中草药制剂提高虾类免疫作用研究进展

· 36文章编号：1006-3188（2017）05-0036-04中草药制剂提高虾类免疫作用研究进展叶建生1 阎斌伦2 王兴强2 郭赣林2（1.江苏农牧科技职业学院 ，江苏泰州 225300；2. 淮海工学院 江苏省海洋生物技术重点建设实验室，江苏连云港 222005）摘要：总结了国内外中草药制剂提高虾类免疫作用的研究成果，并提出了渔用中草药今后的研究方向，以期促进我国对虾养殖业持续健康发展。

关键词:中草药；对虾；免疫中图分类号：S942.5 文献标识码：A基金项目：江苏省海洋生物技术重点实验室开放课题计划项目“凡纳滨对虾温棚低盐度养殖水质生态调控研究”（2014HS012）；江苏省高校“青蓝工程”人才培养专项；江苏农牧科技职业学院院级科研项目“银杏叶提取物在虾蟹饲料中的应用研究”。

作者简介：叶建生（1981－），男，江苏泰州人，讲师，主要从事经济水产动物营养学和养殖生态学研究。

Email：yejianshengye@。

世界对虾养殖业兴起于20世纪70年代，并在80年代得到飞速发展[1]。

2014年我国对虾养殖产量达到120万吨，对虾养殖面积约24万公顷约占世界对虾养殖面积的12％左右，对虾养殖业已成为我国水产养殖产业中一个主要产业。

由于对虾养殖业快速发展，造成了养殖环境恶化、种质资源退化，非传染性疾病和传染性疾病高发等一系列问题，严重地制约着我国对虾养殖业的进一步发展，特别是传染性疾病，主要包括细菌性、真菌性和病毒性疾病[2-6]给对虾养殖业造成了巨大损失。

目前，对虾养殖业的持续健康发展取决于对虾病害的控制和对虾健康状况的保持，而从事对虾养殖生产中就是要正确处理虾病控制这一难题。

因此，开发无药残、抗菌谱广、食用安全的免疫增强剂成为当前对虾饲料研究的热点，而中草药具有来源广泛、价格低廉、无毒低残留等优点，具有广泛的应用前景。

1 虾类的免疫系统虾类在长期生命进化过程中形成了独有的免疫系统，但还很不成熟，以非特异性免疫（Non-specificimmunity ）为主。

非特异性免疫是属于先天所有、相对稳定、无特殊的抵抗病原体的天然抵抗能力，包括细胞免疫和体液免疫，虾体内的细胞免疫和体液免疫作用紧密相关，血细胞可合成并释放体液免疫因子，细胞免疫反应又受到体液免疫因子的介导和影响[7-8]。

虾类具有开放式血液循环系统，在防止外来病原生物入侵时能够建立正确快速的诱导防御机制，血细胞在此诱导机制中起重要作用。

目前，关于对虾血细胞的分类还存在诸多异议，但大多数学者倾向于根据血细胞颗粒的有无及其大小、染色、核质比等将其分为3类，即大颗粒细胞（large granular haemocyte ，LGH ）、小颗粒细胞（small granular haemocyte ，SGH ）和透明细胞（hyalinecell ，HC ）。

不同血细胞在防御反应中担当不同的角色，如透明细胞专营吞噬异物，小颗粒细胞主要负责通过脱颗粒吸附在异物表面等过程来识别异物作出应答并参与对异物颗粒的吞噬[9-10]，同时也参与包囊反应[11]；大颗粒细胞也具有吞噬作用，但其吞噬作用较小颗粒细胞不显著[9]，其最重要的功能是在免疫防御中具有抗菌杀菌活性[12]，通过脱颗粒释放酚氧化酶原，从而激活酚氧化酶系统等[13]。

相对于细胞免疫而言，虾类的体液免疫研究要多一些。

一般认为，虾类体液中不含有免疫球蛋白，然而体液免疫中含有的凝集素、溶菌酶（LSL）、超氧化物歧化酶（SOD）、酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（AKP）、过氧化氢酶（CAT）以及血细胞释放的propo 激活系统等体液免疫因子，能以不同的途径消灭异物，并抵御病原体的侵袭。

2 中草药的主要成分及其免疫作用机理中草药取自自然，并保持了其自然结构和活性，它具有多效性、双向调节和适应原作用等优势，并以调节机体内一切抗病因素、增强抗病力和免疫力，改善养殖对象的风味及肌肉的脂肪酸组成，提高产品氨基酸和矿物质水平，受到国内外众多学者的重视。

