琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书

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胶回收QC操作标准

胶回收QC操作标准

琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(离心柱型)QC标准操作流程1. 实验试剂和耗材1.2 实验试剂1.3 耗材2. 实验操作流程胶回收试剂盒的检测须进行两个实验验证,第一个实验为GelRed染色法,第二个实验为EB染色法。

2.1 GelRed染色法2.1.1 1.5%琼脂糖凝胶的制备(1)准确称取1.5g琼脂糖置于250ml三角锥形瓶中,添加125ml 1×TAE溶液。

(2)轻微混匀后将其置于微波炉中,高火加热6min至溶液沸腾,取出锥形瓶放置室温2min。

(3)添加1×TAE溶液至110ml,再次于微波炉中高火加热3min至溶液沸腾。

(4)室温放置10min后将溶液倒入插有梳子的胶槽内,待胶块凝固后使用。

2.1.2 胶回收实验(1)取6个2ml离心管,依次编号为1-6号,使用分析天平准确称取空离心管的重量。

(2)用干净锋利的手术刀片切下不含核酸染料的1.5%琼脂糖凝胶胶块,放入已称重的2ml离心管中,称取胶块与离心管总重,计算凝胶块的重量。

要求胶块重量不超过200mg 为宜。

(3)添加溶胶液Binding Solution B,要求1、2号管中每100mg琼脂糖凝胶加入200ul Binding Solution B,3、4号管中每100mg琼脂糖凝胶加入300ul Binding Solution B,5、6号管中每100mg琼脂糖凝胶加入400ul Binding Solution B.(4)每管中添加50ul DL2502,混匀后置于60℃水浴5min,期间间断混合,直至凝胶块完全融化。

【注意事项】观察各管内溶胶液溶解胶块的快慢程度。

(5)将上述混合液转移至套放于2ml收集管的GenClean柱中,室温放置2min,10000rpm 室温离心1min,取出GenClean 柱,并倒掉收集管中废液。

(6)将GenClean 柱重新放回收集管中,加入500ul Wash Solution,于12000rpm,室温离心1min,倒掉收集管中废液。

爱思进胶回收说明书

爱思进胶回收说明书

爱思进胶回收说明书
爱思进胶回收试剂盒的使用说明书如下:
1. 制备琼脂糖凝胶电泳:将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,根据Marker 判断PCR产物的大小是否符合要求。

2. 切胶:切下包含目的片段的凝胶,尽量切去上下两端的凝胶,以减少非特异性产物的影响。

3. 胶的融化:将切下的凝胶放入一个离心管中,加入适量的胶融化液,使凝胶完全溶解。

4. 洗涤:将凝胶溶液加入一个离心柱中,离心柱的管底会有一个膜,可以吸附凝胶中的DNA片段。

然后加入洗涤液,将离心柱离心,去除残留的胶融化液。

5. 洗脱:加入适量的洗脱液,离心柱离心,将DNA从膜上洗脱下来。

6. 检测:取洗脱液进行电泳检测,观察电泳结果是否包含目的片段。

以上是爱思进胶回收试剂盒的使用说明书的大致步骤,由于不同版本的产品可能存在差异,因此建议在使用前仔细阅读说明书或咨询专业人士。

DNA凝胶回收试剂盒产品说明书

DNA凝胶回收试剂盒产品说明书

北京四正柏生物科技有限公司网站: 客服热线:400-7060-959技术支持:DNA 凝胶回收试剂盒产品编号规格MDN3066-5050次MDN3066-100100次保存条件及效期:常温运输和保存,保质期一年。

产品描述:本试剂盒用于从琼脂糖凝胶中或DNA 反应体系中(如PCR 反应)回收DNA 片段。

试剂盒采用可以高效、专一结合DNA 的硅胶膜和独特的溶胶体系,或DNA 反应体系中回收的单链、双链及环状DNA ,回收效率可达50-90%(跟片段大小相关)。

得到的DNA 可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。

产品组分:使用方法:1.凝胶回收:切取含DNA 片段的琼脂糖凝胶(100mg 左右,尽可能多地把多余的胶切除,否则会影响回收效率),放入一干净的1.5ml 塑料离心管(自备)中,用移液枪头捣碎,按重量比为1:3到1:5的比例加入通用溶胶液(100mg 琼脂糖凝胶需要加入300μl-500μl 通用溶胶液)。

PCR 产物回收:直接在PCR 反应管中加3-5倍体积的通用溶胶液,混匀,然后跳过第2步、直接从第3步做起。

如果PCR 反应中使用了石蜡,需要预先去除。

2.50℃保温使胶完全溶化(一般需要5分钟),其间可以振荡数次以促进琼脂糖凝胶的溶化。

如果片段长度在300bp 成份50次包装100次包装通用溶胶液25ml 50ml 吸附柱活化液25ml 50ml 通用洗柱液50ml 100ml 离心吸附柱50套100套DNA 洗脱液10ml 10ml 说明书1份1份以下,建议不要加热,以免DNA变性,影响回收率。

3.在等待期间,活化离心吸附柱。

在离心吸附柱中加入0.5mL吸附柱活化液,套上收集管后室温放置2分钟,然后12,000rpm离心2分钟,倒弃穿透液,再将吸附柱套上收集管后待用。

活化后的离心吸附柱必须在当天使用。

4.在上柱前,在溶化的胶中加入相当于胶块体积1/2的异丙醇(对100mg胶块,加50uL),快速振荡10秒混匀。

PCR 或酶切产物凝胶回收试剂盒说明书

PCR 或酶切产物凝胶回收试剂盒说明书

PCR或酶切产物凝胶回收试剂盒说明书
【试剂盒简介】
本试剂盒将可以特异结合DNA的高性能磁性复合微球与独特的溶液系统有机结合在一起,适合从各种电泳凝胶(TAE或TBE)中提取线性DNA(70 bp-10 Kb),回收率在60-90%以上,本试剂盒还可从凝胶中回收质粒。

