2017年春季成都市猪瘟免疫抗体监测与分析
猪瘟免疫抗体监测分析
关键词 猪瘟 抗体检 测 酶联 免疫吸附试验 文献标识码 ：Ａ 文章编号 ：１ ０ ０ ７ ． １ ７ ３ ３ （ ２ ０ １ ７ ） ０ ５ ． ０ ０ ０ ６ 。 ０ ２ ３ 讨论 ３ ． １ 影响免 疫效 果的免疫 效果 按照 国家规定要 求 ，猪
疫 结束 后 ，全 区农 村 散养 生 猪 的 猪 瘟免 疫 抗 体 检 测 结
果 ，现整 理 、分析得 到 的一些数 据 和经验 ，对 掌握全 区
猪 的群体 免疫水 平 ，给今后 指导 和制 定猪瘟 防控 措施 提
供参考依据 。
１ 材 料与方法 １ ． １ 材 料 （１ ）全 区１ ０ 个 乡镇 生猪散 养户 中随机抽 取 ３ ９ ０ 份猪血 清 。（ ２）奥地 ￣ ｌ Ｊ Ａｎ ｔ ｈ ｏ ｓ ２ ０ １ ０ 酶标仪 ；猪瘟抗 体
关键 措施 之一 。 因此 ，本 次监测 数据 是春 季动物 强制 免
瘟免疫密度 常年 维持在９ ０ ％以上 ，其中应免生猪 的免疫密
度要达 １ ０ ０ ％。从本 次检测结果看 ，在抽取 的３ ９ ０ 份猪血 清
样 品中 ，猪 瘟免 疫抗体 的合 格率 为８ ２ ． ８ ２ ％，达到 了农业
３ ． ３ 应采取 的对 策 （１ ） 加 强领导 ，健全制度 。提 高猪 瘟 的免 疫 密度 和免 疫 效价 是 一 项 长 期 系统 的工 作 ，各 级 、各 有关部 门应 加强领 导 ，提高认 识 ，建立健 全各项 规 章制度 ，加 强村级 动物 防疫 员队伍 建设 ，不 断提高 专 业 人员 的业务 技能 和工作 责任 心。（ ２）制 定科 学合理 的 免 疫程序 ，有 效提 高猪 只的免 疫率 。对 于育肥猪 ，要 坚 持 行之 有效 的首免 、春秋 防疫 、常 年补针 ；对 于种猪 ， 每 年春秋 应各做 一次 预 防接 种 。（ ３）争取 经费 ，按村大 小 设定 防疫员 ，在认 真做 好春 秋免疫 的前 提下 ，逐步 实 行 月月补免 的免 疫程序 ，最大限度消 除免疫空 白和死角 。 （ ４）积极 开展猪 只抗体监 测工作 。充分 发挥 区（ 县） 级兽 医实验 室的作 用 ，逐 步加 大抗体 监测 力度 ，为猪 瘟 的综 合 防治提供科 学依据 。在 春秋两次集 中防疫高 峰后 的１ 个 月 内 ，随机采 取猪 血清做 抗体 检测 ，评估 总保 护率 。根 据 抗体 的分布 情况 、免疫 保护 率高低 等 ，具体 分析 防疫 工作是否 到位 ，免疫 效果 是否确实 。
猪瘟实验室检测与预防免疫
猪瘟实验室检测与预防免疫猪瘟，又称非洲猪瘟，是由非洲猪瘟病毒引起的一种急性、高度接触性和传染性的猪病。
此病主要通过猪之间的直接接触或通过受感染的猪粪便间接传播。
非洲猪瘟病毒并不会攻击人类，但是它对猪群的危害性非常大，病毒的传染性非常强，一旦猪群中出现猪瘟，常常会造成大规模的猪只死亡，给养猪业造成严重经济损失。
为了保护猪群不受猪瘟的侵害，猪场和养殖户需要密切关注猪瘟的实验室检测和预防免疫工作。
下面就来看一下关于猪瘟实验室检测与预防免疫的相关内容。
一、猪瘟实验室检测1. 症状观察猪瘟的感染期大约为5-15天。
感染后的猪只会出现食欲下降、发热、精神萎靡、呼吸急促、发生呕吐和腹泻等临床症状。
疑似猪瘟感染的猪只应立即进行隔离，并进行实验室检测确认是否为猪瘟感染。
2. 标本采集对于疑似感染猪只，需要采集相应的组织标本，常用的标本包括血液、淋巴结、脾脏等。
采集标本时要严格遵守无菌操作规范，避免交叉污染。
3. 实验室检测一旦采集到疑似感染的标本，需要立即送往专业的实验室进行猪瘟病毒的检测。
一般常用的检测方法包括PCR技术、ELISA技术等，这些检测方法具有高灵敏度和高特异性，能够迅速准确地检测出猪瘟病毒的存在。
4. 结果分析实验室检测出的结果需要由专业的兽医人员进行分析和判断，如果确认猪只确实感染了猪瘟，需要立即采取相应的隔离和控制措施，避免病毒的进一步传播。
二、猪瘟预防免疫1. 定期疫苗接种猪瘟病毒没有特效的治疗方法，预防和免疫是最为重要的措施。
养殖户需要根据兽医的指导，定期对猪只进行猪瘟疫苗接种。
猪瘟疫苗能够有效地提高猪只的免疫力，降低感染猪瘟的风险。
2. 维护猪场卫生猪场的卫生环境对于猪瘟的预防也非常重要。
养殖户需要定期清理卫生，保持猪场的清洁和干燥。
定期对猪舍进行消毒，定期更换饲料盆、饮水器等饲养设备，避免病毒通过环境传播。
3. 远离野猪和动物粪便猪瘟病毒的传播途径非常复杂，野猪和感染猪只的粪便等都是传播病毒的重要因素。
四川省2017年高致病性猪蓝耳病和猪瘟免疫抗体监测与分析
２０１８年第３期（总第３４６期）畜禽业试验研究四川省２０１７年高致病性猪蓝耳病和猪瘟免疫抗体监测与分析丁梦蝶，陈 斌，裴超信，张 毅，邓 飞，李 丽，邵 靓，周莉媛，张 睿（四川省动物疫病预防控制中心，四川成都６１００４１）摘 要：高致病性猪蓝耳病和猪瘟是威胁养猪业发展的重要病毒性传染病，免疫抗体的监测对于疫苗免疫效果评价和疫病控制有非常重要的现实意义。
为了解四川省２０１７年高致病性猪蓝耳病、猪瘟疫苗免疫效果，分别在春秋两次集中免疫后，从四川省２１个市（州）采集血清样品共３１６０份，使用间接ＥＬＩＳＡ方法进行抗体水平检测。
结果显示：高致病性猪蓝耳病免疫抗体合格的血清有２８７７份，平均合格率为９１．０４％，２１个市（州）中免疫合格率最高为１００．００％，最低为７９．４４％。
猪瘟免疫抗体合格的血清有３０７６份，平均合格率为９７．３４％，２１个市（州）中免疫合格率最高为１００．００％，最低为８３．３３％。
结果表明四川省２０１７年高致病性猪蓝耳病和猪瘟疫苗免疫均取得理想效果。
关键词：高致病性猪蓝耳病；猪瘟；免疫抗体；ＥＬＩＳＡ中图分类号：Ｓ８５２．４＋３ 文献标识码：Ａ ＤＯＩ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８－０４１４．２０１８．０３．００６收稿日期：２０１８－０１－３１ 引言高致病性猪蓝耳病和猪瘟是威胁养猪业发展的重要病毒性传染病，都可以不同程度地导致母猪繁殖障碍问题。
