动物细胞培养和核移植技术上课
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生物选修3动物细胞培养和核移植技术PPT课件
动物细胞培养技术是生物技术领域中的一项重要技术，广泛应用 于细胞生物学、生物医学、药物研发和生物工程等领域。
动物细胞培养的历史与发展
动物细胞培养技术最早可以追溯到20世纪初，但直 到20世纪50年代才开始有系统的研究。
1951年，卡森等人成功地进行了小鼠胚胎细胞的原 代培养，标志着动物细胞培养技术的诞生。
生物选修3动物细胞培养和核 移植技术ppt课件
目
CONTENCT
录
• 动物细胞培养技术概述 • 动物细胞培养技术的基本原理 • 核移植技术的基本原理 • 核移植技术的操作流程 • 核移植技术的优缺点与伦理问题 • 核移植技术的未来展望与研究方向
01
动物细胞培养技术概述
动物细胞培养的定义
动物细胞培养是指将动物组织或细胞从体内取出，在体外进行培 养，使其在人工条件下生长、繁殖和代谢的过程。
04
核移植技术的操作流程
供体细胞的选择与准备
供体细胞来源
选择健康、无病原体污染的动 物胚胎或生殖细胞作为供体细 胞来源。
细胞培养
将供体细胞进行体外培养，使 其分裂和增殖，以获得足够的 细胞数量。
遗传修饰
根据需要，对供体细胞进行遗 传修饰，如基因敲除、基因敲 入等。
受体细胞的准备
01
02
03
受体细胞来源
核移植技术的应用前景
核移植技术可以应用于濒危动 物的繁殖和保护，通过该技术 可以快速繁殖出大量濒危动物 个体，为物种保护提供有力支 持。
核移植技术还可以应用于动物 模型的建立，通过该技术可以 快速获得遗传背景相同的动物 模型，为疾病研究、药物研发 等方面提供有力支持。
随着技术的不断进步和应用范 围的扩大，核移植技术将会在 未来的生物医学领域发挥更加 重要的作用。
生物：2.2.1《动物细胞培养和核移植技术》课件(新人教版选修3)
出来的物质
3、克隆过程运用的技术手段？ 动物体细胞核移植、动物细胞培养和胚胎移植 4、多利的大部分性状与谁一样？
白面绵羊
高度分化的体细胞核具有全能性 5、结论？
克隆动物的研究意义
1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 2.改良动物品种 3.作为异种移植的供体 4.保护濒危动物
体细胞核移植技术存在的问题
原理：细胞增殖
动物细胞培养的过程（见课本）
动物胚胎或幼龄动物的组 织、器官（取材）
剪碎
（分解细胞间的蛋白） 动物组织细胞间隙中含 单个细胞 有一定量蛋白质 加培养液 细胞悬液 原代培养
遗传物质 未改变
胰蛋白酶或胶原蛋白酶
10代细胞 细胞株
50代细胞
遗传物质 已改变
传代培养
细胞系 无限传代
细胞株和细胞系的区别：
1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过 大，异常肥胖，发育困难，免疫失调等。
2.成功率非常低 3、克隆动物食品的安全性问题。
教学反馈
1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细 胞（ ） A．细胞系 B．细胞株 C．原代细胞 D．传代细 胞 2、动物细胞工程技术的基础是 （ ）
A
A.动物细胞融合 C.胚胎移植
4、动物细胞培养能否像绿色植物组织 培养那样最终培养成新个体？
不能，动物细胞培养只能使细胞 数目增多，而不能发育成个体
5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？
能
6、动物细胞培养过程中特别要注意什么？
注意时间的控制
7、能够用胃蛋白酶代替胰 蛋白酶吗？为什么？
不能，因为两者的最适PH不同， 而正常组织细胞的生存环境与胰蛋 白酶的最适PH较接近
A
B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进 行；
3、克隆过程运用的技术手段？ 动物体细胞核移植、动物细胞培养和胚胎移植 4、多利的大部分性状与谁一样？
白面绵羊
高度分化的体细胞核具有全能性 5、结论？
克隆动物的研究意义
1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 2.改良动物品种 3.作为异种移植的供体 4.保护濒危动物
体细胞核移植技术存在的问题
原理：细胞增殖
动物细胞培养的过程（见课本）
动物胚胎或幼龄动物的组 织、器官（取材）
剪碎
（分解细胞间的蛋白） 动物组织细胞间隙中含 单个细胞 有一定量蛋白质 加培养液 细胞悬液 原代培养
遗传物质 未改变
胰蛋白酶或胶原蛋白酶
10代细胞 细胞株
50代细胞
遗传物质 已改变
传代培养
细胞系 无限传代
细胞株和细胞系的区别：
1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过 大，异常肥胖，发育困难，免疫失调等。
2.成功率非常低 3、克隆动物食品的安全性问题。
教学反馈
1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细 胞（ ） A．细胞系 B．细胞株 C．原代细胞 D．传代细 胞 2、动物细胞工程技术的基础是 （ ）
A
A.动物细胞融合 C.胚胎移植
4、动物细胞培养能否像绿色植物组织 培养那样最终培养成新个体？
不能，动物细胞培养只能使细胞 数目增多，而不能发育成个体
5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？
能
6、动物细胞培养过程中特别要注意什么？
注意时间的控制
7、能够用胃蛋白酶代替胰 蛋白酶吗？为什么？
不能，因为两者的最适PH不同， 而正常组织细胞的生存环境与胰蛋 白酶的最适PH较接近
A
B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进 行；
课件11：2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
在理论上证明了，同植物细胞一样，分化了的动物细 胞核也具有全能性．
思考题
5、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出 操作过程的不同点？
多莉克隆过程的受体细胞是去核卵细胞，而高产奶 牛的克隆过程的受体细胞是去核卵母细胞；多莉克 隆过程是将供体细胞核注入受体细胞，而高产奶牛 的克隆过程是将供体细胞注入受体细胞。
用核移植的方法得到的动物称为克隆动物
核 移
胚胎细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全
能性容易
植
体细胞核移植：细胞分化程度高，恢复全能 （难度高） 性不容易
受体细胞：MⅡ期的卵母细胞
卵母细胞采集、培养
MⅡ期卵母细胞 去核
去核卵母细胞
（二）体细胞核移植过程 （体细胞克隆动物）
供体细胞注入 去核卵母细胞
体细胞培养
植物组织培养, 植物体细胞杂交
2、动物细胞工程常用的技术手段呢？ • 动物细胞培养、动物细胞核移植、 • 动物细胞融合、生产单克隆抗体等
动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
一、动物细胞培养 （一）概念
从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞， 然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
（三）培养条件
