质粒提取试剂盒说明书
高纯度质粒小提试剂盒使用说明书
高纯度质粒小提试剂盒 Pure Mini Plasmid Kit(目录号：HS0103)产品包装试剂盒成分 50 preps Buffer P1 15 ml Buffer P2 15 ml Buffer P3 20 ml Buffer PD 30 ml RNase A(10 mg/ml)150 ul Buffer PW 60 ml Buffer EB 10 ml Spin Columns PA 50个 Collection Tubes (2 ml)50个（注意：使用前将全部RNase A 溶液加到Buffer P1中混合均匀，2 ~ 8℃保存）保存条件本试剂盒在室温(15 ~ 25℃)干燥条件下，可保存12个月；更长时间的保存可置于2 ~ 8℃。
若溶液产生沉淀，应在使用前置于37℃下溶解沉淀。
单独包装的RNase A 在室温可稳定保存12个月。
加入RNase A 后的Buffer P1应置于2 ~ 8℃保存，可稳定保存6个月。
产品简介本试剂盒用于高纯度质粒DNA 的小量制备与纯化。
菌体经碱裂解、高盐、低pH 处理，质粒可从菌体中释放出来，并特异、高效地被离心柱硅胶膜（Spin Columns PA ）吸附。
通过去蛋白液（Buffer PD ）和漂洗液（Buffer PW ）的清洗可去除蛋白及其他杂质，在低盐、高pH 条件下洗脱，最后得到高纯度的质粒DNA 。
北京厚生博泰科技有限公司Beijing Hooseen Biotech Co., Ltd.使用本试剂盒可从1 ~ 5 ml过夜培养的菌液中纯化得到高达20 ug的高纯度质粒DNA，可在30 min之内完成提取任务。
所得质粒可直接用于酶切、转化、PCR、测序、低敏感细胞株的转染等各种常规分子生物学操作。
产品特点1. 快速：步骤少，操作简便，节约时间。
2. 简便：离心吸附柱不需要预平衡，漂洗液Buffer PW 和去蛋白液Buffer PD不需要另加乙醇，即开即用。
质粒小提试剂盒使用说明书
质粒小提试剂盒 Mini Plasmid Kit(目录号：HS0101)产品包装（注意：使用前将全部RNase A 溶液加到Buffer P1中混合均匀，2 ~ 8℃保存）保存条件本试剂盒在室温(15 ~ 25℃)干燥条件下，可保存12个月；更长时间的保存可置于2 ~ 8℃。
若溶液产生沉淀，应在使用前置于37℃下溶解沉淀。
单独包装的RNase A 在室温可稳定保存12个月。
加入RNase A 后的Buffer P1应置于2 ~ 8℃保存，可稳定保存6个月。
产品简介本试剂盒用于质粒DNA 的小量制备与纯化。
菌体经碱裂解、高盐、低pH 处理，质粒可从菌体中释放出来，并特异、高效地被离心柱硅胶膜吸附。
通过漂洗液PW 的清洗可去除杂质，在低盐、高pH 条件下洗脱，最后得到纯度较高的质粒DNA 。
使用本试剂盒可从1 ~ 5 ml 过夜培养的菌液中纯化得到高达20 ug 的高纯度质粒DNA ，在30 min 之内完成提取任务。
所得质粒可直接用于酶切、转化、PCR 、测序等各种常规分子生物学操作。
北京厚生博泰科技有限公司Beijing Hooseen Biotech Co., Ltd.产品特点1. 快速：步骤少，操作简便，节约时间。
2. 简便：离心吸附柱不需要预平衡，漂洗液不需要另加乙醇，即开即用。
3. 高质：OD260/280在1.7 ~ 1.9之间。
4. 稳定：正确保存条件下一年内提取效果不发生变化。
操作步骤1. 取1 ~ 5 ml过夜培养的菌液，室温12,000 rpm离心1 min，尽量将上清去除干净。
（注意：根据菌液的浓度决定取液量，浓度高时取1 ml菌液离心即可，浓度低时可多收集一次）2. 加入250 ul Buffer P1，用枪头充分吹打使菌体重悬均匀。
（注意：是否将RNase A溶液加到Buffer P1中并混合均匀；菌体沉淀是否悬浮充分，如有未彻底悬浮的菌块会影响裂解，导致提取的质粒浓度及纯度降低）3. 加入250 ul Buffer P2，温和颠倒混匀6 ~ 8次，直到溶液变得清亮粘稠。
快速型无内毒素质粒超大量 3 提取试剂盒手册说明书
EZgene TM EndoFree plasmid ezFlow ezFilter Megaprep3kit(BG0060) HandbookFor research use only.Not intended for diagnostic testing.ContentsContents (1)Introduction (2)Important Notes (2)Storage and Stability (3)BeforeStarting (4)Safety Information (4)Kit Contents (5)EZgene TM Plasmid ezFilterMegaprep3Protocol (6)Purification of Low-Copy-Number Plasmid and Cosmid (8)快速型无内毒素质粒超大量3提取试剂盒简明步骤 (9)Trouble ShootingGuide (12)IntroductionKey to the kit is our proprietary DNA binding systems that allow the high efficient binding of DNA to our ezBind TM matrix while proteins and other contaminates are removed under certain optimal conditions.Nucleic acids are easily eluted with sterile water or elution buffer.Unlike other procedures,our patented plasmid purification kit has no guanidine salt in the buffer,the purified DNA is guanidine/ion exchange resin residues free which enable the high performance of downstream applications such as transfection, restriction mapping,library screening,sequencing,as well as gene therapy and genetic vaccinations.Important Notesumbers::The yield of plasmid DNA depends on the origin of the Plasmid Copy N umbersreplication and the size of the plasmid.The protocols are optimized for high copy number plasmid purification.For low copy number plasmids,both the culture volume and the buffer volume need to be scaled up2times.Reference Table1for the commonly used plasmids,Host Strains:The strains used for propagating plasmid have significant influence on yield.Host strains such as Top10and DH5a yield high-quality plasmid DNA. endA+strains such as JM101,JM110,HB101,TG1and their derivatives,normally have low plasmid yield due to either endogenous endonucleases or high carbohydrates released during lysis.We recommend transform plasmid to an endA-strain if the yield is not satisfactory.Please reference Table2for the endA information.Table2endA strains of E.Coli .Optimal Cell Mass (OD 600x mL of Culture):This