第五章 酶学诊断
临床医学检验技士考试辅导第五章 诊断酶学练习题
第五章诊断酶学一、A11、下列哪项因素对ALP参考值范围影响最大A、性别B、年龄C、职业D、饮食E、地域2、何种酶检查对肝病早期诊断有较大价值A、AKPB、ASTC、ALTD、ALPE、γ-GT3、反映肝细胞受损，膜通透性增加的血清酶是A、γ－GTB、MAOC、ALTD、chEE、ALP4、根据国际生化学委员会的规定，酶的一个国际单位是指A、最适条件下，每小时催化生成1μmol产物的酶量B、37℃下，每分钟催化生成1μm ol产物的酶量C、25℃下，其他为最适条件，每分钟催化生成1μmol产物的酶量D、30℃下，每小时催化生成1μmol产物的酶量E、在特定条件下，每分钟催化1μmol底物产生变化所需的酶量5、LD属于哪种酶类A、氧化还原酶类B、转移酶类C、异构酶类D、裂解酶类E、水解酶类6、目前公认的诊断急性心肌梗死最有价值的生化指标是A、CK－BBB、CK－MBC、CK－MMD、LD1E、LD27、CK是由2个亚单位组成的二聚体，产生的同工酶有A、2种B、3种C、4种E、6种8、关于细胞酶的释放，正确的是A、不同组织中酶进入血中途径不一B、由于Ca2+进入细胞内，使膜孔隙增大C、细胞内外酶浓度差异，影响酶流动速度D、最容易释放入血的是胞质中的游离酶E、酶流动的速度和数量受多种因素影响9、确认肝癌术后有无复发时，应首选哪项试验A、GGTB、碱性磷酸酶C、ALTD、异常凝血酶原测定E、甲胎蛋白10、血清γ－谷氨酰转肽酶（GGT）在人体组织细胞中含量最多的器官是A、肝脏B、肾脏C、心脏D、胰E、肠11、门冬氨酸和α－酮戊二酸可以作为下列哪种酶的反应基质A、ALTB、ASTC、ALPD、GGTE、AMY12、下列对血清酶活力测定的描述哪一项是错误的A、可测定产物生成量B、可测定底物的消耗量C、需要最适pHD、需要最适温度E、与底物浓度无关13、酗酒者常引起明显升高的酶是A、ALTB、CKC、ALPD、ASTE、GGT14、GGT增高明显的疾病是A、肝癌B、胰腺癌C、急性肝炎E、心肌炎15、人体内含AST活性最高的器官是A、肝脏B、脑C、心脏D、肾脏E、肠16、下列哪种酶与心脏功能是否正常关系不大A、ASTB、ALPC、HBDD、LDE、CK17、年龄引起酶变化最明显的酶是A、ALTB、CKC、ALPD、ASTE、GGT18、血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）在人体何脏器细胞含量最高A、心脏B、脑C、肝脏D、肠E、肾脏19、1，4－糖苷键是下列哪种物质分子中的主要化学键A、蛋白质B、脂肪C、氨基酸D、淀粉E、以上都不是20、ALT测定显著增高时可见于下列哪种疾病A、慢性肝炎B、乙型肝炎急性期C、胆囊炎D、心肌梗死E、肝癌21、酶法测定血清三酰甘油中用到的酶有A、甘油激酸酶B、脂肪酶C、甘油磷酸氧化酶D、过氧化物酶E、以上都是22、CK同工酶由几个亚基组成A、2B、3C、4D、5E、623、诊断急性肝炎最敏感的指标是A、血总胆红素测定B、碱性磷酸盐C、丙氨酸氨基转移酶D、血清蛋白定量E、血清蛋白电泳24、反映肝细胞广泛受损的酶学指标是A、ASTB、ALTC、γ－GTD、MAOE、胆碱酯酶25、关于酶活性和质量测定，错误的是A、测酶质量比测酶活性灵敏度高B、可以测到以前不易测定的酶C、免疫方法特异性低D、酶质量和酶活性存在不平行E、免疫方法测定同工酶简单方便26、无黄疸病人血清ALP明显升高，应考虑A、慢性活性肝炎B、胆囊炎C、肝硬化D、肝癌E、脂肪肝27、血中酶清除快慢的主要因素是酶的A、分布B、数量C、运送D、半衰期E、以上均对28、磷酸甘油氧化酶法测定血清三酰甘油时，其中苯酚及4－氨基安替比林是A、氧化剂B、显色剂C、还原剂E、皂化剂二、A21、男，51岁，胸痛发作24小时，伴心悸、气短、面色苍白。
初级检验士考试临床化学练习题第5章诊断酶学
第五章诊断酶学一、A11、LDH由H和M亚基构成的四聚体，组成几种同工酶A、2种B、3种C、4种D、5种E、6种2、下列反应中无过氧化氢产生的是A、尿酸氧化酶法B、总胆固醇酶法C、三酰甘油酶法D、尿素酶法E、葡萄糖氧化酶法3、骨ALP增加通常不见于A、骨折愈合过程B、恶性肿瘤转移性骨损伤C、Rickets病D、Paget病E、肝癌4、大多数酶促反应是A、可逆反应B、不可逆反应C、不受底物浓度的影响D、不受产物生成量的影响E、以上均不对5、人体含ALT最丰富的组织是A、肝细胞B、心肌C、骨骼肌D、红细胞E、肾脏6、下列哪种酶是血浆特异酶A、胆碱酯酶B、脂肪酶C、转氨酶D、乳酸脱氢酶E、淀粉酶7、诊断心肌梗死，特异性最好的酶是A、CK-MbB、LDHC、α-HBDHD、CPKE、GOT8、“酶胆分离”通常是哪种疾病的征兆A、急性心肌梗死B、肝癌C、肝坏死D、脂肪肝E、胆石症9、无黄疸患者血清ALP明显升高，应考虑A、脂肪肝B、胆囊炎C、肝硬化D、肝癌E、慢性活性肝炎10、酶活性测定方法中的平衡法又称为A、中止反应法B、终点法C、动力学法D、速率法E、连续检测法11、正常成人心肌组织中LDH同工酶的含量顺序为A、LDH1＞LDH2＞LDH3＞LDH4＞LDH5B、LDH2＞LDH1＞LDH3＞LDH4＞LDH5C、LDH3＞LDH1＞LDH2＞LDH4＞LDH5D、LDH4＞LDH3＞LDH2＞LDH1＞LDH5E、LDH5＞LDH2＞LDH1＞LDH3＞LDH412、连续监测法，常通过监测哪处波长吸光度的变化来计算LD酶的活性A、260nmB、280nmC、340nmD、410nmE、620nm13、多用于胰腺炎诊断的血清酶是A、CK和CK-MBB、ALP和AMYC、ALT和ASTD、AST和AMYE、AMY和LPS14、关于细胞酶的释放，正确的是A、不同组织中酶进入血中途径不一B、由于Ca2+进入细胞内，使膜孔隙增大C、细胞内外酶浓度差异，影响酶流动速度D、最容易释放入血的是胞质中的游离酶E、酶流动的速度和数量受多种因素影响15、连续监测法测定酶反应速度是指A、在反应速度变化恒定期间，酶反应的初速度B、在最适反应pH条件下，酶反应的初速度C、在37℃条件下，酶反应的平均速度D、在适宜的酶浓度条件下，酶反应的初速度E、在酶反应的最佳条件下，酶反应的平均速度16、下列有关同工酶的叙述哪一个是正确的A、同工酶的蛋白结构相同B、催化功能相同，理化性质不同C、同工酶的免疫学性质相同D、同工酶是由两个以上不同亚基组成的E、同工酶在细胞内的定位相同17、人体GGT含量最高的组织器官为A、肝脏B、胰腺C、肾脏D、心肌E、脑细胞18、ALT测定显著增高时可见于下列哪种疾病A、慢性肝炎B、乙型肝炎急性期C、胆囊炎D、心肌梗死E、肝癌19、一个酶活力的国际单位（U）是指A、在实验规定条件下，每分钟催化1mmol底物反应所需的酶量B、在实验规定条件下，每分钟催化1μmol底物发生反应所需的酶量C、在37℃条件下，每分钟催化1μmol底物发生反应所需的酶量D、在实验条件下，每秒钟催化1mol底物反应所需的酶量E、在最适条件下，每小时催化1mol底物发生反应所需的酶量20、属分泌性酶的是A、胆碱酯酶B、胰酶C、丙氨酸氨基转移酶D、乳酸脱氢酶E、肌酸激酶21、CK-MM含量最高的器官是A、心B、肝C、肾D、肺E、骨骼肌答案部分一、A11、【正确答案】D【答案解析】LDH是由两种不同的亚基（M、H）构成的四聚体，形成5种同工酶，即LDH1（H4）、LDH2（H3M）、LDH3（H2M2）、LDH4（H3M）、LDH5（M4）。
