多聚甲醛固定对流式细胞术检测HepG2细胞整合素αVβ3的影响
多聚甲醛固定对流式细胞术检测人外周血白细胞P-糖蛋白表达的影响
对照非 特异性背景明显增高 ， 严重干扰 Ｐｇ 而且 — Ｐ外 表位的检测 。在客观全面评价 Ｐｇ － ｐ表达 水平 时 ， 同 时对 Ｐ印 内外表位进行 检测是必要 的 ， － 但在傲 固定
参考 文献 ：
［ 。 ｕ ｍ ． ｅ ｉ ＪＬ Ｍ ｓ ｕ ， ａ ｐ ｄ ｔ ｅ ｅ ｒ ｍ ｅ 【 Ｉ Ｇ ｅ ｉ Ｍ ｒｎ ． ｉ ｏ ｍ １ ｒ ｉ ｉ ｕ ｅ ｍ ｎ Ａ ｌ ｓ ． ｅ ｃｖ ｖ Ｉ
（ｌ Ｏ ， ｉ ａ ｕ Ｒｔ ｔ￣ ｎ ｃ ｌ ｍｙ ｌｌ ｌｕ ｅ ａ ｏ ｃ ｌ ｒ ｄ ｕ ｏ ｉ ｎ ￣： ｎ ｅｏｄ ｅ ｋ ｍｉ ｆ ｅｌ ａ ｎ ｍｈ ｅ ｕ ｉ －ｕ ｌｔ ｎａ ｄ Ｐ ｇ ｘ ｒｓｉｎｓｍｕ ａ ｅｌ ｅｅ ｜ｅ ｙ ｆ ｗ Ｐ ｍｏａｉ ｎ －ｐ ｅ ｐ ｓ ｉ ｈ ｎ ｔ ｖｄ ｔｒ ｎ ｄｂ ｔ ｏ ｅ ｏ ｕ ｏ
的存在。但这些胞 内潜 在 Ｐｇ — Ｐ位点 的多少 可能 与 细胞膜表面 Ｕ Ｃ 特异的表位的量无关 ， Ｉ２ 因为表 １ 结
果 表 明 ， 固定 的 Ａ Ｌ 未 Ｎ Ｌ难 治组 Ｐｇ 达 高 于 初 治 ．Ｐ表
癌患者初治组与难治组外周血 白细胞 Ｐｇ － Ｐ表达量 无显著差异 ， Ａ Ｌ 而 Ｎ Ｌ患者初治组与难治组 Ｐｇ － Ｐ表
｝与 Ａ Ｌ Ｎ Ｌ初 治 组 相 比 ， ＜ ． ５ △ 与 固定 前 相 比 ， ０ ０ 。 Ｐ ００ ； Ｐ＜ ． １
３ 讨论
位的检测 ， 固定后细胞 Ｕ ２ 但 １ 特异 的 Ｐｇ Ｃ － Ｐ表位量
整合素-α2和整合素-β3基因多态性与急性心肌梗死的相关性研究
Ｒｅ ａ ｉ ｎｓ ｉ ｆ ｉ ｔ ｇ ｉ ｌ ａ＿ ｎ ｅ ａ－ ｅ ｏ ｙ ｏ ｐｈ ｓ ｓ ｌ ｔｏ ｈ ｐ ｏ ｎ ｅ ｒ ｎ ａ ｐｈ 。 ａ ｄ ｂ ｔ 。 ｇ ｎｅ ｐ ｌ ｍ ｒ ｉｍ ２ ３ ｗｉｈ ａ ｕ ｅ ｍ ｙ ｃ ｒ ｉ ｌｉ ｆ ｒ ｔｏ ｔ ｃ ｔ ｏ ａ ｄ ａ ｎ ａ ｃｉ ｎ
率 的相 对风 险分 析 发 现 ， 等 位 基 因携 带 者 患 ＡＭＩ 风 险 是 Ｃ 等 位 基 因 的 １ ６ ８倍 （Ｒ 一 １ ６ ８ ９ Ｃ ： Ｔ 的 ．０ Ｏ ．０ ，５ Ｉ
１ １４ ２ １５ ， 带 Ｔ 等 位 基 因的 ＡＭＩ 者 Ｔ ．９～ ．６）携 患 Ｃ水 平显 著 高 于 未携 带 Ｔ 等 位 基 因者 （ Ｐ＜ ０ ０ ） 结论 Ｉ Ｇ ．５ 。 Ｔ Ａ２
中华老 年心脑 血 管病 杂志 ２ １ ０ ０年 ３月 第 １ ２卷 第 ３期 Ｃｈ ｒｔ Ｈｅｒ Ｂａ ｉＪＧｅｉ ｒ ａｔ ｒｉ ｓｅ ＤｓＭａ ０１ ， ｏ １ ， ｏ３ ｎ ａ ｎＶｅｓｌ ｉ， ｒ ０ Ｖ ｌ ２ Ｎ ． ２
・２ ５ ・ １
临 床 研 究
整合 素一２和整合 素一３ 因多 态性 与急性 ｌ基 ３ 心 肌梗 死 的相 关 性研 究
ｅ ｆ ｃ ｆｉ ｅ ｒｎ ｇｅ ｏｌ ｍｏ ｐｈ ｓ ｎ ｐ ａ ｍ ａ ｌｐ ｄ ａ ｉ ｏ ｏ ｅｎ ｌｖｅｓ Ｍ ｅ ｈ ｄ Ｐｏ ｙ ｅ — ｆｅ ｔｏ ｎｔ ｇ ｉ ｎｅ ｐ ｙ ｒ ｉ ｍｓ ｏ ｌ ｓ ｉ ｉ ｎｄ ｌｐ ｐｒ ｔ ｉ ｅ ｌ ． ｔｏ ｓ ｌ ｍ ｒ ａ ｅ ｃ ａ ｎ ｒ ａ ｔｏ — ｅ ｔ ｉ ｔｏ ｒ ｇ ｅ ｅ ｔ ｏ ｙ ｏ ｐｈ ｓ ａ ｓ ｈ ｉ ｅ ｃ ｉ ｎ ｒ ｓ ｒｃ ｉ ｎ ｆａ ｍ ｎｔ ｌｎｇ ｈ ｐ ｌ ｍ ｒ ｉｍ ｎｄ ＤＮＡ ｓ ｑ ｅ ｉ ｒ ｓ ｄ ｆ ｒ ｅ ｕ ｎｃｎｇ ｗｅ ｅ ｕ ｅ ｏ ｔ ｔ ｃ ｉ ｆｉ ｔ ｇｒｎ ｇｅ ｏｔ ｐ ｓｉ ０ ｐ ｔｅ ｓｗｉｈ ＡＭ Ｉａ ｄ ２ ａ ｔ ｙ ｃ ｎ ｒ ｓ Ｔｈ ｌ ｓ ｈｅｄｅ ｅ ｔｏｎ ｏ ｎ ｅ ｉ ｎ ｙ ｅ ｎ １ ａ ｉｎｔ ｔ ８ ｎ ００ ｈｅ ｌｈ ｏ ｔ ｏｌ． ｅ ｐ ａ ｍａ ｌ ｄ ａ ｉ ｏｐ ｏｔ ｉ ｅ ｅ ｓ ｗｅ ｅ ｍｅ ｓ ｒ ｄ ｂ ｏ ｉ ｅ ｈｏ ．Ｒｅ ｕ ｔ Ｐｌ ｓ ｏ ａ ｈ ｅ ｔ ｒ ｌ ｉ ｎｄ ｌｐ ｒ ｅ ｎ ｌｖ ｌ ｒ ａ ｕ ｅ ｙ ｒ ｕｔｎｅ ｍ ｔ ｄ ｐｉ ｓ ｌｓ ａ ｍａ ｔ ｔ ｌｃ ｏｌｓ ｅ ｏ ， ｔ ｉ ｃ １ ｙ ｅ ｉ ｅ ａ ｏ ｄｅ ｉｙ ｌｐ ｒ ｅ ｎ ｃ ｌ ｓ ｅ ｏ ｎ ｔ ａ ｉｎｔ ｔ ｒａ ｙ ｇ１ ｃ ｒｄ ｎｄ ｌ ｗ ｎｓｔ ｉ ｏｐ ｏｔ ｉ — ｈｏ ｅ ｔ ｒ ｌｉ ｈｅ ｐ ｔｅ ｓｗｉｈ ＡＭ １ｗｅ ｅ ｓｇ ｆｃ ｎ — ｒ ｉ ｎｉｉａ ｔ
整合素αV、β3在肝细胞癌中的表达及临床意义
个高倍视野） ０ ≤３％计 １ ，１ ～ ０ 分 ３ ％ ７ ％计 ２ ， 分 ＞ ７ ％计 ３ ； ０ 分 阳性细胞 的着色强度按无 着色 、 黄色、 棕黄色和棕褐色分别判为 ０ １２３ 。根据两项积 、、 、 分
Ｈ Ｃ中整合素 ＆ 和 Ｂ 表达 阳性率分别为 ８ ％、２５ ， 显著高 于正常肝组织 （４４ ， ００ ）其表 达强 度 Ｃ Ｖ ０ ７．％ 均 ４．％ Ｐ＜ ．５ ，
也明显高于正常肝组织 （ ００ ） Ｃ Ｐ＜ ．５ 。Ｈ Ｃ中整合素 ＆ Ｂ Ｖ、 的表达强 度与肿瘤大小及转移 密切 相关 （ ０ ０ ） 整 Ｐ＜ ．５ ， 合素 ０ Ⅳ的表达强度与肿瘤包膜侵犯密切相关（ ０ ０ ） Ｐ＜ ．５ 。认 为整合 素 Ｖ、 的在 Ｈ Ｃ的发生 、 Ｂ Ｃ 发展及浸 润、 转 移过程中发挥着重要作用。 ［ 关键词］ 肝肿瘤 ； 整合素 ＆ 整合素 Ｂ Ｖ； ［ 中图分类号］ Ｒ ３ ． ７ ５７ ［ 文献标识码 ］ Ｂ ［ 文章编号 ］ １０ —６ Ｘ（０ ８ ０ －０ ００ ０２２６ ２０ ）６ ６ － ０ ２
羊抗 鼠 、 抗人整 合 素 抗 体 ， 羊抗
注： 与正常组比较 ， Ｐ＜０ ０ ， ． １ Ｐ＜ ．５ Ｏ０
鼠、 抗人整合素 ｐ 抗体（ 国 Ｓｎ ｒｚ 。 美 ａｔ Ｃｕ 公司） ａ 。 １３ 检测方法 ． 采用免疫组化 ｓ 法检测标本中的 Ｐ
２２ 整合素 、 。 ． ｐ 表达与 Ｈ Ｃ临床病理指标 的关 Ｃ 系 整合素 仅 Ｖ的表达 阳性率与 Ｈ Ｃ包膜侵犯 、 Ｃ 肿 瘤大小、 移 及 肿瘤 分 化 均 无 明显 相关 性 （ 转 Ｐ＞
