桉油栓对豚鼠的皮肤致敏性试验
桉油溶液剂的皮肤毒理学和眼睛、口腔粘膜刺激性实验研究
究 。客 观评 价 其 可能存 在 的毒性 ，为 开发 桉 油外 用 制剂 奠 定 实验
表 １ 皮 肤 刺 激 反 应 评 分
基 础 。
Ｉｒｒｉｔａｔｉｏｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ
Ｓｃｏｒｅ
１ 材 料 与方 法 １．１ 实验 材料 １．１．１ 药 物
桉 油 （江 西福 达 香 料 化工 有 限公 司 ），溶 剂 （药 典 级 ，ＣＡＳ 号 ：９００５—６５—６）。桉 油 溶液 剂 ， 由桉 油 加 溶 剂制 备 而 成 ，由本 实 验室 自制 。 １．１．２ 动 物
Ｎｏｎｅ
１．１．３ 仪 器
ＢＳ一２１０Ｓ电 子天 平 （北 京 赛多 利 斯 天平 有 限公 司 ），ｕＶ光源 （日本 松 下 电器 ）。 １．２ 实 验 方 法 １．２．１ 经 皮 急性 毒性 实验
优 选 １０只 健 康 家兔 （体 重２ ｋｇ左 右 ，雌 雄 各 半 ），用 ７５％的
表 ２ 皮 肤 刺 激 强 度 评 价
资助项 目资 助 （Ｎｏ．２０１６ＸＬＺ００４）；四川 高校科研创新 团 队建设计 划资助 （Ｎｏ．１４ＴＤ００３１）。 作者 简介 阳刚 （１９７５一 ），男 ，四川绵 阳人 ，硕士 ，主要从事兽 医 研究 。
桉 油溶液 剂 的皮肤毒理 学和 眼睛 、口腔粘 膜
刺激性 实验研究
阳 刚 白 璐 殷 中琼 魏 琴 。’ 周黎军 杨仕群
（１．宜宾职业技术学院生物与化工工程系 ，四川宜宾 ６４４００３； ２．四川农业大学动物医学 院天然药物研 究中心，四川成都 ６１１１３０；
３．宜宾学院生命科学与食 品工程 学院，四川宜宾 ６４４０００）
Ｅｒｙｔｈｅｍａ
Ｎｏｎｅ Ｍｉｉｄ ｅｒｙｔｈｅｍａ Ｍｏｄｅｒａｔｅ ｅｒｙｔｈｅｍａ Ｓｅｖｅｒｅ ｅｒｙｔｈｅｍａ Ｅｒｙｔｈｅｍａ ｗｉｔｈ ｅｓ．５～２．５ ，由 四川 农 业大
17味中药对豚鼠皮肤TNF-α、IL-10作用的影响
17味中药对豚鼠皮肤TNF-α、IL-10作用的影响姜丽莎;张晓东;张国斌;张庆瑞;王强【期刊名称】《中国中西医结合皮肤性病学杂志》【年(卷),期】2016(015)003【摘要】目的探讨17味中药对豚鼠皮肤肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)的调节作用.方法实验动物随机分4组,17味中药乙醇提取液为实验组,8-甲氧补骨脂素(8-MOP)、75％乙醇为阳性及阴性对照组,均涂于豚鼠皮肤上,40 d 后取皮肤标本免疫组化染色,测TNF-α、IL-10平均光密度,比较其作用结果.结果当归、甘草、枸杞、红花、女贞子、首乌、益母草、黑芝麻、栀子对TNF-α表达下调;甘草、枸杞、合欢皮、黄芪、女贞子、沙参、沙苑子、菟丝子、黑芝麻对IL-10表达上升,其中甘草、枸杞、女贞子、黑芝麻对TNF-α、IL-10均表现正向调节作用;合欢皮、黑桑葚对TNF-α表达上调,旱莲草、黑桑葚使IL-10表达下降,出现负向调节作用.结论通过中药对TNF-α、IL-10调节作用探讨,为研制治疗白癜风的有效组方提供可靠实验数据.【总页数】3页(P169-171)【作者】姜丽莎;张晓东;张国斌;张庆瑞;王强【作者单位】辽宁医学院研究生学院,锦州121001;解放军第202医院,沈阳110003;解放军第202医院,沈阳110003;解放军第202医院,沈阳110003;解放军第202医院,沈阳110003【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.17味中药对豚鼠皮肤酪氨酸酶mRNA表达水平与致色素作用的影响 [J], 姜丽莎;张晓东;张国斌;王恩波2.大腹皮等七味中药对豚鼠离体胃纵行肌条的作用影响 [J], 田琳;衣兰娟;轩原清史;魏睦新3.溃疡颗粒方治疗胃溃疡的临床疗效观察及其对血清IL-10、IL-17、NO、TNF-α水平的影响 [J], 蒋丽;叶新彬;王婷婷4.TGF-β、IL-10、TNF-α、Th17在妊娠期亚临床甲减中的作用研究 [J], 杜碧君;王晨虹5.愈疡膜对溃疡性直肠炎模型豚鼠局部组织匀浆TNF-α、IL-8、IL-10的影响 [J], 陈红锦;顾宁;曾莉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同染色法检测豚鼠皮肤黑色素的比较研究
不同染色法检测豚鼠皮肤黑色素的比较研究董妙珠;肖萍;洪新宇;仲伟鉴【期刊名称】《环境与职业医学》【年(卷),期】2006(23)5【摘要】[目的]用几种组织化学染色方法来探讨豚鼠皮肤黑色素反应,对不同染色法进行比较。
[方法]利用多巴氧化酶法(DopA)、硫酸亚铁吸收法、亚铁氰化钾法和银浸染色法(Masson-fontana)对黑色素细胞进行染色。
[结果]多巴氧化酶法,黑色素细胞呈黑色。
硫酸亚铁吸收法,黑色素细胞和嗜银细胞呈暗绿色。
亚铁氰化钾法,黑色素细胞和嗜银颗粒为蓝黑色。
银浸染色法,黑色素细胞、亲银细胞和嗜铬细胞均呈黑色。
[结论]多巴氧化酶法在几种方法中是最适合观察黑色素细胞数量和黑色素颗粒的方法。
【总页数】3页(P423-425)【关键词】黑色素;黑色素细胞;多巴氧化酶法;硫酸亚铁吸收法;亚铁氰化钾法;银浸染色法【作者】董妙珠;肖萍;洪新宇;仲伟鉴【作者单位】上海市疾病预防控制中心【正文语种】中文【中图分类】R114【相关文献】1.国外美容医学最新研究与进展（一）--乳房整形、不同基质干细胞对扩张皮肤的影响及恶性黑色素瘤的治疗 [J], 李荟元(译)2.快速斑点免疫金染色法与二种免疫金银染色法检测抗囊尾蚴抗体的比较研究 [J], 郑葵阳;杜文平;郑霞;付琳琳;刘宜升3.豚鼠皮肤溃疡模型建立方法的比较研究 [J], 张珏;林龙4.芦荟大黄素对豚鼠皮肤黑色素细胞NOS的影响--免疫组织化学研究 [J], 程基焱;吴雨岭;段成刚;余鸿;王鑫5.皮肤颜色对黑色素瘤检测中深度学习算法性能的影响研究 [J], 张杰;赵惠军;法振宗因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
皮肤致敏试验简介
⽪肤致敏试验简介试验原理具有致敏作⽤的化学物经⼀定途径进⼊机体，与组织蛋⽩结果形成完全抗原，刺激免疫活性细胞产⽣致敏淋巴细胞或体液抗体；经1~2周致敏期，使体内免疫反应得到充分发展，形成⼀定数量的致敏淋巴细胞或特异抗体。
当再次接触（激发）时使机体对该化学物产⽣感受性增⾼的状态，以⼀定的异常形式表现出来。
试验⽅法⽬前⽪肤致敏性的检验⽅法有：豚⿏最⼤剂量法（GPMT）、封闭式贴敷法（Buehler试验）、局部淋巴结试验法（LLNA），其中豚⿏最⼤剂量法（GPMT）和封闭式贴敷法（Buehler试验）是最常⽤的、⽣物安全性评价中使⽤率最⾼的两种⽅法。
豚⿏最⼤剂量试验是最敏感的⽅法，欧洲国家使⽤此⽅法较⼴泛；封闭式贴敷试验适⽤于局部产品，美国常⽤此⽅法。
局部淋巴结试验（LLNA）被经济与合作发展组织接受作为当前豚⿏试验的唯⼀替代⽅法，该法对动物保护⽅⾯也有所改善，也被认可⽤于化学物致敏活性的检测。
⼩⿏局部淋巴结试验（LLNA）原理：过敏剂可诱导引起作⽤位点的引流淋巴结内淋巴细胞增殖，其增殖程度与过敏剂的剂量和致敏效⼒成正⽐。
从⽽提供了⼀种简单的获取定量测量致敏性的⽅法。
BrdU是胸腺嘧啶核苷的类似物并可掺⼊增殖细胞的DNA中。
通过酶联免疫吸附试验⽅法测量试验动物⽿部引流淋巴结内掺⼊BrdU的量来指⽰增殖细胞的数量增加，并⽤试验组与对照组的平均增殖量之⽐（SI）来评价增殖情况，确定待测物质的致敏潜能。
动物管理：成年未⽣育过且未受孕的雌性⼩⿏，8周龄~12周龄，动物体重不超过平均体重的±20%。
试验样品：应为液体、悬浮液、凝胶或膏状物，此类样品可应⽤⼩⿏的⽿部。
试验设置：设置⼀个或多个对照组、⼀个阴性对照组和⼀个阳性对照组；每组⾄少使⽤4只动物。
经常进⾏LLNA时不必每次试验都包括阳性对照，但⾄少每6个⽉应采⽤⼀次阳性对照。
试验步骤：LLNA检验化学物⼀般采⽤剂量反应⽅式，医疗器械供试样品可能为浸提液，此时仅有单剂量⽤于试验，⼀般可检验未稀释的浸提液。
桉油栓对家兔的肌肉刺激性试验