第五章 诊断酶学
三、血清酶变化的病理机制
一、血清酶的来源
非血浆特异酶 名称
血浆特异酶
细胞酶 外分泌酶
一般代谢酶 组织专一酶
来源
肝
消化腺或其 它外分泌腺
各组织器官 （无器官专 一性）
LDH、AST、 ALT、CK、 MDH等
肝 （有器官 专一性）
种类
凝血酶原、Ⅹ因 子、Ⅻ因子、纤 溶酶原、ChE、 CER、LCAT、脂蛋 白脂肪酶等
（induced-fit hypothesis）
S
S
a
E b
c
a E b
c
E-S复合物
活化能：底物分子从初态转变到活化态所需的能量。
能 量 非催化反应活化能
一般催化剂催 化反应的活化能 酶促反应 活化能
底物 反应总能量改变 产物 反 应 过 程
酶促反应活化能的改变
酶促反应总结： 1、为何具有高度催化效率——降低反应活化能 2、如何降低活化能——形成中间产物 3、如何形成中间产物——诱导契合作用
包头医学院第一附属医院检验报告单
代号 TBil DBil IBil 中文名称 总胆红素 直接胆红素 间接胆红素 结果 参考值 2-20 0-6 2-19 单位 umol/L umol/L umol/l
ALT
TP ALB
谷丙转氨酶
总蛋白 白蛋白
0-42
60-83 35-55
U/L
g/L g/L
GLB
一、酶活性浓度测定方法 二、酶偶联法 三、血清酶活性浓度测定条件的选择 四、酶活性浓度的单位 五、临床酶学测定的标准化
一、酶活性浓度测定方法
： 量气法 分光光度法 荧光法 其它方法（ 放射性核 素法、离子选择电极法， 旋光法、极谱法、HPLC 或生物发光法等）。
《临床生物化学检验》第五---六章练习题及答案
《临床生物化学检验》第五---六章练习题及答案第五章诊断酶学[A型题]1.下列哪种酶不是血浆特异酶（）A.铜氧化酶B.凝血酶原C.脂蛋白酯酶D. ChEE.脂肪酶2.属于水解酶类的是（）A. ASTB.CKC. LDHD. ALPE. GGT3.在测定化合物浓度或酶活力时，NADH和NADPH在下列哪个波长处有特征性光吸收（）A.240nmB.270nmC.300mD.340nmE.400nm4.酶活性国际单位为（）A. U/LB. KatalC. IUD. mmolE. ml/L5.用ACP诊断前列腺疾病时，为防止红细胞干扰，应加人何种抑制剂（）A.苯丙氨酸B. L-酒石酸C.尿酸D. EDTAE. L-半胱氨酸6.使某酶(Km为0. 08mmol/L)催化的反应速度达60%V max时的底物浓度应是（）A.0. 80mmol/LB.0. 36mmol/LC.0. 24mmol/LD.0. 48mmol/LE.0. 12mmol/L7.临床上常用何种方法来分析同工酶（）A.蛋白酶水解法B.沉淀法C.电泳法D.层析法E.热失活分析法8.年龄引起酶变化最明显的酶是和骨的生长发育有密切相关的（）A.胆碱酯酶B.碱性磷酸酶C.铜氧化酶、D.转氨酶E.乳酸脱氢酶9.急性心肌梗死时i，最先恢复正常的酶是（）A.ALTB.LDC.CKD.ASTE.ALP10.多用于胰腺炎诊断的血清酶是（）A.CK和CK-MBB.ALP和AMYC.ALT和ASTD.AST和AMYE.AM和LPS第六章微量元素与维生素检验[A型题]1.下列哪组元素属人体必需的微量元素（）A.铁、碘、氟、锌、锰B.铜、钙、硒、铁、铬C.碘、铜、汞、锌、铬D.硅、铅、钒、锌、碘E.氟、硒、铅、铁、碘2.克山病的发病原因之一是缺乏（）A.硒B.铁C.磷D.锰E.钙3.维生素A除从食物中吸收外，还可在体内由（）A.肝细胞内氨基酸转变生成B.胡萝卜素转变而来C.由脂肪酸转变而来D.由叶绿素转变而来E.肠道细菌合成4.关于铁代谢的叙述，错误的是（）A.盐酸可促进铁游离,有利于铁的吸收B.草酸可与铁结合成难溶沉淀,不利于铁的吸收C. Fe3+比Fe2+溶解度大，故Fe3+较易吸收D.溶解状态的铁才能被肠吸收E.由于铁的减少引起的贫血是低色素小细胞性贫血5.微量元素系指其含量少于人体总重量的（）A.1%B. 0.1%C.0. 01%D.0. 001%E.0. 0001%6. 缺乏哪种维生素会引起口角炎（）A.维生素B1B.维生素B2C.维生素AD.维生素CE.维生素K7.下列哪种元素是构成赖氨酰氧化酶的组分（）A.锰B.碘C.碘D.硅E.铝8.胃幽门部黏膜病变可导致哪种维生素缺乏（）A. 维生素AB.维生素B6C.维生素CD.维生素B12E. 维生素E9.分子铁(Fe)应如何进行描述（）A.主要贮存于肾脏B.以Fe+形式被吸收C.在小肠由转铁蛋白吸收D.与铁蛋白结合而贮存于体内E缺铁时总铁结合力降低10.正常人体内含铜为（）A.3~5gB.20~25mgC.80~100mgD.14~21mgE.2~3g11.动物实验显示，缺铜可导致皮下出血、内出血和心血管功能紊乱,这主要是由于（）A.细胞色素氧化酶功能不全，机体缺乏能源B.亚铁氧化酶功能不全，机体贫血，血管壁营养不良C.赖氨酰氧化酶功能不全,胶原和弹性蛋白的交联不完全D.葡萄糖氧化酶功能不全，内源性维生素C合成过少E.超氧化物歧化酶功能不全，过氧及超氧化物损伤血管壁12. 肠道细菌作用可给人体提供（）A. 维生素EB.维生素KC.维生素PPD.维生素CE.维生素D13.各亚细胞组分中,含锰较多的是（）A.线粒体B.内质网C.细胞核D.细胞质E. 细胞膜14.下列有关脂溶性维生素的叙述中，正确的是（）A.过少或过多都可能引起疾病B. 被消化道吸收C.是一类需要量很大的营养素D.体内不能储存，余者都由尿排出E.都是构成辅酶的成分15. 葡萄糖耐量因子中含有的元素是（）A.铁B.铜C.锌D.镍E.铬16.谷胱甘肽过氧化物酶中含有的微量元素是（）A.铁B.硅C.锰D.硒E.铜17.在糖代谢中,作为胰岛素辅助因子的元素是（）A.铬B.钴C.锰D.硒E.锌18. 与碳酸酐酶活动有关的元素是（）A.锌B.铁C.铜D.硒E.锰19. 脚气病是由于缺乏哪种维生素所引起的（）A.维生素B1B.维生素B2C. 维生素B6D.维生素EE.维生素PP20.与维生素E抗氧化作用有协同作用的元素是（）A.铁B.锰C.硒D.锌E.21.下列辅酶或辅基中哪一种含有硫胺素（）A. FADB. FMNC. NAD+D. NADP+E. TPP22.下列关于维生素的叙述中，正确的是（）A.