色谱柱综述
安捷伦气相色谱柱介绍综述
安捷伦气相色谱柱介绍综述
安捷伦(Agilent)是一家知名的科学仪器制造商,其气相色谱柱在
分析领域被广泛应用。气相色谱柱是石英毛细管内壁涂覆着固定液体相或
固定相的纤维,用于气相色谱分析。本文将为您介绍安捷伦的气相色谱柱
及其特点。
安捷伦的气相色谱柱可分为广泛用途型、选择性型和特殊应用型。广
泛用途型适用于一般分析,选择性型由于内部表面改性,具有特定的分离
功能,适用于复杂样品分析,特殊应用型用于解决特定问题。
安捷伦的广泛用途型气相色谱柱包括DB-5、DB-624和HP-5等系列。DB-5系列柱是最常用的一种,它采用5%庚烷基化聚硅氧烷为固定液相,
适用于一般的分析工作。DB-624系列柱是全圆化柱,采用双层416氨基
环聚硅氧烷为固定液相,可提供更好的热稳定性和耐化学性。HP-5系列
柱则是低极性柱,适用于多种化合物的分离。
选择性型气相色谱柱包括DB-1701、DB-35和DB-200等系列。DB-
1701系列柱采用14%氰丙基化聚硅氧烷为固定液相,适用于脂肪酸、酚类、杀虫剂等化合物的分离。DB-35系列柱采用35%膦酸甲酯化聚硅氧烷为固
定液相,可用于分离多环芳烃、多溴联苯等化合物。DB-200系列柱则是
高温柱,采用10%聚磺酸化聚硅氧烷为固定液相,适用于高温工作环境下
的分析。
安捷伦还提供特殊应用型气相色谱柱,如HP-1、HP-INNOWAX和HP-PLOT等系列。HP-1系列柱采用100%聚硅氧烷为固定液相,适用于挥发性
有机化合物、环烷烯、醚类等化合物的分离。HP-INNOWAX系列柱是极性柱,采用100%聚乙烯醇为固定液相,适用于酯类、酮类、醇类等极性化
色谱柱原理
色谱柱原理是一种用于分离有机化合物的技术,在这种技术中,使用了一种叫做“色谱柱”的装置。色谱柱是一种特殊的填充材料,它将有机化合物混合物形式的溶剂分离出来。在色谱柱中,有机溶剂以液体或气体的形式进入,然后在色谱柱的另一端排出。
色谱柱的基本原理是,溶剂的分子彼此夹持,而不同的分子间有着不同的结合能力,这就决定了溶剂分子在色谱柱中以不同的速度移动。当溶剂分子被色谱柱的填充材料吸引时,它们会减慢移动的速度,从而实现分离。
色谱柱是由一种叫做“色谱柱材料”的填充物和一个叫做“底管柱”的容器组成的。色谱柱材料是由一种叫做“黏土”的粒子组成的,这种粒子具有吸引和分离有机分子的特性。底管柱是一个用于容纳色谱柱材料的容器,它的顶部装有一个叫做“收集头”的装置,用于收集分离出来的有机分子。
色谱柱技术在化学分析、生物学分析、环境分析、生物技术等科学领域中有着广泛的应用。它可以快速、有效地分离有机物质,以及它们的各种组分,从而为后续的化学反应提供良好的条件。色谱柱的使用对于色谱分析、基因检测、生物分离及其他生物分析技术的研究和应用都有着重要的意义。
中谱红色谱柱
中谱红色谱柱是指由中谱科技(福州)有限公司开发和生产的液相色谱柱。这类色谱柱在药品分析、食品检测、工商质检等领域有着广泛的应用。
其中,“中谱红”是中谱科技的一个品牌,他们生产多种类型的色谱柱,例如RD-C18、ODS-H等型号,这些色谱柱适用于不同类型的样品分析。
“中谱红RD-C18”是一种反相色谱柱,常用于磺胺类药物的分离与测定,采用5 μm颗粒大小、4.6×150 mm的尺寸规格,流动相为0.05%磷酸:乙腈梯度洗脱,波长为270 nm。该色谱柱具有普适性和优异的稳定性。