这两种猪病被世界动物卫生组织（ＯＩＥ）列为必须报告的动物疫病，我国将其列为一类动物疫病［１］。
在２０１６年以前这两种猪病一直是国家强制免疫疾病，根据农业部公告，２０１７年起取消国家强制免疫。
为有效控制和消灭高致病性猪蓝耳病、猪瘟，农业部于２０１７年３月印发了《国家高致病性猪蓝耳病防治指导意见（２０１７－２０２０年）》和《国家猪瘟防治指导意见（２０１７－２０２０年）》，提出要继续坚持以预防为主的防控方针，做好疫苗免疫及免疫效果评价工作。
不同年龄猪群中猪瘟抗体监测及免疫效果分析
畜牧兽医XUMUSHOUYI养殖问题研究不同年龄猪群中猪瘟抗体监测及免疫效果分析迟绍洪（云南省昆明市寻甸县羊街镇畜牧科，云南寻甸 655209）摘 要 为了进一步提高猪瘟免疫效果，制定完善的猪瘟免疫程序，以正向间接血凝试验监测分析猪瘟免疫情况。
试验结果表明，随着仔猪日龄的增长，猪瘟母源抗体的合格率会逐渐降低；一般第一胎母猪猪瘟免疫抗体合格率相对较低，其他经产母猪差异性基本相同；40日龄是母猪与仔猪最佳首免日期。
关键词 猪群；猪瘟；抗体监测；免疫效果流行范围较广、发病率高、传染性强是猪瘟的主要特征，一旦发生将直接危害养猪业。
近年来，我国高度重视猪瘟研究，但猪瘟在我国的发生仍然无法阻断。
现阶段，猪瘟的发病特征复杂，临床表现发生了明显变化，其潜伏期逐渐延长，且没有明显的典型症状，发病年龄比以往更早，使养猪业经济损失加重。
此现象与免疫存在直接关系，对猪瘟首次免疫时间和免疫程序进行研究至关重要。
因此，对某规模猪场不同类别猪瘟抗体水平进行针对性调查，对其实施科学分析，制定了完善的免疫程序，旨在为相关人员提供参考借鉴，从根本上提高猪群中猪瘟抗体免疫效果，为养殖业带来可观的经济收益。
１ 试验材料和方法１．１ 试验材料 同一家公司购入猪瘟兔化弱毒冻干细胞苗，在兽医研究所中对猪瘟血凝抗原和阳性对照血清进行选购。
１．２ 试验方法1.2.1 不同日龄仔猪猪瘟母源抗体的检测 随机选取仔猪的全血，仔猪选择标准为1～50 d，并及时对血清进行分离，参考诊断试剂使用说明对抗体进行检测，并对其结果进行客观判断。
1.2.2 使用不同程序免疫后仔猪猪瘟抗体的监测情况 取猪弱毒疫苗免疫对生产母猪断注射，进行断奶，随机分为2组，两组的首免时间分别为21～23 d和35～40 d，二免时间分别为60～65 d和65～70 d。
用3头份猪瘟免疫后，采取全血需在10～15 d进行，采取全血后对其进行血清分离，做好相关检测准备工作。
1.2.3 不同胎龄母猪猪瘟免疫抗体的检测 随机采取母猪全血，母猪数量为141头，胎龄为1～6 d，采后需及时分离血清并准备检测。
猪瘟免疫检测结果分析
猪瘟免疫检测结果分析
通过对各个检测血样猪瘟抗体水平高低 的分析，体现猪群整体免疫效果理想与 否，从而判断免疫方案是否需要调整。
注意事项
1.猪瘟应考虑全程保护，而各年龄段猪只因 诸因素影响差异较大，因此对猪瘟免疫效 果的分析，应该对各年龄段猪只分别考虑
3.生产上要求定期对仔猪进行母源抗体消长 分析，当仔猪母源抗体的（保护）合格率 下降到50%以下是，则进行首次免疫接种；
仔猪母源抗体消长分析
1.母猪强化免疫的主要目的是加强母源抗体对仔猪 的保护，仔猪母抗的逐渐消失其保护力逐渐消减， 母抗水平的高低与消减时间成正比； 2.仔猪的后续保护靠主动免疫，而母抗对猪瘟活疫 苗的免疫效果有明显的中和作用，过早免疫效果 不佳，过迟免疫则留下过长的免疫空白期； 3.生产上要求定期对仔猪进行母源抗体消长分析， 当仔猪母源抗体的（保护）合格率下降到50%以 下是，则进行首次免疫接种； • 以当前母猪群的免疫强度，仔猪的首免适而日龄 在40日左右。
2.仔猪的后续保护靠主动免疫，而母抗对猪 瘟活疫苗的免疫效果有明显的中和作用， 过早免疫效果不佳，过迟免疫则留下过长 的免疫空白期；
仔猪母源抗体消长分析
1.母猪强化免疫的主要目的是加强母源抗体对仔猪 的保护，仔猪母抗的逐渐消失其保护力逐渐消减， 母抗水平的高低与消减时间成正比； 2.仔猪的后续保护靠主动免疫，而母抗对猪瘟活疫 苗的免疫效果有明显的中和作用，过早免疫效果 不佳，过迟免疫则留下过长的免疫空白期；
表1数据显示 1.A场母猪群猪瘟抗体合格率达99%，符合要求； 2.仔猪母源抗体合格率10日龄达95%，20—40日龄逐渐下降， 40日龄合格率为48%，此时选择首次免疫比较合理 3.50日龄合格率最低，是母抗继续消减，主动抗体尚未产生的 原因，符合预期； 3.60日龄抗体合格率上升，是首免主动抗体提升的结果； 4.60日龄进行二免，随后抗体合格率继续提升到更高的水平， 且维持较长时间，体现二次免疫产生更强的免疫效果； 5.160—180日龄合格率明显下降，说明抗体滴度下降，尤其是 一些抗体水平仅仅合格的个体，其下降的速度要快些。
通过抗体检测建立合理的猪瘟、伪狂犬病免疫程序
１ 币且是可行 的．也说 明了调整后免疫程 序的合理性
３２ 伪狂犬病 ． 措瘟抗体效价采用 正向血凝 测定法 检测 ；猪伪狂犬病诊断 采用乳胶凝集法 【 洼：此法虽 只能作 为定性诊断 ．因本场属
非疰 ｔ．此 法 诊 断 具 有 实 际 意 义 ）
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猪 痢 疾 的 诊 断 与 防 制
李锦泉，赵 式 ，许 力亍．黄 峻 ，摩彦卿
１ 材 料和方 法
１ １ 试 验 材 料 ．
血清样 为金华种猪 场猪 群中抽取 的血佯 ；猪瘟正向 血凝 诊 断液 （ 中国农科院兰州兽 医研 究 所生产 １ ；猪伪 狂犬病乳胶 凝 集诊 断试剂 盒 （ 中农业 大学牧 医学院生 产） 华 ：猪瘟疫 苗 （ 汀 蝤陡壁集圊 司江西生物药 厂的猪瘟 兔 化弱毒 莓） ；伪狂犬病 基因缺 损疫 茸 （ 荷兰英特威公司生产１
百ａＯ ｍｌ Ｇ 壮观霉素及 ∞％兔脱纤血 的胰 酪胨血琼脂 培养基 上咋睚氧培养。钯作催 化剂 ，培养环 境 为 ８ ％ ，加％ｃ ． ０
的 Ⅲ 蔷悼 ３３ 致病性试验 ．
此病易感于新生仔 猪 ．所以，使新生仔猪获得较强的免 疫 力是关键 ：选择在母 猪产前 ３周进行主动 免疫 的 目的 ．是使 新
