探究PDA培养基的不同成分对不同的

探究PDA培养基的不同成分对不同的
常见真菌培养的影响

刘菲霞 09级生物科学2班

概述：经过实验证实不同的PDA成分配比对大型真菌的生长影响是不同的，在实验过程中优化培养基既可以缩短实验周期又可以获得活性较高的菌种。
关键字：PDA 大型真菌 生长
我们小组的实验以前是采用一种最常见的PDA培养基对平菇、金针菇以及灵芝进行培养，然而这种培养基并不是对所有的大型真菌都适用。我们查阅了相关的资料后对于不同的大型食用菌的生长来说都需要一定的C源、N源这就需要加入一定量的土豆以及糖分，然而许多的微量元素度他们的生长也具有很大的影响作用，于是我们小组尝试对于不同的菌种向培养基中加入不同的微量元素或者使用不同的配比。
1、实验材料与仪器
1.1供试验的菌种：实验过程所选用的菌种为食用菌小组经过复壮或组织分离而得到的生长状况良好的菌种。
1.2实验材料：土豆、糖、琼脂、硫酸镁、磷酸二氢钾、VB1片等。
1.3实验仪器：高压灭菌锅，电磁炉、锅、电子天平、烧杯、试管、接种耙、超净工作台等。
2、基本的实验操作步骤
2.1培养基的制备
2.1.1平菇培养基的制备：土豆200g，葡萄糖20g，硫酸镁15g，琼脂20g，水1000ml，磷酸二氢钾3g。
2.1.2香菇培养基的制备：土豆200g，葡萄糖20g，硫酸镁0.5g，琼脂20g，水1000ml，磷酸二氢钾2g，维生素B1 10mg。（也可用于菌种保藏）。
2.1.3灵芝培养基的制备：土豆200g，葡萄糖20g，硫酸镁15g，琼脂20g，水1000ml，磷酸二氢钾3g，维生素B1 0.05g。
2.2培养基的灭菌操作
在实验室中我们采用高压灭菌121℃,101kpa，通常灭菌的时间为25分钟。操作中的注意事项：
①、使用之前要加水使高压锅显示为高水位，但水也不宜过多，若水过多可打开排水阀放出；
②、在使用时放气阀不要开得过大，会使水分蒸发的过快使高压锅缺水显示低水位，这时应及时的补加水；
③、当压强降到0时要先动一下排气阀确定蒸汽已全部排出再开锅，等温度有所降低后在将物品拿出。
2.3接种及复壮的无菌操作
在进行操作之前先用酒精擦拭工作台（有机玻璃除外）再将实验用品（菌种除外）都放到超净工作台中用紫外线照射20分钟左右（接种钯可在对培养基灭菌的时候用报纸包起来进行灭菌）。实验操作应迅速，且在离酒精灯15㎝左右的无菌区进行。
2.4菌种的培养及保藏
将接种后的菌种做好标记放在恒温培养箱进行培养，而且控制好培养箱的温度及湿度，定期观察菌丝的生长情况以及石油被杂菌感染，做好实验记录。若发现菌种被污染应及时的清除掉，防止污染扩散。
菌丝已长满试管斜面的菌种

应及时的放入冰箱中进行低温保藏。为保证菌种的活性，要对菌种进行定期的转接、复壮。
3、实验现象的观察及对比
3.1平菇：新的培养基中菌丝较为浓密，而且生长迅速，可以使得实验在原种阶段缩短实验周期，更有利于实验的观察。
3.2香菇：我们小组的香菇为组织分离得到的，使用普通的培养基进行培养的时候菌丝生长较为缓慢且容易被感染，前期的实验成功率很低。PDA培养基中加入硫酸镁及VB1等成分后菌丝生长较快，菌丝浓密呈白色，很大程度上提到了实验的成功率，为后期实验的进行奠定了良好的基础。
3.3灵芝：使用普通的培养基时，灵芝的菌丝通常长势缓慢而且菌丝发干紧贴在培养基表面。新的培养基培养出的菌丝较长，而且不发干。新培养出的菌种经装接到棉籽壳培养基生长较快，被杂菌污染的概率有所降低。现阶段关于灵芝新培养基的实验仍在进一步的探索之中。
4、实验的分析及思考
4.1在这次中对不同大型食用菌的培养基成分进行的探究初步找到了以后实验培养过程中成分的配比规则,VB1对促进菌丝的生长具有很大的作用以及在菌丝的生长过程中Mg、K等微量元素也是十分重要的。但是此次实验中的对比参照是根据以往的经验，没有做进一步确切的对比实验，使得实验分析结果存在着一定的误差。我们在以后的实验会吸取教训，做好对照实验，提高实验的精确度。
4.2此次实验中的许多部分仍在进一步的验证过程之中，在后期的工作中我们将进行更深层次的探究，努力在缩短实验周期方面有所突破，将我们小组的实验进行的更加快速、精确。
4.3经过一年的实验学习，不仅丰富大学的课余生活而且提高实验操作技能为以后的实验研究奠定了良好的基础。
5、参考文献
【1】黄健屏. 食用菌栽培学[M] . 长沙:湖南科学技术出版社,1993。
【2】臧晋、罗建成、黄开勋.灵芝液体培养菌株的选择及其发酵条件研究.四川食品与发酵报出版。
【3】香菇-百度百科。
【4】吕作舟，蔡衍心.食用菌技术生产手册.北京农业出版社.1993.55～56。