维生素是一类高分子有机化合物B.维生素在体内不能合成或合成量很少，必须由食物供给C.维生素是人类必需的营养素，需求量大D.酶的辅酶或辅基都是维生素E.引起维生素缺乏的唯一原因是摄入量不足23.转氨酶机酶的作用，需要下列哪一种维生素（）A维生素 B.维生素B2 C.维生素B6 D.维生素PP E.维生素A24.不具有维生素A活性的物质是（）A .胡萝卜素 B.视黄醇 C.视黄醛 D.视黄酸 E.番茄红素25.夜育症是由于缺乏（）A.维生素AB. 维生素DC.维生素ED.维生素K E维生素C26. “痛痛病"是下利哪种元素的慢性中毒（）A.铅 B汞 C.镉 D.铝 E.砷27.下列胡步卜素类物质在动物体内转变为维生素A的转变率最高的是（）A. α-胡萝卜素 B β-胡萝卜素 C. γ-胡萝卜素D.新玉米黄素AE. 玉米黄素28.坏血病是由哪.种维生素缺乏所引起的（）A .维生素A B.维生素B1 C.维生素C D.维生素PP E. 硫胺素29.转氨酶的作用需要下列哪种维生素（）A.叶酸B.烟酸C.泛酸D.磷酸吡哆胺E.维生素B230.指出下列哪种物质属于维生素D原（）A.麦角钙化醇B. 胆钙化醇C.7-脱氢胆固醇D.1,25-二羟胆钙化醇E.24，25-二羟胆钙化醇31.维生素E中生物活性最强的是（）A. α-生育酚B. β-生育酚C. γ-生育酚D. δ-生育酚E.生育三烯酚32.以下生化检测结果可见于缺铁性贫血的是（）A.转铁蛋白饱和度增高B.血清铁降低C.血清铁结合力降低D.血清铁增高 E血清铁正常33.在体内可由胆固醉转变成的维生素是（）A.维生素AB.维生素DC.维生素ED.维生素KE.维生素B34.下利哪种物质可以治癞皮病（）A.维生素AB.叶酸C.维生素B12D. 烟酰胺E.生物素35.维生素B6作为酶的辅酶最重要的作业是（）A.参与合成神经递质 B参与合成烟酸C.参与合成维生素B2D.参与氨基酸的合成、分解和互变E.作为糖原磷酸化酶组分，稳定酶分子36. 经常日光浴,体内不致缺乏的维生素是（）A.维生素AB.维生素BC.维生素CD.维生素D E维生素E37.小儿经常晒太阳可以预防哪一种维生素缺乏（）A.维生素AB. 维生素DC.维生素ED.维生素KE.维生素B138.儿童缺乏维生素D时易患（）A.骨质软化症B. 佝偻病C.癞皮病D.坏血病 E恶性贫血39. 下列哪种维生素不属于B族维生素（）A.叶酸B.泛酸C.维生素CD.生物素 E维生素PP40.下列哪种维生素是一种重要的天然抗氧化剂（）A.维生素AB. 维生素BC.维生素CD.维生素D E维生素E41.维生素K维持体内在正常水平的凝血因子是（）A. II、III、V和VIIB. II、VII、IX和XC. II、VII、VIII和VID. II、V、X和VII、E. II、I、IX和XI42.成人缺乏维生素D将导致（）A.佝偻病B.骨软化病C.夜盲症D.皮肤病 E脚气病43.与凝血酶原生成有关的维生素是（）A.维生素EB. 维生素AC.维生素KD.维生素PP E维生素C44.维生素B异咯嗪环上用于传递氢原子的两个氮原子是（）A . N1、N5 B. N1 、N10 C.N4、N8 D. N5、N10 E N7、.N845. 下列哪种维生素的吸收过程，需要胃黏膜分泌的内因子协助（）A.维生素AB. 维生素BC.维生素B1D. 维生素D E维生素B1246.维生素B2是下列哪种辅酶或辅基的组成成分（）A. CoAB. TPPC. NAD+D. NADP+E .FAD47. 缺乏哪种维生素，其典型病例具有“三D症状”（）A.维生素AB. 维生素KC.维生素ED.维生素PPE.维生素D48. δ氨基-γ酮基戊酸合成酶的辅基中含有（）A.维生素B1B. 维生素B2C.维生素B6D.维生素B12 E烟酸49. 缺乏维生素B:可引起下列哪种疾病（）A.恶性贫血B.口角炎C.坏血病D.脚气病E.佝偻病50. 长期不吃新鲜蔬菜、水果等食物，可引起下列哪种维生素缺乏（）A.维生素AB.维生素B2C.维生素CD.维生素KE.维生素PP51. 维生素B12分子结构中含有金属（）A.铁B.锰C.锌D.钼 E钴52.成人、儿童因缺乏下列哪一种维生素而导致泪腺分泌障碍患眼干燥症（）A.叶酸B.维生素A C维生素B D.泛酸 E.磷酸吡哆胺53.缺乏维生素B可能引起下列哪一种症状（）A.皮炎B.不育C.坏血病D.脚气病E.恶性贫血54.主要以维生素Br2形式发挥作用的元素是（）A.铜B.铬C.钴D.镍 E镉55.下列维生素中哪一种可以预防和治疗癞皮症（）A.维生素B12B.维生素B1C.烟酸D.吡哆醛E.泛酸56.脂溶性维生素吸收障碍可引起下列哪种疾病（）A.脚气病B.癞皮症C.坏血病D.恶性贫血E.佝偻病57.维生素K缺乏可引起（）A.凝血时间缩短B.凝血时间延长C.凝血酶原合成增加D.凝血酶原不受影响E.凝血时间正常王可引起种元素有关58.甲状腺素具有的生物学作用与下列哪种元素有关（）A.锌B.碘C.铜D.硒E.铁59.含有A维生素是（）A.维生素B1B.维生素B2C.维生素B6D.维生素B12E.叶酸60.暗适应时间延长是由于缺乏（）A.维生素AB.维生素B1C.维生素ED.维生素PPE.维生素61.克山病的发生原因与下列哪种元素缺乏有关（）A.锌B.碘C.铜D.硒E.铁62. 具有促进胰岛素作用的元素是（）A.铜B.铬C.钴D.镍E.镉63.脂类清化吸收障碍时，可引起下列何种疾病（）A.坏血病B.夜盲症C.癞皮症D.恶性贫血E.脚气病[B型题](1~3题共用备选答案)A.恶性贫血B.巨幼细胞贫血C.新生儿出血D.溶血性贫血E.缺铁性贫血1.长期缺乏维生素E可出现（）2.长期缺乏维生素B12可出现（）3.长期缺乏维生素K可出现（）(4~6题共用备选答案)A.维生素AB.维生素B1C.维生素B2D. 维生素DE.维生素PP4.出现皮炎、腹泻、痴呆症状是因为缺乏（）5.幼儿骨骼变软，易弯曲，不能正常钙化是因为缺乏（）6.出现多发性神经炎是因为缺乏（）(7~8题共用备选答案)A.硒和锌B.铁和锌C.钙和铁D.锰和铬 E铜和碘7.肺结核患者应注意补充的无机盐是（）8.慢性肝炎患者应注意补充的无机盐是（）[x型题]1.人体内重要的含锌酶有（）A.碱性磷酸酶B.丙酮酸氧化酶C.碳酸酐酶D.胰羧肽酶E.乳酸脱氢酶2.关于锌的生物学作用正确的描述是（）A.锌可作为多种酶的功能成分或激活剂B.锌是调节DNA复制、转录的DNA聚合酶的必需组成部分C.锌是很多金属酶的辅助因子D.对维持人体正常暗适应有很重要的作用E.参与免疫过程3下列维生素名与常见缺乏症组合中哪共是正确的（）A.维生素B2-口角炎B.维生素B12-恶性贫血C.维生素A-夜盲症D.维生素D-佝偻病E.叶酸一口角炎4.引起佝楼病和骨质软化症的共同原因是（）A.缺乏足够的阳光照射B.维生素D吸收不良C. 食物中缺乏维生素DD.维生素D过多E.肾结石5.在人体内可转变为维生素的物质有（）A.