第十九章 真菌

分离培养： 分离培养：
将标本接种在沙氏 培养基上，25摄氏 培养基上，25摄氏 度或37摄氏度培养 度或37摄氏度培养 1-4天后，培养基 天后， 表面可出现奶油色 类酵母型菌落。 类酵母型菌落。
白色念珠菌在沙氏培养基上 的菌落特征
鉴 定Байду номын сангаас
镜检可见假菌丝及芽生孢子。 镜检可见假菌丝及芽生孢子。 此外还可以用芽管形成试验、厚膜孢子 此外还可以用芽管形成试验、 形成试验、糖同化和发酵试验进行鉴定。 形成试验、糖同化和发酵试验进行鉴定。
表19-1原核细胞型微生物与真核细 19胞型微生物的比较
细胞核结构 核膜 核仁 分裂方式 质膜 内膜 核糖体 呼吸系统 原核细胞型微生物 无 无 主要二分裂 常缺乏固醇 较简单， 较简单，有中介体 70S 质膜或中介体 真核细胞型微生物 有 有 分丝分裂、减数分 分丝分裂、 裂细胞质结构 常有固醇 复杂，有内质网和 复杂， 高尔基体 80S 线粒体
微生物检验
标本直接检查
（1）直接显微镜检查：取脓汁，痰和 直接显微镜检查：取脓汁， 局部炎性分泌物直接涂片， 局部炎性分泌物直接涂片，革兰染色 后镜检，显微镜下见到革兰阳性、 后镜检，显微镜下见到革兰阳性、圆 形或卵圆形菌体或孢子及假菌丝， 形或卵圆形菌体或孢子及假菌丝，可 确认假菌丝酵母菌感染。 确认假菌丝酵母菌感染。 ）、抗原检测 （2）、抗原检测 ）、核酸检测 （3）、核酸检测
分离培养： 分离培养：
培养温度：28摄氏度 但深部真菌为37 培养温度：28摄氏度，但深部真菌为37 摄氏度， 摄氏度，对二相性真菌培养时，28摄氏 摄氏度，对二相性真菌培养时，28摄氏 度培养真菌呈菌丝相（霉菌型），37摄 度培养真菌呈菌丝相（霉菌型）， 摄 ），37 氏度培养为组织型（酵母型）。 氏度培养为组织型（酵母型）。 观察菌落生长情况是鉴别真菌的主要方 法之一。 法之一。 真菌的生化反应： 细菌试验。 真菌的生化反应：试验方法同 细菌试验。
新型隐球菌墨汁染色镜下形态
（三）、微生物检查 ）、微生物检查
1、标本直接检查
（1）、直接镜检：用病人脑脊液做墨 ）、直接镜检 直接镜检： 汁负染色检查是诊断新生隐球菌脑膜炎 最简便、快速方法之一。如用PAS染色 最简便、快速方法之一。如用PAS染色 新生隐球菌呈红色。 后，新生隐球菌呈红色。 ）、抗原检测 用乳胶凝集试验、 抗原检测： （2）、抗原检测：用乳胶凝集试验、 ELISA和单克隆抗体法检测隐球菌荚膜 ELISA和单克隆抗体法检测隐球菌荚膜 多糖特异性抗原， 多糖特异性抗原，已成为临床上的常规 诊断方法。 诊断方法。
显微镜检验： 显微镜检验：
直接镜检对真菌的诊断较细菌更为重要。 直接镜检对真菌的诊断较细菌更为重要。 许多标本不需染色即可直接镜检. 许多标本不需染色即可直接镜检. 如癣病标本多用KOH湿片检查法， 如癣病标本多用KOH湿片检查法，即 湿片检查法 取病变或病损部位、皮屑、 取病变或病损部位、皮屑、甲屑置于载 玻片，加一滴10%KOH液然后加盖玻 玻片，加一滴10%KOH液然后加盖玻 片微微加热，使标本组织溶解透明， 片微微加热，使标本组织溶解透明，在 显微镜下可观察到真菌的孢子和菌丝。 显微镜下可观察到真菌的孢子和菌丝。
真
菌
郭庆合
真
菌
（fungus)
