PAGE胶蛋白微量回收试剂盒使用说明

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PAGE凝胶快速银染试剂盒使用说明

PAGE凝胶快速银染试剂盒使用说明

PAGE凝胶快速银染试剂盒使用说明货号:G7210规格:1L保存:室温(15℃-25℃)干燥保存,复检期12个月。

试剂盒内容:G7210染色液A200ml染色液B1ml染色液C100ml显色液D100ml试剂E2g注:1L规格指可配制的银染液的体积,实际使用次数根据PAGE胶大小不同而不同。

产品说明:蛋白质条带的银染是基于蛋白质中各种基团(如琉基、碳基等)与银的结合,然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使Ag+还原成银颗粒,可把蛋白电泳带染成黑褐色。

它主要用于聚丙烯酰胺凝胶电泳染色。

其灵敏度比考马斯亮蓝高,PAGE凝胶快速银染试剂盒整个过程操作简单,灵敏度高,能检测到10ng以下的蛋白条带。

操作步骤:一、染色液配制(无水乙醇自备)需要配制的染色液体积根据PAGE胶的大小而定,一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。

配制用的器皿清洗干净后用去离子水涮洗,染色液须用去离子水配制,现用现配。

如果配制的溶液体积不是100mL,可以按比例改变各成分用量。

1.固定液:取40ml无水乙醇,10ml染色液A加去离子水至100ml,混匀;2.敏化液:取30ml无水乙醇,10ml染色液C加去离子水至100ml,混匀;3.银染液:称取0.12g试剂E,用50ml去离子水溶解,加入10ul染色液B混匀,加去离子水至100ml现用现配。

4.显色液:10ml显色液D和30ul染色液B加入去离子水至100ml,混匀,现用现配。

5.终止液:取5ml染色液A加去离子水稀释至100ml,现用现配。

二、染色:1.PAGE电泳结束后,将PAGE蛋白胶转移至玻璃平皿或搪瓷盘中,用固定液固定30min。

2.将PAGE胶转移至敏化液中,使染液没过PAGE胶,室温作用30min。

可置于摇床上缓慢摇晃3.弃去敏化液,用去离子水漂洗三次,每次10min。

4.将PAGE胶转移至银染液中,使染液没过PAGE胶,室温摇晃40min。

5.将PAGE胶转移至显色液中,使显色液没过PAGE胶,室温摇晃,该显色一般在10min 左右。

PAGE胶蛋白微量回收试剂盒使用说明

PAGE胶蛋白微量回收试剂盒使用说明

PAGE胶蛋白微量回收试剂盒使用说明货号:G7200规格:20Assays保存:所有试剂常温下运输,收到后所有试剂2-8℃保存,溶液B避免火源,溶液A在低温下容易形成沉淀,请在使用前30℃加热,以促进溶解。

产品组成:产品名称规格Buffer A10mlBuffer B60ml干粉9.6gDTT40mg使用前将干粉和DTT完全溶解于溶液A中,配完后4℃保存,每次使用时30℃加热,以促进溶解,混合好的溶液A尽量在一个月内使用完毕。

产品说明:SDS-PAGE不仅可用于检测蛋白质的相对分子质量,而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一,随着蛋白质技术的微量化,有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、氨基酸组分分析或末端序列测定等,本产品就是专门为此用途开发的微量蛋白胶回收法,本产品适用于从考染,铜染或锌染中回收蛋白质,回收效率在50-80%,能够使用20次。

产品特点:1.简单,不需要复杂而昂贵的仪器(如电洗脱仪)。

2.适用于变性胶(SDS-PAGE)和非变性胶(Native-PAGE)。

3.回收率一般在50-80%之间(跟蛋白质大小,洗脱时间相关)。

4.跟后续的实验兼容,包括1-D、2-D电泳和质谱测序等。

操作步骤:1.用手术刀片将铜染或锌染的胶块中含有目的条带的部分胶切下,放入1.5mL的离心管中,用相应的消除液将胶中蛋白质条带脱色到胶体接近无色,室温12000rpm (12830g),离心5min,尽量去除上清,保留胶体。

对于考染或其他考染方法,直接将不需要脱色液脱色的或经过脱色液脱色的胶块中含有目的条带部分切下,放入1.5mL的离心管中,用双蒸水洗两次,每次5min,再进行步骤2。

2.用研磨杆将离心管中的胶体研磨成细小的碎片,加入400μL的溶液A,在室温条件下,脱色摇床上震荡过夜(16-18小时),期间取出,偶尔震荡几次。

3.室温12000rpm,离心15min,转移上清到另外一个2mL的离心管中,加入2mL的预冷的溶液B,混匀,4℃放置30min。

试剂盒使用说明书

试剂盒使用说明书

大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

1使用目的:本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉),药物、血清和尿样中大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)残留的定量检测。

2实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法,在微孔板包被有大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)偶联抗原,加入大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)标准品或样品,游离大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)与微孔条上预包被的大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)偶联抗原互相竞争抗大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)抗体酶标记物,用TMB底物显色,加入终止液后颜色由蓝色变为黄色,用酶标仪在450nm波长下进行检测,吸光值与样品中大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)含量成反比,通过标准曲线计算样品中大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)的含量。