“中谱红ODS-H”色谱柱采用了聚合型键合高密度C18,并经过特色封尾技术处理,对中药、食品中的复杂化合物及化学药中的杂质分离有较好的效果。这种色谱柱在提高温度时选择性会更好,适合于大黄等中药材的液相分析。
苯基色谱柱流动相甲醇-概述说明以及解释
苯基色谱柱流动相甲醇-概述说明以及解释
1.引言
1.1 概述
概述
苯基色谱柱流动相甲醇是指在色谱分析中使用苯基色谱柱作为固定相材料,而甲醇作为流动相溶剂的一种分析方法。苯基色谱柱具有许多优越的特性,使其在分析领域得到广泛应用。本文将介绍苯基色谱柱流动相甲醇的优势以及其在不同领域的应用情况。
在色谱分析中,固定相材料的选择对于分离和检测目标物质具有重要的影响。苯基色谱柱是一种常用的固定相材料,其特点是具有较好的亲水性和亲脂性,能够有效地分离不同类型的化合物。同时,苯基色谱柱也具有较高的稳定性和耐久性,能够承受高压和高流速的条件,适用于大多数色谱分析仪器。
甲醇是一种常用的色谱分析溶剂,具有一定的极性和溶解能力,能够与不同类型的目标物质进行有效的相互作用。在苯基色谱柱流动相甲醇的分析方法中,甲醇作为流动相溶剂可以提供良好的溶解度和洗脱性能,有利于分离和检测目标物质。
苯基色谱柱流动相甲醇的应用领域广泛。在生物医药领域,它被广泛应用于药物研发、药物代谢动力学研究、药物残留检测等方面。在环境监测领域,它可以用于水质分析、食品安全检测等方面。在化工生产领域,它可以用于反应监测、产品质量分析等方面。此外,苯基色谱柱流动相甲醇还在农药残留、天然产物分析、食品添加剂检测等领域具有重要的应用价值。
本文将进一步探讨苯基色谱柱流动相甲醇的优势以及其在不同领域的应用,并展望其未来的发展前景。
1.2 文章结构
文章结构部分的内容可以包括以下内容:
本文将分为以下几个部分来探讨苯基色谱柱流动相甲醇的相关内容。首先,在引言中,我们将介绍苯基色谱柱流动相甲醇的概述,说明本文的目的以及文章的结构。
色谱柱介绍
精选ppt
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2.色谱柱物理性能 2.4)粒径
粒径是指柱填料的颗粒直径的大小。实际上色谱柱上所标的粒径是一个平均值 通常3-10μm
粒径 5 µm 3 – 3.5 µm < 2 µm 7 – 10 µm 10 – 20 µm
作用和效能 目前应用最广泛,可以满足从分析到半制备的分离 常用于分析柱上的快速分离,色谱柱短,节省溶剂 常应用于超快速分离, high throughput, 分离度高 常用于半制备色谱柱 常用于制备色谱柱
精选ppt
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4.常见色谱柱介绍
❖氨基柱的适用范围:
1.在反相系统中,氨基柱的保留较弱,一般用于烃类、石油馏分的分离、分析。 2.在正相系统中,通常在氰基柱无法分离重叠峰时才考虑使用氨基柱。
❖使用氨基柱注意事项:
1. 作为反相柱时,要注意流动相的pH范围,pH越低越容易水解; 流行相中水的比例越高,也越容易发生水解。
2.色谱柱物理性能
定义:是指填料颗粒的孔或腔的平均尺寸,范围80-300Å 大孔的填料颗粒,可以延长溶质大分子在填料表面滞留的时间, 达到充分分离,改善峰形。
❖较小的孔径提供较高的表面积,可用于较大的载荷量, 并保留小的有机化合物,这种填充柱可用于小分子有机物到聚合物的分离