2019年第5期（总第210期）枝油栓对家兔的肌肉刺激性试验赵丽丽，兰新财，叶志惠，欧彬（浙江金大康动物保健品有限公司，浙江金华321016）中图分类号：S853.7文献标识码：B文章编号：1003-8655（2019）05-0013-01摘要：为评价桜油栓局部用药的安全性，以家兔为受试动物进行肌肉刺激性试验，于一侧后肢股四头肌处以无菌方法注入lml受试物，以生理盐水为对照，观察注射部位肌肉组织变化并按评分标准进行评价，结果表明，给予受试物的四块股四头肌及给予生理盐水的四块股四头肌均未发现有炎性细胞和组织变性等病理变化。
结论：本实验表明桜油栓对肌肉无刺激性，肌肉刺激安全性评价良好。
关键词：榜油栓；家兔；肌肉刺激性桜油为桃金娘种植物蓝桜Eucalptus globulus Labill、樟科植物樟Cinnamomum camphora（L.）Presl.或上述两科同属其他植物经蒸億得到的挥发油［1］,系中国兽药典（2015年版）法定药材，桜油中主要含桜油精（C10H180）,桜油的主要成分是核油精，核油精具有抗菌、杀虫、疏风解热、祛湿解毒作用，同时对多种药物具有良好的透皮渗透作用［2］,其含量M70%（g/g）,还含有柠檬烯、a-菠烯等成分。
樟科植物樟所蒸憎的挥发油主要成分也是桜油精，但还含有黄樟素等毒性成分，桃金娘种植物蓝桜所蒸憎的挥发油不含黄樟素等毒性成分［3］。
本试验所用桩油栓中主要成分蓝桜油系从蓝桜叶茎叶提取的有效成分，本品具有明显的清热解毒、抗菌消炎作用，主要用于预防和治疗母畜的急、慢性子宫内膜炎、阴道炎、胎衣滞留等。
本试验以按油栓对家兔肌肉的刺激性进行观察，以期为临床安全用药提供依据。
1试验材料1.1试验药品按油栓，批号：20170710,规格8g/支，由浙江金大康动物保健品有限公司提供。
1.2实验动物健康新西兰白兔，体重2.0~2.5kg,雌雄兼有，由南京中医药大学实验动物中心提供,试验前全部饲喂不含添加剂的全价颗粒营养饲料及清洁无农药青草，静养三天以适应环境，试验期间实验室温度为22-25湿度为40-70%02试验方法2.1动物处理取健康家兔4只，雌雄各半，分别于一侧后肢股四头肌处以无菌方法注入lml 受试物（受试物于注射前溶解，并晾至适宜温度），另一侧对应部位同法注射生理盐水lml作为对照,48h后于耳静脉注入空气致死，解剖取出股四头肌，纵向切开，观察注射部位肌肉组织变化并按评分标准进行评价，换算成相应反应分值，同时在所取肌肉进针点周围取小块肌肉作为标本,标本用Bouin氏液固定，做常规石蜡组织切片，观察肌肉周围有无炎性变化，有无变性及其他病理变化，进行病理组织切片镜检。
桉叶油抗金黄地鼠皮脂腺斑增生的研究
桉叶油抗金黄地鼠皮脂腺斑增生的研究作者：魏露朱明芳来源：《湖南中医药大学学报》2021年第03期〔摘要〕目的观察桉叶油对金黄地鼠皮脂腺斑的影响，探讨外用桉叶油乳膏治疗痤疮的机制。
方法将24只雄性金黄地鼠随机分为空白组、基质组、桉叶油乳膏组、阳性对照组，每组6只，分别于双侧皮脂腺斑处涂抹蒸馏水、基质、桉叶油乳膏、0.025%维A酸乳膏，连续给药4周后，观察各组金黄地鼠皮脂腺斑面积变化及组织病理学改变。
结果给药后，与空白组、基质组相比，各治疗组金黄地鼠同侧皮脂腺斑面积均减小，差异有统计学意义（P<0.05），同时皮脂腺厚度减少，腺体萎缩，腺叶数量减少，排列疏松;与阳性对照組相比，桉油乳膏组右侧皮脂腺斑的面积缩小，差异有统计学意义（P<0.05），同时皮脂腺腺体较小，排列松散。
结论桉叶油能有效抑制皮脂腺增生，可能是其治疗痤疮的作用机制之一。
〔关键词〕皮脂腺斑;痤疮;桉叶油;金黄地鼠〔中图分类号〕R285.5 〔文献标志码〕A 〔文章编号〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2021.03.006〔Abstract〕 Objective To observe the effect of eucalyptus oil on sebaceous gland spots in golden hamsters， and explore the mechanism of external use of eucalyptus oil cream in the treatment of acne. Methods 24 male golden hamsters were randomly divided into blank group， matrix group，eucalyptus oil cream group and positive control group， with 6 rats in each group. Distilled water，matrix， eucalyptus oil cream and 0.025% vitamin A cream were applied to bilateral sebaceous gland spots. After continuous treatment for 4 weeks， the change of sebaceous gland spots area of golden hamster in each group and histopathological changes were observed. Results After administration，compared with blank group and matrix group， the ipsilateral sebaceous plaque area of golden hamsters in each treatment group decreased， and the difference was statistically significant（P<0.05）. At the same time， the thickness of sebaceous gland spots decreased， the gland atrophic， the number of glandular leaves decreased， and the arrangement was loose. Compared with the positive control group， the area of sebaceous spots on the right side of the eucalyptus oil cream group was reduced， and the difference was statistically significant （P<0.05）. Meanwhile，the sebaceous gland spots were small and loosely arranged. Conclusion Eucalyptus oil can effectively inhibit sebaceous gland spots hyperplasia， which may be one of the mechanisms of acne treatment.〔Keywords〕 eucalyptus oil; acne; golden hamsters; sebaceous gland spots痤疮是多因素介导的毛囊皮脂腺单位的慢性炎症性皮肤病，多发生于油性皮肤[1]。
药物安全性评价中豚鼠全身过敏试验方法的研究
药物安全性评价中豚鼠全身过敏试验方法的研究翁谢川;丁日高;樊星;王青秀;施畅;李磊宁;欧阳兆和;孔琦;王全军;关勇彪【摘要】Objective To analyze some potential factors which might affect the active systemic anaphylaxis (ASA) test on guinea pig. Methods In GLP conditions, guinea pigs from 300 to 400 grams were used as experimental subjects. By using the materials including bovine serum albumin and saline which are recommended for the control subjects by the guidelines, some experimental design factors such as sensitizing dose, challenge dose, challenge interval and challenge injection route, and the frequency of challenge were studied during the systemic anaphylaxis in guinea pigs. Results In a certain dose range, the incidence of allergic reactions in guinea pigs was not related with systemic sensitizing dose, challenge dose and challenge injection approach, but the severity of anaphylaxis symptoms has an obvious relationship with sensitizing dose, challenge dose and challenge injection route. Conclusion Study on the drug-induced anaphylaxis should refer to the guidelines and pay more attention to experimental design dose and the route of administration.