纯化后的线性DNA保持完整的生物活性,适用于多种用途,如:连接、体外转录、PCR、测序、Southern 杂交、微注射等分子生物学研究。

本试剂盒结合自动化设备,可以实现DNA琼脂糖凝胶回收的高通量、自动化提取。

【试剂盒组成】
Cat. No. YR03009-01YR03009-02YR03009-03
制备次数 50次100次200次
Lysis-Binding Buffer 20mL40mL120mL
Wash Buffer W1 70mL140mL400mL
Magnetic beads 1mL2mL4mL
Elution Buffer 2.5mL5mL10mL
使用说明书1份1份1份
【贮藏与有效期】
所有试剂室温保存,有效期为一年。

【操作步骤】请与我公司联系。

【经销商】深圳市易瑞生物技术有限公司
Shenzhen Bioeasy Biotechnologies Co., Ltd.
地址:深圳市宝安区西乡街道桃花源科技创新园11号研发中心邮编:518102
电话:**************************传真:*************
电子邮件:********************公司主页:。

Gel Extraction Spin Protocol(中文)

Gel Extraction Spin Protocol(中文)

琼脂糖凝胶回收操作步骤(离心柱型)●快速- - 用<10分钟从琼脂糖凝胶中回收DNA●可靠- - 优化的缓冲液保证了DNA纯度●优质- - 纯化DNA适于任何下游应用●安全- - 无需有机溶剂2.储存条件及稳定性◆自购买之日起,所有BNT胶回收试剂盒组分在22-25C下都能保质至少24个月。

请确保未使用时结合缓冲液瓶盖紧盖。

★如缓冲液中出现沉淀,于37℃温育即可溶解。

3.结合能力■每个HiBind DNA离心柱能结合多至~ 20 μg DNA■纯化次数基于琼脂糖凝胶浓度及DNA片段大小。

一般来说,<100bp的DNA片段或从>2%的琼脂糖凝胶中回收DNA需要附加的结合缓冲液以达到试剂盒预期的使用次数。

(结合缓冲液能单独购买,货号为Binding-200)。

4.开始回收前强烈建议在开始本操作之前熟悉整个操作步骤。

如果所有步骤都严格遵守,BNT胶回收试剂盒是简单、快捷、可靠的回收方法。

5.BNT胶回收操作步骤(离心柱型)使用者自备材料:▼50 - 55C水浴▼至少耐转速10,000g的微量离心管▼无核酸酶的1.5ml离心管▼无菌去离子水(或TE缓冲液)▼无水乙醇(96%-100%乙醇)▼保护性眼罩▼5M醋酸钠pH5.2⑴进行琼脂糖胶/ EB电泳分离不同DNA片段。

可使用所有类型或级别的琼脂糖。

强烈推荐使用新制TAE或TBE缓冲液作为电泳缓冲液。

不要重复使用电泳缓冲液,其pH会升高,降低回收得率。

⑵各条带分离到恰当位置时,用宽的干净锋利手术刀片仔细切下含有目的片段的琼脂糖胶,尽量切除DNA片段周围多余的琼脂糖胶以使凝胶体积最小。

⑶估计凝胶块体积,将其置于1.5ml微量离心管中称重。

假设凝胶密度为1g/ml,凝胶体积如下推算:质量为0.3g的凝胶块体积为0.3ml。

加入与凝胶等体积的结合缓冲液。

将混合物置于50-65℃7min,或直到凝胶完全溶解。

在溶解过程中每2-3min摇振以促进混合。

Geneaid GenepHlowTM Gel PCR 通用型DNA 纯化回收试剂盒说明书

Geneaid GenepHlowTM Gel PCR 通用型DNA 纯化回收试剂盒说明书

完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉,请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书一、从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段1. 凝胶融解将单一的目的DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分,凝胶重量不超過300 mg )放入干净的离心管中. 向胶块中加入500 μl 溶液Gel/PCR, 55-60ºC 水浴放置10-15分钟,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解.注意:凝胶完全融解后应呈现黄色,即可进行后续操作。

如果胶完全融解后溶液的颜色为紫色,请使用10 μl 3M 乙酸钠(pH 5.0)将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作.(溶液Gel/PCR 中含有pH 指示剂,当pH≤7.5时溶液的颜色为黄色,此时DNA 才能够有效的与膜结合,当pH 值偏高时溶液的颜色变为紫色,需要进行调整.)2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中. 待溶液温度降至室温后,将所得溶液加入吸附柱DFH中,以14-16,000 ×g 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中.3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入400 μl 漂洗液W1,以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中. 向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),静置1分钟后以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中. 以14-16,000 ×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除.注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切,PCR 等)实验.4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ,(如果回收的目的片段>5 kb ,则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热),室温放置2分钟. 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液.注意:1. 为了增加DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2分钟,以14-16,000×g 离心2 分钟,将DNA 溶液收集到离心管中. 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液,需保证其pH 值≥8.0,pH 值低于8.0会降低洗脱效率.Instruction Manual Download完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉,请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书二、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段 (回收DNA进行测序实验)1. 凝胶融解 将单一的目的DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分,凝胶重量不超過300 mg )放入干净的离心管中. 向胶块中加入500 μl 溶液Gel/PCR, 55-60ºC 水浴放置10-15分钟,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解.注意:凝胶完全融解后应呈现黄色,即可进行后续操作.如果胶完全融解后溶液的颜色为紫色,请使用10 μl 3M 乙酸钠(pH 5.0)将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作.(溶液Gel/PCR 中含有pH 指示剂,当pH≤7.5时溶液的颜色为黄色,此时DNA 才能够有效的与膜结合,当pH 值偏高时溶液的颜色变为紫色,需要进行调整.)2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中. 待溶液温度降至室温后,将所得溶液加入吸附柱DFH 中,以14-16,000 ×g 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中.3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),静置1分钟后以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中. 重复向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中,以14-16,000 ×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除.注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验.4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ,(如果回收的目的片段>5 kb ,则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热),室温放置2分钟. 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液.注意:1. 为了增加DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2分钟,以14-16,000×g 离心2 分钟,将DNA 溶液收集到离心管中. 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液,需保证其pH 值≥8.0,pH 值低于8.0会降低洗脱效率.Instruction Manual Download完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉,请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书三、从PCR 反应液或酶切反应液中回收DNA 1. 样品前处理取20-100 μl PCR 反应液或酶切反应液加入1.5 ml 离心管中,向其中加入五倍体积溶液Gel/PCR ,充分混匀(无需去除石蜡油或矿物油). 注意: 如PCR 反应体系为50 μl (不包括石蜡油体积),则加入250 μl 溶液Gel/PCR . 樣品混匀后溶液应呈现黄色,即可进行后续操作. 如果溶液的颜色为紫色,请加入10 μl 3M 乙酸钠(pH 5.0)将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作. 2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中. 将上一步所得溶液加入吸附柱DFH 中,以14-16,000 ×g 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中. 注意:吸附柱容积为750 μl ,若样品体积大于750 μl 可分批加入.3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),静置1分钟后以14-16,000×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中. 以14-16,000×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除. 注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切,PCR 等)实验.4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ,(如果回收的目的片段>5 kb ,则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热),室温放置2分钟. 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液.注意:1. 为了增加DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2分钟,以14-16,000×g 离心2 分钟,将DNA 溶液收集到离心管中. 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液,需保证其pH 值≥8.0,pH 值低于8.0会降低洗脱效率.Instruction Manual Download。

