2013届高考一轮生物复习课件：专题2 微生物的利用 (人教版)

3.实验流程
计数 样品的稀释 土壤取样→____________→微生物的培养与观察→细菌的_____。
回扣·主干知识
归纳·核心考点
体验·双基考题
【点拨】培养后，由于细菌产生的脲酶向周围扩散，将培养基 中的尿素分解，产生的氨使培养基呈碱性，酚红指示剂变红。
这表明以尿素为氮源的细菌分泌了脲酶，并分解了尿素。圆形
回扣·主干知识
归纳·核心考点
体验·双基考题
微生物的纯化培养技术
1.原理 在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌
落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。
2.微生物接种方法 (1)平板划线法：平板划线法中细胞的分离和稀释过程发生在
接种环在固体平板表面上的划线和移动过程中。在线的开始部
分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少， 最后可能形成纯种的单个菌落。(如下图)
回扣·主干知识
归纳·核心考点
体验·双基考题
(2)稀释涂布平板法：
10倍系列稀释操作 ①将分别盛有9 mL水的6支试管灭菌，并按101～106的顺序编号。 ②用移液管吸取1 mL培养的菌液，注入101倍稀释的试管中。用手 指轻压移液管上的橡皮头，吹吸3次，使菌液与水充分混匀。
回扣·主干知识
归纳·核心考点
噬盐菌的菌样应从________环境中采集。 (2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条
件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培
养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择____的培 养基，并在_____条件下培养。
(3)接种前要对培养基进行_______处理。在整个微生物的分离
回扣·主干知识
归纳·核心考点
体验·双基考题
【解析】实验目的是为了筛选出可以分解原油的高效菌株，因 此在筛选的时候选择培养基的碳源为原油。纯化分离微生物的 方法有两种：平板划线法和稀释涂布平板法；灭菌的方法有灼 烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。
答案：(1)原油
(2)平板划线法 (4)干热灭菌
选择
稀释涂布平板法 高压蒸汽灭菌 火焰 (3)强
有机物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等。
(3)生长因子： ①含义：生长不可少的微量有机物。
②作用：酶和核酸的成分。
③主要包括：维生素、氨基酸、碱基等。
回扣·主干知识 归纳·核心考点 体验·双基考题
(4)水： ①含量：在生物体内含量很高，在低等生物体内含量更高。 ②作用：不仅是优良的溶剂，而且可维持生物大分子结构的稳 定。 ③主要来源：培养基、大气、代谢产物等。 (5)无机盐： ①含义：为微生物提供除C、H、O以外的各种重要元素，包括
法有灼烧灭菌、______和______。无菌技术要求实验操作应在 酒精灯______附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。 【解题指南】 1.考查实质：本题以筛选菌株为情境考查培养基的配制、接种
方法、无菌技术等知识点。
2.解题关键：熟悉微生物操作的基本原理、基本技术和操作流 程，明确无菌技术的要素。
大量元素和微量元素。
②作用：细胞内的组成成分，生理调节物质；某些化能自养菌 的能源、酶的激活剂。
③主要来源：培养基、大气等。
回扣·主干知识 归纳·核心考点 体验·双基考题
2.常见的消毒和灭菌方法
内容 种类 灼烧灭 菌法 主要方法 酒精灯火焰 灼烧 干热灭菌箱 160℃～ 170℃加热 1h～2h 121℃维持 15 min ～30 min 应用范围 微生物接种工具，如接种 环、接种针或其他金属用 具等，接种过程中试管口 或瓶口等 玻璃器皿(如吸管、培养 皿等)、金属用具等凡不 适合用其他方法灭菌而又 能耐高温的物品 区别 联系 ①都借助 理化性质， 营造微生 物难以生 存的不良 环境 ②其作用 实质都是 通过使蛋 白质变性 来抑制微 生物生命 活动或杀 死微生物
体验·双基考题
③从101倍稀释的试管中吸取1 mL稀释液，注入102倍稀释的试 管中，重复②步混匀操作。依次类推，直到完成最后1支试管的 稀释。
回扣·主干知识
归纳·核心考点
体验·双基考题
【高考警示钟】
平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同 (1)第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。 (2)每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使 下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。
红色区域越大，表明这种细菌利用尿素的能力越强，脲酶活性 越强，含量越多。
回扣·主干知识
归纳·核心考点
体验·双基考题
三、分解纤维素的微生物的分离
1.纤维素与纤维素酶
多糖 (1)纤维素：纤维素是一种_____，在棉花、木材、作物秸秆中 含量较高。
(2)纤维素酶： ①组成：纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组 C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶 分，即________________________。 ②作用： 纤维二糖
和培养中，一定要注意在_______条件下进行。
回扣·主干知识 归纳·核心考点 体验·双基考题
(4)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的