中草药中具有免疫调节作用的成分主要包括：生物碱、多糖、皂甙、蒽类、挥发油、有机酸等。

如茶叶生物碱(包括咖啡碱和茶碱)、黄芪多糖、人参皂甙、大蒜素、甘草酸等有显著增强机体免疫功能的作用[14]。

中草药作为免疫增强剂对机体的作用，主要通过激活网状内皮系统和补体；激活巨噬细胞和T、B淋巴细胞；诱生多种细胞因子等途径，以此增强细胞的生理代谢作用，促进血液循环，提高机体免疫力。

如中药多糖作为生物效应调节剂，主要影响机体的网状内皮系统、具有促进胸腺反应，刺激巨噬细胞的吞噬功能、淋巴细胞、白细胞、NK细胞、补体系统以及RNA、DNA、蛋白质的合成和体内的cAMP、cGMP的含量，最终可以促进抗体的生成，使淋巴因子及干扰素的诱生增强。

甙类可加强网状内皮系统吞噬功能，并促进抗体生成，促进抗原抗体反应和淋巴细胞转化；生物碱能增强体液和细胞免疫功能，刺激巨噬细胞吞噬功能。

3 中草药制剂在提高虾类免疫作用中的研究概况在虾类养殖中，使用中草药免疫增强剂提高抗病力成为生产性防病的有效手段之一。

中草药制剂的免疫增强作用，大都是通过调动虾类体内非特异性抗菌、抗病毒等积极因素来增强免疫功能而实现的。

目前对虾养殖上应用中草药免疫增强剂后的效果评价，主要通过各种免疫酶活性指标来体现，辅以攻毒试验观察试验组的保护力。

3.1 单一中草药制剂对虾类免疫力的影响陈孝煊等（2002）研究表明大黄（Rheum officinale）和黄连（Coptis chinensis）能增强克氏原螯虾（Procambarus clarka）和红螯螯虾免疫系统的活性并达到防病效果[15]。

郭永军等研究发现，在凡纳滨对虾饲料中添加枳实可以提高超氧化物歧化酶（SOD）、溶菌酶（LSZ）活力以及血淋巴细胞的吞噬能力，对生长促进作用不明显[16]。

李素莹等（2009）在凡纳滨对虾饲料中添加1.0g/kg大黄，可以显著提高血清碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、酚氧化酶、超氧化物歧化酶、溶菌酶以及血清总蛋白量等免疫指标[17]。

杨维维等（2013）在克氏螯虾饲料中添加50-75 mg/kg大黄素，可以显著提高克氏螯虾的免疫功能和肝脏抗氧化[18]。

洪徐鹏等（2014）在克氏原螯虾基础饲料中添加0.8%的黄芪多糖，可提高26.67%的存活率，对克氏原螯虾抗WSSV感染有很好的提高效果[19]。

刘波等（2013）在饲料中添加杜仲0.5%-1.0%，可提高凡纳滨对虾非特异性免疫能力[20]。

3.2 复方中草药制剂对虾类免疫力的影响许兵等（1993）研究了48种化学疗剂对中国明对虾（Fenneropenaeus chinensis）红腿病病原菌生长的抑制作用，结果表明乌梅、石榴皮、五味子的水浸液具有较强的抑菌活性，可用于配制防病药物饵料[21]。

王雷等[22]、刘恒等[23]、刘树青等[24]分别以口服、腹腔注射等方式研究了数种天然免疫多糖对对虾的免疫系统的影响，结果均证实能显著提高对虾血淋巴中的免疫因子活力，增强机体的非特异性免疫功能。

沈锦玉用复合中草药、菌苗、脂多糖等作为免疫药物投喂中国明对虾，用毒力较强的溶藻弧菌攻毒，口服免疫药饵组虾的免疫保护率为78.95%-89.47%，说明虾对疾病的抵抗力增强[25]。

杜爱芳（1997）用4种复合中草药制剂对中国明对虾进行投喂，经测定这4种制剂使对虾血细胞吞噬活性相对细菌的杀伤活性均显著高于对照组，免疫保护率也有提高[26]。

用大蒜油与从多种中草药中提取的皂苷类天然活性物质组成复方制剂，以0.2%的比例添加于对虾饲料中，对虾血细胞吞噬率、杀伤率和吞噬指数有极显著提高，细胞杀伤指数显著提高；对虾血淋巴中的溶菌活力极显著提高，酚氧化酶活力显著提高；溶藻弧菌攻毒后，对虾免疫保护率提高86%[27]。