DNA纯化回收试剂盒

DNA纯化回收试剂盒

DNA纯化回收试剂盒一、试剂盒内容溶液PC 25ml 100ml平衡液BL 30ml 120ml漂洗液PW 15ml 50ml洗脱缓冲液EB 15ml 30ml吸附柱CB2 50个200个收集管(2ml)50个200个说明书1份1份二、操作步骤(一)、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段1、柱平衡步骤:向吸附柱CB2中(吸附柱放入收集管)加入500ul 平衡液BL,12000rpm(~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。

(请使用当天处理过的柱子)2、将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分)放入赶紧的离心管中,称取重量。

3、向胶块中加入等倍体积溶液PC(如果凝胶重为0.1g,其体积可视为100ul,则加入100ulPC溶液),50℃水浴放置10分钟左右,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。

(若胶块的体积过大,可事先将胶块切成碎块)4、将上一步所得溶液加入到一个吸附柱CB2中(吸附柱放入收集管中),12000rpm(~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CB2放回收集管中。

5、向吸附柱CB2中加入600ul漂洗液PW,12000rpm(~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CB2放回收集管中。

6、重复步骤5.7、将吸附柱放入收集管中,12000rpm(~13400×g)离心2分钟,尽量出去漂洗液。

将吸附柱置于室温放置数分钟,彻底晾干。

8、将吸附柱CB2放入一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量的洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟。

12000rpm(~13400×g)离心2分钟,收集DNA溶液。

(二)、从PCR反应液或酶切反应液中回收DNA1、柱平衡步骤:向吸附柱CB2中(吸附柱放入收集管)加入500ul 平衡液BL,12000rpm(~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。

凝胶DNA回收试剂盒说明书

凝胶DNA回收试剂盒说明书

凝胶DNA 回收试剂盒说明书产品组成凝胶DNA回收试剂盒Cat. No. 5次样品200100550次制备2001050250次制备2001250核酸纯化柱2 ml离心管1.5 ml离心管Buffer GBuffer WSBuffer WG(浓缩液)Buffer TE说明书5个5个5个3 ml3 ml2.4 ml0.5 ml1份50个50个50个30 ml30 ml24 ml5 ml1份50个×550个×550个×5150 ml150 ml72 ml ×225 ml1份产品储存与有效期产品如果储存于室温(15~25℃),可在两年内保持使用性能无明显变化;如果将产品储存于2~8℃,可延长产品的有效期至两年以上。

技术支持杭州新景生物试剂开发有限公司研发部:e-mail: *******************,电话:400-0099-857。

产品介绍本试剂盒采用了柱纯化的原理,适合从多至400mg琼脂糖凝胶中回收DNA (70bp-10kb),回收率为70~85%。

溶胶试剂为不含碘化钠的温和溶解液,确保回收的DNA 保持片断完整性和高生物学活性,回收的DNA可直接用于连接、体外转录、PCR扩增、测序、微注射等分子生物学实验。

用户需自备的试剂与物品1.无水乙醇2.1.5ml离心管、移液器及吸头3.一次性手套、纸巾及防护用品4.台式小量离心机(可配离心1.5ml离心管和2ml离心管的转子)使用前准备1)如果离心机有制冷功能,请将温度设置到25℃。

2)根据试剂瓶标签上的指示在Buffer WG中加入无水乙醇,并在标签的方框中打勾作好“乙醇已加”的标记。

3)将水浴锅的温度设置为50°C。

4)可能需要使用3 M 醋酸钠(pH 5.0)及异丙醇。

操作步骤1)在紫外灯下将含有DNA片段的琼脂糖凝胶切下,转移到一个自备的1.5 ml 离心管中。

* 尽量减少多余的凝胶体积,可缩短溶胶时间。

takara 胶回收试剂盒说明书

takara 胶回收试剂盒说明书

操作流程1. 使用TAE缓冲液或TBE缓冲液制作琼脂糖凝胶,然后对目的DNA进行琼脂糖凝胶电泳。

2. 在紫外灯下切出含有目的DNA的琼脂糖凝胶,用纸巾吸尽凝胶表面的液体。

此时应注意尽量切除不含目的DNA部分的凝胶,尽量减小凝胶体积,提高DNA回收率。

胶块超过300 mg时,请使用多个Column进行回收,否则严重影响收率。

注)切胶时请注意不要将DNA 长时间暴露于紫外灯下,以防止DNA损伤。

3. 切碎胶块。

胶块切碎后可以加快操作步骤6的胶块溶解时间,提高DNA回收率。

4. 称量胶块重量,计算胶块体积。

计算胶块体积时,以1 mg=1 μl 进行计算。

5. 向胶块中加入胶块溶解液Buffer GM,Buffer GM的加量如下表:凝胶浓度Buffer GM使用量1.0%3个凝胶体积量1.0%~1.5%4个凝胶体积量1.5%~2.0%5个凝胶体积量6. 均匀混合后室温15-25℃溶解胶块(胶浓度较大或比较难溶时可以在37℃加热)。

