用鸭红细胞悬液消除非特异性凝集因子对鸭禽流感HI试验的影响
高致病性禽流感红细胞凝集(HA)与凝集抑制(HI)
高致病性禽流感红细胞凝集(HA)与凝集抑制(HI)试验1.原理：禽流感病毒具有凝集鸡的红细胞的能力，称为病毒的血凝，利用这种特性设计的试验称血球凝集(HA)试验，以此来推测被检材料中有无病毒存在，是非特异性的，但病毒的凝集红细胞的能力可被相应的特异性抗体所抑制，即血球凝集抑制(Hl)试验，具有特异性。
通过HA-HI试验，可用已知血清来鉴定未知病毒，也可用已知病毒来检查被检血清中的相应抗体和滴定抗体的含量。
2.用途：用于禽流感病毒的血凝素亚型鉴定和抗体检测。
3.试剂：禽流感病毒标准抗原、禽流感标准阴、阳性血清、阿氏液、1%的鸡红细胞、pH7.2的磷酸盐缓冲液。
4.设备耗材：普通天平、分析天平、普通离心机、微量振荡器、微量移液器、高压灭菌器、微量移液器、V形血凝反应板、吸头等。
5.操作步骤6.1血凝试验：5.L1取96孔V形微量反应板，用微量移液器在1孔〜12孔每孔加25μLPBS;5.L2吸取25μL病毒悬液加入第1孔中，吹打3〜5次充分混匀；5.L3从第1孔中吸取25uL混匀后的病毒液到第2孔，混匀后吸取251IL加入到第3孔，依次进行倍比稀释至第11孔，最后从第11孔吸取25UL弃之，设定第12孔位PBS对照；每孔再加入25μLPBSo5.1.4每孔加入25μLl%的鸡红细胞悬液（用前将鸡红细胞悬液充分混匀）；振荡混匀反应混合液，室温（20-25。
C）静置40min后观察结果。
5.L5结果判定：在PBS对照出现正确结果的情况下，将反应板倾斜，观察红细胞是否完全凝集，以完全凝集的病毒最大稀释倍数为该抗原的血凝滴度。
完全凝集的病毒的最高稀释倍数为1个血凝单位（HAU）。
5.2血凝抑制试验：1.1.11配制4单位抗原：根据血凝试验结果配制4单位抗原，以能引起100%血凝的病毒最高稀释倍数代表1个血凝单位，4血凝单位抗原即为最高稀释倍数除以4。
加入抗原的血凝滴度为1:256,则4HAU抗原的稀释倍数为1:64,即ImI抗原加入到63mlPBS中即为4HAU 抗原；1.1.2取96孔V形微量反应板，用移液器在第1〜11孔各加入25ULPBS,第12孔加入50ULPBS；1.1.3第1孔加入25UL新城疫标准阳性血清，充分混匀后移出25μL至第2孔，依次倍比稀释至第10孔，第10孔弃去25μL,第11孔做阴性对照，第12孔为PBS对照。
浅谈影响禽流感血凝抑制试验的因素
２０ ０ ８年 在 湟 中 县 上 新 庄 镇 静 房 、 白路 尔 、 石 白
头 三村 ５ ０户 农 户 ， 青 海 海 北 州 托 勤 勒 牧 场 引 进 从
１ ０只 茨 盖 种 羊 ， 中 ４只 有 角 膜 结 膜 炎 ， 自然 消 ２ 其 后
失 。２ ０ 年 ２ ０９ ～３月份 首先 在 静 房村 杨 某 家茨 盖 羊
绵 羊 角膜 结膜 炎
病 因 的 调 查
陈 福
（ 海 省 西 宁 市 湟 中 县 检 疫 站 ， 海 湟 中 ８ １０ ） 青 青 １ ６ ０
色葡 萄球 菌 。
用普通 肉汤培养 物 ０ ５ｍＬ滴 于 绵羊 眼内 ， ３ ． 第
天可 见接种 羊 眼睛 出现浆 液性 分泌物 ， 眼结 膜潮 红 ， 第 ７天症状 减 轻 ， 后 消 失 。笔 者 用 ０ １ｍＬ培 养 其 ． 物 自行 滴 眼 ， ２天 即 出现 接种 眼发痒 、 明流泪 等 第 羞
置 ２ ￣ ３ ｎ后 观 察 结 果 。若 第 １ ２ ３孔 为 完 全 ０ ０ｍｉ 、、
供的抗 原做检 测 。
２２ 红细胞 来源 的问题 ． 在 禽 流 感 的 ＨＩ ， 发 中 会
现用鸡 的红细 胞悬 液来 检 测鸡 禽 流 感 Ｈ５的 ＨＩ 抗 体时 ， 没有 出现非特 异性 的凝集 反应 ； 而用鸡 的红细
验 结果 的准确性 。笔者 多 年从 事 禽病 的检 测 工作 ， 总结一些 经验如 下 ， 同行参考 。 供 １ 影响血 凝抑 制试验 的因素 １ １ 被检 血清腐 败 变性 被 检血 清 腐败 变 性 严重 ． 影 响免疫 抗体 检测 。 因此 ， 样采 集 后要 及 时 分离 血 血清， 分离 后及 时测定或 放 置在 ４ ℃冰 箱 内保存 ， 要 力 求新鲜 ， 如暂 时不 测 定 可冷 冻 保存 。血 清 使 用前
异源红细胞对HI试验监测禽流感疫苗免疫抗体结果影响的研究
严 重 。为加 强 防控 ，国家 已将 其 纳 入 《 国家 动物
疫病 强 制免 疫 计划 》 ，在 饲 养 的 鸡 、水 禽 、 鸽 子 、 鹌 鹑 等 禽 类 群 体 中 全 面 施 行 免 疫 为 了 科 学 地 评 价 疫 苗 免 疫 效 果 ．通 常 在 免 疫 一 定 时 间 后 采 用 具 有亚 型 特异 性 的血 凝 抑制 试验 （ Ｈ Ｉ ）对 免 疫 抗 体 水 平 进 行 抽 样 监 测 ．监 测 结 果 可 为 进 一 步 开 展 疫 情 风 险 评 估 、 防 控 预 警 和 补 免 工 作 提 供 重 要 的 科 学 依 据 。 为 提 高 监 测 结 果 的 准 确 性 ．本 研 究 就 同
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
作 者 简 介 ： 郑 轶 ， 男 ， 辽 宁 锦 州 人 ，博 士 研 究 生 ， 主
要 从 事 预 防 兽 医学 方 面 的 研 究 。
通 讯作 者。
成 就 未 来
