槐花米中芸香的提取及槲皮素的制备与检识
槐花米中芸香苷和槲皮素的提取全解
有机综合实验综述编号有机综合实验综述题目：槐花米中芸香苷及槲皮素的提取食品学院食品科学与工程专业学号**********学生姓名赵维阳指导教师毛明富二〇一六年六月目录目录摘要 (1)第1章槐花米 (1)1.1 简介及来源 (1)第2章芸香苷 (1)2.1 简介及来源 (1)2.2 功能 (2)2.3 提取方法 (3)2.3.1 碱提取法 (3)2.3.2 醇提取法 (3)2.3.3 回流提取 (3)2.3.4微波与超声交替提取法 (4)2.3.5超临界CO2萃取法..................................................................................... 错误!未定义书签。
第3章槲皮素 . (4)3.1 简介及来源 (4)3.2 功效 (5)3.3 芸香苷水解制槲皮素 (5)3.3.1 中药动态提取法 (5)3.3.2酸水解法 (5)3.3.3 星点设计效应面法 (5)参考文献 (9)芸香苷槐花米中芸香苷及槲皮素的提取摘要本文就槐花米中芸香苷和槲皮素的提取展开讨论，介绍了槐花米、芸香苷以及槲皮素的来源和性能。
通过查找资料，深入了解了芸香苷及槲皮素的提取方法：芸香苷的提取方法主要有水提取法、碱提取法、微波法、超声波法、超临界二氧化碳提取法等。
分析比较各个方法的优缺点，选取收益较高的提取方法。
槲皮素是芸香苷的水解产物，也属于黄酮类化合物。
第一章槐花米1.1 简介及来源槐米广义是为豆科植物槐（Sophora japonica L.）的干燥花蕾及花。
中国各地区产，以黄土高原和华北平原为多。
夏季花未开放时采收其花蕾，称为“槐米”；花开放时采收，称为“槐花”。
采收后除去花序的枝、梗及杂质，及时干燥，生用、炒用或炒炭用。
花蕾卵形或椭圆形，长2—6mm，直径约2mm。
花萼黄绿色，下部有数条纵纹。
萼的上方为黄白色未开放的花瓣。
花梗细小。
槐花米中芦丁和懈皮素的制备
槐花米中芸香苷和懈皮素的提取姓名：邱斌学号： 10151802241. 实验原理1.1 背景介绍芸香苷是一种广泛存在于植物体内的黄酮类的化合物，在自然界的花、叶、果实等有广泛的存在，在槐米、罗布麻等植物中的含量比较高。
槲皮素可以用来作为中药制剂，能够有效的降低毛细血管的通透性，抗病毒、清除氧自由基等功能。
具有防止动脉硬化和增强人体毛细血管的重要功能，在临床上常常被用来作为治疗心血管疾病的辅助药物。
同时由于它是一种植物提取物，它对于人体没有毒性，因此在食品工业中还被用来作为抗氧化剂和天然黄色素。
[1]。
槐花米中芸香苷的含量较高，达 12％一 20％，可作为大量提取芸香苷的原料。
[2] 懈皮素作为一种黄酮类的物质，在草本植物和食物中有广泛的分布。
同时槲皮素作为一种比较强的植物性抗氧化剂，能够防止动脉硬化等功能，在治疗冠心病等心脑血管疾病中具有重要的作用。
同时还能够清除自由基，保护心肌、降血压、降血脂以及抗菌消炎等作用，对于肿瘤细胞等均有良好的抑制效果。
[2]懈皮素可以直接从芸香苷中提取出来。
1.2 提取方法介绍在槲皮素和芸香苷的提取中已经出现了多种提取方法，而且其方法也越来越先进，对槲皮素的普及具有重要的作用。
（热）碱提取酸沉淀法[4]、热水提冷析出的方法[4]、超声辐射法[5-6]、微波辅助提取法拉[7-8]等。
这次实验我们使用醇提取法。
醇提取法利用芸香苷在已醇中溶解度小，在热乙醇中溶解度大 .以及在热水中溶解度大 .在冷水中溶解度小的性质分高。
芸香苷用溶剂加熟溶解后，趁熟抽滤，滤液放冷后能析出而达到分高的目的（如不纯可再重夏操作进行分高）。
也可采用醇溶水纯法进行精制。
1.3 芸香苷和懈皮素的理化性质芸香苷为浅黄色针状结晶（水）熔点: 176。
C-178。
C, [a]23D+13.87。
（乙醇）， [a]23D-39.43。
（吡啶）。
1g芦丁溶于 7ml甲醇， 8000ml水， 200ml 沸水。
槐花米中芦丁和懈皮素的制备
槐花米中芸香苷和懈皮素的提取：邱斌学号：10151802241.实验原理1.1背景介绍芸香苷是一种广泛存在于植物体内的黄酮类的化合物，在自然界的花、叶、果实等有广泛的存在，在槐米、罗布麻等植物中的含量比较高。
槲皮素可以用来作为中药制剂，能够有效的降低毛细血管的通透性，抗病毒、清除氧自由基等功能。
具有防止动脉硬化和增强人体毛细血管的重要功能，在临床上常常被用来作为治疗心血管疾病的辅助药物。
同时由于它是一种植物提取物，它对于人体没有毒性，因此在食品工业中还被用来作为抗氧化剂和天然黄色素。
[1]。
槐花米中芸香苷的含量较高，达12％一20％，可作为大量提取芸香苷的原料。
[2] 懈皮素作为一种黄酮类的物质，在草本植物和食物中有广泛的分布。
同时槲皮素作为一种比较强的植物性抗氧化剂，能够防止动脉硬化等功能，在治疗冠心病等心脑血管疾病中具有重要的作用。
同时还能够清除自由基，保护心肌、降血压、降血脂以及抗菌消炎等作用，对于肿瘤细胞等均有良好的抑制效果。
[2]懈皮素可以直接从芸香苷中提取出来。
1.2 提取方法介绍在槲皮素和芸香苷的提取中已经出现了多种提取方法，而且其方法也越来越先进，对槲皮素的普及具有重要的作用。