3试剂盒组成3.1预包被的大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)偶联抗原的可拆酶标板:1块(12孔×8条)。

3.2大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)标准品:6瓶(1ml/瓶),含量分别是:0ug/ml, 0.1ug/ml,0.3ug/ml,0.9ug/ml,2.7ug/ml,8.1ug/ml3.3抗大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)抗体酶结合物:1瓶(6ml)。

3.4显色液A:1瓶(6ml)。

3.5显色液B:1瓶(6ml)。

3.6终止液:1瓶(6ml),2M硫酸。

3.7样本稀释液:1瓶(10×,6ml),用于样品稀释用。

3.8浓缩洗涤液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。

3.9说明书一份。

4需要而未提供的材料4.1设备4.1.1波长450nm酶标仪。

SDS-PAGE配胶试剂盒使用说明书

SDS-PAGE配胶试剂盒使用说明书

SDS-PAGE配胶试剂盒使用说明书Cat.No:Lot No:原理:本技术中,待分离的样品在有SDS-PAGE和还原剂的存在下通过加热而变性并被去污剂所包被。

SDS可使蛋白质带上大量的负电荷,其带电荷的多少正好与多肽的长度成正比。

聚丙烯酰胺凝胶上样后,在高电压的作用下,蛋白组分向正极(阳极)迁移。

由于所有的蛋白所带的负电荷与其分子大小成正比,因而蛋白就仅仅根据其分子量的大小不同而被分离—凝胶的分子筛效应。

蛋白质的分子量就可以通过与标准蛋白的凝胶迁移率进行比对而得到。

凝胶电泳后,特定的凝胶条带可以通过染色而观察到,并且可通过被动扩散或电洗脱从凝胶上进行回收。

两种最常用的染色方法是考马斯亮蓝法和银染法,这两种方法的蛋白条带检测灵敏度可分别达到50ng和5ng。

由于考马斯亮蓝法使用简便,并可以对收集的蛋白带作进一步分析,因而较为常用。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳应用范围:1)蛋白质纯度的分析;2)蛋白质分子量的测定;3)蛋白质浓度的测定;4)蛋白质水解的分析;5)免疫沉淀蛋白的鉴定;6)免疫印迹的第一步;7)蛋白质修饰的鉴定;8)分离和浓缩用于产生抗体的抗体的抗原;9)分离放射性标记的蛋白质。

试剂盒组成:1.30%预制聚丙烯酰胺胶(4℃保存)200ml2.1.5M TrisCl(PH=8.8)200ml3.1.0M TrisCl(PH=6.8)50ml4.10%SDS 30ml5.10%过硫酸铵(4℃保存)30ml6.去离子水250ml7.TEMED(4℃闭光保存!)1ml8.5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液250 ml9.考马斯亮蓝染色剂50ml10. 考马斯亮蓝脱色剂250ml5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液用时以去离子水1:4稀释,配成1×-甘氨酸电泳缓冲液工作液。

凝胶的配制:(1)将玻璃板安装固定好切误把玻璃弄坏(2)进行分离胶的配制(3)加入TEMED后立即混匀内容物倒入到固定好的玻璃板中,同时留出灌注浓缩胶所需空间(梳子的齿长再加0.5cm)再在胶液面上小心注入一层水(约2—3mm高)以排除气泡和阻止氧气进入凝胶溶液。

胶回收

胶回收

普通琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(离心柱型)试剂盒组成平衡液(BL)溶胶液(PN)漂洗液(PW)洗脱缓冲液(EB)储存条件15-25°干燥条件保存12个月2-8°可保存更长时间。

低温贮存时,使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间,必要时可在37°水浴中预热10分钟,以平衡溶液温度。

产品简介试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统,从TAE 或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质,其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质,回收100bp-10KbDNA片段,回收率高达80%,每个离心吸附柱每次可吸附的DNA量为10微克。

产品特点快速多样可以回收单链、双链DNA片段以及环状质粒DNA高效80%注意事项:1.平衡液BL的加入能够改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性,消除高温、潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。

使用前先检查平衡液BL是否出现浑浊,如果有混浊现象,可在37°水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。

2.电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果3.如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE电泳缓冲液4.切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤5.如果回收率较低,可在胶充分溶解后检测PH值,如果pH大于7.5,可向含有DNA的胶溶液中加10-30微升3M醋酸钠(ph5.2)将ph值调到5-7之间。

6.回收<100bp及>10kb的DNA片段时,应加大溶胶液的体积,延长吸附和洗脱的时间。

7.回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少,洗脱体积越少,回收率越低。

操作步骤:第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明现在15ml漂洗液PW中加入60ml 无水乙醇。

所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心1.柱平衡步骤:向吸附柱CA2中加入500微升平衡液BL,12000 1min2.将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分)放入干净的离心管中,称取重量。