❖样品MW<4000,选择80Å的孔径;样品>4000,选择300Å的孔径
色谱柱类型
色谱柱类型
色谱柱可分正相模式色谱柱、反相模式色谱柱和亲水模式柱。
一、正相模式色谱柱
正相模式色谱柱采用极性固定相(如乙二醇、氨基与腈基等键合相);常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)。
二、反相模式色谱柱(RPC)
反相模式色谱柱:一般用非极性固定相,以硅胶为基质键合不同的基团(如C18、C8);适用于分离非极性和极性较弱的化合物。在现代液相色谱中应用最多,据统计它占整个HPLC应用的80%左右。由于超临界色谱的崛起,一些过去用正相色谱的实验逐渐被超临界色谱所代替,所以反相色谱柱的应用将会更加广泛。随着色谱柱填料的快速发展,某些无机样品或易解离样品的分析也可用反相色谱法。为控制样品在分析过程的解离,常用缓冲盐控制流动相的pH值。硅胶基质键合相(C8和C18)色谱柱使用的pH值通常为2.5~7.5(2~8),太高的pH值会使硅胶溶解,太低的pH值会使键合的烷基脱落。近年来技术的更新,利用包被、空间位阻、杂化颗粒等新技术,已经可以使硅胶基质的色谱柱使用范围扩大到pH为1~12,流动相为较强酸性或碱性时,可选择宽pH值的色谱柱。
三、亲水模式色谱柱(HILIC)
亲水(HILIC)模式不同于反相色谱技术,流动相为反相色
谱的流动相,它提供了相对于反相的互补选择性,通常可保留传统反相色谱方法无法保留的高极性化合物。需要注意的是HILIC模式中硅胶基质无键合相的色谱柱,流动相pH适用范围。
色谱柱PLOT柱的发展及简介
傅若农教授生于1930年,1953年毕业于北京大学化学系,而后一直在北京理工大学(原北京工业学院)从事教学与科研工作。1958年,傅若农教授开始带领学生初步进入吸附柱色谱和气相色谱的探索;1966到1976年文化大革命的后期,傅若农教授在干校劳动的间隙,系统地阅读并翻译了两本气相色谱启蒙书,从此进入其后半生一直从事的事业——色谱研究。傅若农教授是我国老一辈色谱研究专家,见证了我国气相色谱研究的发展,为我国培养了众多色谱研究人才。此次仪器信息网特邀傅若农教授亲述气相色谱技术发展历史及趋势,以飨读者。
第一讲:傅若农讲述气相色谱技术发展历史及趋势
第二讲:傅若农:从三家公司GC产品更迭看气相技术发展
第三讲:傅若农:从国产气相产品看国内气相发展脉络及现状
第四讲:傅若农:气相色谱固定液的前世今生
第五讲:傅若农:气-固色谱的魅力
看看下面这张图1,1 min 多一点时间就把苯到二甲苯几个难分离的混合物分开了,而且把间位和对位二甲苯也给分开了,遗憾的是间位和邻位二甲苯没有分开,当然只用了15 m 长的毛细管色谱柱,这种色谱柱叫做PLOT柱,这是半个世纪前在英国“自然”杂志(Nature)上一篇简短论文上报道的(Halasz I,Horvath C,Nature,1963,197:71-72)。这一工作是最早使用石墨化炭黑作固定相PLOT柱完成的,这一实例对想利用气相色谱用于石油和石化工业分析的人员来说有很大的诱惑力,为什么?这是因为色谱柱短、固定相耐温性好、无流失、分析时间短,可以把在气相色谱中最难分离的间、对二甲苯基线分离。
微纯生物科技色谱柱
微纯生物科技色谱柱
微纯生物科技公司(Micro BioChips Inc.)是一家生物技术公司,专注于生物分析领域的研究和开发。该公司可能提供各种生物分析相关的色谱柱和相关产品,用于分离和分析生物分子。