攀霄 研 字 ２ Ｕｌ ３．
进 行 结 果 比较 ，方 法 Ａ 检 测 只 有 ７份 阳性 。而 利
抗体的 １ ３份 血 清样 品 ，利 用方 法 Ｂ检测 时 ，检 测到 的抗 体滴度 为 ３ 细２ ～ ７ 细２不 等 。见表 １ 。
Ｐｏｕｌ ｔ ｒ ｙ Ｓｃｉ ｅｎ ｃｅ
异 源 红 细胞 对 ＨＩ 试 验 监 测 禽 流感 疫 苗免疫 抗体 结果 影 响 的研 究
郑 轶 ．林 枝 桁
（ 海南省 现 代农 业检 验 检 测预 警 防控 中心 ，海 南 海 口 ５ ７ １ １ ０ ０ ）
中图分 类 号 ： ￥ ８ ５ ２ ． ４
用 方 法 Ｂ检 测 全 部 为 阳性 ．其 中 用 方 法 Ａ 未 检 出
影响禽流感血凝-血凝抑制试验的主要因素
可用 于禽 流感亚 型抗 体水平 的检 测和 流感 分离 株
Ｈ Ａ亚 型鉴 定 。该试 验 因其 具有 简便 、 快速、 准确、 实用 的特 点 ，在县 级兽 医实验 室被广 泛 应用 于禽 流 感亚 型抗体 水平 的检测 。 但 在试 验过 程 中， 人 为 因素 的影 响很 大 ， 常 常 因为操作 不规 范等 ， 导 致试 验 结果不 准确 ， 甚至 失败 。 现 就试 验过 程 中常见 的
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ３ － １ ０ － １ ８
影响禽流感血凝 一 血凝抑制试验的主要 因素一钟蕴珠， 等
经 验 交流 ・ ５ １ ・
图２
非 特 异性 凝集 现 象
０ ． ５ ｍ Ｌ的 血 清 中 加 入 ０ ． ０ ２ ５ ｍ Ｌ的鸡 红 细 胞 ， 轻
滴 度 上升 。
１ ． ３ ４个血凝 单位 （ Ｈ ＡＵ ） 抗 原 的配制
２ 非 特 异 性 凝 集 因子
在 进行 鸭 、 鹅 等水 禽 的禽 流感 抗体 检 测 时， 若 使 用鸡 而非相 应 的鸭或 鹅 的红细 胞悬 液 ，则水 禽
血清 中可 能存在 的 ，对 鸡红 细胞 有非特 异 性凝 集
几个 主要 问题 总结 如下 。
０ ． ０ ２ ５ ｍ Ｌ弃之 ；每孔 均加 入 ０ ． ０ ２ ５ ｍ Ｌ １ ％ 鸡红 细 胞悬 液 。振荡 混匀 ， 室温 下静 置约 ４ ０ ｍ ｉ ｎ后观 察 结 果—— 若前 ２孔 完全 凝集 （ 第 ２孔 为完 全凝集
的终 点） ， 则视 为抗 原配 置正确 （ 见图 １ ） 。
血凝抑制实验_实验报告
一、实验目的1. 了解血凝抑制实验的基本原理和操作方法。
2. 掌握血凝抑制实验在禽流感病毒检测中的应用。
3. 学会通过血凝抑制实验结果判断禽流感病毒的感染情况。
二、实验原理血凝抑制实验（Hemagglutination Inhibition Test，HIT）是一种检测病毒感染的方法，通过检测血清中病毒特异性抗体的存在和效价，来判断动物是否感染过某种病毒。
在禽流感病毒检测中，该实验主要用于检测血清中的禽流感病毒抗体水平，从而判断禽流感病毒感染状态。
实验原理：当禽流感病毒与含有抗体的血清混合后，病毒表面的血凝素（HA）与抗体结合，导致病毒颗粒聚集，血凝素活性降低，从而使红细胞不发生凝集。
通过观察红细胞是否发生凝集，可以判断血清中是否含有禽流感病毒抗体。
三、实验材料1. 禽流感病毒抗原2. 1%鸡红细胞悬液3. 0.5%聚乙烯吡咯烷酮（PVP）4. PBS缓冲液5. 96孔V型酶标板6. 微量移液器7. 振荡器8. 恒温培养箱9. 移液器吸头四、实验方法1. 准备工作（1）将禽流感病毒抗原用PBS缓冲液稀释至适当浓度。
（2）将鸡红细胞悬液用PBS缓冲液稀释至1%。
（3）将PVP用PBS缓冲液溶解，浓度为0.5%。
2. 血凝抑制实验（1）取96孔V型酶标板，每孔加入25μL PBS缓冲液。
（2）在第一排第1孔中加入25μL禽流感病毒抗原，混匀后，从第1孔吸取25μL加入第2孔，依次进行倍比稀释至第24孔，最后弃去25μL。
（3）向每孔加入25μL 1%鸡红细胞悬液，混匀后置于振荡器上振荡10秒。
（4）将酶标板置于室温（20-25℃）下静置30分钟。
（5）观察红细胞是否发生凝集，记录结果。
3. 结果判定（1）完全抑制：红细胞不发生凝集。
（2）部分抑制：红细胞发生凝集，但凝集程度较轻。
（3）未抑制：红细胞发生凝集，凝集程度明显。
五、实验结果与分析1. 结果记录根据实验结果，记录每孔红细胞凝集情况，并计算抑制率。
禽流感血凝抑制试验的影响因素分析
液 配 制 时 间过 长 、确 。 如 果 用 灭 菌 生 理 盐
１ ４ 口叵嗣匿同囤 ２１． ２ ０２ ４
幽
目 ｇ《 目■ ■■目 目 黼
资源 育繁
鸡 的人 工 授精技 术要点
付 友 山 （ 宁省农 业经 济 学校 １ １ ０ ） 辽 ２ ０ １
与 自然 交 配 相 比 ， 鸡 的 人 工 授 精 技 术 具 有 明 显 的优 点 。 人 丁 授 精 能 充 将 选择 好 的种 公 鸡在 采 精前 １２ ～ 周 应 单 笼 饲 养 。 在 采 精 前 ｌ周 左 右 开 始 采 精 训 练 。每 天 ｌ ２次 ．经 过 ３ ４ ～ ～ｄ
凝 抑 制 因 子 ，尤 其 是 水 禽 ， 因 此 在 样
品 进 行 血 凝 抑 制 试 验 前 ． 应 先 除 去 非
特 异 性 凝 集 因 子 。通 常 使 用 受 体 裂 解
酶 （Ｅ Ｒ Ｏ） 或 高 碘 酸 钠 法 对 水 禽 血 清
