PDA培养基
PDA培养基
gus基因存在于E.coli等一些细菌基因组内，编码β-葡萄糖苷酸酶。
β-葡萄糖苷酸酶是一个水解酶，以β-葡萄糖苷酸酯类物质为底物，其反应产物可用多种方法检测出来。
由于绝大多数植物没有检测到葡萄糖苷酸酶的背景活性，因此这个基因被广泛应用于基因调控的研究中。
可作为GUS报告基因检测方法根据gus基因检测所用的底物不同，可以选择三种检测方法：组织化学法、分光光度法和荧光法（灵感度为分光光度检测法最高），其中最为常用的是组织化学法。
组织化学法检测以5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸（X-Gluc）作为反应底物。
将被检材料用含有底物的缓冲液浸泡，若组织细胞发生了解gus 基因的转化，并表达出Gus，在适宜的条件下，该酶就可将X-Gluc水解生成蓝色产物，这是由其初始产物经氧化二聚作用于形成的靛蓝染料，它使具Gus活性的部位或位点呈现蓝色，用肉眼或在显微镜下可看到，且在一定程度下根据染色深浅可反映出Gus活性。
因此利用该方法可观察到外源基因在特定器官、组织，甚至单个细胞内的表达情况。
CTAB法的全称是十六烷基三甲基溴化铵法（Hexadecyltrimethy Ammonium Bromide）。
主要用于提取生物DNA步骤（1）2%CTAB抽提缓冲液在65℃水浴中预热。
（2）取少量实验材料（约300mg）置于研钵中，用液氮磨至粉状；（3）加入700ul的2%CTAB抽提缓冲液，轻轻搅动；（4）将磨碎液分倒入1.5 ml的灭菌离心管中，磨碎液的高度约占管的三分之二；（5）置于65℃的水浴槽或恒温箱中，每隔10 min轻轻摇动，30~60min 后取出；（6）冷却2 min后，加入氯仿-异戊醇（24：1）至满管，剧烈振荡2~3 min（若提取的是总基因组，则不能剧烈震荡。
），使两者混合均匀；（7）放入离心机中10 000 rpm离心10 min，与此同时，将600 ul的异丙醇加入另一新的灭菌离心管中；（8） 10 000 rpm离心1 min后，移液器轻轻地吸取上清夜，转入含有异丙醇的离心管内，将离心管慢慢上下摇动30 sec，使异丙醇与水层充分混合至能见到DNA絮状物；（9）10000 rpm离心1 min后，立即倒掉液体，注意勿将白色DNA沉淀倒出，将离心管倒立于铺开的纸巾上；（10）60 sec后，直立离心管，加入720ul的75%乙醇及80 ul 5 M的醋酸钠，轻轻转动，用手指弹管尖，使沉淀与管底的DNA块状物浮游于液体中；（11）放置30 min，使DNA块状物的不纯物溶解；（12）10000 rpm离心1 min后，倒掉液体，再加入800 ul 75%的乙醇，将DNA再洗 30 min；（13）10000 rpm离心30 sec后，立即倒掉液体，将离心管倒立于铺开的纸巾上；数分钟后，直立离心管，干燥DNA（自然风干或用风筒吹干）；（14）加入50 ul 0.5 × TE(含RNase)缓冲液，使DNA溶解，置于37℃恒温箱约15 h，使RNA消解；以上为通用CTAB法,实验时可根据不同材料加以改进,以获得最佳实验结果.TE Buffer配制：10 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0)1 mmol/L EDTA(pH 8.0)因为含有以上两种物质，所以称为TE。
pda培养基高压蒸汽灭菌条件
pda培养基高压蒸汽灭菌条件高压蒸汽灭菌是一种常见且有效的消毒方式，在实验室和医疗机构中被广泛使用。
PDA培养基作为一种常用的培养基，在微生物学实验中起到重要作用。
本文将探讨PDA培养基的高压蒸汽灭菌条件，以确保其有效性和可靠性。
一、PDA培养基简介PDA培养基，全称为Potato Dextrose Agar，是一种富含蔗糖和马铃薯提取物的培养基。
其成分中的葡萄糖和马铃薯提取物提供了微生物所需的营养物质，使其能够生长和繁殖。
PDA培养基广泛用于微生物的培养、分离和保存。
二、高压蒸汽灭菌原理高压蒸汽灭菌，又称为压力蒸汽灭菌或自动灭菌，是利用高压下的饱和水蒸气来灭菌的过程。
高压蒸汽能够迅速进入培养基中的微生物细胞内部，破坏其细胞膜和核酸结构，从而达到灭菌的效果。
三、PDA培养基高压蒸汽灭菌条件为确保PDA培养基高压蒸汽灭菌的有效性和可靠性，以下是常见的灭菌条件：1. 温度：灭菌温度一般在121摄氏度至135摄氏度之间。
较低的温度可能无法完全杀灭培养基中的微生物，而较高的温度则可能对培养基的成分产生不良影响。
2. 压力：灭菌时，压力一般控制在1至2大气压之间。
较低的压力可能导致灭菌不彻底，而较高的压力可能造成培养基容器的破裂。
3. 时间：灭菌时间取决于容器大小和灭菌设备性能。
一般情况下，灭菌时间应在15至30分钟之间。
过长的灭菌时间可能导致培养基过度干燥、水分流失。
4. 冷却：在灭菌结束后，应将培养基容器放置在适当的环境中进行冷却。
冷却过程应缓慢进行，以避免温差过大导致容器破裂。
四、PDA培养基高压蒸汽灭菌操作步骤以下是PDA培养基高压蒸汽灭菌的常见操作步骤：1. 准备好要灭菌的PDA培养基容器，并确保其密封良好。
2. 将PDA培养基容器放入高压蒸汽灭菌设备的灭菌腔内。
3. 根据实际需要，设置灭菌设备的温度、压力和时间。
4. 启动灭菌设备，等待设定的时间，进行高压蒸汽灭菌。
5. 灭菌结束后，关闭灭菌设备，待其自然冷却。
pda培养基结果讨论
pda培养基结果讨论PDA培养基结果讨论引言：PDA（Potato Dextrose Agar）培养基是一种常用的富含碳水化合物和氮源的培养基，广泛应用于真菌和霉菌的生长和研究中。
本文将对PDA培养基的结果进行讨论。
样品来源：本次实验使用了来自不同环境中的真菌和霉菌，包括从野外土壤、植物表面、室内空气等处采集到的样品。