整合素αvβ3,小干扰RNA载体构建及其对人视网膜血管内皮细胞的干扰效应检测
Ｄ Ａ寡核苷酸链 ， Ｎ 每条正义链包括 ５ 末端 Ｂ ｍ 酶切位点和 ａ ＨＩ
反 向的两个一致 的靶 序列 （９ ｂ ） 两个靶 序列 之间被 ９ｂ １ ｐ ， ｐ的 非 同源序列 （Ｔ Ｃ Ａ Ａ Ａ） 间 隔。３ ＦＡ Ｇ Ｇ 所 末端加 有 ｎＴ Ｉ＇ ｒＴ 及 Ｉ
Ｈｉ Ｉ 酶切位点 。其 中整合素 ｏ ．： Ｇ Ｔ Ｃ Ｇ Ｇ Ａ Ｆ ｎＩ ｄ Ｉ ｔ １５． Ａ Ｃ Ｇ Ａ Ｇ Ｔ Ｃ
成功构建了针对整合 素 ｎ Ｂ 的 ３
视 网膜 新生血管可 由多种 眼病 引起 ， 视 网膜 静脉 阻塞 ， 如 眼缺血综合 症 ， 增殖性 糖尿 病视 网膜病 变 ， 产 儿视 网膜病 变 早 等。抑制视 网膜 新 生血 管 生长 是 治疗 此 类 疾 病 的关 键 】 。 整合素（ｎｅｒ ） ｉｔ ｉ 是一 类细胞 表 面受体 家族 ， ｏ 和 Ｂ两 条链 ｇｎ 由ｔ 通过非共价键连接而成 的异 源二 聚体跨膜 糖 蛋 白 】 。这 一类 受体参与细胞与基质 、 细胞 与细胞 之 间的黏 附 ， 在很 多重 要 的
２： ＡＧＣＩ Ｉ Ｃ ５一 ｒ几－ Ｃ ＡＡＡＡ － ’ ＡＡＧＡＴＦ Ｃ ＧＧ ＴＧＧ ＡＧＧＡＡ ＧＡ，ｒ Ｔ Ｔ Ｔ ＩＣ Ｃ Ｔ Ｔ ＧＡＡＡＴ Ａ，Ｉ Ｔ ＡＧＣ ＡＡＴ Ｇ－ Ｃ Ｉ ℃Ｃ ＣＣ Ｔ Ｃ Ｃ ３。
ｔ ｏ 与配体结合后通过丝裂 原激活 的蛋 白激酶途 径使 内皮 细
ＡＧＣ ＡＴＴ Ｔ Ｃ ＡＡＧＡＧ ＧＡ Ｔ ＴＣ ＡＡＡＴ ＡＡ ＣＴ ＡＴ Ｃ ＣＣ ｒ Ｉ ＇ Ｃ ＴＧ ＧＡ Ｃ Ｔ Ｔｒ ｒ Ｔ Ｉ
Ｇ Ａ Ａ３ ； 合 素 ｏ 一 ： Ａ ＣＩＴＩ Ｃ Ａ Ａ Ａ Ｇ Ｇ Ａ － Ｇ Ａ 一 整 ｔ ２ ５一 Ｇ ｒＩＴ Ａ Ａ Ａ Ｇ Ａ Ｇ Ｔ －Ｉ’ Ｃ
整合素αV与β3在鼻咽癌组织中的表达及其意义▲
整合素αV与β3在鼻咽癌组织中的表达及其意义▲桂雄斌;莫立根;张堃;党阳【摘要】目的探讨整合素αV、β3在鼻咽癌组织中的表达及其与鼻咽癌发生发展的关系。
方法采用免疫组化Supervision二步法检测106例鼻咽癌组织、26例鼻咽黏膜慢性炎症组织中整合素αV、β3的表达，分析其与鼻咽癌患者各临床病理特征之间的关系。
结果106例鼻咽癌组织中，整合素αV、β3表达阳性率分别为81．1％（86/106）、94．3％（100/106），26例鼻咽黏膜慢性炎症组织均无整合素αV、β3阳性表达（P＜0．01）。
整合素αV、β3表达与鼻咽癌临床分期、淋巴结转移和远处转移有关（P＜0．05），与患者性别、年龄无关（P＞0．05）。
整合素αV与β3表达无相关性（P＞0．05）。
结论整合素αV、β3与鼻咽癌的发生、发展有密切关系，两者互相作用共同促进鼻咽癌的侵袭转移。
%Objective To investigate the expression of integrin alpha V and integrin beta 3 in the nasopha-ryngeal carcinoma ( NPC) tissue and its relationship with the occurrence and development of NPC .Methods Immu-nohistochemical Supervision two-step method was used to evaluate the expression of integrin alpha V and integrin beta 3 in 106 cases of nasopharyngeal carcinoma tissue and 26 cases of nasopharyngeal inflammation tissue .The relation-ship of integrin alpha V and integrin beta 3 expressions with clinicopathological features of NPC patients was analyzed . Results In 106 cases of nasopharyngeal carcinoma tissue ,the positive expression rates of integrin alpha V and inte-grin beta 3 were81.1%(86/106),94.3%(100/106) ,respectively,there was no positive expression of integrin alpha V and integrin beta 3 could be observed in 26cases of nasopharyngeal inflammation tissue (P<0.01).The expres-sions of integrin alpha V and integrin beta 3 in NPC tissue correlated with clinical pathological stage ,lymphatic metas-tasis and distant metastasis(P<0.05),but did not correlate with gender and age (P>0.05).The expression of inte-grin alpha V had no correlation with that of integrin beta 3(P>0.05).Conclusion The expressions of integrin al-pha V and integrin beta 3 closely correlate with the occurrence and development of NPC ,their interaction may contrib-ute to the invasion and metastasis of NPC .【期刊名称】《广西医学》【年(卷),期】2013(000)008【总页数】4页(P972-975)【关键词】鼻咽癌;整合素αV;整合素β3;免疫组化;侵袭转移【作者】桂雄斌;莫立根;张堃;党阳【作者单位】广西中医药大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科,南宁市,530023;广西医科大学附属肿瘤医院头颈外科,南宁市,530021;广西医科大学附属肿瘤医院头颈外科,南宁市,530021;广西医科大学附属肿瘤医院头颈外科,南宁市,530021【正文语种】中文【中图分类】R739.63鼻咽癌是我国南方最常见的恶性肿瘤之一，其侵袭转移是导致临床治疗失败和患者死亡的主要原因。
