FUT实验指导

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小鼠皮下荷瘤标准操作规程

小鼠皮下荷瘤标准操作规程小鼠皮下荷瘤（或称移植瘤）实验是一种常用的动物实验方法，用于研究肿瘤生长、药物疗效等方面。

为了保证实验操作的准确性和动物福利的最大化，下面是一份小鼠皮下荷瘤标准操作规程。

一、实验动物1. 鼠种选择：建议使用常用的实验动物品系（如BALB/c、C57BL/6等）。

2. 年龄选择：选择6-8周龄的小鼠，确保其免疫系统和器官发育成熟。

3. 处理：在实验之前，将小鼠隔离一段时间，以适应新环境，并遵循动物实验伦理和相关法规进行处理。

二、荷瘤动物的准备1. 荷瘤细胞株的选择：根据实验目的选择合适的肿瘤细胞株。

细胞株应来源于可靠且经验证的来源，如细胞库、研究机构合作实验。

2. 细胞培养：在符合无菌条件下，将细胞培养在合适的培养基中，保持其活性和稳定性。

3. 细胞计数：使用细胞计数仪准确计算细胞数目，并调整细胞浓度。

4. 细胞检测：定期检测细胞的纯度、鉴定和验证细胞的肿瘤特性。

5. 注射剂量：根据实验需求和细胞特性，确定荷瘤细胞的注射剂量。

三、手术准备1. 操作间的准备：在符合无菌条件下进行手术，准备好所需的实验器具和仪器。

2. 麻醉与镇痛：使用适合的麻醉方法对小鼠进行麻醉，并在手术中给予镇痛以减轻小鼠的疼痛。

3. 无菌操作：实施手术之前，用适当的方法消毒手术台和手术器械。

四、手术操作1. 注射位置选择：选择合适的部位进行皮下注射（如腹部、背部），确保容易观察和测量肿瘤的生长。

2. 手术操作流程：(1) 麻醉小鼠并进行镇痛。

(2) 将小鼠定位到手术台上，以固定小鼠的身体。

(3) 使用酒精棉球消毒注射部位。

(4) 使用规格合适的针头将预定剂量的荷瘤细胞注入小鼠的皮下组织中。

(5) 注意注射的角度和深度，避免插入过深或过浅。

(6) 注射完毕后轻轻拍打注射部位以防止荷瘤细胞漏出。

(7) 小鼠苏醒后放回适宜的养护环境。

五、术后护理1. 观察：术后密切观察小鼠的行为和健康状况，特别是对于术后48小时内的小鼠，要加强监测，以及记录并报告任何异常情况。

F-H实验_指南

夫兰克—赫兹实验实验注意事项1 实验室内禁止吸烟。

2 使用带电仪器时，要注意人身安全，防止触电。

3 不得随意使用或操作未经允许的实验仪器或装置。

4 实验过程中，不得随意扳动仪器开关，特别是电源开关。

5 接线前电源要处于关的位置。

接线后要反复检察核实，避免因连线错误损坏仪器。

弗兰克－赫兹实验预习要求1 了解弗兰克－赫兹实验的历史背景2 复习玻尔原子结构理论的主要内容。

氩原子的第一激发电位是多少？3 明确本实验的主要实验目的4 能够结合弗兰克－赫兹实验的实验原理图简要说明弗兰克－赫兹实验的设计思想和实验原理。

5 明确本实验拟完成的主要实验和观测内容。

一、实验目的1、学习夫兰克和赫兹通过电子和原子碰撞研究原子能级结构的基本思想和实验设计方法。

掌握测量原子激发电势的实验方法。

2、测量氩原子的第一激发电势，从而验证原子能级的存在。

二、实验原理图1 实验原理图图1所示是夫兰克—赫兹实验装置示意图。

在充氩的夫兰克—赫兹管中，灯丝电源氩原子电子K G 1 G 2 A V uAV G2KV G2A V G1K K: 阴极G1: 第一栅极G2：第二栅极 A ：板极 V G1K ：控制电压 V G2K ：加速电压 V G2A ：遏止电压阴极K 通过灯丝加热产生热电子发射。