此时应间断振荡混合,使胶块充分溶解(约5~10分钟)。

7. 当凝胶完全溶解后,观察溶胶液的颜色,如果溶胶液颜色由黄色变为橙色或粉色,向上述胶块溶解液中加入3 M醋酸钠溶液(pH5.2)10 μl,均匀混合至溶液恢复黄色。

当分离小于400 bp的DNA片段时,应在此溶液中再加入终浓度为20%的异丙醇。

8. 将试剂盒中的Spin Column安置于Collection Tube上。

9. 将上述操作步骤7的溶液转移至Spin Column中,12,000 rpm离心1分钟,弃滤液。

注)如将滤液再加入Spin Column中离心一次,可以提高DNA的回收率。

10. 将700 μl 的Buffer WB加入Spin Column中,室温12,000 rpm离心30秒钟,弃滤液。

注)请确认Buffer WB中已经加入了指定体积的100%乙醇。

11. 重复操作步骤10。

12. 将Spin Column安置于Collection Tube上,室温12,000 rpm离心1分钟。

碧云天DNA凝胶回收试剂盒D0056说明书

碧云天DNA凝胶回收试剂盒D0056说明书

DNA 凝胶回收试剂盒产品编号 产品名称包装 D0056DNA 凝胶回收试剂盒50次产品简介:碧云天的DNA 凝胶回收试剂盒(DNA Gel Extraction Kit),是一种用于从DNA 琼脂糖凝胶中回收目的DNA 的试剂盒。

本试剂盒采用了融胶液,可以使琼脂糖凝胶完全融化。

同时采用了一种新型的离子交换柱,在特定条件下,使DNA 能在离心过柱的瞬间,结合到DNA 纯化柱上,在一定条件下又能将DNA 充分洗脱,从而实现DNA 的快速纯化。

无需酚氯仿抽提,无需酒精沉淀,通常12个样品只需不足20分钟即可完成。

每个DNA 纯化柱可以结合的DNA 量的上限约为15微克。

适用于从DNA 琼脂糖凝胶(agarose gel)电泳后割取的含有目的DNA 的凝胶块中快速提取DNA 。

该目的DNA 通常为PCR 产物、质粒DNA 酶切出来的DNA 片段、超螺旋质粒DNA 单酶切后的线性化产物和DNA 连接产物等。

本试剂盒适用于纯化100bp-10kb DNA 。

长至30个碱基的引物均可被完全去除。

DNA 回收效率通常为60-90%。

接近100bp 或10kb 的DNA 片段回收效率要略低一些,大于10kb 的DNA 回收效率迅速下降。

另外如果样品中DNA 含量特别低也会导致回收效率下降。

本试剂盒纯化所得DNA 可直接用于酶切,连接,转化细菌,测序,PCR ,杂交等后续操作。

每个试剂盒足够用于50个平均重量不超过400微克的凝胶样品。

包装清单:产品编号 产品名称 包装 D0056-1 溶液I (融胶液) 20mlD0056-2 溶液II (洗涤液) 26ml (第一次使用前加入39ml 无水乙醇)D0056-3 溶液III (洗脱液)3mlD0056-4DNA 纯化柱及废液收集管50套 —说明书1份保存条件:室温保存,一年有效。

注意事项:第一次使用前在溶液II (洗涤液)中加入39ml 无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。

琼脂糖凝胶回收纯化DNA标准操作规程

琼脂糖凝胶回收纯化DNA标准操作规程

琼脂糖凝胶回收纯化DNA标准操作规程(编号:013)
1、目的及适用范围
该SOP用于分离纯化目的DNA片段。

2、主要仪器及试剂
台式离心机、微量移液器、binding buffer、wash buffer、elution buffer,各试剂均来自胶回收提取试剂盒。

3、实验步骤
3.1 琼脂糖电泳,将特异电泳带用刀切下放入到离心管中,称琼脂糖带的重量;
3.2 按照每100mg加400µL的量加入binding buffer,放入到离心管振荡器中,45℃~55℃温育振荡,直到所有的琼脂糖都溶解(大概要5min);
3.3 取出纯化柱,将上述溶解液转移至柱中,室温下放置2min,8000rpm 离心1min,弃离心管中的液体,将纯化柱放回离心管中;
3.4 加500µL的wash buffer至柱中,8000rpm 离心1min,弃管中的溶液;
3.5 重复操作4步的操作1次,最后将纯化柱放入EP管中10000rpm离心30s,除去残余的wash buffer;
3.6 将纯化柱放入一个新的离心管。

加30~40µL H2O或者elution buffer至纯化柱膜的中央,在37℃或50℃下放置2min,10000rpm离心1min洗脱DNA,将离心管中的DNA溶液放在-20℃保存。

4、注意事项
若想要不电泳而直接纯化DNA,只需要在第2步中按100µL液量加400µL的binding buffer,其余的步骤不变。

30。

凝胶DNA回收试剂盒使用说明

凝胶DNA回收试剂盒使用说明

DNA凝胶回收试剂盒50TCat#:GV-GX-50本试剂盒可从各种浓度琼脂糖凝胶中回收DNA片段,不含盐、蛋白质、RNA等杂质。

500bp以上片段,回收率80%以上,200bp~500bp回收率70%以上,100bp~200bp回收率60%。

可回收单链、双链DNA 片段以及环状质粒DNA。

本试剂盒采用一种独特的平衡液处理吸附膜,该试剂能够激活硅基质膜,改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性,专一吸附DNA的作用,同时还可消除高温/潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。

1试剂盒组成、储存、稳定性成分规格注意事项Buffer GA60mlBuffer BL12mlWash buffer13ml使用前加入52ml无水乙醇Elution4ml离心柱50个单个最大吸附量20μg1.5ml离心管50个说明书1份Buffer GA:溶胶液。

室温密闭贮存。

若出现沉淀,应于65℃温浴溶解并冷却至室温后再使用。

Buffer BL:平衡液,平衡液的加入能够激活硅基质膜,改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性,专一吸附DNA的作用,同时还可消除高温/潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。

