探究PDA培养基的不同成分对不同的
PDA培养基
gus基因存在于E.coli等一些细菌基因组内,编码β-葡萄糖苷酸酶。
β-葡萄糖苷酸酶是一个水解酶,以β-葡萄糖苷酸酯类物质为底物,其反应产物可用多种方法检测出来。
由于绝大多数植物没有检测到葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此这个基因被广泛应用于基因调控的研究中。
可作为GUS报告基因检测方法根据gus基因检测所用的底物不同,可以选择三种检测方法:组织化学法、分光光度法和荧光法(灵感度为分光光度检测法最高),其中最为常用的是组织化学法。
组织化学法检测以5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸(X-Gluc)作为反应底物。
将被检材料用含有底物的缓冲液浸泡,若组织细胞发生了解gus 基因的转化,并表达出Gus,在适宜的条件下,该酶就可将X-Gluc水解生成蓝色产物,这是由其初始产物经氧化二聚作用于形成的靛蓝染料,它使具Gus活性的部位或位点呈现蓝色,用肉眼或在显微镜下可看到,且在一定程度下根据染色深浅可反映出Gus活性。
因此利用该方法可观察到外源基因在特定器官、组织,甚至单个细胞内的表达情况。
CTAB法的全称是十六烷基三甲基溴化铵法(Hexadecyltrimethy Ammonium Bromide)。
主要用于提取生物DNA步骤(1)2%CTAB抽提缓冲液在65℃水浴中预热。
(2)取少量实验材料(约300mg)置于研钵中,用液氮磨至粉状;(3)加入700ul的2%CTAB抽提缓冲液,轻轻搅动;(4)将磨碎液分倒入1.5 ml的灭菌离心管中,磨碎液的高度约占管的三分之二;(5)置于65℃的水浴槽或恒温箱中,每隔10 min轻轻摇动,30~60min 后取出;(6)冷却2 min后,加入氯仿-异戊醇(24:1)至满管,剧烈振荡2~3 min(若提取的是总基因组,则不能剧烈震荡。
),使两者混合均匀;(7)放入离心机中10 000 rpm离心10 min,与此同时,将600 ul的异丙醇加入另一新的灭菌离心管中;(8) 10 000 rpm离心1 min后,移液器轻轻地吸取上清夜,转入含有异丙醇的离心管内,将离心管慢慢上下摇动30 sec,使异丙醇与水层充分混合至能见到DNA絮状物;(9)10000 rpm离心1 min后,立即倒掉液体,注意勿将白色DNA沉淀倒出,将离心管倒立于铺开的纸巾上;(10)60 sec后,直立离心管,加入720ul的75%乙醇及80 ul 5 M的醋酸钠,轻轻转动,用手指弹管尖,使沉淀与管底的DNA块状物浮游于液体中;(11)放置30 min,使DNA块状物的不纯物溶解;(12)10000 rpm离心1 min后,倒掉液体,再加入800 ul 75%的乙醇,将DNA再洗 30 min;(13)10000 rpm离心30 sec后,立即倒掉液体,将离心管倒立于铺开的纸巾上;数分钟后,直立离心管,干燥DNA(自然风干或用风筒吹干);(14)加入50 ul 0.5 × TE(含RNase)缓冲液,使DNA溶解,置于37℃恒温箱约15 h,使RNA消解;以上为通用CTAB法,实验时可根据不同材料加以改进,以获得最佳实验结果.TE Buffer配制:10 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0)1 mmol/L EDTA(pH 8.0)因为含有以上两种物质,所以称为TE。
马铃薯葡萄糖琼脂PDA培养基配制课件
药用真菌培养
在药用真菌培养中,PDA培养基也得到了广泛应用,如灵芝 、冬虫夏草等。通过PDA培养基的精心配制和优化,可以获 得高质量的药用真菌菌丝体,为中药材的制备提供原料。
马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)培养基配制 课件
contents
目录
• PDA培养基简介 • PDA培养基的配制 • PDA培养基的使用方法 • PDA培养基的应用实例 • PDA培养基的优化与改进 • PDA培养基的发展前景与展望
01
PDA培养基简介
PDA培养基的定义
01
PDA培养基是一种常用的真菌培 养基,由马铃薯提取物、葡萄糖 和琼脂粉组成。
02
它是一种半固体培养基,用于支 持真菌的生长和繁殖。
PDA培养基的用途
PDA培养基广泛应用于真菌的分离 、纯化和鉴定。
它也是研究和了解真菌生物学特性的 重要工具。
PDA培养基的发展历程
PDA培养基由法国微生物学家查尔斯·路易斯·帕尼埃(Charles Louis Pastier)于 1880年代发明。
改进保存方式
优化PDA培养基的保存条 件和方法,延长其保存期 限,方便使用。
标准化与质量控制
制定PDA培养基的标准操 作程序和质量标准,确保 培养基的质量和可靠性。
06
PDA培养基的发展前景与 展望
PDA培养基的发展趋势
高效化
随着微生物培养技术的不断发展 ,PDA培养基的配方和制备工艺 将不断优化,提高培养效率,缩
2. 煮沸马铃薯
将切好的马铃薯块放入锅中,加水 煮沸15-20分钟,直到马铃薯变软。