碧云天DNA凝胶回收试剂盒D0056说明书

碧云天DNA凝胶回收试剂盒D0056说明书

DNA 凝胶回收试剂盒产品编号 产品名称包装 D0056DNA 凝胶回收试剂盒50次产品简介:碧云天的DNA 凝胶回收试剂盒(DNA Gel Extraction Kit),是一种用于从DNA 琼脂糖凝胶中回收目的DNA 的试剂盒。

本试剂盒采用了融胶液,可以使琼脂糖凝胶完全融化。

同时采用了一种新型的离子交换柱,在特定条件下,使DNA 能在离心过柱的瞬间,结合到DNA 纯化柱上,在一定条件下又能将DNA 充分洗脱,从而实现DNA 的快速纯化。

无需酚氯仿抽提,无需酒精沉淀,通常12个样品只需不足20分钟即可完成。

每个DNA 纯化柱可以结合的DNA 量的上限约为15微克。

适用于从DNA 琼脂糖凝胶(agarose gel)电泳后割取的含有目的DNA 的凝胶块中快速提取DNA 。

该目的DNA 通常为PCR 产物、质粒DNA 酶切出来的DNA 片段、超螺旋质粒DNA 单酶切后的线性化产物和DNA 连接产物等。

本试剂盒适用于纯化100bp-10kb DNA 。

长至30个碱基的引物均可被完全去除。

DNA 回收效率通常为60-90%。

接近100bp 或10kb 的DNA 片段回收效率要略低一些,大于10kb 的DNA 回收效率迅速下降。

另外如果样品中DNA 含量特别低也会导致回收效率下降。

本试剂盒纯化所得DNA 可直接用于酶切,连接,转化细菌,测序,PCR ,杂交等后续操作。

每个试剂盒足够用于50个平均重量不超过400微克的凝胶样品。

包装清单:产品编号 产品名称 包装 D0056-1 溶液I (融胶液) 20mlD0056-2 溶液II (洗涤液) 26ml (第一次使用前加入39ml 无水乙醇)D0056-3 溶液III (洗脱液)3mlD0056-4DNA 纯化柱及废液收集管50套 —说明书1份保存条件:室温保存,一年有效。

注意事项:第一次使用前在溶液II (洗涤液)中加入39ml 无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。

胶回收方法全攻略

胶回收方法全攻略

胶回收方法全攻略说到电泳凝胶的片断回收,想来在实验室久已的“老手”们都会不屑一顾。

确实,一般在各个和分子生物学沾到一点边儿的实验室里,从琼脂糖凝胶中回收DNA,仅仅是一种简单不过的常规实验操作。

虽说早期的凝胶电泳片断回收没有1—2个小时是搞不定的,每个实验室也有自己的独门秘诀,可后来各大品牌纷纷推出了了多种不同用途,不同价钱的快速凝胶回收试剂盒,一下子将胶回收的时间缩短到10多分钟,操作也大大简化,胶回收就变成“小菜一碟”了。

然而,从bbs逛上一圈下来,发现实际上还是有不少人为胶回收这种看似简单的操作而烦恼。

到底是什么导致了实验新手,甚至是老手在这个已经发展近40年的常规性实验中卡壳?由于胶回收的质量和数量直接影响后继的一系列实验——比如酶切连接、转化筛选、测序或者PCR 扩增、标记乃至显微注射等等,为大家搜罗各种产品和方法的优缺点,注意事项,做一个胶回收全攻略篇。

一、胶回收的关键参数胶回收的质量直接影响后继实验的成功与否。

要想做好胶回收,无论是自己亲力亲为还是借助目前五花八门的胶回收试剂,最基本的评定标准无外乎这么几个:质量( 回收产物的纯度和浓度),回收效率,操作方便(速度),柱子的载量等等。

回收产物质量:回收产物的质量主要指纯度。

常规电泳过程中,普通级别的琼脂糖自带的一些性状不明的多糖,会连同DNA一起从凝胶中抽提出来,会强烈抑制后继的连接、酶切、或者标记、扩增等实验。

从凝胶中回收DNA片断,产物的纯度自然是我们考虑的第一要务。

对于大片断DNA回收,质量还包括了产物的完整与否,如果机械剪切力使得回收产物大小不一致,后果决不是你希望碰见的。

而对于较小片断回收,质量其实还包括了回收产物的浓度。

因为产物浓度太小,对后继实验同样也有影响,比如连接、标记实验等等就很不爽,往往不得不再浓缩一次,增加了操作的复杂性。

此外,极微量的纯化介质或者是某些试剂混入回收产物中也会对结果产生致命的影响。

回收率:回收得率,是我们考虑的另一个重要参数。

胶回收试剂盒

胶回收试剂盒

产品简介产品简介::本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA 的硅基质材料和独特的缓冲液系统,从TAE 或TBE 琼脂糖凝胶上回收DNA 片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。

可回收100 bp–40 kb DNA 片段,回收率可达80%以上(<100 bp 或>10kb 的DNA 片段回收率为30-50%)。

使用本试剂盒回收的DNA 可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR 、测序、文库筛选、连接和转化等实验。