多聚甲醛固定细胞原理
多聚甲醛固定细胞原理多聚甲醛是一种常用的细胞固定剂，其原理主要是通过与细胞内的蛋白质和核酸等生物大分子发生共价交联，从而使细胞结构固定，防止其在后续处理过程中发生变性和溶解。
多聚甲醛固定细胞的原理主要包括以下几个方面：首先，多聚甲醛可以与细胞内的蛋白质发生交联作用。
细胞内的蛋白质是细胞内最主要的有机物质，它们参与了细胞的各种生命活动，如代谢、运输、结构支持等。
多聚甲醛的甲醛基团可以与蛋白质中的氨基酸残基发生共价交联，形成甲醛-蛋白质的加合物，从而固定了细胞内的蛋白质结构。
其次，多聚甲醛还可以与细胞内的核酸发生交联作用。
核酸是细胞内的遗传物质，包括DNA和RNA。
多聚甲醛的甲醛基团可以与核酸中的碱基发生共价交联，形成甲醛-核酸的加合物，从而固定了细胞内的核酸结构。
此外，多聚甲醛还可以与细胞膜和细胞骨架等结构发生交联作用。
细胞膜是细胞的外界界面，细胞骨架是细胞内的支架结构，它们对细胞的形态和功能起着重要作用。
多聚甲醛可以与细胞膜和细胞骨架中的蛋白质发生交联，从而固定了细胞的整体结构。
总的来说，多聚甲醛固定细胞的原理是通过与细胞内的生物大分子发生共价交联，从而固定了细胞的结构。
这种固定方法不仅可以保持细胞的形态和结构完整，还可以使细胞在后续的染色、显微观察和免疫检测等实验中更加稳定和可靠。
因此，多聚甲醛固定细胞在细胞生物学和组织学研究中得到了广泛的应用。
在实际操作中，多聚甲醛固定细胞的原理需要结合具体的实验要求和细胞类型来进行选择和优化。
同时，需要注意多聚甲醛的使用浓度、固定时间和固定温度等因素对固定效果的影响，以确保实验结果的准确性和可靠性。
综上所述，多聚甲醛固定细胞的原理是通过与细胞内的生物大分子发生共价交联，从而固定了细胞的结构。
这种固定方法在细胞生物学和组织学研究中具有重要意义，为后续实验提供了可靠的基础。
因此，深入理解多聚甲醛固定细胞的原理对于开展细胞生物学和组织学研究具有重要的意义。
多聚甲醛固定液的原理
多聚甲醛固定液的原理本产品是一种广泛用于免疫组化(ihc)、免疫荧光(if)、免疫细胞化学(ic)、流式分析(facs)等检测时组织、组织切片、细胞等生物样品固定的溶液。
本产品配制在pbs溶液中，可直接用于组织或细胞的固定，无需稀释。
若需使用低浓度多聚甲醛，可使用pbs按比例稀释。
组织学上，4%的多聚甲醛穿透力强，固定均匀，能使组织硬化，有利于切片。
该固定剂造成的组织收缩少，损伤小，较为温和，能很好的保存固有物质，保持组织的抗原性和细微结构。
此外，多聚甲醛可用于固定并保存脂肪及脂类物质。
本产品固定效果好，应用广泛，适用于各种常见细胞或组织的固定。
对皮肤、肌肉、内脏等有很好的固定作用。
，但主要作用于蛋白质，无法固定尿酸和糖等。
固定液可以使细胞或组织的蛋白质凝固，阻止内源性或外源性的酶反应，防止组织的自溶或异溶，保持原有的结构和形态。
对于免疫组织化学，具有原位保存抗原，避免抗原失活或分散的作用。
固定剂有很多种，如多聚甲醛、甲醛、戊二醛、乙醇、丙酮等。
其固定原理不同，各有利弊。
多聚甲醛目前在科研中应用最广泛，通过形成分子间交联可以固定细胞或组织的三维结构。
多聚甲醛是甲醛的聚合物，性质比甲醛稳定，破坏抗原的能力比甲醛弱。
因此，多聚甲醛常被用作科学研究中的固定剂。
本产品经反复测试，可以很好的适用于ihc、if、ic和facs 等相关检测时样品的固定。
按每个样品需要1ml固定液计算，一包本品可固定100或500个样品。
保存条件：-20℃保存，一年有效。
4℃保存，一个月有效。
注意事项：1．本产品放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸，使溶液ph降低，从而影响染色。
2．不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
3．多聚甲醛虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。
因此固定时间通常不宜超过24小时。
4．多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中，固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留，因此后续实验结果如果受醛基影响，须尽量洗去残留的多聚甲醛。
免疫荧光技术中不同固定剂对RhoA蛋白定位的影响
［摘要］目的: 观察免疫荧光技术中不同固定剂对SGC7901细胞中RhoA蛋白定位的影响，找出最适合观察RhoA蛋白细胞内定位的固定方法。
方法: 采用免疫荧光的方法观察在使用不同固定剂（2%多聚甲醛，4%甲醛，甲醇，丙酮，10%三氯醋酸）及0.3%TritonX-100穿孔的条件下，RhoA蛋白在SGC7901细胞中的定位。
结果: 用2%多聚甲醛固定，不用0.3%TritonX-100时，染色显示胞质内可见少量RhoA蛋白散在分布，核内则有RhoA蛋白浓聚;用0.3%TritonX-100后，质内只能见极少量阳性染色，核内蛋白染色变得清晰。
甲醛固定后染色显示RhoA蛋白主要在核内分布，使用TritonX-100后染色更为清楚。
甲醇和丙酮固定后染色显示RhoA蛋白主要在胞质内分布，核内基本未见阳性分布，加TritonX-100后核内染色增强，胞质染色减弱。
另外，使用10%三氯醋酸固定未加TritonX-100时染色较淡，胞质胞核都可见，加TritonX-100后核内可见蛋白浓聚，胞质染色减少。
结论: 用免疫荧光法观察RhoA定位时，固定剂的不同以及是否加TritonX-100对观察RhoA蛋白细胞内定位具有较大的影响。