蘑菇接种培养实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的本实验旨在掌握蘑菇接种和培养的基本技术,了解蘑菇的生长习性,提高对蘑菇菌种和培养基的认识,为今后蘑菇栽培提供理论依据和技术支持。
二、实验材料1. 实验仪器:无菌操作台、酒精灯、接种针、培养皿、试管、恒温培养箱、显微镜等。
2. 实验材料:蘑菇菌种(如平菇、香菇、金针菇等)、PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)、无菌水、生石灰、脱脂棉等。
三、实验方法1. 菌种活化(1)将蘑菇菌种取出,用无菌水清洗表面,然后用无菌脱脂棉擦干。
(2)将菌种接种到PDA培养基平板上,放入恒温培养箱中,在适宜温度下培养。
(3)观察菌落生长情况,当菌落生长旺盛时,即可用于接种培养。
2. 接种培养(1)将活化后的菌种接种到装有新鲜PDA培养基的试管中,放入恒温培养箱中培养。
(2)定期观察菌丝生长情况,当菌丝长满试管时,即可进行转接培养。
3. 转接培养(1)将长满菌丝的试管取出,用无菌水清洗表面,然后用无菌脱脂棉擦干。
(2)将菌丝接种到装有新鲜PDA培养基的培养皿中,放入恒温培养箱中培养。
(3)观察菌落生长情况,当菌落生长旺盛时,即可进行出菇培养。
4. 出菇培养(1)将长满菌丝的培养皿取出,用无菌水清洗表面,然后用无菌脱脂棉擦干。
(2)将菌丝接种到装有新鲜培养基的菌袋中,放入出菇室中培养。
(3)观察出菇情况,当菌丝长满菌袋,出现菇蕾时,即可收获。
四、实验结果与分析1. 菌种活化菌种在PDA培养基平板上生长良好,菌落生长旺盛,无污染现象。
2. 接种培养接种后的试管菌丝生长迅速,菌丝呈白色,菌丝体粗壮,无污染现象。
3. 转接培养转接后的培养皿菌丝生长良好,菌落生长旺盛,无污染现象。
4. 出菇培养出菇培养期间,菌丝长满菌袋,出现菇蕾,菇蕾生长旺盛,无污染现象。
五、实验结论通过本次实验,掌握了蘑菇接种和培养的基本技术,了解了蘑菇的生长习性。
实验结果表明,蘑菇菌种在适宜的条件下生长良好,出菇效果显著。
在今后的蘑菇栽培中,应根据蘑菇的生长习性,优化接种和培养条件,提高产量和品质。
pda培养基结果讨论
pda培养基结果讨论PDA培养基结果讨论引言:PDA(Potato Dextrose Agar)培养基是一种常用的富含碳水化合物和氮源的培养基,广泛应用于真菌和霉菌的生长和研究中。
本文将对PDA培养基的结果进行讨论。
样品来源:本次实验使用了来自不同环境中的真菌和霉菌,包括从野外土壤、植物表面、室内空气等处采集到的样品。
实验方法:1.制备PDA培养基:将500g马铃薯切成小块,加入1000ml蒸馏水中煮沸30分钟,过滤后加入20g葡萄糖、20g琼脂和适量蒸馏水至1000ml。
pH值调整至5.6-5.8,压力灭菌15分钟。
2.接种:将不同来源的真菌和霉菌分别接种在PDA培养基上,并在恒温箱中以25℃孵育7天。
3.观察:观察各个接种点上是否有生长,并记录其形态特征。
结果:经过7天孵育后,我们发现所有样品都在PDA培养基上生长了,其中有些生长得非常快,甚至在2-3天内就出现了大量菌落。
以下是各个样品的观察结果:1.来自野外土壤的真菌:该样品的生长速度较快,7天内形成了大量白色菌落。
观察下来,这些菌落呈圆形或半圆形,表面光滑,质地柔软。
2.来自植物表面的霉菌:该样品在PDA培养基上生长得非常迅速,在3天内就出现了大量白色绒毛状的菌丝。
观察下来,这些菌丝呈无规则分支状,并且很容易扩散到周围。
3.来自室内空气的真菌:该样品在PDA培养基上生长得比较缓慢,在7天内只有少量白色菌落出现。
观察下来,这些菌落呈不规则形状,表面稍微粗糙。
讨论:1.PDA培养基适合真菌和霉菌的生长从我们实验结果可以看出,所有样品都在PDA培养基上成功地生长了。
这说明PDA培养基是一种适合真菌和霉菌生长的培养基,其富含碳水化合物和氮源的成分可以提供这些微生物所需的营养。
2.不同来源的样品生长速度不同我们发现,不同来源的样品在PDA培养基上生长速度有所不同。
来自野外土壤的真菌生长得比较快,而来自室内空气的真菌则生长得比较缓慢。
这可能与这些样品所处环境中微生物数量和种类有关。
pda培养基原理
pda培养基原理PDA(Pseudomonas agar)是一种常用的选择性和差异培养基,用于检测和分离假单胞菌属(Pseudomonas)细菌。
PDA培养基的原理是基于假单胞菌细菌的特性和对特定成分的反应。
PDA培养基的基本组成包括蛋白胨、胰蛋白胨、葡萄糖和琼脂。
用于选择性和差异分离假单胞菌的添加剂包括碱性亚碳酸、钾盐(如氯化钾)、蓝铜盐和石蕊素。
在PDA培养基中,蛋白胨和胰蛋白胨提供细菌生长所需的营养物质,如氨基酸和肽类。
葡萄糖作为碳源,为细菌提供能量。
琼脂是一种添加剂,可增加培养基的固体性,便于菌落生长和分离。
碱性亚碳酸是一种选择性抑制剂,可以抑制大多数非假单胞菌的细菌生长。
氯化钾是一种电导度指示剂,可以识别产生酸性物质的菌落。
蓝铜盐和石蕊素则是差异添加剂,可识别产生蓝色或绿色色素的假单胞菌。