生仔偌 获得母源抗体 通过本试验证 明母猪产前接种 唇．对于 新生ｆ 堵仍有 ９ ．％的被动免疫阳性率 。 ｆ ８３
２ 试 验结 果
原 始数据的结果统 汁整理如 表 ２所示 ：
猪瘟抗体检测不合格的原因分析
１ 疫 苗 因素
个别 猪场使用的猪瘟疫苗中可能未含有足够量 的有活力的抗原 ， 其本身 的保护性能差 ， 影响了免疫 效果。疫苗毒 （ 菌） 株与田间流行毒 （ 菌） 株血清型
个规模养猪场各采集血样 ｌ ０ 份进行猪瘟抗体检测 。 大多数猪场的猪瘟抗体检测合格率均可达到 ８ ５ ％以 上 ，而个别猪场的猪瘟抗体检测结果则未达到规定 的标准 。笔者结合实际情况 ， 将其原 因总结如下。
有较高的母源抗体或前次免疫残 留的抗体 ，对疫苗 产生了免疫干扰。接种时动物已处于潜伏感染 ， 或在
或 亚 型不 一 致 ， 或 流行 株 的血 清型 发 生 了变 化 ， 或 疫
３ 人为 因素
免 疫 接种 工作 不 规 范 。如肌 注 免疫 时 出 现 “ 飞
苗选择不当甚 至于用错疫苗 。疫苗运输、 保管不当， 或疫苗稀释后未及时使用 ， 造成疫苗失效或减效 ， 或 使用 过 期 、变质 的疫 苗 。不 同类 疫 苗 之 间 的干 扰 作
经 常消毒 ， 对 仔猪要加强调教 ， 加强护理 ， 平 时注意 观察 ， 及时发现病猪 ， 及时隔离治疗 ， 防止传播蔓延 。
春季节 ， 在 猪多拥挤 ， 圈舍潮湿 ， 保温差等饲养 管理
４ 治 疗
“ 除癞灵”（ 主要成分为辛硫磷 ）按说 明涂抹 ， 先用洁净 的温水洗净患部 ， 把竹筷劈开 ， 然后轻轻刮 去硬皮 ， 再涂抹 。Ｏ ． ５ ％～ １ ． Ｏ ％的 “ 敌百虫”（ 邻氨基苯
兽 药
猪 瘟 抗 体 检 测 不 合 格 的 原 因 分 析
耿 松 王兆 亮 （ 江苏省沛县畜牧兽医站 ２ ２ １ ６ ０ ０ ）
猪瘟抗体检测方法
猪瘟抗体检测方法猪瘟，即猪繁殖与呼吸综合征，是由猪瘟病毒引起的一种严重的传染病，对猪群健康和养殖业产生了重大影响。
为了及时控制疫情和保护养殖业的发展，猪瘟抗体检测方法非常重要。
猪瘟抗体检测方法主要包括传统血清学法和分子生物学法。
传统血清学法主要是利用抗原-抗体反应原理进行检测，分子生物学法则是通过检测猪瘟病毒核酸进行诊断。
下面我将详细介绍这两种方法。
传统血清学法中最常用的方法是血清病毒中和试验。
该方法通过将待检血清与猪瘟病毒进行反应，观察病毒和抗体的相互作用。
这种方法的优点是简单、经济、可靠，适用于大规模的抗体检测。
但是存在一些局限性，如需要对待测血清和病毒进行配对，病毒株的选择和制备需要一定的经验和技术，且过程较为繁琐。
另一种传统血清学方法是酶联免疫吸附试验（ELISA）。
该方法利用特异性的酶标记抗体来检测待测血清中的猪瘟病毒抗体。
ELISA具有操作简单、灵敏度高、多重样品同时检测等优势。
此外，还可以通过改变试剂盒中抗原的性质，进一步检测不同类型的抗体，如IgM和IgG。
但是，该方法需要进行酶标仪等专门设备的检测，成本较高。
分子生物学法主要是通过检测猪瘟病毒核酸来进行诊断。
常用的方法包括聚合酶链反应（PCR）和实时荧光定量PCR（RT-qPCR）。
PCR是一种高度敏感且特异的检测方法，通过扩增待检样品中的病毒核酸，可以快速检测出病毒的存在。
RT-qPCR则能实时监测PCR反应的过程，具有更高的精确性和灵敏度。
此外，PCR还可以进行基因测序，用于病毒株的分型和溯源研究。
然而，分子生物学法虽然灵敏度高，但仍存在一些局限性。
首先，该方法对设备和技术要求较高，需要专业的实验室和操作人员。
其次，由于病毒基因组的变异性较大，需要选择合适的引物和探针，以确保检测的准确性。
此外，病毒核酸在环境中的稳定性较差，易受到污染和降解的影响，可能导致假阴性结果。
综上所述，猪瘟抗体检测方法在疫情监测、疫苗评估和动物检疫等方面具有重要作用。
某猪场猪瘟疫苗免疫抗体检测与分析
某猪场猪瘟疫苗免疫抗体检测与分析作者：邱青瑞来源：《中国动物保健》2017年第10期摘要：为评估某猪场猪瘟疫苗的免疫效果，本研究采用猪瘟正向间接血凝试剂盒对该猪场的种猪及不同日龄商品猪猪瘟疫苗免疫抗体水平进行了检测与分析，结果显示种猪的免疫合格率均达100%，猪瘟疫苗首免前仔猪母源抗体阻性率达41.18%，疫苗首免后21d免疫抗体合格率达67.75%，变异系数达42.65%，二免后21d免疫抗体合格率达92.80%，变异系数达21.05%。
表明该猪场首免时母源抗体水平较高，导致首免后猪瘟抗体水平增长缓慢，免疫抗体效价较低，整齐度较差，应及时优化免疫程序。
关键词：猪瘟疫苗；免疫；抗体；检测；分析猪瘟（Classical swine fever，CSF）是由猪瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）引起猪的一种高度接触性传染病，是目前危害我国养猪业健康发展的主要疫病，也是我国重点防范的主要疫病。
近年来，我国在高密度免疫下，猪瘟的发生与流行已逐步减少，但“非典型猪瘟”以及疫苗免疫失败现象仍时有发生。
加强免疫猪群抗体水平的监测，保持猪群有一个较高而且整齐的抗体水平，对保障猪瘟疫苗免疫效果至关重要。
本研究对某猪场猪瘟疫苗免疫抗体水平进行了检测与分析，为猪场猪瘟疫苗免疫效果的评价与免疫程序的优化提供参考与指导。
1材料与方法1.1试剂盒、仪器和耗材猪瘟正向间接血凝抗体检测试剂盒购自中国农业科学院兰州兽医研究所；MM-1微量振荡器为上海精密仪器仪表有限公司产品；量程为300uL 8道可调移液器为Eppendoff公司产品；96孔110°v型血凝板为泰州市康之达实验器材有限公司产品。
1.2猪场猪瘟疫苗免疫情况调查该场存栏妊娠母猪88头，哺乳母猪121头，种公猪23头，各种日龄商品猪共计1，500余头。
该猪场母猪猪瘟疫苗的免疫采用普免和跟胎免疫两种方式相结合，即每年春季、秋季各集中免疫1次，每窝仔猪免疫时母猪再跟胎免疫1次，免疫剂量均为4头份/头。
猪瘟免疫抗体检测及效果分析
选 育 ． 华猪 许 多优 良性 状 将 会 改 变 ． 成
甚 至 有 的 优 良基 因 将会 流失 ３ 成 华 猪 的 保 种 对 策
