临床微生物质量控制ppt课件
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微生物检验的质量控制
微生物检验的质量控制微生物检验的质量控制，包括室内质量控制和室间质量控制评价，室内质量控制是由实验室内部制定并实施的，是质量保证的核心和基础；室间质量控制评价是由实验室外部的组织或机构对实验室进行的质量评价。
1.室内质量控制1.1人员与组织管理经过广泛的基础训练教育，包括微生物学、基础医学、临床医学知识的学习，专业化的实验技能培训，医务人员必须要进行继续教育，配有一名经过严格训练并长期从事于微生物检验的技术人员，全面负责实验室的工作。
1.2操作手册包括：（1）各级人员的职责和权限；（2）实验室安全措施；（3）标本采集和处理指南；（4）本实验室开展的检验项目以及最低鉴定要求；（5）培养基和试剂的配置方法；（6）质量控制方案；（7）常用参考数据；（8）其他制度。
1.3培养基的质量控制培养基是分离培养微生物的必需品。
培养基质量的好坏，直接关系到分离培养的成败，目前大多数实验室都使用干粉培养基配制或者使用成本培养基，对来自著名的微生物培养基生产公司的培养基，质量比较稳定，只要按照说明书的要求储存，在有效期内使用就可以获得满意效果。
1.4试剂、抗血清和染色液质量控制具体如下：（1）试剂以及染色液注明配制日期，有效日期以及存储条件，测试同时进行阳性和阴性对照试验；（2）抗血清的质量控制来源可靠，根据使用说明使用与保存。
冻干制品还应该注明配成水溶液的日期，抗血清应该澄清。
第一次使用时，应用已知菌效价和特异性进行测定。
合格者方可使用。
1.5抗生素与抗生素纸片抗菌药物敏感试验是临床进行抗菌治疗的指导性试验，其结果的正确性直接关系到抗菌治疗的成败。
常有纸片法和稀释法，保证结果的准确性极为重要。
1.6仪器高压灭菌器和干热灭菌器最好在灭菌器装上温度记录装置，以保证整个灭菌过程中的合适温度。
为了保证灭菌的彻底，可用生物指示剂嗜热脂肪芽孢杆菌ATCC7953监视灭菌效果；培养箱、冰箱、水浴箱应该在每日工作开始和结束时记录温度；对于二氧化碳培养箱而言，要每天检查二氧化碳的含量；在更换生物安全柜的滤网时，要有专门的技术人员完成；要对每批培养瓶进行生长试验，保证在有效期内使用；要及时更新系统操作软件，使之能够识别最新认识的微生物。
临床微生物实验室质量控制及质量保证
肠杆菌科 大肠埃希菌ATCC25922 培养基：Mueller-Hinton琼脂
大肠埃希菌ATCC35218 接种液：生长法或直接菌落悬
(用于β-内酰胺类药/β- 液
内酰胺酶抑制剂）
孵育：35℃；空气；16-18h
铜绿假单胞 铜绿假单胞ATCC27853
及不动杆菌 大肠埃希菌ATCC35218 (用
孵育条件 需氧或CO2， 24小时
需氧或CO2， 48小时
已知菌株（ATCC)
化脓链球菌19615 肺炎链球菌6035 大肠埃希菌25922 淋病奈瑟菌43069 流感嗜血杆菌10211
SS琼脂
需氧，24小时
鼠伤寒沙门菌14028 福氏志贺菌12022 粪肠球菌29212 大肠埃希菌25922
预期结果
10.08.2024
8
标本收集和运送的质量控制
向临床提供标本采集说明(sop)
• 不同部位标本的采集方法 • 采集最佳时间、次数 • 标本采集量正确时间、部位、方法等
对收集和运送标本的容器控制 无菌、无防腐剂、足够大、安全严密、不易破碎、 选择合适的运送培养基
10.08.2024
9
标本收集和运送的质量控制
结果报告
3
人员资质
人员
人员能力
人员培训
具备相关教育背景, 每年接受专业技术及知
识培训, 熟悉微生物实验室操作 规程、消毒灭菌及生物
安全知识。
.