实验方法：1.制备PDA培养基：将500g马铃薯切成小块，加入1000ml蒸馏水中煮沸30分钟，过滤后加入20g葡萄糖、20g琼脂和适量蒸馏水至1000ml。
pH值调整至5.6-5.8，压力灭菌15分钟。
2.接种：将不同来源的真菌和霉菌分别接种在PDA培养基上，并在恒温箱中以25℃孵育7天。
3.观察：观察各个接种点上是否有生长，并记录其形态特征。
结果：经过7天孵育后，我们发现所有样品都在PDA培养基上生长了，其中有些生长得非常快，甚至在2-3天内就出现了大量菌落。
以下是各个样品的观察结果：1.来自野外土壤的真菌：该样品的生长速度较快，7天内形成了大量白色菌落。
观察下来，这些菌落呈圆形或半圆形，表面光滑，质地柔软。
2.来自植物表面的霉菌：该样品在PDA培养基上生长得非常迅速，在3天内就出现了大量白色绒毛状的菌丝。
观察下来，这些菌丝呈无规则分支状，并且很容易扩散到周围。
3.来自室内空气的真菌：该样品在PDA培养基上生长得比较缓慢，在7天内只有少量白色菌落出现。
观察下来，这些菌落呈不规则形状，表面稍微粗糙。
讨论：1.PDA培养基适合真菌和霉菌的生长从我们实验结果可以看出，所有样品都在PDA培养基上成功地生长了。
这说明PDA培养基是一种适合真菌和霉菌生长的培养基，其富含碳水化合物和氮源的成分可以提供这些微生物所需的营养。
2.不同来源的样品生长速度不同我们发现，不同来源的样品在PDA培养基上生长速度有所不同。
来自野外土壤的真菌生长得比较快，而来自室内空气的真菌则生长得比较缓慢。
这可能与这些样品所处环境中微生物数量和种类有关。
pda培养基
pda培养基
PDA（Potato Dextrose Agar）是一种常用的培养基，以马铃薯和葡萄糖为主要成分。
它适用于真菌和霉菌的培养和鉴定。
PDA培养基的配方如下：
- 马铃薯提取物：200 g/L
- 葡萄糖：20 g/L
- 洋葱提取液：1 g/L
- 干酪膜素：0.1 g/L
- 硫酸镁：0.5 g/L
- 琼脂：15 g/L
- 蒸馏水：1000 mL
1
制备PDA培养基的步骤如下：
1. 将马铃薯洗净去皮，切成小块。
2. 将马铃薯块放入大容器中，加入适量的蒸馏水，煮沸1
小时，然后离心取得汁液。
3. 将马铃薯汁液过滤。
过滤液为马铃薯提取物。
4. 在一烧瓶中加入马铃薯提取物和葡萄糖，搅拌溶解。
5. 在另一烧瓶中加入洋葱提取液和硫酸镁，搅拌溶解。
6. 将两个烧瓶中的溶液混合在一起，调整pH值为5.6-6.2。
7. 在溶液中加入干酪膜素和琼脂，搅拌溶解。
8. 将培养基加热至沸腾，然后倒入培养瓶中。
9. 灭菌培养瓶，通常以121°C高压蒸汽灭菌20-30分钟。
PDA培养基可以用于分离和培养真菌，如酵母菌、霉菌和
子囊菌等。
它提供了合适的营养物质和适宜的条件，促进
真菌的生长和繁殖。
2。
pda培养基原理
pda培养基原理PDA（Pseudomonas agar）是一种常用的选择性和差异培养基，用于检测和分离假单胞菌属（Pseudomonas）细菌。
PDA培养基的原理是基于假单胞菌细菌的特性和对特定成分的反应。
PDA培养基的基本组成包括蛋白胨、胰蛋白胨、葡萄糖和琼脂。
用于选择性和差异分离假单胞菌的添加剂包括碱性亚碳酸、钾盐（如氯化钾）、蓝铜盐和石蕊素。
在PDA培养基中，蛋白胨和胰蛋白胨提供细菌生长所需的营养物质，如氨基酸和肽类。
葡萄糖作为碳源，为细菌提供能量。
琼脂是一种添加剂，可增加培养基的固体性，便于菌落生长和分离。
碱性亚碳酸是一种选择性抑制剂，可以抑制大多数非假单胞菌的细菌生长。
氯化钾是一种电导度指示剂，可以识别产生酸性物质的菌落。
蓝铜盐和石蕊素则是差异添加剂，可识别产生蓝色或绿色色素的假单胞菌。
假单胞菌属细菌在PDA培养基上的生长特征是形成典型的圆形菌落，菌落通常呈灰色到绿色。
一些假单胞菌属细菌还会产生特征性的蓝色或绿色色素，这是由蓝铜盐和石蕊素的作用所致。
在培养基中有选择性和差异添加剂的作用下，PDA培养基可以抑制其他非假单胞菌的细菌生长，并使假单胞菌属细菌在培养基上显示出特定的生长特征和颜色。
这样，可以通过观察菌落形貌和颜色来识别和分离假单胞菌属细菌。
对于一些特定的应用，PDA培养基还可以添加其他的抗生素和化合物，以提高选择性和差异性。
例如，可以添加青霉素或链霉素来选择抑制其他细菌的生长。
总而言之，PDA培养基利用选择性添加剂抑制非假单胞菌的生长，利用差异添加剂使假单胞菌在培养基上显示出特定的生长特征和颜色。
通过观察菌落形貌和颜色，可以从样品中分离和鉴定假单胞菌细菌。
PDA培养基在微生物实验和临床诊断中具有重要的应用价值。
pda培养基的注意事项
pda培养基的注意事项
当培养细菌使用PDA培养基时，有以下几个注意事项：
1. 储存温度：PDA培养基应该储存在干燥的地方，并且温度保持在常温或者低温（2-8°C）下。
避免暴露在高温或阳光直射的环境中，以免影响培养基的质量。
2. 避免受污染：在使用PDA培养基前，应该确保培养基无明显的异物或者污染。
避免接触到
空气中的微生物，以免造成不必要的细菌或霉菌污染。
3. 培养条件：PDA培养基适用于大多数细菌和霉菌的培养，应该根据所需菌株的要求设置适
当的培养条件，如温度、湿度和光照等。
不同菌株对培养条件的要求有所不同，请根据具体菌株的要求进行培养。
4. 无菌操作：在使用PDA培养基进行菌株的传代或分离时，应该进行无菌操作，以减少外部
细菌或霉菌的污染。
操作时应使用消毒的器具和培养皿，并在无菌工作台下进行操作。
5. 贮存注意：培养好的细菌或霉菌落应及时转移到其他适当的培养基或冷冻保存，避免长时间存放在PDA培养基上。
长时间存放可能导致菌株老化或者变异，影响其生长和代谢性能。
总之，使用PDA培养基进行菌株的培养时，需要注意储存温度、避免污染、设置适当的培养
条件、进行无菌操作以及及时转移和存储等方面的问题。
这些注意事项能够保证培养基的质量和菌株的纯度，同时也能提高培养结果的准确性和可靠性。
