血型鉴定及交叉配血
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起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）； 若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
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（二）聚凝胺介质法
原理：聚凝胺是一种高价阳离子多聚物，在液体
中可产生负电荷，中和红细胞表面的负电荷，减 轻细胞间排斥力，缩短红细胞距离，在离心力作 用下，可使红细胞发生发生可逆性、非特异性凝
室温条件下盐水介质中产生特异性反应，根据是否 出现凝集判断是否有D抗原的存在。
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Rh（D）血型鉴定
加抗D血清1滴
加红细胞悬 液1滴（5%
）
轻轻摇动玻片混匀， 2min内判断结果， 有凝集（＋），无凝 集需按照说明书进一 步实验确认是否为阴 性
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二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
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二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
混匀，离心 1000r/min 观察结果（方法同正定型） 1min
Ps
Ds
Pc
受血者
3%-5% 1%
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Dc
献血者
一、盐水介质法
原理：ABO血型天然IgM类抗体与对应的RBC
抗原特异性结合时，在盐水介质中出现肉 眼可见的凝集。通过判断是否凝集，判断 是否有血型不合的情况
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（一）盐水介质法
操作： 1、取两只小试管，标明主和次侧 2、主侧：受血者血浆2滴，献血者红细胞1滴
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பைடு நூலகம்
二、ABO血型鉴定：
一、正定型 方法： 1、试管法：
-A
-B
加标准血清1滴
（-A -B ）
加红细胞悬 液1滴（5%）
混匀，离心 1000r/min 观察结果
1min
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二、ABO血型鉴定：
正定型 判定结果：
试管法：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC浮起， 观察有无凝集或溶血，
2、所用器材必须清洁干净，避免溶血，专型专用； 3、控制离心速度和时间，防止假阳性和假阴性； 4、抗原抗体比例要适当； 5、溶血时，注意结果的判定； 6、正反定型结果不一致时，不可轻易判定，需查明 原因，可能有技术问题也可能有标本问题。
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Rh（D）血型鉴定
原理：IgM型抗D标准血清与被检者RBC表面D抗原在
次侧：献血者血浆2滴，受血者红细胞1滴 3、混匀，离心，1000r/min,离心1min 4、观察结果：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC
浮起，观察有无凝集或溶血， 如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为
凝集（＋）； 如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮
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二、ABO血型鉴定：
抗A
抗B
结果
结果判定：
＋
—
A
—
＋
B
正定型
＋
＋
AB
—
—
O
反定型
A(RBC) B(RBC) 结果
＋
—
B
—
＋
A
＋
＋
O
—
—
AB
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二、ABO血型鉴定
凝集强度的判断见实验指导表格 注意：1、正反定型一致才能确定结果；
集。低离子液可降低可增强抗原、抗体间的吸引
力，促进血型抗体与红细胞膜上相应抗原结合。
离心后加入再悬液（枸橼酸钠），可中和聚凝胺
的正电荷，正常红细胞表面恢复表面的负电荷， 使非特异性凝集散开，而特异性的抗原抗体结合 引起的凝集仍然存在。
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操作步骤
按照说明书进行
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方法：盐水介质法、聚凝胺介质法、微柱 凝胶法、抗人球蛋白法、酶介质法。
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交叉配血：
主侧：受血者血浆+供血者红细胞
Ps：patient serum
Dc：donor cell
次侧：供血者血浆+受血者红细胞
Ds：donor serum
Pc：patient cell
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一、红细胞悬液制备
常用浓度：1%、2%、5%、10%。 方法：①抗凝血 3000r/min 移去上层血浆待测
5min
②洗涤：剩余的红细胞中加5ML NS，混 匀，洗涤 3000r/min ，弃上清，此步骤重复3次，
5min
最后一次上清应清亮并全部弃去。 ③配制悬液。（根据要求浓度）
如：5%：洗涤后压积红细胞1滴+19滴NS，混匀
实验十一：血型鉴定及 交叉配血
医学检验学院检验基础实验室
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实验内容
一、红细胞悬液的制备 二、ABO血型鉴定（试管法）和Rh血型鉴定 三、交叉配血（盐水介质和聚凝胺介质）
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临床中：
待测
制成红细 胞悬液，
待测
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如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为 凝集（＋）；
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮 起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
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二、ABO血型鉴定：
Rh（D）血型鉴定
注意事项：
1、按照试剂说明书操作 2、先加血清，后加RBC悬液，可通过视觉判断以
免出现漏加抗D试剂导致的假阴性结果 3、观察结果时，应轻轻捻动试管，若用力摇动，可
认为破坏弱凝集，误判为（一）性。
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三、交叉配血