(热)碱提取酸沉淀法[4]、热水提冷析出的方法[4]、超声辐射法[5-6]、微波辅助提取法拉[7-8]等。
这次实验我们使用醇提取法。
醇提取法利用芸香苷在已醇中溶解度小，在热乙醇中溶解度大.以及在热水中溶解度大.在冷水中溶解度小的性质分高。
芸香苷用溶剂加熟溶解后，趁熟抽滤，滤液放冷后能析出而达到分高的目的(如不纯可再重夏操作进行分高)。
也可采用醇溶水纯法进行精制。
1.3芸香苷和懈皮素的理化性质芸香苷为浅黄色针状结晶(水)熔点: 176。
C-178。
C, [a]23D+13.87。
(乙醇)，[a]23D-39.43。
(吡啶)。
1g芦丁溶于7ml甲醇，8000ml水，200ml沸水。
在空气中逐渐变深，把芦J加热至185-192。
天然药化槐米中芦丁的提取分离、鉴定及槲皮素的制备
的硼酸使成饱和溶液进行测定。本法适用于在加入醋酸钠 5 分钟后有分解现象者，方法 二：于 3ml 样品中加入 5 滴硼酸饱和溶液后，快速加入醋酸钠，立即测定。
1%鼠李糖标准品水溶液 展开剂：正丁醇：醋酸：水（4：1：5 上层） 显色剂：喷邻苯二甲酸苯胺溶液后，105℃烘烤 5 分钟，显棕红色斑点。
6.光谱测定 芦丁溶液的配制 精密称取的芦丁纯品 1g，用无水甲醇溶解，并稀释至 10ml，从中吸取 5ml，置 50ml 容量瓶 中，用甲醇稀释至刻度。 A. 甲醇光谱：取样品液置石英杯中，至 200～500nm 内进行扫描，重复一次，观察紫外光
取上述溶液 1~2ml，然后滴加 2%的 ZrOCl2 的甲醇溶液，观察颜色变化（生成黄色的络 合物）。然后向试管中加入 2%的枸橼酸甲醇溶液，观察颜色变化（黄色溶液显著褪色）。 （3）Molish 反应
取上述溶液 1~2ml，置于试管中，加 10%等体积的α-萘酚乙醇溶液，摇匀，沿管壁滴 加少量浓硫酸，观察现象（两液界面处产生紫红色的环）。 4．芦丁和槲皮素的薄层色谱鉴别
槐花米的主要成分为芦丁。芦丁可降低毛细血管脆性和调节渗透性。临床上用作毛细血 管脆性引起的出血症，并常作为高血压症的辅助治疗药， 一、实验目的与要求
1．掌握酸碱法提取黄酮类化合物的原理及操作。 2．掌握化学鉴别实验、苷的水解及薄层检查等方法在苷类化合物鉴定中的作用。 3.了解 UV 在黄酮类化合物结构鉴定中的应用。 二、实验原理 芦丁（rutin）C27H30O16：浅黄色针状结晶 mp174~178℃（含三分子结晶水）；188℃（无 结晶水）。难溶于冷水，可溶于热水、热甲醇、冷甲醇、热乙醇、冷乙醇，不溶于乙醚、氯 仿、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等，易溶于碱液，酸化后析出。全水解得槲皮素和葡萄糖及鼠 李糖。 槲皮素（quercetin）C15H10O7﹒2H2O:黄色结晶,mp313~314℃（2 分子结晶水）。316℃ （无水物）。能溶于冷乙醇、易溶于沸乙醇，可溶于甲醇、乙酸乙脂、冰醋酸、吡啶、丙酮 等，不溶于水、苯、乙醚、氯仿、石油醚等。
槐米中芦丁及槲皮素的提取分离及鉴定
实验二槐米中芦丁及槲皮素的提取分离及鉴定槐米为豆科植物槐（Sophora japonica L．）的未开放花蕾。
味苦性凉、具清热凉血、止血之功。
常用于治疗多种出血症：肠风便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血、赤血下痢等。
槐米常炒炭应用。
槐米的主要化学成分为芦丁，其含量可达12～16％，其次含有槲皮素、三萜皂苷、槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米丙素等。
芦丁具有Vitp样作用，可降低毛细血管脆性和调节通透性。
临床上用作毛细血管脆性引起的出血症，常作为高血压症的辅助治疗药。
[目的要求]1．通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。
2．掌握槲皮素的制备原理及操作。
3．熟悉紫外光谱在黄酮结构鉴定中的应用4．通过芦丁的结构检识，了解苷类结构研究的一般程序和方法。
[实验原理]芦丁（rutin）：C27H30O16·3H2O，浅黄色针状结晶，mp174～178℃（含三分子水）；188℃（无水物）。
难溶于冷水（1：8000～10000），可溶于热水（1：180～200），热甲醇（1：10），冷甲醇（1：100），热乙醇（1：60），冷乙醇（1：650）；难溶于乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等，易溶于碱液。
槲皮素（quercetin）：C15H10O7·2H2O，黄色结晶，mp313～314℃（2分子结晶水），316℃（无水物）。
能溶于冷乙醇（1：290），易溶于沸乙醇（1：23），可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；难溶于水、苯、石油醚等溶剂。
芦丁为黄酮苷，分子中具有酚羟基，显酸性，可溶于稀碱液中，在酸液中沉淀析出，可利用此性质进行提取分离。
利用芦丁易溶热水、热乙醇，较难溶于冷水、冷乙醇的性质选择重结晶方法进行精制。
芦丁可被稀酸水解生成槲皮素及葡萄糖、鼠李糖，依此进行制备槲皮素。
