实验五过氧化物酶酶活性的测定
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试剂 0.01mol/L磷酸缓冲液,ml
0.02mol/L 愈创木酚,ml
酶液,ml
0 2.92
0.05
1 2.9
0.05
2 2.9
0.05
3 2.9
0.05
0
0.02
0.02
0.02
加好反应物,摇匀,立即加新配制的H2O2 (0.01 ml),即刻摇 匀并计时,每隔 30s 读数1次,共计6个数值。
三、实验材料
菠菜、油菜、树叶、草、
四、仪器用品与试剂
分光光度计,研钵,移液管,吸管 愈创木酚,30%过氧化氢,磷酸缓冲液
五、实验步骤
1、称取植物材料 0.5g ,剪碎,放入研钵中,加入 1 ml 磷酸缓冲液 ( 0.05mol/L)研磨成匀浆,以 12000 rpm 离心 15 min ,上清液即为粗 酶液。 对照管 测定管
七、思考题
说明植物过氧化物酶在植物代谢中的意义。
此外,过氧化物同工酶在遗传育种中的重 要作用也正在受到重视。
二、实验原理
RH2+ H2O2→2H2O + R 在有过氧化氢存在的条件下,过氧化物酶能 使邻甲氧基苯酚(愈创木酚)氧化,生成茶 褐色物质,该物质在 470 nm 处有最大吸收, 可用分光光度计测量 470 nm 处的吸光度变 化速率来测定过氧化物酶活性。
一、实验目的
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
熟悉测定过氧化物酶活性的常用方法及其测 定原理。
过氧化物酶(POD)
过氧化物酶广泛存在于植物体中,是活 性较高的一种酶。它与呼吸作用、光合作用及 生长素的氧化等都有关系。在植物生长发育过 程中它的活性不断发生变化。一般老化组织中 活性较高,幼嫩组织中活性较弱。这是因为过 氧化物酶能使组织中所含的某些碳水化合物转 化成木质素,增加木质化程度。