%目的在新药临床前安全性评价中对药物致敏性的研究日益受到重视.本实验基于我国新药评价指导原则,分析探讨SFDA颁布的指导原则中豚鼠全身过敏实验方案中可能影响实验结果的问题和因素.方法在GLP条件下,以体重为300～400克的豚鼠为实验对象,以牛血清白蛋白、生理盐水等受试物为对照,研究不同致敏剂量、激发剂量、激发时间、激发途径和激发次数等条件下,豚鼠全身过敏的发生情况.结果在一定剂量范围内,豚鼠全身过敏反应的发生率与致敏剂量、激发剂量和激发途径无关,但症状发生的严重程度与致敏剂量、激发剂量和激发途径有关.结论新药过敏性评价研究应参照指导原则,注意试验的剂量设计和给药途径.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2012(022)005【总页数】5页(P51-55)【关键词】豚鼠;致敏;激发;全身过敏试验【作者】翁谢川;丁日高;樊星;王青秀;施畅;李磊宁;欧阳兆和;孔琦;王全军;关勇彪【作者单位】军事医学科学院基础医学研究所神经生物学研究室,北京100850;军事医学科学院毒物药物研究所,国家北京药物安全评价中心,北京100850;军事医学科学院毒物药物研究所,国家北京药物安全评价中心,北京100850;军事医学科学院毒物药物研究所,国家北京药物安全评价中心,北京100850;军事医学科学院毒物药物研究所,国家北京药物安全评价中心,北京100850;军事医学科学院毒物药物研究所,国家北京药物安全评价中心,北京100850;军事医学科学院毒物药物研究所,国家北京药物安全评价中心,北京100850;军事医学科学院毒物药物研究所,国家北京药物安全评价中心,北京100850;军事医学科学院毒物药物研究所,国家北京药物安全评价中心,北京100850;军事医学科学院毒物药物研究所,国家北京药物安全评价中心,北京100850【正文语种】中文【中图分类】Q95-331;R332药物可能作为过敏原引发机体产生过敏反应。
编好豚鼠过敏试验
豚鼠过敏性休克试验豚鼠过敏试验属于Ⅰ型超敏反应, 是一个经典的动物过敏性休克试验。
此型过敏反应发生迅速，又称速发型变态反应，具有严格的特异性以及明显的个体差异特点。
过敏反应过程中肥大细胞、嗜碱性粒细胞等细胞释放多种血管活性介质，作用于效应器官，引起特有症状。
本实验主要观察豚鼠的过敏反应现象，重复性好、稳定、过敏现象明显，方法简单。
【实验目的】1. 掌握Ⅰ型超敏反应的机制、临床表现及特点；2. 了解豚鼠实验性过敏性休克的方法及结果观察。
【实验原理】豚鼠过敏反应属Ⅰ型超敏反应，与人类的青霉素和异种血清所引起的过敏性休克类似。
先给豚鼠注射变应原马血清蛋白，过一定时间，变应原刺激动物浆细胞产生IgE类抗体，此抗体的Fc段与肥大细胞或嗜碱性粒细胞表面的FcεR 结合，使得IgE吸附在这些细胞的表面，这是致敏阶段。
当相同的较大量变应原再次进入致敏机体时，即可与吸附在这些细胞表面的IgE结合，引起一系列反应，使这些细胞释放组胺，缓激肽，慢反应物等生物活性介质，作用于效应器官，引起I型过敏反应的发作，即发敏阶段。
组胺是一个主要的生物活性介质，它的迅速释放，能扩张小血管和增加毛细血管通透性、刺激平滑肌收缩、促进粘膜腺体分泌增加；导致血压下降、呼吸困难等，甚至引起过敏性休克，导致死亡。
【实验器材】1.健康豚鼠（体重200克左右）3只。
2.正常马血清。
3.生理盐水，鸡蛋清。
4.无菌注射器，针头，酒精棉球，解剖用具等。
【实验方法】1. 致敏注射：取3只豚鼠，以甲、乙、丙编号，其中甲、乙两只经腹腔或皮下注射1:10 马血清0.1ml ，丙注射0.1ml生理盐水做为对照。
2. 发敏注射：两周后，固定好豚鼠，找到心尖搏动处，用碘酒、酒精依次消毒后，甲豚鼠心脏注射鸡蛋清 1 ～2ml，乙丙两只豚鼠经心脏注入马血清1～2ml 。
3. 注射后数分钟内密切观察动物状态及反应现象。
【实验结果】1．乙豚鼠发生超敏反应，注射后数分钟，动物出现兴奋、不安、躁动、鼻翼翕动，前爪搔鼻，耸毛、咳嗽等现象，继而发生气急及呼吸困难，站立不稳，痉挛性跳跃，大小便失禁，倒地挣扎而死。
塞拉菌素制剂的豚鼠最大化试验和Buehler试验
塞拉菌素制剂的豚鼠最大化试验和Buehler试验摘要:为检验塞拉菌素制剂对皮肤的过敏性,以化学药物指导原则为指导,进行了豚鼠最大化试验(GPMT)和Buehler豚鼠封闭斑贴试验(BT)｡用2,4-二硝基氯苯溶液作为阳性对照物,在GPMT试验和BT试验的阳性对照组的致敏率分别为80%和70%,对豚鼠的致敏率较高,2个试验受试物组的致敏率均为0,表明塞拉菌素对豚鼠没有致敏性｡关键词:塞拉菌素;豚鼠;斑贴试验;最大化试验Guinea Pig Maximination Test and Buehler Test for Selamectin Preparation Abstract: To measure the skin sensitization, the guinea pig maximination test (GPMT) and Buehler test (BT) for selamectin preparation were performed according to the guidance of chemistry medicine. The results showed that the sensitization rate of the positive control group which used 2,4-dinitrochlorobenzene solution in GPMT test and BT test was 80% and 70%, respectively; while the sensitization rate of the test group in both tests were zero. The results proved that there was no sensitization of selamectin to guinea pigs.Key words: selamectin; guinea pig; Buehler test; maximination text塞拉菌素是由基因重组的阿维链霉菌(Streptomyces vermitilis)新菌株发酵而成的阿维菌素类抗生素,是一种兼具抗体内､体外寄生虫双重作用的新型广谱抗寄生虫药[1],对蜱､螨､蚤､虱､恶丝虫､部分线虫有驱杀效果[2-7]｡该药目前主要被开发为犬猫专用的透皮制剂,为研究该制剂的皮肤过敏性,试验进行了豚鼠最大化试验和封闭斑贴试验｡1材料和方法1.1供试药品塞拉菌素制剂,规格45mg∶0.75mL,购至浙江海正药业股份有限公司;0.1%和1%的2,4-二硝基氯苯溶液(上海中秦化学试剂有限公司)｡1.2试验动物成年白色豚鼠,未孕雌性,体重250~300 g｡每次给药前24 h给豚鼠肩背部脱毛,面积为3 cm×3 cm｡试验完后称量动物体重｡1.3试验方法1)预试验｡皮内注射试验:随机选取试验动物16只分为4组,每组4只,于每只豚鼠肩背部去毛区分4点一次性皮下给予不同剂量的塞拉菌素溶液,给药点间距1.5 cm,给药后24 h和48 h观察注射点红斑､水肿和溃烂情况｡各试验组注射剂量分别为0.2 mL､0.1 mL､0.05 mL､0.01 mL｡