通过纸色谱及紫外光谱进行黄酮及糖的鉴定。
[实验内容]一、芦丁的提取分离及精制方法⑴500ml 饱和石灰水，加热，并维持pH8～9滤液 药渣10分钟，维持pH8～9pH 至4 ～5沉淀低温（80℃）干燥，称重。
槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离及含量测定 (3)
综合化学实验论文槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离及含量测定学院化学化工学院姓名专业化学年级2011级指导老师2014年4月20日槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离及含量测定（山西大学化学化工学院，山西太原 030006）摘要：采用碱溶液沉淀法，从槐米中提取芦丁，用稀酸催化水解，得到水解产物槲皮素，并用紫外分光光度法进行定性、定量测定。
关键词：槐米；芦丁；槲皮素；碱溶液沉淀法；紫外光谱槐米中含有多种黄酮类物质，如芦丁、槲皮素等。
其中槲皮素具有广泛的生理和药理活性，它具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌等作用，槲皮素对恶性肿瘤生长和转移的抑制作用是近年来一个十分活跃的研究课题。
芦丁（Rutin）亦称芸香苷（Rutionside），广泛存在于多种植物中。
槐米中含量最高达12~16%。
芦丁为维生素P类药物，有助于保持毛细血管的正常弹性和调节毛细管壁的渗透作用，临床上用于治疗高血压的辅助药物和毛细管性止血药。
此外，对放射性伤害所引起的出血症也有一定的治疗作用。
芦丁为淡黄色针状结晶，含3分子结晶水，其熔点为174-178℃，不含水的芦丁熔点188℃。
芦丁在沸水的溶解度相当大（1:200），而在冷水中的溶解度很小（1:10000），溶于热甲醇（1:7），冷甲醇（1:100），热乙醇（1:30），冷乙醇（1:300），难溶于乙酸乙酯，不溶于苯、氯仿、乙醇及石油醚等溶剂，芦丁分子结构中含有酚羟基，呈弱碱性，易溶于碱液中呈黄色，酸化后又析出，所以可用水煮沸的方法提取。
Rutin Quercetin 芦丁中的苷键属于缩醛结构，易为稀酸催化水解，水解产物主要有苷元槲皮素（quercetin）、鼠李糖和葡萄糖。
槲皮素，即芸香苷元，为黄色针晶体，含2分子结晶水的槲皮素熔点313-314℃，不含结晶水的槲皮素熔点316℃，溶于热乙醇（1:23）、冷乙醇（1:300）、冰醋酸、乙酸乙酯、丙酮等溶剂，不溶于苯、氯仿、乙醚、石油醚和水中。
利用紫外分光光度法先分别扫描出芦丁、槲皮素标准品的紫外谱图，再分别扫描出样品芦丁、槲皮素的紫外谱图，进行对照后，根据吸收峰峰形、最大吸收峰位置是否一致，即可定性；根据朗伯—比尔定律，配置槲皮素标品的系列溶液做成标准曲线，即可定量测出槲皮素的含量。
实验四--槐米中芸香苷的提取分离与鉴定
实验四槐米中芸香苷的提取分离与鉴定芦丁(Rutin)亦称芸香甙(Rutisude)，广泛存在于植物界中。
现已发现含芦丁的植物约有70余种，如烟叶、槐花米、荞麦叶、蒲公英中均含有大量的芦丁。
尤以槐花米和荞麦叶中含量最高，可作为提取芦丁的原料，使用最多的是槐花米。
槐花米为豆科植物槐(Sophora japonica L。
)的花蕾，所含主要成分为芦丁，含量可达12%~16%，其次含有槲皮素、三萜皂甙、槐花米甲素、乙素、丙素等。
芦丁具有维生素P样作用，可降低毛细血管前壁的脆性和调节渗透性。
临床上用于毛细血管脆性引起的出血症，并常作高血压症的辅助治疗药。
槐花米中主要化学成分的结构及性质：1.芦丁(Rutin)淡黄色细小针状结晶，mp.174℃~178℃(含三分子结晶)，188℃(无水物)。
溶解度：水：1:100(冷)，1:200(热)甲醇：1:100(冷)，1:9(热)乙醇：1:650(冷)，1:60(热)吡啶：1:11.7(冷)，易溶(热)不溶于乙醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮等溶剂，易溶于碱液中呈黄色，酸化后复析出。
可溶于浓硫酸、浓盐酸，加水稀释复析出。
2. 槲皮素(Quercetin)即芸香甙甙元，为黄色结晶，mp.313℃~314℃(含2分子结晶水)，316℃(无水物)。
溶解度：乙醇：1:290(无水乙醇)，1:23(热)可溶于甲醇、乙酸乙酯、丙酮、吡啶、冰醋酸。
不溶于水、乙醚、苯、氯仿、石油醚等。
3. 皂甙粗品为白色粉末，mp.210℃~220℃(分解)。
易溶于水、吡啶，能溶于200倍的甲醇中。
酸水解后得白桦脂醇、槐二醇二种皂甙元及葡萄糖，葡萄糖醛酸及葡萄糖醛酸内酯。
(1) 白桦脂醇(Betulin)无色针晶，mp.251℃~252℃。
能溶于醋酸、丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、氯仿、苯、乙醚等溶剂，难溶于石油醚及水。
(2) 槐二醇(Sophoradiol)无色针晶，mp.219℃~220℃或224℃。
能溶于石油醚、苯、丙酮、甲醇中，难溶于水。
槐花米中芦丁和懈皮素的制备