在阴极K 与第一栅极G 1间电压V G1K 的控制下，进入栅极G 1和G 2之间，经过G 2与K 间的加速电压V G2K 的加速，使电子获得一定的能量。

由于仪器制造时G 1和K 的间距很小，而G 1和G 2的间距相对很大，故通过加速获得能量的电子主要在G1G2空间与氩原子发生碰撞。

当电子获得能量恰好是原子激发态能量的整数倍时，电子与原子发生多次非弹性碰撞，将能量全部传递给原子。

此时电子没有剩余能量克服G 2和板极A 之间遏止电压V G2A 的作用到达板极A，因而无板极电流。

当电子获得的能量不是原子激发态能量的整数倍时，与原子碰撞后将会有一定的剩余能量去克服遏止电压的作用到达板极A 形成板流。

中华鳖fut2基因的克隆及其组织表达模式分析

中华鳖fut2基因的克隆及其组织表达模式分析邢潇;宋如昕【摘要】中华鳖(Pelodiscus sinensis)的α-(1,2)岩藻糖基转移酶2(fucosyltransferase 2,FUT2)基因可以合成岩藻糖,岩藻糖作为一种糖类,能够为肠道某些细菌提供能量,在维持肠道微生物的内稳态中发挥着调控作用.利用RACE技术首次获得了中华鳖fut2基因的cDNA全长序列,进而预测和分析fut2基因的蛋白质序列及其功能区域,同时对其在10个组织中的表达水平进行检测与分析.结果显示,该序列全长1 918bp,其中,5'非编码区(5'-UTR)380bp,3'非编码区(3'-UTR)518 bp,开放阅读框(ORF)长度为1020bp,编码339个氨基酸残基;FUT2蛋白为脂溶性蛋白,不存在信号肽.系统进化树分析结果显示,中华鳖fut2基因与西部锦龟和绿毛龟的亲缘关系相对较近,与人和小鼠等亲缘关系相对较远.荧光定量PCR结果显示,中华鳖fut2基因在所检测的组织都表达,其中,在肌肉、心脏中表达量较高,在回肠、直肠中表达量相对较高.研究结果可为进一步了解触2基因功能提供理论依据.%The α-(1,2) fucosyltransferase 2(FUT2) can synthesize fucose,which provides carbon sources for certain fucosebased bacteria in thegut,creating a micro-ecological niche that favors the growth of these bacteria and may play a regulatory role in maintaining the homeostasis of gut microbes.In this study,the full-length cDNA sequence offu t2 was cloned for the first time in Chinese soft-shelled turtle (Pelodiscus sinensis) by RACE technology.Then the fut2 gene sequence and its functional domains were predicted and analyzed.Meanwhile,the expression level of fut2 gene was detected and analyzed in selected tissues.The results showed that the full length of this sequence was 1 918 bp,including a 5'untranslated region (5'UTR) of 380 bp and a 3'UTR (3'-UTR) of 518 bp,and 1 020 bp in open reading frame(ORF) encoding 339 amino acid residues.The FUT2 protein was a lipid-soluble protein,and the protein had no signal peptide.Phylogenetic tree showed that thefut2 gene in Pelodiscus sinensis was similar to those in Chrysemys picta bellii and Chelonia mydas.Real-time PCR results showed thatfut2 was expressed in all selected tissues,with higher expression in muscle and heart,relatively high expression in the ileum and rectum.The results of this study will provide a theoretical basis for further understanding of fut2 gene function.【期刊名称】《山西农业科学》【年(卷),期】2018(046)006【总页数】5页(P889-893)【关键词】中华鳖;岩藻糖基转移酶2(FUT2);生物信息学分析;组织表达分析【作者】邢潇;宋如昕【作者单位】山西大学生命科学学院,山西太原030006;山西大学生命科学学院,山西太原030006【正文语种】中文【中图分类】Q785动物肠道既要防止肠道菌群的入侵，同时也要避免对肠道微生物过度免疫反应，因此，肠道微生物的种类和数目要维持一个平衡状态[1]。

toch五项实验流程

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miR-34a调控下游基因FUT8表达介导乳腺癌多药耐药的实验验证

临床检验杂志年月第卷第期，，，２０１９８３７８ＣｈｉｎＪＣｌｉｎＬａｂＳｃｉＡｕｇ．２０１９Ｖｏｌ．３７Ｎｏ．８
·６１７·
：ＤＯＩ１０．１３６０２／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｃｌｓ．２０１９．０８．１３
·临床实验研究·
ｍ药ｉＲ的３实４ａ验调验控证下游基因ＦＵＴ８表达介导乳腺癌多药耐
白质水平变化；采用ＣＣＫ８实验、免疫荧光实验检测其对ＭＣＦ７和ＭＣＦ７／ＡＤＲ细胞增殖、耐药性的调控作用。结果
（）；在中的表达水平明显高于ｍｉＲ３４ａＭＣＦ７
ＭＣＦ７／ＡＤＲＰ＝０．００２６
ＦＵＴ８基因在ＭＣＦ７／ＡＤＲ中的表达水平明显高于ＭＣＦ７
（Ｐ＝０．００１）；６ＦＵＴ８是ｍｉＲ３４ａ调控乳腺癌耐药性的靶点（Ｐ＝０．００１９）；特异性上调ＭＣＦ７／ＡＤＲ细胞中ｍｉＲ３４ａ的水平可明
ｍｉＲ３４ａｍｅｄｉａｔｅｓｔｈｅｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｂｙｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｄｏｗｎｓｔｒｅａｍｇｅｎｅＦＵＴ８
，（，，，；ＷＡＮＧＸｉｎ１ＭＡＸｉａｏｌｕ２１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙＤａｌｉａｎＳｉｘｔｈＰｅｏｐｌｅ＇ｓＨｏｓｐｉｔａｌＤａｌｉａｎ１１６０３１Ｌｉａｏｎｉｎｇ２．Ｄｅｐａｒｔ，，，，）ｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙｔｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＤａｌｉａｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＤａｌｉａｎ１１６０１１ＬｉａｏｎｉｎｇＣｈｉｎａ：ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｄｅｎｔｉｆｙｔｈｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｔａｒｇｅｔｏｆｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｂｙｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｎｇｔｈｅｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｍｅｃｈａ

编码电路测试与FUT电路设计

《专业综合课程设计》任务书学生姓名：专业班级：通信0805指导教师：江雪梅工作单位：信息工程学院题目: 编码电路测试与FUT电路设计课程设计目的：1.通过对THEX-1型综合实验平台的使用，较深入了解通信电路的原理；2.掌握通信电路的测试方法和设计实验的方法；3.学习利用EWB仿真设计简单通信系统的方法；4.练习利用Protel绘制PCB电路的方法；5.提高正确地撰写论文的基本能力。

课程设计内容和要求1.电路测试：测试CVSD1，CVSD2，HMC，CON，CYC，JZ实验电路板。

要求详细分析实验电路的工作原理（说明每个元器件的作用和功能），写出测试项目，并对测试结果作出详细分析；如果电路板不能测出所需要的结果，要分析原因，找出电路板损坏的部位。

2.用EWB做出FUT的仿真电路，并测试各点的波形；要求详细分析电路原理（说明每个元器件的作用和功能），对测试结果作出详细分析。

3.用Protel绘制FSK2的PCB电路。

4.查阅不少于6篇参考文献。

初始条件：1.THEX-1型综合实验平台及实验指导书；2.示波器，万用表。

3.EWB和Protel软件。

时间安排：第18周，安排设计任务；第19周，完成实验测试和仿真电路的设计与测试；第20周，完成PCB电路绘制；撰写设计报告，答辩。

指导教师签名：年月日系主任（或责任教师）签名：年月日目录1编码电路测试 (1)1.1 CVSD增量调制编码实验CVSD1 (1)1.1.1 电路工作原理 (1)1.1.2 测试内容 (2)1.1.3 实验结果及分析 (2)1.2 CVSD增量调制译码实验CVSD2 (4)1.2.1 电路工作原理 (4)1.2.2 测试内容 (6)1.2.3 测试结果及分析 (6)1.3汉明码编码实验HMC (7)1.3.1 电路工作原理 (7)1.3.2 测试内容 (8)1.3.3 测试结果及分析 (8)1.4 卷积码编码、译码实验CON (9)1.4.1 电路工作原理 (9)1.4.2 测试内容 (9)1.4.3 测试结果及分析 (9)1.5 循环码编码、译码实验CYC (10)1.5.1 电路工作原理 (10)1.5.2 测试内容 (11)1.5.3 测试结果及分析 (12)1.6 交织编码实验JZ (12)1.6.1 电路工作原理 (12)1.6.2 测试内容 (13)1.6.3 测试结果及分析 (13)2 函数信号发生实验FUT (15)2.1 实验原理 (15)2.1.1 ICL8038管脚功能图 (16)2.1.2 实验电路 (16)2.2 实验仿真 (17)2.2.1实验仿真电路图 (17)2.2.2 实验仿真内容以及波形图 (17)3 FSK数字频率解调实验PCB制作（FSK2） (21)3.1 电路原理图（SCH）制作 (21)3.2 电路板PCB 制作 (21)4 小结 (24)5 参考文献 (25)本科生课程设计成绩评定表 (26)1编码电路测试1.1 CVSD增量调制编码实验CVSD11.1.1 电路工作原理众所周知，增量调制是由PCM发展而来的模拟信号数字化的一种编码方式，它是PCM的一种特例，关于PCM编码原理及其实验，已在以后实验中说明。

fret实验操作流程

fret实验操作流程1.首先，准备好所需的实验材料和仪器。

First, prepare the necessary experimental materials and equipment.2.然后，将实验材料按照实验要求进行标定和调配。

Then, calibrate and prepare the experimental materials according to the experimental requirements.3.接着，将实验材料加入实验器皿中进行混合和搅拌。

Next, add the experimental materials to the experimental vessel for mixing and stirring.4.之后，设置好实验仪器的参数并进行预热和调试。

Afterwards, set the parameters of the experimental instrument and preheat and debug it.5.紧接着，将实验样品放入实验仪器中进行测试和观察。