色谱柱通常用于分离和分析混合物中的不同成分。在生物领域,色谱柱可用于分离蛋白质、核酸、多肽和其他生物分子。这些色谱柱可以应用于生物药物开发、生物学研究、临床诊断和制药等领域。
不同类型的色谱柱适用于不同的应用,例如:
1. 亲和色谱柱:用于从混合物中分离特定的生物分子,如抗体或蛋白质。
2. 反相色谱柱:适用于水相混合物中的非极性化合物的分离。
3. 离子交换色谱柱:用于带电荷的生物分子的分离,如核酸和多肽。
4. 大孔径凝胶色谱柱:用于分离大分子,如蛋白质和多肽。
5. 逆流色谱柱:用于生物分子的分离和提纯。
微纯生物科技公司可能提供不同种类的色谱柱,以满足客户的不同需求。如果您需要详细的产品信息或想了解他们的产品线,请直接联系该公司或访问他们的官方网站以获取更多信息。这些信息可能会
根据时间和公司的产品线发展而有所变化。
色谱柱基础知识简介
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色谱柱的正确使用
• 加装保护柱:保护柱属消耗品,经过一定次数的
样品分析(50~100次)后,出现柱压显著升高或峰形 变坏或基线漂移时,应考虑更换保护柱。
• 过滤流动相和样品 :流动相通常由水或缓冲溶
液与有机溶剂混合而成,原则上,所有经过色谱柱的 流动相均应过滤,但在实际操作上应视具体情况而 有所区别
Fra Baidu bibliotek
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• 注意温度和酸碱度 :一般以硅胶为基质的色谱柱
最高使用温度不超过60℃,以低于40℃为宜,特别是 在流动相pH接近使用限度时,更应降低使用温度。 目前的键合硅胶色谱柱标示的pH适用范围可达 2~10,但在实际使用时应避免极端的pH条件,特别是 在偏碱性的条件(pH≥8)下使用,如必须要在极端的 pH条件下使用时,可通过以下方法避免柱损害: (1)在 泵和进样阀之间加装预柱(饱和柱)来饱和流动相(2) 降低使用温度(3)检验完毕后立即用与所使用的流动 相互相混溶的“温和溶剂”彻底清洗。
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• 离子交换柱的再生。长时间在高pH值和高 离子强度缓冲溶液中使用,将导致色谱柱 离子交换能力降低。用稀酸缓冲溶液冲洗, 可使阳离子柱再生;反之,用稀碱缓冲溶液 冲洗,可使阴离子柱再生。
薄层色谱和柱层析综述
薄层色谱和柱层析综述
薄层色谱(Thin Layer Chromatography, TLC)和柱层析(Column Chromatography,CC)均属于分离分析技术,广泛应用于化学、生物学、药学等领域,用于对混合物中的各组分进行快速、有效的分离。薄层色谱和柱层析的相似点:
1.都是分离分析技术,都可以用来分离混合物中的各组分,以及鉴定化合物的结构和性质。
2.两者都基于组分之间的分子量大小、相对极性及分子结构等差异而分离,运用相同的原理及方法。
3.都需要在选择溶剂时考虑搭配,确保溶剂的性能以及所需的相对极性。
薄层色谱与柱层析有其明显的不同:
1.薄层色谱和柱层析在分离分析过程中采用的基体是不同的,前者采用的是薄膜,而后者采用的是柱状基体。