洗 ３ ５次 ，甩 净 蒸 馏 水 放 入 ３ ℃温 箱 ７ 烘 干 备 用 。 如 使 用 一 次 性 凝 集 板 ，要
禽流感血凝抑制试验
要求 按 照适 时 采 样 、合 理 采 样 、
典 型 采 样 、无 菌 采 样 、适 量 采 样 、 安
（）１ ３ ％红 细 胞 悬 液 制 备 。鸡 翅 静
脉或 心脏 采 血 （ 意最 好 选 择 ３只 Ｓ Ｆ 注 Ｐ
或 未 免 疫 成 年 公 鸡 ） 放 入 灭 菌 试 管 。
的 饲 养 数 量 ，降 低 生 产 成 本 ；可 以 克
服 公 母 鸡 的 个 体 体 重 差 异 、 品 种 问 差 异 及 笼 养 种 母 鸡 自然 交 配 困 难 ， 提 高
鸭禽流感免疫抗体血凝检测及其应用
中 国兽 医杂 志 ２ １ ０ ０年 （ ４ 第 Fra bibliotek卷 ） ３期 第
鸭 禽流 感 免疫 抗体 血 凝 检测 及 其应 用
梁 明珍 ，靳 兴 军 ，沈光 年
（ 京 市 兽 医 实 验诊 断所 ，北 京 朝 阳 １ ０ ０ ） 北 ０ １１
中图 分类 号 ： ８ ２ ４ ￥ ５ ． —３ 文 献标 识 码 ： Ｂ 文 章 编 号 ： ５ ９６ ０ （ ０ ０ ０ —０ ４ ０ ０ ２ — ０ ５ ２ １ ） ３０ ２ —２
人 １ 鸡红 细胞悬 液 的试 验 ＨＩ 效价 平 均值 高 ０ ８ ．。 经 Ｄ Ｆ处 理后 的 待 检 鸭血 清及 加 入 １ 鸭 红 细 胞 Ｅ
悬 液 的 ＨＩ 验无非特 异 性凝 集 出现 。所 有试 验 标 试 准 阴性血 清对照 成立 。 ３ 鸭禽流 感免疫 抗体 ＨＩ 方法 的应用 将重组 禽 流 感 灭 活 疫 苗 （ Ｎ１亚 型） 行 免 Ｈ５ 进 疫 ， ＨＩ 用 方法 ， 按表 ３进行抗 体监测 。 免后 ２ １ｄ进 行监 测 抗体 ， 抗 体 平 均 水 平小 ＨＩ 于或者 等 于 ４ｏ ： ， 加强 免 疫 ， ｌｇ 时 须 以后 每 个月 监测 抗体 １次 。通 过 对 ２ ３个 场 户 ， 鸭 ６ ８ 种 Ｏ只 ， 肉鸭
１ ３ 试 齐 配 带 Ｈ ７ ０ ７ ２ ０ ０ ｌＬ Ｐ Ｓ ． ０ ０ｐ ． ～ ． 、 ． １ｍｏ／ Ｂ
作为稀 释液 ； 氏液 （ ｓｖ ｒ） 为 红 细胞保 存 液 ； 阿 Ａｌｅｅｓ 作 １ 和 ５ 的鸡 、 鸭红 细胞悬 液 。
１ ４ 方 法 采 用 禽 流 感 血 凝 （ ． ＨＡ） 血 凝 抑 制 和
胞 悬 液 处 理 。 血 清 吸 附 处 理 方 法 ： Ｖ 型 血 凝 反 应 在
禽流感血凝抑制试验中鸭血清非特异性凝集因子去除方法研究
集率 分别 为 ：８ ３ 、５ ０ 、 ３ ３ 、 ． ％ 。其 中 ， ４ ． １． １ ． ％ ８ ３
于大量样 本 的检 测 。在 进行 小样 本 、 高精 度要 求 的检 测 时， 宜使 用 ５ ／ 适 ０ｍＬ Ｌ鸡 红 细胞 吸 附＋鸭 细胞 测定
法 ， 更有效 去 除非特 异性 反应 。 以
关键 词 ： 禽流 感 ； 特 异性凝 集 因子 ； 血清 非 鸭
中 图 分 类 号 ：８ ５ ４ ￥ ５ ．３ 文献标识码 ： Ａ 文章 编 号 ：０ ７ ５ ３ （ Ｏ Ｏ Ｏ — ０ ９Ｏ １ ０ －０ ８ ２ １ ） ７ ０ ３ 一 ３
１ ２ ４ 红 细 胞 配制 按 如 下 ４种 方 法 进 行 鸭血 清 ． ． 禽 流感 Ｈ５亚型 抗 体效价 检 测 。Ａ 组 １ ／ ０ｍＬ Ｌ鸡红 细胞 直 接测 定 法 ； Ｂ组 １ ／ ０ｍＬ Ｌ鸭 红 细胞 直 接测 定 法； Ｃ组 ５ ／ ０ｍＬ Ｌ鸡 红细 胞 吸附 十鸡 红细 胞 测定 ； Ｄ 组 ５ ／ ０ｍＬ Ｌ鸡 红细 胞 吸附 ＋鸭红 细胞 测定 。
１ ２ 方 法 ．
４种 测定 方 法非 特异 性 凝 集 现象 去 除 效 果对 比
见 表 ｌ ４种 测定 方 法 之 间使 用 Ｓ Ｓ ； Ｐ Ｓ统 计 软件进 行 独 立样 本 Ｔ 检验 结果 见 表 ２ ４种１ ／ ５ ／ 鸡 红 细 胞 ． ． ＯｍＬ Ｌ、０ｍＬ Ｌ 悬 液 ，１ ／ 鸭 红 细 胞 悬 液 按 Ｇ ／ ８ ３ — ０ ｍＬ Ｌ Ｂ Ｔ １９ ６
（． 海 市 动 物 疫 病 预 防 控 制 中心 ， 海 ２ １０ ；． 海 交 通 大 学 ， 海 ２ ０ ４ ） １上 上 ０１３２上 上 ０ ２ ０
摘
血凝(HA)和血凝抑制试验(HI)介绍
A
1
主要内容
一、基本概念 二、HA和HI实验在禽病诊断中的作用 三、基本操作 四、注意事项
A
2
一、基本概念
1、血凝试验(HA)
1.1 定义
某此病毒或病毒的血凝素，能选择性地使某种或某 几种动物的红细胞发生凝集，这种凝集红细胞的现 象称为血凝(hemagglutination，HA)，也称直接 血凝反应，利用这种特性设计的试验称血凝试验 (HA) 。
A
13
三、实验步骤
（以禽流感为例，参照禽流感防治技术规范）
1 阿氏（Alsevers）液配制 称量葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸
0.055g、氯化钠0.42g，加蒸馏水至100mL， 散热溶解后调pH值至6.1，69kPa 15min高 压灭菌，4℃保存备用。
A
14
2 1%鸡红细胞液的制备
A
16
3.7结果判定 将板倾斜，观察血凝板，判读结果将板倾斜 （45度左右），观察血凝板，判读结果：