1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、营养（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、
微量元素、血清、血浆等。）
合成培养基
保证细胞顺利
3、温度和pH
的生长增殖
36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4
4、气体环境：
O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
思考
动物细胞培养液的主要成分是什么？ 较植物组培培养基有何独特之处？ 主要成分： 葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量 元素、血清、血浆等。
思考题
5、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出 操作过程的不同点？
多莉克隆过程的受体细胞是去核卵细胞，而高产奶 牛的克隆过程的受体细胞是去核卵母细胞；多莉克 隆过程是将供体细胞核注入受体细胞，而高产奶牛 的克隆过程是将供体细胞注入受体细胞。
用核移植的方法得到的动物称为克隆动物
核 移
胚胎细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全
能性容易
植
体细胞核移植：细胞分化程度高，恢复全能 （难度高） 性不容易
受体细胞：MⅡ期的卵母细胞
卵母细胞采集、培养
MⅡ期卵母细胞 去核
去核卵母细胞
（二）体细胞核移植过程 （体细胞克隆动物）
供体细胞注入 去核卵母细胞
体细胞培养
植物组织培养, 植物体细胞杂交
2、动物细胞工程常用的技术手段呢？ • 动物细胞培养、动物细胞核移植、 • 动物细胞融合、生产单克隆抗体等
动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
一、动物细胞培养 （一）概念
从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞， 然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
（三）培养条件
1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、营养（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、
微量元素、血清、血浆等。）
合成培养基
保证细胞顺利
3、温度和pH
的生长增殖
36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4
4、气体环境：
O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
思考
动物细胞培养液的主要成分是什么？ 较植物组培培养基有何独特之处？ 主要成分： 葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量 元素、血清、血浆等。
动物细胞培养和核移植技术上课(共43张PPT)
问题探讨：
多细胞动物和人体的细胞都生活在 内环境中，根据你所学的知识，认 为体外培养动物细胞应该模拟内环 境的哪些条件呢？
一动物细胞培养
3、条件：
1、无菌、无毒的环境
（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
2、营养
（葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。）
3、温度和PH
36.5 +0.5度 ；PH为7.2-7.4。
因为幼龄组织或器官上的细胞增殖能力强 1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？
（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
，有丝分裂旺盛，容易培养。 扦插和嫁接实质上也是克隆
这样的过程叫做传代培养 激活受体细胞，完成分裂、发育 CO2作用：维持培养液的PH值
老龄动物的细胞则相反。 二、动物体细胞核移植技术
原代培养时细胞生长可能会出现了哪些现象？
生出与供体奶牛遗传基础相同的犊牛
通过什么手段激活受体细胞，构建重组胚胎？
O2作用：进行
呼吸，提供能量
学习活动二：寻根问底，加深巩固
4、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？用于植
皮的细胞培养应该不多于多少代？
？
保存10代以内的细胞；因为10－50部分细 胞的细胞核型可能发生变化，有少部分还 发生突变向癌细胞方向发展；10代
数目增多，不能发育成新的动物个 疗该病人？
烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治 疗该病人？
体 那么动物细胞工程常用的技术手段 呢？
利用动物体细胞核移植技术 胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛
这样的过程叫做传代培养
一、动物细胞培养
2-2-1 动物细胞培养和核移植技术(第一课时)
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展示内容
展示组/个人
课内探究：1
课内探究：2 课内探究：3 课内探究：4（1）
1组（口头）
2组（口头） 5组（口头） 6组（口头）
课内探究：4（2）
7组（板书）
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3.关于动物细胞培养的叙述，错误的是（ D ） A.用于培养的细胞大量都取自胚胎或幼龄动物 的器官或组织 B.将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其 分散成单个细胞 C.在培养瓶中要定期用蛋白酶使细胞从瓶壁上 脱离，制成悬浮液 D.动物细胞培养只能传50代左右，所培育的细 胞会衰老死亡
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2.2.1
动物细胞培养和核移植技术
第二课时
【学习目标】
和应用前景；
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1.说出动物体细胞核移植技术克隆动物的过程
2.通过阅读教材找出关键词，归纳动物体细胞 核移植技术的流程；
动物细胞培养和核移植技术课件
过程
脱分化、再分化
原代培养、传代培养
项目
植物组织培养
动物细胞培养
结果 获得新个体或细胞产物
大量产生细胞或细胞 产物
用途
①快速繁殖名贵花卉和果 树；②培养无病毒植株、 转基因植物；③大规模生 产细胞产物，如药物、食 品添加剂、香料、色素等
①生产蛋白质制品， 如病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体等；②检 测有毒物质；
(3)温度和
温度：哺乳动物多以 pHpH： 7.2～7.4
36.5±0.5℃
为宜
(4)气体环境COO2 ：2：细维胞持代培谢养所液必的需p的H
4．应用[连线]
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1．动物核移植的概念和类型 (1)概念： ①供体：动物一个细胞的细胞核； ②受体：去掉细胞核的 卵母细胞 ； ③结果：形成重组胚胎，发育成 动物个体 。 (2)类型：哺乳动物核移植可分为胚胎细胞核移植和体细 胞核移植。