槐花米中芸香苷和懈皮素的提取姓名：邱斌学号：10151802241.实验原理1.1背景介绍芸香苷是一种广泛存在于植物体内的黄酮类的化合物，在自然界的花、叶、果实等有广泛的存在，在槐米、罗布麻等植物中的含量比较高。
槲皮素可以用来作为中药制剂，能够有效的降低毛细血管的通透性，抗病毒、清除氧自由基等功能。
具有防止动脉硬化和增强人体毛细血管的重要功能，在临床上常常被用来作为治疗心血管疾病的辅助药物。
同时由于它是一种植物提取物，它对于人体没有毒性，因此在食品工业中还被用来作为抗氧化剂和天然黄色素。
[1]。
槐花米中芸香苷的含量较高，达12％一20％，可作为大量提取芸香苷的原料。
[2] 懈皮素作为一种黄酮类的物质，在草本植物和食物中有广泛的分布。
同时槲皮素作为一种比较强的植物性抗氧化剂，能够防止动脉硬化等功能，在治疗冠心病等心脑血管疾病中具有重要的作用。
同时还能够清除自由基，保护心肌、降血压、降血脂以及抗菌消炎等作用，对于肿瘤细胞等均有良好的抑制效果。
[2]懈皮素可以直接从芸香苷中提取出来。
1.2 提取方法介绍在槲皮素和芸香苷的提取中已经出现了多种提取方法，而且其方法也越来越先进，对槲皮素的普及具有重要的作用。
(热)碱提取酸沉淀法[4]、热水提冷析出的方法[4]、超声辐射法[5-6]、微波辅助提取法拉[7-8]等。
这次实验我们使用醇提取法。
醇提取法利用芸香苷在已醇中溶解度小，在热乙醇中溶解度大.以及在热水中溶解度大.在冷水中溶解度小的性质分高。
芸香苷用溶剂加熟溶解后，趁熟抽滤，滤液放冷后能析出而达到分高的目的(如不纯可再重夏操作进行分高)。
也可采用醇溶水纯法进行精制。
1.3芸香苷和懈皮素的理化性质芸香苷为浅黄色针状结晶(水)熔点: 176。
C-178。
C, [a]23D+13.87。
(乙醇)，[a]23D-39.43。
(吡啶)。
1g芦丁溶于7ml甲醇，8000ml水，200ml沸水。
在空气中逐渐变深，把芦J加热至185-192。
槐米中芦丁及槲皮素的提取实验策划
槐米中芦丁及槲皮素的提取、分离、鉴定及含量测定实验策划[实验背景]槐米为豆科植物槐树(Sophora japonicaL)的花蕾，具有清热、凉血、止血的功效。
现代药学研究表明，槐米中主要含有芦丁，槲皮素和粘液质等，其中芦丁是有效成分。
芦丁(Rutin)，又名芸香甙 (Rutio side)，属黄酮类化合物[1]，其化学名称为∶5，7，3，4'-四羟基一3一芸香糖黄酮，性状为黄色结晶粉末或无晶形粉末，有苦味，略溶于水，能溶于热水及乙醇。
芦丁具有维生素P样作用，能降低毛细血管通透性和脆性，促进细胞增生和防止血细胞凝聚，临床上用于治疗毛细管脆性引起的出血症，有助于恢复毛细血管弹性，如治疗脑血管出血、高血压、视网膜出血、急性出血性肾炎等;芦丁还具有抗心肌缺氧、缺血、抗心律失常、降低血清胆固醇、抑制血小板集聚、抗溃疡、抗肿瘤、抗炎、抗过敏、抗衰老、抗辐射、抗病毒和增强免疫力等功能，是预防和治疗糖尿病、心绞痛、慢性心功能不全、高血脂和预防动脉硬化[2]、心机梗死、脑血栓等疾病的天然绿色药物。
因此，目前芦丁已被广泛用于医药、保健食品和化妆品中，具有很高的开发价值。
我国芦丁生产主要以槐米(槐花的花蕾)为原料进行提取。
[目的要求]1．通过芦丁的提取与精制掌握黄酮类化合物的不同提取方法及操作。
2．掌握槲皮素的制备原理及操作。
3．熟悉紫外光谱在黄酮结构鉴定中的应用4．通过芦丁的结构检识，熟悉它的主要性质、检识方法和含量测定。
[实验内容]1、芦丁的提取方法：碱提取酸沉淀法1.1、原料与试剂槐米（100g），石灰水（硼砂缓冲液饱和），亚硫酸钠，盐酸，op-10，水。
1.2、仪器电子天平，量筒（1000mL），pH试纸，抽滤装置，真空干燥器，大烧杯等。
1.3、实验步骤a.称取槐米100g，加水800mL煮沸，用硼砂缓冲液饱和的石灰水调pH至8～9，加入1%亚硫酸钠作为抗氧剂，在90°C提取30min，过滤。
槐香米中芸香苷和槲皮素的提取
槐花米中芸香苷和槲皮素的提取The Extracting of Rutin and Quercetin inSophora japonica姓名：实验小组成员：班级：学号：1指导老师：实验室编号：实验时间：2015. 6.23-2015.6.26槐花米中芸香苷和槲皮素的提取（江南大学食品学院，江苏，无锡214000）摘要：芸香苷槲皮素是一种具有生理活性的黄酮类化合物。
槐花米自古用做止血药物，可作为提取芸香苷的原料，而通过对芸香苷的水解和重结晶可以得到槲皮素。
本实验通过醇提取法从槐花米中提取芸香苷，收率为3.13 % 。
进一步水解芸香苷制得槲皮素，得由槐花米提取槲皮素的收率为0.66%。
关键词：槐花米；黄酮类化合物；芸香苷；槲皮素；提取随着人们生活水平的提高，人们对天然化合物的保健功能与临床治疗功能愈发重视，黄酮类化合物（flavonoids）具有显著的抗氧化性能，可应用于食品、化妆品中，提高人体抗氧化能力；其在临床上是治疗心血管疾病以及预防癌症的良药，具有很大的应用价值。
1 芸香苷和槲皮素芸香苷（rutin）又名芦丁，主要存在于槐花米中，含量约为15 %的，是一种具有生理活性的黄酮类化合物，有调节毛细管壁渗透性的作用，临床上用作毛细管止血药，也用作高血压症的辅助治疗药物。
槲皮素（quercetin）是一种以游离态形式存在的黄酮类化合物，可通过对芸香苷进行水解和重结晶得到槲皮素。