胆钙化醇B. β-胡萝卜素C.γ-胡萝卜素D.7-脱氢胆固醇E.麦角钙化醇6. 铝毒性的主要临床表现是（）A.高铝血症B.铝贫血C.铝骨病D.铝脑病E.铝肾病7.维生素E的生理功能包括（）A.预防衰老的作用B.作为供氢体与受氢体的作用C.促进凝血作用D.高效抗氧化作用E.促进蛋白质合成的作用8.关于维生素D的叙述下列哪些是正确的（）A.胆固醇可转变为维生素DB.皮肤中的7-脱氢胆固醇通过紫外线照射可转变成维生素D3C.维生素D是类固醇衍生物D.未经紫外线照射过的纯净牛奶是维生素D的较好来源E.儿童维生素D缺乏，常见佝偻病9.维生素K（）A.可由肠道微生物合成B.缺乏时血液凝固发生障碍C.在植物中不存在D.缺乏时凝血时间缩短E.维持体内VII、VIII凝血因子在正常水平10维生素场缺乏主要表现在下列哪些部位（）A.唇B.口腔黏膜C.舌D.会阴皮肤 E骨骼11. 属于水溶性维生素的有（）A.泛醌B.维生素CC.维生素KD.维生素B族E. 维生素E12. 在维生素B1的分子结构中含有（）A.噻唑环 B嘧啶环 C.羧基 D.硫 E.钴13. 含有维生素B的辅基基或辅酶是（）A. NAD+B. FADC. FMND. TPP E NADP+14. 维生素D缺乏可引起（）A.骨软化病B.坏血病C.佝偻病D.脚气病 E骨质疏松症15.维生素B的辅酶形式（）A. 吡哆醇B. 吡哆醛C.磷酸吡哆醛D.磷酸吡哆胺E.吡哆酸16.锰参与下列哪此酶的激话（）A.脱羧酶B.氧化酶C.醛缩酶D.碱性磷酸酶E.精氨酸酶17. 下述关于锌的生物学作用的叙述正确的是（）A.锌可作为多种酶的功能成分或激话剂B.促进机体生长发育,抑制核酸及蛋白质的合成C促进维生素A的正常代谢和生理功能D.强免疫及抑制吞嘩细胞的功能E.可降低T细胞功能18.锅化合物的抑制作用体现于（）A.可抑制肝细胞线粒体氧化磷酸化过程B.可抑制脱羧酶C可抑制组氨酸酶D.可抑制脱氢酶E.可抑制过氧化酶19. 下列哪几项名称与所给出的维生素名称相符（）A.生育酚-维生素EB.硫胺素一维生素B1C.钻胺素一维生素B12D.抗坏血酸-维生素CE.核黄素-维生素B220.脂溶性维生素包括（）A.视黄醇B.钙化醇C.生育酚D.维生素KE.硫胺素21.不能从饮食中摄入蔬菜和水果的患者最有可能存在哪种营养性缺乏症（）A.维生素AB.维生素CC.维生素DD.维生素B. E叶酸22下列有关维生素A的叙述，正确的是（）A.维生素A是脂溶性维生素B.能转变成维生素A的β-胡萝卜素称维生素A原C.维生素A有两种形式即A1和A2两者仅来源不同。
第五章诊断酶学
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一、米－曼氏方程
Michaelis 和Menten提出的酶作用的中间产物学说:
E+S
K1 K2
ES
K3
E+P
1913年提出了著名的酶促反应速度与底物浓度关系
的 方程式，即米-曼氏方程(Michaelis-Menten equation):
V max[S ] V Km [ S ]
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常见酶温度转化系数
25℃
CK LD ALT AST ALP GGT CHE HBDH 0.64 0.75 0.76 0.73 0.78 0.73 0.81 0.85
30℃
1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00
37℃
1.56 1.44 1.38 1.52 1.30 1.31 1.26 1.10
Ex 为待测酶，A为底物，B为中间产物。 A、B二物质的变
化无法直接监测，此时可外加第二个酶Ei(为指示酶)，其底 物为B，反应产物为P可直接测定。
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辅助反应 如果一些酶促反应找不到合适的指示酶与其 直接偶联，此时还可在始发反应和指示反应之间加入另 一种酶，将二者连在一起，此反应称为辅助反应。模式 为：
一酶活性浓度测定方法一酶活性浓度测定方法返回节按检测方法分类按检测方法分类底物或产物浓度的检测底物或产物浓度的检测测定项目方法原理测定手段胆碱酯酶氯化乙酰胆碱做底物产生乙酸根电位滴定法脂肪酶三油酸甘油酯悬乳液做底物生成油酸甘油一酯浊度下降浊度法淀粉酶淀粉做底物一定时间后剩余的淀粉不足以时间滴定法丙氨酸氨基转移酶比色法丙氨酸氨基转移酶ifcc推荐法分光光度法丙氨酸氨基转移酶固定化谷氨酸氧化酶膜生成过氧化氢利用过氧化氢电极生物传感器n乙酰氨基葡萄糖苷酶4甲基伞形酮n乙酰d氨基葡萄糖苷做底物荧光葡萄糖6磷酸脱氢酶nadph在365nm激发下产生荧光荧光返回节定时法固定时间法测定酶与底物作用反应一定时间后底物或产物变化的总量计算酶促反应平均速度
临床医学检验技士考试辅导第五章 诊断酶学练习题
第五章诊断酶学一、A11、下列哪项因素对ALP参考值范围影响最大A、性别B、年龄C、职业D、饮食E、地域2、何种酶检查对肝病早期诊断有较大价值A、AKPB、ASTC、ALTD、ALPE、γ-GT3、反映肝细胞受损，膜通透性增加的血清酶是A、γ－GTB、MAOC、ALTD、chEE、ALP4、根据国际生化学委员会的规定，酶的一个国际单位是指A、最适条件下，每小时催化生成1μmol产物的酶量B、37℃下，每分钟催化生成1μm ol产物的酶量C、25℃下，其他为最适条件，每分钟催化生成1μmol产物的酶量D、30℃下，每小时催化生成1μmol产物的酶量E、在特定条件下，每分钟催化1μmol底物产生变化所需的酶量5、LD属于哪种酶类A、氧化还原酶类B、转移酶类C、异构酶类D、裂解酶类E、水解酶类6、目前公认的诊断急性心肌梗死最有价值的生化指标是A、CK－BBB、CK－MBC、CK－MMD、LD1E、LD27、CK是由2个亚单位组成的二聚体，产生的同工酶有A、2种B、3种C、4种E、6种8、关于细胞酶的释放，正确的是A、不同组织中酶进入血中途径不一B、由于Ca2+进入细胞内，使膜孔隙增大C、细胞内外酶浓度差异，影响酶流动速度D、最容易释放入血的是胞质中的游离酶E、酶流动的速度和数量受多种因素影响9、确认肝癌术后有无复发时，应首选哪项试验A、GGTB、碱性磷酸酶C、ALTD、异常凝血酶原测定E、甲胎蛋白10、血清γ－谷氨酰转肽酶（GGT）在人体组织细胞中含量最多的器官是A、肝脏B、肾脏C、心脏D、胰E、肠11、门冬氨酸和α－酮戊二酸可以作为下列哪种酶的反应基质A、ALTB、ASTC、ALPD、GGTE、AMY12、下列对血清酶活力测定的描述哪一项是错误的A、可测定产物生成量B、可测定底物的消耗量C、需要最适pHD、需要最适温度E、与底物浓度无关13、酗酒者常引起明显升高的酶是A、ALTB、CKC、ALPD、ASTE、GGT14、GGT