Immediately thereafter, place the experimental samples in the experimental instrument for testing and observation.6.然后，记录实验过程中的数据和观察到的现象。

Then, record the data and observed phenomena during the experiment.7.接下来，分析实验数据并进行统计和图表绘制。

Next, analyze the experimental data and performstatistical and graph drawing.8.之后，对实验结果进行初步的总结和讨论。

Afterward, make a preliminary summary and discussion of the experimental results.9.紧随其后，根据实验结果进行进一步的分析和推理。

HEPG2细胞做侵袭实验

HEPG2细胞做侵袭实验细节Transwell 侵袭实验原理Transwell 侵袭实验，其实原理简单地说就是用一层膜将高营养的培养液和低营养的培养液隔开，细胞放在低营养的培养液里，为了找吃的，细胞会往高营养的培养液里面跑，但是有膜挡着，所以要穿过膜才行。

它是用来研究肿瘤细胞的迁移侵袭转移情况的一种简便快捷的实验方法，还可以构建两种细胞的共培养体系以及趋化性试验。

今天咱们就来讲讲怎么做肿瘤细胞的侵袭转移实验。

我们在膜上涂上一层基质胶，模仿细胞外基质，于是细胞就要分泌金属蛋白酶将基质消化了才可以从低营养的培养液跑到高营养的培养液里面，最后我们检测高营养的培养液里细胞量就可以知道细胞的侵袭能力了。

而迁移实验就是不铺胶直接让细胞穿过就行了。

Transwell 小知识②上层培养液：上层培养液采用低血清或无血清培养基，为维持渗透压。

⑤下层培养液：下层常用含5%－10% FBS的培养基，具体浓度根据细胞侵袭力而定，侵袭力弱的细胞可适当提高FBS浓度。

下层也可用趋化因子，比如纤维粘连蛋白。

④基质胶：聚碳酸酯膜上室侧铺上一层基质胶，用以模仿体内细胞外基质，细胞欲进入下室，先要分泌基质金属蛋白酶（MMPs）将基质胶降解，方可通过聚碳酸酯膜。

计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的侵袭能力。

常用的是人工重构基底膜材料Matrigel，主要成分为层黏连蛋白和Ⅳ型胶原，生产厂家有BD、美国Collaborative Rsearch公司、sigma叫ECM。

是一种细胞外基质，4度时是液体，在37度会逐渐凝固成胶状，不可逆。

如果购买的小室是已经铺好基质胶的，那么Matrigel 就不需要购买了。

实验步骤（1）基质胶准备：将冻存于－80度冰箱的BD matrigel 4度过夜（24h），变成液态；（2）基质胶使用：上室的聚碳酸酯膜上加入稀释后的Matrigel (3.9ug/ul)60-80µl (注意体积不可太大，以刚把聚碳酸酯膜浸湿为最好，放入37℃培养箱中，孵育1-5h（<5h）；此间经常观察，当出现“白色层”时，说明已经变为固态;(注意：铺胶过程不要产生气泡，铺胶均匀，否则影响实验结果。

做出相反趋势的实验结果

做出相反趋势的实验结果
为了得到相反趋势的实验结果，可以考虑以下几种方法：
1. 改变实验条件：通过改变实验的特定条件，例如温度、时间、浓度等，来观察是否可以得到相反的实验结果。

例如，如果先前的实验结果显示在高温下产生更多产物，可以尝试在低温下重做实验，并观察是否产生更少的产物。

2. 使用不同的试剂或物质：尝试在相同的实验条件下使用不同的试剂或物质，以观察是否可以获得相反的实验结果。

例如，在一个给定的反应中，如果试剂A 产生产物X，尝试使用试剂B来代替试剂A，以观察是否会产生与产物X相反的产物。

3. 考虑反应机制的不同步骤：如果先前的实验结果显示某一反应的某一步骤贡献了主要的影响，可以尝试重复实验并将注意力集中在其他步骤上，以观察是否会得到相反的实验结果。