产品特点产品特点::快速快速::整个操作过程快速方便,几十分钟即可完成回收工作。

多样多样::可以回收单链、双链DNA 片段以及环状质粒DNA 。

高效高效::独特的离心柱和精心配制的缓冲液,保证最大量回收到高纯度的目的DNA 。

注意事项注意事项::请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。

1. 平衡液BL 的加入能够改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性,消除高温/潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。

使用前请先检查平衡液BL 是否出现浑浊,如有混浊现象,可在37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。

2. 电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。

3. 如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE 电泳缓冲液。

4. 切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA 造成损伤。

5. 如果回收率较低,可在胶充分溶解后检测pH 值,如pH 值大于7.5,可向含有DNA 的胶溶液中加10–30 µl 3 M 醋酸钠(pH5.2)将pH 值调到5–7之间。

6. 回收<100 bp 及>10 kb 的DNA 片段时,应加大溶胶液的体积,延长吸附和洗脱的时间。

7. 回收率与初始DNA 量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越少,回收率越低。

操作步骤操作步骤::第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在15 ml 漂洗液PW 中加入60 ml 无水乙醇! 所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

胶回收试剂盒使用步骤

胶回收试剂盒使用步骤

胶回收试剂盒使用步骤:
1)在紫外灯下从电泳胶上切下所需回收的条带,注意刀片需消毒,胶块应尽量小,使之易融化完全;
2)事先将一个eppendorf管称重,然后将胶块放入后再次称重,获得胶块的重量;
3)以每100mg胶块加入300μl的量加入Binding Buffer,查看胶块是否浸在液体中;
4)56℃水浴10min以融化胶块释放DNA,期间每2-3min 需取出震荡;
5)待胶块完全融化后按照每100mg胶块150μl的量加入异丙醇,充分震荡混匀;
6)将High Pure Filter Tube 安装到Collection Tube上;
7)将所有eppendorf管中的液体转移到High Pure Filter Tube中去,注意不要超过700μl,若超过需分两次离心;
8)12000 rpm 离心1 min,倒掉收集管中的液体;
9)加入500μl Wash Buffer后再次离心1min;
10)倒掉收集管中的液体后再次加200μl的Wash Buffer,12000 rpm 离心1 min;11)小心将Filter Tube取下后装入一个新的Effendorf管上;
12)在滤芯的正中加上30μl的Elution Buffer,室温放置1min,12000 rpm 离心1 min。

试剂盒使用说明

试剂盒使用说明

*质粒小量提取试剂盒产品说明:■本产品采用经典的硅胶膜及碱裂法技术,硅胶膜柱可以在高盐、低pH值情况下高效可逆的结合DNA, 而蛋白及其它杂质不被结合而被除去,被结合的核酸在低盐、高pH值情况下可被洗脱出来.该试剂盒具有高效、快速、方便之特点,全套操作只需半个小时便可完成。

使用本试剂盒可从1~5 ml的过夜培养的菌液中纯化得到1~40μg的高纯度质粒DNA(OD260/OD280 = 1.8~2.0),此质粒DNA可直接用于DNA序列分析以及各种酶促反应等。

试剂盒组成:产品编号GS001-1 GS001-2 GS001-3试剂盒组成纯化次数50次100次200次RNaseA(10mg/ml)150μl 300μl 600μl溶液Ⅰ15ml 30ml 60ml溶液Ⅱ15ml 30ml 60ml溶液Ⅲ20ml 40ml 80ml溶液PB 30ml 50ml 100ml溶液W 30ml 2×30ml3×40ml溶液Eluent 5ml 10ml 20mlDNA纯化柱50个100个200个溶液W初次使用前用无水乙醇按1:1.5稀释,即含60%乙醇。

用途:提取用于酶切、转化、测序、PCR等试验用质粒。

保存:初次使用本试剂盒时,请将RNase A全部加入到溶液Ⅰ中,均匀混合后4℃保存。

溶液Ⅱ:室温保存,若出现沉淀,请于37℃保温溶解,待恢复至室温后使用。

其他试剂:室温保存。

操作步骤:1.用1.5 ml离心管收集1.5-5ml菌液,12000rpm离心60秒,弃上清。

(应根据所培养的菌液的浓度确定收集的菌液量)2. 加入250µl溶液Ⅰ/RNase A混合液,漩涡振荡使菌液完全重新悬浮。

(菌液重新悬浮对于获得高产量是非常重要的,为使RNA被RNase A充分降解,让悬浮菌液静置1-2分钟3. 250µl溶液Ⅱ,温和反复颠倒混匀4-10次,室温放置1-2分钟,以获得澄清的裂解液。

胶回收试剂盒说明书(生工)

胶回收试剂盒说明书(生工)

胶回收试剂盒说明书(生工)SanPrep柱式DNA胶回收试剂盒产品编号:SK8131/SK8132包装规格:50次/100次试剂盒组成组分 SK8131,50次 SK8132,100次纯化套件(吸附柱+收集管) 50套 100套Buffer B2 30 ml 60 mlWash Solution 12 ml 24 mlElution Buffer 5 ml 10 ml操作手册1份1份保存方法及注意事项本试剂盒在室温(15~25°C)干燥保存,有效期见包装。

