酵母培养基

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酵母表达培养基介绍

酵母表达培养基介绍

毕赤酵母表‎达的培养基‎配制[5]2.1 LB(Luria‎-Berta‎n i)培养基:Trypt‎o n l%Yeast‎Extra‎c t 0.5%NaCl l%PH 7.0制作平板时‎加入2%琼脂粉。

121℃高压灭菌 20min‎。

可于室温保‎存。

用于培养p‎P ICZα‎A原核宿主‎菌TOP1‎0F’时可加入Z‎e ocin‎25ug / ml。

2.2 LLB(Low Salt LB)培养基:Trypt‎o n l%Yeast‎Extra‎c t 0.5%NaCl 0.5%PH 7.0制作平板时‎加入2%琼脂粉。

121℃高压灭菌 20min‎。

可于室温保‎存数月。

用于培养p‎P ICZα‎A 原核宿主‎菌TOP1‎0F’时,加入Zeo‎c in 25ug / ml,可以4℃条件下保存‎1~2周。

2.3 YPD (又称YEP‎D)Yeast‎Extra‎c t Pepto‎n e Dextr‎o se Mediu‎m,(Yeast‎Extra‎c t Pepto‎n e Dextr‎o se Mediu‎m,酵母浸出粉‎/胰蛋白胨/右旋葡萄糖‎培养基)Trypt‎o n 2%dextr‎o se (gluco‎s e) 2%+agar 2%+Zeoci‎n‎100‎μg/ml‎液体YPD‎培养基可常‎温保存;琼脂YPD‎平板在4℃可保存几个‎月。

加入Zeo‎c in 100ug‎/ ml,成为YPD‎Z培养基,可以4℃条件下保存‎1~2周。

2.4 YPDS + Zeoci‎n培养基(Yeast‎Extra‎c t Pepto‎n e Dextr‎o se Mediu‎m):yeast‎extra‎c t 1%pepto‎n e 2%dextr‎o se (gluco‎s e) 2%sorbi‎t ol (山梨醇)1 M+agar 2%+ Zeoci‎n‎100‎μg/ml不管是液体‎YPDS培‎养基,还是YPD‎S + Zeoci‎n培养基,都必须存放‎4℃条件下,有效期1~2周。

酵母菌培养基

酵母菌培养基

麦芽汁培‎养基和马铃‎薯葡萄糖培‎养基被广泛‎用于培养酵‎母菌和霉菌‎。

马铃薯葡‎萄糖培养基‎有时也可用‎于培养放线‎菌。

豆芽汁‎葡萄糖培养‎基也是培养‎酵母菌及霉‎菌的一种‎优良培养基‎。

察氏培养‎基主要用于‎培养霉菌观‎察形态用。

‎麦芽汁培养‎基为天然培‎养基,马铃‎薯葡萄糖培‎养基和豆芽‎汁葡萄糖培‎养基二者均‎为半合成培‎养基,而察‎氏培养基‎则为合成培‎养基。

培养‎基配方中出‎现的自然p‎H系指培养‎基不经酸、‎碱调节而自‎然呈现的p‎H。

(一‎)麦芽汁培‎养基的配制‎1‎.培养基成‎分‎新鲜麦芽汁‎一般为10‎-15波林‎。

‎2.配制方‎法‎ (‎1)用水将‎大麦或小麦‎洗净,用水‎浸泡6-1‎2h,置于‎15℃阴凉‎处发芽,上‎盖纱布,每‎日早、中、‎晚淋水一次‎,待麦芽伸‎长至麦粒的‎两倍时,让‎其停止发芽‎,晒干或烘‎干,研磨成‎麦芽粉,贮‎存备用。

‎‎ (2)‎取一份麦芽‎粉加四份水‎,在65℃‎水浴锅中保‎温3-4h‎,使其自行‎糖化,直至‎糖化完全(‎检查方法是‎取0.5m‎l的糖化液‎,加2滴碘‎液,如无蓝‎色出现,即‎表示糖化完‎全)。

‎‎(3) ‎糖化液用4‎-6层纱布‎过滤,滤液‎如仍混浊,‎可用鸡蛋清‎澄清(用一‎个鸡蛋清,‎加水20 ‎m1,调匀‎至生泡沫,‎倒入糖化液‎中,搅拌煮‎沸,再过滤‎)。