选取注射点皮肤不产生溃烂的剂量为皮内注射剂量｡豚鼠封闭斑贴试验:随机选取试验动物16只分成4组,每组4只,于每只豚鼠肩背部去毛区一次性斑贴不同剂量的塞拉菌素溶液,封闭贴敷24 h,进行激发接触｡在去除受试物后的12 h内观察动物去毛区皮肤红斑水肿情况｡各试验组剂量分别为0.5 mL､0.25 mL､0.1 mL､0.05 mL｡选取可产生轻度刺激性的剂量作为第一次斑贴剂量,选取不产生刺激性的最大剂量作为第二次斑贴剂量｡斑贴试验操作:用医用凡士林涂皮,将药物吸附在1cm×1cm的滤纸上贴敷于皮肤表面,用塑料薄膜(保鲜膜)覆盖,最后用胶布将斑贴缠绕固定,松紧程度以不影响豚鼠活动又能固定斑贴为宜｡2)正式试验｡豚鼠最大化试验(GPMT):随机选取40只豚鼠,试验组20只,阳性对照组和阴性对照组各10只｡第0天,豚鼠皮内注射给药进行诱导｡第七天后皮肤斑贴给予药物再次进行诱导,第21天皮肤斑贴给予激发剂量24 h,在去除激发剂量24 h､48 h和72 h后观察皮肤红斑､水肿和其他异常反应,按表1对红斑和水肿进行评分,按表2进行过敏反应强度评价｡若结果难以判定,7 d后再次激发｡阳性对照组用70%乙醇配成溶液,皮内注射的药物浓度为0.1%,剂量为0.10 mL,第一次斑贴诱导浓度和第二次斑贴致敏浓度分别是1.0%和0.1%,剂量均为0.2 mL(见表3)｡Buehler豚鼠封闭斑贴试验(BT):随机选取40只豚鼠,试验组20只,阳性对照组和阴性对照组各10只｡第0､7和14天用封闭片局部给药以诱导,第28天在未给药的肋腹部贴6 h以局部激发｡去除封闭片24 h､48 h和72 h后观察皮肤红斑､水肿和其他异常反应,按表1对红斑和水肿进行评分,按表2进行过敏反应强度评价｡若结果难以判定,7天后再次激发｡阳性对照组用70%乙醇配成溶液,诱导浓度和致敏浓度分别是1.0%和0.1%,剂量均为0.2mL(见表4)｡结果评价标准:反应平均值=根据表2判断过敏反应发生程度｡2试验结果2.1预试验皮内注射试验测得第一次诱导剂量为0.05 mL｡斑贴诱导剂量和斑贴激发剂量分别是0.25 mL､0.05 mL｡2.2正式试验试验结果见表5,GPMT试验中阳性对照组有8只豚鼠发生不同程度的红斑､水肿,致敏率为80%,故对豚鼠有高度的致敏性,在去除激发剂量后的48 h和72 h红斑和水肿症状变轻｡阴性对照组和试验组均无红斑和水肿出现,表明塞拉菌素的致敏率为0｡试验结果见表6,BT试验中阳性对照组有7只豚鼠发生不同程度的红斑､水肿,致敏率为70%,对豚鼠的致敏性较高,在去除激发剂量后的48 h和72 h红斑和水肿症状变轻｡阴性对照组和试验组均无红斑和水肿出现,表明塞拉菌素的致敏率为0｡3讨论豚鼠血清内含有丰富的补体,当豚鼠再次接触致敏原时比其他动物更容易产生过敏反应,因此本试验选用豚鼠作为试验对象｡饲养环境会对豚鼠的生理代谢､免疫产生影响,甚至会对豚鼠产生应激,故试验过程中严格控制饲养环境,室温25℃左右､湿度60%左右,注意通风换气,定期添加垫料,每天更换新鲜的饮水｡由于豚鼠需要更多的纤维素食物和维生素,故每天额外定量饲喂白菜100 g/只､胡萝卜50g/只,以保证豚鼠正常生长需求｡试验结束后称量动物体重均在400~500 g,故该药物以及该试验不影响动物生长｡本试验以《化学药物刺激性､过敏性和溶血性研究技术指导原则》为指导[8],经预试验得出塞拉菌素制剂的致敏剂量和激发剂量,两个剂量均大于临床使用剂量6 mg/kg｡此外,指导原则中对动物的保定未作详细描述,在不影响动物正常活动的前提下,对给药斑贴部位进行固定｡GPMT和BT试验过程中所有豚鼠精神状态良好,饮食较好,活动正常,未出现不良反应,故受试物塞拉菌素制剂在注射量 6 mg/kg条件下,对豚鼠没有过敏性,为其在临床上的安全使用奠定了理论基础｡参考文献:[1] BRUCE C I, BISHOP B F, EV ANS, et al. Selamectin of a Topical Formulation for UK-124,114-a Novel Avermectin Endecticide for Dogs and Cats. Proceedings of the 5th International Symposium on Ectoparasites of Pets; April 11-13,1999; Fort Collins, CO,USA.[2] JERNIGAN A D, MCTIER T L, CHIEFFO C, et al. Efficacy of selamectin against experimentally induced tick (Rhipicephalussanguineus and Dermacentor variabilis) infestations on dogs [J]. Veterinary Parasitology, 2000, 91(3-4): 132-138.[3] KURTDEDE. A, KARAER. Z, ACAR. A. Use of selamectin for the treatment of psoroptic and sarcoptic mite infestation in rabbits[J]. Veterinary dermatology,2007,18:18-22.[4] SHANKS D J, GAUTIER R, CTIER I L, et al. Efficacy of selamectin against biting lice on dogs and cats[J]. The Veterinary Record, 2003, 152: 234-237.[5] MCCOY C, BROCE A B, DRYDEN M W, et al. Flea blood feeding patterns in cats treated with oral nitenpyram and the topical insecticides imidacloprid, fipronil and selamectin[J]. Veterinary Parasitology, 2008, 156: 293-301.[6] MCTIER T L, SHANKS D J, WATSON P, et al. Prevention of experimentally induced heartworm (Dirofilaria immitis)infections in dogs and cats with a single topical application ofselamectin[J]. Veterinary Parasitology,2000,91(3-4):259-268.[7] WANG T, YANG G Y, YAN H J, et al. Comparison of efficacy of selamectin, ivermectin and mebendazole for the control of gastrointestinal nematodes in rhesus macaques, China[J]. Veterinary Parasitology,2008,153(5):121-125.[8] 《化学药物刺激性､过敏性和溶血性研究技术指导原则》课题研究组.化学药物刺激性､过敏性和溶血性研究技术指导原则[Z]. 2005,5-7.。
豚鼠皮肤瘙痒动物模型的建立及评价