报 告 的传 染病 ， 养 猪业 危 害 极大 近 对
几 年 来 潼 南 县 通 过 加 大 免 疫 力 度 防 控 猪 瘟 的发 生 ．为 了检 测 猪 瘟免 疫 效果 ．
（ ） 规模 化猪 场 和 和散 养 户 中采 集 街 的
猪 瘟 免 疫 接 种 ２ 后 的 猪 血 清 ８ ６ ． １ｄ ２份
性 传染 传 染病 有 高度 传染 性 和致 死 具
性。 被世 界 动 物卫 生组 织 ｆＩ １ 为必 须 ０Ｅ列
根 据 养 殖 规模 和免 疫 情 况 分 为 ３ 组 ． 个 其 中第 一 组 ： 猪 场 血 清 １２ ， 采 种 ３份 供 集 血 清 的 猪 免 疫 接 种 ２ 猪 瘟 兔 化 弱 次
计 划 提供 依 据 ． ０ １ １月 在潼 南 县 于２ １年 ０ ２个镇 （ ） ２ 街 的规 模 化 猪 场 和 和 散 养 户
采血 进行 猪 瘟免 疫 抗 体进 行 了检 测 ． 现 将检 测结 果 分析 报告 如 下
１ 材 料 与 方 法 １ １ 材 料 ．
作 目前 ． 华 猪 保 种 场 建 于 上世 纪７ 成 ０ 年 代 ， 产 设 施 、 种 设 备 仪 器 、 污 生 育 粪
化 猪 场 和 和 散 养 猪 场 共 采 血 ７ ６ ．采 用 正 向 间接 血 凝 试 验 对 猪 瘟 免 疫 抗 体 进 行 检 ８份 测 。 果 表 明 ， 瘟 免疫 抗 体 合 格 率 平 均 为８ ． ％ ， 模 化 猪 场 猪 瘟 免 疫 效果 较 好 ， 结 猪 ０９ ９ 规 部 分 散 养 猪 场 猪 瘟 免 疫抗 体 水平 较 低 ， 对 免 疫抗 体 水平 较 低 的 原 因进 行 了分 析 。 并 关键 词 猪瘟 免 疫 抗 体 检 测 效 果 分析
猪瘟免疫抗体的检测与分析
猪瘟 是 由猪瘟 痫 毒 引起猪 的一 猪瘟 正 向间接血凝试 验 ， 格按 免 疫抗体 水平 较 高； 严 散养户 、 规模 小 种急性 、 热性 、 触性传染病 ； 基本 照诊断试剂说 明书的要求进行操作。 场 的防疫 意识较淡薄 ， 接 其 免疫工作不到 特 为发病 急， 高热稽 留， 腹泻 ， 粪便 １ ３ 判 断 标 准 ． 位， 因而 抗体 水平 较低 ， 在 一定 的 存 恶臭 ， 广泛 的 出血 、 梗塞 和坏 死等 病 在 阴性、 阳性血清稀 释液对 照孔 隐 患 。 变 ； 目前 危 害养 猪 业 的 主 要 传 染 病 合 格 的 前 提 下 ，观 察 待 检 血 清 各 孔 ， ３ ２ 针对散 养户 、小规 模场 的猪瘟 是 ． 之一 。 以呈现“ ＋ 凝 集 的最 大稀 释 倍数 为 免 疫抗体水平较低 的现 状 ， 十” 要求 畜主 为 了 进 一 步 了解 和 掌 握 当 前 我 该 份血清 的抗体 效价 ， 受检血清抗 体 及 时进行 猪瘟疫 苗补 免， 并制定 免疫 市养猪业 的猪瘟 免疫效价 ， 定合理 效价 ≥３ 判 为合格 ， 制 ２ 存栏 生猪免疫抗 程序供养猪户参考 。 ３ ３ 在 流 行 病 学 调 查 中 ， 临床 检 查 ． 的免疫程序。为当地 的动物 防疫部 门 体合格率 ≥７ ％ ０ 判为合格 。 ５ 询 和 养猪场 制 定防控 措施 提供 科 学 的 ２ 结 果 对 ３０份血清 的猪瘟 免疫 发现 有疑似猪瘟病 猪， 问场主 得知 依 据 ，我 所 于 ２ ０ ０ ９年 ８月对 全 市 范 抗 体 的 检 测 结 果进 行 了统 计 ， 计 结 每 年都 按要 求 做过猪 瘟 疫苗 接种 工 统 围内 的各 类 型猪场 进行 了猪瘟 免疫 果 见表 ｌ 作， 是否存在 带毒的母猪则须进 行猪 抗体 的检测。 现将此 次猪瘟 免疫抗体 表１ 鹤 山市２０ 年８ ］ 瘟 强 毒 的监 测 和 净 化 。 ０ ９ ７猪场猪瘟免疫抗 检 测 结 果 报 告如 下 。 ３ ４ 进 行猪瘟 的免疫接种 ，采 取定 ． 体 检 测 结 果 １ 材料与方法 根据监测 的结果 猪 场 场 样 品 合 格 不 舍 舍格 率 期对猪群免疫 监测 ， １１ 材料 ． 并严 格贯 规 模 数 数 数 格 数 （ ） ％ 制 定适合本场 的免疫程序 ， １ １１ 血 样 来 自全 市 １ 镇 ３ ． ． １个 ３ 彻 执行。 个 养 猪 场 的血 清 ３ ０份 。 ５ ３ ５ 做好 猪 瘟免 疫 工作 的 同时 ， ． 应 １ １２ 试 剂 猪 瘟 间接 血 凝 诊 断 ．． 注 意其它 免疫抑制性疾病 的影 响 ， 如 蓝耳病、 狂犬病、 伪 圆环 病 毒 感 染 等 。 液、 猪瘟 标准 阴性 血清 、 瘟标 准 阳 猪 性血清 、 释液 ， 稀 均在有 效期 内使用 ， 购 于 中 国农 业 科 学 院 兰 州 兽 医 研 究 ３ ６ 防制猪瘟 的发生 ，应 采取综合 ． 性 的防制措施 。加强饲养 管理 ， 不喂 所。 发霉变质 的饲料 ；坚持 自繁 白养 、 全 １ １３ 器 械 移 液 器 （０ ０ ） ３ 讨论 ．． ５ ｌ ２ １ ， ｕ ｕ 进 全 出的饲养 方式 ；严格 实施防疫 、 取液塑 料嘴 ， Ｖ型 ｌ０ ９ ｌ℃ ６孔 微 量 血 ３ １ 从表 １ 知 ，我市管辖 范 围内 消毒制度 ； 用优质 的疫 苗并正确使 ． 可 选 凝 板， 量振荡器 。 微 的猪场猪瘟 免疫效果较好 ， 合格率达 用 ， 制定 合理 的 免疫程 序 ； 理使用 合 １２ 。 ． 方法 ９ ．１。规模场 的免疫工作较 落实 ， 药物； 汰带毒的母猪。 ３ ７％ 淘
猪瘟免疫交互实验报告
猪瘟免疫交互实验报告引言猪瘟（又称猪繁殖与呼吸综合征病毒，简称PRRSV），是一种严重危害猪类健康并且造成经济损失的病毒性疾病。
目前，猪瘟的流行已经成为全球性的问题，因此，寻找有效的免疫措施成为了猪瘟防控的关键。
本实验旨在探究猪瘟病毒与猪体免疫系统的交互作用，通过观察病毒与猪体的免疫反应，为猪瘟的防控提供一定的理论依据。
实验方法材料准备1. 猪瘟病毒株2. 猪体免疫细胞3. 细胞培养基4. 适当的培养器具及耗材实验步骤1. 培养猪体免疫细胞，使其达到稳定生长状态。