‎(‎4)用波美‎比重计检测‎糖化液中糖‎浓度,将滤‎液用水稀释‎到10-1‎5波林,调‎p H至6.‎4。

如当地‎有啤酒厂,‎可用未经发‎酵,未加酒‎花的新鲜麦‎芽汁,加水‎稀释到10‎-15波林‎后使用。

‎‎ (5)‎如配固体麦‎芽汁培养基‎时,加入2‎%琼脂,加‎热融化,补‎充失水。

‎‎ (6)‎分装、加塞‎、包扎。

‎‎ (7)‎高压蒸汽灭‎菌 10‎0 Pa灭‎菌20 m‎i n。

‎(二)‎马铃薯葡萄‎糖培养基的‎配制‎1、培养‎基成分‎马铃薯‎‎‎‎‎‎‎‎‎‎20g ‎葡萄糖‎‎‎‎‎‎‎‎‎‎2 g ‎琼脂‎‎‎‎‎‎‎‎‎‎1.5-‎2g ‎水‎‎‎‎‎‎‎‎‎‎100m‎l‎自然pH ‎‎‎‎‎‎‎‎‎‎‎ 2.配‎制方法‎‎(1)配‎制20%马‎铃薯浸汁‎取去皮马‎铃薯200‎g,切成小‎块,加水1‎000m1‎。

酵母菌发酵培养基优化要点

酵母菌发酵培养基优化要点

❖ 本实验以菌体生物量为指标,用四因素三水 平的正交试验确定酵母菌的最优培养基。
实验步骤
一、培养基的配制
1.将葡萄糖、蔗糖、酵母提取粉、KH2PO4作为培养基的主要 影响因素,每一因素设定3个水平,进行四因素三水平的正交 试验,试验设计如表1
因素水平 A葡萄糖 /%
1
1.0
2
2.0
3
3.0
表1 正交试验表设计
(X1+X2+X3)/3 (X4+X5+X6)/3 (X7+X8+X9)/3
K最大- K最小
B
1 2 3 1 2 3 1 2 3
(X1+X4+X7)/3 (X2+X5+X8)/3 (X3+X6+X9)/3
K最大- K最小
C
1 2 3 3 1 2 2 3 1
(X1+X5+X9)/3 (X2+X6+X7)/3 (X3+X4+X8)/3
1(1.0)
1(0)
1(1.0)
2(1)
1(1.0)
3(2)
2(2.0)
1(0)
2(2.0)
2(1)
2(2.0)
3(2)
3(3.0)
1(0)
3(3.0)
2(1)
3(3.0)
3(2)
C酵母提 取粉/%
1(0.5) 2(1) 3(1.5) 2(1) 3(1.5) 1(0.5) 3(1.5) 1(0.5) 2(1)
C酵母提取 D KH2PO4
粉/%
/%
1(0.5)
1(0.5)
2(1)
2(1)
3(1.5)

酵母表达培养基介绍

酵母表达培养基介绍

毕赤酵母表达的培养基配制[5]2.1 LB(Luria-Bertani)培养基:Trypton l%Y east Extract 0.5%NaCl l%PH 7.0制作平板时加入2%琼脂粉。

121℃高压灭菌20min。

可于室温保存。

用于培养pPICZαA原核宿主菌TOP10F’时可加入Zeocin 25ug / ml。

2.2 LLB(Low Salt LB)培养基:Trypton l%Y east Extract 0.5%NaCl 0.5%PH 7.0制作平板时加入2%琼脂粉。

121℃高压灭菌20min。

可于室温保存数月。

用于培养pPICZαA 原核宿主菌TOP10F’时,加入Zeocin 25ug / ml,可以4℃条件下保存1~2周。

2.3 YPD (又称YEPD)Y east Extract Peptone Dextrose Medium,(Y east Extract Peptone Dextrose Medium,酵母浸出粉/胰蛋白胨/右旋葡萄糖培养基)Trypton 2%dextrose (glucose) 2%+agar 2%+Zeocin 100 μg/ml液体YPD培养基可常温保存;琼脂YPD平板在4℃可保存几个月。

