丹酚酸B体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究
丹酚酸B及丹参酮ⅡA诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞
丹酚酸B及丹参酮ⅡA诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞李旭;王亚玲【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2013(017)010【摘要】背景:目前大多数研究者采用5-氮胞苷诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞,存在着一定的不良反应,难以应用于临床.中药丹参本身在临床上广泛用于治疗心血管系统疾病,其主要化学成分为丹酚酸B和丹参酮ⅡA.目的:观察丹酚酸B及丹参酮ⅡA联合诱导骨髓间充质干细胞定向分化为心肌样细胞的效果.方法:取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养骨髓间充质干细胞,应用丹酚酸B、丹参酮ⅡA及二者联合分别对第2代骨髓间充质干细胞定向诱导,不加诱导剂为空白对照组.3d后各实验组去除诱导培养基,用正常培养基继续培养4周.结果与结论:空白对照组细胞结蛋白、α-横纹肌肌动蛋白、肌钙蛋白T及缝隙连接蛋白43均为弱阳性或阴性表达.与空白对照组相比,丹酚酸B组,丹参酮ⅡA组,丹酚酸B+丹参酮ⅡA组骨髓间充质干细胞各标记物阳性表达均明显升高,且差异有显著性意义(P< 0.01).其中,二者联合诱导组各标记物的阳性率均最高.荧光免疫细胞化学鉴定可见诱导组细胞质内结蛋白的表达呈红色,肌钙蛋白T的表达呈绿色,当两者同时被观察时可见其重叠的部位变成黄色.结果显示丹酚酸B及丹参酮ⅡA均可分别诱导骨髓间充质干细胞获得心肌分化表型,且二者联合诱导效果最好.【总页数】7页(P1849-1855)【作者】李旭;王亚玲【作者单位】河北北方学院,河北省张家口市 075000;河北北方学院附属第一医院心内科,河北省张家口市 075000【正文语种】中文【中图分类】R394.2【相关文献】1.碱性成纤维细胞生长因子与丹酚酸B体外诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞 [J], 吕洋;王海萍;王浩宇;张辉;任君旭;史宝林;张江兰2.丹酚酸B体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞 [J], 李伟望;王海萍;张娟娟;吕洋3.丹酚酸B及丹参酮ⅡA诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞 [J], 李旭;王亚玲;4.丹酚酸B抑制骨髓间充质干细胞氧化损伤及促进分化为心肌样细胞 [J], 裴丽丽;孙贵才;王弟5.丹酚酸B抑制骨髓间充质干细胞氧化损伤及促进分化为心肌样细胞 [J], 裴丽丽;孙贵才;王弟因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
体外培养鼠骨髓间充质干细胞及其向心肌样细胞诱导分化的实验研究
法分 离培养的 MS s生长稳 定 , 殖较 快。经 5氮胞苷诱 导后 , C 形 态发 生变化 , C 增 一 MS s 可见肌管样结构 。免疫组化 和 R -C T P R证 实
采用贴壁 筛选 法 , 简便 易行 , 短期 内可获得 大量的纯度较 高的骨髓 间充质
干细胞 ; 5 氮胞苷的诱导 下, 在 . 骨髓间充质干细胞呈现 向心肌样 细胞 分化的趋势 。
和 5氮胞苷效能 。方法 .
线 , 用流 式 细胞 仪 技 术检 测 C39 C 4 并 1 、 D 5的 表 达 , 行 细 胞 成 分 鉴 定 。 用 5 氮胞 苷 体 外 诱 导 MS s观 察 其 形 态 结 构 。 用免 疫 组 2 进 一 C,
化检测肌钙蛋 白 T c n ) 结蛋 白( emn , R -C (T T 、 D s i) 用 TP R检 测心肌特异 因子基 因 B肌球蛋 白重链 ( - C 的表 达。结果 - BMH ) MS s C 经体外诱导发 生了向心肌样 细胞 的分化。结论
华
( 中山大学第二附属 医院心胸外 科 , 州市 广
【 摘要 】 目的
通过体外培养骨髓 间充质干细胞 ( S s , 用5 氮胞苷诱 导其向心肌样细胞 分化 , 究 M C 生物 学特 性 M C )并 一 研 Ss
丹酚酸B对骨髓间充质干细胞存活的影响及其作用机制研究
丹酚酸B对骨髓间充质干细胞存活的影响及其作用机制研究向培海;崔国红;邵水金;田金鑫;陆萍萍;国海东【期刊名称】《上海中医药杂志》【年(卷),期】2014(48)1【摘要】目的探讨丹酚酸B(SalB)对骨髓间充质干细胞(MSC)存活的影响及其作用机制。
方法体外培养MSC,建立体外缺血缺氧(OGD)模型。
实验分MSC组、MSC+OGD组和MSC+OGD+不同浓度丹酚酸B组,MSC+OGD+丹酚酸B组在进行OGD处理前30 min,加入相应浓度的SalB进行预处理。
通过Hochest33342染色和Annexin-V/PI双重染色流式细胞仪检测细胞凋亡和存活,经Rhodamine 123染色观察细胞线粒体膜电位的变化,通过Western blot检测Bcl-2和Bax的表达。