++++：红细胞全部凝集，均匀铺于孔底，即100% 红细胞凝集 ＋＋＋：红细胞凝集基本同上，但孔底有大圈 ＋＋：红细胞于孔底形成中等大的圈，四周有小凝块 ＋： 红细胞于孔底形成小圆点，四周有少许凝集块 －：红细胞于孔底呈小圆点，边缘光滑整齐，即红细 胞完全不凝集
如天花、鼠疫等病毒。
A
4
(2) 不可逆转型
血凝素与病毒颗粒结合得比较紧密，不经过特殊处 理血凝素不能与病毒颗粒分开，这种病毒引起的红 细胞凝集，是不可逆转的。在一定的温度 (37℃)下， 病毒释放出一种能破坏红细胞表面受体糖苷键的N乙酰神经氨酸酶，当病毒颗粒从红细胞表面游离出 来后红细胞表面受体已被破坏而失去了再凝集病毒 的能力。
两种不同红细胞悬液对鸭血清抗体监测的影响
和血 凝抑 制 （ ）试 验 技术 的方 法 ，用 配好 的鸡 、鸭的红 点 是 可 用 来 鉴 定 所 有 的 流 感 病 毒 分 离 株 ，可 用 来 检 测禽 川 所采 血清使 用 微量 平板 红 细胞 ＨＩ 验检 测抗 体水 平 ，抗体 体 ＨＡ亚 型相 一 致 时才 能 出 现 Ｈｌ 象 ，各 亚 型 间无 明 显交 试 现
［ 关键 词］ 血 凝 抑 制 试 验 红 细胞 抗体
禽流 感 （ Ｉ Ａ ）是 由Ａ 流感 病毒 （ Ｖ）引起 的家禽 和 禽流感Ｈ Ｎ Ｒ 一 和Ｈ Ｎ ｅ４ 型 ＡＩ ． ｅ ５ Ｒ 一 抗体监测是我们血清抗体监
Ｈ 和血 凝抑 制 野 禽 的一 种从 呼 吸 系统 到全 身 严重 败 血 症等 多 种疾 病 的综 测 中非 常重 要 的项 目。 目前 ，血凝试 验 （ Ａ） Ｈ１ 合征 。被 围际兽 疫局 （ Ｉ 列为 Ａ 传染 病 ，我 国规 定 为 试 验 （ ）被 广 泛用 于 检测 各 种 家禽 的 禽流 感抗 体 和禽 流 ＯＥ） 类
所 以使 用 ｓ 有 益菌 发 酵饲 料 既能 降低 饲 养成 本 ，提 高 Ｔ 养殖 效 益 ，又能 减 少药 物 残 留 和有 害 物质 排放 ，即经 济 又 环保 ，值 得 推广 应用 。
・３ ・ ３
基 础 研 究
中 国畜 牧 兽 医文 摘
２ １年 ０ １
２卷 ７
第１ 期
Ｓ １６ ０ ０ 的 禽流感 检测 Ｈ试 验 的方 法 ，采取 未 免疫 ３ 讨 论 Ｙ ６—２０ ） Ｉ 健康公鸡和鸭各４ ，用注射器抽取一定量的Ａｓｖｒ ， 只 ｌ ｅ液 ｅ ｓ 流 感病 毒 颗 粒 表 面 的血 凝 素 （ ＨＡ）蛋 白 ，具有 识 别 采 等量 的血 ，将 全部 鸡 血和 鸭 血分别 放 在两 个 离心 管里 ，
禽流感血凝和血凝抑制试验作业指导书
禽流感血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验作业指导书1、血凝（HA）试验（微量法）1.1 材料准备1.1.1 96孔V型微量反应板，微量移液器（配有滴头）。
1.1.2 阿氏（Alsevers)液、鸡红细胞悬液，配制方法见附录B。
1.1.3 pH7.2、0.01mol/L PBS.1.1.4 高致病性禽流感病毒血凝素分型抗原和标准分型血清及阴性血清。
1.2 操作方法1.2.1 血凝(HA)试验（微量法）1.2.1.1 在微量反应板的1孔-12孔均加入0.25mLPBS,换滴头。
1.2.1.2 吸取0.25mL病毒悬液（如感染性鸡胚尿囊液）加入第1孔，混匀。
1.2.1.3从第1孔吸取0..25mL病毒液加入第2孔，混匀后吸取0.25mL加入第3孔如此进行对倍稀释至第11孔，从第11孔吸取0..25mL弃之，换滴头。
1.2.1.4 每孔再加入0.25mLPBS。
1.2.1.5 每孔均加入0.25mL体积分数为1%鸡红细胞悬液（蒋鸡红细胞悬液充分摇匀后加入）见附录B。
1.2.1.6 振荡混匀，在室温（20℃-25℃）下静置40min后观察结果（如果环境温度太高，可置4℃环境下）。
对照孔红细胞将成明显的纽扣状沉到孔底。
1.2.1.7 结果判定：将板倾斜，观察红细胞有无呈泪滴状流淌。
完全血凝（不流淌）的抗原或病毒最高稀释倍数代表一个些宁单位（HAU）2、血凝抑制（HI）试验（微量法）2.1 操作方法2.1.1 根据1.2.1试验结果配制4HUA的病毒抗原。
以完全血凝的病毒最高稀释倍数作为终点，终点稀释倍数除以4即为含4HUA的抗原的稀释倍数。
例如，如果血凝的终点滴度为1:256，则4HAU抗原的稀释倍数应是1:64（256除以4）2.1.2 在微量反应板的1孔-12孔均加入0.25mLPBS,第12孔加入0.05 mLPBS。
2.1.3 吸取0.25mL血清加入第1孔内，充分混匀后吸0.025 mL于第2孔，依次对倍稀释至第10孔，从第10孔吸取0.025 mL 弃之。
GZ001 动物疫病检疫检验赛题第5套
全国职业院校技能大赛GZ001动物疫病检疫检验赛题（五）工位号：考试时长：120分钟一、填空题（每空0.5分，共10分）1.畜禽体内的正常菌群能合成维生素B族和维生素。
2.病毒是最好的干扰素诱生剂，一般认为，RNA病毒中的诱生能力最强；DNA病毒中痘病毒诱生能力较强，无囊膜的病毒比有囊膜病毒的诱生能力。
3. 是一组促进造血细胞，尤其是造血干细胞增殖分化和成熟的因子。
4.病毒抗原直接刺激机体的免疫细胞引发体液免疫，抗体是主要的抗感染因素，其中可防止病毒的局部入侵。
5.正常体液中存在多种非特异性抗微生物物质，包括和。
6.多价抗原根据表位特异性的不同，可以分为和。
7.动物巴氏杆菌病的急性型常以和为主要特征。
8.光滑型布鲁菌主要有抗原和抗原两种。