需要注意的是，相反趋势的实验结果并不意味着原始实验结果是错误的。

实验结果可能受到多种因素的影响，包括实验条件、试剂纯度、反应机制等。

因此，在得到相反的实验结果时，需要仔细分析和解释这种差异，并进行进一步的研究以验证其中的原因。

蛙类神经干AP的引导ppt课件

神经干动作电位及其传导速度测定装置示意图
参数设置
采样显示方式触发方式
采样间隔
采样通道处理名称放大倍数上限频率下限频率
参数
示波刺激器触发 25us
1 AP 500 1000 0.02
2
3
AP速度通用 500 500
1000 10000 0.02 直流
刺激刺激方式主周期幅度脉冲数波宽间隔
延时
周期数
参数 20ms
阈刺激和最大刺激强度调整刺激强度至波形最佳，测量相关指标
置换引导电极的正负极位置，观察波形变化
夹伤1、2之间的神经，观察2通道波形的变化
测量有关指标，比较波形的差异
计算动作电位传导速度v＝s/(t2－t1 )或 s/t
注意事项
❖ 标本应尽可能长，避免损伤
❖ 保持标本活性（注意滴加林格液），但神经标本屏蔽盒内不可有积液
思考题
1. 如何鉴别刺激伪迹?
2. 双相和单相动作电位产生原理是什么?双相动作电位上、下相幅值是否相同？为什么？
3. 单相动作电位幅度和时程与双相动作电位上相幅度和时程有何区别?为什么?
仪器连接
神经干标本屏蔽盒
43
2 1 S2 S1
Med4101型 Medlab-U外置式生物信号放大器、刺激器
第四次实验
蛙神经干动作电位的引导及其传导速度的测定
实验原理实验步骤注意事项实验后处理
▪ 相关概念
静息电位(resting potential) 动作电位(action potential) 阈刺激(threshold stimulus)、阈电位兴奋(excitation)、兴奋性(excitability)

13454822_东串猪FUT2基因CDS扩增、序列分析及组织表达谱检测

中国畜牧兽医　２０１７，４４（１）：１１１犆犺犻狀犪犃狀犻犿犪犾犎狌狊犫犪狀犱狉狔牔犞犲狋犲狉犻狀犪狉狔犕犲犱犻犮犻狀犲ｄｏｉ：１０．１６４３１／ｊ．ｃｎｋｉ．１６７１７２３６．２０１７．０１．００１东串猪犉犝犜２基因犆犇犛扩增、序列分析及组织表达谱检测钦伟云１，甘丽娜１，赵呈祥１，喻礼怀１，包文斌１，２，吴圣龙１，２（１．扬州大学，江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室，扬州２２５００９；２．江苏省种猪繁育和健康养殖工程技术研究中心，扬州２２５００９）摘　要：猪α （１，２）岩藻糖转移酶２（ＦＵＴ２）基因为鞘糖脂生物合成—球系列通路中的重要基因，可能在断奶仔猪抵抗大肠杆菌Ｆ１８侵染过程中发挥着调控作用。

为探究猪犉犝犜２基因的序列结构及其生物学功能，试验采用ＰＣＲ扩增得到地方猪品种东串猪犉犝犜２基因的ＣＤＳ全序列，进而预测和分析犉犝犜２基因的蛋白质序列及其功能区域，同时对其在８头３５日龄东串断奶仔猪１１个组织中的表达水平进行检测与分析。

结果显示，犉犝犜２基因的ＣＤＳ序列全长为１０２３ｂｐ，共编码３４０个氨基酸，ＦＵＴ２蛋白为脂溶性的亲水蛋白，蛋白结构不稳定，该蛋白存在１个跨膜螺旋结构，但不存在信号肽，表明ＦＵＴ２蛋白为膜蛋白；ＦＵＴ２蛋白存在２个Ｎ糖基化位点（１８５和３０５位氨基酸），无Ｏ糖基化位点，此外该蛋白还存在１４个潜在的磷酸化位点，包括６个Ｓｅｒ、２个Ｔｈｒ和６个Ｔｙｒ，对其功能区域进行分析发现，ＦＵＴ２蛋白存在１个超级家族保守结构域：ＦＵＴ１ＦＵＴ２ｌｉｋｅ（５８－３１９位氨基酸）；系统进化树结果显示，猪与牛的亲缘关系相对较近，与人、黑猩猩、大鼠和小鼠等亲缘关系相对较远；犉犝犜２基因在东串断奶仔猪１１个组织中均有表达，在消化道和免疫组织中表达水平较高。

试验结果推测犉犝犜２基因在断奶仔猪抵抗大肠杆菌Ｆ１８中可能具有一定的作用，且可能是通过合成岩藻糖转移酶间接发挥其抵抗大肠杆菌Ｆ１８的作用。

提高运动员v_(o_2max)能力的低温实验研究

提高运动员v_(o_2max)能力的低温实验研究
近年来，随着低温研究的深入，低温应用开始被研究，并且成为许多不同领域，如生物学、医学、体育、军事和航空航天等的热门研究方向。

研究发现，低温环境对提高运动员v_o_2max能力具有积极的影响。

因此，许多科学家正在开展有关低温研究以提高运动员
V_(o_2max)能力的研究。

低温能改变血液循环系统，增加血液pH的压力，加快血流速度，促进红细胞生长和活动，抗氧化能力增强，分布越均匀，提高氧化能力，有助于提高运动员V_(o2max)能力。