豚鼠皮肤瘙痒动物模型的建立及评价米本中;杨武斌;罗晓玲;王旖;胡娟;徐嘉红;樵星芳【摘要】Objective To optimize the optimal doses of histamine and 4-aminopyridine (4-AP) in the establish-ment of guinea pigs models of itching, and to establish a new guinea pig model of itching. Methods The central composite design-response surface method was used to arrange the experiment. In the experiment different pruritus agents were hypo-dermically injection of 0. 5 mL in the depilated area, and the scratching incubation period and scratching number in 30 mi-nutes were counted after the injection. The guinea pig itching model was evaluated by observing the behavioral changes of guinea pigs and measuring the levels of histamine and interleukin-6 in the blood. Results The behavioral experiments found that the scratching frequency in the the combination group was significantly higher than the histamine group and 4-AP group (P<0. 01). The itching latency of the combination group was significantly shorter than that of the histamine group and 4-AP group (P<0. 01). Compared with the control group, the histamine concentrations of the combination group and histamine group were significantly increased ( P<0.05 or P<0. 01 ) , and the level of the combination group was lower than that of the histamine group (P<0. 05). Compared with the control group, the serum IL-6 concentrations of histamine group, 4-AP group and combination group were significantly higher (P<0. 01 or P<0. 05), and those in the combination group were significantly higher than thehistamine and 4-AP groups. Compared with the control group, pathologic examina-tion showed proliferation of inflammatory cells in all model groups, and the reaction of the combination group was more ob-vious. Conclusions The optimal conditions used in this experiment are easy to achieve and have good reproducibility in the establishment of a guinea pig model of itching.%目的通过星点设计-效应平面法优化组胺和4-氨基吡啶(4-AP)联用建模的剂量,旨在建立一种新型的豚鼠瘙痒动物模型.方法用星点设计安排实验,各组分别在脱毛部位皮下注射0.5 mL不同致痒剂,记录豚鼠30 min 内的搔抓潜伏期和搔抓次数,用综合评分法筛选最佳致痒组方.通过观察豚鼠的行为学变化和测定血液中的组胺和白介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量对豚鼠模型进行评价.结果行为学实验发现,联合组在30 min内搔抓次数比组胺组和4-AP组均显著增多(P<0.01),搔抓潜伏期显著缩短(P<0.01).4-AP组在30 min内搔抓次数比组胺组显著增多(P<0.01).与对照组相比,联合组、组胺组豚鼠血清的组胺浓度均明显升高(P<0.05或P<0.01),但联合组升高程度低于组胺组(P<0.05);与对照组相比,组胺组、4-AP组和联合组的血清IL-6浓度均有显著的升高(P<0.01或P<0.05),且联合组明显高于组胺组和4-AP组.病理学检查显示,各模型组均出现不同程度的炎细胞增殖,其中联合组的反应更为明显.结论本试验中优化组方(联合组)模型容易实现并且有良好的重复性.【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】2017(025)005【总页数】6页(P528-533)【关键词】组胺;4-氨基吡啶;豚鼠;瘙痒模型【作者】米本中;杨武斌;罗晓玲;王旖;胡娟;徐嘉红;樵星芳【作者单位】重庆市中药研究院实验动物研究所,重庆 400065;重庆市中药研究院实验动物研究所,重庆 400065;重庆市中药研究院实验动物研究所,重庆 400065;重庆市中药研究院实验动物研究所,重庆 400065;重庆市中药研究院实验动物研究所,重庆 400065;重庆市中药研究院实验动物研究所,重庆 400065;重庆市中药研究院实验动物研究所,重庆 400065【正文语种】中文【中图分类】Q95-33瘙痒是皮肤科最常见的症状之一，见于多种皮肤病、胆道疾病、甲状腺疾病、肾脏疾病以及恶性肿瘤等多种临床疾病。
豚鼠过敏
豚鼠过敏休克
实验目的
掌握豚鼠过敏性休克的发病机理及方法
实验原理
经过敏原刺激的豚鼠机体可产生IgE类抗体， 经过敏原刺激的豚鼠机体可产生IgE类抗体， 类抗体 并与肥大细胞及血液中嗜碱性粒细胞表面 IgE的Fc段受体结合 段受体结合， 的IgE的Fc段受体结合，使机体处于致敏状 态。当相同抗原再次进入机体迅速与机体 肥大细胞及血液中嗜碱性粒细胞表面的IgE 肥大细胞及血液中嗜碱性粒细胞表面的IgE 结合使肥大细胞及嗜碱性粒细胞脱颗粒， 结合使肥大细胞及嗜碱性粒细胞脱颗粒， 释放生物活性物质， 释放生物活性物质，作用于支气管平滑肌 和毛细血管，引起支气管平滑肌痉挛， 和毛细血管，引起支气管平滑肌痉挛，毛 细血管扩张，有效循环血量减少， 细血管扩张，有效循环血量减少，血压下 降至休克
实验结果与分析
两周后第一只豚鼠心内注射50℅马血清 两周后第一只豚鼠心内注射50℅马血清1ml，无反应是因 马血清1ml， 为第一次注射的是鸡蛋清， 为第一次注射的是鸡蛋清，豚鼠体内只有抗鸡蛋清的抗体 IgE，而无抗马血清的IgE，所以不能与马血清结合。 IgE，而无抗马血清的IgE，所以不能与马血清结合。把 第二只豚鼠心内注射50℅鸡蛋清 鸡蛋清1ml，迅速出现反应， 第二只豚鼠心内注射50℅鸡蛋清1ml，迅速出现反应，是 因为豚鼠体内经过致敏阶段已存在有抗鸡蛋清的抗体IgE， 因为豚鼠体内经过致敏阶段已存在有抗鸡蛋清的抗体IgE， IgE吸附在动物的肥大细胞及血液中嗜碱性粒细胞表面 IgE吸附在动物的肥大细胞及血液中嗜碱性粒细胞表面， 吸附在动物的肥大细胞及血液中嗜碱性粒细胞表面， 当相同抗原鸡蛋清再次进入机体，可与此IgE结合 结合， 当相同抗原鸡蛋清再次进入机体，可与此IgE结合，使肥 大细胞及血液中嗜碱性粒细胞脱颗粒，释放生物活性物质， 大细胞及血液中嗜碱性粒细胞脱颗粒，释放生物活性物质， 如组胺，白三烯等，作用于支气管平滑肌，使其痉挛， 如组胺，白三烯等，作用于支气管平滑肌，使其痉挛，作 用于毛细血管，使其扩张，通透性增加， 用于毛细血管，使其扩张，通透性增加，使动物的大量血 液潴留在毛细血管，有效回心血量减少，血压下降， 液潴留在毛细血管，有效回心血量减少，血压下降，造成 休克。 休克。
高美华《医学免疫学》豚鼠过敏性休克实验
豚鼠过敏性休克实验
Anaphylactic Shock of Animal
超敏反应（hypersensitivity)
是指机体受某些抗原刺激时，出现生理功能 紊乱或组织细胞损伤的异常适应性免疫应答。 又称变态反应（allergy） 异常的或病理性的免疫应答，具有特异性和 记忆性 变应原（allergen）：变应原是指能够选择 性地诱导机体产生特异性 IgE 抗体的免疫应答， 引起速发型变态反应的抗原物质
四、结果
甲豚鼠可在注射后几分钟内有不安、前爪抓 鼻、竖毛、咳嗽，继而产生全身抽搐，大 小便失禁，最后因窒息而死亡。 乙豚鼠安然无恙。
一、原理：
二、材料
• (一)动物：健康豚鼠（150—250g）两只。
