微生物学实验-细菌染色

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实验五 细菌的革兰氏染色

实验五 细菌的革兰氏染色

菌;如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也会被
染成革兰氏阳性菌。
2.菌龄也有影响。若菌龄太老,由于菌体死亡
或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应。 3.不要涂片太厚,会造成假阴性或假阳性。
五、实验结果:
红色菌:革兰氏阴性菌
紫色菌:革兰氏阳性菌
菌名 大肠杆菌 金黄色葡 萄球菌
菌体形态
菌体颜色
G+或 G

六、思考题
3.固定
固定常常利用高温,手持载玻片的一端,标本向上,在酒 精灯火焰外层尽快的来回通过 2~3次,共约2~3秒钟,并不时以
载玻片背面加热触及皮肤,不觉过烫为宜(不超过60℃),放置
待冷后,进行染色。 4.初染 用草酸铵结晶紫染色1-2min后倾去染液,水洗至流出水无色。 5、媒染 先用碘液冲去残留水迹,再加碘液覆盖媒染1min后水洗。 6.脱色 斜置载玻片,滴加95%乙醇脱色,至流出的乙醇不现紫色为 止,大约需时20~30s,随即水洗。
菌蒸馏水,将接种环在火焰上烧红,待冷却后从斜面挑取少
量菌种与玻片上的水滴混匀后,在载玻片上涂布成一均匀的 薄层,涂布面不宜过大。
2.干燥
涂片最好在室温下使其自然干燥,有时为了使之干得更
快些,可将标本面向上,手持载玻片一端的两侧,小心地在
酒精灯上高处微微加热,使水分蒸发,但切勿紧靠火焰或加 热时间过长,以防标本烤枯而变形。
1、造成革兰氏染色结果不正确(假阴 性或假阳性)的主要原因有哪些? 2、你认为革兰氏染色法中那个步骤可 以省略?在什么情况下?
三、实验仪器及材料
1.仪器:显微镜、酒精灯等 2.实验材料: 菌种:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌 染色剂:草酸铵结晶紫染液、碘液、 番红、95%乙醇
四、实验内容与步骤