9.《新城疫诊断技术》（GB/T 16550-2020）中1%红细胞悬液的配制用液作为抗凝剂，采集至少3只或无新城疫抗体的非免疫鸡的抗凝血液。
10.农业农村部制定的《高致病性禽流感疫情应急实施方案（2020年版）》中划定的高致病性禽流感的疫区一般是指由疫点边缘向外延伸公里的区域。
11.异染颗粒成分是和无机聚偏磷酸盐，功能是储存磷酸盐和能量。
12.著名的是确定某种细菌是否有致病性的主要依据。
13. IMViC试验是一组常用于鉴定的生化试验。
14. 动物布鲁氏菌感染初期，出现凝集反应，但消失较早；继而出现补体结合反应，消失较晚；最后出现，保持时间长。
二、单项选择题（每小题1分，共10分）1.产气荚膜梭菌引起动物食物中毒的类型是（）。
A. AB. BC. CD. D2.有关细菌的命名，下列叙述不正确．．．的是（）。
A.印刷时用斜体字B.细菌的中文译名是属名在前，种名在后C.拉丁文双命名法是属名在前，种名在后D.首字母大写3.链球菌在血平板上生长成小菌落的特征是（）。
A.红色、粗糙、圆形B.光滑、无色、圆形C.半透明、湿润、突起D.灰白色、光滑、滴露状4.流行性出血热流行特点多呈（）。
影响禽流感血凝及血凝抑制试验结果的因素及操作规范
2021年3月第38卷第3期影响禽流感血凝及血凝抑制试验结果的因素及操作规范高爱萍，刘胜宇（江苏省徐州市畜牧兽医站，江苏徐州221000）禽流感病毒、鸡新城疫病毒均能凝集鸡的红细胞，这种红细胞凝集现象可以被特异性免疫血清抑制，可用于检测禽注射疫苗后抗体应答水平及证实是否曾感染，广泛应用于禽流感等重大动物疫病防控中。
HA-HI 试验经济、方便，结果可靠，作为WHO 采用的全球禽流感监测方法，也被纳入我国高致病性禽流感诊断技术的国家标准。
在实际操作中，多种因素均会影响血凝抑制试验结果，从而导致试验结果不准确。
笔者长期从事实验室检测工作，参考行业相关资料，现将影响HA-HI 试验结果的因素作一分析。
一样品因素正确采集被检禽的新鲜血液，及时分离血清，避免溶血及腐败变质（有些样品凝固后呈胶冻样，影响检测结果，应避免喂食后立即采集），并做好样品标记及采样记录。
血清分离后及时检测或放置在4°C 冰箱保存。
若暂不检测，可冷冻保存（-20°C 以下），血清测定前须恢复至室温，并充分摇匀。
二1%红细胞因素配制1%的红细胞，最好采集至少3只SPF 公鸡或无禽流感和新城疫等抗体的健康鸡的血液。
最好采集成年公鸡的血液制作红细胞供体，太小的鸡红细胞稳定性差，会影响检测结果。
在HA-HI 试验过程中，有时用鸡红细胞检测鸭或鹅等血清样品时会出现非特异性凝集现象，因此，在试验过程中尽量选择与检测样品相同来源的非免疫禽的红细胞。
采集好的血液与等体积的阿氏液混合，或加入3.8%柠檬酸钠，肝素作为血液抗凝剂可能对红细胞凝集反应有影响。
采集好的血液尽快送至实验室，用pH 7.20.01mol/L PBS 洗涤3次，每次以1000r/min 离心10分钟后倒掉上清液，尽可能吸去红细胞表层的白细胞，然后再加入20~30体积的pH 7.20.01mol/L PBS ，重新悬浮红细胞。
洗涤后用PBS 配成体积分数为1%的红细胞备用。
禽流感病毒血凝与血凝抑制试验影响
20 ·2021.24Experimental research | 试验研究0 引言血凝（HA ）是指有些病毒的血凝素使一些动物的红细胞产生凝集。
而血凝抑制（HI ）则是抗体特异性地附着在HA 分子的抗原位点上，干扰HA 与红细胞受体的结合，抑制HA 凝集红细胞的能力。
这两种方法应用在病毒鉴定、抗原变异、抗体效价监测以及病毒性疾病的诊断等方面，也是新城疫免疫效果以及禽流感疫情的主要监测手段，操作简单，反应速度快，灵敏度较高，可批量化监测。
但操作过程中很容易受其他因素的影响，导致检测结果不准确。
因此，为保证检测结果准确性，应避免各种因素的影响。
1 影响因素血凝和血凝抑制试验影响因素主要有以下几个方面：红细胞、抗原配制、稀释液（PBS ）、试验温度 、试验耗材、加样操作、稀释操作、反应时间、非特异凝集素等。
1.1 红细胞 红细胞悬液浓度是影响试验准确性的重要因素之一，不同个体对抗原敏感性不同。
为避免鸡只红细胞发生自凝，在配制1%红细胞悬液时，要求至少使用3只SPF （Specific Pathogen Free ，无特定病原）级或无禽流感和新城疫抗体的健康成年公鸡。
制备红细胞悬液时，采集抗凝血液与阿氏液等体积混合，使用PBS 缓冲液，以2 000 r/min 离心5～10 min ，重复3次。
一定要保证冲洗干净血液中的白细胞，否则会增加非特异性反应，影响试验结果。
洗涤后按照1份红细胞和99份缓冲液的比例配制成悬液，于4 ℃保存备用。
但是配制好的1%红细胞悬液不能长期保存，超过3 d 后，需另行配制。
若配置好的红细胞悬液出现溶血，一定要重新配置，不能继续使用[1]。
1.2 抗原配制1.2.1 4单位抗原配制配制浓度必须准确，抗原浓度高，抗体效价偏低；抗原浓度低，抗体效价偏高。
配制4单位抗原时，配制人员需检查血凝价是否准确，然后进行系列稀释，使最终稀释度为1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶6和1∶7。
影响禽流感血凝和血凝抑制试验的因素及对策
影响禽流感血凝和血凝抑制试验的因素及对策作者：郑海玲来源：《兽医导刊》 2017年第8期常用试验方法可以用于鉴定流感病毒分离株HA 亚型，也可以对禽血清中是否存在抗原亚型相同的免疫抗体进行检测。
