不同温度下微生物和纤维素酶对发酵猪粪理化特性的影响_熊仕娟

第34卷第12期2014年12月环境科学学报Acta Scientiae CircumstantiaeVol．34，No．12Dec．，2014基金项目：现代农业产业技术体系建设专项（No．Nycytx-35-gw16）；国家科技支撑计划项目（No．2007BAD87B10）Supported by the Special Fund of China Agriculture Ｒesearch System （No．Nycytx-35-gw16）and the National Key Technology Ｒ＆D Program （No．2007BAD87B10）作者简介：熊仕娟（1990—），女，E-mail ：xiongshijuan5@163．com ；*通讯作者（责任作者），E-mail ：xuwei_hong@163．com Biography ：XIONG Shijuan （1990—），female ，E-mail ：xiongshijuan5@163．com ；*Corresponding author ，E-mail ：xuwei_hong@163．comDOI ：10．13671/j．hjkxxb．2014．0668熊仕娟，徐卫红，杨芸，等．2014．不同温度下微生物和纤维素酶对发酵猪粪理化特性的影响［J ］．环境科学学报，34（12）：3158-3165Xiong S J ，Xu W H ，Yang Y ，et al ．2014．Effects of microbes and cellulase in pig manure fermentation at different temperature ［J ］．Acta Scientiae Circumstantiae ，34（12）：3158-3165不同温度下微生物和纤维素酶对发酵猪粪理化特性的影响熊仕娟，徐卫红*，杨芸，王崇力，江玲，周坤，刘俊，张明中西南大学资源环境学院，重庆400715收稿日期：2014-02-14修回日期：2014-03-18录用日期：2014-03-20摘要：采用恒温发酵培养试验，研究了5ħ和25ħ时分别接种纤维素酶（X ）、枯草芽孢杆菌（K ）和EM 菌（E ）及其组合对新鲜猪粪发酵中的全氮、铵态氮、有机质、pH 及微生物数量的影响．结果表明，5ħ条件下，猪粪中微生物生长受抑制，细菌、真菌、放线菌数量均明显低于25ħ，发酵终期猪粪有机质含量为70% 83%，pH 值为7．16 7．36；25ħ条件时，发酵终期猪粪有机质含量降至61% 72%，pH 值升至8．09 8．94．与对照相比较，25ħ下添加微生物和纤维素酶的处理有机质含量降低了2．95% 7．70%（除了K 和XE 处理），C /N 值降低了4．04% 37．59%（除了XK 处理），pH 值增加了1．7% 26．8%．在总的添加量一致的条件下，发酵剂组合KE 、XE 、XK 、XKE 对猪粪发酵的效果优于单一发酵剂的X 、K 、E 处理．关键词：温度；枯草芽孢杆菌；EM 菌；纤维素酶；理化特性；猪粪发酵文章编号：0253-2468（2014）12-3158-08中图分类号：X705文献标识码：AEffects of microbes and cellulase in pig manure fermentation at different temperatureXIONG Shijuan ，XU Weihong *，YANG Yun ，WANG Chongli ，JIANG Ling ，ZHOU Kun ，LIU Jun ，ZHANG MingzhongCollege of Ｒesources and Environmental Sciences ，Southwest University ，Chongqing 400715Ｒeceived 14February 2014；received in revised form 18March 2014；accepted 20March 2014Abstract ：The study was conducted to investigate the effects of single or combined treatments of cellulase （X ），Bacillus subtilis （K ）and effective microorganisms （E ）on contents of total N ，NH +4-N and organic material ，value of T and pH ，and microbial quantity during pig manure fermentation at 5ħand 25ħ，respectively．