此外，低温研究还可以帮助运动员维持更好的训练水平，有助于减少肌肉和骨骼损伤，让运动员赛前更加有效地进行训练，以达到更好的竞技绩效。

此外，低温研究还可以帮助运动员加速恢复和缩短伤病恢复时间，减少炎症，改善睡眠质量，加快对训练的调整，更快的变化至最佳竞技状态，从而提高运动员v_o_2max能力。

总之，低温研究可以有效地提高运动员v_(o_2max)能力，是一种补充性的训练方法，可以增强运动员的恢复能力，并提高他们的竞技表现。

绝对不能仅仅依靠常规训练来满足运动员的训练需求，低温训练也是重要的一环。

猪FUT2基因沉默对其所在通路基因表达及小肠上皮细胞E.coliF18黏附能力的影响

皮细胞抵抗 E.coliF18 感染的能力，本试验结果同时为球系列鞘糖脂生物合成通路在仔猪抗大肠杆菌感染过程中
的作用机制研究提供一定的理论基础和依据。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
关键词：猪基；FUT2 因大肠；RNAi；杆菌；球系列鞘糖脂生物合成通路
畜牧兽医学报 2017，48（11）：2034-2045
ActaVeterinariaetZootechnicaSinica
doi：10.11843/j.issn.0366-6964.2017.11.004
猪FU上T2皮基细因胞沉E默.c对oli其F所18在黏通附路能基力因的表影达响及小肠
孙
丽1，宗秋芳1，吴
期 11 孙丽等：猪基 FUT2 因沉默对其所在通路基因表达及小肠上皮细胞E.coliF18黏附能力的影响 2035
theoreticalbasisformolecularbreedingofimprovingtheresistanceofpigletstoE.coliF18.The expressiondifferencesofFUT2geneinintestinalepithelialcellsbeforeandafterE.coliF18ab， F18acinfectionandlipopolysaccharide（LPS）induction weredetectedbyReal-timePCR.Then， the Westernblotting wasperformedtoidentifytheproteinexpressiondifferencesofFUT2in intestinalepithelialcellsbeforeandafterE.coliF18abandF18acinfection.MeanwhilethelentiviralinterferencevectorsofporcineFUT2weredesignedandconstructed，andtheintestinalepithelialcellslinewithFUT2genesilencingwasobtained.TheeffectsofFUT2genesilencingon themRNAexpressionofkeygenes（FUT1，ST3GAL1，HEXA，HEXB，B3GALNT1，NAGA） involvedinglycosphingolipidbiosynthesis-globoseriespathwayandonE.coliF18adhesionto intestinalepithelialcells werefurtheranalyzed.TheresultsshowedthattheFUT2expression levelsinintestinalepithelialcellsweresignificantlyincreasedafterE.coliinfectionandLPSinduction （P＜0.01），andtheFUT2expressionlevelinintestinalepithelialcellswasalsoincreased afterE.coliinfection.Moreover，thelentiviralinterferencevectorsofporcineFUT2 weresuccessfullyconstructed，andtheintestinalepithelialcellslinewithFUT2genesilencing wereobtained.AfterFUT2genesilencing，theexpressionlevelofkeygenesinglycosphingolipidbiosynthesis-globoseriespathwayweredecreasedatdifferentdegrees.TheexpressionlevelofFUT1afterFUT2silencingwassignificantlyreduced （P＜0.05），andtheexpressionlevelsofST3GAL1， HEXA，HEXB wereextremelysignificantlyreduced （P＜0.01），whiletheexpressionlevelsof B3GALNT1andNAGA genesshowednosignificantchanges.Inaddition，theadhesionabilityof E.coliF18toswineepithelialcellswasdecreasedsignificantly （P＜0.05）.Theseresultsshow thatthelowerexpressionlevelofFUT2 mayhindertheformationofE.coliF18receptor，and thuselevatetheresistancecapabilityofporcinesmallintestineepithelialcellstoE.coliF18infection.Ourfindingscanalsoprovidetheoreticalfoundationsandevidenceforfurtherinvestigating onthemechanismsofglycosphingolipidbiosynthesis-globoseriespathwayinresistanceofpigsto E.coliinfection. Keywords：swine；FUT2 gene；RNAi；Escherichiacoli；glycosphingolipid biosynthesis-globo seriespathway

n-back实验流程

正式实验：
每个刺激呈现300ms，间隔2000ms。

共八种刺激，见下图：
间隔，见下图：
共有三种任务：
每次任务耗时：6.9s+20*2.3s+4.6s=57.5s
0任务：指导语（0）+task 0（包含20个刺激）+空白
1任务：指导语（1）+task 1（包含20个刺激）+空白
2任务：指导语（2）+task 2（包含20个刺激）+空白
Task 0 : 判断当前刺激是否为靶刺激（方块在左上方为靶刺激）
Task 1 : 判断当前刺激的呈现方位与前一个刺激的呈现方位是否相同，相同为靶刺激
Task 2 : 判断当前刺激的呈现方位与前面隔了一个的刺激的呈现方位是否相同，相同为靶刺激
反应：是靶刺激，用右手的拇指上方的按键，不是靶刺激，用右手的食指按下方的键。