［关键词］固定剂; 免疫荧光显微镜术; TritonX-100; RhoAEffect of different fixatives on location of RhoA protein by immunofluorescence microscopyQIN You，CHEN Yong-chang（School of Medicine，Jiangsu University，Zhenjiang jiangsu 212001，China）［Abstract］Objective: To observe the effect of different fixatives on the location of RhoA protein and find the optimum fixative for the localization of RhoA in SGC7901 cells by immunofluorescence microscopy. Methods: The subcellular location of RhoA protein in cultured SGC7901 cells fixed with different fixatives such as 2% paraformaldehyde，4%formaldehyde，methanol，acetone，and 10% trichloroacetic acid （TCA）was studied by immunofluorescence microscopy. Results: Cells fixed by 2% paraformaldehyde without TritonX-100 treatment showed accumulation of RhoA in nucleus but little distribution in cytoplasm. After penetrating with TritonX-100，RhoA protein could not be detected in cytoplasm and was more accumu- lated in nucleus. Cells fixed by 4% formaldehyde without TritonX-100 penetrating showed nuclear distribu- tion of RhoA. After penetrating with TritonX-100，the staining became clearer. Fixation of SGC7901 cells with methanol or acetone without TritonX-100 penetrating showed that RhoA distributed mainly in the cyto- plasm. After penetrating with TritonX-100，RhoA staining could be seen in nucleus and became weaker in cytoplasm. In addition，in cells fixed by 10% TCA without TritonX-100 penetrating，RhoA was stained blurredly and could be seen in both cytoplasm and nucleus. After TritonX-100 penetrating，the staining be-came clear and the distribution was reduced in cytoplasm and increased in nucleus. Conclusion: Different fixatives and penetrating with TritonX-100 or not are important for localizing RhoA protein by immunofluo-rescence microscopy.［Key words］fixative; immunofluorescence microscopy; TritonX-100; RhoA蛋白是小G蛋白家族成员之一，在细胞内信号转导通路中起着重要作用。
4%的多聚甲醛固定细胞时间
4%的多聚甲醛固定细胞时间多聚甲醛（polyformaldehyde）是一种高分子化合物，具有良好的稳定性和可模性。
由于其优异的物理性质和化学性质，它经常被用作材料的加工、改性和改良。
多聚甲醛对于细胞固定和保存也具有一定的应用价值。
多聚甲醛对于细胞固定的主要机制是通过反应它与细胞壁上的有机物质。
多聚甲醛的预处理可以使其在常温下可以长时间保存。
不同的组织和细胞类型可能对多聚甲醛的反应有所不同。
在此研究中，我们将考察细胞固定在4%多聚甲醛中的时间对细胞形态和活性的影响。
在实验中，我们将使用细胞培养技术来培养人类肝癌细胞HepG2。
将细胞分配到预制的多聚甲醛溶液中，然后在不同时间间隔观察细胞的形态和生物学活性。
结果表明，在4%多聚甲醛中，细胞固定时间较短（1小时）可以有效固定细胞并保持其细胞形态。
长时间固定后（4小时以上），细胞形态发生了明显的改变，细胞外形变得圆滑，并且出现了一些空泡。
在长时间固定后，HepG2细胞的增殖速度降低，并出现部分细胞死亡。
结论是，在4%多聚甲醛中，短时间固定细胞可以有效保持其形态和活动性。
长时间固定后，会导致细胞形态的改变、增殖速度的减缓和部分细胞死亡。
在细胞固定的过程中，需要对固定时间进行控制并根据不同的细胞类型和实验需求进行调整。
1. 高效：多聚甲醛使固定后的细胞和组织具有较好的形态和细胞学特征，便于后续的观察和研究。
2. 稳定性好：多聚甲醛可以长期保存固定后的细胞和组织样本，而且不会破坏它们的形态和结构特征。
3. 易于操作：多聚甲醛的使用比较简单，只需要将其加入到固定样本中即可。
4. 适用性广：多聚甲醛具有广泛的适用性，可以用于固定细胞、组织、器官等不同类型的样本。
多聚甲醛也存在一些缺点。
使用多聚甲醛固定样本后，可能会与一些药物、抗体等相互干扰，影响后续的分析结果。
长时间的多聚甲醛固定可能会引起一些细胞死亡和组织失活等不良反应。
1. 固定时间：固定时间应根据细胞和组织类型进行调整，在不同实验条件下确定最佳固定时间。
多聚甲醛溶液(4% PFA,RNase free)
北京雷根生物技术有限公司 多聚甲醛溶液(4% PFA,RNase free)简介：固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构，固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。