• (二)抗原：马（或牛、羊）血清。 • (三)无菌注射器及针头、碘酒酒精棉球等。
三、方法
• (一)致敏注射 • 取体重250克健康豚鼠甲、乙两只，甲豚鼠 由皮下注射小牛血清0.1毫升致敏，乙豚鼠 留作对照。 • (二)决定注射 • 经2—3周后取甲、乙两只豚鼠由心脏注射 牛血清0.5～1毫升。观察对比两者之反应。
致敏试验
局部毒性作用——皮肤致敏试验：选择豚鼠作为实验动物。
每天涂皮或皮内注射受试物溶液，共14天，此阶段称为诱导阶段。
间隔10～14天后，用激发剂量（通常低于诱导剂量）再皮内注射1次（称为激发阶段），观察有无皮肤反应及反应程度并评分。
第四节皮肤致敏实验一、实验材料1. 动物：选择豚鼠雌雄各半，体重在 250-300g于给受试物前24小时将豚鼠背部两侧毛脱掉，去毛范围每侧约3cm×3cm。
2. 药物：若受试物是膏剂一般不稀释，可直接实验。
若受试物为固体粉末，则需用适量水或适宜的赋形剂（如羊毛脂、凡士林、橄榄油等）混匀以保证受试物与皮肤的良好接触。
3. 阳性致敏物：2,4一二硝基氯代苯制成1％的致敏浓度和0.1％的激发浓度。
二、试验方法1. 局部封闭涂皮法致敏⑴实验分组：将豚鼠按体重性别随机分成三组，每组10只（雌雄各半）。
第一组给受试物，第二组空白对照（给赋形剂），第三组阳性对照（给阳性致敏物）。
⑵致敏接触：取受试物0.1-0.2mg（或g）涂在动物左侧脱毛区，用适宜方法固定，持续6小时。
第7天和第14天，以同样方法重复一次。
空白对照组与阳性对照组方法同上。
⑶激发接触：与末次给受试物致敏后14天，将受试物0.1-0.2m1(或 g)涂于豚鼠背部右侧脱毛区，６小时后去掉受试物，即刻观察，然后子24小时、48小时、72小时再次观察皮肤过敏反应情况，按表评分（空白对照与阳性对照方法均同受试物）。
(4)结果判断与评价：实验结果按皮肤反应标准评分后，根据实验组与对照组豚鼠皮肤反应的差别，按表16-5判断受试物对皮肤过敏反应性质。
为了反应受试物的致敏强度，可按表16-6的分类判断其致敏率。
致敏率的计算是：将出现皮肤红斑或水肿（不论程度轻重）的动物例数除以受试动物总数，即致敏率。
2. 皮内法致敏：第一天在豚鼠背部一侧去毛区内注射被试药物溶液或乳剂0.05m1(0.1%），第二天观察反应，第三天开始继续在同侧3cm×4cm去毛区内按同法给药，剂量增至每次0.1ml，给药日隔一日进行，给药部位依次更换，如此给药9次。
豚鼠过敏试验
豚鼠过敏试验
将死亡豚鼠解剖，可见肺脏极度水肿，胀满整个胸腔。
豚鼠过敏试验
六、注意事项
1、心脏注射时，首先要固定好动物，然后于心跳 最明显之处进针，感觉有搏动、注射器内有回血时 再注射过敏原； 2、由于动物个体反应性不同，有的反应较轻，可 幸免死亡。如果再注射马血清也不出现反应，此称 为脱敏状态。但脱敏状态是暂时的，大约2周后又 处于致敏状态。
3.发敏：按1：10分别稀释马血清，鸡蛋清，按照下 表，心内注射2ml。
1 2-3周后第二
次注射 马血清
2 鸡蛋清
3 马血清
豚鼠过敏试验
豚鼠过敏试验
五、结果判断
豚鼠1在注射马血清1-5分钟会出现不安、抓鼻、喷嚏、 呼吸困难、竖毛、大小便失禁、痉挛性跳跃，症状严重者在 数分钟内死亡。
而豚鼠2、3无任何症状。
豚鼠过敏试验
Ⅰ型超敏反应又称为速发型超敏反应，是由特异性的 IgE抗体介导的，其主要特征为：
出现快，消退也快； 出现功能紊乱性疾病，不出现严重组织细胞损伤； 有明显个体差异和遗传背景。
豚鼠过敏试验
豚鼠过敏试验
静息肥大细胞
激活后 5 分钟
激活后 60 分钟
豚鼠过敏试验
荨麻疹
哮喘病发作患儿
豚鼠过敏试验
精、棉球等。
豚鼠过敏试验
四、实验步骤
1.取豚鼠三只，编号标记； 抓取方法：先用右手掌轻轻扣住豚鼠背部，抓住其肩
胛下方，以拇指和食指抓住颈部将其轻轻提起。
豚鼠过敏试验
2.致敏：按1：10分别稀释马血清，按照下表操作腹 腔注射0.1ml。
1
2
3
第一次注射 马血清 马血清 生理
豚鼠过敏试验
一、实验目的
1,8-桉油精对卵白蛋白致哮喘豚鼠的气道高反应性和炎症的抑制作用
1,8-桉油精对卵白蛋白致哮喘豚鼠的气道高反应性和炎症的抑制作用徐巧萍;王砚;唐法娣;夏锦芳;刘君波;赵小京;卞如濂【期刊名称】《中国药理学与毒理学杂志》【年(卷),期】2010(024)001【摘要】目的探讨1,8-桉油精(1,8-cineol)对哮喘豚鼠肺功能的改善作用及其机制.方法豚鼠第0天和第7天ip给予0.5 ml含卵白蛋白(OVA)20 μg的氢氧化铝凝胶致敏,28 d后OVA攻击制备哮喘模型.观察豚鼠OVA攻击后1 h,1,8-桉油精10,30和100 mg·kg~(-1)对豚鼠吸入OVA后1,2,3,4,10,20和30 min时气道阻力(R_(aw))和肺顺应性(C_(dyn))变化及支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞数和细胞分类的影响,并测量豚鼠肺组织中嗜酸细胞阳离子蛋白(ECP)、白细胞介素4(IL-4)、IL-8和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量.观察豚鼠OVA攻击后17 h再吸入乙酰甲胆碱(MCh)后,1,8-桉油精10, 30和100 mg·kg~(-1)对R_(aw)和C_(dyn)及BALF中白细胞数和细胞分类的影响,并测量豚鼠肺组织中ECP, IL-4, IL-8和TNF-α的含量.结果与正常对照组比较,豚鼠OVA攻击后1 h,在4 min时模型组R_(aw)达到高峰;与模型组比较,1,8-桉油精30和100 mg·kg~(-1)明显抑制R_(aw)增加(P<0.05);在3 min时模型组C_(dyn)达到高峰,与模型组比较,1,8-桉油精10, 30和100 mg·kg~(-1)均能明显抑制C_(dyn)降低(P<0.05);模型组豚鼠肺组织ECP, IL-4和TNF-α含量明显高于正常对照组(P<0.05);1,8-桉油精100 mg·kg~(-1)组ECP, IL-4和TNF-α含量均明显低于模型组(P<0.05),模型组与正常对照组豚鼠肺组织IL-8含量无明显差异.与模型组比较,1,8-桉油精100 mg·kg~(-1)能明显减少BALF中白细胞数和嗜酸性粒细胞比例(P<0.05).致敏豚鼠OVA攻击17 h后, 模型组豚鼠R_(aw)与正常对照组比较显著升高(P<0.05),模型组豚鼠C_(dyn)与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01),1,8-桉油精100 mg·kg~(-1)对MCh 引起的R_(aw)的增加有明显的抑制作用,1,8-桉油精10, 30和100 mg·kg~(-1)对MCh 引起的C_(dyn)降低有明显的改善作用;与模型组相比,1,8-桉油精100 mg·kg~(-1)能明显减少BALF中白细胞数和中性粒细胞比例,降低肺组织ECP, IL-8和TNF-α含量(P<0.01);模型组与正常对照组豚鼠肺组织IL-4含量无明显差异;1,8-桉油精30 mg·kg~(-1)也能降低哮喘豚鼠肺组织中ECP和TNF-α含量(P<0.01).结论在哮喘急性发作时,1,8-桉油精通过减少嗜酸性粒细胞,下调嗜酸性粒细胞的活性,从而抑制了哮喘的急性发作.在哮喘迟发相阶段,1,8-桉油精可通过下调IL-8水平,降低TNF-α活性,从而抑制或改善由IL-8水平升高导致的中性粒细胞聚集于支气管肺泡而直接引起的哮喘加重和持续状态.【总页数】9页(P35-43)【作者】徐巧萍;王砚;唐法娣;夏锦芳;刘君波;赵小京;卞如濂【作者单位】浙江大学医学院呼吸药物研究室,浙江,杭州,310058;浙江大学医学院呼吸药物研究室,浙江,杭州,310058;浙江大学医学院呼吸药物研究室,浙江,杭州,310058;浙江大学医学院呼吸药物研究室,浙江,杭州,310058;浙江大学医学院呼吸药物研究室,浙江,杭州,310058;浙江大学医学院呼吸药物研究室,浙江,杭州,310058;浙江大学医学院呼吸药物研究室,浙江,杭州,310058【正文语种】中文【中图分类】R285;R974【相关文献】1.孟鲁司特对哮喘豚鼠气道嗜酸粒细胞炎症的抑制作用 [J], 张洪泉;武玉清;周成华2.火把花根片对哮喘豚鼠气道炎症抑制作用的实验研究 [J], 张建勇;赵建军;陈应华;任明强3.慢性烟曲霉暴露对支气管哮喘大鼠气道高反应性、气道炎症及气道重构的影响[J], 汪泽;高艳艳;刘永全;高福生4.抑郁对哮喘模型小鼠气道炎症及气道高反应性的影响 [J], 周燕;金华良;王利民;叶健;厉蓓;蔡萃5.呼吸道合胞病毒感染对卵白蛋白诱导哮喘小鼠气道高反应性的影响 [J], 蒋雄斌;殷凯生;黄茂;解卫平;朱毅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