Wash buffer:去盐液。

使用前,第一次使用前根据瓶上指定的体积加入无水乙醇,混合均匀,室温密闭贮存。

Elution:10mM Tris-HCl,pH8.0。

室温密闭贮存。

二、注意事项1:将洗脱液或双蒸水加热至65℃,有利于提高洗脱效率2:DNA呈酸性,建议在10mM Tris-HCl,pH8.0洗脱液中保存3:用平衡液处理过的柱子最好当天使用,放置时间过长会影响效果4:在步骤1中,将凝胶切成细小的碎块可大大缩短溶胶时间(线型DNA长时间暴露在高温条件下易水解),从而提高回收率。

勿将含有DNA的凝胶长时间暴露在紫外灯下,减少紫外线对DNA造成的损伤。

三、实验前试剂准备Wash buffer第一次使用前加入52ml无水乙醇。

琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书

琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书

琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书如下:琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒是用于从混合物中纯化和回收琼脂糖凝胶的试剂盒。

下面是具体的操作方法及步骤说明:1. 准备工作:a. 将琼脂糖凝胶样品放置于冷室中,在4℃下保存。

b. 准备所需的琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒及其附件。

2. 细胞破碎:a. 将琼脂糖凝胶样品加入细胞破碎试剂,并将细胞破碎试剂与样品混合均匀。

b. 在室温下,将样品放置于振荡器中,并在高速摇床上以600 rpm摇动60分钟。

3. 退火:a. 将样品加热至70℃,并在水浴保温器中保温5分钟。

b. 然后快速将样品冷却至室温。

4. 离心:a. 将样品离心15分钟,以去除细胞碎片和残留杂质。

b. 将上清转移到干净的离心管中,并避免沉淀。

5. 琼脂糖凝胶回收:a. 向离心管中加入等体积的琼脂糖凝胶凝胶缓冲液,并将样品与凝胶缓冲液混合均匀。

b. 将混合物加热至65℃,并保温10分钟。

c. 快速冷却混合物至室温,并离心10分钟,从而使琼脂糖凝胶沉淀。

d. 将上清倒掉,并保留沉淀。

6. 洗涤:a. 向琼脂糖凝胶沉淀中加入1 mL 75%乙醇,然后轻轻颠倒离心管,使乙醇与琼脂糖凝胶充分混合。

b. 离心琼脂糖凝胶沉淀和乙醇混合物10分钟,并将上清倒掉。

c. 重复上述步骤一次。

7. 干燥:a. 向琼脂糖凝胶沉淀中加入1 mL无水乙醇,然后快速颠倒离心管,使无水乙醇与琼脂糖凝胶充分混合。

b. 离心琼脂糖凝胶沉淀和无水乙醇混合物10分钟,并将上清倒掉。

c. 重复上述步骤一次。

8. 最终回收:a. 将琼脂糖凝胶沉淀放置在干燥器中,将温度设置为50℃,并将它们完全干燥。

b. 最后,将琼脂糖凝胶沉淀转移到干净的容器中,并储存于冷室中。

请注意,以上操作步骤仅供参考。

在使用试剂盒之前,务必阅读和按照试剂盒的详细说明书执行实验。

琼脂糖凝胶回收实验操作

琼脂糖凝胶回收实验操作

琼脂糖凝胶回收实验操作及注意事项操作方案1.柱平衡:向吸附柱CA2中(吸附柱放入收集管中)加入500μl平衡液BL,1200r,1min,倒废液,将吸附柱重新放回吸附管中。

2 切胶:配制琼脂糖EB凝胶,电泳以分离DNA片段。

推荐使用新鲜的TAE电泳缓冲液.不要重复使用电泳缓冲液,旧的电泳缓冲液PH会增加而降低DNA的回收产量;电泳足够时间后,在紫外灯下小心地把所需的DNA片段切下来.并尽量去除多余的凝胶.注意:DNA在紫外灯下的曝光的时间不要超过30秒,同时在紫外灯下操作的时候一定要戴保护眼镜.3.加等体积PN,50℃水浴:称取空离心管的重量,切下带目的片段的凝胶装在1.5ml离心管中并称其重量,求出凝胶块的重量,近似地确定其体积.一般情况下,凝胶的密度为1g/ml,于是凝胶的体积与重量的关系可按下面换算:凝胶薄片的重量为0.2g 则其体积为0.2ml;加入等倍凝胶体积的PN把混合物置于50℃水浴中温浴至凝胶完全融化,其间每隔2-3分钟混匀一次;小于300bp的小片段可完全溶胶后再加入1/2胶块体积的异丙醇以提高回收率;胶完全全溶后放置至室温在上柱,室温时结合DNA能力较强。

4.上柱:转移700μl的DNA-琼脂糖溶液到一个吸附柱CA2中,,并把柱子装在一个干净的2ml收集管内,室温下放置2min,12000rpm离心1min,弃去液体.一个收集柱最多可容纳700μl的溶液,如果DNA-琼脂糖混合物的体积大于700μl,可先转移700μl溶液至柱子,离心完后,将余下的溶液继续加上柱子上.但是每一个柱子最多可以结合25~30μg DNA.如果预期产量较大,则把样品分别加到合适数目的柱中.5. 将柱子重新套回收集管中,加600μl PW 柱子中;室温下,12000rpm离心1分钟,弃废液;这一步相当关键,不要忽略此步.6.重复步骤57.将空柱子重新套回收集管中,12000rpm离心1min以甩干柱基质残余的液体.这步可以去除柱子基质上残余的乙醇,不要省略此步―――对得到好的DNA产量是十分重要的.8. 把柱子装在一个干净的1.5ml离心管上,加入30~50μl洗脱液或灭菌水上柱子膜上,室温放置2min,12000rpm离心1分钟,离心管中的溶液就是纯化的DNA产物,保存于-20度.如果再洗脱一次的话可以把残余的DNA洗脱出来,不过那样的浓度就会较低.DNA的产量及质量:把纯化产物的样品稀释一定的倍数后,分别在260nm和280nm下测其光吸收值,回收得到的DNA的浓度可按以下公式来计算: DNA浓度=光吸收260×50×稀释倍数μg/ml长度大于500bp的片段通常能纯化得到80%的产量. 而50bp~500bp的带则可达到55%~80%的回收率.(光吸收260/光吸收280)的比率是核酸纯度的一个标记.如果此值1.8,则意味着核酸的纯度>90%.另一方面,如果纯化产物的产量较低时,可以用琼脂糖EB电泳估算产物的浓度.。