2. 在细胞培养基中接种猪瘟病毒株，并与猪体免疫细胞共同培养。
3. 定期观察细胞的形态变化，并采集培养液进行病毒检测。
4. 根据检测结果，记录病毒感染与细胞免疫反应的情况。
实验结果经过数次实验观察及检测，我们得到了以下结果：1. 病毒感染导致猪体免疫细胞数量的减少。
在病毒感染后的几天内，免疫细胞数量呈现下降趋势，直至恢复正常。
2. 病毒感染引发了免疫细胞的凋亡现象。
在感染初期，观察到了细胞内部结构的异常变化，同时出现了细胞凋亡的现象。
3. 病毒感染导致免疫细胞分泌细胞因子的表达增加。
与未感染细胞相比，病毒感染细胞分泌的细胞因子明显升高。
4. 免疫细胞对病毒感染表现出了抗体产生的能力。
通过检测免疫细胞培养液中的抗体水平，我们观察到免疫细胞对病毒感染的反应。
讨论研究结果表明猪瘟病毒感染引发了免疫细胞的一系列反应，包括细胞数量减少、细胞凋亡、细胞因子的表达增加以及抗体产生的能力。
这些反应可能是猪体免疫系统对猪瘟病毒进行免疫的一种方式。
这些研究结果对于探讨猪瘟的发病机理及寻找有效的免疫措施具有重要意义。
通过进一步深入地研究猪体免疫细胞与病毒的交互作用，我们可以更好地理解猪瘟的发病机制，为寻找猪瘟的防控措施提供理论支持。
结论本实验通过观察猪瘟病毒与猪体免疫细胞之间的交互作用，发现病毒感染导致了免疫细胞的数量减少、细胞凋亡的现象，并引发了免疫细胞分泌细胞因子的表达增加以及抗体产生的能力。
三分钟帮您看懂抗体检测报告——猪瘟篇
三分钟帮您看懂抗体检测报告——猪瘟篇各位猪友在看完前几期中牧生物平台推送的内容后,是否对猪场防疫与疫苗使用有了更全面的认识呢?小编我是获益匪浅。
那么各位猪友在因地制宜地采用综合性的管控措施之后，又是否对即将获得的收益多了一份期待？等等……先别着急。
在无限的期许当中，由提升生产管理所带来的滚滚财源，是否真的能化虚为实？进一步的说，如何检验我们在猪场防疫方面所取得的成果呢？科学准确的抗体检测报告给您答案！最近几年，一些有条件的养殖场已经定期开展抗体检测工作。
那么在投入大量人力、物力后拿到手的抗体检测报告，您是否真的读的懂呢？本期中牧生物的专题，小编就与您一起来探究抗体检测报告里的门道。
目前，市场上最为常见的抗体检测报告主要有：猪瘟，蓝耳病，伪狂犬，口蹄疫，乙脑，细小,圆环等。
本次我们就选取公认的猪瘟阻断Elisa检测方式，以猪瘟抗体检测的金标准IDEXX检测试剂盒为例。
首先，从原理出发，通过一张图来看看猪瘟抗体检测。
上图所示的阻断法检测猪瘟疫苗抗体的原理，可以简单的概括为：第3步中加入的酶标记物（抗猪瘟病毒的单克隆抗体），与被检血清中的抗猪瘟病毒抗体，两者竞争与包被抗原结合。
而第2步加入的被检血清中如果大量含有抗猪瘟病毒抗体，就会阻断酶标物抗体与包被抗原的结合。
最后加入底物显色。
被检血清中猪瘟病毒抗体越多，阻断率越高，颜色越浅。
猪瘟疫苗的免疫评估一般关注两点：1.阳性率：猪瘟抗体（阻断率（Blocking）≥40%，判为阳性结果；30%＜Blocking＜40%，判为可疑结果；Blocking≤30%，判为阴性结果）。
免疫合格率：阻断率（Blocking）≥50%的，即为免疫合格（断奶仔猪猪瘟第一次免疫受母源抗体干扰，≥30%可视为合格）。
免疫合格的比例即为免疫合格率。
2.变异系数：Coefficient of Variation(CV)变异系数计算的是平均个体的变化，以平均滴度背离的百分数来表示公式如下：变异系数 CV = 标准偏差（STDEV）/平均阻断率×100%CV≤40%,显示了群内猪只有一个均衡的、相似反应。
猪瘟免疫抗体检测分析报告
（ ａｏｇＡ ｉ ａ Ｈ ｓａｄ ｒ ａｄＶ ｔｒ ａｙｓ ｔ ｎ Ｄ ｔｎ ，１ １０ Ｄ ｔ ｎｍ ｌ ｕｂｎ ａ ｎ ｅ ｉ ｒ ｔ ｉ ， ａ ｇ８ ０ ０ ） ｎ ｙ ｅ ｎ ａｏ ｏ
Ａ ｂ ｔ ａ ｔ： ｅ ｅｉ ｉ ｌ ａｅ ｏ ｍｍｕ ｔ ｎ ｉ ｏ ｙ ｉ ｗｉ ｅ ｆｖ ｒｉ ５． ％ ｏ ｖ ｒ ｇ ｒ ｍ ０ ９ ｔ ０１ ｎ Ｄａ ｏ ｇ ｓｒ ｃ Ｔｈ ｌ ｂｅ ｒ ｔ ｆｉ ｇ ｎｉ ａ ｔｂ ｄ ｎ ｓ ｎ ｅ ｅ Ｓ７ ７ ｙ ｎ ａ ｅ ａ ｅｆｏ ２ ０ ｏ２ ０ ｉ ｔｎ
一
为该 血清 的血凝 效价 ． 判定标 准按农 业部 规定 的标 准 ， 个体 受检 血清抗 体效价 ≥２ 为免 疫 合 格 ， 群体 免 疫 抗 体合 格率 达 ７ ％ 以上为群体 免疫合 格 。 ０
２ 结果
２ １ ２０ －２ １ ． ０ ９ ０ １年猪ｎ ｈ ｐ ｅ ｅ １ ０％ ， ｕ ｓ ｍｅ ｏ ｓ ｉ ｓ ｎｌ ｒ ａ ｈ ５ ｏ ｓ ｉ ｓ ｒａ ｈ ０ ｂ ｔ ｏ ｔｗｎ ｈ ｐ ｏ ｙ ｅ ｃ ０％ ．Ｔｈ ｅｉｉ ｌ ｒ ｔ ｏ ｓ ａｅ ｏ ｓ ｈ ｌ ｒ ａ ｈ ４．６％ ． ｅ ｌｇｂ ｅ ａｅ ｆ ｒ ｃ ｌ ｈ ｕ ｅ ｏ ｄ ｅ ｃ ６
表１ ２ ０ － ２ １ 猪 瘟 免 疫 抗 体 检 测 结 果 ０９ ０ １
１ 材 料与方 法 １ １ 材料 ．
ｃ ｕ ｔ ｏ ｔｒ ｅ ｄ ｏ ０％ ｓｉ ｕ ａｅ ｙ Ａｇ ｉｕｔ ｒ ｌＭｉ ｉｔｙ Ｔ ｌ ｉ ｌ ａｅｏ ｍｍｕｎｔ ｆｓａ ｇ ｔ ｒｓ ｎ ｂ ａ ｓａ ｄ ｏ ｎｙ ｆ ｒｓａ ｄ ｒ ｆ７ ｔｐ ｌｔ ｄ ｂ ｒｃ ｌ ａ ｎ ｓｒ ． ｈｅｅ ｉ ｂ ｅｒ ｔ ｆｉ ｕ ｇ ｉ ｏ ｌｕ ｈ ｅ ｗｉ ｅ， ｏ ｒ ｎ ｙ Ｓ ＷＳ ａ ｅ ５ ６％ ． ． Ｏ ｒ ３． ９１ ７％ ａ ｄ ６ ５％ ｒ ｓ ｅ ｔｖ ｌ ｔ ｏ ｙ ｔｔｒ ｉ ｎ ｉ ｉ ａ ａ ｉ ｅ ｅ ｅ ｉｈ ａ ｔ ｄ ｉｔ ａ ｎ ２． ｅ ｐ ｃｉｅ ｙ Ａｎｉ ｄ ｉ ｎ ｉ ｄ ｖｄｕ ｌ ｈ ｓ ｄｆ ｒｎｃ ．ｈ ｇ ｎ ｉ ｙ ｔｔｒ ｃ ｎ ｂ ｅ ｆ ｏ ｂ ｒ ａ ｈ ２ ｕ ｏ ａ ｔ ｏ ｙ ｉ ｒ ｎ ｙ ｅ ｃ ．Ｔｈ ｒ ａ ｅ ａ ｇ ｄｆｅ ｅ ｅ ｎ ｌ ｉ ｌ ｒ ｔ ａ ｎ ｔｗｎ ｈｉｓ ｅ ｃ Ｉ ｔ ｌ ｗ ｎ ｉ ｄ ｔ ｔ ｏ ｌ ｒ ａ ｈ ２。 ｂ ｂ ｔ ｅ ｅ ｒ ａ ｌ ｒ ｅ ｉ ｒｎｃ ｉ ｅ ｉ ｂ ｅ ａｅ ｍｏ ｇ ｏ ｓ ｐ ｇ