细菌染色原理

细菌染色原理

细菌染色原理
细菌染色是一种常用的实验方法,用于观察和分析细菌的形态和结构。

其原理基于细菌细胞壁的化学组成和特性。

常见的细菌染色方法包括革兰氏染色和酸性忍性染色。

革兰氏染色是通过不同化学反应使细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

此方法基于细菌细胞壁中的一个重要成分——胞外聚糖多聚醣。

在染色过程中,先将细菌涂片进行固定,然后涂抹革兰染色液,接着用碘液处理,最后进行洗涤和观察。

革兰氏阳性菌因其细胞壁含有较多的聚醣和较少的脂类成分,因此革兰染色后呈紫色。

革兰氏阴性菌由于细胞壁含有较少的聚醣和较多的脂类成分,革兰染色后呈红色。

酸性忍性染色是通过比较细菌细胞壁的乙酸溶解性来区分忍性菌和非忍性菌。

由于细菌细胞壁的组成和结构的不同,某些细菌对酸性染色液中的醋酸溶解更敏感,会导致其失去染色,而其他细菌则能够保持染色。

酸性忍性染色方法简单快捷,常用于区分不同类型的细菌。

细菌染色的基本原理是通过染色剂与细菌细胞壁相互作用,将细菌显现出不同的颜色或形态,从而进行分类和鉴定。

此外,还可以通过染色方法来检测细菌是否存在某种特定的化学成分,例如酸性染色中的抗酸染色技术可用于检测结核菌的存在。

总之,细菌染色的原理基于细菌细胞壁的化学组成和特性。

通过选择合适的染色剂和方法,能够使细菌在显微镜下呈现出不同的颜色和形态,从而实现对细菌的分类和鉴定。

细菌染色原理

细菌染色原理

细菌染色原理细菌染色是一种常用的实验技术,用于观察和鉴定细菌的形态、结构和染色性质。

细菌染色的原理主要基于细菌的细胞壁特性和染色剂的化学性质。

在细菌染色过程中,常使用的染色剂包括靛派液(即克氏染色)、革兰氏染色和抗酸染色等。

这些染色剂与细菌细胞壁的成分发生特定的化学反应,从而使细菌产生不同的染色效果。

靛派液是一种由甲基蓝和紫贝涅染料组成的混合溶液,广泛用于细菌的染色。

靛派液中的染料会与细菌细胞壁中的多肽聚糖结合,形成染色复合物。

对于革兰氏阳性细菌,由于其细胞壁中含有较多的多肽聚糖,因此会呈现紫色的染色效果。

而对于革兰氏阴性细菌,其细胞壁中的多肽聚糖较少,因此会呈现粉红色的染色效果。

革兰氏染色则是一种常用的区分细菌的方法。

在革兰氏染色中,首先用靛派液染色,接着使用碘酒处理。

碘酒会使得染色复合物与细菌细胞壁之间形成较为稳定的络合物。

然后通过酒精和无水酒精的连续洗涤,使得革兰氏阳性细菌中的乳酸和某些酶脱色,但革兰氏阴性细菌中的染色物质受到抗脱色作用,保持染色。

最后使用肥大脱色剂将细菌细胞壁中残留的颜料去除。

这样处理后,革兰氏阳性细菌呈现紫色染色,而革兰氏阴性细菌呈现粉红色染色。

抗酸染色是一种特殊的细菌染色方法,适用于某些特定细菌的鉴定。

在抗酸染色中,染色剂常使用的是红色的苏丹粉。

细菌细胞壁中含有的脂类物质和硬脂酸能够与染色剂发生亲和作用,并且与其形成稳定的染色复合物。

经过染色剂的染色处理后,革兰氏阳性细菌呈现红色染色,而抗酸染色阴性细菌则呈现蓝色或紫色染色。

细菌染色的原理简单而重要,它在细菌学和微生物学中起着关键的作用。

通过细菌染色技术,可以为研究和鉴定细菌提供必要的形态特征信息,为疾病的诊断和细菌的分类学研究提供重要参考。

微生物学实验-细菌染色

微生物学实验-细菌染色

革兰氏阳性菌
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作业
• 实验报告
《基础生物学实验》精品课程 基础生物学实验》
1、涂片 、
1. 取一块干净的载玻片平放在载玻片架上,在载 取一块干净的载玻片平放在载玻片架上, 玻片中央滴一滴生理盐水(或蒸馏水); 玻片中央滴一滴生理盐水(或蒸馏水); 无菌操作从试管中生长有琼脂斜面上挑取少许 2. 无菌操作从试管中生长有琼脂斜面上挑取少许 菌苔; 菌苔; 3. 将挑取的菌苔沾入载玻片中央生理盐水中混匀 并涂成薄膜。 并涂成薄膜。 注意:载玻片要洁净无油迹; 注意:载玻片要洁净无油迹;滴生理盐水和取菌不 宜过多;涂片要涂抹均匀,不宜过厚。 宜过多;涂片要涂抹均匀,不宜过厚。
形态学特征
培养特征、菌落的形状、大小、颜色、 培养特征、菌落的形状、大小、颜色、表 面特征、 面特征、光泽等 细胞形态:形状、大小、 细胞形态:形状、大小、排列方式 特殊结构:鞭毛、芽孢、孢子、 特殊结构:鞭毛、芽孢、孢子、荚膜等 细胞内涵物 染色反应:革蓝氏染色、 染色反应:革蓝氏染色、抗酸性染色 运动性
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2、干燥 、
将涂好菌膜的载玻片平放在载玻片架上, 将涂好菌膜的载玻片平放在载玻片架上, 室温下自然干燥。 室温下自然干燥。
《基础生物学实验》精品课程 基础生物学实验》
3、固定 、
手持已经自然干燥的涂好菌膜的载玻片, 手持已经自然干燥的涂好菌膜的载玻片, 涂面朝上,在酒精灯火焰上通过2 3 涂面朝上,在酒精灯火焰上通过2~3次,热 固定细菌细胞。 固定细菌细胞。 原理:加热使细菌细胞的蛋白质凝固、 原理:加热使细菌细胞的蛋白质凝固、使细 菌细胞质凝固,从而固定细菌细胞形态, 菌细胞质凝固,从而固定细菌细胞形态, 并使之牢固附着在载玻片上。 并使之牢固附着在载玻片上。 注意:热固定温度不宜过高, 注意:热固定温度不宜过高,否则会改变甚 至破坏细胞形态。 至破坏细胞形态。

细菌简单染色

细菌简单染色

微生物学实验
杆菌
炭疽杆菌
破伤风杆菌
肉毒芽孢杆菌
大肠杆菌
变形杆菌
绿脓杆菌
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微生物学实验
螺菌
幽门螺杆菌
霍乱弧菌
钩端螺旋体
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生命科学学院微生物学教研室-YJH
微生物学实验
微生物分类鉴定依据
形态学和生理生化特征 血清学试验和噬菌体分型 氨基酸序列和蛋白质分析 核酸的碱基组成、序列和核酸分析
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微生物学实验
细菌的基本形态
Spherical coccus Rod-shaped bacillus Spired-shaped spirallum
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微生物学实验
4、染色
将热固定的细菌涂片平放于在载玻片架 上,滴加染液于涂片上(染液刚好覆盖 涂片薄膜为宜)。 染色时间:
吕氏碱性美蓝染色1~2min; 石炭酸复红染色约1min 草酸铵结晶紫染色约1min。
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微生物学实验
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微生物学实验
7、镜检
涂片干后镜检。 注意:涂片必须完全干燥后才能用油镜 观察。 防止水的折射,以便于观察。
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微生物学实验
无菌操作技术
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微生物学实验
球菌
肺炎链球菌
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香柏油 二甲苯 擦镜纸 生理盐水等。
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微生物学实验

微生物的染色实验报告

微生物的染色实验报告

微生物的染色实验报告微生物的染色实验报告一、引言微生物是一类极小的生物体,包括细菌、真菌和病毒等。

它们在自然界中广泛存在,对人类的生活和健康具有重要影响。

为了更好地研究微生物的形态和结构,染色实验成为一种常用的方法。

本实验旨在通过染色技术观察微生物的形态和结构。

二、实验材料和方法1. 实验材料:(1)细菌标本:如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等;(2)染色试剂:如甲基蓝、碘液等;(3)显微镜和玻片。

2. 实验方法:(1)制备细菌涂片:取一滴细菌液滴在玻片上,用另一块玻片将其均匀涂开。

(2)甲基蓝染色:将制备好的细菌涂片放入甲基蓝溶液中浸泡片刻,然后用水冲洗净。

(3)碘液染色:将经过甲基蓝染色的细菌涂片放入碘液中浸泡片刻,然后用水冲洗净。

(4)观察:将染好色的细菌涂片放在显微镜下观察,并记录所见。

三、实验结果经过甲基蓝染色和碘液染色后,观察到细菌在显微镜下呈现出不同的形态和结构。

1. 大肠杆菌大肠杆菌是一种革兰氏阴性细菌,呈杆状。

在染色后,我们观察到大肠杆菌呈现出深蓝色,细胞形态清晰可见。

通过放大镜,我们可以看到大肠杆菌的细胞体长约为2-3微米,直径约为0.5微米。

细菌细胞内部还可观察到细胞核和胞质等结构。

2. 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌是一种革兰氏阳性细菌,呈球状。

在染色后,我们观察到金黄色葡萄球菌呈现出浅蓝色,细胞形态圆润。

放大镜下,我们可以看到葡萄球菌的细胞直径约为1微米左右,呈团状生长。

细菌细胞内部可见到细胞壁和胞质等结构。

四、实验讨论通过本实验,我们成功地使用染色技术观察了大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的形态和结构。

染色技术能够使细菌在显微镜下更加清晰可见,有助于研究微生物的特征和生理功能。

细菌的染色实验是一种常用的方法,不仅可以观察细菌的形态和结构,还可以帮助鉴定不同种类的细菌。

在实际应用中,染色技术在医学、食品安全和环境监测等领域具有重要作用。

例如,医生可以通过染色技术快速鉴定细菌感染的类型,从而指导治疗方案的选择。

实验1-细菌的革兰氏染色

实验1-细菌的革兰氏染色

环境微生物学实验(参见课本P388-392)实验1 细菌的革兰氏染色一.实验目的(1)了解细菌的涂片和染色在微生物学试验中的重要性。

(2)掌握革兰氏染色法的基本操作技术。

二.实验材料(1)器皿:显微镜、接种环、载玻片、酒精灯。

(2)试剂:草酸铵结晶紫染液、革兰氏碘液、95%乙醇、5g/L沙皇染色液。

(3)材料:常见菌种。

三.实验内容各种细菌经革兰氏染色法染色后,能区分成两大类,一类最终染成紫色,称革兰氏阳性细菌(Gram positive bacteria,G+);另一类被染成红色,称革兰氏阴性细菌(Gram negative bacteria,G-)。