举例说明不同任务的要求：
共有2个session,每个session 里包含有2个task 0，2个task 1，2个task2，每个task 有20个刺激。

2个session 的任务顺序图：
任务实验耗时：11.5min
总耗时：结构像（7min ）+静息（7min ）+任务（11.5min ）=25.5min
训练实验：
在正式做fmri 实验之前，被试允许先做一个session 的练习。

实验4 流化床基本特性的测定

实验四流化床基本特性的测定流化床反应器是一种利用气体或液体通过颗粒状固体层而使固体颗粒处于悬浮运动状态，并使固体颗粒具有某些流体特征的一种床型，它是流态化现象的具体应用，已在化工、能源、冶金、轻工、环保、核工业等部门得到广泛应用。

化工领域中，加氢、烯烃氧化、丙烯氨氧化、费-托合成及石油的催化裂化等均采用了该技术。

因此，它是极为重要的一种操作过程。

流化床反应器的重要特征是细颗粒催化剂在上升气流作用下作悬浮运动，固体颗粒剧烈地上下翻动。

这种运动形式使床层内流体与颗粒充分搅动混和、物料连续、结构紧凑、传质速度快、传热效率高、床层温度分布均匀，避免了固定床反应器中的热点现象，但操作中会造成固体磨损、床层粒子返混严重、反应中转化率不高等现象。

一、实验目的1．通过冷模观察聚式和散式流态化的实验现象，建立起对流态化过程的感性认识。

2．了解流化床的压降分布原理，通过冷模测定流化床的特定曲线。

3．通过冷模观察得到临界流化速度和带出速度，并计算出费劳德数Fr、膨胀比和流化数。

4．掌握流化床液体停留时间分布的测定方法及实验结果分析。

二、实验原理1．流化现象流体从床层下方流入，通过图1中虚线所示的分布板而进入颗粒物料层时，随着流体流速u0的不同，会出现不同的流化现象（图1）。

(a)(b)(c)(d)(e)固定床临界流态化散式流态化聚式流态化稀相流态化图1 流化现象（1）固定床阶段流体流速较低时，固体颗粒静止不动，即未发生流化，床层属于固定床阶段（图1（a）），阻力随流体流速增大而增大。

（2）临界流化阶段流体流速继续增大，颗粒在流体中的浮力接近或等于颗粒所受重力及其在床层中的摩擦力时，颗粒开始松动悬浮，床层体积开始膨胀，当流速继续增大，几乎所有的粒子都会悬浮在床层空间，床层属于初始流化或临界流化阶段（图1（b））。

此时的流速称为临界流化速度或最小流化速度u mf。

（3）流化阶段对于液固流化床，当液速u f>u mf时，由于液体与固体粒子的密度相差不大，此种床层从开始膨胀直到气力输送，床内颗粒的扰动程度是平缓的加大的，床层的上界面较为清晰，即床层膨胀均匀且波动较小，床层属于散式流化阶段（图1（c））。