概念：供血者的血浆、红细胞与受血者的 红细胞、血浆混合，观察有无凝集反应。
谢谢！
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二、ABO血型鉴定：
（一）、正定型 （二）、反定型
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二、ABO血型鉴定（盐水介质）：
一、正定型 原理：用特异性血型抗体检测被检RBC,在盐水介质
中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检RBC膜上有 无与特异性血型抗体相对应的抗原，进一步判定 血型。
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（二）聚凝胺介质法
原理：聚凝胺是一种高价阳离子多聚物，在液体
中可产生负电荷，中和红细胞表面的负电荷，减 轻细胞间排斥力，缩短红细胞距离，在离心力作 用下，可使红细胞发生发生可逆性、非特异性凝
室温条件下盐水介质中产生特异性反应，根据是否 出现凝集判断是否有D抗原的存在。
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Rh（D）血型鉴定
加抗D血清1滴
加红细胞悬 液1滴（5%
）
轻轻摇动玻片混匀， 2min内判断结果， 有凝集（＋），无凝 集需按照说明书进一 步实验确认是否为阴 性
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二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
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二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
混匀，离心 1000r/min 观察结果（方法同正定型） 1min
Ps
Ds
Pc
受血者
3%-5% 1%
-----精品文档------
Dc
献血者
一、盐水介质法
原理：ABO血型天然IgM类抗体与对应的RBC
抗原特异性结合时，在盐水介质中出现肉 眼可见的凝集。通过判断是否凝集，判断 是否有血型不合的情况
-----精品文档------
（一）盐水介质法
操作： 1、取两只小试管，标明主和次侧 2、主侧：受血者血浆2滴，献血者红细胞1滴
-----精品文档------
பைடு நூலகம்
二、ABO血型鉴定：
一、正定型 方法： 1、试管法：
-A
-B
加标准血清1滴
（-A -B ）
加红细胞悬 液1滴（5%）
混匀，离心 1000r/min 观察结果
1min
-----精品文档------
二、ABO血型鉴定：
正定型 判定结果：
试管法：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC浮起， 观察有无凝集或溶血，
2、所用器材必须清洁干净，避免溶血，专型专用； 3、控制离心速度和时间，防止假阳性和假阴性； 4、抗原抗体比例要适当； 5、溶血时，注意结果的判定； 6、正反定型结果不一致时，不可轻易判定，需查明 原因，可能有技术问题也可能有标本问题。
-----精品文档------
Rh（D）血型鉴定
原理：IgM型抗D标准血清与被检者RBC表面D抗原在
次侧：献血者血浆2滴，受血者红细胞1滴 3、混匀，离心，1000r/min,离心1min 4、观察结果：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC
浮起，观察有无凝集或溶血， 如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为
凝集（＋）； 如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮
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二、ABO血型鉴定：
抗A
抗B
结果
结果判定：
＋
—
A
—
＋
B
正定型
＋
＋
AB
—
—
O
反定型
A(RBC) B(RBC) 结果
＋
—
B
—
＋
A
＋
＋
O
—
—
AB
-----精品文档------
二、ABO血型鉴定
凝集强度的判断见实验指导表格 注意：1、正反定型一致才能确定结果；
集。低离子液可降低可增强抗原、抗体间的吸引
力，促进血型抗体与红细胞膜上相应抗原结合。
离心后加入再悬液（枸橼酸钠），可中和聚凝胺
的正电荷，正常红细胞表面恢复表面的负电荷， 使非特异性凝集散开，而特异性的抗原抗体结合 引起的凝集仍然存在。
-----精品文档------
操作步骤
按照说明书进行
-----精品文档------
方法：盐水介质法、聚凝胺介质法、微柱 凝胶法、抗人球蛋白法、酶介质法。
-----精品文档------
交叉配血：
主侧：受血者血浆+供血者红细胞
Ps：patient serum
Dc：donor cell
次侧：供血者血浆+受血者红细胞
Ds：donor serum
Pc：patient cell
-----精品文档------
一、红细胞悬液制备
常用浓度：1%、2%、5%、10%。 方法：①抗凝血 3000r/min 移去上层血浆待测
5min
②洗涤：剩余的红细胞中加5ML NS，混 匀，洗涤 3000r/min ，弃上清，此步骤重复3次，
5min
最后一次上清应清亮并全部弃去。 ③配制悬液。（根据要求浓度）
如：5%：洗涤后压积红细胞1滴+19滴NS，混匀
实验十一：血型鉴定及 交叉配血
医学检验学院检验基础实验室
-----精品文档------
实验内容
一、红细胞悬液的制备 二、ABO血型鉴定（试管法）和Rh血型鉴定 三、交叉配血（盐水介质和聚凝胺介质）
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临床中：
待测
制成红细 胞悬液，
待测
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如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为 凝集（＋）；
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮 起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
-----精品文档------
二、ABO血型鉴定：
Rh（D）血型鉴定
注意事项：
1、按照试剂说明书操作 2、先加血清，后加RBC悬液，可通过视觉判断以
免出现漏加抗D试剂导致的假阴性结果 3、观察结果时，应轻轻捻动试管，若用力摇动，可
认为破坏弱凝集，误判为（一）性。
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三、交叉配血
概念：供血者的血浆、红细胞与受血者的 红细胞、血浆混合，观察有无凝集反应。
谢谢！
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二、ABO血型鉴定：
（一）、正定型 （二）、反定型
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二、ABO血型鉴定（盐水介质）：
一、正定型 原理：用特异性血型抗体检测被检RBC,在盐水介质
中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检RBC膜上有 无与特异性血型抗体相对应的抗原，进一步判定 血型。