Buffer B2中含有刺激性的化合物,操作过程中应穿上实验服,戴好乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,防止吸入口鼻。

沾染皮肤或眼睛后,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医生的帮助。

产品介绍本试剂盒适用于从TAE和TBE琼脂糖凝胶中回收100 bp~10 kb 的DNA片段,回收效率可达80%。

该试剂盒采用特殊的吸附膜,能够有选择性地吸附核酸分子,去除其他杂质,得到高质量的DNA回收产物。

本试剂盒采用的膜结合液中不含有干扰酶活性的碘化钠,所得到的DNA可直接用于酶切、连接、测序等后续的分子生物学试验。

本试剂盒具有以下特点:1. 适用范围广,回收效率高,对于100 bp~10 kb之间的DNA片段回收效率在80%以上。

2. 操作简单快速,整个回收过程仅须15分钟左右。

3. 洗脱效率高,洗脱体积最小可低至15 μl。

快速操作流程(胶回收)1. 准备工作。

a. 检查Wash Solution 中是否已经加入乙醇。

b. 检查Buffer B2是否出现沉淀。

c. 将水浴锅调至55°C 。

2. 从琼脂糖凝胶中割下含目标片段的胶块,称重。

3. 加入胶块重量3-6倍的Buffer B2,50°C 水浴5-10分钟溶胶。

4. (选做)对于 < 500 bp 的片段,加入1/3 Buffer B2体积的异丙醇。

5. 将溶胶液移入吸附柱中,8,000 × g 离心30秒。

蛋白重折叠试剂盒说明书

蛋白重折叠试剂盒说明书

随盒附送的简明操作流程使得分离的包涵体能够在温和的变性条件下重溶。蛋白重溶后,将可
溶部分用含有还原试剂的中性缓冲液透析促进二硫键正确折叠,多余的还原剂可以再次用透析
除去并将中性缓冲液替换成所需蛋白缓冲液。经验证,这个操作流程适用于从包涵体中重溶得
到的CBD•TagTM融合蛋白及其他重组蛋白的重折叠。
蛋白重折叠中的透析操作
试剂盒中包含有50×透析缓冲液和1M DTT溶液用于透析溶解包涵体。 1. 准备透析用的所需体积的缓冲液。通常来讲,要用大于50倍体积的透析缓冲液透析2次以
上。比如,如果样品体积是15ml,则每次透析至少要用750ml,那么总共需要准备至少1.5L 透析缓冲液。制备此体积的缓冲液时,将30ml 50×透析缓冲液稀释在1.5L去离子水中,加 入150μL 1M DTT(使其终浓度为0.1mM)。 注意:如果目标蛋白是带CBDclos融合标签的,推荐使用添加了100mM NaCl(用5M储液稀 释)的透析缓冲液。因为在一些情况下,CBDclos标签对低盐缓冲液敏感。 2. 4℃透析至少3小时,替换缓冲液并继续透析3小时或更长时间。 3. 按照步骤1中操作准备另外的缓冲液,但是不要加DTT。 4. 用不含DTT的透析缓冲液继续透析两次(每次3小时)。 5. 如果透析后样品中有可见的不溶物,4℃ 10,00×g离心10分钟去除沉淀。需要对目标蛋白 进行功能检测从而确定是否需要另外用硫醇试剂处理蛋白氧化并异构二硫键。
液。缓冲液体积需要 25 倍于可溶蛋白样品体积。冷却至 4℃。 2. 4℃过夜透析重折叠蛋白。 3. 取出一些样品检测蛋白活性。 4. 如果需要,室温或 37℃继续透析提高二硫键重形成速率。 注意:也可以直接将高浓度的氧化和还原型谷胱甘肽储液直接加入目标蛋白溶液中,孵育(间 隔不同时间取出样品检测蛋白活性)后透析去除多余的氧化还原试剂。

PCR产物纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书

PCR产物纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书

杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://AidQuick PCR Purification KitPCR产物纯化回收试剂盒目录号:DR02适用范围:适用于PCR反应产物、酶切产物DNA片段、探针标记纯化回收,DNA样品浓缩等。

试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存50次(DR0101)100次(DR0202)200次(DR0203)平衡液室温 5 ml 10 ml 20 ml 结合液BB 室温30 ml 60 ml 100ml漂洗液WB 室温15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温10 ml 15 ml 20 ml吸附柱EC 室温50个100个200个收集管(2ml)室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。

储存事项:所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。

使用前应该恢复到室温储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。

避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

产品介绍:在高离序盐存在的情况下,DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。

产品特点:1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。

克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。

2. 使用了优质结合液,不含传统结合液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。

3. 结合液加酚红调制成为了黄颜色,便于监测pH值变化从而达到最佳结合效果,大大提高回收效率。

4. 快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。

page胶蛋白微量回收试剂配方

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page胶蛋白微量回收试剂配方摘要:一、前言二、胶蛋白微量回收试剂配方简介1.试剂成分2.操作步骤三、胶蛋白微量回收试剂的优势1.高效性2.便捷性3.准确性四、胶蛋白微量回收试剂的应用领域1.生物科学研究2.医学诊断3.食品安全检测五、结论正文:一、前言胶蛋白是一种广泛存在于生物体中的蛋白质,具有重要的生物学功能。