procedure is designed for isolating plasmid grown in standard LB medium (Luria Bertani)for 12-16hours to a density of OD 6002.0to 3.0.If rich medium such as TB or 2xYT are used,make sure the cell density doesn’t exceed 3.0(OD 600).A high ratio of biomass over lysis buffers result in low DNA yield and purity.Culture Volume Volume::Use a flask or tube with a volume at 4times the culture medium to secure optimal condition for bacteria growth.Don’t exceed the maximum culture volume suggested in the protocol.Incomplete lysis due to over amount of bacterial culture results in lower yield and less purity.Table 3The optimal cell mass mass,,culture Volumeand Binding Capacity for the mega DNA units,S torage and StabilityBuffer A1should be stored at 4°C once RNase A is added and Buffer ER should be stored at 4°C.All other materials can be stored at room temperature (22-25o C).The Guaranteed shelf life is 12months from the date of purchase.Before StartingPrepare all components and get all necessary materials ready by examining this instruction booklet and become familiar with each steps.Important:I.RNase A:It is stable for more than half a year when stored at roomtemperature.Spin down RNaseA vial briefly.Add the RNaseA solution to Buffer A1and mix well before use.II.Buffer ER should be stored at4°C.III.Buffer B1precipitates below room temperature.It is critical to warm up the buffer at50°C to dissolve the precipitates before use. IV.Buffer N3may form precipitates below10°C,warm up at37°C to dissolve the precipitates before use.V.Keep the cap tightly closed for Buffer B1after use.VI.Make sure the availability of centrifuge and vacuum manifold, especially,after mixing the lysate with ethanol,the sample needs to be processed immediately by vacuum.Materials supplied by users:VII.100%ethanol.VIII.Pump-driven vacuum system,1,000mL bottle(Corning#430518 or430282)or equivalent pyrex glass bottles.IX.50mL conical tubes.X.High speed centrifuge tube for endotoxin removal if desired. Safety Information�Buffer N3contains acetic acid,use gloves and protective eyewear when handling.�Buffer N3,Buffer RET contains chaotropic salts,which may form reactive compounds when combines with bleach.Do not add bleach or acidic solutions directly to the preparation waste.Kit Contents*Add216mL(BG0059)or320mL(BG0060)96-100%ethanol to each DNA Wash Buffer bottle before use.EZgene TM Plasmid ezFilter ezFilterMegaprep Megaprep 3Protocol I.Inoculate 600600mLmL LB containing appropriate antibiotic with 500µL fresh starter culture.Grow at 37°C for 14-16h with vigorous shaking.Note :The best way to prepare a starter culture:Inoculate a single colony from a freshly grown selective plate into 1mL LB medium containing the appropriate antibiotic and grow at 37°C for 6-8h with vigorous shaking (~250rpm).The buffer volumes need to be scaled up if processing over 500mL of culture.II.Harvest 600mL overnight bacterial cells by centrifugation at 5,000x g for 10minutes at room temperature.Decant or aspirate medium and discard.Note :Remove the residual medium completely for optimal cell lysis and neutralization.III.Resuspend the bacterial pellet in 30mL Buffer A1(Add RNase A to BufferA1before use).Pipet or vortex till thebacterial pellet dispersed thoroughly(Complete resuspension is critical for optimal yields).Then add 1.5mL Bu Bufferffer ER into the suspended bacterial culture.Mix well by inverting 5-10times.Note :if room temperature is below 25°C,warm up the mix solution after adding Buffer ER at 45°C for 5min.IV.Add 27mL Buffer B1.Mix gently but thoroughly by inverting 10times and incubate atroom temperature for 5minutestoobtain a cleared lysate.Do not incubate longer than 5minutes.Then add 3mL Buffer D1,mix gently