The results showed that the microbial growth was obviously inhibited at 5ħ，and the quantities of bacteria ，fungi ，and actinomycetes were significantly lower than those at 25ħ．The content of organic matter was 70% 83%，and the pH value is 7．16 7．36after treatment at 5ħ．While in the end of culture at 25ħ，the content of organic matter decreased to 61% 72%，and the pH increased to 8．09 8．94．Compared with the control in which pig manure was not fermented microbes and cellulase ，the content of organic matter decreased by 2．95% 7．70%（except K and XE ），the value of C /N decreased by 4．04% 37．59%（except XK ），and the value of pH increased by 1．7% 26．8%when treated with microbes and cellulase at 25ħ．The effects of combined treatments with cellulase （X ），Bacillus subtilis （K ）and effective microorganisms （E ）on pig manure fermentation ，such as KE ，XE ，XK or XKE ，were superior to the single treatment of X ，K or E with the same inoculation amount．Keywords ：temperature ；bacillus subtilis ；ecological microorganisms ；cellulase ；physicochemical properties ；pig manure fermentation1引言（Introduction ）近年来，我国畜禽养殖场的集约化、规模化、商品化发展产生了大量畜禽排泄物和废弃物．畜禽粪便中含有大量病原微生物和各种寄生虫卵，如不及时加以处理和合理利用，将造成严重的有机污染和12期熊仕娟等：不同温度下微生物和纤维素酶对发酵猪粪理化特性的影响生物污染，危害人畜的健康．2010年，我国平均每公顷耕地的畜禽粪便污染量为1．86t，畜禽粪便已成为当前我国农业面源污染的最主要污染源之一（仇焕广等，2013．），减少畜禽粪便的污染并进行资源化利用已成为十分紧迫的任务．将畜禽粪便发酵腐熟不仅减少环境污染，且腐熟后的粪便可作为优质的有机肥资源．畜禽粪便发酵的实质是有机物质在微生物的作用下进行矿质化和腐殖化，同时利用产生的生物热杀灭粪便中的病原物而达到无害化目的（夏炜林等，2007）．因此，微生物对畜禽粪便发酵至关重要．然而，传统的畜禽粪便发酵方法劳动强度大，生产周期长而肥效低，规模化生产极受限制．近年来，国内外对接种微生物的筛选及其对畜禽粪便发酵的影响方面做了大量研究（陈昭辉，2006；冯致等，2013；何志刚，2007；霍培书等，2013；李杰等，2014；刘克锋等，2003；Sasaki et al．，2006；孙晓华等，2004；Wakase et al．，2008；王伟东等，2008；王宇，2008；赵明梅等，2007）．接种微生物发酵剂可以改善畜禽发酵粪便的理化性状，减少臭味，促进畜禽粪便发酵快速腐熟，极大弥补了畜禽粪便传统发酵的不足（冯致等，2013；霍培书等，2013；李杰等，2014；Sasaki et al．