假单胞菌属细菌在PDA培养基上的生长特征是形成典型的圆形菌落,菌落通常呈灰色到绿色。
一些假单胞菌属细菌还会产生特征性的蓝色或绿色色素,这是由蓝铜盐和石蕊素的作用所致。
在培养基中有选择性和差异添加剂的作用下,PDA培养基可以抑制其他非假单胞菌的细菌生长,并使假单胞菌属细菌在培养基上显示出特定的生长特征和颜色。
这样,可以通过观察菌落形貌和颜色来识别和分离假单胞菌属细菌。
对于一些特定的应用,PDA培养基还可以添加其他的抗生素和化合物,以提高选择性和差异性。
例如,可以添加青霉素或链霉素来选择抑制其他细菌的生长。
总而言之,PDA培养基利用选择性添加剂抑制非假单胞菌的生长,利用差异添加剂使假单胞菌在培养基上显示出特定的生长特征和颜色。
通过观察菌落形貌和颜色,可以从样品中分离和鉴定假单胞菌细菌。
PDA培养基在微生物实验和临床诊断中具有重要的应用价值。
PDA培养基的配制
PDA培养基的配制
•2008年12月10日
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母种培养基的配制
同一种菌类培养基的配方虽然有多种多样,但必须含有各种菌丝生长所需要的养分、水分和适宜的酸碱度。
马铃薯、葡萄糖、琼脂作为各类母种的培养基最为普遍,菌丝都能正常生长。
现将常用的培养基配方和配制方法举例介绍。
1.马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)
马铃薯(去皮):200g
葡萄糖:20g
琼脂:20g
水:1000mL
pH值:自然
2.马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA培养基)
马铃薯(去皮):200g
蔗糖:20g
琼脂:20g
水:1000mL
pH值:自然
以上两种培养基广泛应用于各种菇、耳、猴头类食用菌的培养。
其具体制作方法是:将200g马铃薯去皮,去芽眼,切成小条放入铝锅中,加入1000mL水,煮沸20~30分钟左右至马铃薯软而不烂时,用6~8层纱布过滤,取滤汁于锅中,补水至1000mL,加入琼脂熔化,再加入糖搅拌均匀,趁热分装于试管中。
牛肉膏蛋白胨培养基(主要是培养细菌用的)
牛肉膏 5.0g
蛋白胨10.0g NaCl 5g
水1000mL pH 7.2~7.4。
黄绿青霉菌产毒影响因素的实验观察的开题报告
黄绿青霉菌产毒影响因素的实验观察的开题报告
黄绿青霉菌是一种广泛分布于自然环境中的真菌,常见于土壤、水果、豆类等食物的表面。
该菌属于细菌属中的青霉菌科,产生一类名为
黄曲霉毒素的毒素,对人体健康具有潜在危害,因此引起了广泛的关注。
在本次实验中,我们将研究影响黄绿青霉菌产毒的因素,包括温度、湿度、培养基成分等因素。
本实验的目的是通过实验观察,探究不同因
素对黄绿青霉菌产毒的影响,以便更好地控制这种真菌的产生和扩散,
保障人体健康安全。
具体实验步骤如下:
1.准备培养基。
选择适宜的培养基是实验中非常重要的一步。
我们
将选择两种常用的培养基,分别为SDA(琼脂糖琼胶培养基)和PDA (马铃薯葡萄糖琼脂培养基)。
在实验前需用高压蒸汽把培养皿杀菌并
在无菌条件下准备好培养基。
2.接种黄绿青霉菌。
将黄绿青霉菌菌种接种在两种培养基上,培养
基分别会让真菌生长出不同的菌落形态,便于判断和比较。
3.控制温度和湿度。
将PDA培养基的组置于温度28℃,湿度70%
的条件下,将SDA培养基组置于温度22℃,湿度80%的条件下。
4.进行观察记录。
观察两种培养基中的黄绿青霉菌分别会在哪个条
件下产生黄曲霉毒素,记录菌落形态和颜色,记录产毒的变化和时间等。
5.结果分析。
根据实验结果,分析不同因素对黄绿青霉菌产毒的影响,从而制定出一系列控制方法,包括控制温湿度、选择适宜的培养基
等方法。
通过这些实验,我们可以更全面地了解黄绿青霉菌产毒的影响因素,从而更好地控制其产生和扩散,使环境更加健康和安全。
青霉菌实验报告
一、实验目的1. 学习并掌握观察青霉菌形态的基本方法。
2. 了解青霉菌的形态特征及其分类依据。
3. 探究不同培养基对青霉菌生长的影响。
二、实验原理青霉菌(Penicillium)是一类广泛分布于自然界中的真菌,它们能够产生抗生素,如青霉素。
青霉菌的菌丝体由许多菌丝组成,分为基内菌丝和气生菌丝,气生菌丝上分化出繁殖菌丝,产生孢子。
青霉菌的孢子形态多样,是分类的重要依据。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 青霉菌菌种- 马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基- 蛋白胨酵母膏琼脂(PYA)培养基- 营养琼脂培养基- 玉米粉琼脂培养基- 生理盐水- 玻璃培养皿- 灭菌棉塞- 酒精灯- 显微镜- 刮刀- 滴管- 纸巾2. 实验仪器:- 烧杯- 研钵- 移液器- 烘箱- 电热恒温水浴锅四、实验方法1. 菌种活化:将保存的青霉菌菌种接种于PDA培养基上,置于恒温培养箱中培养,待菌落长出后,进行观察。
2. 观察青霉菌形态:- 将活化后的青霉菌菌落用刮刀刮取少量菌丝,制成临时玻片。