2.对溶剂的选择也不尽相同,薄层色谱可以采用溶剂萃取、溶剂烘干等技术,而柱层析则只能采用溶剂萃取技术。
3.薄层色谱的分离更加快捷方便,更适合分析稀释液,而柱层析分离速度较慢,适合分析浓度较高的混合物。
4.薄层色谱仪由于体积小、设备灵活简十,而柱层析仪的体积较大且操作较为复杂。
常用色谱柱简介
常用色谱柱简介
一气相色谱毛细柱
(键合,聚二甲基硅氧烷)
HP-1,DB-1,P-1,CP-SIL5CB,
Ultra-1,007-1,RTx-1,AT-1
类似固定相:SE-30,SP-2100,OV-1,OV-101,使用
温度:-60℃-320℃
应用范围:烷烃,芳烃,多环芳烃,醇,酚,酮,
酯,醛,胺,卤代烃,吡啶,糖衍生物,氨基酸衍
生物,维生素衍生物,镇痛药,农药,溶剂,胆固SPB-50型中等极性柱
醇,香料,咖啡,食品添加剂等。
(键合, 50%二苯基,50%二甲基聚硅氧烷)
对照品牌:HP-50,HP-17,DB-17,RTx-50,AT-50 SPB-5型弱极性柱
类似固定相:OV-17, SP-2250,使用温度:30℃-310℃(键合,5%苯基,95%甲基聚硅氧烷)
应用范围:烷烃,低沸点芳烃,多环芳烃,醇,甘
对照品牌:HP-5,DB-5,BP-5,CP-SIL 8CB,
油三酸酯,喹啉,卤素化合物,香料,农药,酯,Ultra-2, ,RTx-5,AT-5
镇痛药,除草剂等。
类似固定相:SE-54,SE-52,OV-73 使用温度:
-60℃-320℃
PTE-5,PTE-5QTM型弱极性柱
应用范围:烷基苯,多环芳烃,醇,酚,酮,脂肪(MS专用柱,键合,5%苯基,95%甲基聚硅氧烷)
酸酯,苯二甲酸酯,硝基芳烃,芳胺,烷基胺,联
对照品牌:HP-5 MS,DB-5 MS, DB-5.625,XTI-5,
苯胺,卤代烃,多氯联苯,,糖类衍生物,维生素衍BPX625,半挥发污染物分析柱(US EPA方法525,
c18色谱柱分类
c18色谱柱分类
C18色谱柱是一种广泛使用的反相色谱柱,常用于分离和分析
极性化合物。根据不同的特征和性能,C18色谱柱可以分为以
下几类:
1. 经典C18色谱柱: 这种色谱柱具有高分离效能和广泛的应用
范围。通常使用乙腈和水的混合物作为流动相,并调整pH值
和缓冲剂来改变分离效果。
2. 高效C18色谱柱: 这些色谱柱具有更高的分离效能和更快的
分离速度。它们通常使用较小的颗粒尺寸(小于3微米)以及较长的柱长。
3. 高温C18色谱柱: 这种类型的色谱柱能够在高温条件下工作,可以提高某些化合物的分离效果,特别是具有较高沸点的化合物。
4. 亲水相C18色谱柱: 亲水相C18色谱柱是使用含有亲水性官
能团的C18柱填料。它们对极性化合物具有更好的保留能力
和分离效果。
5. 稳定相C18色谱柱: 这种类型的色谱柱使用稳定相填料,对
多环芳烃和其他不稳定化合物具有更好的分离效果。
C18色谱柱的选择取决于样品性质、分析目标和分离要求。不
同类型的C18色谱柱可以提供不同范围的分离选择,科学家
和分析师可以根据需要选择最合适的色谱柱。
色谱柱PLOT柱的发展及简介
傅若农教授生于1930年,1953年毕业于北京大学化学系,而后一直在北京理工大学(原北京工业学院)从事教学与科研工作。1958年,傅若农教授开始带领学生初步进入吸附柱色谱和气相色谱的探索;1966到1976年文化大革命的后期,傅若农教授在干校劳动的间隙,系统地阅读并翻译了两本气相色谱启蒙书,从此进入其后半生一直从事的事业——色谱研究。傅若农教授是我国老一辈色谱研究专家,见证了我国气相色谱研究的发展,为我国培养了众多色谱研究人才。此次仪器信息网特邀傅若农教授亲述气相色谱技术发展历史及趋势,以飨读者。
