两个特殊的滤光片，光源前的用以滤除可见光，目镜和物镜之间的用于滤除紫外线，用以保护人的眼睛。
6、冰冻蚀刻技术亦称冰冻断裂。
标本置于干冰或液氮中，进行冰冻。
然后用冷刀骤然将标本断开，升温后，冰在真空条件下迅即升华，暴露出了断裂面的结构。
冰升华暴露出标本内部结构的步骤称为蚀刻。
蚀刻后，再向断裂面上喷涂一层蒸气碳和铂。
然后将组织溶掉，把金属薄膜剥下来，此膜即为复膜。
复膜显示出了标本蚀刻画的形态，可置于电镜下观察。
电镜下的影像即代表标本中细胞断裂面处的结构。
7、高等生物是由多细胞构成的整体，在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内的功能活动是十分困难的。
但是如果把活细胞拿到体外培养进行观察和研究，则要方便得多，培养中的细胞不受体内复杂环境的影响，人为改变培养条件（如物理、化学、生物等外界因素的变化）即可进一步观察细胞在单因素或多因素影响下的生理功能变化。
活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动，特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格，稍有不适就要死亡。
所以，细胞培养技术就是选用最佳生存条件对活细胞进行培养和研究的最基本技术之一。
8、体外细胞培养技术的一般过程是：①准备工作，包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试。
②取材：在无菌环境／从机体取出某种组织细胞，经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接人培养器血中，这一过程称为取材。
如果是细胞株的扩大培养，则无取材这一过程。
③培养：将取得的组织细胞接人培养瓶或培养板中的过程称为培养。
如进行组织块培养，则直接将组织块接入培养器皿底部，几个小时后组织块可贴牢在底部，再加入培养基。
如进行分散细胞的培养，一般应在接种于培养器皿之前进行细胞计数，按要求以一定的量（以每毫升细胞数表示）接种于培养器皿并直接加入培养基。
细胞种于培养器皿后，立即放入培养箱中，使细胞尽早进入生长状态。
9、体外培养细胞必须注意三个环节：物质营养、生存环境和废物的排除。
体外培养细胞所需的营养是由培养基提供的。
培养基通常含有细胞生长所需的氨基酸、维生素和微量元素。
一般培养细胞所用的培养基是合成培养基，它含有细胞生长必需的营养成分：但是在使用合成培养基时需要添加一些天然成分，其中最重要的是血清，以牛血清为主。
这是因为血清中含有多种促细胞生长因子和一些生物活性物质。
由于血清中含有一些不明成分，对于特殊目的细胞培养是不利的。
为此，研究人员正在探索无血清培养细胞的条件，并已经取得一些进展。
由于机体内的细胞生长通常需要不同的细胞因子进行调节，所以，在无血清培养时仍然需要添加必要的因子，包括促细胞生长因子（如EGF），促贴附物（如层黏连蛋白）和其他活性物质（如转铁蛋白）。
无血清培养排除了有血清培养时血清中不明因素的干扰，使实验结果更加可靠。
体外细胞培养必须模拟体内细胞生长的环境。
环境因素主要是指无菌环境、合适的温度、一定的渗透压和气体环境。
气体主要有两种，即O和CO。
后者对于维持细胞培养液的酸碱度十分重要。
22活体内生长的细胞所产生的代谢物和废物通过一定的系统进行利用和排除。
体外培养细胞产生的代谢物和废物积累在培养液中，所以定期更换培养液，对于体外细胞培养也是至关重要的。
六、问答题1、分辨力表示的是能够区别两个点间最近距离的能力，所以广值越小，分辨力越高。
从分辨力的表达式来看，NA越大，分辨力越高，或者波长越短，分辨力越高。
当以可见光作光源，玻璃透镜的最大分辨力是多少呢？应从以下几个方面来考虑这一问题。
首先应如何尽可能地缩短波长。
可见光的波长范围是400～700nm，而可见光中的蓝色光波长最短，为450nm，所以光镜使用时应滤去其他杂色光。
第二是使NA的数值尽可能大，因为最好的玻璃透镜的镜口角是70°，所以sinα的最大值为0.94，空气的折光率（n）为1，因此玻璃透镜的最大数值孔径为0.94。
这样，我们可以计算光镜的最大分辨力了：假定用最好的玻璃透镜，角孔径为70°，用最短的可见光——蓝色光的波长为450nm，用空气作为光的折射介质，则最大分辨力为R=0.61λ／N.A.=0.61 ×450／0.94=292nm。
光镜中的油镜可用油作为光折射的介质，由于油的折光率为1.5，所以用油镜时，分辨力R=0.61λ／N.A.=0.61 ×450／1.5×0.94=196nm=0.2μm 在光学显微镜中，用紫外光作光源可使分辨率提高到0.1μm。
紫外光的波长较短，约为200～300nm。
但是，紫外光是肉眼不可见的，必须通过照相。
另外，用紫外光源时需用石英透镜，价格较高。
2、基本原理：动物高度分化的细胞核具有全套的个体遗传信息，保持着全能性，有发育为完整个体的潜在能力。
基本步骤：（1）取出一只成年母羊的乳腺上皮细胞，在低血清浓度下进行体外培养。
（2）取出卵细胞供体母羊的卵母细胞进行去核处理。
（3）利用电融合技术使乳腺上皮细胞与去核卵母细胞进行电融合。
（4）将融合细胞在体外培养至囊胚期。
（5）将囊胚移植到母羊的子宫内，使其着床和发育，直至生出小羊。
主要技术：细胞培养；细胞融合；胚胎培养和胚胎移植。