- 在显微镜下观察菌丝的形态,包括菌丝的粗细、颜色、有无分隔等。
- 观察孢子的形态,包括孢子的形状、大小、颜色等。
3. 不同培养基对青霉菌生长的影响:- 将活化后的青霉菌菌种分别接种于PDA、PYA、营养琼脂和玉米粉琼脂培养基上。
- 将培养皿置于恒温培养箱中培养,观察不同培养基上青霉菌的生长情况。
五、实验结果1. 青霉菌菌落特征:- 青霉菌菌落呈灰绿色,表面有绒毛状菌丝。
- 菌丝直径约3-5μm,有分隔。
- 孢子呈椭圆形或圆柱形,大小约2-4μm,绿色。
2. 不同培养基对青霉菌生长的影响:- PDA培养基上青霉菌生长良好,菌落较大,菌丝发达。
- PYA培养基上青霉菌生长较差,菌落较小,菌丝较细。
- 营养琼脂培养基上青霉菌生长一般,菌落中等大小,菌丝中等发达。
- 玉米粉琼脂培养基上青霉菌生长最差,菌落较小,菌丝稀疏。
六、实验讨论1. 通过观察青霉菌的形态特征,可以初步判断其种类。
pda培养基的用途
pda培养基的用途PDA培养基(Potato Dextrose Agar)是一种常用的微生物培养基,由马铃薯、葡萄糖和琼脂组成。
它可以提供微生物生长所需的营养物质,并且具有一定的选择性和差异性,因此在微生物学和生物技术领域有广泛的应用。
下面我们将介绍PDA培养基的几个主要用途。
1. 菌落观察与鉴定PDA培养基适合于菌落的生长和观察,其透明度和质地便于观察菌落的形态、颜色和质地特征。
通过菌落的形态特征、生长速度、颜色变化等可以初步判断出菌落所属的科、属或种。
此外,PDA培养基还可用于菌种的纯化和保存,为进一步的鉴定提供基础。
2. 真菌培养与研究PDA培养基对真菌具有较好的适应性,可以提供真菌生长所需的碳水化合物和其他营养物质。
许多真菌在PDA培养基上形成特征性的菌丝和孢子结构,便于观察和研究。
此外,PDA培养基还可以用于真菌的分离与筛选,为真菌资源的研究和利用提供支持。
3. 细菌的生长和筛选尽管PDA培养基主要适用于真菌的培养,但也适用于一些细菌的生长。
例如,一些革兰氏阳性菌和嗜热菌株在PDA培养基上也能够生长。
此外,PDA培养基中添加适当的抗生素或其他抑菌剂,可以用于细菌的筛选和鉴定。
4. 食品和饮料行业的微生物检测PDA培养基被广泛应用于食品和饮料行业的微生物检测中。
通过将食品或饮料样品接种在PDA培养基上,可以快速筛选出其中的微生物菌落。
比如,霉菌和酵母菌在PDA培养基上生长较快,并形成特征性的菌落。
这些菌落的观察和计数可以为食品和饮料的质量控制提供重要的依据。
5. 生物学实验的基础培养基PDA培养基是许多生物学实验的基础培养基之一。
在细胞培养、基因工程、发酵工艺等实验中,需要使用到纯净的培养基来培养目标微生物或细胞。
PDA培养基可以通过灭菌处理得到无菌状态,从而提供一个适宜的生长环境。
PDA培养基作为一种常用的微生物培养基,在微生物学和生物技术领域有着广泛的应用。
它不仅适用于菌落的观察和鉴定,还可以用于真菌和细菌的培养、筛选和研究。
多组学分析揭示三七镰刀菌属致病菌的生物学差异
核农学报2024,38(3):0443~0454Journal of Nuclear Agricultural Sciences多组学分析揭示三七镰刀菌属致病菌的生物学差异张丽燕聂红艳闻进蕊廖洪新凌翠琼徐福荣董鲜 *(云南中医药大学中药学院,云南昆明650500)摘要:镰刀菌属病原菌是三七根腐病的主要病原菌。
为探究不同种镰刀菌之间产生生物学差异的机制,本研究结合多组学数据,对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporium)、层出镰刀菌(Fusarium proliferatum)和腐皮镰刀菌(Fusarium solani)的生物学特性进行分析。
采用马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基培养菌株,同时对孢子萌发率、菌丝生长、孢子产量及致病力进行测定,并采用广泛靶向代谢组学和转录组学,对尖孢镰刀菌、层出镰刀菌和腐皮镰刀菌3种镰刀菌9个样本进行转录组高通量测序及代谢物分析,比较镰刀菌属不同种间的差异表达基因(DEGs)和差异代谢物(DAMs),并结合GO和KEGG数据库对DEGs和DAMs进行功能注释和代谢通路分析。
结果显示,孢子萌发率表现为:尖孢镰刀菌<层出镰刀菌<腐皮镰刀菌;菌丝生长及孢子产量表现为:尖孢镰刀菌>层出镰刀菌>腐皮镰刀菌;致病力表现为:尖孢镰刀菌>腐皮镰刀菌>层出镰刀菌。
DAMs分析结果表明,氨基酸类化合物是主要的差异代谢物,其成分和含量的差异是造成这3种镰刀菌生长差异的主要因素。
转录组数据结果显示,不同种镰刀菌中的DEGs功能主要与核糖体和氧化磷酸化相关。
本研究结果为三七镰刀菌属根腐病害的防控提供了理论依据。
关键词:三七;根腐病;代谢组;转录组;氨基酸DOI:10.11869/j.issn.1000‑8551.2024.03.0443三七[Panax notogineseng (Burk.) F.H. Chen]是我国传统名贵中药材,为五加科多年生草本植物,具化瘀止血、补血活血定痛的功效[1]。