加入Zeocin 100ug / ml,成为YPDZ培养基,可以4℃条件下保存1~2周。

2.4 YPDS + Zeocin 培养基(Y east Extract Peptone Dextrose Medium):yeast extract 1%peptone 2%dextrose (glucose) 2%sorbitol (山梨醇)1 M+agar 2%+ Zeocin 100 μg/ml不管是液体YPDS培养基,还是YPDS + Zeocin 培养基,都必须存放4℃条件下,有效期1~2周。

2.5 MGYMinimal Glycerol Medium (最小甘油培养基)(34%YNB;1%甘油;4*10-5%生物素)。

酵母液体培养基配方

酵母液体培养基配方

酵母液体培养基配方
酵母是一种单细胞真菌,广泛应用于食品、饮料、医药和工业等领域。

酵母液体培养基是酵母生长和繁殖的基础,其配方的优劣直接影响到酵母生长的效果和产物的质量。

以下是一种常用的酵母液体培养基配方:
1. 酵母营养素:10克/升
2. 柠檬酸:5克/升
3. 葡萄糖:20克/升
4. 氯化镁:1克/升
5. 柠檬酸钠:5克/升
6. 酵母提取物:1克/升
以上配方在水中充分溶解混合后,以121°C高压灭菌30分钟即可使用。

此配方可支持大多数酵母生长和繁殖。

需要注意的是,不同的酵母种类对营养素的需求有所不同,因此在实际应用中,可以根据具体情况调整培养基的配方,以获得更好的生长效果和产物质量。

- 1 -。

酵母表达过程中用到的培养基

酵母表达过程中用到的培养基

酵母表达过程中用到的培养基毕赤酵母表达的培养基配制[5]2.1 LB(Luria-Bertani)培养基:Trypton l%Yeast Extract 0.5%NaCl l%PH 7.0制作平板时加入2%琼脂粉。

121℃高压灭菌20min。

可于室温保存。

用于培养pPICZαA 原核宿主菌TOP10F’时可加入Zeocin 25ug / ml。

2.2 LLB(Low Salt LB)培养基:Trypton l%Yeast Extract 0.5%NaCl 0.5%PH 7.0制作平板时加入2%琼脂粉。

121℃高压灭菌20min。

可于室温保存数月。

用于培养pPICZαA原核宿主菌TOP10F’时,加入Zeocin 25ug / ml,可以4℃条件下保存1~2周。

2.3 YPD (又称YEPD)Yeast Extract Peptone Dextrose Medium,(Yeast Extract Peptone Dextrose Medium,酵母浸出粉/胰蛋白胨/右旋葡萄糖培养基)Trypton 2%dextrose (glucose) 2%+agar 2%+Zeocin 100 μg/ml液体YPD培养基可常温保存;琼脂YPD平板在4℃可保存几个月。

加入Zeocin 100ug / ml,成为YPDZ培养基,可以4℃条件下保存1~2周。

2.4 YPDS + Zeocin 培养基(Yeast Extract Peptone Dextrose Medium):yeast extract 1%peptone 2%dextrose (glucose) 2%sorbitol (山梨醇)1 M+agar 2%+ Zeocin 100 μg/ml不管是液体YPDS培养基,还是YPDS + Zeocin 培养基,都必须存放4℃条件下,有效期1~2周。