，2006；Wakase et al．，2008；王宇，2008；赵明梅等，2007）．温度是影响堆肥反应速率的决定性因素，它可制约微生物的活性及有机物的降解速度，从而影响堆肥进程．研究显示（Avnimelech et al．，2004；Bach et al．，1984；李国学，2003），温度过高或过低都会降低微生物的活性而影响有机质的降解效果，不利于堆肥的腐熟．目前，粪便发酵相关研究大多集中在微生物菌剂对堆肥发酵结果的影响，而对不同温度下接种不同发酵剂组合及其混合比例对畜禽粪便发酵过程中基本理化指标的变化方面研究甚少．为此，本研究采用室内气候培养箱，分别于5ħ和25ħ两个温度条件下，研究了枯草芽孢杆菌、EM菌和纤维素酶3种发酵剂及其组合对猪粪发酵过程中pH 值、铵态氮、有机质、全氮、C/N、微生物数量的变化特征的影响，旨在为筛选不同温度下猪粪发酵最佳微生物种类及组合提供科学依据．2材料与方法（Materials and methods）2．1供试材料供试猪粪采自重庆市北碚区，采样时间是2013年3月1日．采来的猪粪用塑料袋装好，放于－20ħ的冰箱中冷冻保存备用．供试猪粪基本理化性质为：有机质80．1%、全氮3．65%、全磷1．36%、全钾0.45%、C/N13．27、含水量75%、pH7．41．实验用枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）购买自南京便诊生物科技有限公司，配制成菌液浓度约7．2ˑ106个·mL－1；EM菌，购买自河南中广集团天义生物谷，配制成菌液浓度约100亿·mL－1；纤维素酶规格为40U·mg－1，购买自上海如吉生物科技发展有限公司．2．2实验方案将采来的猪粪调节水分含量至65% 70%，分装于玻璃发酵罐中（发酵罐高度121mm，罐身直径72．1mm，罐口内径52．6mm，公称容量380mL），5ħ每个发酵罐装样110g，25ħ装样40g．用封口膜封口（可透气），于115ħ灭菌15min，自然冷却．向灭菌后的猪粪中添加EM菌（E）、枯草芽孢杆菌（K）、纤维素酶（X）及其组合，对照为不添加菌剂．枯草芽孢杆菌和EM菌的接种量均设为0．2%，纤维素酶的添加浓度为30U·g－1，8个处理（表1），3个重复，分别置于（5ʃ1）ħ和（25ʃ1）ħ的气候培养箱中进行恒温培养，控制气候培养箱湿度为60%．发酵过程中不添加任何微量元素和营养元素．分别于发酵第0、3、6、9、12、15、18天取样，每次取样为一个重复中的多点混合样，分析测定猪粪铵态氮、全氮、有机质、C/N、pH、微生物数量．表1实验处理和微生物接种量Table1Experimental treatment and microbial inoculation amount发酵温度代号处理纤维素酶/（U·g－1）枯草芽孢杆菌EM菌5ħ和CK X0K0E000025ħX X1K0E03000K X0K1E000．2%0E X0K0E1000．2%XK X1K1E0300．2%0XE X1K0E13000．2%KE X0K1E100．11%0．09%XKE X1K1E1300．11%0．09%注：CK为不添加微生物和纤维素酶的对照处理；X为纤维素酶；K为枯草芽孢杆菌；E为EM菌．2．3测定项目及方法pH测定采用pH计法，有机质测定采用K2Cr2 O7容量法，铵态氮测定采用2mol·L－1KCl浸提-凯氏蒸馏法，全氮测定采用H2SO4-H2O2消煮-凯氏蒸馏法，全磷测定采用H2SO4-H2O2消煮-钒目黄比色9513环境科学学报34卷法，全钾测定采用H2SO4-H2O2消煮-火焰光度计法，有机质测定采用重铬酸钾容量法（杨剑虹，2008）；微生物数量统计采用涂布平板计数法（范秀容，1998）；细菌采用牛肉膏蛋白胨培养基培养；真菌采用马丁氏培养基培养；放线菌采用高氏1号培养基培养．2．4数据处理本研究所列结果为3次重复的测定值，数据方差分析和多重比较采用SPSS18．0统计软件进行．3结果（Ｒesults）3．1不同处理猪粪发酵的表观变化在整个发酵过程中，5ħ条件下发酵的猪粪均存在刺激臭味，且表观无明显变化；25ħ发酵的猪粪在接种第5天，添加了纤维素酶的猪粪都明显长出了白色菌丝，发酵后期枯草芽孢杆菌处理的猪粪出现了微锯齿状的淡黄色枯草芽孢杆菌菌落．