槲皮素及其衍生物有抗癌作用，对一些致突剂致癌物有拮抗作用。
近年来，心脑血管疾病和癌症的发病率逐渐上升[1]，因此对治疗和预防心脑血管疾病以及癌症的药品与保健品的开发研究就显得尤为重要，使得芸香苷与槲皮素的需求量进一步扩大，因此，对槐花米中芸香苷和槲皮素的提取具有重大意义。
2 芸香苷和槲皮素的物理性质及提取原理2.1芸香苷的物理性质及提取原理芸香苷（rutoin），分子式C27 H30 O16，分子量610.51，淡黄色针状结晶，熔点177~178℃。
芸香苷与槲皮素的提取、分离及鉴定实验(含现象结论讨论)
芸香苷与槲皮素的提取、分离及鉴定实验（含现象结论及讨论）一、目的和要求1.通过芸香苷的提取与精制，掌握利用溶解度差异与酸碱性，提取黄酮类合物的原理和操作。
2.掌握黄酮苷水解制取黄酮苷元的方法。
3.了解黄酮类化合物的一般性质。
4.了解TLC及紫外光谱在黄酮类化合物鉴别中的应用。
二、实验原理1.利用芸香苷对冷水和热水的溶解度相差大的特性进行提取和精制。
2.黄酮苷可通过酸水解得到苷元和糖，且槲皮素在碱性溶液中可降解，反应结果可通过薄层色谱进行检识。
3.利用黄酮类化合物在紫外光下具有特定的吸收光谱可进行结构检识。
三、实验步骤（1）提取:热水粗提称取槐花米粗粉10 g，加150 ml沸水回流1h，滤布趁热过滤，稍冷却后，放冷析晶。
待全部析出后，离心(3000转，10 min)，减压抽滤，水洗3次，得粗制芸香苷。
（2）纯化:碱溶酸沉法碱溶酸沉法原理:芸香苷结构中的酚羟基与碱成盐后溶于水；加酸后析出。
，即石灰乳或石灰水。
酸:盐酸，硫酸。
常用碱液：Ca(OH)2优点:一方面可使含酚羟基化合物成盐溶解，另一方面可使含-COOH杂质形成不溶的沉淀。
注意:碱性不宜过强，以免破坏黄酮母核;酸化时，酸性不宜过强，以免形成佯盐而溶解。
将上述所得的芸香苷粗品置于烧杯中，加约50-80 ml的去离子水，再用石灰水调pH至8。
加入沸石，回流2~3 min，使充分溶解。
趁热棉花过滤，滤液滴加3M HCl调pH至7，放置于冰箱析晶，即析出沉淀。
减压抽滤，用少量去离子水洗沉淀2~3次，然后用少量乙醇洗1次，即得精制芸香苷。
上述所得精制芸香苷，少量用离心管冻存做后续鉴定，其余量做水解。
（3）芸香苷的水解取上述所得的精制芸香苷，置于250 ml圆底烧瓶中，放入沸石，加入2% 硫酸30 ml，加热回流40 min，瓶中浑浊液逐渐变为澄清的棕黄色液，最后生成鲜黄色沉淀。
放冷后减压抽滤，保存首道滤液(澄清无色液体)，作为糖的检查，沉淀物为芸香苷苷元(槲皮素)，用蒸馏水洗至中性，抽干水分，得到粗制槲皮素。
实验一槐花米中芸香甙的提取
实验一槐花米中芸香甙的提取、精制和检识芸香甙亦称芦丁（Rutin），广泛存在于植物界，已发现的芦丁植物至少在70种以上，以槐米、荞麦叶、蒲公英和烟叶中含量较多，本实验以槐花米作为提取芦丁的原料。
槐花米系豆科植物Sophora joponia L的未开放花蕾，其中芦丁含量高达23.5%，槐花开放后降至13.0%。
芦丁除用作治疗毛细管脆弱引起的出血症和高血病的辅助治疗剂外，还可作为制药原料，用于制造槲皮素（Ruercetin）、羧乙基槲皮素、羧乙基芦丁、二羧丙基芦丁、β-乙基吗啉芦丁、6-二乙胺基芦丁等。
槐花米中除含有芦丁外，还含有白桦脂醇（Betulin）、槐二醇（Sophoradiol）、皂甙以及槐花米甲、乙、丙素（Sophorin A、B、C）和多糖粘液质等。
芸香甙的结构一、槐花米主要成份的理化性质1. 芦丁：是槲皮素3位羧基与芸香糖（Rutinose）脱水缩合成的甙。
浅黄色粉末或极细的针状结晶，含3分子结晶水（C27H36O16·3H2O），mp ll7~178℃。
在110℃ 10mmHg下真空干燥12小时变成无水物，无水物易吸湿，可从大气中吸收约2.5分子水份。
无水芦丁在125℃变褐，在190~192℃变成胶状，当温度升至214~215℃发泡分解。
芦丁溶解度在冷水中1∶10000，热水中1∶200，冷乙醇中1∶300，热乙醇中1∶30，沸甲醇中1∶7，冷吡啶中1∶12，微溶于丙酮、乙醇乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚。
UV λmax nm：259，266（sh），299（sh）。
芦丁分子中具有较多酚羟基，显弱酸性，易溶于碱液中，酸化后又析出，因此可以用碱溶液沉的方法提取芦丁。
芦丁分子因含有邻二酚羟基，性质不太稳定，暴露空气中，在光的作用下，能缓缓分解，变为暗褐色，在碱性条件下更容易被氧化分解，硼酸盐能与邻二酚羟基结合，达到保护的目的，故在碱性条件溶液中加热提取芦丁时，往往在加入少量硼砂，就是保护芦丁减少氧化分解。
槐花米中芸香的提取及槲皮素的制备与检识
芸香苷粗品
芸香苷的提取（精制）
芸香苷粗品2g 加蒸馏水400ml，煮沸 溶解15min趁热抽滤 滤液 静置析晶，抽滤 滤液 药渣
结晶 室温下晾干 精制芸香苷
芸香苷的水解
精制芸香苷 加止，放冷抽滤 沉淀
芸香苷、槲皮素及糖的检识
6、Fehling试验：