增高明显的疾病是A、肝癌B、胰腺癌C、急性肝炎E、心肌炎15、人体内含AST活性最高的器官是A、肝脏B、脑C、心脏D、肾脏E、肠16、下列哪种酶与心脏功能是否正常关系不大A、ASTB、ALPC、HBDD、LDE、CK17、年龄引起酶变化最明显的酶是A、ALTB、CKC、ALPD、ASTE、GGT18、血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）在人体何脏器细胞含量最高A、心脏B、脑C、肝脏D、肠E、肾脏19、1，4－糖苷键是下列哪种物质分子中的主要化学键A、蛋白质B、脂肪C、氨基酸D、淀粉E、以上都不是20、ALT测定显著增高时可见于下列哪种疾病A、慢性肝炎B、乙型肝炎急性期C、胆囊炎D、心肌梗死E、肝癌21、酶法测定血清三酰甘油中用到的酶有A、甘油激酸酶B、脂肪酶C、甘油磷酸氧化酶D、过氧化物酶E、以上都是22、CK同工酶由几个亚基组成A、2B、3C、4D、5E、623、诊断急性肝炎最敏感的指标是A、血总胆红素测定B、碱性磷酸盐C、丙氨酸氨基转移酶D、血清蛋白定量E、血清蛋白电泳24、反映肝细胞广泛受损的酶学指标是A、ASTB、ALTC、γ－GTD、MAOE、胆碱酯酶25、关于酶活性和质量测定，错误的是A、测酶质量比测酶活性灵敏度高B、可以测到以前不易测定的酶C、免疫方法特异性低D、酶质量和酶活性存在不平行E、免疫方法测定同工酶简单方便26、无黄疸病人血清ALP明显升高，应考虑A、慢性活性肝炎B、胆囊炎C、肝硬化D、肝癌E、脂肪肝27、血中酶清除快慢的主要因素是酶的A、分布B、数量C、运送D、半衰期E、以上均对28、磷酸甘油氧化酶法测定血清三酰甘油时，其中苯酚及4－氨基安替比林是A、氧化剂B、显色剂C、还原剂E、皂化剂二、A21、男，51岁，胸痛发作24小时，伴心悸、气短、面色苍白。
临床医学检验技术(士)考试过关必做2000题(临床化学 第五章 诊断酶学)【圣才出品】
A．AST
B．ALP
C．LD
D．HBD
E．CK
【答案】B
22．可以门冬氨酸和α－酮戊二酸作为反应基质的酶是（ ）。
A．ALT
B．AST
C．GGT
7 / 18
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D．ALP
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E．AMY
【答案】B
23．通常酶促反应进程曲线可用于确定（ ）。
9 / 18
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【答案】D
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29．为鉴别 ALP 升高的来源，可同时测定（ ）。
D．13～28U（卡门法）
E．5～28U（金氏法）
【答案】A
16．心肌梗死时，CK－B 可持续升高的时间是（ ）。
A．4D
5 / 18
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B．6D
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C．7D
D．8D
E．10D
【答案】C
17．改变连续监测法测酶活性浓度的常数 K 值大小最方便的途径为（ ）。
【答案】B
27．对血清酶活力测定的描述错误的是（ ）。
A．可测定产物生成量
B．需要最适 pH
C．可测定底物的消耗量
D．需要最适温度
E．与底物浓度无关
【答案】E
28．国内外目前应用连续监测法测定血清 ALT 所选的测定波长为（ ）。
A．560nm
B．450nm
C．405nm
D．340nm
E．280nm
E．免疫方法测定同工酶简单方便
【答案】C
3 / 18
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第五章诊断酶学 - 酶活性浓度的测定技术
ALT双试剂法测定中，首先使血清与缺
此时反应的方向少由αN-酮A戊DH二转酸的变底为物N溶A液D混，合随，反37应°进C保行，A 应随之而下降，通过温检5m测，反将应样产品中物所A含在的34内0源nm性处α-酮A的酸消变化速 率，可以检测指示酶耗反完应。。然后再加入α-酮戊二酸启动ALT
即POD催化下， H2O2氧化芳香族胺色素原生成有色色 素，此类色素原供氢体包括：OT、DAB、ODA、TMB。
34
2. NAD(P)+或NAD(P)H偶联的脱氢酶及其指示反应
许多氧化还原反应，尤其是作为工具酶如LD、GLD、 G6PD等参与时，常将底物的H去除后传递给NAD (P)+形成 NAD(P)H。借助NAD(P)H340nm处特征性的光吸收，借此用 分光光度法检测。
通过测定被加速化学反
应的反应速率，来间接
反映酶的浓度
S
E
P
E+S
ES
E+P
V＝
ds dt
或
V＝
dp dt
14
3. 酶活性浓度
即酶所催化的化学反应的反应速率，用 酶促反应中单位时间内底物的减少量或产物 的生成量来计算。
注意：只有当酶所催化的反应速度仅与 [E] 成正比，而不受其它因素影响时，即在酶促 反应的零级期，才能根据酶所催化的化学反 应速率来确切表示酶活性浓度的大小。
A Ex B Ei P
始发反应
指示反应 辅助酶
A Ex B Ea C Ei P
辅助反应
被测酶 始发反应 指示反应 指示酶 辅助酶 辅助反应 酶偶联体系
临床医学检验技师考试辅导临床化学 第五章 诊断酶学练习
第五章诊断酶学一、A11、LDH由H和M亚基构成的四聚体，组成几种同工酶A、2种B、3种C、4种D、5种E、6种2、下列反应中无过氧化氢产生的是A、尿酸氧化酶法B、总胆固醇酶法C、三酰甘油酶法D、尿素酶法E、葡萄糖氧化酶法3、骨ALP增加通常不见于A、骨折愈合过程B、恶性肿瘤转移性骨损伤C、Rickets病D、Paget病E、肝癌4、大多数酶促反应是A、可逆反应B、不可逆反应C、不受底物浓度的影响D、不受产物生成量的影响E、以上均不对5、人体含ALT最丰富的组织是A、肝细胞B、心肌C、骨骼肌D、红细胞E、肾脏6、下列哪种酶是血浆特异酶A、胆碱酯酶B、脂肪酶C、转氨酶D、乳酸脱氢酶E、淀粉酶7、诊断心肌梗死，特异性最好的酶是A、CK-MbB、LDHC、α-HBDHD、CPKE、GOT8、“酶胆分离”通常是哪种疾病的征兆A、急性心肌梗死B、肝癌C、肝坏死D、脂肪肝E、胆石症9、无黄疸患者血清ALP明显升高，应考虑A、脂肪肝B、胆囊炎C、肝硬化D、肝癌E、慢性活性肝炎10、酶活性测定方法中的平衡法又称为A、中止反应法B、终点法C、动力学法D、速率法E、连续检测法11、正常成人心肌组织中LDH同工酶的含量顺序为A、LDH1＞LDH2＞LDH3＞LDH4＞LDH5B、LDH2＞LDH1＞LDH3＞LDH4＞LDH5C、LDH3＞LDH1＞LDH2＞LDH4＞LDH5D、LDH4＞LDH3＞LDH2＞LDH1＞LDH5E、LDH5＞LDH2＞LDH1＞LDH3＞LDH412、连续监测法，常通过监测哪处波长吸光度的变化来计算LD酶的活性A、260nmB、280nmC、340nmD、410nmE、620nm13、多用于胰腺炎诊断的血清酶是A、CK和CK-MBB、ALP和AMYC、ALT和ASTD、AST和AMYE、AMY和LPS14、关于细胞酶的释放，正确的是A、不同组织中酶进入血中途径不一B、由于Ca2+进入细胞内，使膜孔隙增大C、细胞内外酶浓度差异，影响酶流动速度D、最容易释放入血的是胞质中的游离酶E、酶流动的速度和数量受多种因素影响15、连续监测法测定酶反应速度是指A、在反应速度变化恒定期间，酶反应的初速度B、在最适反应pH条件下，酶反应的初速度C、在37℃条件下，酶反应的平均速度D、在适宜的酶浓度条件下，酶反应的初速度E、在酶反应的最佳条件下，酶反应的平均速度16、下列有关同工酶的叙述哪一个是正确的A、同工酶的蛋白结构相同B、催化功能相同，理化性质不同C、同工酶的免疫学性质相同D、同工酶是由两个以上不同亚基组成的E、同工酶在细胞内的定位相同17、人体GGT含量最高的组织器官为A、肝脏B、胰腺C、肾脏D、心肌E、脑细胞18、ALT测定显著增高时可见于下列哪种疾病A、慢性肝炎B、乙型肝炎急性期C、胆囊炎D、心肌梗死E、肝癌19、一个酶活力的国际单位（U）是指A、在实验规定条件下，每分钟催化1mmol底物反应所需的酶量B、在实验规定条件下，每分钟催化1μmol底物发生反应所需的酶量C、在37℃条件下，每分钟催化1μmol底物发生反应所需的酶量D、在实验条件下，每秒钟催化1mol底物反应所需的酶量E、在最适条件下，每小时催化1mol底物发生反应所需的酶量20、属分泌性酶的是A、胆碱酯酶B、胰酶C、丙氨酸氨基转移酶D、乳酸脱氢酶E、肌酸激酶21、CK-MM含量最高的器官是A、心B、肝C、肾D、肺E、骨骼肌答案部分一、A11、【正确答案】D【答案解析】LDH是由两种不同的亚基（M、H）构成的四聚体，形成5种同工酶，即LDH1（H4）、LDH2（H3M）、LDH3（H2M2）、LDH4（H3M）、LDH5（M4）。
临床免疫学检验-第五章-诊断酶学
(二)连续监测法测定酶活性
偶联反应中存在几个时相：
①预孵育期： ②延滞期： ③稳态期：
酶偶联法测定ALT的吸光度变化
米－曼氏方程
• Michaelis 和Menten提出的酶作用的中间产物学说
E+S
K1 K2
ES K3
E+P
1913年提出了著名的酶促反应速度与底物浓度关系 的
方程式，即米-曼氏方程(Michaelis-Menten equation):
酶 ALT AST ALP
ACP LD CK γ-GT
AMY LPS ChE#
方法 连续监测法 底物中含磷酸吡哆醛
底物中不含磷酸吡哆醛 连续监测法 底物中含磷酸吡哆醛
底物中不含磷酸吡哆醛 连续监测法（磷酸对硝基苯酚法）
比色法（磷酸麝香草酚法） 连续监测法 L→P，即LD-L法
P→L，即LD-P法 连续监测法（酶偶联法）
(三)干扰因素
1. 其他酶和物质的干扰 2. 酶的污染 3. 非酶反应 4. 分析容器的污染 5. 沉淀形成
（四）血清酶活性浓度测定的条件的优化
1.方法选择 尽可能采用连续监测法；尽量减少操作步骤。 2.仪器和设备 明确规定仪器和设备的各种性能规范。 3.试剂 化学试剂必须具有一定纯度；试验用水最好是纯水或双蒸水。 4.自动生化分析仪参数的设置
参考区间 男：≤45U/L；女：≤34U/L* 5~40U/L 男：≤35U/L；女：≤33U/L* 8~40U/L 1~12岁＜500U/L； 男：12~15岁＜750U/L，
＞25岁40~150U/L； 女：＞15岁40~150U/L 0.5~1.9U/L ≤252U/L* 200~380U/L 男：≤169U/L；女：≤143U/L*
05 酶学性质表征
V
初 速 度 v
a
c b
混合级反应
0 [S ]
底物浓度对反应速度的影响
当底物浓度高达一定程度时，达到最大反应速度
V
初 速 度 v
a
c b
零级反应
0 [S ]
底物浓度对反应速度的影响
3.3 稳态学说
E
酶
+S
底物
k1 k-1
ES k2 中间产物k-2
E+P
酶 产物
稳态时，复合物的生成速率和分解速率相等
速 度
b
速率为最大速率一
v
1/2V max
半时底物浓度。
a
0
Km
[S ]
图5-14 底物浓度对酶促反应速度的影响
k������������������
=
������������������������ [������]
������������������������ ������������
酶的转化数：在单位时间内 每一活性中心或每分子酶所 能转换的底物分子数
1903年，蔗糖酶水解蔗糖
V
初
c
速
b
度
vaຫໍສະໝຸດ 酶促反应速度曲线0 [S ]
底物浓度对反应速度的影响
3.2酶-底物中间复合物学说（单底物
一定酶浓度）
中间复合物
当底物浓度较低时，反应速度与底物浓度成正比
V
初
c
速
b
度
v
a
一级反应
0 [S ]
底物浓度对反应速度的影响
随着底物浓度增加，反应速度不再成比例加速
-1 0
1
Km
[S]
第五章 酶学诊断
（三）代谢物浓度的酶法测定技术
1.终点法
直接法 酶偶联法
2.动力学法
第二节 酶活性浓度的测定技术
一、酶活性测定
根据测定方法分类： 量气法、分光光度法（最常用）、荧光 法、放射核素法、电极法和其它方法。 根据对酶促反应时间的选择不同分类： 定时法 连续监测法
优点:
能动态观测酶促反应进程，可以明显地找到反
应的线性期，结果准确可靠，标本和试剂用量少，
可在较短时间内完成测定。
缺点： 要求高，要求能够精确地控制温度、pH值和底
物浓度等反应条件，要求仪器具有恒温装臵及自动
监测功能，半自动及自动生化分析仪都能达到这些
要求。
直接连续监测法： 特点： 使用各种分析手段，在不停止酶反应 条件下直接测反应体系中底物或产物的变 化，从而计算出酶活性浓度。 应用最多的方法为分光光度法。 应用最广的反应系统 • NAD(P)H，可以测定大部分的脱氢酶， • 色素原底物，其本身为无色或微黄色， 在酶作用下生成有色化合物，适用于测 定水解酶和一些转移酶。
酶促反应进程曲线表明，只有初速度才能真正 代表酶活性，一般要求初速度达到最大速度的 90%～95%、底物消耗率为1%～5%。这样既可以近似 地表示酶活性，又不致于使底物浓度过高而造成浪 费。
5.鉴定酶的种类
Km值是酶的特征常数，在反应条件一定时，只 与酶的种类和底物的性质有关，与酶的浓度无关。 不同种类的酶其Km值不同，对于一种未知的酶，可 在规定的条件下测定其Km值加以鉴定。
相关疾病
心肌梗死、肌病、颅脑损伤、肿瘤