结果 Hochest33342染色和Annexin-V/PI流式细胞仪检测显示,MSC经OGD处理后,出现明显的凋亡现象(P<0.01)。
OGD处理前加入SalB与单纯OGD处理比较,MSC的凋亡明显减少,存活细胞数目显著增多(P<0.05,P<0.01)。
OGD处理可以降低Rhodamine 123的表达,减少Bcl-2水平、增加Bax水平(P<0.01);与OGD组比较,10μmol/L丹酚酸B预处理可增加Rhodamine 123的表达,并可增加Bcl-2水平、减少Bax水平(P<0.05)。
结论SalB预处理可阻止线粒体凋亡途径,从而减少MSC凋亡,提高干细胞的存活率。
【总页数】4页(P74-77)【作者】向培海;崔国红;邵水金;田金鑫;陆萍萍;国海东【作者单位】上海中医药大学基础医学院解剖教研室;上海交通大学医学院附属第九人民医院神经内科【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.丹酚酸B对骨髓间充质干细胞分化方向的影响2.丹酚酸B对骨髓间充质干细胞分化方向的影响3.丹酚酸B联合重组腺病毒修饰对大鼠骨髓间充质干细胞存活和分化的影响4.丹酚酸B预处理EPCs对AMI大鼠移植骨髓间充质干细胞后心肌微环境的影响5.丹酚酸B对内皮祖细胞与骨髓间充质干细胞联合心脏移植后增殖状况的影响因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
骨髓间充质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞
胞, 具有横 向分化为心肌 细胞 的能力 …。已有大量的 文 献报 道 , 心 肌 梗死 患 者 和 动 物模 型 中均 可 检 测 到 在 血 清 中 肝 细 胞 生 长 因 子 (eaoyego t atr hpt t rwhfc , c o H F 升高 . G) 因此其被认 为具 有 防止心肌 细胞 凋亡 和 促进血管生成 的作用 [3 2] -。但 目前 并没有人对 H F G 是 否能 促进 心肌 细胞 的分 化进 行 具 体研 究 。 实 验采 本 用 H F作为诱导剂 , G 探讨 M C 向心肌细胞 的定 向诱 Ss 导分化 , 以期 为 干 细 胞 移 植 治 疗 心 肌 梗 死 、 力 衰竭 心 等疾病提供更加 良好 的细胞源。
1 材 料 与方 法
1 大鼠髓 问充质干细胞 的分离 ,扩增培养 参 照 . 1 P t gr 述的方法 , i ne 等[ t e ] 描 分离培养 大 鼠 M C , S s培养 基 组成 为含 1%胎 牛血 清 ( 国 Gbc 司 ) 10U 5 美 ii o公 ,0 / m L青霉素及 10b / L链霉素 的高糖 D E ( 0 gm  ̄ M M 美国 Gbc 公 司 )在 1~ 2d时 贴 壁 细 胞 达 到 8%融 合 , iio , 0 1 0 用 1: 1的 02 %胰 蛋 白酶 和 00 mo/ D A 的混 .5 .1 m lLE T 合液消化 , 1 3的比例继续传代扩增培养 。 按 : 1 骨髓基质干细胞 ( C 的体外诱导分化 将第 4 . 2 MS ) 代的 M C细胞接种于 6 S 孔板 中, 3 第 天换液时将 6 孔 板分为两组 , i 第 组为对照组 , 不加 H F 第 2 , G; 组 加 终浓 度 为 2 gmL的 H F 共 同培养 2 0n/ G . 4h后换 液 , 各 组全 部更 换 为基本 培 养基 , 以后每 3天 换 液 1次 , 相差 显微 镜 下 观 察 细 胞 形 态 学 变 化 , 后 进 行 免 疫 荧 光 4周 和 R —C TP R检测 。 13 免 疫 细 胞 化 学 检 测 取 诱 导 培 养 4周 后 的 . MS s 4 C , %多聚 甲醛 固定 。然后 用 血 清稀 释 液 封 闭 1 h 以 去 除 非 特 异 性 染 色 ,再 分 别 滴 加 抗 鼠 肌 钙 蛋 白 Tooi T抗 体 和抗 鼠 C n ei4 rpnn onxn 3抗 体 ( 国 Sg a 美 im 公 司 )加 P S 空 白对 照 , , B作 湿盒 内 4 ℃过夜 , 然后加
骨髓间充质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞的实验研究
( . p rme t fC r iv slg te is Pep e S s i l fG a g h u, 1 De a t n a d o aoo y, rt o l ’ Hop t u n z o o h F a o G a g h u5 , hn ;2 De a t n f H i oo ya d E y l y, u n z o 0 C ia . p rmet s lg n mb oo 11 08 o t g
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实用临床医学 20 0 8年 第 9卷 第 5期
P at a Ciia dcn , 0 8 V l , o r c cl l c l i n Me i e 2 0 , o 9 N 5 i
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1 ・ 5