PDA培养基的配制及试管斜面制作
PDA培养基的配制及试管斜面制作PDA（Potato Dextrose Agar）是一种常用的培养基，用于微生物的培养和鉴定。
下面将详细介绍PDA培养基的配制方法以及试管斜面的制作步骤。
一、PDA培养基的配制方法：-马铃薯提取物：200g-葡萄糖：20g-琼脂：15g- 蒸馏水：1000ml1.将马铃薯削皮并切成小块，然后放入锅中加入足够的蒸馏水，煮沸30分钟，使马铃薯溶解。
2. 用纱布或过滤纸过滤烧开的马铃薯，收集滤液，将滤液浓缩至1000ml。
3.将浓缩后的马铃薯提取物与葡萄糖混合，搅拌均匀。
4.将琼脂加入马铃薯提取物和葡萄糖混合物中，加入足够的蒸馏水。
5.在烧杯中加热混合物，使琼脂完全溶解。
6.用自动调节器调节pH值为7.0-7.27.将混合物分装至试管或琼脂培养皿中。
8.将试管或琼脂培养皿密封并高压灭菌，高压灭菌时间为121°C，15-20分钟。
二、试管斜面的制作步骤：1.配制好的PDA培养基倒入装有试管的架子中，大约倒满1/3左右。
2.将试管架放入预热至沸腾状态的水浴中。
3.等待试管内的培养基开始沸腾，并保持沸腾状态2-3分钟。
4.将试管架从水浴中取出，让试管内的培养基冷却至接近凝固的状态。
5.倾斜试管架，使试管内的培养基斜倒在试管壁上，形成斜面。
6.等待培养基凝固完全。
7.使用无菌的环针或棉签，在斜面上划线隔离待培养的微生物。
8.将试管密封，高压灭菌。
PDA培养基配制和试管斜面制作之后，可以用于各种微生物的培养和鉴定。
在使用PDA培养基时，要注意严格无菌操作，避免外界的污染。
在制作试管斜面时，也要确保试管和培养基的完全无菌，以保证培养的准确性和可靠性。
PDA培养基
用 法： 1． 称取本品 46.0g，加入 1000ml 蒸馏水中， 115℃高压灭菌 20 分钟。 2． 取适宜稀释度样品液 1ml，加入到无菌 平皿中心，将冷至 45~50℃的 PDA 15~20ml 倾注于平皿中。旋转 平皿将培养基 与样液充 分混匀。 3． 凝固后，翻转平板，置于 36±1℃培养 40~48h。
使用须知： 请在培养基保质期内使用。
质量控制：
1． 外观
此干燥培养基的粉末均匀，具有良好的流动性。制备
好的平板呈透明无色或淡黄色。
2． 微生物实验
在 36 ±1 ℃培养 40~48 h：
质控菌株
CMCC 生长情况 菌落颜色 沉淀环
酵母菌
+++
白色
-
黑曲霉菌
98003
+++
黑色
-
马铃薯葡萄糖琼脂 Potato Dextrose Agar（PDA）
用 理：
产品编号： AKF003
容 量：250g
成 分：（g/L） 马铃薯浸粉･･････････････････････6.0g 葡萄糖･････････････････････････20.0g 琼脂･･･････････････････････････20.0g pＨ值 5.6±0.2･･･････････････････25℃
pda培养基的配制方法流程
1.马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)马铃薯(去皮)200g葡萄糖20g琼脂20g水1000mLpH值自然PDA培养基配制注意事项1.培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养24h，无菌生长者方可使用。
2.PDA培养基一般不需要调pH。
对于要调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pH。
如果培养基偏酸或偏碱时，可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。
调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。
3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养。
4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量为0.2g/L培养基，主要是为了抑制细菌的生长，减少干扰性。
15:49:27太珥日2016-4-26 15:49:27PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potato Dextrose Agar (Medium)，分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它属于固体培养基、半合成培养基。
PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势，一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。
PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g(提前搞碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量：固体培养基约为试管高度的1/5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。
(4)加棉塞培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。
细菌在pda培养基生长的条件
细菌在pda培养基生长的条件
PDA是一种常用的富含营养的培养基，适合于许多细菌的生长和培养。
以下是细菌在PDA培养基生长的条件：
1. pH值：PDA培养基的pH值通常在5.6-6.0之间，对于大多数细菌来说，这是一个适宜的pH范围。
2. 温度：细菌对生长温度的适应范围各不相同，但通常适合的温度在25-37℃之间。