第一讲:傅若农讲述气相色谱技术发展历史及趋势
第二讲:傅若农:从三家公司GC产品更迭看气相技术发展
第三讲:傅若农:从国产气相产品看国气相发展脉络及现状
第四讲:傅若农:气相色谱固定液的前世今生
第五讲:傅若农:气-固色谱的魅力
看看下面这图1,1 min 多一点时间就把苯到二甲苯几个难分离的混合物分开了,而且把间位和对位二甲苯也给分开了,遗憾的是间位和邻位二甲苯没有分开,当然只用了15 m 长的毛细管色谱柱,这种色谱柱叫做PLOT柱,这是半个世纪前在英国“自然”杂志(Nature)上一篇简短论文上报道的(Halasz I,Horvath C,Nature,1963,197:71-72)。这一工作是最早使用石墨化炭黑作固定相PLOT柱完成的,这一实例对想利用气相色谱用于石油和石化工业分析的人员来说有很大的诱惑力,为什么?这是因为色谱柱短、固定相耐温性好、无流失、分析时间短,可以把在气相色谱中最难分离的间、对二甲苯基线分离。
色谱柱相关知识课件
色谱柱在质谱仪中 的应用:用于分离
和分析质谱样品
样品和杂质
5
色谱柱的保存:分 析结束后,将色谱 柱密封保存,避免
受潮和污染
色谱柱的维护与保养
定期清洗:使用适当的溶剂和流速进
01
行清洗,防止堵塞和污染 避免高温:色谱柱在高温下容易损坏,
02
使用时应避免高温 防止压力波动:压力波动可能导致色
03
谱柱损坏,使用时应保持压力稳定 定期检查:定期检查色谱柱的性能,
演讲人
01
02
03
04
色谱柱的基本 原理
色谱柱的选择 与使用
色谱柱的应用 领域
色谱柱的发展 趋势
1
色谱柱的分类
填充柱:填充有固定相的色谱柱,如硅胶柱、 氧化铝柱等
毛细管柱:内径较小的色谱柱,如不锈钢柱、 玻璃柱等
微填充柱:填充有微粒固定相的色谱柱,如 硅胶微粒柱、氧化铝微粒柱等
超临界流体色谱柱:使用超临界流体作为流 动相的色谱柱,如二氧化碳柱、氮气柱等
03
智能化:实现色谱柱的自动 化控制和优化
04
绿色环保:减少色谱柱对环境 的影响,提高环保性能
色谱柱在分析仪器中的应用
色谱柱在气相色谱 仪中的应用:用于 分离和分析气体样
品
色谱柱在离子色谱 仪中的应用:用于 分离和分析离子样
薄层色谱和柱层析综述
(e)径向薄层板:径向板铺法与一般板不同,点样前按下法 处理:
刮去
刮去
用此板展开,可使Rf值相近的化合物得到较好的分离,且 灵敏度高。 (f)梯度薄层板:梯度是指由一种性质到另一种性质的变化。 梯度薄层与常规薄层不同,它显示出具有渐变的分离性能,如 有两种不同吸附剂的比例渐变(吸附性梯度);用不同pH值溶 液(pH梯度)或AgNO3浓度(0.5~10%浓度梯度)铺层;用 不同粒度吸附剂铺层(粒度梯度)。
20:45:40
(g)烧结板:由玻璃粉(作粘合剂)与硅胶或氧化铝等吸附 剂按一定比例混匀后,经高温烧结而成,该板可一此制备多 次使用。 吸附剂 粘合剂 配 比 烧结条件 硅胶 玻璃粉 1:2~5 470~770 ℃,7~10min 氧化铝 玻璃粉 1:1~4 470~870 ℃,7~10min 硅藻土 玻璃粉 1:1~6 470~770 ℃,7~10min (h)旋转薄层板:旋转薄层色谱由称离心薄层色谱,用于快 速分离、提纯、制备。