骨 髓 间 充 质 干 细 胞 体 外 诱 导 分 化 为 心 肌 样 细胞 的实 验研 究
用浓 度 梯 度 法 分 离 和 纯 化 W i a 大 鼠 MS s贴 壁 法 培 养 , 养 的第 2代 细 胞 分 别 用 终 浓 度 为 0 0 1 1 0 1 . 、 sr t C, 培 、. 、 . 、 0 0
5 . 、0 . mo/ 0 0 1 0 0 ̄ lL的 5氮 杂 胞 苷 (一zct ie 5aa诱 导 分 化 , 光 学 显 微 镜 观 察 细 胞 的形 态 并 用 免 疫 细 胞 化 一 5aayi n ,-z) d 用 学 方 法 鉴 定 细 胞 内 的心 肌 肌 钙 蛋 白 Icri o o i Ic I 。结 果 以终 浓 度 1 . mo/ -z (ad ct p nn ,Tn) a r 0 0“ lL 5aa为诱 导 组 , 细
丹酚酸B在大鼠骨髓间充质干细胞分化过程对心肌早期基因Nkx2.5GATA-4 mRNA表达的影响
A s a t O j t e: 0 t yte iee t t no o em  ̄ w d r e o a m ne e y a c l M C )i u e t b t c : b ci T u f rn a o f n a o e v df m r e sn h m l e s( S s n c di o r e v sd h d ii b i r t l d n
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辽 宁 中 医杂 志 2 0 0 8年第 3 6卷 第 8期
丹酚酸 B在大鼠骨髓间充质干细胞分化过程对心肌早期基因 N x. G T 4m N k25 A A一 R A表达的影响
华声瑜 赵桂 峰 郭茂娟 指 导 : 英 昌 , , 。 范
HU hn -u ,H O G ieg , U o un ,di rF N Yn - a g A S egy Z A u- n 2G O Ma- a av o:A i c n f j s gh
( . in nU  ̄ m yo hns Me i ,in n30 9 ,hn ;. h it o i lf l t 1r f n eh ai fC i e  ̄c r f 0 13 C i 2 TeFr s t i e t e e n ai a sH pa A a d o i
D i e e i to f a ne m a r w e e c ym a t m e l nt f r nta n o r t bo i ro m sn h lse c ls i o c r i m y c t s i uc d by Sa B n v t o a do o y e nd e l i i r
碱性成纤维细胞生长因子与丹酚酸B体外诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞
解剖学杂志
2 0 1 3 年第 3 6 卷第 6 期
碱 性成 纤 维 细胞 生 长 因子 与丹 酚酸 B体 外诱 导
骨 髓 间 充 质 干 细 胞 分 化 为 心 肌 样 细 胞
各组 培 养 4周 后 , 应用免疫 细胞化学检测结蛋 白 ( d e s mi n ) 、 一 横纹肌肌动蛋 白 ( a - s a r e o me r i c a c t i n ) 、 原肌球蛋 白
( t r o p o my o s i n ) 及肌钙蛋 白 T( c Tn T) 的表达情况 ; 透射 电镜观察分化细胞 的超微结构变化 。结果 : 对照组细胞结 蛋 白、 a 一 横 纹肌肌动蛋 白、 原肌球蛋 白及 肌钙 蛋白 T均 为弱 阳性 或 阴性 表达 。与对 照组相 比 , b F GF组 、 丹 酚酸 B组及 两者联 合诱 导 组B MS C s 以上各标记物 的阳性表达均 明显升高 , 差异 具有 统计 学意义 。其 中 , 两者联合 诱导组各 标记物 的阳性率 均显著 高于 b F ( 或丹酚酸 B单独诱 导组。透射 电镜结果显示 , b F G F组 、 丹酚酸 B组及两者联合诱导组分化的细胞多呈杆状 , 胞 核卵圆形 , 位于细胞 中央 , 胞质 中可见平行排列 的肌 丝 、 大量粗 面内质 网和线粒体 , 并 富含 糖原 和核糖体 。结论 . b F G F 、 丹 酚酸 B均可分别及联合诱导 B MS C s 获得心肌分化表 型, 且两者联合 诱导效果 优于单一诱 导效果 。
A b s t r a c t O b j e c t i v e : T o e x p l o r e i n v i t r o d i f f e r e n t i a t i o n o f r a t b o n e ma r r o w me s e n c h y ma l s t e m c e l l s( B MS C s )i n t o
体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞的分化和鉴定
A hdae m nC c r 叨 . A ahl 20 1 83: n y r si Hu a a e s n n m JPto, 0 1,5 ( )
OOSr RW UK E E, RUI ER J HOEDEM AEKER , e 1 T D , PJ ta.