2.如图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答： (1)容器 A 中放置的是动物器官或组织，它一般 取自________________。 (2)容器 A 中的动物器官或组织首先要进行的处 理是________，然后用__________酶处理，这 是为了使细胞分散开来，这样做的目的是 _________________________________________________。
胞质内的遗传物质来自受体卵母细胞，其次生物的性状还
受环境的影响，因此，克隆动物并不是对提供体细胞的动
物进行完全复制。
4.右图为哺乳动物(羊)的生殖过程，下列叙述
不．正确的是
(D )
A．个体 2 为克隆动物，c 为高度分化的
体细胞
B．个体 2 的遗传性状与提供 c 细胞的羊
[人教版]《动物细胞培养和核移植技术》公开课课件1
![[人教版]《动物细胞培养和核移植技术》公开课课件1](https://img.taocdn.com/s3/m/5f7715066f1aff00bfd51e47.png)
人 ［教 名版 师《课动堂物教细学胞］培［养人和教核版移］《植动技物术 细胞》培PPT养课和件核2 移植技 术》公 开课课 件1（完 整版PP T)
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体细胞核移植技术的应用前景
C母绵羊子宫 妊娠 分娩 多莉羊
［名师课堂教学］［人教版］《动物 细胞培 养和核 移植技 术》公 开课课 件1（完 整版PP T)
克隆羊成功的分子 细胞生理学机理
重组移核细胞丢失了源于乳腺细胞的调 节蛋白，经过三次分裂后，原乳腺细胞的调 节蛋白便全部被卵细胞质中的蛋白因子替换 了，因此核DNA被重新编排，细胞开始表达
（二）动物细胞全能性的表现程度 1、高等动物细胞 受精卵 > 胚胎干细胞 > 多能干细胞 > 单能干细胞 > 体细胞
如多能造血干细胞：可分化为红细胞、白细胞、血小板等
2、低等动物细胞：全能性一般容易体现。如水螅的上 皮细胞，不经过分裂就可以转变为上皮、肌肉细胞。
（三）植物组织培养和动物细胞培养的比较
④原代培养：从机体取出后立即进行的细胞培养 ⑤传代培养：从1个培养瓶中转移或移植到另一 个培养瓶的培养
原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原 代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞 称为原代细胞培养。
传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制 成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶 中继续培养，称为传代培养。
［名师课堂教学］［人教版］《动物 细胞培 养和核 移植技 术》公 开课课 件1（完 整版PP T)
多
A母绵羊
莉 卵细胞
羊
的
培
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体细胞核移植技术的应用前景
C母绵羊子宫 妊娠 分娩 多莉羊
［名师课堂教学］［人教版］《动物 细胞培 养和核 移植技 术》公 开课课 件1（完 整版PP T)
克隆羊成功的分子 细胞生理学机理
重组移核细胞丢失了源于乳腺细胞的调 节蛋白，经过三次分裂后，原乳腺细胞的调 节蛋白便全部被卵细胞质中的蛋白因子替换 了，因此核DNA被重新编排，细胞开始表达
（二）动物细胞全能性的表现程度 1、高等动物细胞 受精卵 > 胚胎干细胞 > 多能干细胞 > 单能干细胞 > 体细胞
如多能造血干细胞：可分化为红细胞、白细胞、血小板等
2、低等动物细胞：全能性一般容易体现。如水螅的上 皮细胞，不经过分裂就可以转变为上皮、肌肉细胞。
（三）植物组织培养和动物细胞培养的比较
④原代培养：从机体取出后立即进行的细胞培养 ⑤传代培养：从1个培养瓶中转移或移植到另一 个培养瓶的培养
原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原 代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞 称为原代细胞培养。
传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制 成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶 中继续培养，称为传代培养。
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多
A母绵羊
莉 卵细胞
羊
的
培
动物细胞培养和核移植技术(上课用)
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一、动物细胞培养过程 4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？
胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时 间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作 用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。
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一、动物细胞培养过程
5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或 组织做动物细胞培养材料？
2.2 动物细胞工程
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学习目标：
1、简述动物细胞培养的过程、条件及 应用 2、对比说出动物细胞培养与植物组织 培养原理、条件、结果、培养目的
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复习：植物细胞工程常用的技术手段有哪些？
植物组织培养技术、 植物体细胞杂交技术
动物细胞工程常用的技术手段：
动物细胞培养技术、 动物细胞核移植技术、 动物细胞融合技术、 生产单克隆抗体技术
原理是细胞增殖 （有丝分裂） 。
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动物细胞生长特点：
细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，
称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、
易于贴附。 细胞的接触抑制：
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时， 细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细 胞的接触抑制。
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不可以，因为高度分化的动物细胞的全能性受 到抑制。
不需要诱导其脱分化。
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原代培养
• 定义：把第1代细胞的培养与10代以内的细胞 培养统称为原代培养。