2.5 MGYMinimal Glycerol Medium (最小甘油培养基)(34%YNB;1%甘油;4*10-5%生物素)。

酵母菌发酵培养基的优化

酵母菌发酵培养基的优化
详细描述
酵母菌可以利用多种碳源,如糖、糖蜜、淀粉等,其中葡萄糖是最常用的碳源, 因为其易得且能够快速被酵母菌利用。在优化培养基时,可以根据实际需求选 择合适的碳源及其浓度。
氮源
总结词
氮源是酵母菌发酵培养基中必不可少的成分,用于合成蛋白质、核酸等细胞成分 。
详细描述
酵母菌可以利用多种氮源,如氨、尿素、氨基酸等。在选择氮源时,需要考虑其 适用性和成本效益。在某些情况下,添加适量的氨或尿素可以促进酵母菌的生长 和代谢。
研究结论
优化后的培养基能够显著提高 酵母菌的发酵效率和产物产量, 降低生产成本。
通过实验对比,优化后的培养 基在营养成分、pH值、渗透压 等方面均表现出更好的性能。
优化过程中采用的单因素实验 和正交实验方法为培养足与展望
1
尽管本研究取得了一定的成果,但仍需进一步探 究不同酵母菌种的最佳培养条件和营养需求。
正交实验法
总结词
通过设计正交表,对多个因素进行同时调整,以找出最优组合。
详细描述
正交实验法是一种高效且科学的方法,通过设计正交表,对多个因素进行同时调整,以找出最优组合。这种方法 可以同时考虑多个因素对酵母菌生长的影响,避免了单因素实验的片面性,提高了实验效率和准确性。
响应面法
总结词
通过构建数学模型,描述酵母菌生长与培养 基成分之间的关系,并找出最优解。
结果讨论
本实验通过添加不同种类的营养物质,发现 葡萄糖、蛋白胨和酵母提取物对酵母菌的生 长具有促进作用。
在实际生产中,可以根据需要选择合适的营 养物质配比,以达到最佳的酵母菌发酵效果 。
本实验结果可为酵母菌发酵培养基的优化提 供一定的参考依据,有助于提高酵母菌发酵 产物的产量和质量。
05

酵母菌培养操作

酵母菌培养操作

酵母菌培养操作一、引言酵母菌是一类单细胞真菌,广泛存在于自然界中的土壤、水体、植物和动物体内。

它们在生物学、医学和工业领域中具有重要的应用价值。

为了研究酵母菌的生理特性和生物学功能,科研人员经常需要进行酵母菌的培养操作。

本文将介绍一种常用的酵母菌培养方法。

二、材料和试剂准备1. 培养基:选择适合酵母菌生长的培养基,如YPD培养基(1%酵母粉、2%蛋白胨、2%葡萄糖)。

2. 培养器具:培养皿、试管、离心管等。

3. 酵母菌菌株:选择所需的酵母菌菌株。

三、酵母菌的分离和接种1. 从酵母菌菌株保存液中取出所需的菌株。

2. 在无菌条件下,将菌株转移到含有YPD培养基的试管中。

3. 进行适当的稀释,使培养液中的菌落数量适中。

4. 震荡培养液,使菌落均匀悬浮于培养基中。

四、酵母菌的培养条件1. 温度:酵母菌的生长温度一般为28-30摄氏度,根据不同的菌株和实验目的可以进行调整。

2. pH值:酵母菌的最适生长pH通常在5-6之间,也可以根据具体要求进行调整。

3. 培养时间:酵母菌的培养时间根据实验目的和菌株的生长速度而定,一般为24-48小时。

五、酵母菌的培养方法1. 平板培养法:将适量的酵母菌培养液均匀倒在培养皿中,待其凝固后,将所需的酵母菌菌株接种在培养基表面,然后在恰当的温度下培养一段时间,观察菌落形态和数量。

2. 液体培养法:将适量的酵母菌培养液倒入无菌的离心管中,加盖后在恰当的温度下培养一段时间,观察菌液浑浊度和细胞数量的变化。

3. 摇瓶培养法:将适量的酵母菌培养液倒入无菌的摇瓶中,盖紧盖子后在恰当的温度下进行摇床培养,可以获得大量的酵母菌菌液。

六、酵母菌的保存1. 冷冻保存:将酵母菌培养液加入等体积的甘油溶液中,混匀后分装在无菌冷冻管中,置于-80摄氏度的冷冻箱中保存。

2. 高温保存:将酵母菌培养液均匀涂布在含有蔗糖的平板培养基上,置于30-37摄氏度的恒温箱中保存。

七、实验注意事项1. 所有实验操作必须在无菌条件下进行,避免外界细菌和真菌的污染。

酿酒酵母培养基配方

酿酒酵母培养基配方

种子培养基(g/L ) : 无氨基酵母氮源(YNB, Difco) 15, 尿嘧啶0. 04, 腺嘌岭0. 04, 色氨酸0. 02,组氨酸0.02, 精氨酸0.02, 蛋氨酸0.02, 苏氨酸0.03。

常规发酵培养基(g/L ) : 大豆蛋白胨(Difco )40, 酵母粉(Difco) 40, 葡萄糖20。

合成培养基由葡萄糖(60 g/L )、氨基酸、微量矿物质和维生素构成。

氨基酸成分与种子培养基相同。

微量矿物质和维生素的构成如下:微量矿物质(g/L ) : (NH4)2SO4 20, KH2PO4 0.3, M gSO4·7H2O 0.5, EDTA 1.5, ZnSO4·7H2O0.0045, CoCl2 · 6H2O 0.003, M nCl2 · 4H2O 0.001, CuSO4 ·5H2O 0.003, CaCl2 ·2H2O 0.0045, FeSO4·7H2O 0.003, H3BO3 0.001, KI 0.001(121 °C灭菌30 m in)。