王宜艳等[28]以中草药复合免疫药物虾康素连续投喂中国明对虾7天，能显著提高血淋巴的P0、SOD、CAT活力。

赵杰研究表明，CoIP（河北农业大学自行研制，含维生素、免疫多糖以及抗病毒中草药等成分）复方免疫增强剂在饲料中的添加量为1.75g/Kg时，能明显提高中国明对虾PO、SOD活性，血细胞吞噬活性显著提高，能延长中国明对虾存活时间，使其顺利度过6、7、8三个月的高温季节[29]。

李义采用黄芪、党参、大黄、板蓝根等10余味中草药，粉碎过筛后制成复方添加剂，可显著地提高罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergi）的免疫功能，有效地预防嗜水气单胞菌的感染[30]。

郭文婷等（2005）以黄芪为主药，配以霪羊藿、37 ·党参、大黄、黄芩、甘草、当归、金银花、板蓝根、麦芽等9种中草药，发现饲料中添加l%-2％可以促进凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）的生长，增强免疫力和抗病力[31]。

江湧等[32]在凡纳滨对虾饲料中添加自制中草药添加剂（主要成分是黄芪、甘草和白术等），制成4种实验性饲料，发现能够提高免疫和抗WSSV的能力。

4 展望目前虾类养殖上迫切要求解决滥用抗生素、化学药物等带来的药物残留、耐药性、毒副作用等问题；加上我国中草药使用的悠久历史，水产养殖生产应用中比较广泛，因此中草药免疫增强剂的开发利用具有广阔的前景。

从现有中草药制剂的应用来看，在虾类病害防治中虽然取得了一定成果，但与畜牧中兽医比较，差距还较大，还有许多问题急需解决。

中草药制剂提高免疫功能机理是深奥的，虽然有不少研究报道，但总的来说，还处于起步阶段，许多领域尚待深入研究与探索。

由于中药成份复杂，各成份间可能存在相互拮抗，有效成分研究不够深入，存在活性成份被掩盖的可能性；生产工艺和制剂水平落后，给大规模生产中草药免疫制剂质量控制的带来困难；不同季节、产地和加工方法等极大地影响药材质量, 缺乏有效的技术控制手段；中草药免疫增强剂的免疫调节作用呈现一定的量效关系，部分中草药小剂量有免疫增强作用，大剂量则为免疫抑制作用；中草药制剂除能提高虾类非特异性免疫能力外，还能调整机体新陈代谢，提高抗应激能力，同时具抗菌、营养、双向调节等多种功能。

因此很有必要加强中草药的抗病机理的深化研究以及使用技术，如饲料添加、浸泡、注射等具体剂量、用药程序等。

同时加强临床应用研究，探讨渔用中草药产业化途径，采用现代生物化学技术提纯中草药的有效成分，使经验处方标准化科学化，力求药物疗效的稳定性，筛选出针对不同病原体的方剂，促使渔用中草药产品向系列化、专业化方向发展，建立更接近于虾类抗感染力的免疫指标评价体系，并在虾类疾病的有效预防中发挥作用。