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制
三、菌种生产常用的设备和用具 6、常用的消毒药品 、
石炭酸: ⑷ 5%石炭酸: 喷洒墙壁 、 地面及擦洗桌面等 , 也 石炭酸 喷洒墙壁、地面及擦洗桌面等, 可用来苏尔代替; 可用来苏尔代替; ⑸ 2%来苏尔、新洁尔灭:用法同上; 来苏尔、 来苏尔 新洁尔灭:用法同上; 甲醛(福尔马林) ⑹ 甲醛 ( 福尔马林 ) : 用于菇房和接种箱等空气消 毒; 方法:关闭门窗消毒,自行气化; 方法:关闭门窗消毒,自行气化; 用量: 甲醛+ 立方米。 用量:10ml甲醛+5g KMnO4/立方米。 甲醛
四、母种生产技术
②综合马铃薯培养基 马 铃 薯 200g 、 葡 萄 糖 ( 或 蔗 糖 ) 20g 、 KH2PO4 2g、MgSO4 0.5g、维生素B1 10mg、 、 、维生素 、 琼脂20g、H2O 1000ml、pH自然。 自然。 琼脂 、 、 自然 适合培养草菇、猴头菌、 适合培养草菇、猴头菌、灵芝及各种食用菌菌 种分离、保藏。 种分离、保藏。
四、母种生产技术
食用菌母种培养基的种类繁多, 食用菌母种培养基的种类繁多 ,由于不同营养 类型的食用菌对营养物质的要求不同, 所以, 类型的食用菌对营养物质的要求不同 , 所以 , 在 培养不同食用菌母种时, 培养不同食用菌母种时 , 应选择适宜该菌种的培 养基。 养基。 母种培养基要求营养丰富、 完全、 氮源、 母种培养基要求营养丰富 、 完全 、 氮源 、 维生 素的比例应高。 素的比例应高。 现将食用菌常用的母种培养基列举如下 :
实验1(PDA培养基的制备)ppt课件
5、熬琼脂、定容 在沸腾状态下加入琼脂10g,直到琼脂完全溶化为止,
定容至500ml。
9
6、营养液分装 (1)用注射器分装(直接分装) (2)分装标准:分装量为试管长度的1/4~1/5。注意培养 基不能沾污试管口。
10
(3)塞棉塞 棉塞松紧适度,1/3在管外,2/3在管内。
(4)扎捆 5~6支试管捆在一起,棉塞上包好防水纸,直立放入高压 灭菌锅中。
11
③灭菌处理 在1.0~1.5 kg/cm2压力下维持20min。
12
高压灭菌锅:
(1)手提式 (2)立式 (3)卧式
13
④ 摆斜面
灭菌结束后锅盖开1/5的小缝,用余热烘干报纸和 棉塞,然后摆斜面。斜面长是试管总长的1/2。
14
7、检查灭菌效果 28℃培养2~3天。
15
3
三、培养基的制作
1、营养液制作 (1)准备工作
条状
粉状4
5
2、称量、材料预处理 按配方准确称量各营养物质。将马铃
6
3、熬煮 将切好的马铃薯块加适量水后放入电饭锅中,煮至酥而 不烂。
7
4、过滤、加可溶药物 用3层沙布过滤,取滤汁,放在电饭锅中加入糖10g。
自然ph粉状条状三培养基的制作1营养液制作1准备工作2称量材料预处理按配方准确称量各营养物质
实验一 PDA斜面培养基的制备
1
一、实验目标: 1、掌握PDA斜面培养基的制备。 2、了解培养基的多样性。 二、仪器设备与材料 电磁炉、锅、高压灭菌锅; 葡萄糖、琼脂、马铃薯。
2
三、PDA培养基的配方 马铃薯 200克 ;葡萄糖 20克 ; 琼脂 15~20克; 自来水 1000毫升 ; 自然PH 。
(完整版)PDA培养基的配方及配制方法
PDA培养基的配方及配制方法PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它属于固体培养基、半合成培养基.PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势,一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛.PDA培养基的配方土豆 200g葡萄糖 20g琼脂 15~20g水 1000mLpH值自然PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20—30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝.(4)加棉塞培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。
(5)包扎加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
杀死真菌的实验报告
一、实验目的1. 探究不同杀菌剂对真菌的杀灭效果。
2. 分析不同杀菌剂对真菌生长的影响。
3. 为实际生产中真菌防治提供理论依据。
二、实验材料1. 真菌菌种:黑曲霉(Aspergillus niger)、青霉(Penicillium chrysogenum)2. 菌种培养基:PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)3. 杀菌剂:苯甲酸、甲苯、氯仿、甲醛、高锰酸钾4. 仪器与设备:恒温培养箱、电子天平、移液器、培养皿、无菌操作台等三、实验方法1. 菌种活化:将保藏的真菌菌种接种于PDA培养基上,在恒温培养箱中培养至菌丝长满平板。