在发酵中后期，经发酵剂处理的猪粪逐渐有腐熟的气味，猪粪质地疏松，部分猪粪由原来的黑色变为黑褐色，添加了纤维素酶的处理发酵效果最为明显．经发酵剂处理的猪粪其表观状态发生变化均早于对照，变化也比对照明显，此外，发酵剂组合处理表观变化也优于单种发酵剂处理．3．2不同处理铵态氮含量的变化由图1可知，5ħ中各处理铵态氮含量变化趋势一致，均先下降后上升，发酵结束时，E、XK、XE、XKE、K处理铵态氮含量依次比对照高19．90%、16.58%、15．63%、9．95%、0．85%，X和KE处理分别比对照低4．51%、2．54%．25ħ试验中除了对照处理铵态氮含量变化平缓，其他处理铵态氮含量变化趋势与5ħ相似，发酵终期对照处理铵态氮含量最多，比其他处理高1．17 1．89mg·kg－1，其中XK、KE 处理铵态氮含量比对照低27．3%、19．5%，低于其他处理．由于EM菌含有大量乳酸，产酸能力强，减少了氨的挥发损失，25ħ中E处理铵态氮含量上升的时间早于其它处理，且发酵中铵态氮含量较高．发酵终期5ħ和25ħ中所有处理猪粪中铵态氮含量均大于5000mg·kg－1，含量较高．3．3不同处理有机质、全氮、C/N的变化由发酵中有机质含量的变化（图2a和图3a）可知，在5ħ试验中，前9d各处理有机质含量均呈下降变化，且经发酵剂处理的猪粪有机质均比对照低，随后呈升-降-升的变化趋势．发酵终期有机质含图15ħ（a）和25ħ（b）时发酵猪粪铵态氮含量的变化Fig．1Changes of NH+4-N concentration in5ħ（a）and25ħ（b）（CK为对照，不添加发酵剂；X为纤维素酶处理，添加浓度30 U·g－1；K为枯草芽孢杆菌处理，添加量0．2%；E为EM菌剂处理，添加量0．2%；XE为纤维素酶和EM菌混合菌剂处理，添加量为纤维素酶30U·g－1，EM菌剂0．2%；KE为枯草芽孢杆菌和EM菌混合菌剂处理，总添加量0．2%，混合比例11ʒ9；XK为纤维素酶和枯草芽孢杆菌混合菌剂处理，添加量为纤维素酶30U·g－1，枯草芽孢杆菌0．2%；XKE为纤维素酶、枯草芽孢杆菌、EM菌混合菌剂处理，添加量为纤维素酶30U·g－1，EM菌和枯草芽孢杆菌总添加量0．2%，混合比例11ʒ9，下同）．量均在70% 83%范围，其中CK、K、E、XK、XKE处理有机质含量分别较发酵初始增加了0．28%、3.26%、3．82%、3．62%、4．54%，其余处理均有所降低，与对照相比，X、XE、KE处理有机质降低了2.10%、10．63%、6．35%，其余处理比对照高3．79% 5.43%．与5ħ相比，25ħ条件下猪粪有机质降解效果更好，发酵终期所有处理有机质含量均降至61% 72%范围，较发酵0天下降了12．29% 29.94%，其中X处理有机质含量最低，K和XE处理比对照高5．87%和7．42%，其余处理比对照低2.95% 7．70%．在5ħ和25ħ试验中，全氮含量在前期均呈下降变化（图2b和图3b），与发酵0天相比，发酵终期25ħ试验中E、X、XE处理全氮分别增加了0．42%、0．09%、0．04%，其余处理均降低了0.34% 0．82%，而5ħ发酵终期所有处理全氮下降了0．44% 0．94%，且25ħ全氮含量上升的时间早于5ħ．C/N值与有机质变化趋势基本一致（图2c和图3c）．与发酵0天相比，5ħ实验在发酵终期061312期熊仕娟等：不同温度下微生物和纤维素酶对发酵猪粪理化特性的影响图25ħ时发酵猪粪有机质（a ）、全氮（b ）、C /N （c ）的变化Fig．2The changes of organic material （a ），total N （b ），C/N （c ）in 5ħ表25ħ和25ħ时猪粪发酵终点的总有机碳、C /N 及T 值Table 2Values of TOC ，C /N and T at the end of fermentation in 5ħand 25ħ发酵温度/ħ处理总有机碳全氮C /N T 值5CK 45．53%3．09%14．721．11K 47．25%3．31%14．261．07X 44．57%2．97%15．021．13E 47．58%3．32%14．351．08XE 40．69%3．09%13．180．99XK 47．47%3．47%13．681．03KE 42．64%3．36%12．700．96XKE 48．00%3．07%15．661．1825CK 38．73%2．67%14．511．09K 41．00%2．