猪瘟常年免疫抗体检测及效果分析
３ 结 论 与 分 析
２ ０ １ ０年 我 区 提 出 了 将 生 猪 重 大 动 物 疫 病 免 疫 由 “ 春、 秋
猪 瘟免疫抗体 监测 ， 这 为 常 年 免 疫 保 质 保 量 提 供 依 据 。现
将 监测结果 报告如下 ：
集 中 免疫 模 式 ” 改 为“ 常年 按需 免疫模 式” 。将被 动、 应 激 式 免 疫 转 变 为 自愿 、 主 动 免 疫 的管 理 模 式 。该 模 式 下 免 疫 抗 体 合格率有 了显著 提高 ， 猪 瘟 总体 免 疫 抗 体 合 格 率 从 ２ ０ ０ ９年 的７ ３ 提高到 ２ ０ １ ２ 年的８ ６ ． ７ １ 。这 一 模 式 较 好 地 解 决 了
・ ５ ８ ・
《 上 海畜牧 兽 医通讯 》 ２ ０ １ ３年 第 ４期
猪 瘟 常年 免疫 抗体 检 测及 效 果分 析
贾惠琚 。 罗时 霞 吴亨进 浦 同灿 周 莉
（１贵 州 大 学 ５ ５ ０ ０ ２ ５ ２花 溪 区动 物 疫 病 预 防控 制 中心 贵州 花 溪 ５ ５ ０ ０ ２ ５）
确 保 了生 猪 养 殖 向 “ 优质 、 安全 、 高效、 可持续 ” 方 向发展 ， 为 实现健康养殖 、 农业增 产增 效、 发 展 现 代 畜 牧 业 奠 定 了 坚 实
基础 ， 具有广阔的应用前景 。
改 变 传 统 的春 、 秋 两防 防疫 ， 实 行 生 猪 强 制 常 年 免 疫 模 式， 通过“ 以监 促 免 、 以检促 防、 检免结 合” 的技 术 措 施 ， 提 高
１ ． ３ 其 它 器 械
移液器 （ ５ ０ 、 ３ ０ １ ） ， 取 液滴 头 ， 微量振荡器 ， 水浴锅 。
了农 户 防疫 意 识 ， 村级 防疫 员主动 实施 常年免 疫 ， 使 我 区 动
2017年上半年猪瘟抗体检测分析与防控建议
暗红色区域为样品来源区域2.方法。
美国IDEXX猪瘟ELISA抗体检测试剂盒，判断标准阻断率≥40%抗体阳性；＜30%为阴性；30%≤阻断率＜40%判为可疑。
15 mg/kg，1 次/全群治疗，每kg1.5 g土霉素原粉，d，可消除带菌状态和临床症状。
怀孕母猪于产前1个月连续饲个疗程，可防止流产。
被污染的场地及水源用漂白粉或2% NaOH母猪是一个猪场的核心部分，掌握母猪不孕的防治措施意义重大。
母猪不孕原因众多，找准病原，坚持“早发现，早治疗”的原则。
加强饲养管理，坚持自繁自养，杜绝从疫区引进种猪。
母猪饲喂营养均衡的全价料，禁止给予霉变饲料，圈舍加强消毒措施，给予充足光照时间。
科学饲喂种公猪，选择优良种公猪进行配种。
根据当地流行病学情况，合理制定猪场免疫程序，把预防抓在养殖的最前面。
192.各省、市区抗体合格率分析。
全国平均抗体合格率为80.3%（3598/4483）,按照省份送检样品猪瘟抗体平均合格率统计分析，黑龙江、吉林、辽宁、江苏等省份抗体合格率较高，而天津、新疆平均抗体合格率较低。
主要因为天津、新疆送检样品比较少，样品的代表性就相对较差，也可能是免疫程序不科学，抗体整体均匀度不够所致。
3.养殖规模与猪瘟免疫效果分析。
基本表现出了养殖规模越大，猪瘟免疫效果越好的现象。
检测样本数以50头～300头基础母猪最多，占比60%，300～1 000头基础母猪占比18.2%，≥1 000头基础母猪占比12.2%，≤50头基础母猪占比9.5%；而300～1 000头基础母猪，抗体结果最理想，抗体合格率达到86.4%，明显高于平均的80.3%，而≤50头基础母猪，猪瘟抗体最差，仅为63.1%。
主要因为规模越小，养殖观念相对落后，硬件设施落后老化，品种不纯，生产数据统计不全或者缺少统计分析，过分看重产品价格，免疫程序不科学，缺少疾病规避手段，也是目前中国猪场发病率最高的群体；而超过1 000头基础母猪（1 000头～3 000头）的猪场，4.不同饲养阶段猪瘟抗体分析。
成都市2019 年秋季猪瘟免疫抗体监测情况
32020.10·试验研究 | Experimental research0 引言猪瘟在养殖场中传播流行，会给养殖业造成巨大危害。
预防该种病毒性疾病的有效措施是进行预防接种，疫苗免疫接种质量对猪瘟身体抵抗能力有着最直接影响，为进一步掌握成都市2019年秋季猪瘟免疫抗体水平，对成都市管辖的15个区（市）县的规模化养殖场、散养养殖场和屠宰场的生猪血清进行了抗体水平监测采集，现将具体监测结果介绍如下。
1 材料与方法1.1 材料选取分别选取成都市规模化养殖场、散养养殖场和屠宰场的生猪新鲜血液，采集血液分别为210、390和420份，共计1 020份采集当天送回兽医站进行血清分离。
被采集的猪日龄普遍在60 d 以上，都免疫接种了猪瘟疫苗。
1.2 方法本次研究选择使用酶联免疫吸附试验法进行检测，使用北京亿森宝生物科技有限公司生产的抗体检测试剂盒（酶联免疫吸附），生产批号：20191020。
1.2.1 仪器准备50、100 μL 微量移液器、一次性微量移液器使用的吸头、蒸馏水或去离子水、洗板用的洗瓶或洗板机、温箱或微量反应板用的封条、酶标仪。
1.2.2 试剂准备包被的微量反应板，样品稀释液，阳性对照，阴性对照，酶标二抗，底物溶液和终止液使用前无需处理。
洗涤液（10×）浓缩的洗涤液在使用前必须用超纯水进行10倍稀释[1]。
被稀释了的洗涤液可以在4 ℃的条件下保存3 d ，或冰冻条件下保存1年。
如250 mL 的洗涤液需用25 mL 的浓缩洗涤液和225 mL 的超纯水充分混合配成而成。
注意：如果浓缩液中含有结晶，在使用前必须将它融化，应将该液温水浴30 min 以上。
1.2.3 样品准备新鲜的、冷藏（4 ℃少于8 d ）的、冰冻的血清或血浆都可以用于检测。
作者简介：林鑫（1978-），男，汉族，四川威远人，大学本科，兽医师，主要从事试验室检测工作。