•过程：从动物机体中取出组织 剪碎 加胰蛋白酶 细胞游离 加培养液 将 细胞接种到培养瓶内 培养（1—2天换一 次培养液） 细胞贴壁生长 长成单层细 胞
加培养液
细胞悬浮液
限增殖的不死的癌症细胞，
一、动物细胞培养过程 4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？
胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时 间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作 用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。
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一、动物细胞培养过程
5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或 组织做动物细胞培养材料？
2.2 动物细胞工程
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学习目标：
1、简述动物细胞培养的过程、条件及 应用 2、对比说出动物细胞培养与植物组织 培养原理、条件、结果、培养目的
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复习：植物细胞工程常用的技术手段有哪些？
植物组织培养技术、 植物体细胞杂交技术
动物细胞工程常用的技术手段：
动物细胞培养技术、 动物细胞核移植技术、 动物细胞融合技术、 生产单克隆抗体技术
原理是细胞增殖 （有丝分裂） 。
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动物细胞生长特点：
细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，
称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、
易于贴附。 细胞的接触抑制：
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时， 细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细 胞的接触抑制。
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不可以，因为高度分化的动物细胞的全能性受 到抑制。
不需要诱导其脱分化。
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原代培养
• 定义：把第1代细胞的培养与10代以内的细胞 培养统称为原代培养。
•过程：从动物机体中取出组织 剪碎 加胰蛋白酶 细胞游离 加培养液 将 细胞接种到培养瓶内 培养（1—2天换一 次培养液） 细胞贴壁生长 长成单层细 胞
加培养液
细胞悬浮液
限增殖的不死的癌症细胞，
《动物细胞培养和核移植技术》课件PPT课件
当前应用
动物细胞培养技术已成为 生物医学、药物研发、基 因治疗等领域的重要手段 。
动物细胞培养的应用领域
生物医学研究
用于研究细胞生长、发育、分化、凋 亡等生物学过程，以及疾病发病机制 和药物筛选等。
药物研发
用于筛选和鉴定药物作用靶点，以及 新药的研发和安全性评价。
基因治疗
用于制备基因治疗载体和基因修饰细 胞，治疗遗传性疾病和恶性肿瘤等疾 病。
06
CATALOGUE
动物细胞培养和核移植技术的挑战与展望
技术瓶颈和伦理问题
技术瓶颈
动物细胞培养和核移植技术在实践中面临许多技术瓶颈，如细胞核重编程、细 胞生长和分化控制等。
伦理问题
该技术涉及到生命起源和尊严等伦理问题，引发了广泛的社会争议和伦理审查 。
技术改进和未来发展方向
技术改进
科研人员正在努力改进动物细胞培养和核移植技术，以提高技术的稳定性和成功率。
人类疾病模型的建立过程包括疾病病理生理机制研究、基因敲除或转基 因技术应用和表型分析等步骤。其中，疾病病理生理机制研究是整个过
程的基础，需要掌握病理学、生理学和分子生物学等知识。
人类疾病模型的成功建立为研究各种人类疾病的发病机制和治疗方法提 供了重要的实验材料和手段，有助于推动医学科学的发展和人类健康水 平的提高。
机械法
通过反复吹打或组织块切 碎来分离细胞。
传代
将培养的细胞按一定比例 稀释并重新接种在新的培 养器皿中，以维持细胞的 生长。
细胞鉴定和细胞系建立
形态学鉴定
01
通过观察细胞的形态、染色和排列等特征来鉴定细胞的类型。
免疫学鉴定
02
利用特异性抗体对细胞表面抗原进行检测，以确定细胞的来源
动物细胞培养和核移植技术(讲课)页PPT文档
胰蛋白酶或胶原蛋白酶
有一定量蛋白质
单个细胞
动物细胞培养适 宜的PH为7.2— 7.4，此环境下 胃蛋白酶（2.0） 没有活性，而胰 蛋白酶(7.2-8.4) 的活性较高。
加培养液
细胞悬液
原代培养
10代细胞
50代细胞 传代培养
无限传代
探究
1、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动 物的组织或器官，请解释原因？
1.动物细胞核移植的概念、种类：
概念：
将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核 的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎， 这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）
分 胚胎细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全能性容易 类 体细胞核移植： 细胞分化程度高，恢复全能性不容易
2.体细胞核移植的过程：
剪碎 胰蛋白酶处理
细胞悬液
细胞贴壁、接触抑制
10代细胞
50代细胞
细胞株
培养液培养
细胞系
无限传代
3、条件：
1、无菌、无毒
2、添营加养一（定培量养的基抗生成素分） （ 血糖清定培、、期养氨血更 液基 浆换 和酸等培 培、。养 养促）液器生具长无因菌子处培、理无养机基盐的、不微同量是元素、 3、适宜的温度和PH值 动物细胞培养和
① 加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育 ② 保护濒危物种，增加存活数量 ③ 克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 ④ 可以作为异种移植的供体 ⑤ 可以用于组织器官的移植
4.体细胞核移植技术存在的问题：
• ① 成功率低 • ② 克隆动物存在健康问题 • ③ 克隆动物食品的安全性问题存有争议
思考题
细胞贴壁。 5.什么叫接触抑制？
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就 会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 6、如何理解原代培养和传代培养？
动物细胞培养和核移植技术 课件
[答案] (1)细胞核 (2)核移植技术 转基因技术(或基因工程、DNA 重组技 术、基因拼接技术) (3)含有促进细胞核全能性表达的物质 (4)这些细胞分化程度极低，具有全能性，可以定向地诱 导分化为各类细胞 (5)没有免疫排斥反应 体外基因治疗
(1)细胞核移植技术中，注入去核卵母细胞中的也 可以是整个细胞。