固定液分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等，较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
Leagene 多聚甲醛溶液(4% PFA,RNase free)主要由优质多聚甲醛、磷酸盐、DEPC 处理水组成，pH 为7.4，适合于绝大多数组织和细胞的固定，尤其适用于与RNA 有关实验，它能较好的保护组织和细胞的形态结构以及RNA 。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 一般组织固定时间控制在4～12h 。
2、 大标本应适当延长固定时间，培养细胞或细胞爬片固定时间控制在10～15min 。
3、 特殊情况除外。
注意事项：1、 该固定液无法高压灭菌，所以无法做到彻底的RNase free ，操作时请注意该细节。
2、 多聚甲醛溶液(4% PFA,RNase free)有一定刺激性和腐蚀性。
一经开启，储存过久固定效果易下降。
3、 避免过度延长固定时间，否则引起生物大分子过度交联。
取材厚度不同，固定时间也不同。
4、 固定液的容量应足够，一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。
5、 温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。
6、 取出新鲜组织后，应及时固定，无法及时固定时，应保存于生理盐水中及时送检。
编号 名称 DF0133 DF0133 Storage 多聚甲醛溶液(4% PFA,RNase free) 100ml 500ml 4℃ 使用说明书 1份。
多聚甲醛固定DIO染色外泌体对肿瘤细胞活性的影响
doi：10.3969/j.issn.1000-484X.2023.07.002多聚甲醛固定DIO染色外泌体对肿瘤细胞活性的影响①刘佳敏杨艳红彭彬②戢敏③徐旭张自力曾蓉潘万龙（川北医学院基础医学与法医学研究所，南充637000）中图分类号R392.3 文献标志码 A 文章编号1000-484X（2023）07-1351-07［摘要］目的：探究多聚甲醛固定外泌体对外泌体本身、细胞活性和功能的影响，为研究外泌体相关策略选择提供基础。
方法：采用透射电镜和Western blot鉴定外泌体，通过外泌体转染HepG2、Panc-1、Hela细胞后的形态和功能变化，鉴定多聚甲醛固定和未固定DIOC18（3）（3，3'-二十八烷氧碳菁高氯酸盐）染色对外泌体生物学特性的影响。
采用CCK-8、MTT试验、细胞凋亡试验、细胞分泌外泌体的功能和细胞本身的功能来确定多聚甲醛固定和未固定DIO染色外泌体对细胞活力和功能的影响。
结果：多聚甲醛固定DIO染色外泌体转染细胞阳性率比多聚甲醛未固定组高（20.21±0.05）%（P<0.05），前者的凋亡率比后者高（12.65±0.01）% （P<0.05）。
多聚甲醛未固定DIO染色外泌体转染的细胞存活率比多聚甲醛固定组高（22.84±0.16）%（P< 0.05），前者外泌体分泌率比后者高（28.10±5.65）%（P<0.05）。
多聚甲醛未固定DIO染色HepG2.2.15细胞上清来源的外泌体转染HepG2细胞后，HBV DNA拷贝数比多聚甲醛固定DIO染色外泌体组高3.33倍（P<0.05）。
结论：多聚甲醛固定DIO染色外泌体对外泌体本身特性及示踪定位研究具有良好效果；多聚甲醛未固定DIO染色外泌体亦能达到一定的示踪目的，但更能准确评价外泌体对细胞功能调控的作用。
［关键词］多聚甲醛；DIO（3，3 ' -二十八烷氧碳菁高氯酸盐）；外泌体；细胞活力Effect of paraformaldehyde fixed DIO stained exosomes on tumor cell activity LIU Jiamin， YANG Yanhong， PENG Bin， JI Min，XU Xu，ZHANG Zili， ZENG Rong， PAN Wanlong. Institute of Basic Medicine and Forensic Medicine， North Sichuan Medical College， Nanchong 637000， China［Abstract］Objective：To investigate the effects of paraformaldehyde fixation of exosomes on exosomes themselves， cell viability and functions， to provide the foundation for the selection of exosome-related research strategies. Methods：After the exosomes were identified by transmission electron microscopy and Western blot， the effects of paraformaldehyde fixed and non-fixed DIOC18（3）（3，3'-DIOctadecyloxacarbocyanine perchlorate） staining on the biological properties of exosomes were identified by morphological and func‐tional HepG2，Panc-1，Hela cell changes after exosome transfection. CCK-8， MTT assay， apoptosis assay， cell function in secreting exosomes and the function of cells themselves were used to determine the effect of paraformaldehyde fixed and non-fixed DIO-stained exosomes on cell viability and function. Results：The positive rate of transfected cells which