其过程如下:(1)涂片、固定(干燥)取干净的载玻片于试验台上,在正面边角作几号,并滴一滴无菌蒸馏水于载玻片的中央,灼烧接种环,待冷却后从斜面挑取少量菌种与玻片上的水滴混匀后,在载玻片上涂布成一均匀的薄层,涂布面不宜过多。

干燥过程最好在空气中自然晾干,为了加速干燥,也可在微小火焰上方烘干。

烘干后再在火焰上方快速通过3~4次,使菌体完全固定在载玻片上。

但不宜在高温下长时间烤干,否则急速失水会使菌体变形。

(2)初染滴加草酸铵结晶紫染色液1―2min,水洗。

(3)媒染滴加革兰氏碘液,染1-2min,水洗。

(4)脱色滴加体积分数为95%的乙醇,约45s后即水洗;或滴加体积分数为95%的乙醇后将玻片摇晃几下即倾去乙醇,如此重复2-3次后即水洗。

(5)复染滴加沙黄液(番红),染2-3min,水洗并使之干燥。

(6)镜检按显微镜的操作步骤观察菌体形态,及时记录。

根据呈现的颜色判断该菌属是G+还是G-细菌。

观察时先用低倍镜观察,发现目的物后用油镜观察。

四.注意事项(1)涂片所用载玻片要洁净无油污迹,否则影响涂片。

(2)挑菌量应少些,涂片宜薄,过厚重叠的菌体则不易观察清楚。

(3)染色过程中勿使染色液干涸。

用水冲洗后,应甩去玻片上的残水以免染色液被稀释而影响染色效果。

(4)革兰氏染色成败的关键是脱色时间是否合适,如脱色过度,革兰氏阳性细菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性细菌。

微生物常用实验3篇

微生物常用实验3篇

微生物常用实验第一篇:细菌涂片染色实验细菌涂片染色实验是微生物学中最基本的实验之一。

通过染色方法,使细菌变得可见,便于观察形态、结构、数量等特征,有利于研究其生长、代谢、致病性等方面。

下面,我们来介绍细菌涂片染色实验的具体步骤:一、制备细菌涂片1.取出培养基上生长良好的细菌菌落,用不锈钢嵌片环沿中心点轻压一下。

2.将嵌片环中的菌落涂匀于无菌载玻片上,制备成直径约1厘米的薄片。

3.待载玻片上的细菌涂片晾干,并用火焰消毒。

二、涂片染色1.用火焰将铺有细菌涂片的玻片烤干。

2.将烤干的玻片浸入甲醇中,固定一分钟,再用水漱洗。

3.将玻片浸入碘酒中,固定一分钟,再用水漱洗。

4.将玻片浸入乙醇中,使背景颜色褪去,再用水漱洗。

5.将玻片浸入洋红染色液中,染色时间不超过1分钟。

6.用水冲洗干净,晾干后可以在显微镜下观察。

通过细菌涂片染色实验,我们可以直观地观察到细菌的形态、大小、聚集情况、颜色等,有助于鉴定细菌种类,并进一步深入研究其生物学特性。

第二篇:厌氧培养实验厌氧菌是一类生长需要在完全无氧条件下进行的微生物。

在许多疾病的发病机制中,厌氧菌都发挥着重要作用,因此,研究厌氧菌对于认识疾病的发病机制具有极其重要的意义。

下面,我们来介绍厌氧培养实验的具体步骤:一、制备厌氧培养基制备厌氧培养基是进行厌氧菌培养的关键。

具体操作步骤如下:1.准备培养基,并在其中加入培养菌株所需的配方和其他适宜的添加剂。

2.将培养基分装到无菌针筒或暗口瓶中。

3.在体积的一半至三分之二处加入去氧剂(一般为Thioglycolate或Dithiothreitol)。

二、厌氧细菌接种与培养1.准备厌氧细菌培养物的接种种子。

一般情况下,把生长适应在厌氧条件下的细菌进行分生处理来获得设计数量的细胞,并将其重新悬浮在与培养基相同的缓冲液中。

2.在无氧条件下接种厌氧菌,避免暴露于空气中。

可以通过使用瓶盖和橡胶塞的局部替代或全封闭气密容器的方法来实现无氧条件。

微生物学实验6 细菌染色法

微生物学实验6 细菌染色法

南京大学生物技术系实验报告题目细菌染色法姓名年04 月12 日【一、实验目的】1、学习微生物涂片、染色的基本技术,掌握细菌的染色法。

2、初步认识细菌的形态特征。

3、巩固显微镜(油镜)的使用方法和无菌操作技术。

【二、实验原理】1、革兰氏染色是广泛使用的细菌鉴别染色法,可将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

革兰氏阳性菌细胞壁肽聚糖层厚,经乙醇处理发生脱水作用,使孔径缩小、孔径降低、结晶紫与碘形成的大分子复合物保留在细胞内而不被脱色,结果使细胞呈紫色。

革兰氏阴性菌肽聚糖层薄,网状结构交联少,而且类脂含量较高,经乙醇处理后,类脂被溶解、细胞壁孔径变大,通透性增加,结晶紫与碘的复合物被溶出细胞壁,因而细胞被脱色,再经番红复染后细胞呈红色。

2、芽孢具有不易渗透的厚壁,着色及脱色均较困难,因此在做芽孢染色时先用着色力强的染料使芽孢与菌体都染上颜色,再用脱色液将菌体脱色,并用不同颜色的复染液复染,使芽孢与菌体染成不同的颜色。

