芒果叶斑病病原菌的鉴定及其生物学特性

察 ， 培养 ４～ ７ ｄ ， 待病 菌产孢后进行纯化 。
１ ． ２ ． ２ 病菌 的纯 化 采用 琼脂 平板 稀释 法进 行病 菌 的纯 化 。先用灭菌水配制成孢子悬浮液 ， 再用接种环取 １环孢 子悬浮 液与 １ ０ ｍ Ｌ已融化 的琼脂培养 基 （ 约４ ５℃ ） 充分 混
广东 、 广西 、 海南 、 福建 、 云南 、 台湾等省 区。芒 果色 、 香、 味俱
佳， 营养丰富 ， 食用芒果具有益 胃、 解渴 、 利尿等功用… 。
肖倩莼等于 １ ９ ８ ５ －１ ９ ９ ５年对华南地 区的芒果病害及其
合， 倒入灭菌的培养皿 中， 放置于 ２ ８℃恒温培养箱 中进行 培 养 。从培养皿 中挑取单个分散 的菌落移植 到 Ｐ Ｄ Ａ培养基 上
叉法测定菌落直径 ， 以其平均值 代表菌落的大小并计算 纯生
长量 ：
分后移到 Ｐ Ｄ Ａ培养 基 中 ， 置于 ２ ５℃ 的恒 温箱 中培养 并 观
纯生长量 ＝ 菌落平均直径 一菌饼直径 。
２ 结 果与 分 析
收稿 日 期： ２ ０ １ ２ — １ ０— ０ ９ 基金项 目： 红河学 院特色专业建设项 目（ 编号 ： Ｔ Ｓ ２ ０ ０ ８ ０ １ ） ； 红河学 院 植物保护硕士点建设项 目。 作 者简介 ： 周银丽（ １ ９ ７ ６ 一） ， 女， 云南祥 云人 ， 博士研究生 ， 副教授 ， 主 要从事植 物 线 虫病 害 及植 物 病 害 复合 侵 染 的研 究。Ｅ—ｍ ａ ｉ ｌ ：
况， 直至对照（ Ｃ Ｋ） 长满整个培养皿为止 。与此同时用十字 交
１ ． ２ ． １ 病菌 的分离及培养 用清水将感病 、 健康交界处 的植
株组织冲洗 干净 ， 用灭 菌手 术刀取 ３ ｍ ｉ ｌ ｌ Ｘ ４ ｍｉ ｌ ｌ 的病变维管 束组 织 ， 用 ７ ０ ％ 乙醇 消毒 ３ ０ ｓ后 用 ０ ．１ ％ 氯 化 汞 消 毒 ３— ５ ｍ ｉ ｎ ， 再用蒸馏水 漂洗 ３—５次 ， 最后用灭 菌滤 纸吸干水
值、 光照 、 碳氮 比等条件对叶斑病病原 菌菌丝生 长的影响 ， 以期 系统掌握该病原菌的生物学特性 ， 为芒果 叶斑病 的防治 提供理论依据 。结果表明 ， 云南红河地 区芒果叶斑病病原菌是链格孢菌 ， 其菌丝 在 １ ０— ３ ５℃范围内均 能生长 ， 最适 温 度为２ ５℃ ； 在ｐ Ｈ值 ５～ ９之 间菌丝均能生长 ， ｐ Ｈ值为 ７时生长最好 ； 在３ 种光照条件下菌丝均能扩展 ， 最适光照为全 黑 暗环境 ； 在碳 氮比为 ３～ ７的范围内， 菌丝均能生长 ， 最适碳氮 比为 ６ 。
度、 印度尼西亚 、 菲律宾 、 法 国、 南非 、 巴西及美 国等 国家亦有
相关报道 。本 试验主 要分离 鉴定红 河州 的芒果 叶斑病病
原菌 ， 并对其生物学特性进行研究 ， 以期对芒果叶斑病的防治
提供一定的参考 。
１ 材 料 与 方 法 １ ． １ 试 验 材 料 ・
择温度、 ｐ Ｈ值 、 光照和碳氮 比为指标 ， 不 同的温度梯度分别 设 置为 ｌ ５ 、 ２ ０ 、 ２ ５ 、 ３ ０ 、 ３ ５℃ ， 不同的 ｐ Ｈ值梯度分别设 置为 ５ 、 ６ 、 ７ 、 ８ ． ９ ， 不同的碳氮 比梯 度分 别设 置为 ３ 、 ４ 、 ５ 、 ６ 、 ７， 不 同的光