取试样数 mg，溶于0.5 ml热水中，加斐林氏试剂 甲、乙等量混合液2 ml，沸水浴上加热，如产生 氧化亚铜的暗红色或黄色沉淀表示有还原糖或其 它还原性物质。充分加热作用后滤去沉淀，滤液 滴加浓盐酸酸化，在水浴上加热水解，水解液以 10% NaOH 中和，再进行斐林氏试验，此时显阳 性反应者表示样品为糖苷化合物。比较芸香苷和 槲皮素的不同。
2、计算槲皮素的得率
3、记录芦丁的检测结果
注意事项
3 ．本实验直接用沸水由槐花米中提取芸香 苷，收得率稳定，且操作简便。如用碱溶酸沉 法提取，加入石灰乳可以达到碱性溶解的目的， 又可除去槐花 7 米中所含的大量粘液质，但应 严格控制其碱性pH8～9，不可超过pH10。如 pH 值过高，加热提取过程中芸香苷可被水解 破坏，降低收得率。加酸沉淀时，控制pH3～ 4,不宜过低，否则芸香苷可生成yang盐而溶于 水，也降低收得率。
注意事项
1 ．在提取前应将槐花米略捣碎，使芸香苷 易于被热水溶出。 2 ．在提取过程中，加入硼砂的目的是使其 与芸香苷分子中的邻二酚羟基发生络合，既保 护了邻二酚羟基不被氧化破坏，又避免了邻二 酚羟基与钙离子络合（芸香苷的钙络合物不溶 于水），使芸香苷不受损失，提高收得率。
实验结果
1、计算芦丁的得率
实验原理
中药化学实验指导—实验四 槐花米中芸香苷的提取及槲皮素的制备与检识
实验四槐花米中芸香苷的提取及槲皮素的制备与检识（一）目的要求学习黄酮类化合物的提取、分离和检识，通过实验要求：1．通过芸香苷提取与精制，掌握碱溶酸沉法提取黄酮类化合物的原理和操作。
2．掌握黄酮类化合物的主要性质及黄酮苷、苷元和糖部分的检识方法。
3．掌握由芸香苷水解制取槲皮素的方法。
（二）主要化学成分的结构及性质槐花米为豆科植物槐Sophora japonica L.的干燥花蕾，主要含芸香苷（芦丁），含量高达12％～20％，水解生成槲皮素、葡萄糖及鼠李糖；槐花亦含芸香苷，但含量较槐米为少。
芸香苷(rutoside) 分子式C27H30O16，分子量610.51。
淡黄色针状结晶，mp.177～178℃，难溶于冷水（1∶8000），略溶于热水（1∶200），溶于热甲醇（1∶7）、冷甲醇（1∶100）、热乙醇（1∶30）、冷乙醇（1∶650），难溶于醋酸乙酯、丙酮，不溶于苯、氯仿、乙醚、石油醚等，易溶于吡啶及稀碱液中。
槲皮素(quercetin) 又称槲皮黄素，分子式C15H10O7，分子量302.23。
黄色结晶，mp.314℃（分解）。
溶于热乙醇（1∶23）、冷乙醇（1∶300），可溶于甲醇、丙酮、醋酸乙酯、冰醋酸、吡啶等溶剂，不溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿中，几不溶于水。
O OHOHO ORHOOH芸香苷R=－葡萄糖－鼠李糖槲皮素R=H（三）实验原理由槐花米中提取芸香苷的方法很多，本实验是根据芸香苷在冷水和热水中的溶解度差异的特性进行提取和精制，或根据芸香苷分子中具有酚羟基，显弱酸性，能与碱成盐而增大溶解度，以碱水为溶剂煮沸提取，其提取液加酸酸化后则芸香苷游离析出。
（四）实验内容1．芸香苷的提取方法Ⅰ：水提取法见书方法Ⅱ：碱溶酸沉法见书2．芸香苷的精制见书4．芸香苷、槲皮素及糖的检识取芸香苷、槲皮素少许，分别用8ml乙醇溶解，制成试样溶液，按下列方法进行实验，比较苷元和苷的反应情况。
（1）Molish反应：取试样溶液各2ml，分置于两支试管中，加10％α-萘酚乙醇溶液1ml，振摇后倾斜试管45°，沿管壁滴加1ml浓硫酸，静置，观察并记录两液面交界处颜色变化。
槐米中芸香苷提取分离及检识
沉淀物为芸香苷苷元（槲皮素），用蒸馏水洗至中性，抽
干水分，烘干，称重。得槲皮素。
OH OH
H+
HO
O OH OH O
芸香苷 芸香苷
槲皮素
CH2OH O OH OH OH OH
+
OH CH3
O
OH OH OH
葡萄糖
鼠李糖
O
H C l H O 2
C l + O
O O H
芸香苷的水解
槲皮素
将上次实验所得溶液抽滤，在60～70℃烘干，得精制 芸香苷。 取精制芸香苷1g，置250ml圆底烧瓶中，加入2%硫酸 80ml，加几粒沸石，加热回流1h，瓶中浑浊液逐渐变 为澄清的棕黄色液体，最后生成鲜黄色沉淀。放冷， 抽滤，丢弃滤液（应为澄清无色液体），沉淀物为芸 香苷苷元（槲皮素），用蒸馏水洗至中性，抽干水分， 烘干，称重。得槲皮素。
展开剂：乙醇 : 水 : 乙酸乙酯（3:1:0.5）约4ml，上行展开。 展距：6cm。
显色剂：①在可见光下观察斑点颜色，再在紫外灯下观察斑点颜色。 ②用氨水熏，记录斑点颜色和位置。 结果：记录图谱，斑点颜色，并计算芸香苷和槲皮素的Rf值。
聚酰胺色谱法是利用作为固定相的聚酰胺 分子内存在的许多酰胺基，能与酚类的羟
槐米中芸香苷提取分离及检识
OH HO O OH H 2C OH O O O OH OH 槲皮素 OH 葡萄糖 芸香糖 芸香苷 鼠李糖 O OH O OH CH 3
实验原理： 1.芸香苷分子中含具有酚羟基，能与 碱成盐而溶于碱液中，加酸酸化后又 可沉淀析出，可用碱溶酸沉法提取芸 香苷。
OH
2.在热水中溶解度大, 冷水中溶解度
槲皮素
OH
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芸香苷、槲皮素及糖的检识 芸香苷、