Mo o ln tb d 2 0 r c g ie e e mi a tp e e ti n c o a a io y G 5 e o z s a d t r n r s n n l n n n
me a t t u r mo e o e a e l c cn ma e pr s i g t e ts ai t mo d lf r r n c l a i o x e s n h c l r
[] 1
P T E , H RS A L O F RC P AR I Dan sc pon scad i ot , r ot n g i g i teae t l ao s f ab nca hdae ncn e[. r h rpui i i t n ro i n y rss acr] Bi c mp c i o c i J JC cr 0 3 9127 a e 0 , ()- . n 2 8 :
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第 3 期 S
中 山大 学 学 报 ( 医学 科 学 版 ) 1: 6 — 4 8 ) 4 5 16 . 1
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论依据。
体 内实 验 中两 组 小 鼠在 观 察 期 间 肿 瘤 均 不 断 生 长 . 瘤 肿 大 小 及 生 存 期 差 别 不 明显 。其 原 因 是 体 内抑 瘤 机 制 较 为 复
丹酚酸B干预对移植骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化相关基因表达的影响
植上调了心肌分化 基因 N X . 和 G T - m N K2 5 A A 4 R A的表 达 , 可能改善心功能 。 有
【 关键词 】 丹 酚酸 B 急性心肌梗塞 ; ; 骨髓问充质干细胞 ; 移植 细胞
Ef e to l v a olea i O l a l e i d g ne e pr s i n e e c y a t m e l f c fSa i n i c d B i e r y p r o e x e s o of m s n h m l s e c ls
s ni rt’ o e ue oada i aci fMI Me o s ut ai n uict no C t . h t oe Ml a i sm dlo a tmycri rt nA ) o na s c f l n f o . t d lvt na dp r ai f h C i o i f o MS snvr T e a m d lf i io r oA g w
丹酚酸 B干预 对移 植骨髓 间充质 干细胞 向心肌细胞分 化 相 关 基 因表 达 的影 响
陈嘉 陈苑 邹移海 广州 , 14 5 500 ) ( 广州中医药大学实验 动物 中心 , 广东
【 摘要 】 目的 探讨中药单体丹 酚酸 B预处理对急性心肌梗塞( M ) 鼠移植骨髓间充质干细胞 ( S sI A I大 M C)  ̄心肌细胞分化
p o u e yl aino teCoo ayatr . 4 t rd c db i to f h g rn r rey 0r sweed vd drnd ml ymo e ,h m ,MS n ava oi c i r o iin d a r iie a o yb d l sa Csa ds in l l ca dB pe ndt e c o wi Csgo p . Af r e s tee p eso fNl)25GATA一 r x mie yRT PCR. s h ee p eso fNKX2. t MS ru s h t we k o h x rsino (( ./ e4 4weee a n d b _ Re u sTh x rsino 5 n a d GATA一 mRNA n ra e e r a l o ae t d ru . C n lso sTh Csp eo dt n dwi ava oi cd B 4 ices d rmak byc mp rd wi mo ego p h o cu in eMS rc n io e t s in lca i i h l
体外诱导间充质干细胞向心肌细胞方向分化的研究
Ab ta t 0b e t e To e p o e t ep s ii t o id c s n h ma se c l r m u n f— sr c : j ci v x lr h o sbl y t n u eme e c y l tm el fo h ma e i s
摘 要 : 证 实 来 源 于胎 儿肝 脏 的 间充 质 干 细胞 ( MS s 具 有 向 心 肌 细 胞 方 向 分 化 的 潜 能 。方 法 取 6 9代 目的 F C) ~
细胞 , 不 同浓 度 的诱 导 剂 组 合 诱 导 细 胞 , 别 置 于 不 同 的 条 件 下 进 行 培 养 , 括 不 同温 度 、 同氧 浓 度 及 不 同培 用 分 包 不 养 液 。 结 果 在使 用 心 肌 分 化 培 养 液 及 常 规 培 养 条 件 下 ( 7 、 O O ) 5氮 胞 苷 (0 g lL 、 甲 酸 ( 0 3 ℃ 2 ,一 5 mo胞 向心肌 细胞 方 向分 化 的研 究
常静 雷寒 陈建斌 贾锋 鹏 黄仁 英 , , , ,
(. 庆 医 科 大 学 附 属 第 一 医 院 , 庆 4 0 1 ;. 江 县 妇 幼 保健 院 , 庆 6 8 0 ) 1重 重 0 0 6 2垫 重 4 30
化 的 潜 能 , MS s 生 向心 肌 方 向 的分 化 所 需条 件 与 来 源 于其 他 动 物种 属 的 间 充 质 干 细 胞 的 分 化 条 件 不 同。 F C 发 关键 词 : 间质 干 细 胞 ; 细胞 移 植 ; 扎 胞 苷 ; 胞 分 化 ; 钙 蛋 白 I 干 阿 细 肌
中 图分 类 号 : 5 2 2 R 4 .
文献标识码 : A
文 章 编 号 :0 90 2 (0 7 0—4 70 10 —1 6 20 )600 —3
骨髓间充质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞的实验研究
a d a t n miso lcrn mirs o y , e e p eso fB— n r s sin ee t co c p T x rsin o MHC a d To o i a ee td b a o h n rp nn 1w s d tce yRT— C Reut : b i MS s P R. s l Ra bt s C
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2 27・
骨 髓 间 充质 干 细 胞 体 外 诱 导 分 化 为 心 肌 样 细 胞 的 实 验 研 究
王 卫 彪 姜敏 辉 姜胜 华来自姚 蓓 ( 南通 大 学 附属 医 院心 内科 , 苏 2 6 0 ) 江 2 0 1
摘 要 目的 : 究 兔 骨 髓 间充 质 干 细 胞 ( C) 研 MS s 的体 外 分离 、 养 及 向心 肌 细 胞 诱 导 分 化 的条 件 。方 法 : 取 培 抽 兔 髂 骨 骨 髓 , 密 度 梯 度 离 心 法 和 贴 壁 培 养 法 分 离 、 化 MS s 3 细 胞 (3用 流 式 细 胞 术 检 测 细 胞 表 面 抗 原 用 纯 C, 第 代 P)