10.08.2024
包括其对诸如分 析前、中、后特 定阶段的专业经 验和熟练试验技 术 。并直接参与
质控工作
.包括新员工培训、老员 工的再培训以及员工工作
能力评估
加入后培养基由无色
质控要求: 每批试剂使用前应使用变为相红应色
临床微生物实验室质量控制及质量保证胡继红
临床微生物实验室 质量控制及质量保证
卫生部临床检验中心 胡继红
质量控制概念的引入
• 历史上，现代风险管理的概念引入实验室 之后，就以质量控制的形式出现。 • 狭义上指的是一项持续的、系统性的评估 工作来确保终产品的一致性——
根据可接受的程度： 事先建立好的允许限度下的精确度和准确度。
临床微生物实验室质量控制环节
质量保证持续监测
评价和持续改进检测病人标本结果的可靠性和有效性
QA监测
目标 质量、数量、体积，可接受的合格标本
标本
检测
报告
根据临床指症、诊断和其他临床资料，采 用适当检测方法
监测报告的正确，清楚、及时
服务对象 积极问询其需要，满意度，对抱怨的处理 理解 情况
临床微生物实验室质量控制范畴
标本分析前的质量控制： 微生物学特殊性——得到正确分析结果的基础
凝固酶: 区别金黄色葡萄球菌/凝固酶阴性葡萄球菌，药敏标准 致病性和用药等都不同
氧化酶： G-菌区别，肠杆菌科/非发酵菌/弧菌科/少见G-菌等 β-内酰胺酶：预测流感嗜血杆菌、卡他布兰汉菌和淋病奈瑟 菌对青霉素类抗生素敏感性；葡萄球菌属对青 霉素敏感性。
每个工作日或每次试验应做质控（阳性对照及阴性对照）
血培养的时机
• 针对血培养的时机缺乏系统的研究。尽管菌血症 经常出现寒战，但是在发热前，而发热时才会把 血培养提上日程。
• 有权威建议血培养应被安排在任意间隔。但在一 项回顾性调查中，Li等认为，在24小时内或固定 间隔获得血样的结果没有差别。 • 临床医生和实验者应根据患者的状态及怀疑的诊 断决定。对于败血症或不稳定的患者，血培养须 迅速，以便制定治疗方案。相反地，若在病情稳 定的患者怀疑是亚急性心内膜炎，应在固定间隔 采集血样。
卫生部临床检验中心 胡继红
质量控制概念的引入
• 历史上，现代风险管理的概念引入实验室 之后，就以质量控制的形式出现。 • 狭义上指的是一项持续的、系统性的评估 工作来确保终产品的一致性——
根据可接受的程度： 事先建立好的允许限度下的精确度和准确度。
临床微生物实验室质量控制环节
质量保证持续监测
评价和持续改进检测病人标本结果的可靠性和有效性
QA监测
目标 质量、数量、体积，可接受的合格标本
标本
检测
报告
根据临床指症、诊断和其他临床资料，采 用适当检测方法
监测报告的正确，清楚、及时
服务对象 积极问询其需要，满意度，对抱怨的处理 理解 情况
临床微生物实验室质量控制范畴
标本分析前的质量控制： 微生物学特殊性——得到正确分析结果的基础
凝固酶: 区别金黄色葡萄球菌/凝固酶阴性葡萄球菌，药敏标准 致病性和用药等都不同
氧化酶： G-菌区别，肠杆菌科/非发酵菌/弧菌科/少见G-菌等 β-内酰胺酶：预测流感嗜血杆菌、卡他布兰汉菌和淋病奈瑟 菌对青霉素类抗生素敏感性；葡萄球菌属对青 霉素敏感性。
每个工作日或每次试验应做质控（阳性对照及阴性对照）
血培养的时机
• 针对血培养的时机缺乏系统的研究。尽管菌血症 经常出现寒战，但是在发热前，而发热时才会把 血培养提上日程。
• 有权威建议血培养应被安排在任意间隔。但在一 项回顾性调查中，Li等认为，在24小时内或固定 间隔获得血样的结果没有差别。 • 临床医生和实验者应根据患者的状态及怀疑的诊 断决定。对于败血症或不稳定的患者，血培养须 迅速，以便制定治疗方案。相反地，若在病情稳 定的患者怀疑是亚急性心内膜炎，应在固定间隔 采集血样。
《微生物学质量控制》课件
医疗器械微生物学质量控制 的目标是预防和控制医疗器 械中致病菌的生长和繁殖， 同时促进有益菌的生长，以 提高医疗器械的卫生状况和
使用效果。
医疗器械微生物学质量控制 需要遵循国家和国际相关法 规和标准，如《医疗器械生 产质量管理规范》(GMP)和
ISO 11000等。
环境微生物学质量控制
环境微生物学质量控制是环境保护和公共卫生领 域的重要工作，通过控制环境中微生物的数量和 种类，降低环境污染和公共卫生事件的风险。
微生物学质量控制的发展历程
初期阶段