维生素(mg/L ) : 生物素0.5, 泛酸0.1, 尼克酸1.0, 肌醇25.0, 硫胺素1.0, 吡哆酸1.0, 对氨基苯甲酸20, 叶酸1, 胆碱15, 核黄素4 (过滤灭菌)。

合成培养基(g/L ):1,(NH4)2SO4 25,KH2PO4 25,MgSO47.3,CaSO4.2H2O 12,YNB 13.4,His 1,Leu 2,Trp 23,PTM1 4ml4,甘油3050%甘油补料(g/L ):1,甘油5002,12ml PTM13,His 1,Leu 2,Trp 220%半乳糖诱导(g/L ):1,半乳糖2002,6ml PTM13,His 1,Leu 2,Trp 2。

酵母菌液体培养基配方

酵母菌液体培养基配方

酵母菌液体培养基配方酵母菌液体培养基是一种用于培养和繁殖酵母菌的培养基。

它提供了酵母菌所需的营养物质和环境条件,使其能够正常生长和繁殖。

下面将介绍一种常用的酵母菌液体培养基配方。

配方:- 葡萄糖(20 g/L):提供碳源,为酵母菌提供能量。

- 酵母浸出物(10 g/L):提供氮源和维生素,促进酵母菌的生长和繁殖。

- 酵母精蛋白(5 g/L):提供氮源和维生素,增强酵母菌的生长和繁殖能力。

- 氯化镁(1 g/L):提供镁离子,维持细胞内环境稳定。

- 磷酸二氢钾(3 g/L):提供磷酸盐,为酵母菌提供磷源。

- 氯化钙(0.1 g/L):提供钙离子,维持细胞内钙离子平衡。

- 硫酸镁(0.5 g/L):提供镁离子,维持细胞内环境稳定。

- 硫酸钾(0.5 g/L):提供钾离子,维持细胞内钾离子平衡。

- 硫酸铵(1 g/L):提供氮源,为酵母菌提供氮源。

- 氯化钠(1 g/L):提供钠离子,维持细胞内钠离子平衡。

- 红曲粉(0.01 g/L):提供维生素和生长因子,促进酵母菌的生长和繁殖。

将葡萄糖、酵母浸出物、酵母精蛋白、氯化镁、磷酸二氢钾、氯化钙、硫酸镁、硫酸钾、硫酸铵和氯化钠按照配方中的比例加入适量的蒸馏水中。

然后,将培养基混合均匀,并用蒸馏水调整pH值,使其保持在5.5-6.0的范围内。

pH的调整可以使用盐酸或氢氧化钠溶液进行。

接下来,将培养基分装到装有适量的量筒或瓶中,并用塞子或铝箔密封,以防止细菌和其他污染物的进入。

将培养基在121摄氏度高压蒸汽灭菌器中进行高温高压灭菌处理,以杀灭其中的细菌和其他有害微生物。

完成以上步骤后,酵母菌液体培养基就可以用于培养和繁殖酵母菌了。

总结:酵母菌液体培养基配方的制备是一个相对简单的过程,只需要将适量的各种营养物质按照一定比例加入蒸馏水中,并进行适当的pH 调整和高温高压灭菌处理,就可以得到一种适用于酵母菌生长和繁殖的培养基。