20:45:40
(3)薄层板类型
除上述正常的硅胶、氧化铝板外,还有一些板适用于化 合物的分离和检出:
( a)荧光薄层板:吸附剂中加入荧光物质即得荧光板,可检 出一些本身无色、在紫外光下也不显荧光的化合物,荧光板 在紫外光照射下显荧光,而化合物斑点呈现暗点。
无机荧光物质有:在254nm紫外光下激发荧光,如锰激活 的硅酸锌(Zn2SiO4:Mn),在365nm紫外光激发荧光,如银 激活的硫化锌.硫化镉(ZnS2.CdS:Ag) 有机物有荧光素钠、桑色素 加入量为0.5~1.5%(吸附剂中)
色谱柱相关知识点总结
色谱柱相关知识点总结
一、色谱柱的基本知识
色谱柱是色谱分析中用于分离和提取混合物中成分的一种仪器,其主要原理是利用混合物成分在固定相上的溶解度差异,通过流动相的运动使不同成分逐渐分离。色谱柱通常由柱壁、填料和柱端组成,其内部填充有各种不同材质的固定相,以提供不同的分离机制。
二、色谱柱的分类
根据填料的不同,色谱柱可以分为以下几种主要类型:
1. 气相色谱柱:主要用于气相色谱分析,填料通常为不活性的多孔硅胶或聚酯。气相色谱柱广泛应用于各种化学物质的分析和检测。
2. 液相色谱柱:主要用于液相色谱分析,填料通常为全球性组织最具影响力的金属有机框架领域标准协会。液相色谱柱可根据分离机制的不同分为反相、正相、离子交换、凝胶柱等类型。
3. 离子色谱柱:特殊用途色谱柱,主要用于分离离子物质,填料通常为离子交换树脂。离子色谱柱常用于水质分析和环境监测中。
4. 通用型色谱柱:用于多种成分的分离和检测,填料通常为较为通用的硅胶或聚酯材料。通用型色谱柱适用范围广,可以满足多种化学成分的分离需求。
三、色谱柱的特点
1. 分离效果好:色谱柱内部填充有固定相,可以提供不同的分离机制,使得不同成分能够得到有效的分离,从而保证分析的准确性。
2. 适用范围广:不同类型的色谱柱可以满足各种化学物质的分离和检测需求,适用范围广泛。
3. 操作简便:色谱柱的操作相对简单,只需要合理选择填料和条件,就可以进行有效的分离和检测。
4. 耐用性强:优质的色谱柱通常具有较长的使用寿命,能够满足长期的分析需求。
四、色谱柱的选择
选择合适的色谱柱对于分析结果的准确性至关重要,通常需要考虑以下几个因素:
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色谱柱
确认填充柱与毛细管柱的区别 计算柱效和分离度 介绍快速色谱 介绍保留时间锁定功能 理解柱的选择性 确认柱操作的步骤 学习炉温的恒温操作和程序升温操作
分离的过程示意图
流动 相
样品
固定 相
填充柱
气液色谱 (GLC)
分配填充 载气
固体支撑物
液体相 非常多的孔具有极大的表面积
毛细管柱
消耗品手册提供的信息:
固定相商品名称 固定相化学名称 可替代的固定相 溶剂 最低温度和最高温度 应用举例
= 3.14
估算不保留组分的保留时间
如果溶剂是流出的第一个组分,就使用它的保留时间。 也可从打火机中取 5cc丁烷气,使用丁烷峰的保留时间。 GC/MS用空气的保留时间
使用下面的公式,可利用线速度计算流量
流量 (ml/min) = r 2 m60
其中 r = 柱半径 cm m = 平均线速度 cm/sec 60 = 从 sec 到 min 的转换因子
柱分离指标