微生物学质量控制起源于20世纪初，当时主要是针对临床实验室的 管理和控制。
发展阶段
随着微生物学研究的深入和应用领域的拓展，微生物学质量控制逐 渐发展成为一门独立的学科，并不断完善和规范。
当前阶段
现代微生物学质量控制已经形成了较为完善的体系和方法，广泛应用 于各个领域，为人类健康和公共卫生安全提供了有力保障。
显微镜
分光光度计
观察微生物形态和结构，进行初步鉴 定。
用于检测微生物细胞浓度和生长曲线 。
培养箱
控制微生物生长所需的温度和湿度条 件。
微生物学检测数据处理与分析
数据处理
对实验数据进行整理、统计和分析，确保数据的准确性和可 靠性。
质量控制
通过绘制质控图、计算质控指标等方式，对实验过程进行监 控和评估，确保实验结果的可靠性。
微生物学样品处理
对采集的样品进行适当的预处理 ，如稀释、均质化等，以便后续 的检测和分析。
微生物学检测方法与技术
传统培养法
通过培养基培养微生物，观察菌落形 态、染色等特征，进行微生物鉴定。
分子生物学技术
利用基因测序、PCR等分子生物学技 术，对微生物进行快速、准确的鉴定 和分型。
微生物实验室质量控制 .ppt
检验前- - 不合格标本
检验单与标本容器上的信息不符：如姓名不符、 标本种类不符、检测目的不符等； 痰、环境样本、皮肤、中段尿 等样本申请厌氧培养； 未用无菌容器； 标本量太少；
检验前程序
标本接收 制定接收标准 （如：肉眼可见渗漏，标本类/量，正确保存，预防拭 子干燥，合适运送培基等） 评估合格性，反馈结果 不合格痰处理 尽快通知医护（病房），及时通知患者（门诊）以便 重新采集。
商。
商品化培养基的验收要点
外观 检查外观是否完好，有无裂开、溶血、冰
冻、不均衡填充，过量气泡以及明显污染的情况。
标识 培养基上是否有明确标识，包括：培养基
种类、生产日期（批号)、保质期、储存条件等。
质量控制 外观无明显不合格的培养基要进行质量控
制实验，合格后方可使用。
培养基（自制）
名称和类型 分装体积 存放条件：通常2-8℃冰箱保存1-2周 配制时间和配制人员 质量控制
检验程序
应制定常规药敏试验方法（纸片扩散法、琼脂稀释法、微量肉汤稀释法、E 试验或 其他）的操作程序（含各类病原体和/或标本的检测药物、质控标准、结果解释 等）； 抗菌药物敏感性试验方法包括纸片扩散法、稀释法（琼脂稀释法、肉汤稀释法）、 浓度梯度扩散法（E 试验）或自动化仪器检测； 抗菌药物敏感性试验方法及结果判断至少应遵循上一年的标准。
药敏试验失控的原因分析
失控结果出现的原因可能包括但不限于：
QC菌株 • QC菌株使用不正确 • 不合理储存 • 维护不足（例如，使用同一个培养物超过1个月） • 污染 • 无法生存 • 微生物内部发生的改变（如，突变，质粒丢失） 测试用品 • 不合理的储存或运输条件 • 污染 • KB法中使用有缺陷的琼脂平板（过厚或过薄，PH过高或过低），MIC法中使用的管或 孔中的肉汤量不足
临床微生物学检验-PPT课件
（一）医院感染标本的采集和 运送的基本原则
发现医院感染应及时采集微生物标本 作病原学检查，二、三级医院微生物 标本送检率不应低于70%。 尽量在抗菌药物使用之前采集标本。 标本采集时应严格执行无菌操作，减 少或避免机体正常菌群及其他杂菌污 染。 标本采集后应立即送至实验室，床旁 接种可提高病原菌检出率。
标本送检方法 --血液与骨髓
① 通常采血部位为肘静脉。疑似细菌性心内膜炎时，以 肘动脉或股动脉采血为宜。切忌在静滴抗菌药物的静 脉处采取血标本。 ② 采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血液注入 血培养基前，应过火消毒针头，最新资料显示更换针 头容易造成新的污染。血培养瓶应在避光室温中保存， 不必置冰箱保贮。 ③ 每次采血量成人5-10ml，婴幼儿l-5ml，培养基与血 液之比以 10：1为宜，以稀释血液中的抗生素、抗体 等杀菌物质。为提高阳性率，我们一般要求成人采血 不少于8 ml，儿童不少于3 ml，婴儿1-2 ml。
三、分析前的质量控制
分析前质量控制是我国目前临床实验室 诊断质量保证中较为薄弱的环节，严重影 响临床微生物学实验室对感染样本中致病 菌的分离培养的阳性率和医院感染病原体 监控，也影响临床诊断，合理选用抗菌药 物，降低耐药菌的产生和提高感染的治愈 率，而且对预测或及时发现医院感染的暴 发流行、杜绝感染蔓延、研究医院感染的 发病机制和环节、制定有效的医院感染控 制措施等，均具有十分重要的意义。严格 实施正确的微生物标本送检和检验方法， 是做与