and incubating for another 5minutes.Over-incubating causes genomic DNA contamination and plasmid damage .Avoid vigorous mixing as this will shear the genomic DNA.V.Add 8mL Buffer N3and mix immediately by inverting 5times till a flocculentwhite precipitate forms.Vortex the lysate for 5seconds.Note:It is critical to mix the lysate well,if the mixture still appears conglobated,brownish or viscous,more mix is required to completely neutralize the solution.VI.Attach the 2-layer filter unit to a sterile 500mL or 1000mL standard bottle(Corning#430518or 430282or equivalent pyrex glass bottle)and screw tight.Connect the unit to a pump-driven vacuum system.VII.Transfer the clear lysate from the bottom of the mixture (use a 50mL serological pipet)to the filter unit.Stand by for 5minutes and turn on the vacuum with low vacuum force and increase to maximum vacuum force after 5minutes.Figure1.Instruction of filter assembling.Note11:If the flow through gets too slow,turn off the vacuum and wait for1minute.NoteCarefully detach the upper filter cup and replace it with the replacement cup.Assemble the unit as Figure1.Pour the lysate from the original cup to the replacement cup.Turn on the vacuum and filter the rest of the lysateN ote2:Low vacuum force prevents clogging of the filter membranes.Note3:Use a50mL serological pipet to transfer the relatively clear lysate from the bottom of the lysate bottle to the filter unit.This will speed up the flow rate of the filter unit.Normally around200mL lysate can be filtered through the filter unit within20-30 minutes.Pour the remaining white precipitates to the filter unit when most of the lysate has been filtered through.VIII.When most of the lysate has been filtered through the unit,turn off the vacuum,wait for1minute,detach the unit and discard the upper filter cup including the rubber rings.Note:The DNA is in the collection bottle.IX.Connect the DNA unit to a500mL or1,000mL standard bottle and screw tight.Connect the DNA unit to the vacuum with the vacuum off.Add1volume of Buffer RET(For example,60m L of Buffer RET to60m L of clear lysate), and add36mL100%ethanol to the lysate bottle.Mix well by sharp hand shaking3-5times and immediately pour half of the lysate/ethanol mixture to the DNA unit and turn on the vacuum.X.Pour the rest of the lysate/ethanol mixture into the DNA unit.When all the lysate pass through the DNA unit,vacuum for1minute.XI.Wash the DNA membrane with50mL DNA Washing Buffer and vacuum for 1minute at maximum force.Wash the DNA membrane with another50 mL DNA Washing Buffer and vacuum for1minute at maximum force. XII.Add50mL100%ethanol evenly to the DNA membrane and vacuum for1minute.Turn off the vacuum,wait for1minute,and discard the liquid waste in the bottle.Reconnect the bottle to the DNA binding unit.Turn on the vacuum for10minutes at maximum force(It is critical to dry the residual ethanol for optimal yield).Turn off the vacuum,incubate at65o C for10min will help to remove the ethonal and increase the elution efficiencyXIII.Wait for1minute,and replace the500mL or1,000mL standard bottle with a sterile50mL conical tube,screw tight.XIV.Add8mL Endofree Elution Buffer evenly to the membrane and incubate for5minutes.Turn on vacuum to elute DNA.Typically3~5mL of solution can be collected.This is the1st elution.XV.Turn off the vacuum and replace the50mL conical tube with another sterile 50mL conical tube,screw tight.Add3mL Endofree Elution Buffer and incubate for3minute.Turn on the vacuum and collect the2nd elution,typically mL of solution can be collected.1~21~2mLNote:The DNA is ready for downstream applications such as transfection of endotoxin-sensitive cell lines,primary cultured cells or microinjection.Note:Two