参考文献[1] FAO Fishstat Plus. Food and Agriculture Organization of the United Nations Fisheries[R]. Department Statistical Database and Software, 2001, 12: 30-50.[2] LighterDV, Redman R M, Bell T A. Infectious hypodermal(IHHNV)and a newly recognized virus disease of penaeid shrimp[J].JInvertebrPathol,1983,42:62-72.[3] Kroll R M, Hawlcins W E, Overstreet R R. Rickettsial and mollicute infectious in hepatopancreatic cells of cultured Pacific white shrimp (Penaeus annamei) [J]. J Invertebr Pathol,1991,57:3622-3660.[4] Mohney L L, Lighter D V, Bell T A. Anepizootic of vibriosis in Ecuedorian pond-reared Penaeus vannamei Boone(Crustacea Decapoda) [J]. World aquaculture, 1994,soc,25.[5] Hasson K W, Lighter D V, Poulos B T, et al. Taura syndrome in Penaeus vannamei demonstration of a viral etiology[J]. Dis Aquat Org,1995,23:115-126.[6] Flegel T W. Special topic review, major viral diseases of the black tiger prawn (Penaeus monodon) in Thailand[J].World J of Microbiol Biotechnol, 1997, 13: 433-442.[7] 宋理平,张宇峰,阎大伟. 中草药作为免疫增强剂在水产动物上的应用. [J]饲料工业, 2005, 26(5): 10-12.[8] 陈国福, 黄倢, 宋晓玲. 对虾免疫机能研究概况. [J]水产学报, 2004, 28(2): 209-215.[9] Bachne E, Mialhe E. Knowledge and research prospects in marine mollusa and crustacea immunology[J]. Aquac,1995,132:17-32.[10] Pesson M, Cerenius L, Sderhll K. Encapasulation of foreign particles in vitro by separated blood cells from crayfish Astacus leptodacitylus cell [J]. TissueRes, 1987,247:409-415.[11] Martin H. Defence functions of granulocytes in the rideback prawn Sicyonia ingentis [J].J Invertebr Pathol,1989,53:335-346.[12] Smith C. Comparison of antibacterial activity in the hamocytes of different crustacean species[J].Comp Biochem and Physiol,1995,110:39-45.[13] Smith V J, Chisholm J R S. Induction of degranulation and lysis of haemocytes in the fresh water crayfish Astacus by components of the prophenoloxidase activating system in vitro[J].Cell Tissue Res,1983,233:195-303.[14] 程志斌, 葛长荣, 韩剑众. 中草药有效成分对动物免疫功能的影响及其应用. [J]河北畜牧兽医, 2002,· 3818(10): 16-17.[15] 陈孝煊, 吴志新, 张厚梅. 大黄与黄连对二种淡水虾血细胞吞噬活性的影响. [J]水生生物学报, 2002, 26(2): 201-204.[16] 郭永军, 邢克智, 陈成勋, 等. 枳实对南美白对虾健康的影响[J]. 水利渔业, 2005, 25(4): 99-101.[17] 李素莹,周歧存. 大黄对凡纳滨对虾生长和非特异性免疫指标的影响[J].广东海洋大学学报, 2009, 29(6):36-41.[18] 杨维维,沈美芳,刘文斌, 等.大黄素对克氏螯虾生长、免疫、肝脏抗氧化以及肠道消化酶的影响[J].江苏农业学报, 2013, 29(6):1405-1410.[19] 洪徐鹏,陆宏达, 张庆华, 等.黄芪多糖对克氏原螯虾抗白斑综合征病毒(WSSV)感染的效果研究[J].上海海洋大学学报, 2014, 23(3):423-428.[20] 刘波,冷向军,李小勤, 等.杜仲对凡纳滨对虾生长、血清非特异性免疫和肌肉成分的影响[J].中国水产科学, 2013(4):869-875.[21] 许兵, 纪伟尚, 张鹏等. 对虾病原菌抑菌药物的研究. [J]海洋通报, 1993,23(2): 43-51.[22] 王雷, 李光友. 口服免疫药物对养殖中国对虾病害防治作用的研究. [J]海洋与湖沼, 1994, 25(5): 486-491.[23] 刘恒, 李光友. 免疫多糖对养殖南美白对虾作用的研究[J]. 海洋与湖沼, 1998, 29(2): 113-117.[24] 刘树青, 江晓路, 牟海津, 等. 免疫多糖对中国对虾血清溶菌酶、磷酸酶和过氧化物酶的作用[J]. 海洋与湖沼, 1999, 30(3): 278-283.[25] 沈锦玉. 中国对虾某些免疫指标的测定及免疫预防初步研究. [J]科技通报, 1996, 13(5): 324-327.[26] 杜爱芳,蔡渭明,于涟. 中国对虾血细胞吞噬功能的研究. [J]中国水产科学, 1997,4(2): 1-6.[27] 杜爱芳,叶均安,于涟. 复方大蒜油添加剂对中国对虾免疫机能的增强作用. [J]浙江农业大学学报, 1997,(3): 317-320.[28] 王宜艳, 孙虎山, 李光友. 复合免疫药物对中国对虾血淋巴氧化酶和抗氧化酶活力的影响[J]. 海洋科学进展, 2002, 20(3): 79-83.[29] 赵杰. 复方免疫促长剂－Compound Immune Promoter（CoIP）对中国对虾生长发育、部分生化指标及免疫机能的影响. [D] 河北保定 河北农业大学 2002.[30] 李义. 复方中药添加剂对罗氏沼虾免疫功能的增强作用. [J]饲料工业, 2002,(7): 45-47.[31] 郭文婷, 李健. 中草药制剂对凡纳滨对虾生长及血淋巴中免疫因子的影响. [J]饲料工业, 2005, 26(6): 6-10.[32] 江湧, 王广军, 余德光. 中草药添加剂对凡纳滨对虾 (Litopenaeus vannamei) 生长和抗病力影响的研究[J]. 渔业现代化, 2005(4): 35-37.（上接第35页）3.3 药敏试验结果观察抑菌圈直径，对利福平、阿米卡星、复方新诺明、氨苄青霉素、阿奇霉素、恩诺沙星均敏感。