脓液
① 无菌生理盐水擦洗病灶表面后用棉拭子取病 灶深部的脓液和分泌物，置运送培养基内送 检。 ② 对未渍破的脓肿宜用碘酒、酒精消毒皮肤后， 以无菌注射器抽取脓液送检：也可于切开排 脓时用无菌棉拭子采样。
微生物的质量控制
临床微生物实验室的质量控制作者：魏衍超临床微生物检验，在感染性疾病及相关病患的诊断治疗预防及研究工作中起者越来越重要的作用，为了保障检验结果的准确性和可靠性，日常工作中要注意开展质量控制，包括室间质量控制和室内质量控制。
室间质量控制是各地实验室之间进行质量控制的一种方式，也是上一级实验室对各实验室进行质量管理的手段。
参加由各省临床检验中心或卫生部临床检验中心组织的室间质控，会遇见一些平时罕见或未见过的菌株，通过质控检验对它们的生长条件、菌落形态、染色、镜下形态等有了较深的感性认识。
日后工作中倘若再遇见这些菌将不再会漏检。
室间质控建立在一个较好的室内质控的基础上的，做好室内质控直接关系到日常检验工作的质量。
室内质控主要包括几个方面：实验室前的质量控制、标本接种前的质量控制、培养基的质量控制、染色液及染色方法质量控制、常用仪器的质量控制、药敏实验的质量控制、及发报告前的质量控制。
要想获得可靠的检验结果，首先要取得一份合格的标本，所以实验室前的质量控制是保障检验结果准确性的关键。
包括标本采集时间（时机）、采集方法与运送等。
采集时间一般应在发病早期，应用抗生素前或下次用药前（血药浓度相对较低）。
呼吸道标本的采集要尽量减少上呼吸道正常菌群干扰，如采集晨痰、随意痰要用清水漱口2～3次后深呼吸用力咳出气管内之痰块直接吐于无菌器皿内，迅速盖上器皿盖、送检。
注意收集浓痰或粘稠液而非唾液。
咽拭子、湿润无菌生理盐水、湿润无菌拭子，越过舌根到达咽后壁或悬雍垂后侧或咽喉部发红、灰白色可疑假膜部位，反复涂抹数次后小心退出，随即置于无菌试管内塞紧塞子送检。
拭子退出时注意避免接触口腔黏膜、舌头等部位。
泌尿道标本的采集要尽量避免或减少尿道口正常菌群干扰。
采集中段尿，无论男性、女性、儿童病人均应先冲洗尿道口，弃去开始排出的尿液，留取中段尿4～6毫升于无菌试管内塞紧塞子，尽快送检。
尿量不宜太多，试管塞子与尿液不应直接接触。
留取导尿管尿要排空导尿管内陈旧尿液，接取新引出尿液4～6毫升。
微生物检验ppt课件(2024)
涂布分离法
将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
2024/1/29
19
革兰氏染色技术
初染
涂片固定后，滴加结晶 紫染色液覆盖涂片，染 色1分钟，然后水洗。
2024/1/29
媒染
脱色
复染
滴加卢戈氏碘液覆盖涂 片，媒染1分钟，然后水
洗。
用95%乙醇脱色30秒至 1分钟，然后水洗。
22
04
定期对实验室环境和设 备进行清洁、消毒和维 护，确保其功能正常
实验人员的素质与技能要求
01
02
03
04
具备微生物学、医学、检验学 等相关专业的背景和知识
熟悉微生物检验的基本原理、 方法和技术
掌握实验室安全知识和操作技 能，如生物安全防护、废弃物
处理等
具备良好的职业道德和团队协 作精神，能够认真负责地完成
及时向上级主管部门或相关方报告实验结果，并提供必 要的技术支持和建议
对实验结果进行客观、准确的评价和解释，避免主观臆 断和误导
对实验过程中出现的问题和异常情况进行及时汇报和处 理，确保实验质量和安全
2024/1/29
25
06
微生物检验的挑战与发展趋势
2024/1/29
26
微生物检验面临的挑战与问题
微生物多样性
微生物种类繁多，形态各异，对检验技术的要求极高。
2024/1/29
检验灵敏度与特异性
传统微生物检验方法灵敏度低，特异性差，难以满足临床和科研 需求。
耐药性问题
随着抗生素的广泛使用，耐药微生物逐渐增多，对检验技术提出 了更高的要求。
27
新技术在微生物检验中的应用与展望
将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
2024/1/29
19
革兰氏染色技术
初染