3、盐酸 镁粉反应： 、盐酸-镁粉反应 镁粉反应： 取芸香苷1 取芸香苷 mg，加乙醇 ml，在水浴上加热 ，加乙醇2 ， 溶解，加镁粉约50 溶解，加镁粉约 mg，滴加数滴浓盐酸，溶液由 ，滴加数滴浓盐酸， 黄色渐变红色者表示有黄酮类化合物。 黄色渐变红色者表示有黄酮类化合物 。 以同法试 验槲皮素。 验槲皮素。 如用锌粉代替镁粉，则芸香苷（ 羟基与糖结 如用锌粉代替镁粉，则芸香苷（3-羟基与糖结 合成苷）仍有作用，而槲皮素（黄酮醇类） 合成苷） 仍有作用 ，而槲皮素 （ 黄酮醇类） 不呈 还原显色反应。因此可区别两者。 还原显色反应。因此可区别两者。
思考
1、苷类水解有几种催化方法？ 、苷类水解有几种催化方法？ 2、黄酮类化合物还有哪些提取方法？芸香苷 、黄酮类化合物还有哪些提取方法？ 的提取还可用什么方法？ 的提取还可用什么方法？ 3、酸水解常用什么酸？为什么用硫酸比用盐 、酸水解常用什么酸？ 酸水解后处理更方便？ 酸水解后处理更方便？
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
芸香苷的提取
方法Ⅰ 方法Ⅰ：水提取法
槐花米粗粉20g 槐花米粗粉20g 20 加10倍量沸水煮沸20min，反复2 10倍量沸水煮沸20min，反复2 倍量沸水煮沸20min 次，趁热脱脂棉滤过
药渣
滤液 静置过夜， 静置过夜，滤过
滤液
芸香苷粗品
粗提） 芸香苷的提取 （粗提）
方法Ⅱ 方法Ⅱ ：碱溶酸沉法
芸香苷、槲皮素及糖的检识 芸香苷、
4、三氯化铝反应： 、三氯化铝反应： 取样品1 溶于甲醇中， 取样品 mg溶于甲醇中，加1%三氯化铝甲醇溶液 溶于甲醇中 三氯化铝甲醇溶液 2~3滴，黄酮类呈鲜黄色，并有荧光。 滴 黄酮类呈鲜黄色，并有荧光。 5、锆-柠檬酸反应： 、 柠檬酸反应 柠檬酸反应： 取样品1 取样品 mg，加甲醇 ml，在水浴上加热溶解， ，加甲醇2 ，在水浴上加热溶解， 再加2%二氯氧锆甲醇溶液 二氯氧锆甲醇溶液3~4滴 ， 凡有 羟基或 再加 二氯氧锆甲醇溶液 滴 凡有3-羟基或 5-羟基的黄酮即呈鲜黄色。然后加 羟基的黄酮即呈鲜黄色。 羟基的黄酮即呈鲜黄色 然后加2%柠檬酸甲醇 柠檬酸甲醇 溶液3~4滴，有3-羟基的黄酮黄色不褪。比较芸香 羟基的黄酮黄色不褪。 溶液 滴 羟基的黄酮黄色不褪 苷和槲皮素的不同。 苷和槲皮素的不同。
注意事项
在提取前应将槐花米略捣碎， 1 ． 在提取前应将槐花米略捣碎 ， 使芸香 苷易于被热水溶出。 苷易于被热水溶出。 在提取过程中， 2 ． 在提取过程中 ， 加入硼砂的目的是使 其与芸香苷分子中的邻二酚羟基发生络合，既 其与芸香苷分子中的邻二酚羟基发生络合， 保护了邻二酚羟基不被氧化破坏， 保护了邻二酚羟基不被氧化破坏，又避免了邻 二酚羟基与钙离子络合（ 二酚羟基与钙离子络合（芸香苷的钙络合物不 溶于水） 使芸香苷不受损失，提高收得率。 溶于水），使芸香苷不受损失，提高收得率。
滤液
沉淀 室温下晾干
芸香苷粗品
芸香苷的提取（精制） 芸香苷的提取（精制）
芸香苷粗品2g 芸香苷粗品2 加蒸馏水400ml， 400ml 加蒸馏水400ml，煮沸 溶解15min趁热抽滤 溶解15min趁热抽滤
滤液 静置析晶， 静置析晶，抽滤
药渣
滤液
结晶 室温下晾干 精制芸香苷
芸香苷的水解
精制芸香苷 硫酸50ml 加热回流40min 50ml， 40min， 加2％硫酸50ml，加热回流40min，至沉 淀不再增加为止， 淀不再增加为止，放冷抽滤
芸香苷、槲皮素及糖的检识 芸香苷、
1、酸性试验： 、酸性试验： 取小试管8支 支一组， 取小试管 支 ， 每 4支一组， 第一组每管中加 支一组 入芸香苷1mg， 第二组每管中加入槲皮素 入芸香苷 ， 第二组每管中加入槲皮素1mg， ， 每组四管中分别加入稀氨水、 碳酸氢钠水溶液 碳酸氢钠水溶液、 每组四管中分别加入稀氨水、5%碳酸氢钠水溶液、 5%碳酸钠水溶液、1%氢氧化钠水溶液各 ml， 碳酸钠水溶液、 氢氧化钠水溶液各2 碳酸钠水溶液 氢氧化钠水溶液各 ， 振摇后观察各管溶解情况。溶解的溶液应呈黄色。 振摇后观察各管溶解情况 。溶解的溶液应呈黄色。 再加浓盐酸数滴酸化，黄色褪去或变浅， 再加浓盐酸数滴酸化， 黄色褪去或变浅 ，并有沉 淀析出或产生混浊。 淀析出或产生混浊。
实验原理
OH
纯品为浅黄色粉末或 极细的针状结晶， 极细的针状结晶，含有三 分子的结晶水，熔点为 174-178℃ 。 微 溶 于 水 ， ℃ 易溶于醋酸乙酯等, 易溶于醋酸乙酯等 不溶 于丙酮、乙醚、氯仿、 于丙酮、乙醚、氯仿、石 油醚，溶于碱而呈黄色。 油醚，溶于碱而呈黄色。
OH
O OH
O
OH
OH H H H OH OH H H O O
芸香苷、槲皮素及糖的检识 芸香苷、
6、Fehling试验： 、 试验： 试验
取试样数mg，溶于0.5 ml热水中，加斐林氏试剂 热水中， 取试样数 ，溶于 热水中 乙等量混合液2 甲、乙等量混合液 ml，沸水浴上加热，如产生 ，沸水浴上加热， 氧化亚铜的暗红色或黄色沉淀表示有还原糖或其 它还原性物质。充分加热作用后滤去沉淀， 它还原性物质。 充分加热作用后滤去沉淀， 滤液 滴加浓盐酸酸化，在水浴上加热水解， 滴加浓盐酸酸化 ， 在水浴上加热水解 ， 水解液以 10% NaOH 中和，再进行斐林氏试验，此时显阳 中和，再进行斐林氏试验， 性反应者表示样品为糖苷化合物。 性反应者表示样品为糖苷化合物 。比较芸香苷和 槲皮素的不同。 槲皮素的不同。