2. 配制杀菌剂:按照一定比例配制不同浓度的杀菌剂溶液。
3. 实验分组:将活化后的真菌菌种分别接种于PDA培养基上,每个培养基加入不同浓度的杀菌剂溶液,同时设置不加杀菌剂的处理组作为对照。
4. 观察记录:在恒温培养箱中培养一定时间,观察记录不同杀菌剂对真菌生长的影响。
5. 数据分析:采用SPSS软件对实验数据进行统计分析,比较不同杀菌剂对真菌的杀灭效果。
四、实验结果与分析1. 苯甲酸对真菌的杀灭效果苯甲酸对黑曲霉和青霉的杀灭效果较好,在浓度为1000mg/L时,黑曲霉和青霉的生长受到显著抑制,菌丝生长速度明显降低。
2. 甲苯对真菌的杀灭效果甲苯对黑曲霉和青霉的杀灭效果次之,在浓度为1000mg/L时,黑曲霉和青霉的生长受到一定程度的抑制,菌丝生长速度有所降低。
3. 氯仿对真菌的杀灭效果氯仿对黑曲霉和青霉的杀灭效果较差,在浓度为1000mg/L时,黑曲霉和青霉的生长基本不受影响。
4. 甲醛对真菌的杀灭效果甲醛对黑曲霉和青霉的杀灭效果较好,在浓度为1000mg/L时,黑曲霉和青霉的生长受到显著抑制,菌丝生长速度明显降低。
5. 高锰酸钾对真菌的杀灭效果高锰酸钾对黑曲霉和青霉的杀灭效果较好,在浓度为1000mg/L时,黑曲霉和青霉的生长受到显著抑制,菌丝生长速度明显降低。
五、结论1. 苯甲酸、甲醛、高锰酸钾对真菌的杀灭效果较好,可作为真菌防治的候选杀菌剂。
PDA培养基的配方及配制方法
PDA培养基的配方及配制方法
PDA(Potato Dextrose Agar)培养基是一种常用的微生物培养基,广泛用于真菌和霉菌的分离和培养。
它由马铃薯提取物、葡萄糖和琼脂组成,营养丰富,pH较为中性,适合各种真菌和霉菌的生长。
以下是PDA 培养基的配方及配制方法。
配方:
1.马铃薯提取物:200克
2.葡萄糖:20克
3.琼脂:20克
4.蒸馏水:1000毫升
配制方法:
1.将200克马铃薯削皮并切成块。
2.将马铃薯块加入1000毫升蒸馏水中,煮沸30分钟。
3.将马铃薯块滤除,保留煮沸后的马铃薯水。
4.将200克煮沸后的马铃薯水搅拌均匀,加入20克葡萄糖和20克琼脂。
5.将培养基混合物加热至化解琼脂,并搅拌均匀。
6.将培养基装入培养瓶中。
7.用适当装置和工具对装有培养基的瓶子进行高压灭菌,常压培养2小时。
8.灭菌完成后,将培养基倒入培养皿中,密封。
以上是PDA培养基的配方及配制方法。
使用培养基时要注意,避免交叉污染和外界污染。
同时,根据需要可以调整配方中的成分浓度,以适应不同微生物的要求。
pda培养基
指状青霉拉丁学名Penicillium digitatum分类地位:菌物界> 无性型真菌门> 半知菌纲> 壳霉目> 杯霉科> 指状青霉属菌落绒状,暗黄绿色,后变橄榄灰,有特殊的香味;分生孢子梗短,帚状枝大而不规则;产孢瓶体在不同的高度上形成;分生孢子卵形至圆柱形。
侵害柑橘果实,引起绿霉病。
培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含。
培养基有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及生长素和水等。
有的培养基还含有抗菌素、色素、激素和血清。
培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。
一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。
对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在2~6℃的冰箱内。
由于液体培养基不易长期保管,现在均改制成粉末。
培养基的配制1.配料配方换算→在容器中加入少量水〔蒸馏水,自然水〕→按照配方称取各种药品〔依次加入〕→加足所需水量《一药一勺,取药后立即盖上瓶盖》。
2.溶解淀粉溶解:少量冷水调成糊状加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95~97℃,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。
3.调PH用1N的盐酸或的1N NaOH把培养基调节到所要求的值。
4.过滤滤纸或棉花进行过滤。
5.分装一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。
(1)三角瓶若作静置培养,则100 ml培养基/250 ml的三角瓶,最多不能超过150 ml培养基/250 ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15~20 ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。
(2)试管分装液体培养基一般装4~5 ml,约试管的1/4高度;固体斜面培养基一般装3~4 ml,约试管的1/5高度。
6.包扎分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。