3、在某些细菌细胞壁外形成一层较厚且固定的黏性物质称为荚膜(荚膜的厚薄,可因环境的不同而改变)。

荚膜与染料亲和力低,所以观察荚膜时,常使菌体与背景着色,把无色的荚膜衬托出来。

4、苏云金芽孢杆菌的晶体是特殊的细胞内含物,晶体的存在与否,是作为苏云金芽孢杆菌类生物的检验项目之一。

利用区别染色,可以达到区别晶体、芽孢和菌体细胞三者的目的。

【三、实验材料、主要仪器和试剂】1、材料:枯草芽孢杆菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(E. coli)、苏云金芽孢杆菌2、试剂:蒸馏水、草酸铵结晶紫染液、鲁古氏碘液、95%乙醇、0.5%蕃红水溶液、5%孔雀绿水溶液、黑墨素液、甲醇、苏丹黑、二甲苯3、仪器:接种环(×1)、酒精灯(×1)、载玻片(×5)、光学显微镜(×1)【四、操作步骤】1、革兰氏染色:涂片→固定→结晶紫→水洗→碘液→水洗→95%酒精→水洗→蕃红→水洗→干燥→镜检2、芽孢染色:涂片→固定→孔雀绿染色5min→水洗→蕃红→水洗→干燥→镜检3、荚膜染色法(选做):涂片→干燥→石炭酸复红→水红→吸干→黑墨素→镜检4、伴胞晶体染色(选做):涂片→固定→10%石炭酸复红→水洗→风干→镜检5、类脂染色(选做):涂片→固定→苏丹黑染色10min→水洗→吸干→二甲苯冲洗→蕃红→水洗→晾干→镜检6、清理器皿、实验桌面。

细菌染色标本制作的基本程序

细菌染色标本制作的基本程序

细菌染色标本制作的基本程序细菌染色是微生物学中最常用的一项实验技术,它可以通过给细菌染色剂上色,使其在显微镜下更容易观察和分辨。

当然,制作细菌染色标本是一项需要一定技巧和步骤的工作,下面将为您介绍细菌染色标本制作的基本程序。

首先,我们需要准备好实验所需的材料和试剂。

这些包括:细菌培养物、正常盐水、草酸、无菌显微镜玻璃片、无菌染色盒、无菌棉签、无菌吸管、脱脂酒精、革兰氏染色液(包括靛基紫、碘酒、酒精洗涤液和地高辛溶液)等。

第二步,我们需要从培养物中取出一小部分细菌。

这时候,我们可以用无菌吸管将一小滴的细菌悬浮液滴在无菌玻璃片上。

这个步骤要小心且迅速,以避免细菌的污染。

第三步,取一片无菌玻璃片,将其浸入细菌悬浮液中,在载玻片上面均匀地涂抹细菌,然后将它晾干。

第四步,取一片已经晾干的载玻片,将其放置在无菌染色盒中,并加入足够的靛基紫染液。

注意,染液要保持润湿玻璃片的表面。

第五步,加入适量的草酸,进行解染处理。

解染时间要控制好,一般为10-15秒。

解染液会使染色菌体失去原有的紫色。

第六步,用水冲洗载玻片,直至冲洗出的水完全清晰。

这个步骤的目的是除去多余的染色剂和解染液,同时保留已染色的细菌。

第七步,加入碘酒,进行固定处理。

这个步骤可使细菌维持染色,还可以增加其稳定性。

第八步,用脱脂酒精进行洗涤处理。

这个步骤可以除去碘酒和细菌的余溶剂。

第九步,用无菌棉签将细菌标本上的水分吸干,然后将载玻片晾干。

最后,将制作完成的细菌染色标本放置在显微镜下观察。

在观察时,我们可以通过调整显微镜的倍数和焦距,进一步细致地观察和分析细菌的形态、结构和染色情况。

在进行细菌染色标本制作时,需要注意一些关键点。

首先,所有使用的材料都必须经过无菌处理,以避免外源性细菌的污染。

其次,在进行每个步骤时,都要小心操作,严格控制每一步骤的时间和温度,以确保染色结果的准确性和可靠性。

最后,制作完成的染色标本要储存好,以便保持其染色效果的稳定性。

微生物实验四细菌的涂片及简单染色法和革兰氏染色法经典法

微生物实验四细菌的涂片及简单染色法和革兰氏染色法经典法

【实验报告】
• 2)填表

表1 细菌形态的描述
【实验报告】

2.思考题

(1)涂片为什么要固定,固定时应注
意什么问题?

(2)你在涂片染色过程中遇到了什么
问题?试分析其中原因?

ห้องสมุดไป่ตู้
(3)革兰氏染色中哪一步是关键,为
什么?你如何控制这一步。

(4)不经复染这一步,能否区别革兰
氏阳性菌和阴性菌?
• 2、仪器 显微镜(25台); • 3、材料 载玻片(每组4个),酒精灯(每组1个)
,接种环(每组1个),擦镜纸,二甲苯、香柏油 ,吸水纸,染色缸等;
【实验用品】
• 4、染料 草酸铵结晶紫(Crystal Violet , CV)、沙黄、吕氏碱性美蓝染液。
1)草酸铵结晶紫染液的配制:
A液: 结晶紫

染色前必须先固定细菌,其目的有二
:一是杀死细菌,使细胞质凝固,菌体粘
附于玻片上;二是增加其对染料的亲和力
。常用的有加热和化学固定两种方法。固
定时应尽量维持细胞原有形态,防止细胞
膨胀或收缩。
【基本原理】
• 二、革兰氏染色法(经典法)基本原理 • 革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重
要性状 • 革兰氏染色法(Gram stain)不仅能观
【方法步骤】
• 3、染色

⑴初染 将玻片置于玻片搁架上,加草酸铵结
晶紫染色液(加量以盖满菌膜为度),染色1-2min。
倾去染色液,用自来水小心地冲洗。

⑵媒染 滴加(Lugol)碘液,染1-2min,水洗。

⑶脱色 滴加95%乙醇2-3次,脱色20-25s立

细菌染色和涂片观察的方法

细菌染色和涂片观察的方法

细菌染色和涂片观察的方法细菌的染色和涂片观察是微生物学中非常重要的实验方法,可以帮助我们识别和研究细菌的形态、结构和特征。

下面将详细介绍细菌染色和涂片观察的方法。

一、细菌染色方法:1.革兰氏染色法:革兰氏染色法是细菌染色中最常用的方法之一、通过该方法,细菌可以被分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