烟酰胺干预UVB诱导豚鼠皮肤色素沉着的作用
烟酰胺干预UVB诱导豚鼠皮肤色素沉着的作用【摘要】目的探讨烟酰胺对中波紫外线致豚鼠皮肤色素沉着的抑制作用。
方法以亚红斑剂量UVB照射豚鼠背部10天建立皮肤无急性损伤色素沉着动物模型后，外涂基质和%、5%、10%的烟酰胺4周，在此期间观察肤色改变和测定皮肤L值。
涂药结束后取材，进行Masson－Fontana、冰冻切片Dopa 染色和黑素细胞超微结构观察，观察黑素细胞数量、形态和功能的改变。
结果涂抹5%烟酰胺4周后，豚鼠皮肤变白，L值显着下降，多巴阳性黑素细胞数及黑素含量指数较对照组明显减少。
结论 5％烟酰胺对UVB诱导的色素沉着有明显的抑制，它主要是通过抑制黑素细胞的增殖和黑素细胞内黑素小体的合成而发挥作用。
【关键词】烟酰胺；色素沉着；黑素细胞【Abstract】 Objective To investigate the inhibitory effect of nicotinamide on hyperpigmentation induced by UVB. Methods After hyperpigmentation was induced by UVB radiation on the back of brown guinea pigs， substance， %，5% and 10% nicotinamide were applied on the exposed skin for 4 weeks respectively. During this process， the changes of skin coloration were observed with naked eyes and L value were measured. Then the biopsy specimens were taken from the treated skin， sections were prepared for special staining and TEM examination and the number of melanocytes and melanin content index(MCI) were determined. Results After the application of 5% nicotinamide for 4 weeks， lightening effect was obviously observed with naked eyes and the L value decreased significantly. Compared with the substance control， the number ofDopa positive melanocytes and melanin content index were all significantly reduced () in the treated skin with 5% nicotinamide. Conclusion 5% nicotinamide is effective in lightening the UVB-induced pigmentation of guinea pig skin. This effect may be related to the declined proliferation of melanocytes and the inhibition of melanin synthesis in melanocytes.【Key words】 nicotinamide；pigmentation；melanocyte烟酰胺是近年来尝试用于美白和防晒化妆品中的一种化学物质［1，2］，但对其效果和作用机制了解甚少。
桉油精的抗菌抗炎作用研究
桉油精的抗菌抗炎作用研究
张丽佳;薛银;张岑容;胡松华
【期刊名称】《中国兽药杂志》
【年(卷),期】2013(047)003
【摘要】为研究桉油精的抗菌抗炎作用,选取37株奶牛子宫内膜炎临床分离株,采
用二倍稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC),同时分别设计小鼠耳肿胀和腹腔毛细血管通透性增加2种炎症模型研究其抗炎活性.结果显示,桉油精对7种细菌均有抗菌作用,MIC为3.9～12.4 mg/mL,MBC为6.0 ～ 18.2 mg/mL；桉油精能够显著抑制小鼠耳肿胀及腹腔毛细血管通透性增加,并且给药剂量为400 mg/kg时效果最佳.研究表明,桉油精对奶牛子宫内膜炎致病菌具有良好的抗菌作用和显著的抗炎效果.
【总页数】4页(P21-24)
【作者】张丽佳;薛银;张岑容;胡松华
【作者单位】浙江大学动物科学学院动物医学系,杭州310058
【正文语种】中文
【中图分类】S853.75
【相关文献】
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YBB60262012皮肤致敏检查法
YBB60262012皮肤致敏检查法Pifu Zhimin JianchafaTests for Skin Sensitization本试验系将一定量的供试液与豚鼠皮肤接触，以检测供试品是否具有引起接触性皮肤变态反应的可能性。
供试用豚鼠应健康合格，体重300～500g，雌鼠应未产并无孕，每组至少10只，对照组至少5只。
试验前24小时剃除豚鼠肩背部4cm×6cm区域毛发。
弗氏完全佐剂（CFA）制备无水羊毛脂与液体石蜡的体积比为4︰6（如冬天，使用比例为3︰5）。
将无水羊毛脂加热溶解后，取40ml，置研钵中，稍冷却后，边研磨边加液体石蜡，直至60ml液体石蜡加完。
置高压蒸汽灭菌器内，在115℃保持30分钟，即制备成弗氏不完全佐剂（IFA），4℃保存备用。
在IFA中按4～5mg/ml加入死的或减毒的分枝杆菌（如卡介苗或结核杆菌），即得弗氏完全佐剂（CFA）。
与供试液接触的所有器具均应置高压蒸汽灭菌器内121℃灭菌30分钟。
供试品溶液的制备将供试品用肥皂水清洗除去油污，再用纯化水冲洗干净，滤纸吸干后切成0.5cm×2cm条状，置玻璃容器内，加入氯化钠注射液作为浸提液（供试品每3cm2表面积加入氯化钠注射液1ml），使浸提液浸没供试品，置高压蒸汽灭菌器内，在121℃保持60分钟，即得。
同条件制备得阴性对照液。
将供试液及阴性对照液、阳性对照液（5％甲醛溶液）与弗氏完全佐剂（CFA）等体积混合，用力搅拌数分钟至完全乳化为止。
检查法最大剂量法诱导：用75％乙醇清洁豚鼠背部去毛区，在每只豚鼠去毛区作6点对称的皮内注射，各点相距1～2cm，每点注射量为0.1ml。
皮内注射后7天，在注射部位再次剃毛，用75％乙醇清洁。
若未出现刺激反应，每一试验区用10％十二烷基硫酸钠石蜡液预处理，在局部斑贴前24小时涂抹、按摩试验区皮肤，24小时后，将2cm×4cm滤纸浸入供试品溶液或阴性对照液、阳性对照液至饱和，将其贴敷于豚鼠背部注射部位，封闭固定48小时。
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2019年第6期(总第211期)
桜油栓对豚鼠的皮肤致敏性试验
赵丽丽，兰新财，叶志惠，欧彬
(浙江金大康动物保健品有限公司，浙江金华321016)
中图分类号：S853.74文献标识码：B文章编号：1003-8655(2019)06-0010-02
摘要：为评价按油栓的全身或局部过敏反应，以豚鼠为受试动物进行皮肤刺激性试验，试验选取体重250-300g的豚鼠40只，雌雄各半，随机分成3组，空白对照组10只，阳性对照组10只，药物试验组20只，进行三次致敏接触后，进行激发反应。
结果表明，空白对照组、药物试验组在致敏0h、6h、24h、48h、72h的反应平均分皆为0,致命率均为0；而2,4-二硝基氯代苯阳性对照组则出现明显红斑、水肿过敏症状，致命率为100%,结论：本实验表明按油栓不引起皮肤接触性变态反应。
关键词：核油栓；豚鼠;皮肤致敏性
桜油为桃金娘种植物蓝桜Eucalptus globulus Labill、樟科植物樟Cinnamomum camphora(L.)