这种培养基可以广泛应用于酵母菌的实验室研究和工业生产中,为酵母菌的生长和繁殖提供了必要的条件和营养物质。

酵母菌培养基的配置流程

酵母菌培养基的配置流程

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在配置酵母菌培养基之前,需要做好充分的准备。

酵母菌培养操作

酵母菌培养操作

酵母菌培养操作酵母菌是一类单细胞真菌,广泛应用于食品发酵、酿造工业以及生物学研究中。

为了获得高质量的酵母菌培养物,我们需要进行一系列的培养操作,包括选择合适的培养基、接种、培养条件控制等。

本文将介绍酵母菌培养操作的步骤和注意事项。

一、选择合适的培养基酵母菌的培养基主要包括液体培养基和固体培养基两种。

液体培养基适用于大规模培养,而固体培养基则适合于分离纯种菌落。

常用的液体培养基有YPDA培养基和YPG培养基,固体培养基则是在液体培养基中加入2%的琼脂。

二、接种酵母菌接种是酵母菌培养的第一步,也是最关键的一步。

首先需要从冷冻保存的酵母菌液氮罐中取出酵母菌菌种,用无菌吸管将菌液转移到无菌培养基中。

然后将培养基倒入含有酵母菌菌种的培养瓶中,摇匀后放入恒温摇床中培养。

三、培养条件控制酵母菌的生长需要适宜的温度、pH值和营养物质。

一般来说,酵母菌的最适温度为30℃,pH值为5-6。

此外,酵母菌还需要一定的营养物质,如碳源、氮源、矿物质等。

在培养过程中,需要根据菌株的不同特点和需求进行调控。

四、培养时间控制酵母菌的培养时间一般为24-48小时,具体时间取决于菌株的生长速度和培养条件的控制。

在培养的过程中,需要定期观察菌液的浑浊度和菌体的形态,以判断是否需要停止培养。

五、酵母菌分离与纯化在酵母菌培养过程中,可能会出现多个菌株混合生长的情况。

为了获得纯种菌株,需要进行菌落分离。

具体方法是将培养物均匀涂布在固体培养基上,培养一段时间后,通过菌落形态和颜色的差异,选择目标菌落进行传代培养。

六、保存酵母菌菌种为了长期保存酵母菌菌种,可以采用冷冻保存或冻干保存的方法。

冷冻保存是将酵母菌菌种悬浮液加入到甘油中,然后在液氮罐中保存。

而冻干保存则是将酵母菌菌落在无菌条件下冻干,并保存在低温干燥的环境中。

总结起来,酵母菌培养操作是一个复杂而关键的过程,需要仔细控制培养基的选择、接种、培养条件的调控以及菌株的分离与纯化。

只有通过科学规范的操作,才能获得高质量的酵母菌培养物,为后续的实验研究提供可靠的基础。

微生物(酵母)的培养基优化

微生物(酵母)的培养基优化

实验一微生物(酵母)的培养基优化(指导教师:汪文俊熊海容王海英肖新才实验员: 张继泰) 一.实验目的:掌握微生物斜面培养基、种子培养基及发酵培养基确定方法,学会对已确定菌种确定实验室发酵工艺。

二.实验原理生物量的测定方法有比浊法和直接称重法等。

由于酵母在液体深层通气发酵过程中是以均一混浊液的状态存在的,所以可以采用直接比色法进行测定。

三.仪器与试剂全恒温振荡培养箱,分光光度计、电热恒温水浴槽、天平、电炉。

试剂为葡萄糖、蔗糖、酵母浸粉、KH2PO4。

四.实验方法(1)、培养基的配制(见表1,2)表1 正交表试验设计因素水平葡萄糖蔗糖酵母膏KH2PO41 1.0 0.0 0.5 0.52 2.0 1.0 1.0 1.03 3.0 2.0 2.0 2.0表2 正交表实验方案编号葡萄糖(A) 蔗糖(B)酵母膏(C)KH2PO4(D)生物量(OD)h12h24h36h48h60h1 (1) (1) (1) (1)2 (1) (2) (2) (2)3 (1) (3) (3) (3)4 (2) (1) (2) (3)5 (2) (2) (3) (1)6 (2) (3) (1) (2)7 (3) (1) (3) (2)8 (3) (2) (1) (3)9 (3) (3) (2) (1)(2)将上述培养基配制好以后,每250 ml三角瓶装入培养基100 ml,于121℃下灭菌30 min,冷却。

(3)冷却后接种(接种量为5%),置于28℃培养箱进行培养。

(4)测OD值:将接种0 h、12 h、24 h、36 h、48 h、60 h不同时间的菌悬液摇均匀后于560nm波长、1cm比色皿中测定0D值。

比色测定时,用以未接种的培养基作空白对照,并将0D值填入表中,最终确定最佳培养基的组成及发酵时间。

五.思考题(1)比浊计数在生产实践中有何应用价值?(2)本实验为什么采用560nm波长测定酵母菌悬液的光密度?如果你在实验中需要测定大肠杆菌生长的OD值,你将如何选择波长?实验二紫外线的诱变育种(指导教师:汪文俊熊海容王海英肖新才实验员: 张继泰) 一.目的要求通过实验,观察紫外线对枯草芽孢杆菌的诱变效应,并学习物理因素诱变育种的方法。