步骤:(1)取一块玻璃片,将细菌涂布于玻璃片上。

(2)用火炬预热玻璃片,使玻璃片夹持菌液返燃。

(3)在火焰中反复将菌液加热,使其彻底干燥。

(4)将干燥的玻片放在青霉素醛固定液中,固定细菌片。

(5)用生理盐水将玻璃片在微生物操作台上反复冲洗,去除青霉素醛固定液。

(6)将玻璃片放在碘酒液中浸泡3-5分钟,使菌液变成深度蓝黑色。

(7)洗净玻片,以去除碘酒液。

(8)将玻片放入95%乙醇中,进行除膜操作,1-2秒钟后取出。

(9)玻片反复在试管中加乙醇,直至洗涤液基本为无色,然后将玻片放入流动水中漂洗。

(10)用草绿素溶液染色,将玻片浸泡5分钟。

(11)用水漂洗片面,直至玻片颜色基本不变。

(12)用纤维纸轻轻拍去多余的水分,放在显微镜载物玻片上中间,覆盖一层玻璃标本纸,压平,尽量避免产生气泡。

(13)利用显微镜观察染色结果,革兰氏阳性菌为紫色或紫蓝色,革兰氏阴性菌为粉红色。

2.肥湖水染色法:肥湖水染色法也是常用的细菌染色法之一,可以用来观察鞭毛、纤毛等细菌结构。

步骤:(1)取一块玻璃片,将细菌涂布于玻璃片上。

(2)用火焰热熔玻璃片,使其保持与菌液接触状态,避免菌液干燥。

(3)将玻璃片放在肥湖水溶液中浸泡2-3分钟。

(4)用生理盐水将玻璃片反复冲洗,去除肥湖水溶液。

(5)用希森润湿法将玻璃片上覆盖一层希森润湿剂。

(6)利用显微镜观察染色结果,鞭毛呈现鲜绿色,纤毛呈现暗蓝色。

二、涂片观察方法:1.涂片制备:涂片制备是观察细菌形态和结构最常用的方法之一、涂片制备的步骤如下:(1)在无菌条件下,将细菌涂布于玻璃片上。

(2)用火焰或紫外线灭菌,使其迅速晾干。

微生物的染色及观察

微生物的染色及观察

实验二微生物的染色及观察一、细菌的简单染色法1 实验目的1.1 学习微生物涂片、染色的基本技术。

1.2 掌握细菌的简单染色法。

1.3 初步认识细菌的形态特征,巩固学习油镜的使用方法和无菌操作技术。

2 实验原理细菌的涂片和染色是微生物学实验中的一项基本技术。

细菌的细胞小而透明,在普通的光学显微镜下不易识别,必须对它们进行染色。

利用单一染料对细菌进行染色,使经染色后的菌体与背景形成明显的色差,从而能更清楚地观察到其形态和结构。

此法操作简便,适用于菌体一般形状和细菌排列的观察。

常用碱性染料进行简单染色,这是因为在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,而碱性染料在电离时,其分子的染色部分带正电荷,因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色。

经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比,在显微镜下更易于识别。

常用作简单染色的染料有美蓝、结晶紫、碱性复红等。

当细菌分解糖类产酸使培养基pH下降时,细菌所带正电荷增加,此时可用伊红、酸性复红或刚果红等酸性染料染色。

染色前必须固定细菌。

其目的有二:一是杀死细菌并使菌体粘附于玻片上;二是增加其对染料的亲和力。

常用的有加热和化学固定两种方法。

固定时尽量维持细胞原有的形态。

3 材料3.1 菌种枯草芽孢杆菌12~18h营养琼脂斜面培养物、金黄色葡萄球菌约24h营养琼脂斜面培养物、大肠杆菌24h营养琼脂斜面培养物、面包酵母琼脂斜面培养物。

实验教师可根据具体情况提供合适的菌种。

3.2 染色剂吕氏碱性美蓝染液(或草酸铵结晶紫染液),石炭酸复红染液。

3.3 仪器或其他用具显微镜,酒精灯,载玻片,接种环,玻片搁架、双层瓶(内装香柏油和二甲苯),擦镜纸,生理盐水或蒸馏水等。

4 流程涂片→干燥→固定→染色→水洗→干燥→镜检。

5 步骤5.1 涂片取两块洁净无油的载玻片,在无菌的条件下各滴一小滴生理盐水(或蒸馏水)于玻片中央,用接种环以无菌操作,分别从枯草芽孢杆菌、藤黄微球菌和大肠杆菌斜面上挑取少许菌苔于水滴中,混匀并涂成薄膜。

实验细菌的简单染色与革兰氏染色

实验细菌的简单染色与革兰氏染色
染色原理主要基于不同物质对染 料的结合能力差异,使细菌着色 ,从而在显微镜下呈现出不同的 颜色和形态。
掌握简单染色和革兰氏染色的操作方法
简单染色
将细菌涂片或培养物直接与染料混合 ,然后进行观察。操作简单,适用于 初步观察细菌形态。
革兰氏染色
一种特殊的染色方法,通过结晶紫初 染、碘液媒染、酒精脱色和沙黄复染 等步骤,将细菌分为革兰氏阳性菌和 革兰氏阴性菌两类。
出版年份:XXXX年
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简单染色方法简便,操作相对容易,但只能显示细菌的形态 和结构,不能提供细菌的种类信息。
革兰氏染色原理
01
02
03
04
05
革兰氏染色是一种常用 的细菌鉴别染色法,通 过使用结晶紫、碘液和 酒精等染料对细菌进行 染色,能够将细菌分为 革兰氏阳性菌和革兰氏 阴性菌两大类。
革兰氏染色的原理主要 是基于细菌细胞壁的成 分和结构不同,导致对 染料的吸附和着色能力 。
复染
将涂片浸入稀释后的伊 红或沙黄染色液中,染
色一定时间后取出。
冲洗
用清水冲洗涂片,去除 染色液。
观察
在显微镜下观察染色结 果,判断细菌是革兰氏
阳性还是阴性。
05
实验结果与分析
简单染色结果与分析
染色结果
通过简单染色法,细菌被 染上了不同的颜色,如红 色或紫色。
03
04
涂片制备
将细菌均匀涂在载玻片上,晾 干。
染色
将涂片浸入染色液中,染色一 定时间后取出。
冲洗
用清水冲洗涂片,去除染色液 。
观察
在显微镜下观察染色结果,判 断细菌类型。
革兰氏染色步骤
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涂片制备

实验三 细菌的简单染色和革兰氏染色

实验三 细菌的简单染色和革兰氏染色

实验三 细菌的简单染色和革兰氏染色一、目的与要求1、掌握细菌涂片标本的制备2、掌握革兰氏染色法的步骤和关键点3、识别细菌革兰氏染色结果二、实验原理:细菌的涂片和染色是微生物学实验中的一项基本技术。