elutions give rise to maximum DNA yield.For maximum yield and higher concentration,pool the elutions together,add0.1volume3M Potassium Acetate or Sodium acetate(pH5.2)and0.7volume isopropanol.Centrifuge at top speed for10 min.Discard supernatant.Wash the DNA with1000µL70%ethanol,centrifuge for5 min,carefully decant.Air-dry the pellet for10-20minutes in a tissue culture hood.Resuspend the DNA in Endofree Elution Buffer.Note:Use lessEndofree Elution Buffer if high concentration is desired.g/mL L)=OD260nm x50x dilution factor.DNA concentration(µg/mPurification of Low-Copy-Number Plasmid and CosmidThe yield of low copy number plasmid is normally around0.1–1µg/mL of overnight culture.For isolating low copy number or medium copy number plasmid DNA,use the following guideline:•Culture volume:Use2x volume of the high copy number cultureBuffer B1,Buffer D1and Buffer N3•Use2x volume of the Buffer A1,Buffer ER,ER,Bufferand100%ethanol.Additional buffers can be purchased from Abgent.•use same volume of DNA Wash Buffer and Endofree Elution BuffeBuffer.r.快速型无内毒素质粒超大量3提取试剂盒简明步骤（详细内容请参考说明书英文部分）�实验前准备RNase A:常温下可稳定贮藏半年，使用前将提供的所有RNase A瞬时离心后加入Buffer A1,使用后将Buffer A1/RNase A置于4o C保存。
宁波基内生物技术 小量质粒提取试剂盒说明书
【注意事项】（1）溶液Ⅱ和溶液Ⅲ均应避免长时间与空气接触，使用后立即盖紧瓶盖，否则会因溶液失效而导致菌体裂解效率效果下降。
漂洗液PW含有乙醇成分，用后立即盖紧瓶盖，避免乙醇成分的挥发。
（2）菌体裂解、中和过程中，剧烈混合会造成基因组DNA断裂，导致提取的质粒DNA有基因组DNA污染，请按说明书操作。
（3）溶液Ⅱ作用细菌太久，一方面导致基因组DNA断裂成较短的DNA，不易和其他成分一起沉淀，造成基因组DNA污染。
另一方面会使质粒DNA 出现切口和断裂，间接导致质粒的质量下降。
裂解步骤所用时间不应超过5分钟。
（4）溶液Ⅱ加入后，溶液会变清亮，若无清亮现象，应加大溶液Ⅱ的用量。
（5）含质粒的转化菌的培养时间不应超过16小时。
过度培养一方面导致抗生素失效，选择压力降低，质粒丢失，无质粒细菌增多。
另一方面长时间的培养条件会导致细菌崩解。
（6）尽管本试剂盒可以抽提较大的质粒（>10kb），但不推荐使用。
如果一定要使用，请参考以下方法：加大菌体使用量（使用5～10ml过夜培养物），同时按照比例增加溶液Ⅰ、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ的用量；溶解液TE应在60℃预热，洗脱时延长放置时间或用50～100ul TE洗脱2次。
【生产企业】宁波基内生物技术有限公司【医疗器械生产企业许可证编号】浙食药监械生产许20080119号【生产地址】宁波镇海区庄市街道中官路777号【注册地址】宁波镇海区庄市街道中官路777号【联系方式】电话：*************传真：*************小量质粒提取试剂盒说明书宁波基内生物技术有限公司【产品名称】通用名称：小量质粒提取试剂盒商品名称：Geneinn小量质粒提取试剂盒英文名称：Kit for small scale plasmid preparation【产品代码】GN00014【包装规格】50次/盒，100次/盒【预期用途】应用本试剂盒制备的质粒DNA纯度高，可以用于酶切、PCR、测序、细菌转化等实验。
高纯度质粒小量提取试剂盒 说明书
大班数学活动教案：拼图教案1. 教学背景学生年龄：4-5岁学生已具备的知识和技能：会数数、认识一到十的数字、知道形状与颜色的区别2. 教学目标2.1 知识目标1.学生能把简单的拼图拼好，并准确地说出拼图所属的几何形状。
2.学生能通过拼图，巩固对一到十个数字的认识。
2.2 技能目标1.提升学生的动手能力，能够按照图示，拼好拼图。
2.培养学生的观察能力，能够观察拼图的几何形状和数字，准确地做出判断。
2.3 情感目标1.养成学生对数学活动的兴趣，让学生体验到学习数学的快乐。
2.培养学生的合作意识，学生能够在小组内合作完成拼图。
3. 教学过程3.1 导入环节教师问学生：“你们在家里会玩拼图吗？”学生回答时，教师让学生展示一下自己的拼图，然后教师说：“好的，今天我们就来学习大一点的拼图，准备好了吗？”3.2 活动环节一：拼图过程1.分组：教师将学生分成小组，每组三到四名学生。
2.活动准备：教师为每个小组提供一份数字拼图图纸，和相应的拼图，每张图纸上有一到十个数字和图形，学生需要根据图纸上的数字和图形拼出对应的图片。
3.活动过程：教师告诉学生，现在开始拼图，让学生自由组合句子，优美表达以及敢于发言。
学生在拼图过程中，要注意拼图的位置和相互之间的关系，有效进行小组合作，完成自己的任务。
3.3 活动环节二：讲解数字与形状教师在学生完成拼图后，根据每个组完成拼图的情况，问学生完成拼图的过程，并带学生回顾每个数字都对应的几何形状，如数字一对应的图形是直线，数字五对应的图形是五边形等。
3.4 活动环节三：游戏比赛教师让每个小组选一名代表出来，分别进行拼图比赛，以时间最短和完成度最高的小组为胜者，并为获胜小组颁发奖励。
4. 教学反思这次的数学活动，让学生在拼图的过程中，不仅锻炼了学生的动手能力和观察力，还让学生对数字和几何形状有了更深刻的认识。
同时，我们也培养了学生的合作意识，让他们感受到集体的力量。
在今后的数学活动中，我们将进一步发扬数学活动的魅力，让学生在活动中感受到更多的乐趣。
OMEGA无内毒素质粒中提试剂盒中文说明书
E.Z.N.A. Fastfiler Endo-free Plasmid Maxiprep Protocol(OMEGA无内毒素质粒中提)依据该程序可从30-50ml过夜培养物中纯化100-250ug高拷贝数质粒或10-100ug低拷贝数质粒。
若要提高低拷贝质粒的产量，请第8页“Low Copy-Number Plasmids protocol”操作。
■细菌培养：1. 于200-400的培养瓶中加入30-50 LB培养基/AMP或KAN（50ug/ml）,然后接种含所需质粒的菌种于37℃摇床培养12-16小时；使用过夜培养物（0.3-0.5ml）可以获得最佳的结果。
强烈推荐使用E.coli(endA-)菌株用于常规的质粒提取，如DH5a和JM109。
细菌达到最佳生长条件对获得最高质粒DNA产量至关重要。
从新鲜转化平板或新鲜平板挑取单菌落接种于2-5ml含相应抗生素的初始培养基内，于37℃振荡培养（约300rpm）约8小时。
然后接种到合适体积的含相应抗生素预热好的液体培养基中。
于37℃振荡培养（约300rpm）12-16小时。
使用3-4倍于培养物体积的三角瓶或其它容器并以1/500-1/1000的比例稀释初始培养物到生长培养基。
这样可又获得最佳培养条件。
过夜培养后，OD600达1.5-2.0提示为较好的培养物。
建议每批培养物都测下OD600值可以得到最佳的结果。
稀释细菌培养物（10-20倍）使其分光光度测量值在OD6000.1-0.5范围内呈线形变化，该步也具有重要意义。
我们推荐细菌密度在OD6002.0-3.0之间。
若使用非营养丰富培养基，一定要确保细胞浓度不要超过OD600 3.0。
如果使用甘油冻存的菌种作接种物，则应在含有相应抗生素的琼脂糖平板上划线培养以获取间菌落。