were transfected with paraformaldehyde fixed DIO stained exosomes was （20.21±0.05）% higher than paraformaldehyde non-fixed group （P<0.05）， and the apoptosis rate of the former was （12.65±0.01）% higher than the latter （P<0.05）. The survival rate of transfected cells which were transfected with para‐formaldehyde non-fixed exosomes was （22.84±0.16）% higher than paraformaldehyde fixed group （P<0.05）， and the exosome secretion rate of the former was （28.10±5.65）% higher than that the latter （P<0.05）. The copy number of HBV DNA in HepG2 cells which were transfected with paraformaldehyde non-fixed，DIO stained，and the exosomes derived from HepG2.2.15 culture medium was 3.33 times higher than paraformaldehyde fixed DIO stained exosomes （P<0.05）. Conclusion：The paraformaldehyde fixation and DIO staining of exosomes demonstrated good results for the investigation of exosomes' own characteristics， tracing and localization of exosomes. DIO staining of exosomes without paraformaldehyde fixation can also achieve the goal of tracing to a certain degree， but it can evaluate more accurately the role of exosomes in regulating cell function.［Key words］Paraformaldehyde；DIO（3，3'-DIOctadecyloxacarbocyanine perchlorate）；Exosomes；Cell activity①本文为2019年川北医学院国家自然科学基金预研项目（CBY19-YZ07）。
检测细胞完整性是否可以用多聚甲醛固定
检测细胞完整性是否可以用多聚甲醛固定检测细胞完整性是否可以用多聚甲醛固定?在检测凋亡时,应该不用固定.固定必然会破坏细胞膜造成假阳性.实验室固定细胞分很多种，如果怕损害细胞膜就不要用丙酮，用甲醛或者多聚甲醛，这样对细胞损伤小一些。
用多聚甲醛固定悬浮细胞所有的固定方案必须做到：①防止抗原丢失；②透化细胞以便使抗体进入；③尽量使抗原保持能与抗体结合的状态；④维持细胞正常结构。
常用的固定剂种类很多，固定剂的正确选择取决于被研究抗原的性质及所用抗体的特性。
固定剂可分为两大类：有机溶剂和交联剂。
有机溶剂如乙醇和丙酮能够去除脂类物质使细胞脱水，把蛋白质沉淀在细胞结构上。
交联剂一般通过自由氨基基团把生物分子桥连起来，形成一个相互连接的抗原网。
两种方法均使蛋白质抗原部分变性。
因此，在细胞染色中，能够识别变性蛋白的抗体更加有用。
在某些情况下，只有用此类抗体才能得到满意的结果。
往往凭经验选择固定剂。
虽然许多人发现用交联剂固定细胞可以获得较好的结果，但没有通用规则可以参考。
可以试用两种方法，然后选择较好的一种。
悬浮细胞染色通常用于检测细胞表面抗原。
因为细胞呈悬浮状态，洗涤过程复杂，因此，应注意离心时间不要过长或转速太高。
1．所需溶液4％多聚甲醛(临用前配制)、PBS。
2．操作步骤(1)PBS配制4％多聚甲醛；(2)用PBS洗涤细胞2次，用200g离心5min；重悬细胞。
(3)小心用4％多聚甲醛溶液悬浮细胞，细胞浓度约为1X106／m1 15min，间或摇动；(4)200g离心5rain，用PBS重悬细胞，重复洗涤细胞2次；室温下静置(5)用含0．2％TritonX-100或NP-40的PBS 溶液透化细胞2min(室温)，有的抗原需15min，具体时间视抗原而定；(6)200g离心5rain，用PBS重悬细胞，重复洗涤细胞2次。
此时的细胞标本可用于后续的抗体检测。
血清对Hela细胞整合素αvβ3受体内吞循环的影响
血清对Hela细胞整合素αvβ3受体内吞循环的影响张璐琳;刘文琦;蔡荣荣;沈皖珠;崔亚男;管华【摘要】目的探讨血清对Hela细胞整合素αvβ3受体内吞循环的影响.方法培养Hela细胞,激光共聚焦显微镜观测其表面αvβ3受体的表达情况.通过对细胞表面蛋白进行生物素标记,利用酶联免疫吸附法,考察含血清培养基培养条件下和不含血清的培养条件下,细胞表面αvβ3受体的内吞循环情况.结果αvβ3受体在Hela细胞表面具有高表达.与不含血清培养条件相比,含血清培养组αvβ3受体的入胞量在5min和10min时显著减少,差异具有统计学意义(P<0.05).结论含血清培养基培养的条件下,Hela细胞中的αvβ3受体可能更快地循环返回至细胞表面.【期刊名称】《济宁医学院学报》【年(卷),期】2019(042)003【总页数】4页(P162-165)【关键词】整合素αvβ3受体;细胞内吞;血清;人宫颈癌细胞;酶联免疫吸附法【作者】张璐琳;刘文琦;蔡荣荣;沈皖珠;崔亚男;管华【作者单位】济宁医学院药学院,日照276826;济宁医学院药学院,日照276826;济宁医学院药学院,日照276826;济宁医学院药学院,日照276826;济宁医学院药学院,日照276826;济宁医学院药学院,日照276826【正文语种】中文【中图分类】R730.1随着纳米医学以及分子生物学的发展，以肿瘤细胞中异常表达的蛋白或受体为靶标，通过对药物或载体进行特异性修饰，将药物分子选择性地递送到肿瘤细胞甚至其细胞器中，是药学工作者长期以来的研究方向[1-4]。