[思路点拨]
[解析] (1)动物细胞培养一般取材于动物胚胎或幼龄 动物的器官或组织，因为这部分细胞的分裂能力强。(2)在 进行培养时应尽量使细胞分散，便于与培养液充分接触，进 行物质交换；使其分散需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。 (3)动物细胞培养过程中应尽量使培养基成分与体内的环境 基本相同，所以需要添加糖、氨基酸、无机盐、动物血清等。 培养的过程分为原代培养和传代培养两个大阶段，分瓶之前 的培养称为原代培养。(4)当细胞数目较多时，需要用胰蛋 白酶处理，使细胞分散，从玻璃瓶壁上脱离下来，配制成细 胞悬液继续培养。
(2)该技术形成重组细胞发育成一个新个体，体现 了细胞核的全能性而非动物细胞的全能性。
(3)克隆属于无性繁殖，产生新个体的性别、绝大 多数性状与供核亲本一致。
[思路点拨]
[解析] (1)①是从供体(患者)体细胞分离出的细胞核。(2)③ 表示核移植技术，④表示转基因技术。(3)核移植的受体细胞一 般是卵母细胞，原因是它体积大、易操作，含有供胚胎发育的 营养物质，它还含有促进细胞核全能性表达的物质。(4)早期胚 胎中的细胞分化程度低，全能性高，可诱导分化成各种组织器 官。(5)图示培育出的细胞(胰岛 B 细胞)核遗传物质来自患者本 人，所以移植后不发生免疫排斥反应；图中所示基因治疗是体 外转基因，故所属类型为体外基因治疗。
动物细胞培养和核移植技术
动物细胞培养
生物《动物细胞培养和核移植技术》PPT课件(新人教版-选修3)
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞 核,移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞 中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个 新的胚胎最终发育为动物个体.
胚胎移植技术
胚胎移植的基本程序如下（以牛胚胎移植为例）
核移植技术
1.克隆羊培育过程
黑面绵羊去 核卵细胞
白面绵羊乳 腺细胞核
3.动物细胞培养 的条件 1.无菌无毒的环境 2.营养 3.温度和pH 4.气体环境
比较：植物的组织培养的条件
4.动物细胞培养技术的应用
• 蛋白质生物制品的生产 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体
• 健康细胞培养
培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植 • 细胞的生理、药理、病理研究
植物组织培养和动物细胞培养的比较
动物细胞培养 动物 细胞 工程 常用 技术 核移植 动物细胞融合 单克隆抗体技术 胚胎移植技术
一、动物细胞培养
1.发展历史: 20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细 胞质向外突出形成的，还是由神经细胞周围的其他细 胞融合而成的。生物学家们就这个问题展开了激烈的 争论。1907年，美国生物学家哈里森(Harrison)从蝌 蚪的脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的 淋巴液中培养。蝌蚪的神经组织存活了好几周，并且 从神经细胞中长出了神经纤维。哈里森的实验不仅解 决了神经纤维的起源问题，而且开创了动物组织培养 的先河。此后，在许多科学家的不懈努力下，动物组 织培养不断改进并逐渐发展成为动物细胞培养。
胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞间 的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单个 细胞。
有关概念
原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原 代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细 胞称为原代细胞培养。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制 成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养 瓶中继续培养，称为传代培养。
动物细胞培养和核移植技术课件
(3)如何区分原代培养与传代培养？ 答案 ①原代培养：通常将动物组织消化后的初次培养称 为原代培养。 ②传代培养：贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处 理，然后分瓶继续培养，让细胞增殖，即为传代培养。
2．条件 (1)无菌、无毒的环境：培养液应进行_无__菌___处理。 (2)营养：合成培养基的成分为糖、__氨__基__酸___、促生长 因子、无机盐、微量元素、_血__清___、血浆等。 (3)温度和 pH：适宜的温度为__3_6_._5_±_0_.5__℃_____；pH 为 _7_._2_～__7_._4___。 (4)气体环境：_空__气___ 95%和 CO25%的混合气体。
【归纳提炼】 1．不同层次的克隆
(1)分子水平：如DNA复制。 (2)细胞水平：动物细胞培养。 (3)个体水平：“多利”羊的诞生。 2．动物细胞核移植的条件及结果 (1)核移植一般选择去核的卵母细胞，因为卵母细胞体 积大，易操作，含有促使细胞核全能性表达的物质和营 养条件。一般不选择生殖细胞作为供核细胞，因为生殖 细胞与正常体细胞相比，遗传物质减半。
【归纳提炼】 动物细胞培养与动物组织培养的比较
【活学活用】
1．判断下面关于动物细胞培养的叙述的正误。
(1)动物细胞培养的原理是动物细胞的全能性
()
(2)需要对细胞进行一次脱分化处理和两次蛋白酶处理 ( )
(3)原代培养的细胞是指从贴壁生长到发生接触抑制的细胞
()
(4)恒温条件下，细胞周期持续时间长短不随细胞培养进程而
5．应用 (1)加速家畜_遗__传___改良进程，促进优良畜群繁育。 (2)增加濒危动物数量，保护_濒__危___物种。 (3)生产医用蛋白。 (4)作为_异__种__移植的供体。 (5)用于组织器官的移植。
动物细胞培养和核移植技术上课
4、培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、 药理等方面的研究。
第九页，共二十一页。
植物细胞和动物细胞培养的比较
比较工程
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
培养基特有成分 蔗糖、植物激素
液体培养基
葡萄糖、动物血清
促生长因子
培养结果
一般为植物体
细胞数目增多
培养目的
快速繁殖、培育脱 毒作物等
10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型， 发生突变。
3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供 体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 不是
克隆动物绝大局部DNA来自供体细胞核，但核外还有少局部 DNA〔如线粒体DNA〕来自受体卵母细胞。
第十七页，共二十一页。
动物核移植
是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去 掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新 的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。〔克隆 动物〕