也称eumycota,来源于拉丁文fungus 也称eumycota,来源于拉丁文fungus，即蘑 eumycota,来源于拉丁文fungus， 真菌自成一界，为真核细胞型微生物， 菇。真菌自成一界，为真核细胞型微生物， 它具有典型的细胞核，不含叶绿素， 它具有典型的细胞核，不含叶绿素，营养方 式为吸收，无吞噬作用，营腐生、寄生、 式为吸收，无吞噬作用，营腐生、寄生、共 生和超寄生生活。细胞壁含几丁质和B 生和超寄生生活。细胞壁含几丁质和B-葡聚 有完善的细胞器，有呼吸作用， 糖。有完善的细胞器，有呼吸作用，能进行 有性生殖和（ 无性繁殖。 有性生殖和（或）无性繁殖。它与原核型微 生物有许多不同点。 生物有许多不同点。
一、假丝酵母菌
假丝酵母菌（Candida)， 假丝酵母菌（Candida)，俗称 念珠菌， 念珠菌，生物学分类为半知菌 亚门，半知菌纲，隐球菌目、 亚门，半知菌纲，隐球菌目、 假丝酵母菌为最常见的致病菌。 假丝酵母菌为最常见的致病菌。
临床意义
白假丝酵母菌通常存在与人的口腔、 白假丝酵母菌通常存在与人的口腔、上呼吸 道和阴道粘膜上， 道和阴道粘膜上，当机体发生菌群失调或抵 抗力降低时，可引起各种念珠菌病。 抗力降低时，可引起各种念珠菌病。 可引起阴道炎、外阴炎、龟头炎、包皮炎。 可引起阴道炎、外阴炎、龟头炎、包皮炎。 白假丝酵母菌可引起体质虚弱婴儿的鹅口疮。 白假丝酵母菌可引起体质虚弱婴儿的鹅口疮。 引起肠炎、肺炎、膀胱炎、肾盂肾炎、 引起肠炎、肺炎、膀胱炎、肾盂肾炎、脑膜 脑膜脑炎、脑脓肿， 炎、脑膜脑炎、脑脓肿，长期用静脉内导管 引起全身假丝酵母菌病，病死率极高。 引起全身假丝酵母菌病，病死率极高。
真菌的形态特性 ：
真菌按形态分为单细胞和多细胞两大类。 真菌按形态分为单细胞和多细胞两大类。 单细胞真菌呈圆形或卵圆形， 单细胞真菌呈圆形或卵圆形，如酵母菌和类 酵母菌，以出芽方式繁殖， 酵母菌，以出芽方式繁殖，对人致病的主要 有新生隐球菌和白假丝酵母菌。 有新生隐球菌和白假丝酵母菌。 多细胞真菌有菌丝和孢子，菌丝伸长分支， 多细胞真菌有菌丝和孢子，菌丝伸长分支， 交织成团，称丝状菌，又称霉菌， 交织成团，称丝状菌，又称霉菌，对人致病 的有皮肤癣菌等。 的有皮肤癣菌等。 有些真菌因环境条件改变， 有些真菌因环境条件改变，可有一重形态转 变为另一种形态，此真菌称为二相性真菌。 变为另一种形态，此真菌称为二相性真菌。
药物敏感试验： 药物敏感试验：
对二性霉素B 对二性霉素B、5-FC等药物敏感，但对 FC等药物敏感 等药物敏感， 5-FC极易产生耐药性。体外药敏实验一 FC极易产生耐药性 极易产生耐药性。 般不做。 般不做。
隐球菌
隐球菌（Cryptococcus)归入半知菌亚门 归入半知菌亚门、 隐球菌（Cryptococcus)归入半知菌亚门、 半知菌纲，隐球菌目、隐球菌属。 半知菌纲，隐球菌目、隐球菌属。该菌 1894年首先在法国发现 我国于1964 年首先在法国发现， 于1894年首先在法国发现，我国于1964 年在南京首先发现。隐球菌属包括17个 年在南京首先发现。隐球菌属包括17个 种和7个变种， 种和7个变种，其中仅新生隐球菌及其 变种有致病性， 变种有致病性，新生隐球菌广泛分布于 自然界，也可以存在与人体体表、 自然界，也可以存在与人体体表、口腔 和肠道中。 和肠道中。
分离培养： 分离培养：