生物培养真菌实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习并掌握真菌的培养方法。
2. 观察并描述真菌的生长特征。
3. 探究不同环境条件下真菌的生长情况。
二、实验材料1. 真菌样品:香菇、金针菇、平菇等。
2. 培养基:马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)。
3. 实验器材:培养皿、无菌棉签、镊子、酒精灯、显微镜等。
三、实验步骤1. 准备培养基:将PDA培养基称取适量,加水溶解后,分装到培养皿中,待冷却凝固。
2. 分离真菌:取适量真菌样品,用无菌镊子将菌丝撕成小块,放入培养基中。
3. 接种:用无菌棉签将菌丝均匀涂布在培养基表面。
4. 培养条件:将培养皿放入恒温培养箱中,保持适宜的温度和湿度。
5. 观察与记录:定期观察真菌的生长情况,记录菌落形态、颜色、大小等特征。
6. 观察真菌生殖结构:将生长良好的菌落用显微镜观察,观察其生殖结构。
7. 分析与讨论:分析不同环境条件下真菌的生长情况,讨论影响真菌生长的因素。
四、实验结果1. 香菇:菌落呈白色,菌丝较粗,生长速度较快,菌落边缘整齐。
2. 金针菇:菌落呈淡黄色,菌丝较细,生长速度较快,菌落边缘不整齐。
3. 平菇:菌落呈灰白色,菌丝较粗,生长速度较快,菌落边缘整齐。
4. 镜下观察:香菇、金针菇、平菇的菌丝均具有分支,菌丝表面有孢子囊,内含大量孢子。
五、分析与讨论1. 实验结果表明,香菇、金针菇、平菇在不同的培养基上均能生长,且生长速度较快。
2. 香菇、金针菇、平菇的菌落形态、颜色、大小等特征存在差异,这与它们的生物学特性有关。
3. 实验过程中,温度、湿度等环境条件对真菌的生长有较大影响。
适宜的温度和湿度有利于真菌的生长。
4. 通过观察真菌的生殖结构,可以发现真菌具有分支的菌丝和孢子囊,内含大量孢子,这是真菌繁殖的方式。
六、实验结论1. 真菌的培养方法简单易行,可通过观察其生长特征了解其生物学特性。
2. 环境条件对真菌的生长有较大影响,适宜的温度和湿度有利于真菌的生长。
3. 通过实验,我们掌握了真菌的培养方法,了解了真菌的生长特征和繁殖方式。
发芽马铃薯PDA培养基对几种霉菌培养效果的影响
I n l f u e n c e o n C u l t u r e E f e c t o f S e v e r a l Mo u l d s o f Ge r mi n a t i o n o f
P o t a t o P DA Me d i u m
第 3 期 ( 总第 4 2 7 期) 2 0 1 7年 3月
农产 品加工
F a r m P r o d u c t s P r o c e s s i n g
N0 3
Ma r .
文章编号 :1 6 7 1 — 9 6 4 6( 2 0 1 7 )0 3 a 一 0 0 2 2 — 0 3
马铃薯发芽过程还原糖含量和淀粉酶活性升高 ;发芽马铃薯 P D A培养基可以加快霉菌生长速度 。
关键词 :发芽马铃薯 ;P D A培养基 ;霉菌 ;培养效果
中 图 分 类 号 :¥ 5 3 2 文 献标 志码 :A d o i :1 0 . 1 6 6 9 3 / j . c n k i . 1 6 7 1 — 9 6 4 6 ( X) . 2 0 1 7 . 0 3 . 0 0 7
c u l t u r e o f t h e mo ld u s i n a b o v e P DA c u l t u r e me d i u m. Th e c o n t e n t o f r e d u c i n g s u g a r a n d he t a my l a s e a c t i v i t y o f d i f e r e 基对几 种霉菌培 养效 果 的影响
杨薇红 , 童 斌 ,张 小华 ,陈 赓 ,高 强 ,徐 中
( 江苏农林职业技术学院 生物工程系 , 江苏 句容 2 1 2 4 0 0 )
PDA培养基改良配方的研究
PDA培养基改良配方的研究杨勇;张凤英;陈岑【摘要】通过单因素和正交试验对PDA培养基配方进行改良。
改良后的PDA培养基为:在PDA基础培养基中添加牛肉膏0-35%,酵母膏0.45%,玉米汁3.50%。
同一米根霉菌株分别用改良PDA和基础PDA培养,结果表明,用改良PDA培养的菌种糖化酶活力为1374U/g,基础PDA培养的糖化酶活力为1190U/g。