这种方法操作简单、方便、灵敏度高，在基层动物防疫部门得到广泛应用。
但是很多因素会导致HA-HI 试验结果失真，难以取得预期检测效果，下面将对相关影响因素与对策具体探究。
一、处理与保存血清1. 溶血。
很多因素影响下会使溶血形成，比如，注射器清洁不当，容器不干燥或者受到污染；穿刺方法不正确，损伤了组织；长时间的淤血；过快的抽血速度；将血液向容器中注入，未能将针头取下或者过快的注入速度使大量泡沫产生，久而久之会形成溶血；过于剧烈的震荡，这些都需要在操作中格外注意。
可以在采血时应用一次性注射器，让血清在注射器中自然析出，可以降低溶血发生率。
2. 血清分离。
采集完的血液呈45 ～ 60o 角于室温（20 ℃ ～25 ℃）下放置约2 ～ 3h 即可分离出血清，条件允许时可先将采好的血液呈45 ～ 60o 角于4℃冰箱放置约1h，然后用低速离心机离心3 ～ 5min，转速为3000 ～ 5000 转。
3. 胶冻样血清。
在采集血样中，因为血液中存有过多脂肪会出现胶冻样血清，处理这种血清的方法是应用干净的玻璃棒或者塑料棒挑起胶冻样的血清，在管壁上挤压，直到胶冻样消除为止，然后快速离心，这样可以快速获得检测用的血清样。
4. 保存血清。
血清通常在冰箱中冷藏，5℃为适宜温度。
如果检测用的样品需要保存1 周，需要放置冷冻箱中。
保存好的血清一定要做好标记与封闭处理，避免弄混。
有的血清样品需要反复检测，就需要多次冻融，这样将难以确保检测结果准确。
有研究人员将30 份抗体水平较高的血清作为试验样本，分为①组、②组和③组，①组为被检测血清反复冻融，②组为检测抗原，也反复冻融，③组为对照组。
3组均做血凝抑制试验，结果显示：①组抗体水平较对照组低1 个滴度，②组抗体水平较对照组低2 个滴度。
鸭禽流感免疫抗体血凝检测及其应用
鸭禽流感免疫抗体血凝检测及其应用梁明珍;靳兴军;沈光年【摘要】@@ 鸭是禽流感传播链中的一个重要环节,能否有效防控鸭禽流感的关键之一是使用科学的检测方法.目前,是参照禽流感血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验标准(GB/T18936-2003)[1],但是,鸭体内含有非特异性抑制因子,血清中的唾液酸残基会模拟红细胞受体,同红细胞受体竞争与流感病毒血凝素的结合,因而会导致非特异性抑制结果(假阳性)的出现,用鸡红细胞悬液检测水禽禽流感血清抗体时,常常存在非特异性凝集现象,出现前带和后带现象,有时能严重影响结果的判定.为此,本文采用不同种家禽的红细胞悬液做重复试验,探讨水禽血清的处理方法及不同种的家禽红细胞悬液对水禽禽流感血清抗体检测的影响, 在临床应用中,可为鸭禽流感免疫技术提供参考依据.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2010(046)003【总页数】3页(P24-26)【作者】梁明珍;靳兴军;沈光年【作者单位】北京市兽医实验诊断所,北京,朝阳,100101;北京市兽医实验诊断所,北京,朝阳,100101;北京市兽医实验诊断所,北京,朝阳,100101【正文语种】中文【中图分类】S852.4+3鸭是禽流感传播链中的一个重要环节,能否有效防控鸭禽流感的关键之一是使用科学的检测方法。
目前,是参照禽流感血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验标准(GB/T18936-2003)[1],但是,鸭体内含有非特异性抑制因子,血清中的唾液酸残基会模拟红细胞受体,同红细胞受体竞争与流感病毒血凝素的结合,因而会导致非特异性抑制结果(假阳性)的出现,用鸡红细胞悬液检测水禽禽流感血清抗体时,常常存在非特异性凝集现象,出现前带和后带现象,有时能严重影响结果的判定。
为此,本文采用不同种家禽的红细胞悬液做重复试验,探讨水禽血清的处理方法及不同种的家禽红细胞悬液对水禽禽流感血清抗体检测的影响,在临床应用中,可为鸭禽流感免疫技术提供参考依据。
禽流感流行病抗体检测HI试验方法 的诊断与预防
禽流感流行病抗体检测HI试验方法的诊断与预防摘要】禽流感是由A型流感病毒引起的禽类一种从呼吸系统到全身败血症等多种症状的传染病。
此后,这种疫病更名为禽流感。
高致病性禽流感发病率、死亡率高,感染的鸡群常常“全军覆没”;低致病性禽流感可使禽类出现轻度呼吸道症状,食量减少,产蛋量下降,出现零星死亡;非致病性禽流感不会引起明显的症状,仅使传染的禽类体内产生病毒抗体。
【关键词】禽流感流行病诊断【中图分类号】R511.7 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2013）49-0078-021 流行病学一般禽流感的病毒都会有很多的病种、水禽和野生的鸟类都是能够可以让禽流感传播的病菌。
家里面养的鸡和火鸡都是很容易传播病菌的，然后就是雏鸡和孔雀，鸭、鹅和鸽这样写动物都是病菌传播的比较少的。
传染源为多种带毒动物或患病动物,最重要是水禽,如鸭、鹅。
2 临床症状2.1临床表现我们常常以呼吸道和消化道症状为主。
排黄绿色粪便、产蛋下降、神经症状、角弓反张肿头、冠和肉髯紫黑色血斑、跖部鳞片出血、饮水量减少。
分为3种即急性型、呼吸道型、野禽的隐性型感染。
2.2病理变化高致的病变一般就是坏死，主要的就是消化器官为主；有的病性直接就会破坏泌尿生殖道，不是致病的病情就会不影响病理的变化。