WA G Weba, I N n u, I N h nh a YA e D pr e t f ad l y, fl t opt fN n n nvri , N iio J G Mih iJA G Se g H, O B i( eat n ri o A m o C o g Afi e H si l a t gU iesy iad ao o t J ns2 6 0 ) i gu 2 00 a A sr c Obet eT td h sl i ,u f a o n iee t t no rb ib n snh m l tm ci ( C)it b ta t jci :os ytei a o p r ct naddf rni i f abt oemeec y a s el MS s no v u o tn i i i f ao e s
骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的体外诱导实验
C NE EJ HI S OUR NAL OFANATOMY Vo. No 22 0 13 . 0 8 1
解剖学杂志
20 0 8年第 3 卷第 2期 1
骨 髓 间 充 质 干 细 胞 向 心 肌 细 胞 分 化 的体 外 诱 导 实 验
张本 斯 李 庄 洪 虹 王 凡。 李瑞祥 。
应、 免疫 细胞 化学 等 鉴定 。结果 :诱 导 细胞 以梭 形 、 状 为主 , 分 细胞 有分 支 , 核 , 柱 部 单 核卵 圆形 、 中 , 似 心肌 细 胞 居 类
形 态 ; AS反 应 阳性 ; 导培 养 2周 , acmei at P 诱 S ro r ci c n和 C n e i-3表达 较 弱 , o nxn4 以后逐 渐 增 强 。 以 1 mo/ - 杂 0 lL5氮
胞 苷诱 导 2 4h效果 最佳 。结论 :MS s 5氮 杂胞苷 诱 导下 可定 向分 化 为心 肌样 细 胞 , C在 一 可望 成 为 自体 心 肌 细胞 的一
种 良好供 体 来 源 。 关键词 问充质 干细胞 ; 骨髓 ; 心肌细胞 ; 细胞分化 ;5氮杂胞 苷 -
Ra r o d rv d me e c y ls e c ls c n b nd c d i o c r i m y c t si ir tma r w- e i e s n h ma t m e l a e i u e nt a d o o y e n v t o
i ir fe en n u e y5 a a y i i e a d p o i e f u d t n f rs r i g M S s a n w e l ou c t m e l r n — n v t o a t rb i g id c d b - z c td n n r v d o n a i o e v n Csa e c l s r e i s e c l ta s o n p a t t n f rh a tf i r h r p .M eh d :Ra S r s l t d a d c lu e ,a d te t d wih d fe e t5 a a y i i e ln a i o e r a l e t e a y o u to s tM Cs we e io a e n u t r d n r a e t i r n - z c t n f d c n e t a i n td fe e ttme o c n r t sa i r n i .Th i e e ta e e l r d n iid b r h lg o f e d f r n it d c i we e i e tf y mo p o o y,i f s e mm u o y o h m ity a d p ro i- n c t c e s r n e id c a i- c i e c in ( AS .Re u t :Afe en r a e t - z c t i e f r 2 o r n h n n r l u t r d,mo t cd s h f r a t f o P ) sl s t r b ig t e t d wi 5 a a y i n o 4 h u s a d t e o ma l c l e h d y u s M S r d al e a p n l-i e a d p l r f r wih t e c n r l v l u l i n r i i rt a d o o y e ,a d h d Cs g a u l b c me s i d e l n i a -o m t h e t a a ce a d we esm l o c r i my c t s n a y k l o n a p stv e c i n i AS o i e r a t n P i o .Th o ii e sa n n fs r o rc a t n o n x n 4 r o b e v d u t wo we k fe e p st t i i g o a c me i c i a d c n e i - 3 we e n to s r e n i t e s a t r v n l
体外诱导人骨髓间充质干细胞转化为心肌样细胞的基因表达
Junl f adoac l & P l nr Dsae,aur 2 1 , o.9 N . ora o ri sua C v r u moa i ssJn a 00 V 1 , o 1 y e y 2
43
DOI1 3 6 / .sn 1 0 -0 2. 01 0101 :0.9 9 jis . 0 75 6 2 0. . 4
合 酶链 反 应 检测 A P B P d se t ci、 C2 、 A A4和 N x . N 、N 、 - la at ML 一v G T _ kel n k2 5基 冈 表 达 。 结 果 : 第 2代 骨 3份
髓 间 充质 干 细 胞样 本 重 复测 定 , 达 C 2 , D 4 不 表达 C 3 C 4 。 以 5 aa 导 培 养 2 后 , 表 D9 C 4 , D 4, D 5 -z 诱 4h 骨髓 间 充 质干 细 胞形 态 和 排 列方 式 发 生 明显 变 化 , 导 1 后 , 胞体 积 增 大 , 呈 长梭 行 , 行 排列 ; 导 2 诱 周 细 多 平 诱
ANP 。 BNP。 s e ealaci M LC - 理-k lt tn。 2v, ATA _ d Nkx . JANG Hui WANG i an, WANG n G 4 an 25 I , Hus h Ze g—
w i HU Ho g u, O n c a g,Z A n i D p r n ado aclrS rey e ea si e,Z n y S NG Heg h n H NG Na bn ea t tfC riv sua ug r,G nrl p— me o Ho tlfS e) n layR go S e n 0 1 C ia a h n g Mitr e in, hn a g,1 0 hn o a i 1 6,
丹酚酸B体外干预骨髓间充质干细胞分化过程中cTnT的表达
d30 s ;立式 自 o2一 ) 动电热压力蒸汽灭菌器 (D X LZ 一 4 B)上海 申安医疗器械厂 ;W— J2 D型单人双 0 I, S C 一F 面 净 化 工 作 台 ; 量 移 液 器 , 国 Gl n H 6数 微 法 io ; H一 s
. .