在这个温度范围内，PDA培养基的温度应该保持一致，以便细菌能够稳定地生长。
3. 湿度：PDA培养基需要保持一定的湿度，以便细菌能够吸收足够的水分和营养物质。
通常情况下，PDA培养基的湿度应该在60-80%之间。
4. 氧气：大多数细菌需要空气中的氧气来进行呼吸作用，因此PDA培养基需要提供足够的氧气。
通常情况下，培养皿应该被松散地盖上，以便空气可以流通。
5. 光照：细菌对光照的需求各不相同，但通常不需要特别的光照条件。
在实验室中，通常使用白色荧光灯来提供足够的照明。
总的来说，细菌在PDA培养基上生长的条件需要注意温度、湿度、氧气和光照等方面，以便细菌能够稳定地生长和繁殖。
- 1 -。
pda培养基
指状青霉拉丁学名Penicillium digitatum分类地位：菌物界> 无性型真菌门> 半知菌纲> 壳霉目> 杯霉科> 指状青霉属菌落绒状,暗黄绿色,后变橄榄灰,有特殊的香味;分生孢子梗短,帚状枝大而不规则;产孢瓶体在不同的高度上形成;分生孢子卵形至圆柱形。
侵害柑橘果实,引起绿霉病。
培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含。
培养基有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及生长素和水等。
有的培养基还含有抗菌素、色素、激素和血清。
培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。
一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。
对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在2~6℃的冰箱内。
由于液体培养基不易长期保管，现在均改制成粉末。
培养基的配制1.配料配方换算→在容器中加入少量水〔蒸馏水，自然水〕→按照配方称取各种药品〔依次加入〕→加足所需水量《一药一勺，取药后立即盖上瓶盖》。
2.溶解淀粉溶解：少量冷水调成糊状加热溶解，特别是加有琼脂的培养基，一定要煮沸，琼脂的熔解温度95～97℃，且需要边加热边搅拌以防止烧焦。
3.调PH用1N的盐酸或的1N NaOH把培养基调节到所要求的值。
4.过滤滤纸或棉花进行过滤。
5.分装一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。
(1)三角瓶若作静置培养，则100 ml培养基/250 ml的三角瓶，最多不能超过150 ml培养基/250 ml的三角瓶，否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞，造成染菌；若作摇瓶培养，则15～20 ml培养基/250ml的三角瓶，保证通气良好。
(2)试管分装液体培养基一般装4～5 ml，约试管的1/4高度；固体斜面培养基一般装3～4 ml，约试管的1/5高度。
6.包扎分装好后，塞上棉塞，在用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。
PDA培养基
PDA培养基制作PDA培养基(马铃薯葡萄糖培养基) 马铃薯（去皮）200 g 、葡萄糖20 g、琼脂15～20g、蒸馏水1000 ml ，自然pH。
在PDA培养基配方中也可用蔗糖代替葡萄糖，这样配制的培养基也称为PSA培养基。
(1) 称量称量去皮马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂15～20 g。
提示：琼脂加入的量取决于琼脂的质量，质量好的15 g就够了，质量差的应适当增加。
另外，在夏天气温较高时，适当增加用量。
(2) 将马铃薯切成小块，放入锅中，加水1000 ml，煮沸30 min。
用纱布滤去马铃薯残渣。
(3) 将马铃薯滤液放回锅中，加入琼脂，加热熔化。
提示：在琼脂熔化的过程中，需要用玻璃棒不断搅拌，并控制火力不要使培养基溢出或烧焦。
(4) 加入葡萄糖葡萄糖溶解后，加入适量的水以补充加热过程中损失的水分，定容至1000 ml。
提示：通常在制作培养基的锅内用红蓝铅笔标记出不同体积的刻度，如1 000 ml、2000 ml 等，在定容时直接将水加至已标记的刻度即可。
(5) 分装根据不同的实验目的，可将配制的培养基分装于试管内或三角瓶内。
分装试管，其量为管高的1／5，灭菌后制成斜面。
分装三角瓶的容量以不超过三角瓶容积之一半为宜。
(6) 加塞在管口或瓶口塞上棉塞。
棉塞要用未脱脂的经弹松的棉花，棉塞可过滤空气，防止杂菌侵入并可减缓培养基水分的蒸发，故在植物病理学研究工作中普遍使用。
正确的棉塞是形状、划、、松紧与管口或瓶口完全适合，过紧时妨碍空气流通，操作不便；过松则达不到滤菌的目的，且棉塞过小往往容易掉进试管内。
正确的棉塞头较大，约有1／3在外，2／3在试管内。
分装过程中注意不要使培养基沾染在管(瓶)口上以免浸湿棉塞，引起污染。
(7) 包扎加塞后，将试管用线绳捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳扎好。
用记号笔注明培养基名称、配制日期、组别、制作人等。
(8) 灭菌将上述培养基以0.1MPa，121℃，高压蒸气灭菌20 min。
PDA培养基的配制方法和注意事项
PDA培养基的配制方法和注意事项PDA（Potato Dextrose Agar）是一种常用的真菌培养基，适用于培养和生长多种真菌菌株。
下面将介绍PDA培养基的配制方法以及注意事项。
配制方法：1. 准备所需材料：马铃薯（200g）、葡萄糖（20g）、琼脂（15g）、蒸馏水（1000ml）。
2.将马铃薯洗净，并切成块状。
3.将切好的马铃薯放入一个大锅中，加入足够的蒸馏水，使其完全浸泡。
4.使用中小火煮沸约30分钟，直到马铃薯变得软烂。