%The formula of PDA culture mediums was improved by single factor test and orthogonal test as follows: 0.35 % beef extract, 0.45 % yeast extract, and 3.5 % corn juice were added in PDA basic culture mediums. Rhizopus oryzae strain was cultured by improved PDA and basic PDA respectively in the experiment and the results showed that glucoamylasc activity ofRhizopus oryzae cultured by improved PDA was 1374 U/g and that by basic PDA was only 1190 U/g.【期刊名称】《酿酒科技》【年(卷),期】2012(000)004【总页数】3页(P29-31)【关键词】糖化酶活力;改良;菌丝【作者】杨勇;张凤英;陈岑【作者单位】江西农业大学食品学院,江西南昌330045;江西农业大学食品学院,江西南昌330045;江西省宜春市第二中学,江西宜春336600【正文语种】中文【中图分类】Q93-3土豆培养基(简称PDA)是最常用的霉菌培养基。
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4.3经过一年的实验学习,不仅丰富大学的课余生活而且提高实验操作技能为以后的实验研究奠定了良好的基础。
5、参考文献
【1】黄健屏. 食用菌栽培学[M] . 长沙:湖南科学技术出版社,1993。
3、实验现象的观察及对比
3.1平菇:新的培养基中菌丝较为浓密,而且生长迅速,可以使得实验在原种阶段缩短实验周期,更有利于实验的观察。
3.2香菇:我们小组的香菇为组织分离得到的,使用普通的培养基进行培养的时候菌丝生长较为缓慢且容易被感染,前期的实验成功率很低。PDA培养基中加入硫酸镁及VB1等成分后菌丝生长较快,菌丝浓密呈白色,很大程度上提到了实验的成功率,为后期实验的进行奠定了良好的基础。
③、当压强降到0时要先动一下排气阀确定蒸汽已全部排出再开锅,等温度有所降低后在将物品拿出。
2.3接种及复壮的无菌操作
在进行操作之前先用酒精擦拭工作台(有机玻璃除外)再将实验用品(菌种除外)都放到超净工作台中用紫外线照射20分钟左右(接种钯可在对培养基灭菌的时候用报纸包起来进行灭菌)。实验操作应迅速,且在离酒精灯15㎝左右的无菌区进行。
【2】臧晋、罗建成、黄开勋.灵芝液体培养菌株的选择及其发酵条件研究.四川用菌技术生产手册.北京农业出版社.1993.55~56。
3.3灵芝:使用普通的培养基时,灵芝的菌丝通常长势缓慢而且菌丝发干紧贴在培养基表面。新的培养基培养出的菌丝较长,而且不发干。新培养出的菌种经装接到棉籽壳培养基生长较快,被杂菌污染的概率有所降低。现阶段关于灵芝新培养基的实验仍在进一步的探索之中。
4、实验的分析及思考
4.1在这次中对不同大型食用菌的培养基成分进行的探究初步找到了以后实验培养过程中成分的配比规则,VB1对促进菌丝的生长具有很大的作用以及在菌丝的生长过程中Mg、K等微量元素也是十分重要的。但是此次实验中的对比参照是根据以往的经验,没有做进一步确切的对比实验,使得实验分析结果存在着一定的误差。我们在以后的实验会吸取教训,做好对照实验,提高实验的精确度。
2.2培养基的灭菌操作
在实验室中我们采用高压灭菌121℃,101kpa,通常灭菌的时间为25分钟。操作中的注意事项:
①、使用之前要加水使高压锅显示为高水位,但水也不宜过多,若水过多可打开排水阀放出;
②、在使用时放气阀不要开得过大,会使水分蒸发的过快使高压锅缺水显示低水位,这时应及时的补加水;
探究PDA培养基的不同成分对不同的
常见真菌培养的影响
刘菲霞 09级生物科学2班
概述:经过实验证实不同的PDA成分配比对大型真菌的生长影响是不同的,在实验过程中优化培养基既可以缩短实验周期又可以获得活性较高的菌种。
关键字:PDA 大型真菌 生长
我们小组的实验以前是采用一种最常见的PDA培养基对平菇、金针菇以及灵芝进行培养,然而这种培养基并不是对所有的大型真菌都适用。我们查阅了相关的资料后对于不同的大型食用菌的生长来说都需要一定的C源、N源这就需要加入一定量的土豆以及糖分,然而许多的微量元素度他们的生长也具有很大的影响作用,于是我们小组尝试对于不同的菌种向培养基中加入不同的微量元素或者使用不同的配比。
2.4菌种的培养及保藏
将接种后的菌种做好标记放在恒温培养箱进行培养,而且控制好培养箱的温度及湿度,定期观察菌丝的生长情况以及石油被杂菌感染,做好实验记录。若发现菌种被污染应及时的清除掉,防止污染扩散。
菌丝已长满试管斜面的菌种应及时的放入冰箱中进行低温保藏。为保证菌种的活性,要对菌种进行定期的转接、复壮。
2.1.1平菇培养基的制备:土豆200g,葡萄糖20g,硫酸镁15g,琼脂20g,水1000ml,磷酸二氢钾3g。
2.1.2香菇培养基的制备:土豆200g,葡萄糖20g,硫酸镁0.5g,琼脂20g,水1000ml,磷酸二氢钾2g,维生素B1 10mg。(也可用于菌种保藏)。
2.1.3灵芝培养基的制备:土豆200g,葡萄糖20g,硫酸镁15g,琼脂20g,水1000ml,磷酸二氢钾3g,维生素B1 0.05g。
1、实验材料与仪器
1.1供试验的菌种:实验过程所选用的菌种为食用菌小组经过复壮或组织分离而得到的生长状况良好的菌种。
1.2实验材料:土豆、糖、琼脂、硫酸镁、磷酸二氢钾、VB1片等。
1.3实验仪器:高压灭菌锅,电磁炉、锅、电子天平、烧杯、试管、接种耙、超净工作台等。
2、基本的实验操作步骤