涂片固定后，滴加结晶 紫染色液覆盖涂片，染 色1分钟，然后水洗。
2024/1/29
媒染
脱色
复染
滴加卢戈氏碘液覆盖涂 片，媒染1分钟，然后水
洗。
用95%乙醇脱色30秒至 1分钟，然后水洗。
22
04
定期对实验室环境和设 备进行清洁、消毒和维 护，确保其功能正常
实验人员的素质与技能要求
01
02
03
04
具备微生物学、医学、检验学 等相关专业的背景和知识
熟悉微生物检验的基本原理、 方法和技术
掌握实验室安全知识和操作技 能，如生物安全防护、废弃物
处理等
具备良好的职业道德和团队协 作精神，能够认真负责地完成
及时向上级主管部门或相关方报告实验结果，并提供必 要的技术支持和建议
对实验结果进行客观、准确的评价和解释，避免主观臆 断和误导
对实验过程中出现的问题和异常情况进行及时汇报和处 理，确保实验质量和安全
2024/1/29
25
06
微生物检验的挑战与发展趋势
2024/1/29
26
微生物检验面临的挑战与问题
微生物多样性
微生物种类繁多，形态各异，对检验技术的要求极高。
2024/1/29
检验灵敏度与特异性
传统微生物检验方法灵敏度低，特异性差，难以满足临床和科研 需求。
耐药性问题
随着抗生素的广泛使用，耐药微生物逐渐增多，对检验技术提出 了更高的要求。
27
新技术在微生物检验中的应用与展望
临床细菌学实验室质量管理
福氏志贺菌 12022
生长
粪肠球菌 29212 部分或完全抑制
大肠埃希菌 25922 部分或完全抑制
革兰染色的质量控制
➢ 严格按照标本收集程序取样并涂片 ➢ 严格编号或标识 ➢ 在固定涂片时，避免玻片加热过度 ➢ 染液放置处避免高温、干燥及灰尘 ➢ 结晶紫固体结晶应过滤除去 ➢ 如卢戈氏碘液褪色，应立即更新 ➢ 每周用金葡ATCC25923及大肠ATCC25922至
映出培养特征（如溶血等） ➢ 鉴定是否符合 ➢ 药敏结果（抑菌圈或MIC值） ➢ 药敏结果（敏感、中介或耐药）
举例说明
培养基的质量控制
➢ pH测试（测得值-预期值 |0.2|时，需纠正） ➢ 无菌试验（随机抽样3-5%） ➢ 已知菌生长试验（提倡使用标准菌株）
常用培养基已知菌生长试验
培养基
血琼脂
临床细菌学实验室 质量管理
质量管理的内容
➢ 结果准确与否 ➢ 结果是否得到准确及时地反馈
临床细菌检验质控工作的特点
➢ 环节多（药敏、培养基、生化项目、稀释液等） ➢ 涉及的知识面广 ➢ 复杂性高、需要超强的责任心
质量管理应考虑的几个方面
➢ 标本是否符合要求 ➢ 是否能生长、是否能抑制、是否能客观反
巧克力琼脂 SS 琼脂
孵育条件
已知菌株
预期结果
（ATCC）
需氧或 化脓性链球菌 19615 CO2，24h 肺炎链球菌 6305
大肠埃希菌 25922 CO2，24-48h 淋病奈瑟菌 43069
流感嗜血杆菌 10211
生长，-溶血 生长，-溶血
生长 生长 生长
需氧，24h
鼠伤寒沙门菌 14028
生长
➢ 患者的隐私保护（性病、结核等） ➢ 抱怨 ➢ 持续改进
微生物学质量控制
不良
(2)脾脏小，无二级滤泡
免疫功能
(1)血清中IgG、IgM水平低，几乎不存在 丙种球蛋白和特异性抗体
(2)免疫应答速度慢，过敏反应、对异体 移植物的排斥反应以及自身免疫现象消失 或减弱
生长率 (1)不同种属不同 (2)无菌鸟类生长率高于同种普通鸟 (3)无菌大、小鼠与普通鼠差不多 (4)无菌豚鼠和无菌兔比普通的慢
Algebra 2/Trig
微生物学质量控制
M acintosh P IC T im age form at
is not supported
8.6 Radical Expressions and Radical Functions Pages 520-527
A 遗传控制标准化
实验动物的 四个“标准化
工作人员
按微生物学控制分类
实验动物
1 普通动物，CV 2 清洁动物，CL 3 无特定病原体动物，SPF 4 无菌动物GF，悉生动物GN
实验动物微生物等级
2001版国家标准根据微生物和寄生虫等级对实验动
物等级进行了重新设定。
❖ 小鼠
清洁级 SPF级 无菌级
❖ 大鼠
清洁级 SPF级 无菌级
❖地鼠 普通级 清洁级 SPF级 无菌级
生殖
(1)无菌大、小鼠略高于普通大小鼠 (2)豚鼠和兔繁殖能力比普通级低 代谢和营养