然后按照上面步骤挑取单菌落接种于2-5ml初始培养基内。
■碱性SDS溶液裂解细菌：2. 收集20-50ml培养基至适当的离心管，室温3,500-5,000×g离心10分钟；3. 倒去或吸取培养基并弃去。
天根DP117-无内毒素质粒大提试剂盒说明书
For personal use only in study and research; not for commercial use产品简介本试剂盒采用独特的硅胶模吸附技术，高效专一地结合质粒DNA。
同时采用特殊的溶液P4和过滤器CS1，可有效的出去内毒素、蛋白质杂志；整个提取过程仅需1h，方便快捷。
使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接、转化和细胞转染多种细胞等试验。
推荐每次菌液使用量：高拷贝质粒推荐使用量为100ml，得率一般在500-1500μg左右；低拷贝质粒推荐使用量为200ml，得率一般在200-600μg左右。
注意事项：请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
1.溶液P1在使用前先加入RNase A （将试剂盒中提供的RNase A全部加入)，混匀，置于2-8℃保存。
2.第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在漂洗液PW中加入无水乙醇。
3.使用前先检查平衡液BL，溶液P2和P4是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀现象，可在37℃水浴中加热几分钟，即可恢复澄清。
4.注意不要直接接触溶液P2和P4，使用后应立即盖紧盖子。
5.使用过滤器时请将推柄小心缓慢地从过滤管中抽出，避免滤膜因压力而松动。
6.提取的质粒量与细菌培养浓度，质粒拷贝数等因素有关。
如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒，应加大菌体使用量，同时按比例增加P1、P2、P4的用量；洗脱缓冲液推荐在65-70℃水浴中预热，可以适当延长吸附和洗脱时间，以提高提取效率。
7.实验前使用平衡液BL处理吸附柱，可以最大限度激活硅基质膜，提高得率。
8.用平衡液处理过的柱子最好立即使用，放置时间过长会影响使用效果。
质粒DNA 浓度及纯度检测得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA。
纯化的质粒DNA OD260/OD280通常在1.8-2.0左右，可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的实验中。
莱枫 质粒DNA小量提取试剂盒 说明书
上海莱枫生物科技有限公司网址：订货电话：传真：技术解答：技术支持：上海)质粒DNA小量提取试剂盒一、产品简介采用SDS碱裂解法，结合硅胶膜选择性吸附DNA的方法，适合从1-4 ml细菌培养物中提取多至20 μg质粒DNA。
纯化的质粒DNA适合用于酶切、PCR、测序、转化和转染肿瘤细胞。
本试剂盒改进了裂解条件(Buffer P2)，避免菌量极少时或者菌液过度老化时可能出现的单链质粒DNA；优化了中和环境(Buffer P3)，彻底去除游离SDS，避免因SDS残留导致的酶切不完全或弥散、转染效率低等情况。
二、试剂盒组成和储存组成内容DK301-01 (50次)DK301-02 (200次)原理与用途RNase A1＊30 μl120 μl降解RNABuffer P115 ml60 ml悬浮细菌Buffer P215 ml60 ml含SDS/NaOH，裂解细菌Buffer P315 ml×280 ml中和，去除SDS-蛋白-基因组DNA复合物Buffer WA15 ml×2120 ml漂洗去除抑制物Buffer WB§16 ml65 ml漂洗去盐DNA吸附柱-B50个 200个 吸附DNA收集管 50个×2200个×2接收废液1.5 ml离心管 50个 200个 接收洗脱的DNATE※15 ml30 ml洗脱DNA说明书 1份 1份＊RNase A1: 50 mg/ml, -20℃长期保存；第一次使用前将RNase A1全部加入Buffer P1中，于4℃保存。
§Buffer WB，第一次使用前按试剂瓶所示体积加入无水乙醇，混合均匀。
※TE：10 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, pH 8.0(25°C)。
除RNase A1和Buffer P1(已加入RNase A1)外，其他组成成分于室温储存。
三、注意事项1. Buffer P2、Buffer P3和Buffer WA含刺激性化合物，避免沾染皮肤、眼睛和衣服、谨防吸入口鼻。
质粒大量抽提试剂盒使用说明书( 质粒大量抽提试剂盒使用说明书
宁波保税区西区创业大道7号2C-1,315800, 电话：+86-574-86822306 传真：+86-574-26893101, sales@质粒大量抽提试剂盒使用说明书质粒大量抽提试剂盒使用说明书（（离心法离心法））产品编号 产品名称包装 DNAP002质粒大量抽提试剂盒（离心法）6×包装清单包装清单：：Solution Ⅰ（溶液Ⅰ） 60ml Solution Ⅱ（溶液Ⅱ） 60ml Solution Ⅲ（溶液 Ⅲ） 84ml Wash Solution （冲洗液） 21ml Elution Buffer （洗脱液）9ml Affinity Column （质粒纯化柱）6个 Collection Tube （废液收集管） 6个 Instrution （说明书）1份操作步骤操作步骤：：1. 取40ml 过夜培养菌液，放于Collection Tube 中，11,000－13,000rpm 离心2分钟，离心速度低时应适当延长离心时间。
2. 弃上清，再加入40ml 菌液，重复步骤1。
弃上清，离心1分钟，用吸头吸干多余液体。
3. 加10 ml 含RNase A 的Solution Ⅰ，用吸头冲打沉淀或用振荡器使菌体充分混悬。
4. 加10 ml Solution Ⅱ，上下翻转混合6－10次，使菌体充分裂解，形成清亮溶液。
5. 加14 ml Solution Ⅲ，上下翻转混合6－10次，于4℃静置10分钟，应见大量白色沉淀生成。
6. 于4℃，11,000rpm 离心30分钟。
离心期间，将Affinity Column 放在Collection Tube 中。
7. 将上清倒入准备好的Affinity Column 中，11,000 rpm 离心2分钟。
也可将过柱液重新倒回AffinityColumn 中，11,000 rpm 离心2分钟，以增加回收率。
8. 弃过柱液，加8.4ml Wash Solution 于Affinity Column 中，11,000 rpm 离心2分钟。
质粒小提试剂盒使用说明书
质粒小提试剂盒I简明步骤（PD1211）（详细内容请参考英文说明书）I.实验前准备II.注意事项RNase A: 使用前将提供的所有RNase A瞬时离心后加入Buffer A1, 使用后将Buffer A1/RNase A置于4o C保存。
质粒拷贝数:纯化中低拷贝的质粒时，使用2倍的菌液体积，2倍的Buffer A1,B1,N1, 相同体积的Wash Buffer和Elution Buffer.转化菌:若为-70o C甘油冻存的菌，请先涂布平板培养后，再重新挑选新的单个菌落进行培养。
切勿直接取冻存的菌种进行培养。
DNA Wash Buffer*: 使用前请将8 mL (PD1211-00)或48 mL(PD1211-01)或216 mL (PD1211-02) or 90 mL (PD1211-03) 96-100% 乙醇加入DNA Wash Buffer。
Buffer B1: 在低于室温时会沉淀，请于50o C左右水浴加热至沉淀完全溶解，溶液澄清，使用后保证Buffer B1瓶盖旋紧。
在室温下（22-25o C）进行所有离心操作。
III.操作步骤1.接种新鲜的单个菌落到1-5 mL的LB培养基（含适量抗生素），37o C震荡培养14-16小时。
室温下10,000 x g离心1分钟，收集菌体，并尽可能的吸去上清。
注：残留的液体培养基容易导致菌液裂解不充分，第5步离心后沉淀较松，不能有效吸取上清。
注：本说明书中的操作程序适用于标准LB （Luria Bertani）培养基培养12-16 小时后，OD600（细菌密度）在2.0-3.0之间的菌液。
若采用的是富集培养基，例如TB 或2×YT，请注意保证OD600不超过3.0。