成都市２０１９年秋季猪瘟免疫抗体监测情况林鑫（成都市动物疫病预防控制中心，成都 610000）摘要：猪瘟是危害较为严重的一类病毒性传染性疾病，为进一步掌握成都市秋季猪瘟免疫抗体水平，分别选取成都市规模化养殖场、散养养殖户和屠宰场的生猪血液，分别为210、390和420份，选择使用酶联免疫吸附法进行抗体水平监测，监测结果显示，散养养殖户、集约化规模化养殖户、屠宰场的生猪猪瘟抗体水平普遍在80%以上，符合农业农村部规定要求的免疫抗体平均合格率在70%以上。
猪瘟实验室检测与预防免疫
猪瘟实验室检测与预防免疫猪瘟是一种高致死性疾病，对养猪业造成了很大的经济损失。
猪瘟的传播非常容易，对于猪场来说是一个严峻的挑战。
因此，开展猪瘟实验室检测和预防免疫非常重要。
猪只如果患有猪瘟，就需要进行猪瘟实验室检测。
目前，常用的检测手段有抗体检测和病毒检测。
1. 抗体检测抗体检测是指检测猪血清中是否存在抗猪瘟病毒的抗体，从而判断猪是否感染了猪瘟病毒。
抗体检测不仅可以检测病猪，还可以检测潜伏猪和康复猪是否存在抗体，以确定猪群中的疫情情况。
抗体检测方法有很多种，比较常用的是酶联免疫吸附试验（ELISA）和血凝抑制试验（HI）。
其中，ELISA技术灵敏度更高，也更广泛应用。
抗体检测的优点是操作简单、适用性强、成本低且检测结果可以互相验证。
2. 病毒检测病毒检测是指对病猪的组织样本、血清或粪便等样本进行病毒检测，以确定猪是否感染猪瘟病毒。
病毒检测主要有病毒分离、PCR（聚合酶链式反应）和荧光抗体法等方法。
病毒分离是指将病毒分离出来并在培养基中增殖，然后进行鉴定。
这种方法需要专业实验室条件和技术人员，操作难度较大。
PCR技术是基于病毒RNA或DNA在人工扩增的原理，可以检测非常低浓度的病毒。
这种方法具有高灵敏度、高特异性、快速检测等优点。
但同时也存在比较高的假阳性和假阴性率。
荧光抗体法是利用荧光抗体对病毒感染的组织进行检测，这种方法操作简单，准确度高，但对病情严重的病猪组织分解速度较快，不利于检测。
二、猪瘟预防免疫猪瘟的预防免疫是非常重要的，免疫可以有效提高猪只的免疫力，降低患病率。
预防免疫有两种方法：被动免疫和主动免疫。
1. 被动免疫被动免疫是指通过将富含抗体的血清注入幼猪体内，以免疫幼猪。
这种方法主要用于疫情比较严重的猪场，可以迅速提高猪群中的抗体水平，防止猪群暴发病情。
主动免疫是指通过给猪注射疫苗，促使其产生病毒抗体，从而达到免疫效果。
疫苗种类有活疫苗和灭活疫苗。
活疫苗是指使用弱毒株、温和毒株或者减毒株制成的疫苗。
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现代农业科技2017年第22期动物科学摘要为评估成都市猪瘟疫苗接种的免疫效果,采用ELISA 方法对从成都市15个管辖区(市)县规模化猪场、散养户和屠宰厂采集的910份猪血清样品进行了猪瘟病毒免疫抗体的检测。
结果表明,规模化猪场、散养户和屠宰厂受检样品的猪瘟病毒免疫抗体合格率分别为95.71%、99.29%、89.76%,免疫抗体平均合格率为94.07%,散养户猪瘟病毒免疫抗体合格率稍高于规模化猪场。
关键词猪瘟;免疫抗体;监测;四川成都;2017年春季中图分类号S858.28文献标识码A 文章编号1007-5739(2017)22-0228-02Surveillance and Analysis of Immune Antibodies on Classical Swine Fever in Chengdu City in Spring of 2017LI Li-rui 1LI Min 1ZHOU Xiao-xiao 1LI Gui-li 1XIAO Jin-peng 1YANG Ze-xiao 2YUE Jian-guo 1*(1Animal Disease Prevention and Control Center of Chengdu City of Sichuan Province ,Chengdu Sichuan 610041;2Sichuan Agricultural University )Abstract In order to evaluate the immune effect of swine fever vaccine in Chengdu City ,the swine fever virus immune antibody of 910samples which collected from large-scale pig farms ,scatter-feed households and slaughterhouses were detected by ELISA method.The results showed that the qualified rate of swine fever virus immune antibody of the detected samples collected from large -scale pig farms ,scatter -feed households and slaughterhouses were 95.71%,99.29%and 89.76%respectively ,the average qualified rate of immune antibody was 94.07%,and the qualified rate of swine fever immune antibody of the scatter-feed household was slightly higher than the large-scale pig farms.Key words swine fever ;immune antibody ;surveillance ;Chengdu Sichuan ;spring of 20172017年春季成都市猪瘟免疫抗体监测与分析李俐睿1李敏1周潇潇1李桂黎1肖金鹏1杨泽晓2岳建国1*(1四川省成都市动物疫病预防控制中心,四川成都610041;2四川农业大学)猪瘟俗称“烂肠瘟”,是一种由猪瘟病毒引起的具有高度传染性疫病,致死率高,是威胁养猪业的重要传染病之一。
其临床典型特征是全身皮肤、浆膜、黏膜和内脏器官有不同程度的出血,而现在临床上的普遍情况是非典型化的、亚临床感染、持续感染及隐性感染等[1-2]。