Viagene Biotech DNA 凝胶回收试剂盒 说明书

Viagene Biotech DNA 凝胶回收试剂盒 说明书

宁波保税区西区创业大道7号2C-1,315800, 电话:+86-574-86822306 传真:+86-574-26893101, sales@ DNA 凝胶回收试剂盒使用说明书产品编号产品名称 包装 DNAG001 DNA 凝胶回收试剂盒50×包装清单Solution I (溶液I )16 ml Solution Ⅱ(溶液Ⅱ)0.6ml Wash Solution (清洗液)27.5ml Elution Buffer (洗脱液)1ml Instruction (说明书) 1份本试剂盒适用于从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段,而不必采用低熔点的琼脂糖。

回收的DNA 片段纯度高,可以直接应用于DNA 克隆、各种酶促反应等实验。

操作说明:一,回收DNA 片段1. 将空小离心管称重。

将回收的带DNA 片段的凝胶放入其中、再次称重,确定凝胶净重。

2. 将离心管中的凝胶捣碎以助于凝胶溶解。

按胶的重量加入三倍体积的Solution I (1mg 凝胶加3μl solution I )。

3. 加入10μl 的Solution Ⅱ。

4. 55℃恒温加热直到凝胶完全融化(5-15分钟),每隔2-3分钟需将管内混悬液混匀一次。

5. 在室温、6000-13000rpm 离心1 分钟,弃上清液。

6. 加入500μl Wash Solution ,6000-13000rpm 离心1分钟,弃上清液。

7. 重复步骤6一次。

8. 将有白色沉淀的离心管再离心1分钟后,小心去除残留的液体。

9. 打开离心管盖子、室温干燥10分钟。

10. 加入10-20μl 的Elution Buffer ,37℃孵育5分钟,离心回收DNA 样品。

或者按下面操作进行酶连接。

二,连接酶连接DNA 片段1. 加入12.5μl 的Elution Buffer 。

振动样品管使沉淀颗粒完全悬浮。

2. 加1.5μl 的10× DNA 连接酶缓冲液,混匀。

琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

琼脂糖凝胶DNA 回收试剂盒说明书修订日期说明书修订日期::2015.07.13Cat Number :KGA3050/KGA30100 Store at RT/ 4for 24 months ℃For Research Use Only (科研专用)一、 试剂盒说明凯基琼脂糖凝胶DNA 回收试剂盒采用机械切割的硅胶膜吸附材料作为离心吸附柱,在优化的指定缓冲液提供的条件下,可选择性结合回收目标DNA ,去除污染杂质;溶胶液的溶胶效率高,并含特有成分消除硼酸对吸附的干扰,适用于TAE 和TBE 缓冲液;回收40bp-50kb 片段效果佳。

回收的产物可用于PCR 、酶切、连接反应、测序等工作。

产品特点与经典的凝胶回收、纯化方法相比较,本试剂盒具有以下特点:·快速――在≤120min 内就可以从凝胶中回收DNA ; ·可靠――最适的缓冲液保证了高纯度的DNA ; ·安全――这是无有机物的抽提;·质量――纯化得的DNA 可做任何下游应用。

二、 试剂盒组份组 份 KGA3050 50T KGA30100 100T 储存 离心吸附柱50个 100个 RT 溶胶液 25ml 50 ml RT 漂洗液 50ml 100ml RT 洗脱液 5ml 10ml RT pH 调节剂0.6ml1.2 mlRT三、 操作步骤操作步骤((所有离心步骤都在室温下进行所有离心步骤都在室温下进行))1. 在琼脂糖凝胶-EB 电泳后,在紫外灯上小心的把所需的DNA 片段切下来,尽量去除多余的凝胶并尽量少带电泳缓冲液,称重,装入1.5ml 离心管,用Tip 头捣碎。

2. 按照凝胶的重量可近似地确定其体积。

假设其密度为1g /ml ,于是凝胶的体积便可通过如下方法得到:凝胶薄片的重量为0.2g 则其体积为0.2ml 。

3.加入3倍凝胶体积的溶胶液于50℃保温10min ,或直至凝胶完全融化。

期间可振荡促融。

琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书

琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书

杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://AidQuick Gel Extraction Kit琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒目录号:DR01❖适用范围:适用于琼脂糖凝胶DNA回收❖试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存50次(DR0101)100次(DR0102)200次(DR0103)平衡液室温5ml 10ml 20ml 溶胶液DD 室温50 ml 50ml×2 200 ml漂洗液WB 室温15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温10 ml 15 ml 15 ml吸附柱EC 室温50个100个200个收集管(2ml)室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。

储存事项:1.所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。

使用前应该恢复到室温。

2.储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。

3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

❖产品介绍:在高离序盐存在的情况下,DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。

❖产品特点:1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。

克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。

2.使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。

3.溶胶液加酚红调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果,大大提高回收效率。

4.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性,即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。