2.加入250 µL Buffer A1（确保已加入RNase A），用移液枪或涡流震荡充分悬浮细菌细胞。
注：细菌细胞如果没有充分悬浮均匀，将导致菌体裂解不完全，从而降低产量。
无内毒素质粒小量提取试剂盒使用说明
10、 向 吸 附 柱 中 加 入 500ul 漂 洗 液 ， 12000rpm 离 心 1min， 弃 废 液 ， 将吸附柱放入收集管中。
3、向 离 心 管 中 加 入 200ul 溶 液 P2，温 和 地 上 下 翻 转 6-8 次 使 菌 体 充 分 裂 解 。 注 意 ： 混 匀 一 定 要 温 和 ， 以 免 污 染 细 菌 基 因 组 DNA， 此 时 菌 液 应 变 得 清 亮 粘 稠 ， 作 用 时 间 不 要 超 过 5 min， 以 免 质 粒 受 到 破 坏 。
2. 洗 脱 缓 冲 液 体 积 不 应 少 于 50ul， 体 积 过 小 影 响 回 收 效 率 ； 洗 脱 液 的
pH 值 对 洗 脱 效 率 也 有 影 晌 ，若 需 要 用 水 做 洗 脱 液 应 保 证 其 pH 值 在 8.0 左 右 (可 用 NaOH 将 水 的 pH 值 调 至 此 范 围 )， pH 值 低 于 7. 0 会 降 低 洗 脱 效 率。
由于质粒dna本身的性质清除过程可导致部分质粒dna丢失但内毒素却能得到最大限度清所有溶液应用无内毒素的高纯水配制所有器械材料均应不含内毒素玻璃器皿可高温烘烤非挥发性水溶液可高压处理
无内毒素质粒小量提取试剂盒使用说明 货 号 ： D1140 规 格 ： 50T/100T 保存：常温干燥保存，复检期为一年。 试剂盒内容：
有 机 化 合 物 。 内 毒 素 清 除 剂 可 最 大 限 度 地 除 去 内 毒 素。 从 1-5ml 大 肠 杆 菌 LB 培 养 液 中 ，可 快 速 提 取 5-15μ g 高 纯 度 质 粒 DNA，提 取 率 达 85-90%。使 用 本 试 剂 盒 提 取 的 质 粒 DNA 纯 度 高 ，可 直 接 用 于 细 胞 转 染 等 要 求 较 高 的 实 验 ， 以 及 其 他 各 种 常 规 操 作 ， 包 括 酶 切 、 PCR、 测 序 、 连 接 和 转 化 等 试 验 。
酵母质粒快速提取试剂盒说明书
一般实验室使用，仅用于体外一步法酵母质粒快速提取试剂盒一步法快速提取酵母质粒目录号：DP5001（50次）DP5002（100次）使用手册2007年4月，第1版Bioteke Corporation一、试剂盒组成、储存、稳定性本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
注意事项1．裂解液YE低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2．避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
3．操作过程请带手套，一旦有试剂接触到皮肤请立即用水冲洗。
二、原理简介本试剂盒提供了一种简单快捷的提取酵母质粒的方法，不需要任何破壁酶和玻璃珠，能大大的缩短操作时间，在30分钟左右的时间提取高纯度的酵母质粒DNA。
三、试剂盒特点1．不需要破壁酶。
2．不需要借助玻璃珠破壁。
3．时间短，方便快捷。
四、注意事项（实验前必须首先阅读这部分！）1．所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到14，000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2．开始实验前将需要的水浴先预热到65℃备用。
3．为了最佳效果，最好使用新鲜标本，否则会严重降低产量。
五、操作步骤1.用1.5ml的离心管收集菌体，14000rpm离心20秒沉淀菌体(菌液1.5ml培养24小时左右至OD260达到1-1.5)，倒掉上层液体。
2.加入100ul的裂解液YE重悬菌体，加入等体积的酚/氯仿（1：1），激烈旋涡震荡10分钟。
3.65℃水浴5分钟，期间保持静置，不要摇动。
4.14000rpm离心5分钟收集上清液。
5.转移上清（注意不要触动界面物质），并加入2倍体积的95%乙醇，室温放置5 min后，以12,000 rpm离心5 min，弃尽上清，沉淀用70％无水乙醇洗涤2次，放置真空浓缩仪抽干5 min（或者常温晾干）。
6.100μl洗脱缓冲液EB溶解沉淀物，于-20℃保存。
天根质粒小提试剂盒说明书(DP103)
天根质粒小提试剂盒说明书（DP103）注意事项1.请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项2.溶液P1在使用前先加入RNaseA（将试剂盒中提供的RNaseA全部加入），混匀，置于2-8°C保存。
3.使用前请先检查平衡液BL、溶液P2和P3是否出现浑浊，如有混浊现象，可在37°C水浴中加热几分钟，即可恢复澄清。
4.注意不要直接接触溶液P2和P3，使用后应立即盖紧盖子。
5.所有离心步骤均为使用常规台式离心机室温下进行离心，速度为12,000rpm(~13，400g)。
6.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。
7.实验前使用平衡液BL处理吸附柱，可以最大限度激活硅基质膜，提高得率。
8.用平衡液BL处理过的柱子最好当天使用，放置时间过长会影响效果。
9.去蛋白液PD可以有效去除残留的蛋白污染，当宿主菌为endA+（TG1、BL21、HB101、ET12567、JM系列）等核酸酶含量较高的菌株时，强烈推荐使用去蛋白液PD。
操作步骤使用前请先在漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1.柱平衡步骤：向吸附柱CP3中（吸附柱放入收集管中）加入500μI的平衡液BL，12,000rpm(~13,400g)离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
（请使用当天处理过的柱子）2.取1-5ml过夜培养的菌液，加入离心管中，使用常规台式离心机，12,000rpm(~13,400g)离心1min，尽量吸除上清（菌液较多时可以通过多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中）。
3.向留有菌体沉淀的离心管中加入250μI溶液P1（请先检查是否已加入RNaseA)，使用移液器或涡旋振荡器彻底悬浮细菌沉淀注意如果有未彻底混匀的菌块，会影响裂解，导致提取量和纯度偏低。
4.向离心管中加入250μl溶液P2，温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。
注意：温和地混合，不要剧烈震荡，以免打断基因组DNA，造成提取的质粒中混有基因组DNA片断此时菌液应变得清亮粘稠，所用时间不应超过5min，以免质粒受到破坏。
质粒小提试剂盒使用说明书
质粒小提试剂盒I简明步骤（PD1211）（详细内容请参考英文说明书）1. 接种新鲜的单个菌落到1-5 mL的LB培养基（含适量抗生素），37o C震荡培养14-16小时。
室温下10,000 x g 离心1分钟，收集菌体，并尽可能的吸去上清。
注：残留的液体培养基容易导致菌液裂解不充分，第5步离心后沉淀较松，不能有效吸取上清。
注：本说明书中的操作程序适用于标准LB （Luria Bertani）培养基培养12-16 小时后，OD600（细菌密度）在2.0-3.0之间的菌液。
若采用的是富集培养基，例如TB 或2×YT，请注意保证OD600不超过3.0。
2. 加入250 µL Buffer A1（确保已加入RNase A），用移液枪或涡流震荡充分悬浮细菌细胞。
注：细菌细胞如果没有充分悬浮均匀，将导致菌体裂解不完全，从而降低产量。
3. 加入 250 µL Buffer B1, 轻轻地反转5-10 次以混合均匀，然后静置2-5分钟至溶液粘稠而澄清。
注：切勿剧烈振荡。
静置时间不超过5分钟，时间过长会导致基因组DNA污染或质粒受到损伤。
若溶液未清亮澄清，则表明菌体裂解不充分，应加大Buffer B1的用量或减少菌体量。
4. 加入350 µL Buffer N1, 立即反转多次，至溶液充分混匀，此时出现白色絮状沉淀。
5. 将离心管转至高速离心机，在室温下13,000 rpm离心10分钟（若上清中有白色沉淀，可再次离心）。
6. 小心吸取离心后的上清液至带有收集管的DNA柱中（避免吸起沉淀），室温下13000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将离心柱重新放回到收集管中。