为什么要对细菌染色?细菌的细胞小而透明,在普通光学显微镜下不易识别,必须对它们进行染色,使经染色后的菌体与背景形成明显的色差,从而能更清楚地观察到其形态和结构。

用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。

简单染色法可用以观察微生物的形状、大小及细胞排列状态,是微生物技术中应用广泛,操作简便的染色法。

革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G )和革兰氏阴性菌(G-)两大类,是细菌学上最常用的鉴别性染色法。

其原理是利用细菌的细胞壁组成成分和结构的不同。

革兰氏阳性菌的细胞壁肽聚糖层厚,交联而成的肽聚糖网状结构致密,经乙醇处理发生脱水作用,使孔径缩小,通透性降低,结晶紫与碘形成的大分子复合物保留在细胞壁内使细胞呈蓝紫色,而革兰氏阴性菌肽聚糖层薄,网状结构交联少,且类脂含量较高,经乙醇处理后,类脂被溶解,细胞壁孔径变大,通透性增加,结晶紫与碘的复合物被溶出细胞壁,再经番红复染后细胞呈红色。

三、实验器材1、菌种 牛肉膏琼脂斜面28℃培养24h 的大肠杆菌(Escherichia coli)斜面菌种,牛肉膏琼脂斜面28℃培养16h 的枯草杆菌(Bacillus subtilis)斜面菌种;2、仪器 显微镜;3、材料 载玻片,香柏油,二甲苯,擦镜纸,吸水纸,染色缸等。

4、染料 草酸铵结晶紫染色液,路哥氏(Lugol)碘液,95%乙醇,0.5%番红染色液; 细菌的简单染色步骤:细菌的革兰氏染色步骤:涂 片,干 燥,固 定,结晶紫染色,水洗,碘液媒染,水 洗,乙醇脱色,水 洗,番红复染,水 洗,干 燥,镜 检.五、实验关键步骤和注意点:1、玻片要洁净无油,否则菌液涂不开。

2、挑菌量宜少,涂片宜薄,过厚则不易观察。

细菌的染色方法范文

细菌的染色方法范文

细菌的染色方法范文细菌染色是一种常见的实验方法,用于从复杂的细菌群体中提取有关其结构、形态和一些特定性质的信息。

它是微生物学研究中不可或缺的工具。

本文将介绍常见的细菌染色方法,包括简单染色、差异染色和特殊染色。

1.简单染色简单染色是最基本的细菌染色方法,使用一种染色剂将细菌细胞全部染色。

最常用的染色剂是碘蓝和甲基蓝。

染色方法如下:(1)将细菌涂片固定在玻片上,可以使用热固定法或化学固定法。

(2)在涂片上滴加碘蓝或甲基蓝溶液,让其渗透细菌细胞。

(3)用水冲洗玻片以去除多余的染色剂。

(4)用纸巾将玻片上的水分吸干。

(5)在显微镜下观察染色的细菌。

2.差异染色差异染色是通过使用多种染色剂及/或特定条件,使不同种类或部分细菌以不同颜色呈现。

主要的差异染色方法有革兰氏染色和酸性忍受染色。

(1)革兰氏染色革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法,主要用于将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。

染色方法如下:-将细菌涂片固定在玻片上。

-滴加革兰氏紫素,让其渗透细菌细胞。

-用碘液固定染色,形成染色颗粒。

-用乙醚或酒精去除多余的染色剂。

-滴加脱色剂,使革兰氏阴性细菌脱色,而革兰氏阳性细菌保持染色。

-用水冲洗玻片以去除脱色剂。

-在显微镜下观察染色的细菌。

(2)酸性忍受染色酸性忍受染色是一种特殊的染色方法,适用于具有特殊的抗酸性结构的细菌,如结核菌和其他抗酸杆菌。

染色方法如下:-将细菌涂片固定在玻片上。

-滴加浓硫酸,让其固定和脱水细菌。

-滴加酸性忍受染色液,让其渗透细菌细胞。

-冲洗玻片以去除多余的染色液。

-在显微镜下观察染色的细菌。

3.特殊染色特殊染色方法主要用于染色细菌的特定部分或结构,以使其更清晰可见。

一些常见的特殊染色包括荧光染色、胞外多糖染色和内孢子染色。

(1)荧光染色荧光染色是一种利用荧光染料如荧光素和荧光素同系物染色细菌的方法。

这种染色方法可以给细菌标记上特定的荧光标记物,以在显微镜下观察细菌。

荧光染色是现代生物学和医学研究中常用的方法之一(2)胞外多糖染色胞外多糖染色是一种常见的细菌染色方法,用于染色细菌细胞表面的胞外多糖。

细菌染色实训

细菌染色实训

实训二细菌染色法一、实训目的1.掌握细菌染色标本的制备过程。

2.熟悉细菌染色方法的一般原则,掌握革兰染色法及其结果判断。

3.熟悉革兰染色法在细菌鉴定上的重要意义。

二、实训原理微生物学是一门形态学科,所以细菌涂片的制备、染色及形态的观察在微生物学的实训教学过程中是一个不可忽视的基本环节和技术。

由于细菌微小,又与周围的水环境光学性质相近,从而用一般的光学显微镜不易看清其形态和结构,通常用染色的方法增加反差,有助于细菌标本的观察。

染料有带阴离子发色团的酸性染料和带有阳离子发色团的碱性染料。

在一般生理条件下(pH7.4左右)细菌菌体都带负电荷,因而更容易与碱性染料相结合。

常用的碱性染料包括美蓝、结晶紫、碱性复红、孔雀绿等。

细菌的染色法包括单染色法及复染色法。

单染色法是只用一种染料使细菌着色以显示其形态的方法,所有的细菌均被染成一种颜色。

可以用来观察细菌的形态和排列方式,但不能鉴别细菌。

复染色法又称为鉴别染色法,通常用两种或两种以上的染料染色,由于不同种类的细菌或同种细菌的不同结构对染料有不同的反应性而被染成不同的颜色,从而有鉴别细菌的作用。

最常用的鉴别染色法是革兰染色法。

该染色法不仅可以观察细菌的形态和排列,还可以根据染色结果将所有细菌分成革兰阳性菌(G+)和革兰阴性菌(G-)两大类,是细菌分类和鉴定的基础。

本实验要求掌握细菌涂片标本的制作、细菌染色的基本步骤、革兰染色法。

三、实训材料1. 菌种:金黄色葡萄球菌斜面培养物1支,大肠杆菌斜面培养物1支。

2. 试剂:吕氏美蓝染色液、结晶紫染色液、卢戈碘液、95%乙醇、复红染色液、香柏油、生理盐水、二甲苯。

3. 其他载玻片、生理盐水、接种环、酒精灯、吸水纸、擦镜纸、显微镜等。

四、实训方法(一)细菌涂片标本的制作(图1-35)为了能在显微镜下看清细菌的形态特征,对细菌涂片的制作有一定要求,即涂片不能太厚,细菌在涂片中最好呈单层分布,另外为了观察细菌的典型形态,应取处于对数生长期的细菌进行涂片。