肝胆疾病、骨病、妊娠、结肠炎、肿瘤
LD1、LD2、 LD3、LD4、LD5 心肌梗死、肌病、肺梗死、肝病、肿瘤 前列腺癌、血液病、骨肿瘤 急慢性胰腺炎、腮腺炎
临床化学诊断酶学
第五章诊断酶学本章考点：1.血清酶（1）分类、生理变异与病理生理机制（2）酶活性与酶质量测定方法及其评价（3）同工酶及其亚型测定的临床意义2.血清酶活性检测技术（1）酶活性概念和表示方法（2）酶活性测定方法分类、原理、优缺点及应用（3）影响酶作用的因素（4）工具酶的概念、代谢物测定中常用的指示反应3.常用血清酶及同工酶测定的参考值及临床意义（1）肌酸激酶及同工酶和其亚型（2）乳酸脱氢酶及同工酶（3）氨基转移酶及同工酶（4）碱性磷酸酶及同工酶（5）谷氨酰基转移酶及同工酶（6）淀粉酶及同工酶（7）酸性磷酸酶及同工酶4.代谢物酶法测定第一节血清酶一、血清酶的分类根据酶的来源及其在血清中发挥催化功能的情况，可将血清酶分为两大类。
（一）血浆特异酶在血浆中发挥特定催化作用的酶。
如凝血酶、胆碱酯酶（CHE）、脂蛋白脂肪酶、铜氧化酶等。
它们大多数在肝内合成，在血浆中的浓度甚至超过器官细胞内浓度。
有的可以作为肝功能试验的一部分。
血浆特异酶活性的改变，除了反映血液功能外，还反映来源器官的功能。
（有少部分酶在细胞合成后分泌到血液中行使其功能，如凝血因子及有关的纤溶因子。
它们以酶原状态分泌人血，在一定的条件下被激活，引起相应的生理或病理变化。
）（二）非血浆特异酶在血浆中浓度很低，且无功能，分为两种。
1.分泌酶：来源于消化腺或其他外分泌腺的酶。
如α-淀粉酶（AMY）、前列腺酸性磷酸酶（ACP）、脂肪酶（LPS）、胃蛋白酶原、胰蛋白酶原、ALP等。
正常体液中外分泌酶活性低而稳定，不发生催化作用。
在血液中的浓度和其分泌腺体的功能活动和疾病有关，来源增加或排泄受阻时，血浆中此类酶活性增高。
例如，急性胰腺炎时，血淀粉酶就会升高。
2.代谢酶：（细胞酶）在细胞内发挥催化功能的酶。
正常时这些酶存在于组织细胞中，血浆中酶活性很低。
细胞内、外浓度差异悬殊。
当酶来源的组织细胞发生病变，细胞膜通透性增加或细胞坏死时，细胞内酶大量进入血浆，导致血浆酶活性显著增高。
5第五章 酶学分析技术
第三节 代谢物酶学分析技术
一、工具酶
定义：
工具酶：将作为试剂用于测定待测酶活性或底物浓 度的酶
偶联：工具酶与待测酶、工具酶与工具酶之间的联合
分类： 工具酶有氧化还原酶类、转移酶类和水解酶类
第三节 代谢物酶学分析技术
常用工具酶的名称及其缩写符号
第一节 酶活性测定的基本知识
2.酶活性单位
定义：指在一定条件下使酶促反应达到某一速度时 所需要的酶量。酶活性单位是一个人为规定的标准
惯用单位：酶活性测定方法的建立者所规定的单位 国际单位 ：1IU指在规定条件（最适pH，最适底物浓度）下， 每分钟转化1mol底物的酶量。单位为IU/L Katal单位：1Katal指在规定条件下，每秒钟转化1mol底物的 酶量，1Katal=60×106IU
第二节 酶活性测定方法
特点：
优点：简单，不需要特种仪器 缺点：难以确定酶促反应是否处于线性期
注意：固定时间法时间段的预定不宜太长，一般以30～60分 钟为宜
第二节 酶活性测定方法
二、连续监测法（速率法、动态法）
定义：测定底物或产物随时间的变化量，又称为速率法 原理：
该方法每隔一定时间（10s～60s）测定一次底物或产物 的变化量，连续测定多点，然后将测定结果对时间作图，绘 制反应速度曲线
3.酶偶联反应在酶活性测定和酶法分析代谢物中的应用； 以NAD（P）H为指示系统和色原底物在酶活性测定中的应用
4.熟悉酶促反应进程；酶促反应底物动力学；酶学分析在临 床诊断上的应用
5.了解Km值、Vmax值的应用及Km和Vmax的测定；同工酶测定和 酶活性测定最适条件的选择
第一节 酶活性测定的基本知识
第五章 诊断酶学(自编)
第一节
概 述
二、同工酶的概念与特征
3、临床常用的同工酶
第一节
概 述
二、同工酶的概念与特征
3、临床常见的同工酶 （1）LDH： 该酶是四聚体酶，由两种亚基类型即骨 骼肌型（M）和心肌型（H）。 种类：LDH1，LDH2，LDH3,LDH4， LDH5。主要分布于心肌，红细胞，骨骼肌 和肝脏中。
第一节
min
×K
V×106
K=
ε ×V×L
例：NADH的ε 为6.22×103cm/mol，血清量50μm，底物
第一节
概 述
三、工具酶 （三） 酶循环法 2、实例：酶循环法测定总胆汁酸
第一节
概 述
三、工具酶 （三） 酶循环法 2、实例：酶循环法测定总胆汁酸 解释：硫代-NADH在405nm处有强值，胆汁酸的 浓度与此处吸光值的变化成正比。
△A/min（样品）
总胆汁酸浓度=
△A/min（标准品）
第一节
概 述
Vi×P Vx = P + （Km）i Vi =Vx [1+
（Km）i P
]
第 二 节 酶测定技术
采用酶偶联法测定酶活性前提： 指示酶量的选择标准 ③
第 二 节 酶测定技术
（三）干扰因素
1、其他酶和物质的干扰 2、酶的污染 3、非酶反应 4、分析容器的污染 5、沉淀形成
第 二 节 酶测定技术
（四）血清酶活性浓度测定条件的优化 1、方法的选择 2、仪器和设备
第一节
概 述
三、工具酶 （四）代谢物浓度的酶法测定技术 2、动力学法（定时法）： （1）定义：根据固定时间内底物消耗量和产物生 成量计算酶的活性。 （2）原理：当酶促反应为一级反应时，反应速度 V=K〔S〕。此时测定酶促反应的初速度，根据 标准浓度法即可求得待测物的浓度。
临床化学之诊断酶学
临床化学之诊断酶学在临床医学中，诊断酶学是一个至关重要的领域，它为疾病的诊断、监测和治疗提供了重要的依据。
酶作为生物体内的催化剂，参与了各种生理和生化过程，其活性和含量的变化往往与疾病的发生和发展密切相关。
酶是一种具有高效催化作用的生物大分子，能够加速化学反应的进行。
在人体内，存在着数千种酶，它们分布在不同的组织和细胞中，执行着特定的生理功能。
当人体发生疾病时，细胞和组织受到损伤，酶会释放到血液、尿液或其他体液中，导致酶的活性或含量发生改变。
通过检测这些变化，医生可以推断出疾病的类型、严重程度以及病变的部位。
诊断酶学中常用的检测指标包括血清酶、尿液酶和同工酶等。
血清酶是临床上应用最为广泛的一类酶，如谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肌酸激酶（CK）等。
ALT 和 AST 主要存在于肝细胞中，当肝细胞受损时，它们会释放到血液中，导致血清中 ALT 和 AST 的活性升高。
因此，ALT 和 AST 常用于诊断肝脏疾病，如肝炎、肝硬化等。
CK 则主要存在于心肌、骨骼肌和脑组织中，当心肌梗死、肌肉损伤或脑卒中等疾病发生时，血清 CK 的活性会显著升高。
尿液酶的检测对于肾脏疾病的诊断具有重要意义。
例如，N乙酰βD氨基葡萄糖苷酶（NAG）主要存在于肾小管上皮细胞中，当肾小管受到损伤时，尿液中 NAG 的活性会增加。