猪瘟被国际兽医局列为A 类传染病[3],我国将其列为一类疫病。
为有效做好猪瘟的防疫工作,成都市在每年2月和8月为管辖的15个区(市)县发放猪瘟疫苗,进行春、秋2季集中免疫。
为切实了解2017年春季猪瘟疫苗免疫实施情况和评估免疫效果,根据免疫计划要求,于2017年5月对所有发放疫苗的区(市)县的部分规模场、散养户和屠宰厂采集血清样品,采用猪瘟病毒ELISA 抗体检测试剂盒对采集样品进行免疫抗体水平的检测。
1材料与方法1.1试验材料检测试剂为武汉科前生物股份有限公司猪瘟病毒ELISA 抗体检测试剂盒,批号为160507。
样品血清样品采集自成都市管辖的15个区(市)县的规模养殖猪场、散养户和屠宰厂,共计910份样品。
1.2试验方法1.2.1准备。
使用前将所有试剂平衡至室温。
用样品稀释液2倍稀释待检血清和阳性、阴性对照;摇匀洗涤液后,用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
1.2.2检测步骤。
每孔加入稀释好的洗涤液200μL 到抗原包被板,静置1min 倒掉液体,洗板3次,最后一次在吸水纸上拍干。
再分别将稀释好的待检血清和对照各取100μL 加入到抗原包被板孔中,阴性对照和阳性对照各设2孔,轻轻振匀孔中样品,置37℃温育2h 。
甩掉板孔中的溶液,每孔加入稀释好的洗涤液200μL ,静置1min 倒掉,洗涤3次,最后在吸水纸上拍干。
每孔加酶标记物100μL ,置37℃温育30min 。
洗涤5次,方法同上。
每孔先加底物液A (50μL )、再加底物液B (50μL ),混匀,室温(20~25℃)避光显色10min 。
每孔加终止液(50μL ),10min 内测定结果。
1.2.3检测结果判定。
在酶标仪上测各孔的OD 630nm 值。
试验成立的条件为阴性对照平均OD 630nm 值≥0.500,阳性对照的阻断率>50%。
阻断率(%)=(1-S /N )×100式中,S 为样品孔OD 630nm 值,N 为阴性对照孔平均OD 630nm值。
样品阻断率≤30%,该样品判为猪瘟病毒抗体阴性;样品阻断率≥40%,该样品判为猪瘟病毒抗体阳性;样品阻断率在30%~40%之间,该样品判为可疑。
2结果与分析从表1可以看出,2017年春季成都市共检测免疫猪瘟血清910份,合格856份,平均合格率为94.07%。
在210份规模场猪血清中,合格201份,平均合格率为95.71%。
在280份散养户猪血清中,合格278份,平均合格率为99.29%。
在420份屠宰厂猪血清中,合格377份,平均合格率为89.76%。
3结论与讨论猪瘟是一类动物疫病,无有效治疗方法,制定科学的免疫程序并按计划接种疫苗是防控该病的主要方针。
为评估成都市春防后猪瘟病毒免疫的效果,对910份不同猪群来源猪血清样品中猪瘟病毒的抗体进行了检测,其中检出阳性856份,平均免疫合格率为94.07%,符合农业部规定要求的免疫抗体平均合格率在70%以上,在临床上可以对猪群产生作者简介李俐睿(1986-),女,四川邛崃人,硕士研究生,兽医师,从事动物疫病防治研究工作。
*通信作者收稿日期2017-08-14表12017年春季成都市猪瘟免疫抗体检测结果养殖场类型检测数/份合格数/份合格率/%散养户28027899.29屠宰厂42037789.76合计91085694.07228相应的免疫保护作用,表明成都市在春季防疫工作中对猪瘟的强制免疫工作基本达到了预期的效果。
研究表明,散养户的免疫效果要略好于规模场,屠宰厂血清样品猪瘟病毒免疫抗体阳性率最低,仅有89.76%。
据了解,在发放疫苗后,散养户对政府采购的疫苗使用率要高于规模场,并且更乐意接受专业指导并科学地接种疫苗,而规模场一方面可能使用自行购买的猪瘟疫苗,另一方面随着近几年猪瘟防控措施的实施并得到了较好控制,对猪瘟疫苗接种工作重视程度有所下降。
同时需要考虑的是,该试剂盒中抗原包被板上的E2蛋白并不能选择性地结合由疫苗免疫产生的猪瘟抗体,对由野毒感染所产生的猪瘟抗体同样能反应,因而这可能是散养户的免疫效果要偏高于规模场的原因之一。
屠宰厂猪只免疫抗体可能与抗体的自然消长有关。
此次监测结果也提示养殖场在自行购买商品猪瘟疫苗时要注意疫苗的质量、使用和保存,同时注意免疫抑制疫病的防控,以减少免疫失败的发生几率。
在加强猪瘟诊断和免疫监测的同时,必须从源头控制,从种源入手扎实抓好种猪场猪瘟的防疫工作。
为避免免疫失败,淘汰隐性感染或潜伏感染的种公猪和母猪,特别是母猪一旦感染猪瘟病毒会发生水平和垂直传播,因而从源头上消除引起仔猪先天感染和免疫耐受的传染源特别重要[4-6]。
同时制定科学合理的免疫程序,适当加大免疫剂量[7-9],免疫仔猪时要排除母源抗体的感染,确定合适的首免日期,保证猪群具有抵抗猪瘟病毒感染的抗体水平。
加强饲料管理,优先选用配合饲料,保证猪群的营养全面,使机体拥有较强的免疫力[10]。
猪场必须实施严格的生物安全措施,定期对圈舍、垫草、粪水和用具等进行彻底消毒;来访人员和工作人员进入猪场必须经过淋浴等消毒程序;禁止外来人员或车辆进入猪场。
需引进猪时,必须做好隔离观察和免疫检测[11-12]。
本次监测的910份不同来源猪群的血清样品中抗体阳性率几乎都在90%以上,但是尚无100%免疫合格率猪群,因而需要重视免疫密度,提高防止野毒感染的几率。
鉴于猪瘟的高度接触性的性质和对养殖业的巨大危害,仍需认真分析猪瘟防疫过程中出现的各种问题,重视和加强猪瘟的防控工作,切实根据农业部农医发[2017]10号文件中《国家猪瘟防治指导意见》的防治目标,到2020年底,成都市所有猪场和部分地区达到猪瘟净化标准,并进一步扩大猪瘟净化区域范围。
在平时开展的流行病学调查工作中,仍需继续在各个区(市)县选择一定数量的养殖场、屠宰厂和交易市场作为定点监测点,持续开展猪瘟疫情监测工作。
同时,定期对区(市)县的基层防疫员进行技术培训,对养殖户推广最科学、最新的免疫程序和猪瘟的防疫知识,保障成都市畜牧业生产的健康发展。
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