在科学研究、医学诊断和食品安全检测等领域,对胶蛋白进行准确、高效的检测具有重要意义。

本文将介绍一种胶蛋白微量回收试剂配方,以满足这些领域的需求。

二、胶蛋白微量回收试剂配方简介1.试剂成分胶蛋白微量回收试剂主要包含以下成分:酶标抗体、缓冲液、稳定剂、防腐剂等。

这些成分共同作用,实现胶蛋白的高效回收。

2.操作步骤(1)取一定量的胶蛋白样本,加入适量的缓冲液,进行超声处理。

(2)将处理后的样本进行离心,收集上清液。

(3)将上清液与胶蛋白微量回收试剂混合,室温下静置一段时间。

(4)再次进行离心,收集沉淀物。

(5)将沉淀物进行洗涤、干燥,即可得到回收的胶蛋白。

三、胶蛋白微量回收试剂的优势1.高效性胶蛋白微量回收试剂具有高效性,能够在短时间内实现胶蛋白的高效回收,提高实验效率。

2.便捷性该试剂操作简单,只需几个步骤即可完成胶蛋白的回收,节省实验者的时间和精力。

3.准确性胶蛋白微量回收试剂具有较高的准确性,回收的胶蛋白纯度高,有利于后续的实验研究。

四、胶蛋白微量回收试剂的应用领域1.生物科学研究胶蛋白微量回收试剂可应用于各种生物科学研究领域,为研究者提供可靠、高效的胶蛋白检测手段。

2.医学诊断胶蛋白微量回收试剂在医学诊断领域具有广泛应用,如心血管疾病、肿瘤等疾病的诊断和病情监测。

3.食品安全检测胶蛋白微量回收试剂可用于食品安全检测,检测食品中的胶蛋白成分,保障食品安全。

五、结论胶蛋白微量回收试剂具有高效、便捷、准确等优势,广泛应用于生物科学研究、医学诊断和食品安全检测等领域。

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以下是一种可能的胶蛋白微量回收试剂配方:
- 胶蛋白酶:用于降解胶蛋白,从而使其变成可回收的形式。

可以选择某种商用胶蛋白酶,并按照其推荐的浓度使用。

- 缓冲液:用于调整试剂的酸碱度和维持适宜的工作条件。

可以使用一种合适的缓冲剂(如Tris-HCl)来制备具有适宜pH值的缓冲液。

- 蛋白酶抑制剂:用于抑制酶的活性,从而保护被回收的胶蛋白。

可以选择一种合适的蛋白酶抑制剂(如PMSF)并按照其推荐的浓度使用。

- 重组蛋白:用于辅助胶蛋白的回收。

可以选择一种与胶蛋白相互作用并具有良好相容性的重组蛋白,并按照其推荐的浓度使用。

- 乙酸酒石酸盐:用于调整试剂的离子强度和保持适宜的工作条件。

可以按照实验需要调整乙酸酒石酸盐的浓度。

以上是一种可能的配方,具体配方应根据具体实验要求和试剂的特性进行优化和调整。

另外,为了保证实验结果的准确性和可重复性,使用前应对试剂进行充分的验收和验证。

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page胶蛋白微量回收试剂配方【最新版】目录一、引言1.介绍 page 胶蛋白微量回收试剂配方的背景和意义2.概述本篇文章的主要内容二、page 胶蛋白微量回收试剂的配方1.试剂的种类和作用2.各试剂的比例和配制方法三、试剂的特性和应用1.试剂的优点和特性2.试剂在 page 胶蛋白微量回收中的应用四、实验操作步骤1.实验的准备工作2.实验的具体操作流程五、实验结果与分析1.实验结果的描述2.实验结果的分析和讨论六、结论1.总结 page 胶蛋白微量回收试剂配方的特点和优点2.对未来研究的展望正文在生物科学研究中,胶蛋白是一类重要的蛋白质,它们在细胞信号传导、细胞黏附和迁移等过程中起着关键作用。

然而,由于胶蛋白的微量特性,对其进行回收和研究一直是一个难题。

近年来,page 胶蛋白微量回收试剂配方的出现,为胶蛋白的研究提供了新的可能。

本文将详细介绍page 胶蛋白微量回收试剂配方的配制方法和应用。

二、page 胶蛋白微量回收试剂的配方page 胶蛋白微量回收试剂主要包括以下几种成分:聚乙二醇(PEG)、十二烷基磺酸钠(SDS)、甘油和磷酸缓冲液。

其中,PEG 作为载体,可以增加胶蛋白的溶解度;SDS 则可以消除胶蛋白的电荷,防止其沉淀;甘油和磷酸缓冲液则可以提供稳定的 pH 环境。

这些试剂的比例一般为:PEG:SDS:甘油:磷酸缓冲液=1:1:1:1。

三、试剂的特性和应用page 胶蛋白微量回收试剂具有以下优点:一是能够高效地回收胶蛋白,回收率可以达到 90% 以上;二是操作简单,只需要将样品与试剂混合,然后离心即可;三是试剂的毒性低,对实验者的危害小。