5.用纱布过滤掉马铃薯块，收集到的液体称为马铃薯提取液。
6.将马铃薯提取液加热到煮沸，并添加葡萄糖，搅拌使其充分溶解。
7.加入琼脂，搅拌溶解。
8.继续加热并保持搅拌，直到琼脂完全溶解。
9.关火冷却到40-45°C，搅拌均匀。
10.倒入培养皿或试管中，使其充分凝固。
11.将培养基容器包装好，使用锡箔纸和胶带封口，避免杂菌污染。
12.PDA培养基可以根据需要分装成适当大小的琼脂平板或斜面管，以供后续使用。
注意事项：1.所有试剂和仪器应尽可能消毒和无菌处理，以确保制备的PDA培养基无菌。
2.马铃薯切成块状是为了加速煮沸的过程，但切的过小可能导致提取液中的杂质过多，影响培养基质量。
3.煮沸的时间不宜过短，马铃薯需要彻底煮熟才能提取足够的营养物质。
4.搅拌是为了使葡萄糖和琼脂均匀溶解，并避免极度热区出现。
5.琼脂的溶解需要一定的时间和温度，不可急于冷却和使用。
6.冷却到40-45°C是为了防止高温对培养基中微生物的损害，也是为了避免由于过度冷却导致琼脂凝固太快。
7.封装培养基容器是为了防止杂菌和空气中的孢子进入培养基，避免细菌和真菌污染。
8.在分装培养基前，应将工作台面和器皿用酒精消毒，防止培养基受到外界污染。
9.PDA培养基在20-25°C的常温下可保存2-4周，或在4°C冰箱中保存2-3个月。
保存时不可直接暴露在光线下，避免褪色和干燥。
pda培养基的配制方法流程
p d a培养基的配制方法流程-标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII1.马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)马铃薯(去皮)200g葡萄糖20g琼脂20g水1000mLpH值自然PDA培养基配制注意事项1.培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养24h，无菌生长者方可使用。
2.PDA培养基一般不需要调pH。
对于要调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pH。
如果培养基偏酸或偏碱时，可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。
调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。
3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养。
4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量为0.2g/L培养基，主要是为了抑制细菌的生长，减少干扰性。
15:49:27太珥日 2016-4-26 15:49:27PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potato Dextrose Agar (Medium)，分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它属于固体培养基、半合成培养基。
PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势，一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。
PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g(提前搞碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量：固体培养基约为试管高度的1/5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。
PDA培养基
马铃薯葡萄糖琼脂培养基
目录
01 特点及用途
03 棉塞制作
02 配制方法
PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potato Dextrose Agar （Medium），依次对应马 铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
特点及用途
分装于试管一种常用的培养基，宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。 按物理性状划分：固体培养基 按培养基成分划分：半合成培养基
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1.培养基经灭菌后，必须放在37℃温箱培养24h，无菌生长者方可使用。 2.PDA培养基一般不需要调pH。对于要调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pH。如果培养基偏酸或偏碱时， 可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸或过碱破坏培养 基成分。 3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养。 4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量为0.2g/L培养基，主要是为了抑制细菌的生长，减少干扰性 PDA培养基的配制 (1)称量和熬煮 按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持2030min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。