2.3诊断方法及程序2.3.1 流行病学禽流感病毒的宿主广泛,鸡、火鸡、鸭、鹅、鹌鹑和雉鸡等家禽及野鸟、水禽、海鸟等均可感染。
一般鸡和火鸡都是对病毒禽流感最严重危害的，然而鸭子体内的病毒就比其他的禽类多很多。
2.3.2 临床症状禽流感的潜伏期一般都是从几个小时到3d都是不一定的，有的时候时间的长短都是看感染病毒的毒力和剂量、感染的一些途径、还有就是感染禽的种别和禽体得一些状态。
3 稀释液的配制一定使用PH7.2的PBS液，摄氏121度灭菌15分钟，冷却后，摄氏4度恒温保存备用。
灭菌的时间和温度及恒温保存是关键要素，不能随意改变。
也可先配制浓缩的PBS液保存，每次使用时稀释。
2022年兽医实验室理论考试题库
兽医实验室理论考试题库一、法律、法规和管理制度（一）动物疫病防控法规等A 选择题1、不属于国内尚未发现旳动物疫病有？（ A ）Ａ. A型口蹄疫Ｂ. 疯牛病Ｃ. 非洲猪瘟Ｄ. 非洲马瘟2、国内已消灭旳动物疫病有（ B ）Ａ. 口蹄疫Ｂ. 牛瘟Ｃ. 新城疫Ｄ. 猪链球菌病3、如下哪些为二类病原微生物（ C ）A. 口蹄疫病毒B. 牛海绵状脑病病原C. 炭疽芽孢杆菌D. 高致病性禽流感病毒4、动物防疫监督机构在接到报告后，怀疑是高致病性禽流感旳，应在( B )小时以内将状况逐级报到省级畜牧兽医行政管理部门。
A. 1小时B. 2小时C. 3小时D. 4小时5、重大动物疫情分为几种级别（ C ）。
A. 2 级B. 3级C. 4级D. 5级6、疫区内不必要采用旳措施是（ B ）。
A. 在疫区周边设立警示标志B. 扑杀并销毁疫区内所有易感动物C. 关闭动物及动物产品交易市场D. 对易感染旳动物进行监测7、自疫区内最后一头（只）发病动物及其同群动物解决完毕起，通过（C ）旳监测，未浮现新旳病例旳，彻底消毒后，经上一级动物防疫监督机构验收合格，由原发布封锁令旳人民政府宣布解除封锁，撤销疫区。
A. 7天B. 20天C. 一种潜伏期以上D. 两个潜伏期以上8、重大动物疫情旳报告内容不涉及（ D ）。
A.疫情发生旳时间、地点、发病旳动物种类和品种B.临床症状、发病数量、死亡数量、与否有人员感染C.已采用旳控制措施、疫情报告旳单位和个人、联系方式等D.控制疫情所需资金预算9、以疫点为中心旳一定范畴内旳区域划定为疫区，疫区划分时不需要考虑旳因素为（ D ）。
A.本地旳饲养环境B.天然屏障（如河流、山脉）C.交通因素D.本地居民旳人口数量10、有下列状况之一旳，可定为口蹄疫一级疫情( A )A.在相邻省份旳相邻区域14天内有10个以上县发生疫情B.在1个省级行政区域内有同步2个以上地(市)发生疫情C.在1个省级行政区域内同步有5个以上县连片发生疫情D.在1个地（市）行政区域内同步发生疫情11、有下列状况之一旳，可定为口蹄疫二级疫情( D )A.在相邻省份旳相邻区域14天内有10个以上县发生疫情；B.在数省短期内呈多发态势旳疫情C.在1个地（市）行政区域内同步发生疫情旳D.在1个省级行政区域内同步有5个以上县连片发生疫情12、下列不属于国内一类动物疫病旳是（ D ）A.口蹄疫B.禽流感C.小反刍兽疫D.狂犬病13、下列属于国内二类动物疫病旳是（ B ）A.猪瘟B.伪狂犬C.马流感D.黑腿病14、下列不属于人畜共患病旳是（ D ）A.炭疽B.结核C.弓形虫D.口蹄疫15、对患口蹄疫或疑似口蹄疫旳动物应采用如何旳扑杀措施？ ( B )A.应采用放血扑杀措施;B.应采用电击、药物注射等无出血扑杀措施;C.应采用窒息扑杀措施;D.应采用扭颈扑杀措施。
影响血凝和血凝抑制试验结果的几个重要因素
影响血凝和血凝抑制试验结果的几个重要因素血凝（HA）及血凝抑制（HI）试验是目前我国对禽类疾病进行流行病学调查、疫病诊断、防疫监测等工作的主要手段。
各大养殖场、兽医门市、动保实验室、兽药疫苗生产厂家均可进行操作。
该试验虽然操作简便，但每疏忽一步都会直接影响最终结果的判定。
本文总结了笔者在工作及学习中所整理的一些最为重要的影响因素。
1.红细胞悬液的影响差值法配制1%鸡红细胞悬液：采集2-6月龄SPF健康公鸡的血液，与等量阿氏液混合，将血液配平放入离心机中，2000转／分钟离心10分钟。
共离心三次，第一次和第二次离心结束后，将上清液倒掉，第三次离心结束后，不要晃动离心管，用注射器、吸管或移液枪将上清液除去，尽量去除干净。
用1000ul移液枪向离心管中加入5ml生理盐水（或PBS），然后混匀离心管中的液体。
用1000ul移液枪将离心管中的液体移入干净的瓶子中，记下毫升数A。
A与5的差值B就是鸡红细胞的数量，按照1%比例向瓶子中加入相应量的生理盐水（或PBS），配成1%的鸡红细胞悬液。
如果红细胞浓度偏高，则血凝价可能偏低，血凝抑制价可能偏高；如果红细胞浓度偏低，则血凝价可能偏高，血凝抑制价可能偏低。
2.抗原凝集价的测定血凝试验测抗原凝集价：在微量板上，从第1孔至12孔或所需之倍数孔，用移液器每孔加入PBS（生理盐水）25ul 。
用移液器吸取被测抗原25ul，从第1孔起，依次做2倍系列稀释，至第11个孔弃去移液器内25ul液体。
每孔加入1%鸡红细胞悬液25ul，在最后1列设不加样品的红细胞对照孔，立即在微量板振摇器上摇匀，置室温20~40分钟或置2~8℃40~60分钟。
当对照孔中的红细胞呈显著钮扣状时判定结果。
以使红细胞完全凝集的最高稀释度作为判定终点。
抗原凝集价的测定直接影响下一步试验中4HAU血凝素配制的准确程度。
