Ru安宫黄体酮环的孢菌素维拉帕米对非P—g介导的卵巢癌耐顺铂细胞株COC／DDP耐药性的逆转

Ru-486、安宫黄体酮、环孢菌素、维拉帕米对非P—g介导的卵巢癌耐顺铂细胞株COC1／DDP耐药性的逆转

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研究报告?

生物技术通报

BIoTECHNoLoGYBULLETIN2008年第2期

Ru一486,安宫黄体酮,环孢菌素,维拉帕米对非P—g介导的

卵巢癌耐顺铂细胞株COC1/DDP耐药性的逆转

康楷,z黄林董晓静朱园方胡丽娜1,4

('重庆医科大学附属第二医院妇产科,重庆400010;SchoolofHealthSciences,UniversityofWollongong,Wdlongong,2522,NSW, Australia;贵F13医学院附属医院妇产科,贵F13550004;四川大学华西医学中心第二医院妇产科,成都610041)

摘要:目的在同一实验系统中比较Ru～486,MPA,vP,CsA对非P—g介导的卵巢癌耐顺铂细胞株COC1/

DDP耐药性的逆转作用并对其作用机制进行探讨,为I洛床克服耐药提供参考依据.方法采用MTT法从细胞代谢,DNA

凝胶电泳从细胞凋亡方面系统观察比较DDP,Ru一486,MPA,vP,CsA5种药物对卵巢癌多药耐药细胞系COC1/DDP的

影响及相互关系,检测上述5种药物与COC1/DDP作用时细胞内GSH—ST和GSH—Px活性的变化,并采用western

blotting以Bcl一2抗体为分子探针对上述5种药物与COC1/DDP作用时细胞内Bcl一2基因的表达进行测定对其逆转机制

进行探讨.结果1)Ru一486,CsA,MPA对COCI/DDP有直接抑制作用,其抑制率随浓度增高进行性升高,而VP对

COC1/DDP没有直接抑制作用.和DDP联用时,Ru一486,MPA,vP,CsA都能显着增强COC1/DDP对DDP的敏感性,

达到一定浓度后,可以完全逆转COC1/DDP对DDP的耐药性.这种逆转是通过抑制细胞代谢,诱导细胞凋亡的结果.2)

单纯2.5g/ml的DDP能使GSH—Px及GST活力上升,除vP外,Ru一486等药物可降低GSH—Px和GST活力,与DDP

联用时亦如此.提示,Ru一486,CsA,MPA可以通过抑制GSH转移酶系统阻止对细胞损伤的修复而达到对耐药性的逆转.

3)单独的DDP,Ru一一486等药物非但对Bcl一2的表达没有抑制作用,反而促进了其表达,以MPA最甚.与DDP联用时,

却出现了一个有趣的现象,即可以抑制Bcl一2的表达,Ru一486与DDP联用时Bcl一2的表达几乎完全被阻截.结论:vP,

Ru一486,CsA和MPA对卵巢癌多药耐药细胞系COC1/DDP的耐药性有确切逆转作用.其逆转机制可能与降低GSH转

移酶系统活性有关.当与DDP联用时可以通过降低Bcl一2蛋白表达来逆转耐药. 关键词:卵巢癌多药耐药逆转剂凋亡谷胱甘肽Bcl一2

Ru一486,MedroxyprogesteroneAcetate,CyclosporinAand VerapamilReversetheMDRPhenotypeoftheHumanNon?-P?- glycoprotein—translatedCisplatinResistanceOvarianCancerCell

LineCOC1/DDP

KangKai'HuangLinDongXiaojing'ZhuYuanfangHuLina?

('O&G,TheSecondAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity,Chongqing4 00010;2SchoolofHealthSciences,

UniversityofWollongong,Wollongong,2522,NSW,Australia;O&G,TheAffiliatedH ospitalofGuiymtgMedicalCollege.

Guiyang550004;40&G,TheSecondAffiliatedHospitalofHuaxiMedicalCentre,Sich uanUniversity,Chengdu610041)

Abstract:ObjectiveOvarianmahgnanttumorisoneofthethreemostharnffulfemalegenimlt umors.Forlackof

efficienttreatment,thefive—year-survival—ratehavelongbeenloweredattherangeof25%～30%Multi—drugresistance

(MDR)isthemajorreasonthatresultsthepatientabadconsequencewhenchemicaltherapyw asdone.Toinvestigation theMDRinhibitorhasbecomeaveryimportantnfissionofthetumorchemicaltherapysincev erapamilwasfoundthat

couldbeusedasaMDRreverserin1981.Ourstudyisaimtoobservesystemicallytheinfluence offivedrags(DDP,

收稿日期:2oo7一l2—18

基金项目:困家自然科学基金资助项目(30371619)

作者简介:康楷,博士研究生,主治医师,现为澳大利亚Wollongong大学访问学者;E —mail:.au

通讯作者:胡丽娜,四川大学华西医学中心第二医院妇产科医生

2008年第2期

康楷等:Ru?486,安宫黄体酮,环孢菌素,维拉帕米对非P-g介导的

卵巢癌耐顺铂细胞株COC1/DDP耐药性的逆转173

Ru-486,MPA,Vp,CsA)onthenon-P—glycoprotein—translatedcisplatinresistancecellfinesCOC1/DDPandtheirmutual

relationships,andtrytoinvestigatethemechanismofthereversion.MethodsUsingMTTtoob servetheeffectof

reversion.ApoptosisDNAgelelectrophoresis,GSH?STandGSH.Pxanalysisaswellaswest emblottingwereusedto

approachthemechanismofreversion.ResultsRu一486,CsA,MPAcanrepressCOC1/DDPdirectly.theirrepressiverateis binedwithD DP,allofRu.486,CsA,

MPA,VPcanenhancethesusceptibilityofDDP,whencertainconcentrationisreached,theres istanceofCOC1/DDPcan

betotallyreversed.Thisreversioniscausedbythemetabolismrepression,apoptosisinductio