相应的，对于这类药物的入胞循环分子机制的探索，亦成为近年来的研究热点之一[5-6]。
目前，在给药系统对象的细胞内吞循环机制的研究方面，大多数实验采用的是无血清培养条件，对于血清的添加与否目前尚缺乏共识[7-9]。
有文献报道，细胞表面受体的内吞循环机制与培养基中添加的成分密切相关[10]。
血清作为培养基中模拟细胞体内生长环境所必需的营养成分，其成分复杂。
整合素αvβ3对MDA-MB-231BO乳腺癌细胞AKT信号通路的调控
整合素αvβ3对MDA-MB-231BO乳腺癌细胞AKT信号通路的调控彭远远;王捷;夏冰;杨传红;冼江【摘要】旨在探究整合素αvβ3的单克隆抗体LM609在BSP不同表达水平的乳腺癌细胞中对AKT(蛋白激酶B)信号通路的影响.利用免疫细胞化学法检测BSP不同表达水平的乳腺癌细胞中整合素αvβ3的表达量.BSP基因沉默乳腺癌MDA-MB-231BO细胞,Western blotting在蛋白水平检测磷酸化AKT的表达,MTT试验和细胞划痕试验分别检测细胞增殖、迁移能力的变化.结果显示,与231BO-Scrambled细胞相比,231BO-BSP27细胞中BSP蛋白水平明显降低,抑制率达到(59.43±1.71)％；LM609分别处理两株细胞后,与对照组231BO-Scrambled细胞相比,BSP基因沉默组21BO-BSP27细胞中AKT磷酸化水平下调明显,为(33.78±1.51)％(P＜0.01)；231BO-BSP27细胞和对照组231BO-Scrambled中细胞的增殖和迁移能力均有不同程度的下降(P＜0.05).LM609能够抑制胞内整合素αvβ3功能的表达,进而对AKT信号通路进行调控,并影响细胞增殖和迁移的发生.【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2012(000)003【总页数】5页(P191-195)【关键词】整合素αvβ3;LM609;乳腺癌细胞;AKT信号通路【作者】彭远远;王捷;夏冰;杨传红;冼江【作者单位】广州军区广州总医院医学实验科,广州510010;华南理工大学生物科学与工程学院,广州510006;广州军区广州总医院医学实验科,广州510010;广州军区广州总医院医学实验科,广州510010;广州军区广州总医院医学实验科,广州510010;广州军区广州总医院医学实验科,广州510010【正文语种】中文骨唾液酸蛋白（BSP）是1994年由Bellahcence首次在发生骨转移的人乳腺癌细胞中发现并阐明[1]。
多聚甲醛的作用
多聚甲醛的作用一、多聚甲醛的作用二、多聚甲醛中毒应怎么办三、多聚甲醛的危害多聚甲醛的作用1、多聚甲醛的作用多聚甲醛主要用于除草剂的生产和使用,还用于制取合成树脂(如人造角制品或人造象牙)与胶粘剂。
多聚甲醛同时用于制药工业(避孕乳膏的有效成分)及药房、衣服和被褥等的消毒,多聚甲醛也可用作熏蒸消毒剂、杀菌剂和杀虫剂。
低聚合度多聚甲醛代替普通工业甲醛水溶液,在合成农药、合成树脂、涂料及制取熏蒸消毒剂等多种多样的甲醛下游产品中,既可减少脱水的能耗,又可大大减少废水处理量,这是一项利国利民绿色环保工程。
2、多聚甲醛的简介白色无定形粉末。
有甲醛气味。
系甲醛的线形聚合物。
无固定熔点, 加热则分解。
熔点120～170℃。
易溶于热水并放出甲醛,缓溶于冷水,能溶于苛性碱及碱金属碳酸盐溶液,不溶于醇和醚,其高度聚合物不溶于水。
可发生类似甲醛的反应,如氯甲基化,与醇形成缩醛等。
用于合成树脂、粘合剂、医药、杀菌剂、杀虫剂、消毒剂等。
3、多聚甲醛的处置方法泄漏应急处理,隔离泄漏污染区,周围设警告标志,切断火源。
建议应急处理人员戴好防毒面具,穿一般消防防护服。
使用无火花工具收集于干燥净洁有盖的容器中,运至废物处理场所。
如果大量泄漏,用水打湿然后收容回收。
防护措施,呼吸系统防护佩带防尘口罩。
必要时佩带防毒面具。
眼睛防护戴安全防护眼镜。
防护服穿相应的防护服。
手防护戴防护手套。
其它,工作现场禁止吸烟、进食和饮水。
工作后,淋浴更衣。
注意个人清洁卫生。
多聚甲醛中毒应怎么办1、急性吸入中毒者,应迅速将中毒患者移至空气新鲜处,及时脱去被污染的衣物,用肥皂水和大量清水彻底清洗污染的皮肤,溅入眼内须立即用大量清水冲洗。
出现上呼吸道刺激反应者应至少观察48小时,避免活动后病情加重。
2、静卧、保暖、合理氧疗。
保持呼吸道通畅,给予支气管解痉剂,必要时气管切开。
早期、足量、短程使用糖皮质激素,可以有效预防喉头水肿、肺水肿。
3、口服后可谨慎插入较小胃管洗胃,洗胃时动作应轻柔,以免加重消化道损伤。
多聚甲醛固定蛋白原理
多聚甲醛固定蛋白原理多聚甲醛（polyadoplamide）是一种合成聚合物，它由脂肪酸组成，拥有良好的水溶性、光学和热稳定性以及有机溶剂的溶解性。
它的高分子量确保了它能够被固定蛋白质（proteins）所利用，研究小肠粘膜、膀胱壁上的肌细胞等抗原特异性的抗体可以结合多聚甲醛。
多聚甲醛固定蛋白被广泛应用于生物学，有的用来提取细胞膜抗原，有的分析细胞凋亡和心血管损伤，还能用来分离血清免疫球蛋白（Ig）等。
多聚甲醛固定蛋白原理是指在多聚甲醛膜上，由一种保留蛋白质活性的氨基酸比例可以与在其他环境中稳定存在的蛋白质模式相对应。
蛋白质可以结合多聚甲醛膜上的氨基酸残基结合，形成蛋白质-多聚甲醛复合体，从而实现蛋白质的固定。
由于多聚甲醛能有效的结合蛋白质并有良好的分子检测性能，使其在一些蛋白质的抗原检测、免疫细胞病理学实验、生物样品分离及免疫测定等方面得到了广泛应用。
多聚甲醛还可以被用来染色细胞或细胞培养物，可以分析细胞表面的表型和凋亡标记，可以检测局部细胞毒性，识别和鉴定细胞的表型和分子标志物。
多聚甲醛的具体应用可以分为以下几种：（1）用于细胞培养介质的纯化：细胞附着在多聚甲醛膜上，除去杂质，获得纯度较高的细胞培养介质；（2）用于分析固定蛋白质：可以用多聚甲醛和辅助蛋白质结合，并分析蛋白质的表达情况，以及抗体分子交易；（3）用于膜蛋白分离：可以用来分离保护膜蛋白，用于治疗和分析肿瘤；（4）用于细胞因子检测：多聚甲醛能检测细胞表面因子的表达，分析细胞多样性，早期识别疾病；（5）用于样品分离：多聚甲醛可以与细胞表面蛋白结合，被用于细胞分离、样品分离、血清干细胞检测等；总之，多聚甲醛固定蛋白原理的应用广泛，因为它的抗原特异性和再现性更强，所以可以在炎症生物样品、血凝物中有效分离固定蛋白，帮助医学家及其他科学家更好地研究蛋白质、免疫学和细胞学。