无菌动物血中含氮量少，肠管对水的吸收率低， 代谢周期比普通动物长
体内不能合成维生素B和K，易产生这两种维生 素的缺乏症
抗辐射能力 无菌动物抗辐射能力强，抗实验性烫伤和抗
休克死亡能力也强于普通动物 寿命
无菌动物的寿命普遍长于普通动物
小结：微生物感染对人、动物和实验的影响 ❖ 直接影响： （1）引起人畜共患病，影响工作人员的身体健康。 （2）引起动物传染病，影响均衡生产，影响动物健
(2)脾脏小，无二级滤泡
免疫功能
(1)血清中IgG、IgM水平低，几乎不存在 丙种球蛋白和特异性抗体
(2)免疫应答速度慢，过敏反应、对异体 移植物的排斥反应以及自身免疫现象消失 或减弱
生长率 (1)不同种属不同 (2)无菌鸟类生长率高于同种普通鸟 (3)无菌大、小鼠与普通鼠差不多 (4)无菌豚鼠和无菌兔比普通的慢
Algebra 2/Trig
微生物学质量控制
M acintosh P IC T im age form at
is not supported
8.6 Radical Expressions and Radical Functions Pages 520-527
A 遗传控制标准化
实验动物的 四个“标准化
工作人员
按微生物学控制分类
实验动物
1 普通动物，CV 2 清洁动物，CL 3 无特定病原体动物，SPF 4 无菌动物GF，悉生动物GN
实验动物微生物等级
2001版国家标准根据微生物和寄生虫等级对实验动
物等级进行了重新设定。
❖ 小鼠
清洁级 SPF级 无菌级
❖ 大鼠
清洁级 SPF级 无菌级
❖地鼠 普通级 清洁级 SPF级 无菌级
生殖
(1)无菌大、小鼠略高于普通大小鼠 (2)豚鼠和兔繁殖能力比普通级低 代谢和营养
无菌动物血中含氮量少，肠管对水的吸收率低， 代谢周期比普通动物长
体内不能合成维生素B和K，易产生这两种维生 素的缺乏症
抗辐射能力 无菌动物抗辐射能力强，抗实验性烫伤和抗
休克死亡能力也强于普通动物 寿命
无菌动物的寿命普遍长于普通动物
小结：微生物感染对人、动物和实验的影响 ❖ 直接影响： （1）引起人畜共患病，影响工作人员的身体健康。 （2）引起动物传染病，影响均衡生产，影响动物健
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的病原菌及其生化特征和抗药性 • 什么是细菌检验中的质量控制：制定细菌检验的质量
水平，并采取监测手段，这一过程称为质量控制。 • 质量保证：为达到应有的质量水平而采纳的措施 • 质量评价：用一个客观的公认的标准来评定一个实验
室或实验室中某项试验是否达到标准的过程
ppt课件.
5
细菌检验人员及其培养教育
ppt课件.
14
培养基的质量控制
(3)生长抑制试验 • 非选择性培养基配好后，要求抽 样接种标准质控
菌株，常规培养后生长良好 • 选择性培养基应至少分别选1株可生长、1株被抑
制的标准菌株进行接种培养，可生长菌应生长良 好，被抑制菌应不能生长或部分生长
ppt课件.
15
培养基的质量控制
• (4)演变试验 实验室应保存一整套质控菌株，用 来观察培养基各种性能的演变特征(如肠杆菌科、 非发酵菌微量生化鉴定管)。生化反应培养基至少 应分别选阳性和阴性反应菌株各1株，以证实应有 的生化反应
性的质控菌株进行测试，并作好测试记录，防止 细菌的污染
ppt课件.
19
试剂质量控制
常用生化试剂的质量鉴定
试剂名称 3%过氧化氢 凝固酶血浆
氧化酶
阳性对照菌株 阴性对照菌株 质控频率
金黄色葡萄球 A群链球菌 菌
每天
金黄色葡萄球 表皮葡萄球菌 每天 菌
铜绿假单胞菌 大肠埃希氏菌 每天
杆菌肽 optochin纸片 vp试剂
A群链球菌 B群链球菌 每批；每周
肺炎链球菌 —————— 每批；每周
产气肠杆菌 大肠埃希菌
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ppt课件.
16
试剂质量控制
（1）染色液质量控制 染液在使用过程中，应该 适时用质控菌株进行阴、阳性质控。微生物室最 常见的染色液是革兰染液和抗酸染液。
• 自制的染液应严格按照SOP规定配制，要求将整 个配制过程的操作步骤形成记录并保存，瓶签上 应注明染色液名称、配制日期、配制人、有效期
ppt课件.