此外，γ谷氨酰转肽酶（γGT）、碱性磷酸酶（ALP）等在尿液中的变化也有助于诊断肾脏疾病和泌尿系统疾病。
同工酶是指催化相同化学反应，但分子结构、理化性质和免疫学性质不同的一组酶。
同工酶的检测在诊断疾病时具有很高的特异性。
以乳酸脱氢酶（LDH）为例，它有五种同工酶，分别是 LDH1、LDH2、LDH3、LDH4 和 LDH5。
在心肌梗死时，血清中 LDH1 和 LDH2 的活性升高，而在肝脏疾病时，LDH5 的活性升高。
通过检测 LDH 同工酶的比例变化，可以帮助医生区分不同的疾病。
除了上述常见的酶类，还有许多其他酶在诊断疾病中也发挥着重要作用。
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2. 系统命名法：规定每一种酶均有一个系统 名称，它标明酶的底物与反应性质，底物 之间以“：”分隔开。
3. 应用：为应用方便，对每一个酶同时推荐 一个习惯命名。
(四) 酶的分类与编号 氧化还原酶类（oxidoreductases） 转移酶类（transfereases） 水解酶类（hydrolases） 裂解酶类（lyases） 异构酶类（isomerases） 合成酶类（synthetase）
5.鉴定酶的种类
Km值是酶的特征常数，在反应条件一定时，只 与酶的种类和底物的性质有关，与酶的浓度无关。 不同种类的酶其Km值不同，对于一种未知的酶，可 在规定的条件下测定其Km值加以鉴定。
某些酶的Km值
酶
底物
Km(mmol/L)
乳酸脱氢酶 己糖激酶
-半乳糖苷酶 碳酸酐酶 过氧化氢酶 蔗糖酶 糜蛋白酶
丙酮酸
0.017
D-葡萄糖
0.05
D-果糖
1.5
D-乳糖
4.0
H2CO3
9.0
H2O2
25
蔗糖
28
甘氨酰酪氨酰甘氨酸 108
6.分别测定正逆方向反应的Km值及底物浓 度，可推断该酶在体内的反应方向和催化 效率。
7.根据Km值可帮助寻找酶反应体系的限速 酶。 酶反应体系中， Km大的酶可能为限速酶。
节性。
（二）酶的催化作用机制
酶底物复合物
E + S ES E + P
*诱导契合假说(induced-fit hypothesis) 酶与底物相互接近时，其结构相互诱导、
相互变形和相互适应，进而相互结合。这一过 程称为酶-底物结合的诱导契合假说 。
【酶促反应动力学】
概念 研究各种因素对酶促反应速度影响的学科--酶促反应动力学。
第五章 诊断酶学
Diagnostic Enzymology
目的： 学习并掌握血清酶的基本知识及其在 临床检验诊断中的应用。 学习内容：
第一节 概述 第二节 酶测定技术 第三节 常用酶及同工酶测定的临床应用
第一节 概 述
与酶催化反应有关的名词
酶促反应：酶催化的反应； 酶活性(activity)：酶催化反应的能力； 底物(substrate，S)：酶所作用的物质； 产物(product，P)：酶促反应的生成物； 酶的激活剂(activator）：加速酶促反应
酶促反应速度：用单位时间内底物的消耗量 或产物的生成量表示
V=Vmax[S]/Km+[S]
米-曼氏方程（michaelis menten equation)
【Km】 Km的定义
由米-曼氏方程可以导出：
（Vmax-v）〔S〕 Km = ———————
v
当v = 1/2Vmax时，Km =〔S〕。因此Km值为反应速度 相当于最大反应速度一半时的底物浓度。Km值是酶的 特征常数，具有重要的应用价值。 大多数酶Km在10-6~10-2mmol/L之间
临床常用酶的名称与编号
习惯用名 乳酸脱氢酶 异柠檬酸脱氢酶 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 谷氨酸脱氢酶 单胺氧化酶 -谷氨酰转移酶 糖原磷酸化酶 谷胱甘肽转移酶 门冬氨酸氨基转移酶 丙氨酸氨基转移酶 肌酸激酶 脂肪酶 胆碱酯酶 碱性磷酸酶 酸性磷酸酶 5‘-核苷酸酶 -淀粉酶
英文缩写
EC 编号
LD(LDH)
酶活性浓度测定就是要使酶促反应的初速度 (v)达到最大速度Vmax，即在过量底物存在 下的零级反应期的速度。
【酶促反应的影响因素和反应条件的选择】
影响酶促反应的因素： –酶浓度 –底物浓度 –pH –温度 –电解质 –辅酶 –激活剂 –抑制剂
酶促反应的最适条件：
我国检验学会文件提出的最适条件为
1.1.1.1.42
G6PD(G6PDH) 1.1.1.49
GLD(GLDH)
1.4..1.3
MAO
1.4.3.4
3.计算不同底物浓度时酶促反应速度和相当于最 大反应速度的比率
根据米-曼氏方程可以计算
4.设计适宜的底物浓度，可通过米-曼氏方程来 推算工具酶的用量。
酶促反应进程曲线表明，只有初速度才能真正代 表酶活性，一般要求初速度达到最大速度的90%～ 95%、底物消耗率为1%～5%。这样既可以近似地 表示酶活性，又不致于使底物浓度过高而造成浪费。
【酶促反应进程】
酶活性浓度即酶的催化活性浓度，用酶促反应 速度表示，指在规定条件下单位时间内底物的减 少量或产物的生成量。
v =-d〔S〕/dt 或 v =d〔P〕/dt。
底物浓度为〔S〕,产物浓度为〔P〕,时间为t，反应速度为v
注：在实际测定酶促反应速度时，以测定单位时间内产物的 生成量为好。
酶促反应中基质[S]、产物[P]和反应速率V在不同 时间变化的模式图
Km值的应用
1.反映酶与底物的亲合力
Km值越大，酶与底物亲合力越小， Km值越小，酶与底物亲合力越大。
2.选择酶的最适底物 Km值取决于酶的种类和底物的性质，在酶一定时， 不同底物有不同的Km值, Km值最小的底物为酶的最 适底物。 酶活力测定时，应优先选择酶的最适底物，使酶促 反应容易进行，并节省底物用量。
的物质； 酶的抑制剂(inhibitor ）：减慢或终止酶
促反应的物质
(一)酶的组成、结构与功能
组成 单纯酶(simple enzyme)： 仅由氨基酸残基构成的酶
结合酶（conjugated enzyme)： 由蛋白质部分和非蛋白质部分（辅
助因子）构成的酶。
结构
*单体酶： 具有一、二、三级结构
1. 选合适的底物、辅因子、活化剂、变构剂的 种类和浓度。
2. 指示酶和辅助酶的种类和浓度。 3. 反应混合液的最适pH，缓冲液种类和浓度。
其它影响酶活性的因素，如去除各种抑制剂。 4. 在某些情况下，为了获得更好的测定重复性
或更大的临床价值，可考虑对上述“最适条 件”作适度的修改。
(三) 酶的命名
*寡聚酶： 具有一、二、三、四级结构
每一种酶分子内具有与催化功能密切相关的空间结 构区域---活性中心（active center）
活性中心以外 的必需基团
结合基团
底物
催化基团
活性中心
目录
酶的功能及其特性
功能： 对生物体内的化学反应起催化作用。
酶催化作用的特性： 高度催化效率、高度特异性及高度可调