低温诱导实验步骤

低温诱导实验步骤低温诱导实验，这事儿说起来简单，做起来可不简单。

我记得我第一次做这实验的时候，心里那叫一个忐忑，就跟第一次上战场似的。

实验室里那台低温冰箱，冷冰冰的，跟个铁疙瘩似的，我一靠近它，就觉得浑身发冷。

第一步，你得准备好材料。

这材料可不是随便什么东西都能用的，得是那种对低温特别敏感的，比如某些植物的种子，或者细胞培养物。

我那次用的是一种叫拟南芥的植物，这玩意儿小巧玲珑，跟个小草似的，但脾气可不小，稍微冷一点就蔫儿了。

准备好材料，接下来就是设置低温条件。

这低温可不是随便设的，得根据实验要求来。

我那次设的是零下4度，听起来不算太冷，但你要知道，这拟南芥平时可是生活在温暖湿润的环境里，零下4度对它来说，简直就是冰天雪地了。

设置好低温条件，接下来就是诱导过程。

我把拟南芥的种子小心翼翼地放进低温冰箱里，心里默念着：“小家伙，你可得挺住啊！”冰箱门一关，我就站在外面等着，心里七上八下的，就跟等高考成绩似的。

时间一分一秒地过去，我时不时地打开冰箱门看看，生怕那小家伙冻坏了。

可你猜怎么着？那拟南芥居然一点事儿没有，反倒精神抖擞的，跟刚洗了个冷水澡似的。

我当时就乐了，心想：“这小家伙，还挺能扛冻的！”诱导完了，接下来就是观察和记录。

我把拟南芥从冰箱里拿出来，放在显微镜下仔细观察。

你别说，这低温诱导还真有点效果，拟南芥的细胞结构明显发生了变化，跟平时不一样了。

我一边观察，一边记录，心里那叫一个美滋滋的，就跟中了彩票似的。

实验做完了，我心里那叫一个满足。

虽然过程有点曲折，但结果还是挺让人满意的。

我记得当时实验室里还有几个同事，他们看我做实验，一个个都笑得前仰后合的，说我跟个老农民似的，对着一盆小草又是担心又是高兴的。

不过话说回来，这低温诱导实验虽然有点麻烦，但做起来还是挺有意思的。

尤其是看到那些小生命在低温下顽强生存的样子，心里那叫一个感动。

科学这东西，有时候就是这么神奇，你永远不知道下一秒会发生什么。

所以啊，做实验这事儿，你得有耐心，得有爱心，还得有点幽默感。

瑞加诺生负荷实验步骤

瑞加诺生负荷实验步骤
瑞加诺生负荷实验是一种常用的研究材料的力学性能的方法，下面是瑞加诺生负荷实验的步骤：
1. 准备材料：首先选择需要研究的材料，如金属、聚合物等，并准备好相应的样品。

样品的尺寸和形状应满足实验要求。

2. 安装设备：将样品固定在瑞加诺仪上，并确保样品处于水平状态。

同时，根据实验要求调整瑞加诺仪的工作参数，如荷重范围、变形速率等。

3. 调节荷重：根据实验设计将荷重调至初始值，并记录下此时的数值。

在实验过程中，可以根据需要逐渐增加或减小荷重。

4. 进行实验：开始进行压缩或拉伸实验。

在每次施加荷载后，记录下样品的变形情况，包括应力和应变的变化。

根据需要，可以选择连续记录变形情况，或在特定荷载下进行静态加载。

5. 结束实验：直到达到实验终点或样品发生破坏后，停止加载，并记录下此时的荷载值和样品的断裂形态。

6. 数据处理与分析：根据实验记录的数据，进行数据处理和分析，计算材料的力学性能指标，如弹性模量、屈服强度、断裂韧度等。

可以绘制应力-应变曲线或荷载-变形曲线，进行进一
步的分析和比较。

需要注意的是，瑞加诺生负荷实验需要仪器设备和技术的支持，
操作时应按照安全规范进行，并根据具体要求进行实验步骤的调整。

《高水平英式橄榄球运动员速度与灵敏素质的多方向移动训练实验研究》

《高水平英式橄榄球运动员速度与灵敏素质的多方向移动训练实验研究》一、引言英式橄榄球是一项需要高速度、高灵敏度和多方向移动能力的运动。

在比赛中，运动员需要快速反应，灵活地改变移动方向，以应对对手的防守和进攻。

因此，提高运动员的速度与灵敏素质对于提升英式橄榄球运动员的竞技水平至关重要。

本研究旨在通过多方向移动训练实验，探讨高水平英式橄榄球运动员速度与灵敏素质的训练方法和效果。

二、研究方法1. 研究对象本研究选取了某英式橄榄球队的20名高水平运动员作为研究对象，按照其速度和灵敏素质分为实验组和对照组。

2. 训练方法实验组运动员接受为期12周的多方向移动训练，每周3次，每次训练包括基础体能训练、速度训练、灵敏度训练和模拟比赛场景的实战训练。

对照组则维持原有训练计划。

3. 评价指标采用速度测试（如短距离冲刺、长距离耐力跑）和灵敏度测试（如侧移、Z型折返跑）来评价实验前后的变化。

三、实验过程及结果分析1. 实验过程实验过程中，实验组和对照组运动员分别按照各自的训练计划进行训练。

实验组的训练计划着重于多方向移动训练，包括变换方向的速度训练、快速起跑及停止的训练、多方向敏捷性训练等。

同时，结合模拟比赛场景的实战训练，以提高运动员在比赛中的实际应用能力。

2. 结果分析经过12周的实验后，对实验组和对照组的运动员进行速度和灵敏度测试。

结果显示，实验组在速度和灵敏度方面均有显著提高，而对照组则无明显变化。

具体数据如下：（1）速度测试：实验组在短距离冲刺和长距离耐力跑方面均取得了显著提高，平均成绩较实验前提高了约10%。

而对照组则无明显变化。

（2）灵敏度测试：实验组在侧移和Z型折返跑等灵敏度测试中取得了显著提高，平均成绩较实验前提高了约15%。

而对照组在灵敏度方面无明显变化。

四、讨论根据实验结果，我们可以得出以下结论：多方向移动训练对于提高高水平英式橄榄球运动员的速度与灵敏素质具有显著效果。

通过多方向移动训练，运动员可以更好地掌握变换方向的速度技巧、快速起跑及停止的能力以及多方向敏捷性技巧等。