丹酚酸 B体外干预 骨髓 间充质 干细胞分化过程中cn TT的表达
孙连胜 徐 秀梅 郭茂娟 2 , , , 赵 旭 苏金玲 ,
(. 1天津市塘 沽区杭 州道 医院内科 , 天津 3 0 5 ;. 0 4 1 2天津中医药大学; 天津 3 0 9 ) 0 13
摘 要 :目的】观察丹酚酸 BS l) 【 (a 体外 干预骨髓间充质干细胞( C) B MS s 后细胞形态及心肌特异性蛋 白肌钙蛋 白 T (T T 的表达。【 cn ) 方法】 培养 、 纯化及鉴定 MS s用 Sl 、一 C , aB 5 氮胞苷组 (一 z)Sl 5 aa 、aB联合 5 aa Sl+ 一z ) - z(a 5 aa分别定向诱 B 导分化 ,观察此过程 中 MS s的形态学变化并采用免疫细胞化学法鉴定诱导后 MS s C C 心肌特异性肌钙蛋白 T(T T cn ) 的表达。【 结果】 诱导后 的 MS s C 体积增大 , 增殖减慢 , 出现肌管样结构 ; 并 免疫细胞化学结果显示诱导后 MS s C 表达心
鼠, 购于中国医学科学院放射医学研究所实验动物 中心 , 动物 许 可证号 :ck 05 00 。 sx 20— 0 1 1 主要试剂与仪器 . 2 LD E — M M培养液 、: 0胰 15 2
蛋 白酶 、 乙二 胺 四乙酸 ( D A 、 E T )双抗 , ic 公 司 ; Gbo 胎
丹酚酸B对骨髓间充质干细胞分化方向的影响
《中国组织工程研究》Chinese Journal of Tissue Engineering Research文章编号:2095-4344(2018)25-04095-064095·综述·www.CRTER .org李子怡,女,1992年生,河北省保定市人,汉族,河北医科大学在读硕士,主要从事糖尿病与骨代谢研究。
通讯作者:李玉坤,博士,教授,河北医科大学第三医院内分泌二科,河北省石家庄市050001中图分类号:R394.2文献标识码:A稿件接受:2017-12-15Li Zi-yi,Master candidate,Department ofEndocrinology,the Third Hospital of Hebei Medical University,Shijiazhuang 050001,Hebei Province,ChinaCorresponding author:Li Yu-kun,M.D.,Professor,Department ofEndocrinology,the Third Hospital of Hebei Medical University,Shijiazhuang 050001,Hebei Province,China丹酚酸B 对骨髓间充质干细胞分化方向的影响李子怡,王娜,薛鹏,李玉坤(河北医科大学第三医院内分泌二科,河北省石家庄市050001)DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.0428ORCID:0000-0002-0706-1047(李子怡)文章快速阅读:文题释义:丹酚酸B :是丹参的重要水溶性成分,由三分子丹参素和一分子咖啡酸缩合而成,具有抗氧化、清除氧自由基等作用,对心血管系统、肝、肾等器官均具有重要的药理作用。
细胞分化:细胞分化发生在生命过程中的各个时期。
指同一来源的细胞逐渐出现形态功能不同的亚群。
其本质为时间和空间上基因组选择性表达。
心肌微环境下丹酚酸B诱导MSCs向心肌样细胞分化的研究
心肌微环境下丹酚酸B诱导MSCs向心肌样细胞分化的研究张云莎;薛亮;范英昌【期刊名称】《天津中医药》【年(卷),期】2012(29)3【摘要】[目的]复制心肌缺血-再灌注损伤模型,体外模拟心肌缺氧复氧微环境,观察丹酚酸B(SalB)诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌样细胞分化的作用。
[方法]通过向MSCs培养体系中添加心肌细胞裂解液的方法,体外模拟心肌微环境。
自成年大鼠骨髓中分离MSCs,设对照组(A组)、心肌细胞裂解液(TJ)组(B组)、SalB组(C 组)、TJ+SalB组(D组)。
培养4周,观察细胞形态,并采用免疫荧光技术检测cTnT 的表达。
[结果]除A组MSCs无明显的肌样细胞形成,各诱导组均有肌样细胞分化,D组与C组相比,cTnT表达率明显增高,差异有统计学意义。
[结论]心肌细胞裂解液可以诱导MSCs向心肌样细胞分化;心肌微环境的建立有利于SalB诱导MSCs 向心肌样细胞分化。
【总页数】3页(P278-280)【关键词】骨髓间充质干细胞;心肌样细胞;丹酚酸B;心肌微环境【作者】张云莎;薛亮;范英昌【作者单位】天津中医药大学病理教研室;天津中医药大学中医学院【正文语种】中文【中图分类】R542.2【相关文献】1.碱性成纤维细胞生长因子与丹酚酸B体外诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞 [J], 吕洋;王海萍;王浩宇;张辉;任君旭;史宝林;张江兰2.丹酚酸B诱导胎盘间充质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究 [J], 孙璐;林岳;刘晓杰;李昆3.丹酚酸B诱导体外培养大鼠骨髓基质细胞向心肌样细胞分化的研究 [J], 范英昌;华声瑜;姚雅娟4.丹酚酸B体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究 [J], 徐秀梅;郭茂娟;赵旭;范英昌5.丹酚酸B体外诱导MSCs向心肌细胞分化中β-catenin表达的实验研究 [J], 季红;高青;胡先同;范英昌因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