Presl.或上述两科同属其他植物经蒸谓得到的挥
发油⑴，系中国兽药典(2015年版)法定药材，桜
油中主要含桜油精(C10H18O),桜油的主要成分
是桜油精，核油精具有抗菌、杀虫、疏风解热、祛
湿解毒作用，同时对多种药物具有良好的透皮渗皿透作用⑵,其含量M70%(g/g),还含有柠檬烯、a-试菠烯等成分。
樟科植物樟所蒸憾的挥发油主要成
伍分也是桜油精，但还含有黄樟素等毒性成分，桃兒金娘种植物蓝桜所蒸馅的挥发油不含黄樟素等毒性成分⑶。
本试验所用桜油栓中主要成分蓝桜
油系从蓝桜叶茎叶提取的有效成分，本品具有明
显的清热解毒、抗菌消炎作用，主要用于预防和
治疗母畜的急、慢性子宫内膜炎、阴道炎、胎衣滞
留等。
本文主要对檯油栓对豚鼠的皮肤致敏性进
行试验观察，以期为临床安全用药提供依据。
1试验材料
1.1药物及试剂
核油栓，批号=20170710,规格8g/支，由浙江金大康动物保健品有限公司提供。
赋形剂空白栓
剂，批号=20170710,规格8g/支，由浙江金大康动
物保健品有限公司提供。
2,4_二硝基氯代苯，配
制1%为致敏浓度,0.1%为激发浓度。
1.2实验动物
健康白色豚鼠，体重250-300g,雌雄各半，由作者简介：赵丽丽(1981-),女，制药工程师，执业兽医师，
主要从事兽药的研究与开发。
E-mail:21866671@ 南京南京市江宁区青龙山动物繁殖场提供，试验期间提供全价颗粒料及新鲜蔬菜，自由采食、饮水。
2试验方法
2.1受试动物准备
给药前24h将豚鼠背部两侧用脱毛器去毛暴露皮肤，去毛面积为3cm x3cm,试验时将皮肤破损的动物剔除。
2.2分组及处理
取40只豚鼠随机分三组，各组数量及处理如下：
表1试验设计
组别空白对照组阳性对照组药物试验组数量(只)101020
处理赋形剂2,4-二硝基氯代苯檢油栓
(1)致敏接触：空白对照组与药物试验组分别取0.2g加热溶解，阳性对照组取0.2ml1%2,4-二硝基氯代苯均匀涂于豚鼠左侧脱毛区，用一层油纸及两层纱布覆盖，作用6h后，除去覆盖物；第7d、第14d以同样的方法处理。
(2)激发接触：于末次给受试物致敏后14d,分别取O.lg赋形剂与桜油栓,0.1%2,4-二硝基氯代苯均匀涂于豚鼠右侧脱毛区，用一层油纸及两层纱布覆盖，作用6h,用生理盐水洗去涂抹物.即刻观察激发接触后Oh、6h、24h、48h、72h皮肤过敏反应情况3)。
2.3观察指标
致敏后lh和24h及激发后24h和48h观察皮肤红斑、水肿和其他异常反应，按下表对红斑
2019年第6期（总第211期）
表2皮肤过敏反应评分标准
和水肿进行评分。
皮肤反应强度分值皮肤反应强度分值
红斑水肿
无红斑0无水肿0
轻微可见红斑1轻度水肿1
中度红斑2中度水肿2
严重红斑3严重水肿，轮廓清楚3
紫红色红斑到轻度4严重水肿，皮肤隆起1mm4
焦痂形成以上或有水泡或破溃
皮肤过敏反应最高分为8分
皮肤从反应平均分=（红斑形成总分+水肿形成总分）/动物数2.4结果评价
计算过敏反应发生率，根据表3判断过敏反应发生的程度。
表3皮肤过敏反应评价标准
过敏反应发生率％分级过敏反应强度
0-8I弱致敏
9-28n轻度致敏29-64m中度致敏65-80IV强致敏
81-100V极强致敏致敏率=出现红斑或红肿的动物数/该组动物总数
3结果
表4校油栓对皮肤的致敏性评价
组别皮肤过敏反应平均分=（红斑总分+水肿总分）/动物数致敏率/%
Oh6h24h48h72h
空白对照组000000
阳性对照组 2.1 2.5 4.9 5.2 3.9100药物试验组000000
试验结果表明，空白对照组、药物试验组在致敏后0h、6h、24h、48h、72h的反应平均分皆为0,而2,4-二硝基氯代苯阳性对照组则为2.1、2.5、4.9、5.2、3.9，出现明显红斑、水肿过敏症状；各组均未出现哮喘、站立不稳或休克等严重全身性过敏反应。
空白对照组及药物试验组的致敏率反应后，最后进行激发反应，结果显示阳性对照£组岀现红斑及水肿的过敏症状，表明试验所采用研的试剂及方法符合要求；而空白对照组和药物试兜验组未出现红斑和水肿等过敏反应症状。
本试验
结果表明桜油栓不引起皮肤接触性变态反应。
参考文献：
均为0。
4结论
皮肤过敏性试验是指经皮肤给受试物后，产生免疫学传递的皮肤反应。
按抗原与抗体或细胞反应的方式和补体是否参加等，将过敏反应分为I、n、in、iv四型。
其中I型过敏反应是了解得最多的一种过敏反应，目前采用的过敏试验方法多数是根据I型过敏反应发病机制的不同环节而设计建立的力。
试验中主要观察动物的皮肤初始接触受试物后，再进行受试物的激发接触，观察是否产生全身或局部过敏反应。
本文根据《中药、天然药物免疫毒性（过敏性、光过敏反应）研究的技术指导原则》的要求，采取主动皮肤过敏试验方法，在经过三次的致敏［1］中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典2015年版二部［S］
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［5］曹柳英，潘华新，梁瑞燕等.化痔栓局部刺激性与过敏性试验研究，深圳中西医结合杂志［J］,2006,16（5）:
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