凝胶DNA回收试剂盒使用说明

凝胶DNA回收试剂盒使用说明

凝胶DNA回收试剂盒使用说明一、试剂盒组成1.碱性ELUTION缓冲液:用于回收DNA片段。

2.DNA绑定胶柱:用于吸附DNA片段。

3.洗涤缓冲液:用于去除琼脂糖凝胶残渣和其他杂质。

4.电子式试剂盒设备:用于快速洗脱DNA片段。

二、凝胶DNA回收试剂盒使用步骤1.准备工作:a.将碱性ELUTION缓冲液加热至65℃,并保存在试剂盒中。

b.手套和面具是使用过程中必需的,以确保实验环境的干净。

c.严格遵守实验室的安全操作规程。

2.凝胶切割:a. 切割需回收的DNA片段:将琼脂糖凝胶切割为片段大小约为50-5000 bp的目标DNA。

b.将切割好的琼脂糖凝胶片段放入微量离心管中,注意不要弄混不同大小的DNA片段。

c.记录每个DNA片段的位置和大小。

3.DNA回收:a.将切割好的琼脂糖凝胶片段放入DNA绑定胶柱中。

b.将绑定胶柱放入收集管中,通过离心将DNA片段吸附到胶柱上。

c.倒掉废液,并使用洗涤缓冲液洗脱胶柱上的残驻琼脂糖凝胶和其他杂质。

重复此步骤1-2次以确保彻底洗脱。

4.DNA洗脱:a.将洗柱放回空的收集管中。

b.加入预热的碱性ELUTION缓冲液(65℃),封闭试管盖,并放入电子式试剂盒设备中。

c.按照设备操作说明进行启动,并设置相应的洗脱温度和时间。

d.在洗脱完成后,将洗脱液转移到新的离心管中。

可以使用适当的方法(如乙醇沉淀或其他纯化方法)进一步纯化DNA。

5.质量检测:a.使用电泳进行质量检测,以确认回收的DNA片段大小和纯度。

b.如果需要,可以定量将DNA溶液保存在冰箱中以备后续实验使用。

三、注意事项1.使用前确保熟悉试剂盒的组成和使用步骤。

2.使用过程中务必佩戴手套和面具,确保操作环境的洁净。

3.严格按照试剂盒的说明进行操作,并遵循实验室的安全操作规程。

4.需要注意的是,琼脂糖凝胶切割和回收过程极易受到外源DNA污染,因此要确保实验环境的洁净,并尽量避免不必要的接触。

5.回收的DNA片段应尽快进行下一步的实验处理,以避免DNA降解和污染。

02 琼脂糖凝胶回收DNA片段及检测

02 琼脂糖凝胶回收DNA片段及检测
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
3.操作步骤 3.操作步骤
1.在长波紫外灯下,用干净刀片将所需回收 1.在长波紫外灯下,用干净刀片将所需回收 的DNA条带切下,尽量切除不含DNA的凝 DNA条带切下,尽量切除不含DNA的凝 胶,得到凝胶体积越小越好。 2.将切下含有DNA条带凝胶放入1.5ml离心 2.将切下含有DNA条带凝胶放入1.5ml离心 管,称重。
6.将上一步所得溶液加入吸附柱AC中(吸 6.将上一步所得溶液加入吸附柱AC中(吸 附柱放入收集管中),12, 附柱放入收集管中),12,000 rpm离心30-60 rpm离心30秒,倒掉收集管中的废液。
注意:如果总体积超过750µ 注意:如果总体积超过750µl,可分两次将溶液加入同一个吸 附柱AC中 附柱AC中。
1.试剂盒组成 1.试剂盒组成
溶胶/结合液DB 溶胶/结合液DB 漂洗液WB 漂洗液WB 洗脱缓冲液EB 洗脱缓冲液EB 3M醋酸钠(PH5.2) 3M醋酸钠(PH5.2) 异丙醇 吸附柱 收集管(2ml) 收集管(2ml)
2.原理简介 2.原理简介
在高盐情况下,DNA片断选择性地吸附于离心 高盐情况下,DNA片断选择性地吸附于离心 柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗 -离心的步骤去除杂质(引物、核苷酸、蛋白 酶等),最后低盐,高PH值 酶等),最后低盐,高PH值的洗脱缓冲液将 纯净DNA从硅基质膜上洗脱。 纯净DNA从硅基质膜上洗脱。
10. 取出吸附柱AC,放入一个干净的离心管 取出吸附柱AC,放入一个干净的离心管 中,在吸附膜的中间部位加30µ 中,在吸附膜的中间部位加30µl洗脱缓冲液 EB(洗脱缓冲液事先在65-70℃水浴中加热 EB(洗脱缓冲液事先在65-70℃ 效果更好),室温放置2分钟,12,000rpm离 效果更好),室温放置2分钟,12,000rpm离 心1分钟。