丹参及其丹酚酸B在骨髓间充质干细胞定向心肌细胞分化治疗心肌梗死中的研究进展
丹参及其丹酚酸B在骨髓间充质干细胞定向心肌细胞分化治
疗心肌梗死中的研究进展
王世龙;林原;唐泽耀
【期刊名称】《中国中西医结合杂志》
【年(卷),期】2010()12
【摘要】骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一种具有分泌多种细胞因子功能的未分化骨髓基质细胞,用于自体移植不存在人类主要组织相容性复合体(MHC)限制,无免疫原性且不涉及伦理问题,这些优点使之成为组织工程的重点种子细胞。
【总页数】4页(P1334-1337)
【关键词】骨髓间充质干细胞;心肌梗死;分化治疗;心肌细胞;丹酚酸B;人类主要组织相容性复合体;丹参;骨髓基质细胞
【作者】王世龙;林原;唐泽耀
【作者单位】大连医科大学药理教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R329.2
【相关文献】
1.丹酚酸B干预对移植骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化相关基因表达的影响 [J], 陈嘉;陈苑;邹移海
2.丹酚酸B及丹参酮ⅡA诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞 [J], 李旭;王亚玲;
3.丹酚酸B及丹参酮ⅡA诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞 [J], 李旭;王亚玲
4.骨髓间充质干细胞与丹酚酸B预处理内皮祖细胞共移植对急性心肌梗死大鼠心功能及分化基因表达的影响 [J], 李庆雯;南亚昀;谭俊珍;范英昌
5.丹酚酸B对大鼠骨髓间充质干细胞分化过程中Desmin、α-actinmRNA表达的影响 [J], 华声瑜;范英昌;马轶文;王强
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丹酚酸B对骨髓间充质干细胞SCF表达的影响
丹酚酸B对骨髓间充质干细胞SCF表达的影响陈嘉;孙京臣;邹移海;黄冰;张进;张永斌【期刊名称】《解放军医学杂志》【年(卷),期】2008(33)3【摘要】目的研究中药单体丹酚酸B对骨髓间充质干细胞(MSCs)中干细胞因子(stem cell factor,SCF)的影响.方法用贴壁培养法分离、培养和纯化MSCs,取第三代MSCs进行实验.用含不同浓度丹酚酸B的低糖DMEM培养液培养MSCs,ELISA法检测培养24、48、72h的上清中SCF的含量;RT-PCR法检测培养24、48、72h的SCF mRNA的表达.结果膜型和可溶型SCF mRNA均有表达.随着培养时间的增加,0.3μg/ml、3μg/ml、30μg/ml丹酚酸B可明显促进SCF的分泌和SCF mRNA的表达(与空白对照组比较,P<0.05),而0.03μg/ml丹酚酸B组和空白对照组比较无明显差异(P>0.05).结论丹酚酸B可促进MSCs分泌SCF并促进SCF mRNA的表达,提示SCF可能在中药丹参治疗心肌梗死中发挥了重要作用.【总页数】3页(P276-278)【作者】陈嘉;孙京臣;邹移海;黄冰;张进;张永斌【作者单位】510405,广州,广州中医药大学实验动物中心;华南农业大学动物科学学院;510405,广州,广州中医药大学实验动物中心;中山大学中山眼科中心;广州中医药大学基础医学院;510405,广州,广州中医药大学实验动物中心【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.丹酚酸B干预对移植骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化相关基因表达的影响 [J], 陈嘉;陈苑;邹移海2.丹酚酸B干预内皮祖细胞对骨髓间充质干细胞向心肌分化早期基因表达的影响[J], 李庆雯;谭俊珍;南亚昀;范英昌3.丹酚酸B在大鼠骨髓间充质干细胞分化过程对心肌早期基因mRNA表达的影响[J], 华声瑜;赵桂峰;郭茂娟;范英昌4.骨髓间充质干细胞与丹酚酸B预处理内皮祖细胞共移植对急性心肌梗死大鼠心功能及分化基因表达的影响 [J], 李庆雯;南亚昀;谭俊珍;范英昌5.SCF对体外转染pEGFP-C1/Akt的骨髓间充质干细胞中c-kit、Akt及VEGF表达的影响 [J], 霍鑫;唐海燕;孔宏亮;刘英;张宏伟;王欣;胡新华;张强因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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诱 导分 化为心肌样细胞 。但 5一aa作为抗肿瘤药 物具 有一定的 2 方 法 z 毒副作用 , 寻找 安全 、 故 有效 的诱 导剂 应是 目前 的重 要课 题 。我 2 1 MS s . C 的分 离培养 将大 鼠脱颈处死 , 无菌条件下取 双侧股
们前期的研究结果表 明 Sl aB可 以减 小心肌 梗塞 的面积 , 并能 骨 、 骨 , 胫 适量 D—H n  ̄液冲洗骨髓 ,0 ak 10目筛 网过滤 , 密度为 将 有效地促进梗塞灶 内成纤维细 胞 的增 生 , 速心脏 的修复 过程。 10 3/ l P r l预 先 置 于 试 管 的 底 部 , 后 按 照 1 1的 比 加 .7 gm 的 ec l o 然 :
分化为心肌样细胞 的研究 。现将研究结果报道如下 n 后接种 于完全培养 液 ( 1 %胎 牛血清 、0 / / i, i) a 含 0 10mgL 青 霉素 、0 / 10mgL链霉素 的 L—D M 培养液 ) 置 于 3 5 ME , 7C、% 9