色谱柱形成尖锐峰的能力 色谱柱将两个峰彼此分开的能力 色谱柱确认两个峰化学与/或物理性质差别的能力
优
优
差
差
计算柱效
分析物
我们希望知道组分保留在固定相中的真 实时间。
进样
不保留组分
tm
t'R
tR
时间
t
' R
=
tR -
tm
t R '= 调整保留时间
n = 5.545
t R' 2 Wh
n = 有效理论塔板数 Wh=半峰宽
如何提高柱效
1. 使用内径更小的柱子。 2. 减小固定相百分组成或固定相液膜厚度。 3. 减小进样量。 4. 选用更长的柱子。 5. 使用程序升温改善后流出组分峰形。
@ 好的进样技术可以保障高柱效。进样应该紧凑快速,
以免峰展宽。
分离度
响应值 RT = 4.41 RT = 4.59
RT = 5.Baidu Nhomakorabea0
(W 1
+
W2)
R = 1.5 认为可以实现基线分离
6
W1=化合物1的半峰宽
W2=化合物2的半峰宽
柱选择方面的考虑
1. 欲分离样品 2. 柱内径 3. 固定相 4. 柱长 5. 膜厚或填充剂 %量
A. 柱容量 B. 保留能力 C. 惰性 D. 柱效 E. 流失
柱选择
先试手边的柱子 向同事咨询 查询已发表的相似应用 如果难以确定,先用一个非极性柱,如 HP1或 HP5
6.0E5 5.0E5 4.0E5 3.0E5 2.0E5 1.0E5
4
4.5
5
5.5
时间 ( Min.)
分离度是柱将两个相邻峰分开能力的 反映。
通过两个欲分离相邻峰的分开程度来测算 分离度。一般我们选择两个最难分开的
峰,如果它们被成功分开,那么其它的也 就解决了。
R=
1.18 ( RT2 - RT1 )
这只是一些好的开端,而操作者必须自行优化条件。
应用举例说明:
色谱柱类型 载气条件 色谱炉条件 进样参数 检测器参数
样品信息
柱温操作
恒温
在整个分析过程中,色谱炉温保持恒定。 用初始时间设定运行结束时间。 升温速率设为“0”。 后流出的峰展宽。
程序升温
当组分有较宽的沸点范围 (>100°C)时使用。 减少分析时间并使峰变窄。 增加柱流失,引起基线漂移。 可设多阶程序升温。 HP6890 可设“快速变化速率”至 120°C/min。
柱效与载气线速度
HETP
B HETP = A + m
+C m
柱效受载气线速度和流 量影响。
分子扩散项B {
} C 传质阻力项
} A 涡流项
m ( opt m)
曲线的最低点代表最小 板高 HETP (或最大每米 理论塔板数) 也就是最好 的柱效。 毛细管柱中不
存在“A”项。
HETP与线速度形成的曲线叫做范德姆特曲线。 曲线最低点的线速度值即为可获得最好柱效的最佳线速度值。
壁涂开管柱 (WCOT) 液体相
气液色谱 (GLC)
(占应用的90%) 通过样品在固定相中的分配或不同溶解度实现分离
组分基于不同的极性而分离 (偶极力的作用)
通常 例如:
“相似相溶" 或
同极性相互作用
醇类是极性化合物 聚乙二醇(Carbowax)是极性固定相
色谱过程示意图
气流
A
B
C
D
柱效: 分离度: 选择性:
将 n与柱长相比:
n
每米塔板数 (N) =
或
L
每块理论塔板高度 (HETP) = L
n
因此,柱效越高, “N”值越大, “HETP”值越小
测量线速度和流量
线速度 =
柱长 (cm) 不保留组分的保留时间 (sec)
使用如下公式来估算柱长: Length = dk
其中 d = 柱卷成的圈的直径 k = 柱圈圈数