配制方法
配制步骤
配方
其他事项
马铃薯 200克葡萄糖 20克 琼脂 15~20克蒸馏水1000毫升 自然PH
煮马铃薯块其做法是先洗净去皮,再称取200g马铃薯切成小块，加水煮烂（煮沸20~30分钟，能被玻璃棒戳破 即可），用八层纱布过滤，加热，再据实际实验需要加15-20g琼脂，继续加热搅拌混匀，待琼脂溶解完后，加入 葡萄糖，搅拌均匀，稍冷却后再补足水分至1000毫升，分装试管或者锥形瓶，加塞、包扎，（115℃）灭菌20分 钟左右后取出试管摆斜面或者摇匀，冷却后贮存备用。
PDA培养基的配制方法和注意事项
PDA培养基的配制方法和注意事项PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potat o Dextro se Agar (Medium)，分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它属于固体培养基、半合成培养基。
PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势，一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。
PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g(提前搞碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量：固体培养基约为试管高度的1/5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。
(4)加棉塞培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。
(5)包扎加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳或橡皮筋扎好，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
PDA培养基配制注意事项1.培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养24h，无菌生长者方可使用。
2.PDA培养基一般不需要调pH。
对于要调节p H的培养基，一般用pH试纸测定其p H。
pda培养基的制备
pda培养基的制备
关于PDA培养基的制备，本文将为您做出详细介绍。
PDA培养基全称为Potato Dextrose Agar，是一种以马铃薯粉、葡萄糖以及抗菌剂组成的培养基，用于细菌的培养及细菌的药敏试验实验。
首先，准备和整理所需要的相关药物和原料。
注意避免杂质和外来污染物的污染。
其次，熔融马铃薯粉，并将葡萄糖以及其他要求的干粉类药物加入到熔融后的马铃薯粉中去，同时缓慢调整其PH值至7点左右，然后封闭容器，等待其充分的松散溶解。
最后，将熔融与调节过PH值的混合液进行灭菌处理，然后将灭菌后的混合液进行滴定至一定的浓度，最后在有条件的情况下放置一定的时间，待其完全软化，即可取出即可使用。
以上就是关于PDA培养基制备的处理过程，该培养基有非常出色的抗菌特性，广泛应用于微生物实验室，能够有效地保护实验样件，便于科学实验的精准完成。
pda培养基配置的原理
pda培养基配置的原理
PDA培养基，通常也称为紫外通道培养基，是一种用于培养真菌菌株的液态培养基，是一种灰白色的粉末状的混合物，主要由酵母粉、蔗糖、凝胶、血清、矿质元素和碳水化合物组成。
其特性包括低氧，抑制杂菌的生长，促进真菌生长，还可以用来检测真菌菌株间的相互关系，如同它们之
间的系谱关系和共同特征。
PDA培养基在正确配制组成后，可以利用紫外
光照射这种培养基，以特殊的光照强度使背景发紫外反射，使图像突出显示；经过紫外照射变色，从而使得真菌和伪菌的形态明显区分开来，增强
菌类识别的准确性和效率，大大提高了识别菌类的速度。
首先，PDA培养基的成分配比必须谨慎控制，以确保培养基的稳定性。
这意味着主要原料（如碳水化物、矿质元素、血清、酵母粉和蔗糖）的含
量需要精确地控制在配置规定范围内。
比如，给定的亚硝酸盐对真菌的增
长具有显著的抑制作用，因此PDA培养基中的含量必须严格控制，以保证
培养基的可靠性和可控性。
此外，使用PDA培养基还需要考虑不同环境条件下的配置要求。
因此，在添加各种原料之前，首先检查培养基的pH值，防止不同种类的酵母形成
软化物，以及酵母毒素对真菌菌株的毒性影响，在环境pH值确定后，整体
培养组份比例应考虑到环境pH值影响，在使用硝酸钠时应控制在10毫克/升，另外要注意原料混合温度，以免改变培养基的性质。
最后，在配置PDA培养基时，还应注意维持良好的材料制备条件，以
免影响真菌的有效性和分类识别精度，确保高质量的培养基可以有效地提
升细菌的分类准确率。
在配制培养基时，需要保证过氧化物能量的首要性，才能达到预期的培养效果。
pda培养基原理
pda培养基原理
PDA培养基又称马铃薯葡萄糖琼脂培养基
用途：马铃薯葡萄糖琼脂用于供霉菌和酵母菌计数及分离培养
原理：马铃薯浸出粉有助于各种霉菌的生长;葡萄糖提供能源;琼脂是培养基的凝固剂;氯霉素可抑制细菌的生长。
配方
马铃薯300g(从中提取浸出粉)
葡萄糖20g
琼脂15g
氯霉素0.1g
最终pH6.0±0.2
LB琼脂培养基
用途：LB琼脂培养基用于一般细菌培养，特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。
原理：蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。
配方(每升)：
蛋白胨10g
酵母膏粉5g
氯化钠5g
葡萄糖1g
琼脂15g
最终pH7.0±0.2。