效果图，请分析接种的具体方法。
获得图A效果的接种方法是_______，图B效果的接种方法是 _______。一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌 落连成一片，最可能的原因是_______，应当怎样操作才可避 免此种现象？ ____________________________________________。 (5)如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是______， 应该保持__________________等不变(至少答两项)。
②制备培养基过程中要进行调pH操作，必须在灭菌之前溶化之后 进行。
回扣·主干知识
归纳·核心考点
体验·双基考题
二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1.分离原理 脲酶 土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们体内能合成_____， 催化 这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到_____作用。 2.统计菌落数目 稀释涂布平板 统计样品中的活菌一般用_____________法。
回扣·主干知识
归纳·核心考点
体验·双基考题
2.无菌技术 (1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的 方法。 防止外来杂菌的入侵 (2)关键：___________________。 煮沸消毒法
紫外线消毒法 灼烧灭菌 高压蒸汽灭菌
回扣·主干知识 归纳·核心考点 体验·双基考题
3.大肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基: 牛肉膏蛋白胨 ①最常用的细菌培养基：_____________培养基。 称量 灭菌 ②配制步骤：计算→_____→溶化→_____→倒平板。
(3)划线结束后：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环
境和感染操作者。
回扣·主干知识
归纳·核心考点
体验·双基考题
【典例训练2】从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采
集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。 (1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从
适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养
(3)菌种的保存:
临时保藏 ①对于频繁使用的菌种，可以采用_________的方法。
甘油管藏 ②对于需要长期保存的菌种，可以采用__________的方法。
【点拨】①酒精消毒时，70%的酒精杀菌效果最好，原因是：浓 度过高，使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜，乙醇分子不能渗
入其中；浓度过低，杀菌力减弱。
①含义：能提供碳元素的物质。
②作用：构成生物体的物质，异养生物的能源物质。 ③主要来源： 无机物：CO2、NaHCO3。 有机物：糖类、脂肪酸、石油、花生粉饼等。
回扣·主干知识
归纳·核心考点
体验·双基考题
(2)氮源：
①含义：能提供氮元素的物质。 ②作用：合成蛋白质、核酸以及含氮代谢产物。 ③主要来源： 无机物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐。
干热灭 灭菌 菌法
高压蒸 汽灭菌 法
使用强烈 的理化因 素杀死物 体内外所 有的微生 物，包括 芽孢和孢 子
培养基及多种器材、物品
回扣·主干知识
归纳·核心考点
体验·双基考题
内容
种类
主要方法
应用范围
区别
联系
消毒
牛奶、啤酒、果 酒和酱油等不宜 使用较 ①都借助 进行高温灭菌的 为温和 理化性质， 液体 的物理 营造微生 物难以生 煮沸 100℃煮沸 日常食品、罐装 或化学 存的不良 消毒 方法杀 食品 5 min～6 min 环境 法 死物体 表面或 ②其作用 紫外 紫外线照射 接种室、接种箱 内部的 实质都是 线消 通过使蛋 等 30 min 部分微 白质变性 毒法 生物 来抑制微 用于皮肤、伤口、 化学 用体积分数为 （不包 生物生命 动植物组织表面 药物 70%～75%的酒精、 括芽孢 活动或杀 消毒、手术器械、 消毒 碘酒涂抹，来苏 和孢子） 死微生物 塑料或玻璃器皿 法 水喷洒等 等 巴氏 消毒 法 70℃～75℃煮 30 min或80℃煮 15 min
回扣·主干知识 归纳·核心考点 体验·双基考题
【高考警示钟】
自养微生物与异养微生物所需的营养物质不同 (1)自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物，
而异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物，因
此可根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型。 (2)含氮无机物不但能给自养微生物提供氮源，也能作为能源 物质，提供能量，如NH3既作为硝化细菌的氮源也作为能源。
回扣·主干知识 归纳·核心考点 体验·双基考题
【解题指南】 1.知识储备 (1)菌种筛选的原理和方法；
(2)微生物纯化培养的具体方法和情境分析。
2.解题关键：了解选择培养基配制的一般规律和具体应用，并 结合实验现象分析纯化培养的接种方法。 【解析】(1)筛选菌种应从适于目的菌种生长、繁殖的环境中 寻找，故培养噬盐菌应从高盐环境中采集。 (2)富集培养时培养基及培养条件应能促进目的菌的生长、繁 殖。