17
试剂质量控制
• 商品化的染色液应对厂家、试剂名称、批号存放 条件加以说明并要求厂家提供质量保证书
• 超过保质期的或已经混浊、沉淀、变色的染液应 该及时处理和废弃
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试剂质量控制
(2) 试纸和试剂 • 无论是外购的还是自制的，在使用时一定要注明
开启时间和失效日期 • 测定代谢产物的试纸或试剂，要用已知阳性和阴
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仪器设备的质量控制
临床微生物室常见仪器设备质量控制
仪器设备名称 允许范围
监控方法和频率
光学显微镜
——————
每年4次或需要时做清洁与调试
恒温培养箱
35 ± 1 ℃
每天观察记录温度
CO2培养箱
35 ± 1 ℃；5% CO2
每天观察记录温度和CO2浓度
冰箱 生物安全柜
冷藏室 2-8℃ 冷冻室-15- -25℃
（2）操作手册的建立 • 规章制度 • 检验项目 • 细菌鉴定的最低要求及药敏试验 • 培养基及其制备 • 试剂、染色剂的制备 • 生物安全防护 • 参考数据及书籍 • 室内及室间质量控制
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微生物检验过程的基本要求
• 标本的采集和运送 • 实验室收到临床标本后，应做好标本的验收工作
，严格执行标本的拒收标准（如：直接涂片→ 除血标本外的临床标本特别是痰标本应做直接涂 片） • 根据培养目的的不同，合理选择培养基，及时接 种
均匀，一般厚度为3cm（M-H平板厚度为4cm） • 斜面培养基的斜面长度不得超过斜面2/3，基底层
至少有1cm的直立段 • PH值应在规定值±0.2的范围内
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培养基的质量控制
(2)无菌试验 每批培养基在高压或过滤除菌后均要进行抽样培 养，以证实无细菌污染
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培养基的质量控制
痰及下呼吸道分泌物
肉眼观察
培养前处理
涂片检查
血琼脂平板 必要时可增加 一个作厌氧培养
各种鉴定试验
巧克力平板
CO2培养
35℃；18-24h
伊红美兰琼/中国蓝 或麦康凯
需氧培养
观察菌落和涂片染色镜检
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报告
药敏试验9
仪器设备的质量控制
• 随着检验医学的不断发展，临床微生物检 验已经进入微量化和自动化的时代,使微生 物的培养、鉴定及药敏结果更加快速准确 。对于这些仪器的质量控制可根据厂家推 荐的方法做，确保测试系统的准确度和精 密度
构对实验室进行的质量评价
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3
微生物室内质控
• 微生物检验人员及其培养教育 • 微生物检验过程的基本要求 • 仪器设备的质量控制 • 培养基的质量控制 • 试剂质量控制 • 抗微生物药物质量控制 • 纠控
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细菌检验人员及其培养教育
（1）培养临床细菌室工作人员树立质量控制概念 • 什么是细菌检验中的质量：结果真实显示标本中存在
临床微生物质量控制
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1
• 概述 • 涉及内容
室内质控 室间质评
内容提要
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2
质量控制概述
质量控制（Quality control）是临床微生物学实验 室为了保证检验结果实事求是地反映客观存在而 建立的操作程序体系
包括室内质量控制和室间质量控制评价 ➢ 室内质量控制是质量保证的核心和基础 ➢ 室间质量控制评价是由实验室外部的组织或机
• 对于分装后进行灭菌的培养基，一般随机抽取 5%~10%的量，置35℃孵箱培养24h，证明无菌 生长为合格
• 无菌手续分装的培养基则应对全部培养基置35℃ 孵箱培养24h，无菌生长为合格
• 选择性培养基应取部分培养基加入10~20倍无抑 制性肉汤培养基稀释后，置35℃孵箱培养24h， 证明无菌生长为合格
——————
压力蒸汽灭菌器 ——————
每天观察记录温度
定期年检,滤器3个月校正一次， 合格后使用 每周用嗜热芽孢杆菌或每次用化 学方法测试灭菌效果
BacT/Alert120全自 动培养仪
ppt课件. 定期校准、年检
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培养基的质量控制
(1)一般性状 • 液体培养基透明清亮，颜色符合要求 • 固体培养基表面湿润但无水汽、平整光滑、厚度
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7
微生物检验过程的基本要求
• 对阳性培养要分离纯化，然后进行分群、种属鉴 定和药敏试验
• 如实记录检验过程中所见现象和发现的问题，以 便于系统分析实验结果，得出正确的结论和发出 可信的报告
• 对于疑难菌株，要查阅文献，组织会诊，不能轻 易求
水平，并采取监测手段，这一过程称为质量控制。 • 质量保证：为达到应有的质量水平而采纳的措施 • 质量评价：用一个客观的公认的标准来评定一个实验
室或实验室中某项试验是否达到标准的过程
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5
细菌检验人员及其培养教育
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14
培养基的质量控制
(3)生长抑制试验 • 非选择性培养基配好后，要求抽 样接种标准质控
菌株，常规培养后生长良好 • 选择性培养基应至少分别选1株可生长、1株被抑
制的标准菌株进行接种培养，可生长菌应生长良 好，被抑制菌应不能生长或部分生长
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15
培养基的质量控制
• (4)演变试验 实验室应保存一整套质控菌株，用 来观察培养基各种性能的演变特征(如肠杆菌科、 非发酵菌微量生化鉴定管)。生化反应培养基至少 应分别选阳性和阴性反应菌株各1株，以证实应有 的生化反应
性的质控菌株进行测试，并作好测试记录，防止 细菌的污染
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试剂质量控制
常用生化试剂的质量鉴定
试剂名称 3%过氧化氢 凝固酶血浆
氧化酶
阳性对照菌株 阴性对照菌株 质控频率
金黄色葡萄球 A群链球菌 菌
每天
金黄色葡萄球 表皮葡萄球菌 每天 菌
铜绿假单胞菌 大肠埃希氏菌 每天
杆菌肽 optochin纸片 vp试剂
A群链球菌 B群链球菌 每批；每周
肺炎链球菌 —————— 每批；每周
产气肠杆菌 大肠埃希菌
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试剂质量控制
（1）染色液质量控制 染液在使用过程中，应该 适时用质控菌株进行阴、阳性质控。微生物室最 常见的染色液是革兰染液和抗酸染液。
• 自制的染液应严格按照SOP规定配制，要求将整 个配制过程的操作步骤形成记录并保存，瓶签上 应注明染色液名称、配制日期、配制人、有效期
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试剂质量控制
• 商品化的染色液应对厂家、试剂名称、批号存放 条件加以说明并要求厂家提供质量保证书
• 超过保质期的或已经混浊、沉淀、变色的染液应 该及时处理和废弃
ppt课件.