AxyPrep DNA 凝胶回收试剂盒 说明书

AxyPrep DNA 凝胶回收试剂盒 说明书

AxyPrep DNA凝胶回收试剂盒本试剂盒适合从各种琼脂糖凝胶中提取多至8 μg DNA(70bp-10Kb),回收率为60-85%。

琼脂糖凝胶在温和的缓冲液(DE-A溶液)中溶解,其中的保护剂能防止线状DNA在高温下降解,然后在DE-B溶液的作用下使DNA选择性结合到膜上。

纯化的DNA纯度高,并保持片断完整性和高生物活性,可直接用于连接、体外转录、PCR扩增、测序、微注射等分子生物学实验。

一、试剂盒组成、贮存、稳定性说明书,耗材:DNA制备管、2 ml离心管、1.5 ml离心管。

Buffer DE-A:凝胶熔化剂,含DNA保护剂,防止DNA在高温下降解。

室温密闭贮存。

Buffer DE-B:结合液(促使大于70 bp的DNA片段选择性结合到DNA制备膜上)。

室温密闭贮存。

若出现沉淀,应于70°C温育溶解并冷却至室温后再使用。

Buffer W1:洗涤液,室温密闭贮存。

Buffer W2 concentrate:去盐液,使用前,根据瓶上数量加入乙醇,混合均匀,室温密闭贮存。

可用100%无水乙醇或95%乙醇。

Eluent:2.5 mM Tris-HCl,pH 8.5,室温密闭贮存。

二、注意事项1. 在步骤1中,将凝胶切成细小的碎块可大大缩短凝胶熔化时间(线型DNA长时间暴露在高温条件下易于水解),从而提高回收率。

勿将含DNA的凝胶长时间地暴露在紫外灯下,减少紫外线对DNA 造成的损伤。

2. 在步骤2中凝胶必须完全熔化,否则将严重影响DNA回收率。

3. 将Eluent或水加热至65°C,有利于提高洗脱效率。

4. DNA分子呈酸性,建议在2.5 mM Tris-HCl,pH 8.5洗脱液中保存。

三、实验准备1. 第一次使用前,Buffer W2 concentrate中加入指定体积的无水乙醇。

2. 准备无核酸和核酸酶污染的Tip头、离心管。

3. 准备75°C水浴。

四、操作步骤1. 在紫外灯下切下含有目的DNA的琼脂糖凝胶,用纸巾吸尽凝胶表面液体并切碎。

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产品介绍:
在高离序盐存在的情况下,DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅 基质膜上,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将引 物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲 液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点:
1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附 膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试 剂盒膜质量不稳定的弊端。
荡一次帮助加速溶解。
5. 可选,一般不需要:每100mg最初的凝胶重量加入150μl的异丙 醇,震荡混匀。
有时候加入异丙醇可以提高回收率,加入后不要离心。回收大于 4Kb的片段时,不加入异丙醇,加入有时反而可能降低回收效 率。
平衡液预处理吸附柱: 使用平衡液预处理硅胶膜吸附柱为必做步骤,具体方法参见前文“关 于平衡液的使用”
3. 回收纯化的DNA片段一般在100bp到40kb之间,过长、过短片段 的回收效率迅速降低。
4. 回收DNA的量和起始DNA的量、洗脱体积、DNA片断大小有 关。一般1-15μg, 100bp-5kb的DNA片段,回收率可高达85%。
5. 切胶回收时,紫外灯观察对DNA片段有损坏作用,应该尽可能 使用能量低的长波紫外线,并且尽可能的缩短紫外线下处理的 时间。
1. 在长波紫外灯下,用干净刀片将所需回收的DNA条带切下,尽 量切除不含DNA的凝胶,得到凝胶体积越小越好。
2. 将切下的含有DNA条带凝胶放入1.5ml离心管,称重。 先称一个空1.5ml离心管重量,然后放入凝胶块后再称一次,两次 重量相减,得到凝胶的重量。
3. 加3倍体积溶胶液DD。 如果凝胶重为100mg,其体积可视为100μl,则加入300μl溶胶液。 如果凝胶浓度大于2%,应加入6倍体积溶胶液。 4. 56℃水浴放置10分钟(或直至胶完全溶解)。每2-3分钟涡旋震
◆ 目录号 RP02

◆ 使用手册
◆ 实验室使用,仅 用于体外
◆ TRIpure Reagent 抽提指南
◆ 目录号 RP02
◆ 使用手册
◆ 实验室使用,仅 用于体外
试剂 盒组 成
平衡液
保 50次
100次
200次
存 (DR0101) (DR0102) (DR0103)
室 5ml

10ml
20ml
溶胶液 室
7. 加入600μl漂洗液WB (请先检查是否已加入无水乙醇!), 12,000rpm 离心30秒,弃掉废液。
8. 加入600μl漂洗液WB,12,000rpm离心30秒,弃掉废液。 9. 将吸附柱EC放回空收集管中,12,000rpm离心2分钟,尽量除去
漂洗液,以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
2. 使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不 抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3. 溶胶液加酚红调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH 值变化从而达到最佳结合效果,大大提高回收效率。
4. 改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性,即使样品变 化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
AidQuick Gel Extraction Kit 琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒
目录号:DR01 适用范围:
适用于琼脂糖凝胶DNA回收
试剂盒组成、储存、稳定性:
◆ TRIpure Reagent 抽提指南
◆ 目录号 RP02
◆ 使用手册
◆ 实验室使用,仅 用于体外
◆ TRIpure Reagent 抽提指南
储存事项:
1. 所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉 淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢 复澄清。使用前应该恢复到室温。
2. 储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效 果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。
3. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各 溶液使用后应及时盖紧盖子。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA, 不影响下游酶切、连接等反 应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5, pH过低影响 洗脱效率。用水洗脱,DNA片段应该保存在-20℃。DNA片段 如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl, 1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使 用时可以适当稀释。
DD
温 50 ml
50ml×2
200 ml
漂洗液 室 15 ml
25 ml 50 ml
WB
温 第一次使用前按说明加指定量乙醇
洗脱缓 室 10 ml
冲液EB 温
15 ml
15 ml
吸附柱 室
50个
EC

100个
200个
收集管 室 50个
(2ml) 温
100个
200个
本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
关于平衡液的使用
1. 介绍:核酸吸附硅胶膜柱子长期放置过程中会同空气中的电荷/ 尘埃发生反应而影响其核酸的结合能力。硅胶柱经平衡液预处 理后可大大减少柱子中硅胶膜的憎水基团,提高核酸的结合能 力。从而提高硅胶柱子回收效率或者产量。平衡液是强碱性溶 液,若不小心碰到,请用大量自来水清洗。用完后需盖紧瓶 盖,以免接触空气。室温保存。在保存过程中可能有沉淀生 成,请加热至37℃使沉淀完全消失。
2. 使用方法:取一个新的硅胶膜吸附柱子装在收集管中,吸取 100μl的平衡液至柱子中。13000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中 废液,将吸附柱子重新放回收集管。此时平衡液预处理柱子完 毕。接后续的操作步骤。
操作步骤
提示:第一次使用前请先在漂洗液WB中加入指定量无水乙醇,加 入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
6. 将上一步所得溶液加入吸附柱EC中(吸附柱放入收集管中), 室温放置1分钟,12,000rpm离心30-60秒,倒掉收集管中的废 液。
如果总体积超过750μl,可分两次将溶液加入同一个吸附柱EC 中。 过滤下的溶胶液和收集管内残存的强碱性平衡液混合后,溶胶液 可能会从黄色变成橘红甚至紫色,此为酚红PH指示剂碱性条件下 的正常颜色变化。
10. 取出吸附柱EC,放入一个干净的离心管中,在吸附膜的中间部 位加50μl洗脱缓冲液EB(洗脱缓冲液事先在 65-70℃水浴中加热 效果更好),室温放置2分钟,12,000rpm 离心1分钟。如果需要 较多量DNA,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,离心1分钟。
洗脱体积越大,洗脱效率越高,如果需要DNA浓度较高,可以适 当减少洗脱体积, 但是最小体积不应少于25μl,体积过小降低 DNA洗脱效率,减少产量。
5. 快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂,也不需要 乙醇沉淀。
注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的 传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 溶胶液中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染 皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水 或者生理盐水冲洗。
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