7. 可选:向DNA柱中加入 500 µL Buffer KB, 室温下13000 rpm 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将离心柱重新放回到收集管中。
注：此步对富含内源核酸酶的宿主菌（endA＋）来说是必须的，如HB101, JM101, TG1等；对endA-来说可省略，如Top 10和DH5a等，请参照英文说明书第3页的表2.8. 向离心柱中加入500 µL DNA Wash Buffer（确保已加入无水乙醇），室温下，13000 rpm 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将离心柱重新放回到收集管中。
中量质粒提取试剂盒操作方法及步骤说明书
杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp:// Plasmid Midi Kit中量质粒提取试剂盒目录号：PL08适用范围：适用于中量高纯或者转染级质粒制备和BAC/PAC大型质粒制备试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存20次（PL0801）40次（PL0802）RNaseA（10mg/ml）-20℃0.75 ml 1.3 ml溶液P1 4℃65 ml 130 ml溶液P2 室温50 ml 100 ml溶液PⅢ室温50 ml 110 ml杂质清除剂A 室温 1.5 ml 3 ml杂质清除剂B 室温15 ml 30 ml内毒素清除剂-20℃ 5 ml 10 ml本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:1.第一次使用时，将试剂盒所带全部的RNase A加入溶液P1后（终浓度100μg /ml）置于4℃保存。
如果溶液P1中RNase A失活，提取的质粒可能会混杂有微量RNA 残留，在溶液P1中补加RNase A即可。
2.内毒素清除剂在4℃可保存一个月，如果要长期保存，建议保存在－20℃!3.环境温度低时溶液P2中SDS可能会析出出现浑浊或者沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。
4.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍：本试剂盒用碱裂解法从培养菌中提取质粒DNA，采用独特的溶液配方和内毒素清除试剂，只需要几次简单离心去除蛋白质、多糖、内毒素、RNA等杂质，获得高质量的质粒DNA。
纯化DNA的OD260/280通常在1.8左右，得到的质粒可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的工作中。
纯化后期过程均在1.5ml 小离心管中操作，方法简单，不需特殊设备，无需过柱，不用酚氯仿抽提；基本可完全回收细菌裂解释放出的质粒，不必担心质粒DNA的丢失。
本方法提取纯化质粒DNA，对质粒损伤小，即使是10kb甚至100kb以上的大型质粒或超大型BAC/PAC质粒，只要碱裂解法能够提取，就可以有效纯化。
Plasmid Mini Kit 质粒小提试剂盒 说明书
Version 02152011 Plasmid Mini Kit质粒小提试剂盒Cat. No. CW0511保存： 室温组分说明Cat. No. CW0511C CW0511AKit Size 100 200Buffer P1 30 ml 60 mlBuffer P2 30 ml 60 mlBuffer N3 40 ml 80 mlBuffer PS 30 ml 60 mlBuffer PW（concentrate） 25 ml 50 mlBuffer EB 10 ml 30 mlRNase A（10 mg/ml） 300 μl 600 μlSpin Column CM 100 200Collection Tube（2 ml） 100 200产品简介本试剂盒提供一种简单快捷提取质粒的方法，快速获得大量的质粒DNA。
采用碱裂解法裂解细胞，新型硅基质膜高效专一性结合质粒DNA，独特的缓冲液系统洗去杂质，无需酚抽提和乙醇沉淀。
本试剂盒在保证提取量和纯度的前提下，大大简化提取步骤，可从1-5 ml菌液中纯化多达30 μg的高拷贝质粒DNA。
得到的DNA可直接用于PCR、酶切、测序、转化等生物学实验。
注意事项1.Buffer P1在使用前先加入RNase A（将试剂盒中提供的RNase A全部加入），混匀，置于2–8℃保存。
2.第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer PW中加入无水乙醇。
3.使用前请检查Buffer P2、Buffer N3是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀现象，可在37℃水浴几分钟，即可恢复澄清。
4.注意不要直接接触Buffer P2和Buffer N3，使用后应立即盖紧盖子。
5.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。
6.所有离心步骤均为使用常规台式离心机室温下进行离心。
自备：无水乙醇，离心管操作步骤1.取1-5 ml过夜培养的菌液，加入离心管（自备）中，12,000 rpm（~13,400×g）离心1分钟，尽量吸弃上清。
质粒提取试剂盒说明书
质粒提取试剂盒说明书质粒是能够自主复制的小型环状DNA分子，多存在于细菌及酵母菌等生物中，是基因工程中最常用的运载体，担负着将目的基因转移到宿主细胞中的重要使命。
基因表达载体的构建（也就是目的基因与运载体结合）是基因工程的核心步骤，用作运载体的质粒更是掌上明珠。
我们需要从细菌中分离出质粒以备后用。
如果分离不好的嘛......提取出的目的基因就只能眼巴巴地望着彼岸的受体细胞吹凉风。
知道厉害了吧如何提取质粒呢？视频献上，头脑风暴一下热身之后，看一看质粒提取的具体操作。
分离质粒的方法有很多，但都离不开三个主要步骤。
摇菌培养即培养细菌使质粒扩增1.将鉴定测序正确的克隆菌液涂在LB固体平板（一种培养基，使质粒扩增）。
2.置于37℃恒温培养箱，培养12-17h，待长出菌落。
3.灭菌15ml离心管内加入5ml含抗生素的LB液体培养基，编号标记。
4. 挑取单克隆菌团放置液体培养基，每个培养基放置1个菌落。
5. 37℃，180rpm，振荡培养过夜。
现在，一团团质粒丰富细菌准备就绪任人宰割啦。
分割线收获细菌并裂解21.离心扩增好的菌液，按说明书将菌液重悬，转入1.5ml离心管中。
2.用质粒小量抽提试剂盒，按说明书要求提取质粒。
3.细菌高速离心1min,彻底去除上清。
4.加入250ulRB溶液，振荡器充分悬浮细菌。
5.加入250ulLB溶液。
立即上下颠倒10次，使细菌裂解，室温，放置2min。
6.加入250ulNB溶液。
立即上下颠倒10次，使之充分中和，室温，放置2min。
7.室温，1500rpm，高速离心15min。
8、将吸附柱放入收集管内，离心得到的上清转移至吸附柱，室温，15000rpm，高速离心30s。
无内毒素质粒小量提取试剂盒说明书
北京索莱宝科技有限公司无内毒素质粒小量提取试剂盒说明书货号：D1140规格：50T/100T保存：常温干燥保存，复检期为一年。
试剂盒内容：试剂盒组成D1140-50T D1140-100TRNase A300ul500ul内毒素清除剂20ml40ml溶液P110ml20ml溶液P210ml20ml溶液P310ml20ml溶液P430ml60ml漂洗液15ml15ml×2洗脱液15ml30ml吸附柱50个100个收集管50个100个说明书1份1份注意：使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。
溶液P1在使用前先将试剂盒中提供的RNaseA全部加入，混匀，置于2-8℃保存。
如非指明，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
产品说明：本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞，根据离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA的原理特异性提取质粒DNA。
离心吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。
本试剂盒内的内毒素清除剂，可最大限度地除去内毒素。