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１ ０ ８． － — —
江苏农业科学
２ ０ １ ３年第 ４ １ 卷第 ５期
周银丽， 白 建 波， 胡先奇， 等．芒果叶斑病病原菌 的鉴定及 其生物 学特性［ Ｊ ］ ．江苏农业科学 ， ２ ０ １ ３ ， ４ １ （ ５ ） ： １ ０ ８ — １ ０ ９
芒果 叶斑病病原菌 的鉴定及其生物学特性
关键词 ｉ 芒果树 ； 叶斑病 ； 病原鉴定 ； 生物学特性 中图分 类号 ： Ｓ ４ ３ ６ ． ６ ７ 文献标志码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ ２—１ ３ ０ ２ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ５— ０ １ ０ ８— ０ ２
芒果（ Ｍａ ｎ ｇ ｉ ｆ ｅ ｒ ａ ｉ ｎ ｄ ｉ ｃ ａ Ｉ Ａ ｎ ｎ ． ） 为漆树 科芒果属 热带 常绿 大乔木 ， 原产印度及马来西亚。我 国芒果 的经济栽培地 区有
病原物做了调查 、 鉴定 ； 龙亚芹 等于 ２ ０ ０ ８ －２ ０ １ ０年对 云南 省的芒果病 害进行 了调查 ， 共鉴定 出病 虫害 ９ ４种 ， 其 中病 害 ２ ３种 ， 虫害 ７ １种 。芒 果 的主 要病 害有 芒果 炭疽 病、 白粉
病、 叶斑病、 芒果流胶病、 芒果蒂腐病等 ， 其 中芒果叶斑病是发
周银 丽 ，白建 波 ，胡先 奇 ，卯异涛
（ １ ． 红河学院云南省高校农作物优质高效栽培与安全控制重点实验室 ， 云南蒙 自 ６ ６ １ １ ０ ０ ：
２ ． 云南农业大学农业生物多样性应用技术国家工程研究 中心 ， 云南昆明 ６ ５ ０ ２ ０ １ ）
摘要 ： 芒 果叶斑病是一种较为严重的病害 ， 对 云南红河地 区的芒果 叶斑病病原菌进行 了鉴定 ， 探讨 不同温度 、 ｐ Ｈ
照分别设 置为全光ห้องสมุดไป่ตู้、 半光照、 全黑暗 ， 每处理 ５个重复。
从发病 严重 的芒果林采集感病芒 果叶作为样 品 ， 将其带 回实验室进行病菌的分离。
１ ． ２ 试 验 方 法
在无 菌环境下将芒 果叶斑病病原菌接种 到各培养基 中， 然后置于恒温 培养箱 中培养 。每隔 ２ ｄ记 录菌落 的扩展情
生较普遍 、 危 害性 较大、 寄主范 围较广 的一种 真菌病害 ， 在 印
进行纯化培养 ， 再 转入试管斜面进行保存。
１ ． ２ ． ３ 柯赫式法则验证及病菌 的鉴定 将纯化、 产孢的病 原
菌孢子用无菌水配制成 一定浓度 的孢子悬 浮液 ， 喷洒在 同一
品种健康芒果植株 的叶片上 ， 以无 菌水 作为对照 ； 保湿 、 观察 并记录发病情况 。将病 原菌接种 在 Ｐ Ｄ Ａ培养基上 ， ３ ０℃ 恒 温培养箱 中培养 ６ ｄ后 ， 观察菌落颜色 、 形状 、 大小 ， 是否产 孢 以及分生孢子颜色、 形态及分生孢子梗的形态并测量其大小 ， 从而进行 病原菌的鉴定 。 １ ． ２ ． ４ 芒果 叶斑病病原菌基本 生物学特性的室 内测定 选