因此,该试剂配方已经被广泛应用于胶蛋白的研究中。

四、实验操作步骤实验的准备工作主要包括:准备试剂、准备样品和准备离心机。

实验的具体操作流程如下:首先,将样品与试剂混合,然后放入离心机中离心,离心结束后,收集上清液,即为回收的胶蛋白溶液。

五、实验结果与分析实验结果显示,使用 page 胶蛋白微量回收试剂配方,可以有效地回收胶蛋白。

SDS-PAGE原理、试剂配制和注意事项

SDS-PAGE原理、试剂配制和注意事项

SDS是阴离子去污剂,能断裂分子内和分子间的氢键,破坏蛋白分子的二、三级结构。

作用有四:去蛋白质电荷、解离蛋白质之间的氢键、取消蛋白分子内的疏水作用、去多肽折叠。

而强还原剂如巯基乙醇,二硫苏糖醇能使绊胱氨酸残基间的二硫键断裂。

在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成多肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白- SDS 胶束,所带的负电荷大大超过了蛋白原有的电荷量,这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异。

SDS-PAGE一般采用的是不连续缓冲系统,浓缩胶是由AP催化聚合而成的大孔胶,凝胶缓冲液为pH6.7的Tris-HC1。

分离胶是由AP催化聚合而成的小孔胶,凝胶缓冲液为pH8.9 Tris-HC1。

电极缓冲液是pH8.3 Tris-甘氨酸缓冲液。

2种孔径的凝胶、2种缓冲体系、3种pH值使不连续体系形成了凝胶孔径、pH值、缓冲液离子成分的不连续性,这是样品浓缩的主要因素。

当样品液和浓缩胶选TRIS/HCL缓冲液,电极液选TRIS/甘氨酸。

电泳开始后,HCL解离成氯离子,甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。

蛋白质带负电荷,因此一起向正极移动,其中氯离子最快,甘氨酸根离子最慢,蛋白居中。

电泳开始时氯离子泳动率最大,超过蛋白,因此在后面形成低电导区,而电场强度与低电导区成反比,因而产生较高的电场强度,使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动,形成以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩成一中间层。

过硫酸铵(AP)为催化剂,四甲基乙二胺(TEMED)为加速剂。

在聚合过程中,TEMED 催化过硫酸铵产生自由基,后者引发丙烯酰胺单体聚合,同时甲叉双丙烯酰胺与丙烯酰胺链间产生甲叉键交联,从而形成三维网状结构。

当分子量在15KD到200KD之间时,蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系,符合下式:logMW=K-bX,式中:MW为分子量,X为迁移率,k、b均为常数,若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图,可获得一条标准曲线,未知蛋白质在相同条件下进行电泳,根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。

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page胶蛋白微量回收试剂配方(原创版)目录1.介绍 page 胶蛋白微量回收试剂配方的背景和目的2.详述 page 胶蛋白微量回收试剂配方的步骤和所需材料3.解释 page 胶蛋白微量回收试剂配方的作用原理4.分析 page 胶蛋白微量回收试剂配方的优缺点和可能的改进方向5.总结 page 胶蛋白微量回收试剂配方的重要性和应用前景正文一、介绍Page 胶蛋白微量回收试剂配方是一种用于实验室研究中的胶蛋白回收方法。