细菌染色原理

细菌染色原理

细菌染色原理细菌染色是微生物学中一项重要的实验技术,通过对细菌进行染色可以帮助科研人员观察和研究细菌的形态、结构和生理特性。

细菌染色主要分为简单染色、差染色和特殊染色三种类型,不同类型的染色方法适用于不同的细菌研究目的。

在进行细菌染色之前,需要了解细菌染色的原理,以确保实验的准确性和可靠性。

细菌的染色原理主要是利用染色剂与细菌细胞结构之间的亲和性来实现。

在细菌染色过程中,染色剂会与细菌细胞的不同部分发生化学反应,从而使细菌细胞产生颜色变化,便于观察和研究。

简单染色是最常用的细菌染色方法之一,它利用一种染色剂(如墨汁或甘露醇晶紫)对整个细菌细胞进行染色,使细菌细胞呈现出一种颜色。

差染色则是利用两种染色剂(如碘液和乙醇)对细菌细胞进行染色,通过不同染色剂的作用,使细菌细胞呈现出不同的颜色,有利于观察细菌的结构特征。

特殊染色则是针对特定的细菌结构或生理特性进行染色,如革兰氏染色、抗酸染色等,可以帮助科研人员鉴定细菌的类型和特性。

在进行细菌染色实验时,需要注意控制染色时间、染色温度和染色剂的浓度,以确保染色效果的准确性和稳定性。

此外,细菌的生长状态、培养基的选择和细菌细胞的密度也会影响细菌染色的效果。

因此,在进行细菌染色实验前,需要对实验条件进行充分的准备和调试,以确保实验结果的可靠性和重复性。

细菌染色的原理和方法不仅在科研领域有重要应用,还在临床诊断和微生物检测中发挥着重要作用。

通过对临床样本中的细菌进行染色,可以帮助医生快速诊断疾病和选择合适的治疗方案。

在微生物检测中,细菌染色也是常用的检测手段之一,可以帮助检测人员迅速鉴定样本中的细菌类型和数量,为疾病的预防和控制提供重要依据。

总之,细菌染色是微生物学领域中一项重要的实验技术,它通过对细菌细胞的染色反应,帮助科研人员观察和研究细菌的形态、结构和生理特性。

了解细菌染色的原理和方法,对于正确开展实验和获取可靠结果至关重要。

同时,细菌染色技术在临床诊断和微生物检测中也具有重要的应用价值,为疾病的预防和治疗提供重要支持。

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6、干燥 、
自然干燥:将染好色的细菌涂片平放在载 自然干燥: 玻片架上,室温下自然干燥; 玻片架上,室温下自然干燥; 吹干: 吹干:将染好色的细菌涂片平放在载玻片 架上,用电吹风冷风或低温热风吹干; 架上,用电吹风冷风或低温热风吹干; 吸干: 吸干:将染好色的细菌涂片平放在一张吸 水纸上,上面覆盖一张吸水纸, 水纸上,上面覆盖一张吸水纸,将细菌涂 片两面的形状、大小、颜色、 培养特征、菌落的形状、大小、颜色、表 面特征、 面特征、光泽等 细胞形态:形状、大小、 细胞形态:形状、大小、排列方式 特殊结构:鞭毛、芽孢、孢子、 特殊结构:鞭毛、芽孢、孢子、荚膜等 细胞内涵物 染色反应:革蓝氏染色、 染色反应:革蓝氏染色、抗酸性染色 运动性
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革蓝氏染色的意义
• 细菌分类鉴定 • 指导临床用药
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微生物分类鉴定的特征
形态学和生理生化特征 形态学和生理生化特征 血清学实验和噬菌体分型 氨基酸序列和蛋白质分析 核酸碱基组成和序列分析
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4、染色 、
将热固定的细菌涂片平放于在载玻片架上, 热固定的细菌涂片平放于在载玻片架上, 涂片平放于在载玻片架上 滴加染液于涂片上( 滴加染液于涂片上(染液刚好覆盖涂片薄 膜为宜)。 膜为宜)。 染色时间: 染色时间:
吕氏碱性美蓝染色1~2min; 吕氏碱性美蓝染色 ; 石炭酸复红染色约1min 石炭酸复红染色约 草酸铵结晶紫染色约1min。 。 草酸铵结晶紫染色约
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微生物染色原理
在中性、碱性或弱酸性溶液中, 在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞 通常带负电荷; 通常带负电荷; 而碱性染料在电离时, 而碱性染料在电离时,其分子的染色部分 带正电荷; 带正电荷; 带正电荷的碱性染料染色部分很容易与带 负电荷细菌细胞结合使细菌染色。 负电荷细菌细胞结合使细菌染色。
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1. 菌种 2. 染色剂 3. 仪器或其他用具: 仪器或其他用具:
显微镜 酒精灯 载玻片 接种环 香柏油 酒精+乙醚 酒精 乙醚 擦镜纸 生理盐水等。 生理盐水等。