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gus基因存在于E.coli等一些细菌基因组内，编码β-葡萄糖苷酸酶。
β-葡萄糖苷酸酶是一个水解酶，以β-葡萄糖苷酸酯类物质为底物，其反应产物可用多种方法检测出来。
由于绝大多数植物没有检测到葡萄糖苷酸酶的背景活性，因此这个基因被广泛应用于基因调控的研究中。
可作为GUS报告基因检测方法根据gus基因检测所用的底物不同，可以选择三种检测方法：组织化学法、分光光度法和荧光法（灵感度为分光光度检测法最高），其中最为常用的是组织化学法。
组织化学法检测以5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸（X-Gluc）作为反应底物。
将被检材料用含有底物的缓冲液浸泡，若组织细胞发生了解gus 基因的转化，并表达出Gus，在适宜的条件下，该酶就可将X-Gluc水解生成蓝色产物，这是由其初始产物经氧化二聚作用于形成的靛蓝染料，它使具Gus活性的部位或位点呈现蓝色，用肉眼或在显微镜下可看到，且在一定程度下根据染色深浅可反映出Gus活性。
因此利用该方法可观察到外源基因在特定器官、组织，甚至单个细胞内的表达情况。
CTAB法的全称是十六烷基三甲基溴化铵法（Hexadecyltrimethy Ammonium Bromide）。
主要用于提取生物DNA步骤（1）2%CTAB抽提缓冲液在65℃水浴中预热。
（2）取少量实验材料（约300mg）置于研钵中，用液氮磨至粉状；（3）加入700ul的2%CTAB抽提缓冲液，轻轻搅动；（4）将磨碎液分倒入1.5 ml的灭菌离心管中，磨碎液的高度约占管的三分之二；（5）置于65℃的水浴槽或恒温箱中，每隔10 min轻轻摇动，30~60min 后取出；（6）冷却2 min后，加入氯仿-异戊醇（24：1）至满管，剧烈振荡2~3 min（若提取的是总基因组，则不能剧烈震荡。
），使两者混合均匀；（7）放入离心机中10 000 rpm离心10 min，与此同时，将600 ul的异丙醇加入另一新的灭菌离心管中；（8） 10 000 rpm离心1 min后，移液器轻轻地吸取上清夜，转入含有异丙醇的离心管内，将离心管慢慢上下摇动30 sec，使异丙醇与水层充分混合至能见到DNA絮状物；（9）10000 rpm离心1 min后，立即倒掉液体，注意勿将白色DNA沉淀倒出，将离心管倒立于铺开的纸巾上；（10）60 sec后，直立离心管，加入720ul的75%乙醇及80 ul 5 M的醋酸钠，轻轻转动，用手指弹管尖，使沉淀与管底的DNA块状物浮游于液体中；（11）放置30 min，使DNA块状物的不纯物溶解；（12）10000 rpm离心1 min后，倒掉液体，再加入800 ul 75%的乙醇，将DNA再洗 30 min；（13）10000 rpm离心30 sec后，立即倒掉液体，将离心管倒立于铺开的纸巾上；数分钟后，直立离心管，干燥DNA（自然风干或用风筒吹干）；（14）加入50 ul 0.5 × TE(含RNase)缓冲液，使DNA溶解，置于37℃恒温箱约15 h，使RNA消解；以上为通用CTAB法,实验时可根据不同材料加以改进,以获得最佳实验结果.TE Buffer配制：10 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0)1 mmol/L EDTA(pH 8.0)因为含有以上两种物质，所以称为TE。
作用：TE缓冲液是弱碱性,对DNA的碱基有保护性,(DNA在它是的稳定性较好,不易破坏其完整性或产生开环及断裂),包括提取好的DNA也要放在TE缓冲液是保存.MD板上生长速度明显快于MM板的克隆为His+Muts, 而MD板上生长速度与MM 板上生长速度相当的克隆为His+Mut+甲醇利用正常型His+Mut+和His+Muts的菌的生长状态不同的根本原因。
如果没有记错的话只是对甲醇的利用能力不同，所以，在MD板子上，由于加入的是葡萄糖，所有的菌生长状态应该是一样，为什么你有三个菌长的慢可能是你再转接的时候点上去的菌量少。
对于MM板，由于加入甲醇作为碳源，<A href="/">PDA</A> 所以利用能力强的菌His+Mut+会先长出来，理论上就是和在MD板子上涨的速度一致，实际上MM上的菌总体都会比MD上的长的慢。
而His+Muts型的菌长得非常慢，有时候甚至几乎在MM板上好像就没长。
所以，你要好好观察MM板上的菌，长得比较大的应该就是His+Mut+。
处方药所谓处方药是指需经过医生处方才能从药房或药店得到并要在医生监控或指导下使用的药物。
国际上通常用Prescription Drug.表示，简称R（即医生处方左上角常见到的R）。
处方药一般包括：刚上市的新药：对其活性、副作用还要进一步观察；可产生依赖性的某些药物：如吗啡类镇痛药及某些催眠安定药物等；药物本身毒性较大：如抗癌药物等；某些疾病必须由医生和实验室进行确诊，使用药物需医生处方，并在医生指导下使用，如心血管疾病药物等。
非处方药与处方药相对，非处方药是指那些消费者不需要持有医生处方就可直接从药房或药店购买的药物。
国际常用的术语有：Nonprescription Drug, Over the Counter Drug，简称为OTC Drug，现已经成为国际上非处方药简称的习惯用语。
这些药物大都属于如下情况：感冒、发烧、咳嗽；消化系统疾病；头痛；关节疾病；鼻炎等过敏症；营养补剂，如维生素、某些中药补剂等。
如何区别处方药和非处方药品牌、标识物、标签及含有OTC指导的用语在国际上，非处方药在品牌和标识物上有着自己独特的象征，如品牌应尽力统一，同时重视不断创新的提高知名度，以便在连锁店销售，同时也以品牌作为保护自己产品的措施。