从1-5ml大肠杆菌LB 培养液中，可快速提取5-15μg高纯度质粒DNA，提取率达85-90%。
使用本试剂盒提取的质粒DNA纯度高，第1页共3页可直接用于细胞转染等要求较高的实验，以及其他各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。
操作步骤：1、取1-5ml细菌培养物，12000rpm离心1min，吸除上清（菌液浓度较低时可多次离心收集到一个离心管中）。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入200μl溶液P1(请先检查是否已加入RNaseA），使用移液器或旋涡振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀。
注意：如果菌块未彻底混匀，会影响裂解导致质粒提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入200ul溶液P2，温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。
注意：混匀一定要温和，以免污染细菌基因组DNA，此时菌液应变得清亮粘稠，作用时间不要超过5min，以免质粒受到破坏。
EZ-10质粒提取试剂盒说明书
EZ-10柱式质粒小量抽提试剂盒产品编号：B610413 包装规格：50/100 次试剂盒组成组分 50 次 100 次 RNase A Solution I Solution II Solution III Wash Solution Elution Buffer EZ-10 Column 2.0 ml Collection Tube 操作手册2.1mg 14ml 14ml 20ml 12ml 5ml 50 50 1份4.2mg 28ml 28ml 40ml 24ml 10ml 100 1001份a.RNase A 以干粉形式运输。
使用前，加入1ml solution I 到RNase A 中，彻底溶解后将RNase A 溶液全部加入到Solution I 中并混合均匀。
含RNase 的Solution I 如经常使用应保存于4°C ，不经常使用则保存于-20°C 。
b. Solution II 保存过程可能会形成沉淀。
如有沉淀，则将溶液于37ºC 温浴使沉淀溶解。
c.使用前，12ml Wash Solution (B610413，50次)中应加入48ml 96-100%的乙醇，或24ml Wash Solution(B610413，100次)中应加入 96ml 96-100%的乙醇。
如果是其他体积的wash solution ，只需要加入足够的乙醇使得比例为4:1 (无水乙醇:Wash Solution= 4:1)。
d. Elution Buffer 为2.0 mM Tris-HCl ，pH 8.0~8.5。
回收率相当于TE buffer pH 8.0或水的120%。
保存方法除RNase A 外，试剂盒的其他组分可室温保存。
RNase A 应保存于4ºC 。
试剂盒在室温下可稳定保存12 个月。
为长期保存，请将试剂盒置于低温环境中。
原理本试剂盒用于质粒DNA 小量抽提纯化，方法简单高效。
GENMED 小量质粒抽提试剂盒 产品说明书(中文版)
GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A GMS60007.1 v.A GENMED小量质粒抽提试剂盒产品说明书（中文版）主要用途GENMED小量质粒抽提试剂是一种旨在通过化学和生物裂解细胞、净化、沉淀、萃取来达到脱盐、去蛋白、去杂质小分子的纯化质粒DNA的权威而经典的技术方法。
该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种质粒/柯斯质粒DNA样品的制备，OD260/280在1.8-2.0之间。
产物可用于各种后续。
产品即到即用，性能稳定，操作方便迅速，提取效率和纯化程度高。
技术背景GENMED小量质粒DNA制备技术综合了酶解、碱裂、净化等液体法优势元素充分有效地使细菌中核酶、PCR反应抑制剂失活，清除非DNA分子，其产量较之离心柱法高达数倍。
产品内容GENMED混匀液（Reagent A）毫升GENMED裂解液（Reagent B）毫升GENMED平衡液（Reagent C）毫升GENMED净化液（Reagent D）微升GENMED沉淀液（Reagent E）毫升GENMED清理液（Reagent F）毫升GENMED保存液（Reagent G）毫升产品说明书1份保存方式保存GENMED混匀液（Reagent A）和GENMED净化液（Reagent D）在℃冰箱里，其余的保存在℃冰箱里，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于样品操作的容器微型台式离心机：用于沉淀核酸涡旋震荡仪：用于混匀反应物实验步骤1．加入毫升含质粒的细菌到毫升离心管（注意：确保细菌量OD600＝ ;如果细菌量不足，影响质粒提取）2．放进微型台式离心机离心秒，速度为g（RPM，例如eppendorf 5415D）3．小心抽去上清液4．加入微升GENMED混匀液（Reagent A），涡旋震荡少许，使细菌颗粒充分混匀5．加入微升GENMED裂解液（Reagent B），轻轻混匀6．加入微升GENMED平衡液（Reagent C），强力涡旋震荡秒7．放进微型台式离心机离心分钟，速度为g（RPM，例如eppendorf 5415D）8．小心移取微升上清液到新的毫升离心管，避免絮状物（注意：如果操作不慎，可以重复实验步骤和，确保避免絮状物）9．加入微升GENMED净化液（Reagent D）10．室温下静置分钟11．加入微升GENMED沉淀液（Reagent E）12．放进微型台式离心机离心钟，速度为g（RPM，例如eppendorf 5415D）13．小心抽去上清液14．加入微升GENMED清理液（Reagent F）15．放进微型台式离心机离心分钟，速度为g（RPM，例如eppendorf 5415D）16．小心抽去上清液17．空气中晾干18．加入微升GENMED保存液（Reagent G）19．放进℃冰箱里备用注意事项1．本产品为100次操作2．GENMED液体法采用特殊酶解和净化技术3．细菌量是个重要因素：通常1毫升细菌可获得3－10微克质粒4．如果需要制备各种数量的细菌质粒/柯斯质粒，可订购中量和大量规格5．如果强化去除残留的RNA，建议使用本公司提供GENMED-RNA清除试剂盒（GMS20059）6．如果需要去除细菌内毒素，建议使用GENMED去内毒素试剂盒（GMS20067）7．本公司提供特级优质质粒提取试剂盒：GENMED质粒DNA氯化铯纯化试剂盒（GMS20025）、GENMED 低内毒素小量质粒抽提试剂盒（GMS60007.2）和GENMED无内毒素小量质粒抽提试剂盒（GMS60007.3）质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定提取效率和纯化程度高使用承诺杰美基因秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
质粒提取试剂盒说明书
而载体构建的方法有多种：
常规克隆（分子克隆你不知道的那些事）
TA克隆（这么简单的TA克隆来领走吧）
同源重组（秒杀分子克隆！同源重组快人一步）
而经转化（DH5α感受态制备及转化）、菌落PCR（菌落PCR）验证得到阳性克隆后，就需要提取质粒了。
构载体是分子生物学中最基本的实验了，而提质粒可以说是最简单的实验了，完全不经过大脑，照着说明书就是“机械”操作，因为这个有现成的试剂盒嘛。
嗯，虽然简单，但是也不能不想啊，要不然提质粒是按什么原理来的你都不知道，这不，当你还在傻傻用试剂盒提质粒的时候，我已经开始自己配buffer了。
加灭菌水补足到1 L。
这个溶液的主要作用是细胞裂解，氢氧化钠会破坏细胞膜的结构，同时会使基因组变性成单链，而对质粒无影响。
在这一步，试剂盒的说明书上会说时间不能过长，因为时间长了对质粒也是有影响的。
而SDS可以和蛋白结合，使变性蛋白质将溶解在溶液中，从而多肽链更好地与基因组DNA缠绕。
这个溶液一看就是酸，用来中和碱的，同时还能清除掉蛋白质等细胞内的杂质，此时基因组也会复性沉淀下来。
另外醋酸钾会与Solution Ⅱ中的SDS发生作用，反应生成的十二烷基硫酸钾，而十二烷基硫酸钾不溶于水，会迅速发生沉淀，也就是我们提质粒时经常看到的沉淀。
好了，到这一步后，试剂盒法一般是要先离心，取上清去过柱，有的剂盒有一个柱的平衡液：。