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简单染色方法
涂片 干燥 固定
干燥 镜检 水洗 染色
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微生物染色的染料
• 是一类苯环上带有发色基团和助色基团的 有机化合物。 有机化合物。 • 染料通常都是盐,分酸性染料和碱性染料 染料通常都是盐, 两大类。 两大类。 • 在微生物染色中,碱性染料较常用,如常 在微生物染色中,碱性染料较常用, 用的美蓝(即亚甲蓝)、结晶紫、 )、结晶紫 用的美蓝(即亚甲蓝)、结晶紫、碱性紫 复红、番红(即沙黄)、 )、孔雀绿等都属于 复红、番红(即沙黄)、孔雀绿等都属于 碱性染料。 碱性染料。
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5、水洗 、
将细菌涂片上染液倒入废液缸中; 细菌涂片上染液倒入废液缸中; 涂片上染液倒入废液缸中 手持细菌染色涂片,置于废液缸上方, 细菌染色涂片 手持细菌染色涂片,置于废液缸上方,用 洗瓶中自来水冲洗涂片, 洗瓶中自来水冲洗涂片,直至流下的水无 色为止。 色为止。 注意:水洗时,不要直接冲洗涂面, 注意:水洗时,不要直接冲洗涂面,而应使 水从载玻片的一端流下。水流不宜过急, 水从载玻片的一端流下。水流不宜过急, 过大,以免涂片薄膜脱落。 过大,以免涂片薄膜脱落。
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方法
涂片 初染 媒染 脱色 复染 镜检
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涂片
要用活跃生长期的幼培养物作革兰氏染色; 要用活跃生长期的幼培养物作革兰氏染色; 注意练习无菌操作; 注意练习无菌操作; 在载玻片上滴半滴生理盐水; 在载玻片上滴半滴生理盐水; 取菌不要贪多, 取菌不要贪多,接种环上肉眼可见菌苔痕 迹即可; 迹即可; 菌苔在生理盐水中涂片要均匀, 菌苔在生理盐水中涂片要均匀,局部不宜 过厚,以免脱色不完全造成假阳性。 过厚,以免脱色不完全造成假阳性。
革兰氏阳性菌
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作业
• 实验报告
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1、涂片 、
1. 取一块干净的载玻片平放在载玻片架上,在载 取一块干净的载玻片平放在载玻片架上, 玻片中央滴一滴生理盐水(或蒸馏水); 玻片中央滴一滴生理盐水(或蒸馏水); 无菌操作从试管中生长有琼脂斜面上挑取少许 2. 无菌操作从试管中生长有琼脂斜面上挑取少许 菌苔; 菌苔; 3. 将挑取的菌苔沾入载玻片中央生理盐水中混匀 并涂成薄膜。 并涂成薄膜。 注意:载玻片要洁净无油迹; 注意:载玻片要洁净无油迹;滴生理盐水和取菌不 宜过多;涂片要涂抹均匀,不宜过厚。 宜过多;涂片要涂抹均匀,不宜过厚。
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7、镜检 、
• 涂片干后镜检。 涂片干后镜检。 • 注意:涂片必须完全干燥后才能用油镜观 注意: 察。 • 防止水的折射,以便于观察。 防止水的折射,以便于观察。
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Microbiological Sterile Techniques
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细菌染色技术
基础生物学实验( 基础生物学实验(三)
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目的要求
1. 学习微生物涂片,染色的基本技术,掌握 学习微生物涂片,染色的基本技术, 细菌的染色法。 细菌的染色法。 2. 初步认识细菌的形态特征。 初步认识细菌的形态特征。 3. 巩固显微镜(油镜)的使用方法和无菌操 巩固显微镜(油镜) 作技术。 作技术。
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• 干燥后,置油镜观察。被染成紫色者即为 干燥后,置油镜观察。 革兰氏阳性菌(G+ ;被染成红色者是革兰 革兰氏阳性菌 +);被染成红色者是革兰 氏阴性菌(G-)。 。 氏阴性菌
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革兰氏阴性菌
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革蓝氏阳性和阴性菌细胞壁成分比较
成分 占细胞壁干重的% 占细胞壁干重的% 革蓝氏阳性菌 革蓝氏阴性菌
肽聚糖 含量很高(50-90) 含量很低(~10) 含量很高(50-90) 含量很低(~10) 含量较高(<50) 磷壁酸 含量较高(<50) 无 一般无( 2) 类脂质 一般无( < 2) 蛋白质 无 含量较高(~20) 含量较高(~20) 含量较高
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革兰氏染色
• 菌种: 菌种:
• 参考菌:G+:Staphylococcus aureus, 参考菌: : • G-: Escherichia coli
• 仪器 显微镜; 显微镜; • 材料 载玻片,香柏油,二甲苯,擦镜纸, 载玻片,香柏油,二甲苯,擦镜纸, 吸水纸,染色缸等。 吸水纸,染色缸等。 • 染料 草酸铵结晶紫染色液,路哥氏(Lugol) 草酸铵结晶紫染色液,路哥氏(Lugol) 碘液,95%乙醇 0.5%番红染色液 乙醇, 番红染色液; 碘液,95%乙醇,0.5%番红染色液;
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2、干燥 、
将涂好菌膜的载玻片平放在载玻片架上, 将涂好菌膜的载玻片平放在载玻片架上, 室温下自然干燥。 室温下自然干燥。
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3、固定 、
手持已经自然干燥的涂好菌膜的载玻片, 手持已经自然干燥的涂好菌膜的载玻片, 涂面朝上,在酒精灯火焰上通过2 3 涂面朝上,在酒精灯火焰上通过2~3次,热 固定细菌细胞。 固定细菌细胞。 原理:加热使细菌细胞的蛋白质凝固、 原理:加热使细菌细胞的蛋白质凝固、使细 菌细胞质凝固,从而固定细菌细胞形态, 菌细胞质凝固,从而固定细菌细胞形态, 并使之牢固附着在载玻片上。 并使之牢固附着在载玻片上。 注意:热固定温度不宜过高, 注意:热固定温度不宜过高,否则会改变甚 至破坏细胞形态。 至破坏细胞形态。
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• ⑴初染 将玻片置于玻片搁架上,加草酸 将玻片置于玻片搁架上, 铵结晶紫染色液(加量以盖满菌膜为度) 铵结晶紫染色液(加量以盖满菌膜为度), 染色1 2min。倾去染色液, 染色1-2min。倾去染色液,用自来水小心 地冲洗。 地冲洗。 • ⑵媒染 滴加(Lugol)碘液,染1-2min,水 滴加(Lugol)碘液, (Lugol)碘液 2min, 洗。 • ⑶脱色 滴加95%乙醇,脱色20-25s立即水 滴加95%乙醇,脱色20 25s立即水 95%乙醇 20以终止脱色。 洗,以终止脱色。 • ⑷复染 滴加蕃红,染色2-3min,水洗。 滴加蕃红,染色2 3min,水洗。 最后用吸水纸轻轻吸干。 最后用吸水纸轻轻吸干。
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球菌
肺炎链球菌
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杆菌
炭疽杆菌
破伤风杆菌
肉毒芽孢杆菌
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杆菌
变形杆菌
大肠杆菌
绿脓杆菌
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螺菌
幽门螺杆菌
霍乱弧菌
钩端螺旋体
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