1. 什么是克隆？
克隆就是无性繁殖，具体地说，是指 一个共同的 祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性 相同的DNA分子、细胞或个体。
a.分子水平上： 一般指DNA克隆。
b.细胞水平上： 指一个单一的细胞分裂所形成的细胞群体。
c.个体水平上： 指基因型完全相同的两个或一个群体。
第十二页，共二十一页。
4.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？
胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜
蛋白，因此必须控制好胰蛋白酶的处理时间。
5.人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？
保存10代以内的细胞。
因为10－50代局部细胞的细胞核型可能发生变化， 有少局部还发生突变向癌细胞方向开展。
第九页，共二十一页。
植物细胞和动物细胞培养的比较
比较工程
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
培养基特有成分 蔗糖、植物激素
液体培养基
葡萄糖、动物血清
促生长因子
培养结果
一般为植物体
细胞数目增多
培养目的
快速繁殖、培育脱 毒作物等
10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型， 发生突变。
3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供 体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 不是
克隆动物绝大局部DNA来自供体细胞核，但核外还有少局部 DNA〔如线粒体DNA〕来自受体卵母细胞。
第十七页，共二十一页。
动物核移植
是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去 掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新 的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。〔克隆 动物〕
1. 什么是克隆？
克隆就是无性繁殖，具体地说，是指 一个共同的 祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性 相同的DNA分子、细胞或个体。
a.分子水平上： 一般指DNA克隆。
b.细胞水平上： 指一个单一的细胞分裂所形成的细胞群体。
c.个体水平上： 指基因型完全相同的两个或一个群体。
第十二页，共二十一页。
4.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？
胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜
蛋白，因此必须控制好胰蛋白酶的处理时间。
5.人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？
保存10代以内的细胞。
因为10－50代局部细胞的细胞核型可能发生变化， 有少局部还发生突变向癌细胞方向开展。
动物细胞培养和核移植技术 课件
动物体细胞核移植技术和克隆动物
1．动物核移植的概念：就是将动物的一个细胞的 细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其 重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为 动物个体。
2．动物体细胞核移植的原理：动物细胞核具有全 能性。
3．动物体细胞核移植的过程(如下图所示)：
4．动物体细胞核移植技术的应用及面临问题
细胞悬浮液——10代细胞——50代细胞(少数细胞会
克服细胞寿命
原代培养
传代培养
获得不死性， 朝着等同于癌
细胞的方向发展)
3．条件
(1)无菌、无毒的环境；对培养液和所有培养用具进行无 菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过 程中的污染；定期更换培养液，以便清除代谢产物，防止细 胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。
4．应用 (1)生产生物制品：如○29 ____疫苗、干扰素、○30 ____等。 (2)应用于基因工程：当○31 ____是基因工程技术中的受 体细胞时，则离不开动物细胞培养。 (3)检测○32 ____，判断某种物质的○33 ____。 (4)用于生理、病理、药理等方面的研究，如筛选抗癌 药物等。
答案：(1)相互接触 接触抑制 单层(或一层) 胰蛋白 酶 (2)衰老甚至死亡 不死性 降低 减少 (3)由于活细胞 的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活 细胞不能着色(或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子 染料能够进入死细胞内而着色) (4)中 (5)冷冻(或超低温、 液氮) 酶 新陈代谢 (6)抗原
(5)人的核移植胚胎干细胞经诱导分化，形成相应组织、 器官后，可以用于○42 ____。
(6)研究胚胎发育及衰老过程，追踪研究疾病的发展过程 和治疗疾病。
动物细胞培养和核移植技术 课件
3．特点：核移植过程中细胞核只来自于一个个体，因此核 遗传物质与供核个体相同，不会改变生物体的基因型，属于无 性繁殖。
动物细胞培养的要点 【例1】下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别 的是( ) A．培养基成分不同 B．动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C．动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能 D．动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株
动物细胞培养和核移植技术
动物细胞工程 1．常用的技术手段：动物细胞培养、动物细胞__核__移__植____、 动物细胞融合、生产单克隆抗体等。 2．基础：_动__物__细__胞__培__养__技术。
动物细胞培养
1．概念：取动物机体中相关的组织，将它分散成_单__个__细__胞___ 后，在适宜的培养基中让其生长和繁殖的过程。
2．动物细胞培养的条件： (1)无菌、无毒的环境：对培养液和培养用具作无菌处理； 在培养液中加入一定量抗生素；定期更换培养液。 (2)营养：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素， 另外，合成培养基需加入血清、血浆等天然成分。 (3)温度和pH：适宜温度为36.5 ℃±0.5 ℃；适宜pH为7.2～ 7.4。 (4)气体环境： ①O2：细胞代谢所必需。 ②CO2(5%)：维持培养液的 pH。
【名师点拨】动物细胞培养与植物组织培养有许多相似之 处，也有许多不同点。其主要不同点是它们的培养基的成分不 同。动物细胞培养的培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机 盐和维生素，另外还有动物血清。植物组织培养所需要的培养 基包含植物生长和发育的全部营养成分，如矿质元素、蔗糖、 维生素、植物激素和有机添加物，但没有动物血清。