槐花米粗粉20g 槐花米粗粉20g 20 0.4％硼砂水200ml，石灰乳调pH8 200ml pH8～ 加0.4％硼砂水200ml，石灰乳调pH8～9 煮沸30min 趁热抽滤或4 30min， 煮沸30min，趁热抽滤或4层纱布过滤
滤液 药渣 放冷至60 70℃， 60～ 放冷至60～70℃，浓盐酸调 pH2～ 冰箱中析晶， pH2～3，冰箱中析晶，抽滤
O
O H H OH
H
H H HO OH
实验原理
芦丁具有维生素P样作用。 芦丁具有维生素 样作用。有助于保持 样作用 及恢复毛细血管的正常弹性， 及恢复毛细血管的正常弹性 ， 主要用作防 治高血压病的辅助治疗（但不能降压） 治高血压病的辅助治疗 （ 但不能降压 ） 剂 ， 亦可防治因缺芦丁所致的其它出血症。 亦可防治因缺芦丁所致的其它出血症 。 多 作口服，也可作注射用。 作口服，也可作注射用。
芸香苷、槲皮素及糖的检识 芸香苷、
2、Molish反应： 、 反应： 反应 取试样1 置小试管中， 溶解， 取试样 mg置小试管中，加乙醇 置小试管中 加乙醇0.5 ml溶解，加α溶解 萘酚试剂1~2滴，摇匀。倾斜试管，沿管壁徐徐注 萘酚试剂 滴 摇匀。倾斜试管， 入浓硫酸约0.5 ml静置。观察两层溶液的界面变 静置。 入浓硫酸约 静置 出现紫色环者为阳性， 化，出现紫色环者为阳性，表示样品分子中含有 糖的结构（糖和苷类均呈阳性反应） 糖的结构（糖和苷类均呈阳性反应），比较芸香 苷和槲皮素的不同。 苷和槲皮素的不同。
实验二 槐花米中芸香苷的提取及 槲皮素的制备与检识
目的要求
学习和掌握芸香苷的提取及检测 技术 学会利用芸香苷的水解作用制备 糖类及苷元
实验原理
芸香苷俗称芦丁。广泛存在于植物界中， 芸香苷俗称芦丁。 广泛存在于植物界中 ， 现 已发现含芦丁的植物至少在70种以上 如烟叶、 种以上， 已发现含芦丁的植物至少在 种以上，如烟叶、 槐花、荞麦和蒲公英中均含有。尤以槐花米（ 槐花、荞麦和蒲公英中均含有。尤以槐花米（为 植物槐树的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高， 植物槐树的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高， 可作为大量提取芦丁的原料。 可作为大量提取芦丁的原料。 芦丁是由槲皮素（ 芦丁是由槲皮素 （ Quercetin） 3位上的羟基 ） 位上的羟基 与芸香糖脱水缩合形成的苷。 芸香糖 芸香糖（ 与芸香糖脱水缩合形成的苷。[芸香糖（Rutinose） ） 为葡萄糖（ 为葡萄糖 （ Glucose） 与鼠李糖 （ Rhamnose） 组 ） 与鼠李糖（ ） 成的双糖。 成的双糖。
沉淀
用少量水洗去余酸， 用少量水洗去余酸，晾干
滤液
加氢氧化钡中和至中性， 加氢氧化钡中和至中性，滤过
槲皮素粗品 硫酸钡沉淀
95％ 95％乙醇 重结晶
滤液 浓缩至干， 浓缩至干，加2～ ml乙醇溶解 3ml乙醇溶解 糖供试液
槲皮素精制品
芸香苷、槲皮素及糖的检识 芸香苷、
实验名称 Molish反应 反应 实验试剂 10%α-萘酚乙醇 萘酚乙醇 溶液-浓硫酸 溶液 浓硫酸 盐酸-镁粉反应 盐酸-镁粉 红色～ 盐酸-镁粉反应 盐酸-镁粉 红色～紫红色 1％醋酸镁甲醇 黄色荧光（紫外灯） 醋酸镁反应 ％ 黄色荧光（紫外灯） 溶液（滤纸） 溶液（滤纸） 1％三氯化铝乙 三氯化铝反应 ％ 黄色荧光 醇溶液（紫外灯） 醇溶液（紫外灯） 2％二氯氧锆甲醇溶液 锆-柠檬酸反应 柠檬酸反应 ％ 黄色并 黄色 2％柠檬酸甲醇溶液 ～4滴 ％柠檬酸甲醇溶液3～ 滴 褪色 不褪色 现象 芸香苷 槲皮素 紫色环 无现象
实验原理
提取芦丁的方法很多， 提取芦丁的方法很多 ， 目前我国多采 碱提取- 酸沉淀法。 用碱提取 酸沉淀法。该法的提取原理是依 据芦丁结构中含有酚羟基， 据芦丁结构中含有酚羟基 ， 能与碱反应生 成盐而溶于水中，向此盐溶液中加入酸， 成盐而溶于水中， 向此盐溶液中加入酸 ， 则芦丁游离析出。此外， 则芦丁游离析出 。 此外 ， 还可以采用水或 醇提取法。 醇提取法。
实验结果
1、计算芦丁的得率 2、计算槲皮素的得率 3、记录芦丁的检测结果
注意事项
3 ． 本实验直接用沸水由槐花米中提取芸 香苷，收得率稳定，且操作简便。 香苷，收得率稳定，且操作简便。如用碱溶酸 沉法提取， 沉法提取，加入石灰乳可以达到碱性溶解的目 又可除去槐花7 米中所含的大量粘液质， 的 ， 又可除去槐花 7 米中所含的大量粘液质 ， 但应严格控制其碱性pH pH8 不可超过pH10。 pH10 但应严格控制其碱性pH8～9，不可超过pH10。 pH值过高 值过高， 如pH值过高，加热提取过程中芸香苷可被水解 破坏，降低收得率。加酸沉淀时，控制pH pH3 破坏，降低收得率。加酸沉淀时，控制pH3～4, 不宜过低，否则芸香苷可生成yang盐而溶于水， yang盐而溶于水 不宜过低，否则芸香苷可生成yang盐而溶于水， 也降低收得率。 也降低收得率。