培养基酵母粉规格要求

培养基酵母粉规格要求

培养基酵母粉规格要求培养基酵母粉规格要求概述导言培养基酵母粉是一种常用的实验室培养基,广泛应用于微生物学、细胞生物学和生物化学等领域。

它是由培养基配方和培养基酵母粉两部分组成的,其中培养基酵母粉扮演着提供营养和生长因子的重要角色。

在本文中,我将全面评估培养基酵母粉的规格要求,并根据其深度和广度的要求探讨这一主题。

1. 培养基酵母粉的基本概念和背景(提及主题文字)在开展相关研究之前,了解培养基酵母粉的基本概念和背景是至关重要的。

培养基酵母粉是从酵母菌中提取得到的含有丰富营养和生长因子的粉末。

其主要成分包括蛋白质、碳水化合物、维生素和矿物质等,这些都是酵母菌正常生长和繁殖所必需的。

培养基酵母粉在实验室中作为培养基的重要组成部分,可以为酵母菌提供充足的营养和适宜的环境条件。

2. 培养基酵母粉的规格要求和选择(提及主题文字)在选择培养基酵母粉时,我们需要考虑几个重要的规格要求。

酵母菌的种类和应用领域将决定我们选择的培养基酵母粉的类型。

对于酿酒业或食品产业中的酵母菌,我们可以选择专门用于这些应用领域的培养基酵母粉。

培养基酵母粉的营养成分也是选择的重要因素。

我们需要保证培养基酵母粉含有充足的蛋白质、碳水化合物、维生素和矿物质等,以满足酵母菌的生长需求。

培养基酵母粉应该是纯净的,不含有杂质和其他微生物,以避免对实验结果的影响。

培养基酵母粉的稳定性和保存性也是我们需要考虑的因素。

良好的培养基酵母粉应该具有较长的保存期限,并且在常规的保存条件下不易受到污染或降解。

3. 培养基酵母粉的制备和使用方法(提及主题文字)对于制备和使用培养基酵母粉,我们需要遵循一定的方法和步骤。

我们需要根据所选培养基酵母粉的规格要求以及实验要求来选择合适的载体。

按照规定的比例将培养基酵母粉溶解在适量的溶液中,并加热或搅拌以促进溶解。

接下来,我们可以根据实验需求来添加其他成分,例如抗生素或诱导物,以调整培养基的特性。

完成后,将溶液进行高温或高压灭菌处理,以确保培养基酵母粉中的微生物被杀死。

酵母转化常用培养基及程序

酵母转化常用培养基及程序

酵母实验操作方案一.质粒酶切及线性化1)用维特洁日常型小量DNA纯化试剂盒抽提9KSF2,可得到较纯的质粒10μg/3ml菌液,终体积80ul。

2)线性化质粒使用80μl酶切体系9KSF2质粒70μl内切酶(SacI,SalI,BglⅡ)2μl10 x buffer 8μl3)酶切3-16小时,一般3小时即可;二.乙醇回收酶切质粒1)2倍体积无水乙醇和0.1倍体积的3M NaAC(PH 5.2),混匀,沉淀DNA;2)-200C数个小时(>2小时),13,200rpm离心10~20分钟,吸弃上清;3)300ul 70%乙醇洗一次,13,200rpm离心10分钟,吸弃上清(注意离心管位置,从含有DNA的离心管另一侧吸取);4)37℃烘干水分和残留乙醇;5)用20μl ddH2O重溶;6)1ul样品电泳检测DNA量,计算DNA总量;三.电转化1.准备感受态细胞1)5ml YPD 接种GS115单菌落,250rpm,300C,摇菌24 hours;2)100ml YPD,接种百分之一,同时留1ml空白YPD,300C ,250rpm,7~8hours,直到OD600=1.3~1.5;3)菌液转入500ml离心管,JA14,1500g,40C离心5 min,弃上清;4)100ml冰水重悬,同上离心,弃上清;5)80~90ml冰水重悬【50ml】,同上离心,弃上清;6)20ml冰1M sorbitol 重悬【5ml】,然后转移到50ml 离心管中,同上离心,弃上清;7)约150μl 1M sorbitol重悬【250ul】,40C备用,剩下的感受态细胞可以保存在-700C冰箱大约3周。