胶蛋白是细胞外基质的主要成分,对于细胞生长、分化和迁移等过程有着重要的影响。

在实验室研究中,胶蛋白的微量回收是一项重要的技术,对于研究细胞生物学、分子生物学等领域有着重要的意义。

二、步骤和材料Page 胶蛋白微量回收试剂配方的具体步骤如下:1.准备试剂:所需试剂包括 Page 胶蛋白回收液、蒸馏水、pH 缓冲液等。

2.制备样品:将待测的胶蛋白样品准备好,并加入适量的 Page 胶蛋白回收液。

3.离心:将样品离心,使其中的胶蛋白被沉淀。

4.洗涤:用蒸馏水和 pH 缓冲液洗涤沉淀的胶蛋白,以去除杂质。

5.再次离心:将洗涤后的胶蛋白再次离心,以获得纯净的胶蛋白。

三、作用原理Page 胶蛋白微量回收试剂配方的作用原理是利用 Page 胶蛋白回收液中的特殊物质,与胶蛋白样品中的胶蛋白结合,从而使胶蛋白沉淀。

通过多次洗涤和离心,可以有效地去除样品中的杂质,获得纯净的胶蛋白。

四、优缺点和改进方向Page 胶蛋白微量回收试剂配方的优点是操作简便,回收效率高,适用于各种类型的胶蛋白样品。

缺点是回收过程中可能会损失一部分胶蛋白,而且对于一些特殊的胶蛋白样品,回收效果可能不理想。

未来的改进方向包括寻找更有效的胶蛋白回收试剂,以及优化回收流程,以提高回收效率和减少胶蛋白的损失。

五、总结总的来说,Page 胶蛋白微量回收试剂配方是一种重要的胶蛋白回收方法,对于实验室研究有着重要的意义。

UElandy SDS-PAGE 胶凝固剂试剂盒说明书

UElandy SDS-PAGE 胶凝固剂试剂盒说明书

产品说明书凝胶配制试剂盒SDS-PAGE(任意浓度)产品货号:P80111-KIT产品规格:50块胶(0.75mm)产品组分:组分编号试剂A试剂B试剂C试剂D试剂E试剂F试剂G名称上层胶缓冲液下层胶缓冲液30%Acr-Bis(29:1)10%SDSPAGE胶凝固剂PAGE胶促凝剂储存缓冲液(5×)含量50mL100mL100mL5mL0.5g0.6mL100mL储存条件4℃避光保存,有效期见外包装。

PAGE胶凝固剂(粉剂):4℃保存时需拧紧瓶盖注意防潮,受潮后会很快失效。

PAGE胶凝固剂(粉剂)用水配制成10%溶液后,分装成小管-20℃保存,半年内有效;配制好的凝胶请浸没在1×储存缓冲液(凝胶保存液)中,室温保存,6个月保质期。

产品介绍本产品采用Tris-甘氨酸凝胶体系,按照使用说明书操作,只需自备制胶器具和蒸馏水,加入促凝剂即可配成任意浓度的SDS PAGE凝胶。

操作简单,成本低。

本试剂盒约可配制50块常规大小的(0.75mm)SDS-PAGE凝胶。

具体可以配制的凝胶数量与凝胶厚薄、大小有关。

产品特点保质期长:改良配方,制备的SDS PAGE凝胶可在室温下保存半年以上;上样方便:可制备有颜色的上层胶,点样孔清晰易辨,方便点样;效果优秀:跑胶条带清晰,敏锐,蛋白分辨率高。

高效兼容传统的电泳/转膜液。

使用方法1.准备工作PAGE胶凝固剂(粉剂)溶于5mL蒸馏水中,将溶液分装为10管,0.5mL/管,于-20℃长期保存。

10%PAGE胶凝固剂(粉剂)溶液可在4℃保存一周。

2.分离胶的配制(1)根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶):不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范SDS-PAGE分离胶浓度6%胶8%胶10%胶12%胶15%胶最佳分离范围50-150kD30-90kD20-80kD12-60kD10-40kD 如果样品蛋白分子量范围较广,建议使用梯度预制胶。

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PAGE胶蛋白微量回收试剂盒使用说明
胶蛋白微量回收试剂盒(以下简称试剂盒)是一种用于从聚丙烯酰胺
凝胶电泳()胶中回收目标蛋白质的试剂盒。

本文将详细介绍试剂盒的使
用方法。

一.实验前准备
1.准备好实验室所需的培养基、显微镜玻片等。

2.检查试剂盒中的试剂瓶是否有球结,如有疑问请勿使用。

二.胶回收实验步骤
1.准备样品:取适量的包含目标蛋白质的胶,将其剪碎并放入E盒洗
涤缓冲液中,孵育15分钟,然后通过藻蓝溶液染色观察胶中的蛋白条带。

2.胶块处理:将BL3溶液倒入胶块处理管中,将样品转移到胶块处理
管中,尽量避免将胶块带入胶块处理管。

然后用吸滤纸吸去底部的液体,
加入2次体积的洗涤缓冲液洗涤胶块。

3.添加胶析试剂:将胶块处理管倒置并放置在收集管上,将胶析试剂
加入胶块处理管中,使其接触胶块。

注意避免产生气泡。

缓慢旋转收集管,使胶析试剂均匀分布。

4.离心:将收集管与胶块处理管在离心机上离心10分钟,使胶析试
剂顺着离心力聚集在胶块底部。

保留悬液。

5.胶结析:从收集管底部用吸头吸去尽量多的溶液,用吸头吸取底部
的胶,放入重结析管中,加入BL3溶液充满整个管子。

注意避免产生气泡。

离心2分钟,废液倒掉。

6. 洗涤蛋白:重置重结析管的位置,用2ml洗涤缓冲液洗涤胶2次,每次洗涤10分钟。

收集液体。

7. 胶脱水:加入3ml脱水溶液,重置离心管的位置,离心2分钟,
废液倒掉。

重复此步骤2次,最后倒掉废液。

8.再溶解:加入约30μl再溶解缓冲液,然后离心2分钟,收集上清液。

9.分析:取适量的上清液进行进一步实验。

三.注意事项
1.使用试剂盒前,请阅读使用说明书,并严格按照说明操作。

2.实验中使用的所有试剂和器材都必须经过严格的无菌操作。

3.在实验过程中,应注意避免直接接触试剂与胶液。

4.在洗涤、离心和脱水过程中,要小心操作,避免试剂或胶溶液外溢。

5.在试剂盒过程中,应注意实验室内的清洁和卫生。

四.结语。

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