①蛋白质生物制品的生产 ②皮肤移植材料的培育 ③检测有毒物质 ④生理、病理、药理学研究
取材
动物细胞培养和核移植技术-课件
■细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就 贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。
■培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易 于帖附。
强调三：接触抑制
■当贴壁细胞分裂生 长到表面相互接触时, 细胞就会停止分裂增 殖，这种现象称为细 胞的接触抑制。
P46讨 论
多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中， 根据你所学的内环境的知识，思考以下问题：
3.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动 物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？ 为什么？
绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还有 少量的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵 母细胞。
此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的 一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系， 核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境 不会完全相同，其形成的行为、习性也不可能和 核供体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物 不会是核供体动物100%的复制。
该克隆牛不能无限制地推广，其数量不宜过多， 尤其是在小范围内不能无限的繁殖，以避免奶牛 群出现近亲繁殖而引起种质衰退。
（2）如果将克隆高产奶牛卢辛达的任务交 给你，你将如何对它进行克隆？ 从卢辛达耳朵（也可用别的组织、器官，耳朵 在活体上容易取）上剪取一小块组织，在体外 培养获得该组织（如软骨组织）的细胞。从屠 宰场取废弃的牛卵巢，抽取卵母细胞体外培养 成熟。用显微针去除卵母细胞的核，再将耳细 胞注入卵母细胞，用电刺激方法使卵母细胞与 体细胞融合，这时供体核就进入了受体卵母细 胞，再用电刺激或化学物质激活注入了体细胞 核的卵母细胞，使其完成细胞分裂和发育过程。 核移植胚胎在体外短时间培养后，挑选正常卵 裂的胚胎植入经同期发情处理的受体母牛体内。
2.2 动物细胞工程
动物细胞工程常用的技术
■培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易 于帖附。
强调三：接触抑制
■当贴壁细胞分裂生 长到表面相互接触时, 细胞就会停止分裂增 殖，这种现象称为细 胞的接触抑制。
P46讨 论
多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中， 根据你所学的内环境的知识，思考以下问题：
3.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动 物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？ 为什么？
绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还有 少量的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵 母细胞。
此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的 一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系， 核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境 不会完全相同，其形成的行为、习性也不可能和 核供体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物 不会是核供体动物100%的复制。
该克隆牛不能无限制地推广，其数量不宜过多， 尤其是在小范围内不能无限的繁殖，以避免奶牛 群出现近亲繁殖而引起种质衰退。
（2）如果将克隆高产奶牛卢辛达的任务交 给你，你将如何对它进行克隆？ 从卢辛达耳朵（也可用别的组织、器官，耳朵 在活体上容易取）上剪取一小块组织，在体外 培养获得该组织（如软骨组织）的细胞。从屠 宰场取废弃的牛卵巢，抽取卵母细胞体外培养 成熟。用显微针去除卵母细胞的核，再将耳细 胞注入卵母细胞，用电刺激方法使卵母细胞与 体细胞融合，这时供体核就进入了受体卵母细 胞，再用电刺激或化学物质激活注入了体细胞 核的卵母细胞，使其完成细胞分裂和发育过程。 核移植胚胎在体外短时间培养后，挑选正常卵 裂的胚胎植入经同期发情处理的受体母牛体内。
2.2 动物细胞工程
动物细胞工程常用的技术
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课后习题
1.动物细胞培养要经过脱分化吗？为什么？
动物细胞特点？ • 分化潜能变窄：随着细胞分化程度的 提高而逐渐受到限制，分化潜能变窄， 这是指整体细胞而言。 • 细胞核仍具有全能性：细胞核，它含 有保持物种遗传性所需的全套基因， 而且并没有因细胞分化而丢失基因， 因此高度分化细胞的细胞核仍具有全 能性
不能，因为两者的最适pH不同，
思考题
4、幼龄与老龄动物的组织细胞比较，分化程度低的 与分化程度高的组织细胞比较，哪一种更易于培养？ 思考一下，这是什么道理？
一般来说幼年动物的组织细胞比老年动物的组 织细胞易于培养。同样，组织细胞的分化程度 越低，则增殖能力越强，所以更容易培养
思考题
5、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、 无毒？ 易于培养细胞贴壁，进行生长增殖
动物细胞培养
细胞增殖
液体培养基 葡萄糖、动物血清 细胞株、细胞系 获得细胞 或细胞分泌蛋白
应用：
• 大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、 干扰素、单克隆抗体） • 培养作为基因工程中的受体细胞 • 培养的动物细胞可以用于检测有毒物 质，判断某种物质的毒性 • 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理 论依据
成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的 生长和增殖，也不利于细胞营养物质的吸收和代 谢废物的排出。
2、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？
先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理。
3、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞 间的物质是什么成份？能够用胃蛋白酶代替胰 蛋白酶吗？为什么？