培养基 培养一般采用葡萄糖蛋白胨琼脂， 培养一般采用葡萄糖蛋白胨琼脂，即沙 氏琼脂、PH4.0-6.0一般细菌不宜生长 一般细菌不宜生长。 氏琼脂、PH4.0-6.0一般细菌不宜生长。 许多病原性真菌如白假丝酵母菌在血琼 脂上生长良好， 脂上生长良好，二相性真菌常使用营养 更丰富的脑心浸液琼脂。 更丰富的脑心浸液琼脂。 培养方法：平皿培养法、 培养方法：平皿培养法、大试管培养和 玻片培养等。 玻片培养等。
白假丝酵母菌引起的皮炎
白假丝酵母菌引起的粘膜白斑
微生物特性： 微生物特性：
白假丝酵母菌呈圆 形或卵圆形， 形或卵圆形，直径 3-6UM。革兰阳性， 6UM。革兰阳性， 着色不均匀。 着色不均匀。出芽 方式繁殖， 方式繁殖，在组织 内可见芽生孢子， 内可见芽生孢子， 假菌丝， 假菌丝，在玉米粉 培养基中可产生假 菌丝和厚膜孢子。 菌丝和厚膜孢子。 白色念珠菌革兰染色镜下形态
原发性新型隐球菌病
新型隐球菌病昏迷的患儿
（二）微生物特性
新生隐球菌在组织中呈圆形或卵圆 直径一般在4 6UM， 形，直径一般在4-6UM，外有宽厚 的荚膜，荚膜较菌体大1 的荚膜，荚膜较菌体大1-3倍，折光 性强， 性强，一般染色法不宜着色而难以 发现而得名。常采用墨汁负染色， 发现而得名。常采用墨汁负染色， 在黑色背景下可镜检到透亮菌体和 荚膜。非致病性隐球菌无荚膜。 荚膜。非致病性隐球菌无荚膜。新 生隐球菌有明显的生物学多态性， 生隐球菌有明显的生物学多态性， 在沙氏培养基上形成白色至奶油色 粘稠菌落。 粘稠菌落。
2、霉菌菌落
是多细胞真菌的菌落， 是多细胞真菌的菌落，菌落呈 棉絮状、绒毛状、粉末状， 棉絮状、绒毛状、粉末状，并 产生不同的色素，如皮肤癣菌。 产生不同的色素，如皮肤癣菌。
真菌的检验方法： 真菌的检验方法：
类同细菌检验，真菌的检验方法 类同细菌检验， 包括： 包括： 1.直接镜检细菌形态 1.直接镜检细菌形态 2.抗原检测 2.抗原检测 3.真菌的分离培养与鉴定 3.真菌的分离培养与鉴定 4.真菌核酸检测及真菌毒素检测等 4.真菌核酸检测及真菌毒素检测等
病原性真菌
深部真菌感染
深部真菌感染是指能侵袭深部组织和内 脏及全身的真菌，主要有假丝酵母菌、 脏及全身的真菌，主要有假丝酵母菌、隐 球菌、曲菌、毛霉、 球菌、曲菌、毛霉、组织胞浆菌和卡氏肺 孢菌等，其中以隐球菌感染较常见。 孢菌等，其中以隐球菌感染较常见。 组织胞浆菌为二相性真菌，假丝酵母菌、 组织胞浆菌为二相性真菌，假丝酵母菌、 曲霉菌、 曲霉菌、毛霉和卡氏肺胞菌等为条件致病 只有在一定条件，才引起机体致病。 菌，只有在一定条件，才引起机体致病。
（一）、临床意义 ）、临床意义
本菌属外源性感染。经呼吸道侵入人体，由 本菌属外源性感染。经呼吸道侵入人体， 肺血行播散时可侵犯所有脏器组织， 肺血行播散时可侵犯所有脏器组织，主要侵 犯肺、脑及脑膜，也可侵犯皮肤、关节、 犯肺、脑及脑膜，也可侵犯皮肤、关节、骨。 新生隐球菌病好发于细胞免疫功能低下者。 新生隐球菌病好发于细胞免疫功能低下者。 近二十年来，隐球菌的发病率越来越高。 近二十年来，隐球菌的发病率越来越高。在 国外为AIDS病最常见的并发症之一 病最常见的并发症之一， 国外为AIDS病最常见的并发症之一，是 AIDS死亡的首要原因 AIDS死亡的首要原因。在国内已将隐球菌病 死亡的首要原因。 与病毒性肝炎同列为乙类传染病。 与病毒性肝炎同列为乙类传染病。是人类面 临的一种严重的真菌病。 临的一种严重的真菌病。新生隐球菌的致病 物质是荚膜。 物质是荚膜。