3.4HAU血凝素的影响将配制好的4HAU血凝素用PBS（生理盐水）稀释，使其稀释度为1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7，在每一稀释度的25ul体系中加入25ul PBS（生理盐水），再加入1%鸡红细胞悬液25ul，摇匀，置室温20~40分钟或置2~8℃40~60分钟判定结果。
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ｌ ０ ｌ １
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３００ ５０５
文献 标 识 码 ： Ａ
文章 编 号 ：０ ３— ３ １２０ ）５—０３ ０ １０ ４ ３ （０６ ｏ ００— ２
禽流感 自 １７ ８ ８年 在 意 大 利 首 次 发 生 以来 不 断 蔓延 ， 近年 来 ， 许 多 国家 和地 区 出现暴 发 和 流行 ， 在 成为 严重 危害养 禽业 健康 发展 的一 种 主要 家 禽传 染 病 。因此 ， 加强 禽 流感 的检 测 是 预 防 和控 制 禽 流 感 的重 要措 施 。 目前 ， 基层 单 位大 都 采 用 微量 红 细 胞 血凝 抑制 试验 （ 称 Ｈ 试 验 ） 简 Ｉ 来检 测 家 禽 禽 流感 血
Ａ Ｈ 与 Ｈ 试验。 Ｉ
２ ２ 用 鸡红 细 胞 悬 液 、 红 细 胞悬 液对 ４ ． 鸭 ｏ份 鸭 血 清 Ａ Ｖ Ｈ 亚 型 的 Ｈ 试验 ， 果见 表 ２ Ｉ ５ Ｉ 结 。
表 ２ 不 同种 红 细 胞 悬 液 对 鸭 血 清 Ａ ＶＨ 抗 体 的 检 测结 果 （ ｓ ） Ｉ Ｉ １ ２ ｏ
底。
１５ ７ 结 果判 定 ．．
将 板倾 斜 ， 察 红细 胞 有无 泪滴 观
状流 淌 ， 流淌 的说 明非 特异性 凝集 素 的存 在 ， 不 以不 流淌 的最 高稀 释倍数 作 为凝集 价 。
２ 结 果
２ １ 分 别用 鸡 红 细胞 悬 液 、 红 细胞 悬 液 对 １ ． 鸭 ８份
维普资讯
黼建畜牧兽医
第 ２ 卷 ８
第５ 期
２０ 年 ０６
用 鸭 红 细 胞 悬 液 消 除 非 特 异 性 凝 集
因子 对 鸭 禽 流 感 Ｈ 试 验 的影 响 Ｉ
吴 峻华
中 图分 类 号 ：８ ２４ ５５ ． ５ ；
邱 艳红
叶
玮
林
晴
福建 省福 州 市畜牧 兽 医站
至第 １ 孑 ， １ Ｌ 从第 １ 孑 吸取 ０ ０５ｒ １Ｌ ．２ Ｌ弃 之 ， 滴头 。 ｎ 换 １５ ４ 每孑 均 加入 ０ ０５ｍ Ｂ 液 。 ．． Ｌ ．２ ＬＰ Ｓ
２
０ ０ ０
６
５ ５ ５
＋
＋ ＋ ＋
７
６ ７ ５
１ 仃 培 ２
鸡 红 细胞 悬 液
鸭 红 细胞 悬 液
１１ 抗 原 ．
哈尔滨 兽药 研究 所生 产 的禽流 感 亚
型 Ｈ 抗原 ， Ｉ 批号 为 ２０ ０ ００ 。 ０ ５ １７ １
１２ 待 检血 清 ．
２０ 年 按（ Ｂ Ｔ１９６ ０３高 致 ０５ （ ／ ８３ —２０ Ｇ
病性禽流感诊断技术》 方法检测过 的备用 鸭血清样 品 ５ 份 ， 中 呈 ＡＶ Ｈ 亚 型 Ｈ 抗 体 阴性 样 品 ３ ８ 其 Ｉ ５ Ｉ ８
份、 阳性样 品 ２ 份 。 ０ １３ 红 细 胞 悬 液 及 标 准 抗 原 的 制 备 按 《 Ｂ Ｔ ． Ｇ ／
１９６ ０３高 致 病 性 禽 流 感 诊 断 技 术 》 法 制 备 ８３ —２０ 方
１ ％鸡 红 细胞悬 液 、％鸭红 细胞悬 液 和标准 抗原 。 １
１４ 血 凝 （ Ａ） 血 凝 抑 制 试 验 （ Ｉ 按 《 Ｂ Ｔ ． Ｈ 与 Ｈ） Ｇ ／ １９６ ０３高 致 病 性 禽 流 感 诊 断 技 术 》 法 进 行 ８３ —２０ 方
清抗 体 ， 但在 检测 过程 中 ， 们发 现依 照 国标 的要 求 我 采用 鸡红 细胞 悬 液 来 检测 水 禽 禽流 感 血清 抗 体 ， 常 常存在 非特 异性凝 集现 象 。我们 通过 用鸭 红细胞 悬 液 替代鸡 红细 胞 悬 液 来 检测 水 禽 禽流感 血 清 Ｈ 抗 Ｉ 体， 探讨 是否 能 消 除非 特 异 性 凝 集 因子 对 鸭 禽 流感
刘定结果
—
— — —
效价
４
５ ４ ４
判定结果
一
＋ — —
编号 效 价 判定结 果 效价
！ Ｉ
２ ２ ２ ３ ２ ９ ４
判定结果
＋
＋ ＋ ＋
１５２ 吸取 ００５Ｉ 待检血清加入第 １ Ｌ 混匀。 ．． ． Ｌ ２ ｎ 孑， １５ ３ 从 第 １ Ｌ ．． 孑 吸取 ００５Ｉ ．２ Ｌ液 体加入 第 ２孑 ， ｎ Ｌ混 匀后 吸取 ０ ０５ ｒ ．２ Ｌ加入 第 ３孑 ， ｎ Ｌ 如此 进行 对倍 稀 释
＋
＋ ＋
Ｈ 试 验 的影 响 ， Ｉ 现报 道 如下 ：
１ 材料 与方 法
鸭血 清进 行非 特 异 性凝 集 素试 验 及 ＡＶ Ｈ 亚 型 的 Ｉ ５
Ｈ 试 验 ห้องสมุดไป่ตู้结 果见 表 １ Ｉ
表 １ 两种 红细胞悬液对鸭血清非特异性凝集素试 验及 ＾ Ｈ 抗体 的检测结果 Ⅳ Ｉ
２ ４ ６ ８ ｍ ¨ 坦 Ｂ ３ ５ ７ ９ Ｈ
血清 ｉ 垡 墅ｌ熊２ ｉ 璺垒 坦 垦 堑塑墼量煎２ 血清 ｉ 璺红塑塑量熊２ ｆ 竖堑堡照量遮２
编号 效价
Ｉ
２ ３ ４
１５ 待检 血 清 中的非特 异性凝 集 素的鉴 定 ．
１５ １ 在 微 量 反 应 板 的 １ ２孑 中均 加 入 ０ ０ ５ ．． ～１ Ｌ ．２ ｍ Ｂ 液 ， ＬＰ Ｓ 更换 滴 头 。