2.转化1)100μl GS115感受态细胞加入+20μl 线性化质粒,用枪打匀;2)冰浴5min,加入0.2cm转化杯中,轻轻将液体震到杯底,立即冰浴;3) 电转化,参数设定:电压1500V 电容25μF电阻200欧姆,放电时间4~5ms4)立即加650μl 冰1M sorbitol 入转化杯,打匀;5) 迅速涂板,250μl/块MD板,共3块;6) 涂好的板放在300C培养箱中培养4~5天,至菌落直径1mm即可。

酵母菌霉菌常用培养基的配方

酵母菌霉菌常用培养基的配方

酵母菌、霉菌常用培养基的配制一、目的要求了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。

学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的配制方法。

二、基本原理麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。

马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。

豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。

察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。

麦芽汁培养基为天然培养基,马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基,而察氏培养基则为合成培养基。

培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。

三、实验材料(一)药品葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O,FeS04、琼脂。

(二)仪器天平、高压蒸汽灭菌锅。

(三)玻璃器皿移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养皿、玻璃漏斗等。

(四)其他物品药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。

四、实验内容(一)麦芽汁培养基的配制1.培养基成分新鲜麦芽汁一般为10-15波林。

2.配制方法(1)用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡6—12h,置于15℃阴凉处发芽,上盖纱布,每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,研磨成麦芽粉,贮存备用。

(2)取一份麦芽粉加四份水,在65℃水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)。

(3)糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水20 m1,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤).(4)用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10—15波林,调p H至6.4。

如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到10—15波林后使用.(5)如配固体麦芽汁培养基时,加入2%琼脂,加热融化,补充失水。

酵母转化常用培养基及程序

酵母转化常用培养基及程序

酵母实验操作方案一.质粒酶切及线性化1)用维特洁日常型小量DNA纯化试剂盒抽提9KSF2,可得到较纯的质粒10μg/3ml菌液,终体积80ul。

2)线性化质粒使用80μl酶切体系9KSF2质粒70μl内切酶(SacI,SalI,BglⅡ)2μl10 x buffer 8μl3)酶切3-16小时,一般3小时即可;二.乙醇回收酶切质粒1)2倍体积无水乙醇和0.1倍体积的3M NaAC(PH 5.2),混匀,沉淀DNA;2)-200C数个小时(>2小时),13,200rpm离心10~20分钟,吸弃上清;3)300ul 70%乙醇洗一次,13,200rpm离心10分钟,吸弃上清(注意离心管位置,从含有DNA的离心管另一侧吸取);4)37℃烘干水分和残留乙醇;5)用20μl ddH2O重溶;6)1ul样品电泳检测DNA量,计算DNA总量;三.电转化1.准备感受态细胞1)5ml YPD 接种GS115单菌落,250rpm,300C,摇菌24 hours;2)100ml YPD,接种百分之一,同时留1ml空白YPD,300C ,250rpm,7~8hours,直到OD600=1.3~1.5;3)菌液转入500ml离心管,JA14,1500g,40C离心5 min,弃上清;4)100ml冰水重悬,同上离心,弃上清;5)80~90ml冰水重悬【50ml】,同上离心,弃上清;6)20ml冰1M sorbitol 重悬【5ml】,然后转移到50ml 离心管中,同上离心,弃上清;7)约150μl 1M sorbitol重悬【250ul】,40C备用,剩下的感受态细胞可以保存在-700C冰箱大约3周。

2.转化1)100μl GS115感受态细胞加入+20μl 线性化质粒,用枪打匀;2)冰浴5min,加入0.2cm转化杯中,轻轻将液体震到杯底,立即冰浴;3) 电转化,参数设定:电压1500V 电容25μF电阻200欧姆,放电时间4~5ms4)立即加650μl 冰1M sorbitol 入转化杯,打匀;5) 迅速涂板,250μl/块MD板,共3块;6) 涂好的板放在300C培养箱中培养4~5天,至菌落直径1mm即可。

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