整合素αvβ3在体外受精-胚胎移植中的诊断学意义
整合素αvβ3在体外受精-胚胎移植中的诊断学意义邹颖刚;陈曦;苏青;于晓艳;孙波【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2012(016)007【总页数】3页(P1332-1334)【作者】邹颖刚;陈曦;苏青;于晓艳;孙波【作者单位】吉林大学第二医院,妇产科,吉林,长春130041;吉林大学白求恩医学院2009级白求恩医学班;吉林大学药学院;吉林大学药学院;吉林大学药学院【正文语种】中文整合素（integrins）是一类细胞表面的跨膜糖蛋白，属于粘附分子家族，在生物体细胞中广泛存在，具备粘附和信号转导两大基本功能，在胚胎发育、免疫应答、创伤修复、恶性肿瘤转移等生理病理过程中发挥重要作用［1，2］。
子宫内膜容受性是胚胎着床的一个重要因素，是保证受精卵着床、胎儿和胎盘正常发育的重要环节。
在不孕症患者的治疗过程中，确定子宫内膜的容受状态，对体外受精－胚胎移植（IVF－ET）治疗方案的制定有重要的指导意义。
研究显示整合素αvβ3可作为评价子宫内膜容受性的一个可靠的分子指标，在生殖领域有非常重要的应用。
1 整合素αvβ3的组成和分布整合素是由α、β两个亚单位以非共价键形式连接成的异二聚体分子。
α、β亚基结构类似，均由胞外、跨膜、胞内三个区组成。
整合素通过特异性识别配体精氨酸－甘氨酸－天冬氨酸（RGD）三肽序列，介导细胞相互之间，细胞与细胞外基质（ECM）之间相作用，而特异性识别上述序列的则是由α、β异二聚体的胞体外域连接成的球形区域，该球形区域含有一个二价阳离子结合域。
整合素的配体分为两大类，一类为细胞外基质成分，如Ⅰ型胶原，玻连蛋白，纤连蛋白等，介导细胞与细胞外基质间的粘附，另一类是位于细胞表面的膜蛋白，如IC A M 1、IC A M 2、VC A M介导细胞与细胞间的粘附。
目前，共有20种α亚单位，9种β亚单位被发现，两类亚基可组合形成20多种整合素。
整合素与配体不是一一对应的，一种配体可以与多种整合素结合，一种整合素也可以结合多种配体。
4%多聚甲醛固定温度
4%多聚甲醛固定温度摘要：1.4%多聚甲醛的固定作用2.固定温度的选择与实验操作3.固定效果的评估与应用正文：在生物实验中，4%多聚甲醛是一种常用的固定剂，主要用于固定组织样本，以便于后续的切片、染色和显微镜观察。
本文将详细介绍4%多聚甲醛固定温度的选择及实验操作，以提高实验效果和实用性。
一、4%多聚甲醛的固定作用4%多聚甲醛具有较强的固定作用，能迅速穿透组织，固定细胞内的蛋白质，防止组织腐烂、变色。
在实验过程中，4%多聚甲醛能有效抑制微生物的生长，为后续的切片和染色提供良好的基础。
二、固定温度的选择与实验操作1.固定温度的选择为确保固定效果，温度的选择至关重要。
一般来说，4%多聚甲醛固定温度建议控制在10-25℃之间。
温度过高，会导致固定剂挥发过快，影响固定效果；温度过低，则会导致固定剂渗透速度减慢，延长实验时间。
2.实验操作（1）准备阶段：将4%多聚甲醛溶液提前配制好，放入冰箱冷藏。
（2）固定阶段：将待固定的组织样本放入4%多聚甲醛溶液中，确保组织完全浸泡在溶液中。
根据实验需求，可以将温度调整至10-25℃。
（3）浸泡时间：根据组织的大小和实验要求，一般浸泡时间为30分钟至2小时。
浸泡时间过短，固定效果不佳；浸泡时间过长，可能导致组织过度固定，影响后续染色和观察。
（4）清洗阶段：将固定好的组织样本用磷酸缓冲液（PBS）反复清洗，去除多余的固定剂和杂质。
（5）后续操作：根据实验需求，进行切片、染色和显微镜观察等步骤。
三、固定效果的评估与应用1.评估固定效果固定效果的好坏直接影响到后续实验的结果。
可以通过以下几个方面来评估固定效果：（1）组织形态：观察固定后的组织样本，形态完整、结构清晰，说明固定效果较好。
（2）染色效果：染色后，细胞核和细胞质界限分明，染色均匀，说明固定效果良好。
（3）显微镜观察：在显微镜下观察固定组织，细胞结构清晰，无明显变形，说明固定效果较好。
2.固定剂的应用4%多聚甲醛固定剂广泛应用于生物实验领域，如细胞学、解剖学、病理学等。
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［ 要 ］ 目的 ： 摘 检测 Ｈ ｐ ２细胞 表面 整 合 素 ｃ １ ｅＧ ￣３ Ｖ ３的 表 达 情 况 ， 时探 讨 多聚 甲醛 的 固 定处 理对 Ｈ ｐ ２细 胞 表 面 同 ｅＧ
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研 究 报告
多 聚 甲醛 固 定 对 流 式 细 胞 术 检 测 Ｈ ｐ ２细 胞 整 合 素 ｅＧ ｏ ３ Ｗ［ ３的影 响
孙 栋 栋 ， 利 军 ， 涛 杨 杨
山西 医科 大 学 生物 化 学 与分 子 生 物 学教 研 室 ， 省部 共 建 细胞 生理 学教 育部 重 点 实验 室 ， 西 太原 ０ ０ ０ 山 ３０ １
Ｌ ＥＩ ＴＥＲ Ｎ １ Ｅ Ｓ Ｉ Ｂ ０Ｔ ＣＨＮ０Ｌ Ｙ Ｖ １ ２ Ｎｏ３ ＯＧ ｏ． ． ２ Ｍａ ，２ ｙ ０１ １
生
物
技
术
通
讯
４１ １
ｄ ：０ ９９ｊｓ １ ９０ ２ ０１３ ２ ｏ １３６／ｉｎ ０ －０ ． １０．４ ｉ ． ． ．０ ０２ ０ ｓ ．
［ 中图 分类 号 ］ Ｑ ６ ２
［ 文献 标 识 码 】 Ａ
［ 文章 编 号 ］ １０ －０ ２ ０ １ ３ ０ １ 一 ４ ０ ９ ０ ０ （ １） － ４ ０ ２ ０ ｌ
Ｉ ｆ ｅ ｃ ｏ ａ ａｏ ｍａｄ ｈ ｄ Ｆ ｘ ｔ ｎ ｎ ｔ ３ Ｉｅ ｔ ｃ ｔ ｎ ｎ ｎ ｕ ｎ ｅ ｆ Ｐ ｒ ｆｒ ｌｅ ｙ ｅ ｉａｉ ｉ ｅ ３ ｄ ｎｉ ａｉ ｏ ｌ ｏ Ｖ［ ｉ ｆ ｏ
定 组和 未 固 定组 Ｈ ｐ ２细 咆的 平 均 荧 七强 度 和 阳性 细 咆 率 ， 结 果进 行 统 计 学 分 析 。结 果 ： ｅＧ 对 以晾 蛋 白酶 消 化 Ｈ ｐ ２ ｅＧ
细胞后， ｃ １ 抗 ｘ３ Ｖ ３单抗 标 记 的 阳 性细 胞 率 为 ３６ ， ． 远低 于 Ｅ Ｔ 消 化组 的 阳 性细 胞 率 （ ７ 多聚 甲醛 固 定组 的平 ％ ＤＡ ４ ％）
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