胰蛋白酶水解蛋白质 细胞间的成份是蛋白质
加培养液
细胞悬浮液 10代细胞 细胞株
原代培养
遗传物质 未改变
50代细胞
遗传物质 已改变
传代培养
细胞系 无限传代
细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞 生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存 活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞 生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的 改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这 种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传 物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制， 容易传代培养。
思考题
12、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？ 保存10代以内的细胞，因为10－50部分 细胞的细胞核型可能发生变化，有少部分 还发生突变向癌细胞方向发展 13、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养 那样最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多， 不能发育成新的动物个体
动物胚胎或幼龄动 物的组织、器官 胰蛋白酶 剪碎 单个细胞
供体细胞 （供核）
卵巢卵母细胞
细胞培养 去核 胚胎 代孕 移植 母体
体细胞
注入
（MⅡ中期：供质）
无核卵 母细胞
细胞 重 融合 组 细 胞
归纳:
构建重 组胚胎
生出与供体奶 牛遗传基础相 同的犊牛
1.共分成两大阶段：核移植和胚胎移植
2.取卵细胞作受体细胞的原因是:它是最大的细胞,易操作,它发育可直接表达性状 3.严格来说新个体有卵巢母细胞的细胞质所以有两个亲本的性状
根据动物细胞核仍具有全能性 的特点,怎样将动物细胞的全能性 表达?
利用动物体细胞核移植技术
动物核移植：
将动物的一个细胞的 细胞核 ，移入一个 已经去掉细胞核的 卵母细胞 中，使其重 组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎 最终发育为动物个体。
克隆动物：用核移植的方法得到的动物。
细胞核移植
胚胎移植
6、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再 分裂、增殖？ 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时， 细胞分裂就会停止分裂增殖，这种现象 叫接触抑制。 7、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应 该怎样办？ 将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然 后继续增殖。 这样的过程叫做传代培养
思考题
8、如何理解原代培养和传代培养？ 上述过程中，在第一培养瓶中培养就是 原代培养，之后转移到其它培养瓶中培 养就是传代培养 9、传代培养的细胞能一直传代下去吗？ 不都能 10、有些为何能一直传下去？ 发生突变，朝着癌细胞方向发展 11、动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗？ 不全是
Ａ母绵羊
Ｂ母绵羊
细胞拆合技术 乳腺细胞
多移植
细胞核 融合后的卵细胞 卵裂 早期胚胎
胚胎移植
C母绵羊子宫 妊娠 分娩
多莉羊
2.体细胞核移植技术的应用前景
克隆动物的研究意义
1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 2.加速改良动物品种 3.治疗人类疾病，提供供体（器官、细胞、组织） 4.保护濒危动物
动物细胞生长特性
接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分 裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细 胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再 部分细胞突变，获 增加。
得不死性，向癌细 胞方向发展，糖蛋 白减少。
接触抑制 50代以后 失去接触抑制
思考题
1、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个 细胞的呢？
体细胞核移植技术存在的问题
1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过 大，异常肥胖，发育困难，免疫失调等。 2.成功率非常低
3.克隆动物食品的安全性问题。
课后习题
2.体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体 细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什 么？
聚焦一、动物细胞培养过程 简述动物细胞培养 的操作过程
分离组织（低幼动物）
分散细胞（胰蛋白酶） 原代培养（细胞增殖）
分装
传代培养（细胞增殖）
动物细胞生长特点： 细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、 易于贴附。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时， 细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细 胞的接触抑制。
浆等。）
补充合成培养基 3、温度和PH 36.5 +0.5度 ；PH为7.2-7.4。 中缺乏的物质 4、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
？
比较项目 原理 培养基性质 培养基特有成分 培养结果 培养目的
植物组织培养 细胞的全能性
固体培养基 蔗糖、植物激素 植物体或组织 快速繁殖、培育 无病毒植株等
讨论
多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境 中，根据你所学的内环境的知识，思考并讨论 以下问题： 1.体外培养细胞时需要提供哪些物质 充足的营养供给、适宜的温度、适宜的 pH和气体环境 2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？ 无菌、无毒的环境。
1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血
是其他动物细胞工程技术的基础。
动 物 细 通常采用的 胞 技术手段 工 程
动物细胞培养
动物细胞核移植
动物细胞融合 单克隆抗体
注意关键词:
细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养
聚焦一、动物细胞培养过程 1、动物细胞培养的概念是什么？该技术实施 的原理是什么？ 从动物机体中取出相关组织，将它分散成单 个细胞，然后在适宜的培养基中，让这些细胞生 长和繁殖。 原理是细胞增殖 （有丝分裂） 。