那么 , 对有 心肌分化 潜能的 MS s 什么作用 呢?为进一 步研 例沿管壁缓慢滴加骨髓悬液 , 它 C起 ・ 离心( 0 / i,0 mn , 180rmn 2 i) 收获位 究其机制 , 我们进 行了中药单 体丹 酚酸 B Sl 体 外诱 导 MS s 于界面层灰 白色 的单个核细胞 , L—D E (a B) C 用 M M离心洗涤 2次( 0 80
向心 肌 细 胞 分 化 的 能 力 。
关键 词 : 丹酚酸 B 骨髓间充质干细胞; 体外诱导; 免疫细胞化学; 实时荧光定量 R — C ; T PR
中图分类 号 :92 R 7
文 献标 识码 : A
文章编 号 :0800 (0 8 0 -540 10 —85 2 0 )307 -3
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时珍 国医 国药 20 0 8年第 1 9卷第 3期
丹 酚 酸 B体 外 诱 导 骨 髓 间充质 干细 胞 向心 肌 样 细 胞 分化 的实 验研 究
徐 秀梅 , 郭茂娟 , 赵 旭, 范英 昌
30 9 ) 0 13 ( 天津 中医药大 学 , 天津
M C 表达心肌特异性蛋 白 c n , 5一aa Ss TT 与 z 组相 比,a Sl B组 c n T T表达较低 ,a Sl B联合 5一aa c n z 组 T T表达升 高; 实时荧光 定量 R T—P R结果显示各组均表 达心肌分化早期基 因,a C Sl B联合 5一 z 组诱 导后 的 MS s aa C 的心肌早 期分化基 因表 达明 显高于其他两组。结论 Sl aB可在 体外诱导大鼠 M C S s定向分化 为心肌 样细胞 , 与 5一aa联合诱 导可 明显提 高 M C 其 z Ss
—
0 01 0 。
2 2 MS s的传 代 及 纯 化 . C
待 原 代 MS s 满 瓶 底 时 , 1 1 C长 用 :
12 试剂与仪器 L—D M培养液 、:20胰蛋 白酶 、 D A、 配 比的 0 2 %胰蛋 白酶 和 0 0 % 的 E T . ME 1 5 ET .5 .2 D A对细胞进行消化 2~ 3 双抗 , ic Gbo公司 ; 胎牛血清 (e l oiesrt,F S , yl e公 m n 以完全培养液中止消化并 反复吹打贴壁细胞 , ft v eun B ) H c n ab n o i, 制成单细胞悬 司; D—H n s 冲液 ;pro 淋 巴细胞分 离液 , hr ai 司 ; 液 , 1 ak 缓 ecl l P am c a公 按 :3进行 传代培养 , 直至贴壁细 胞彼此融合铺 满瓶底 时 , C4 D 4兔多克隆抗体 [ abt ni I ( C M) 、 D 4兔多克 重复上述操作 , 复传至第 9代 。 R bi A t—CM4 H A ] C 3 反 隆抗体( abtA t —C 3 ) 即用 型 S B R bi ni D 4 、 A C免疫 组 化染 色 试剂 23 MS s . C 的鉴定 选用 生长状 况 良好 的第 9代 M C , S s 用免疫 盒 ,A D B显 色试剂 盒 、 B P S缓 冲液 , 武汉博 士德 生物工 程有 限公 细胞化学方法检测细胞表面抗 原 C 4 D 4和 C 3 。将第 9代 的大 D4 司; 小鼠抗 大 鼠单 克 隆抗 体 T oo i T,C ri sf m A r n p n a a I o b一3 鼠 MS s d c or C 培养于 6孔板 ,L 内预置无菌盖玻片 , 后 , 孑板 周 细胞 8 % 0 ( ln T一 ) 美 国 L bvs n公 司; CoeC 3 , a io i 即用 型 s P免疫组化染色 试 长满瓶底 , 9 %乙醇( 用 5 加少量冰醋酸 ) 固定 1 i, B 5mn P S彻底清
定心肌特 异性肌 钙蛋白 T( T T 的表达 ,实时荧光定量 R cn ) T—P R法检 测心肌 早期基 因 N X . 、 A A一 、 emn和 a C K 25 G T 4 Ds i
—
at R A的表达。结果 诱 导后 的 MS s c nm N i C 体积增 大, 殖减慢 , 出现肌 管样结构 ; 增 并 免疫细胞化 学结果 显示诱导 后的
1 1 动物 (0 2 ) . 20± 0 g体重的 Wia 雄性大 鼠 , 于 中国医学 C , 和湿 度的培养箱 中继续培养 , sr t 购 O饱 2 h后首次换液 , 4 以后 每 3d 科学 院放 射医学 研究所 实验 动物 中心 , 物许 可证 号 :ck0 5 更换 1次培养液 , 动 sx20 2周后细胞长满瓶底 。
摘要 : 目的 观察丹酚酸 B Sl) (a 干预体外诱导骨髓间充质干细胞( S s分化为心肌样细胞的作用及其机制。方法 分 B M C)
离培养及鉴定 大鼠 MS s对其进行分组诱 导:a C, Sl ( B组 终浓度 为 2 0 / )5一氮胞苷组 ( 5 g L 、 终浓度为 1 m lL 、aB联 0I o ) Sl x / 合 5一aa ( z 组 终浓度分别为 20 gL与 1 m lL , 导 2 5 / 0I o )诱 x / 4h后继 续培养 4周 , 观察其形态学变化 , 免疫细胞化 学法鉴
A 130实时定量 P R仪 。 B7 0 C
骨髓 间充质 干细胞 ( S s 系 自体来源 , M C) 取材容易 , 扩增 能力
强, 是一种体 内外 均有 极 强 的分 化潜 能 的 干细 胞… 。19 95年 , 13 药品 5一 z ,im 公 司 ; . aaSg a 坩酚酸 B 天津天士 力制 药股份 , 有 限 公 。 Wai ns kt i 等 发现体外分离培养 的大 鼠 MS s a C 体外 可波 5一aa z