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试剂质量控制
(2) 试纸和试剂 • 无论是外购的还是自制的，在使用时一定要注明
开启时间和失效日期 • 测定代谢产物的试纸或试剂，要用已知阳性和阴
ppt课件.
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仪器设备的质量控制
临床微生物室常见仪器设备质量控制
仪器设备名称 允许范围
监控方法和频率
光学显微镜
——————
每年4次或需要时做清洁与调试
恒温培养箱
35 ± 1 ℃
每天观察记录温度
CO2培养箱
35 ± 1 ℃；5% CO2
每天观察记录温度和CO2浓度
冰箱 生物安全柜
冷藏室 2-8℃ 冷冻室-15- -25℃
（2）操作手册的建立 • 规章制度 • 检验项目 • 细菌鉴定的最低要求及药敏试验 • 培养基及其制备 • 试剂、染色剂的制备 • 生物安全防护 • 参考数据及书籍 • 室内及室间质量控制
ppt课件.
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微生物检验过程的基本要求
• 标本的采集和运送 • 实验室收到临床标本后，应做好标本的验收工作
，严格执行标本的拒收标准（如：直接涂片→ 除血标本外的临床标本特别是痰标本应做直接涂 片） • 根据培养目的的不同，合理选择培养基，及时接 种
均匀，一般厚度为3cm（M-H平板厚度为4cm） • 斜面培养基的斜面长度不得超过斜面2/3，基底层
至少有1cm的直立段 • PH值应在规定值±0.2的范围内
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培养基的质量控制
(2)无菌试验 每批培养基在高压或过滤除菌后均要进行抽样培 养，以证实无细菌污染
ppt课件.
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培养基的质量控制
痰及下呼吸道分泌物
肉眼观察
培养前处理
涂片检查
血琼脂平板 必要时可增加 一个作厌氧培养
各种鉴定试验
巧克力平板
CO2培养
35℃；18-24h
伊红美兰琼/中国蓝 或麦康凯
需氧培养
观察菌落和涂片染色镜检
ppt课件.
报告
药敏试验9
仪器设备的质量控制
• 随着检验医学的不断发展，临床微生物检 验已经进入微量化和自动化的时代,使微生 物的培养、鉴定及药敏结果更加快速准确 。对于这些仪器的质量控制可根据厂家推 荐的方法做，确保测试系统的准确度和精 密度
构对实验室进行的质量评价
ppt课件.
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微生物室内质控
• 微生物检验人员及其培养教育 • 微生物检验过程的基本要求 • 仪器设备的质量控制 • 培养基的质量控制 • 试剂质量控制 • 抗微生物药物质量控制 • 纠控
ppt课件.
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细菌检验人员及其培养教育
（1）培养临床细菌室工作人员树立质量控制概念 • 什么是细菌检验中的质量：结果真实显示标本中存在
临床微生物质量控制
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• 概述 • 涉及内容
室内质控 室间质评
内容提要
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质量控制概述
质量控制（Quality control）是临床微生物学实验 室为了保证检验结果实事求是地反映客观存在而 建立的操作程序体系
包括室内质量控制和室间质量控制评价 ➢ 室内质量控制是质量保证的核心和基础 ➢ 室间质量控制评价是由实验室外部的组织或机
• 对于分装后进行灭菌的培养基，一般随机抽取 5%~10%的量，置35℃孵箱培养24h，证明无菌 生长为合格
• 无菌手续分装的培养基则应对全部培养基置35℃ 孵箱培养24h，无菌生长为合格
• 选择性培养基应取部分培养基加入10~20倍无抑 制性肉汤培养基稀释后，置35℃孵箱培养24h， 证明无菌生长为合格
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压力蒸汽灭菌器 ——————
每天观察记录温度
定期年检,滤器3个月校正一次， 合格后使用 每周用嗜热芽孢杆菌或每次用化 学方法测试灭菌效果
BacT/Alert120全自 动培养仪
ppt课件. 定期校准、年检
11
培养基的质量控制
(1)一般性状 • 液体培养基透明清亮，颜色符合要求 • 固体培养基表面湿润但无水汽、平整光滑、厚度
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微生物检验过程的基本要求
• 对阳性培养要分离纯化，然后进行分群、种属鉴 定和药敏试验
• 如实记录检验过程中所见现象和发现的问题，以 便于系统分析实验结果，得出正确的结论和发出 可信的报告
• 对于疑难菌株，要查阅文献，组织会诊，不能轻 易求