标识物应能明显区分该药是作为处方药还是非处方药使用，如美国的处方药均要注明"联邦法规定无医生处方禁止调配"(Federal Law Prohibits Dispensing Without Prescription)，而非处方药标签上应有"适应的用药指导"(Adequate Direction foruse)，英国、德国、日本等国也有类似的字样或标识。
检签应以正常人能理解的文字表述，甚至加以图解，以便消费者凭标签便能正确使用非处方药。
美国食品与药品监督管理局提出非处方药标签的7项内容有：(1)产品名称；(2)生产商、包装商或分发商的名称、地址；(3)包装内容物；(4)所有有效成份的INN(国际非专利药物通用名)名称；(5)某些其它组分如乙醇、生物碱等的含量；(6)保护消费者的注意事项及忠告性内容；(7)安全、正确使用该药品适当的用药指导。
因此，人们在识别非处方药时一般可从其品牌、标识物、标签及含有OTC指导的用语中得以辩认。
沙保氏培养基Sabouraud's smedium 含4%葡萄糖 1.0%蛋白胨 pH4.0～6.0，用于真菌培养。
大多数真菌营养要求不高，在沙保氏培养基，22～28℃生长良好。
大多于1～2周出现典型菌落。
A.巧克力培养基：脑膜炎球菌B.伊红一美蓝培养基：鉴别大肠杆菌C.亚碲酸钾培养基：白喉杆菌D.沙保培养基：真菌E.疱肉培养基：厌氧细菌PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potato Dextrose Agar （Medium），依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
一种常用的培养基，宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。
按物理性状划分：固体培养基按培养基成分划分：半合成培养基配方马铃薯 200克葡萄糖 20克琼脂 15~20克自来水 1000毫升自然PH配制步骤其做法是称取200g马铃薯，洗净去皮切成小块，加水煮烂（煮沸20~30分钟，能被玻璃棒戳破即可），用四层纱布过滤，再据实际实验需要加葡萄糖和琼脂，继续加热搅拌混匀，稍冷却后再补足水分至1000毫升，分装试管，加塞、包扎，（121℃）灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。
其他事项1.培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养24h，无菌生长者方可使用。
2.PDA培养基一般不需要调pH。
对于要调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pH。
如果培养基偏酸或偏碱时，可用lmol／LNaOH或lmol／LHCL 溶液进行调节。
调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。
3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养。
4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量为0.1g/L培养基，主要是为了抑制细菌的生长，减少干扰性干燥培养基的制造方法申请号/专利号： 93104723本发明涉及用于培养真菌类微生物的马铃薯葡萄糖琼脂干燥培养基的制造方法。
马铃薯经匀浆、浸提、液化、糖化、胰酶消化、煮沸过滤、浓缩及喷雾干燥等生产工艺得到马铃薯营养提取粉，配以适量的葡萄糖和琼脂粉，就可制成ＰＤＡ干燥培养基。
本发明从马铃薯中提取的营养物质数量是常规方法的５－７倍。
本发明生产的ＰＤＡ干燥培养基具有使用方便、营养丰富、更宜于微生物生长发育、节省原料、便于贮运、适合工业化生产等优点划线法获得单菌落菌落接种平板划线分离法是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，<A href="/">手持机</A> 通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。
有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。
其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。
方式划线的形式有多种，可将一个平板分成四个不同面积的小区进行划线,第一区(A区)面积最小，作为待分离菌的菌源区，第二和第三区(B、C区)是逐级稀释的过渡区，第四区(D区)，则是关键区，使该区出现大量的单菌落以供挑选纯种用。
为了得到较多的典型单菌落,平板上四区面积的分配应是D＞C＞B＞A。
编辑本段步骤用接种环在平板培养基表面通过分区划线而达到纯化分离微生物的一种方法。
是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离的目的。
用于目的微生物的分离。
编辑本段特点快捷、方便、便于得到目的性状的单克隆。
编辑本段示例对大肠杆菌的分离实验器材大肠杆菌、枯草芽孢杆菌混合菌悬液牛肉膏蛋白胨培养基无菌培养皿，水浴锅，接种环等。
实验步骤1．融化培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基放入水浴中加热至融化。
2．倒平板：待培养基冷却至50℃左右，按无菌操作法倒2只平板(每皿约15m1)，平置，待凝固。
倒平板的方法：右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边，用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出，试管或瓶口保持对着火焰；然后用右手手掌边缘或小指与无名指夹住管(瓶)塞(也可将试管塞或瓶塞放在左手边缘或小指与无名指之间夹住。