96%13．841．04X 35．74%3．39%10．560．80E 37．43%3．72%10．070．76XE 41．60%3．33%12．480．94XK 37．58%2．48%15．171．14KE 36．52%2．83%12．910．97XKE36．21%2．79%12．990．98所有处理C /N 值均有所增加，C /N 值均在12 16之间，除了X 和XKE 处理C /N 值比对照高2．04%和6．36%，其余处理比对照低2．53% 13．75%；而25ħ实验在发酵终期各处理C /N 值均下降了0．56 5．66，其中X 、E 、XE 处理下降幅度较大，分别降低了5．17、5．66、3．25，除了XK 处理C /N 值比对照高4.53%，其余处理均比对照低4．04% 37．59%．5ħ和25ħ试验在发酵结束时各处理猪粪C /N 值均低于16，T 值均大于0．6，但5ħ中T 值均高于25ħ（表2）．图325ħ发酵实验中有机质（a ）、全氮（b ）、C /N （c ）的变化Fig．3Changes of organic material （a ），total N （b ）and C /N （c ）in 25ħ3．4不同处理pH 值的变化5ħ和25ħ条件下发酵的猪粪其pH 变化趋势明显不同（图4）．5ħ试验中（图4a ）各处理猪粪pH 普遍呈降升降的变化趋势，发酵终期各处理pH 值均在7．16 7．36范围，比发酵初始pH 降低了0．28 0．48，其中X 、XE 处理pH 比对照低0.04和0.07，其余处理均高于对照，XKE 处理pH 最高，为7.36．25ħ试验中（图4b ）pH 变化情况明显与5ħ1613环境科学学报34卷不同，除了对照和E 处理pH 值较低且变化趋势平缓，其它处理pH 值均明显增加，发酵终期，CK 和E 处理pH 值分别为7．05和7．17，其余各处理pH 值均升高到8．09 8．94范围，其中X 、XE 、XK 处理pH 较高．图45ħ（a ）和25ħ（b ）时发酵猪粪pH 的变化Fig．4Changes of pH in 5ħ（a ）and 25ħ（b ）3．5不同处理细菌、真菌、放线菌数量的变化5ħ和25ħ实验中，细菌、真菌、放线菌的数量变化趋势各有不同，但对照处理微生物均最低且变化平缓，微生物数量大小均表现为细菌＞真菌＞放线菌（图5和图6）．5ħ中发酵初始阶段细菌、真菌、放线菌数量变化均不大，在发酵前3d ，CK 、K 、X 3个处理的猪粪中均未检测出放线菌，随后微生物数量急剧增加，细菌数量表现为发酵剂组合处理高于单种发酵剂处理，真菌数量表现为X 、E 、XE 、XK 、XKE 处理明显高于其他处理，数量增加的时间也较早，放线菌则表现为X 处理明显低于其他处理，随后细菌数量一直减少，真菌和放线菌数量先降低后有所增加（图5）；而25ħ试验中，发酵开始时微生物数量增加明显，在发酵过程中经发酵剂处理的猪粪中微生物数量均明显高于对照，细菌和真菌在发酵6到15d 保持较高的数量，此阶段放线菌数量出现极小值，这是由于细菌和真菌生长旺盛，有机物竞争消耗大，在发酵结束时XE 和KE 处理的细菌和放线菌数量分别最高（图6）．综合5ħ和25ħ中各处理细菌、真菌、放线菌数量变化情况分析，在发酵的9到12d是微生物生图55ħ时发酵猪粪中细菌（a ）、真菌（b ）、放线菌（c ）数量的变化Fig．5Changes of bacterial （a ），fungi （b ）and actinomycetes （c ）quantity in 5ħ261312期熊仕娟等：不同温度下微生物和纤维素酶对发酵猪粪理化特性的影响图625ħ时发酵猪粪中细菌（a ）、真菌（b ）、放线菌（c ）数量的变化Fig．6Changes of bacterial （a ），fungi （b ）and actinomycetes （c ）quantity in 25ħ长繁殖较旺盛的时期，25ħ发酵中猪粪微生物数量明显高于5ħ，说明低温对微生物生长繁殖有强烈抑制作用．在发酵过程中发酵剂组合为XK 、XE 、KE 、XKE 的处理微生物数量普遍高于只添加1种微生物的X 、K 、E 处理，对照处理微生物数量变化平缓且比其它处理低．4讨论（Discussion ）温度是堆肥腐熟的重要保证，可通过影响微生物活性和有机物降解速率而影响发酵进程．本研究中，5ħ和25ħ条件下的猪粪的发酵效果明显不同．25ħ发酵条件下，除了对照和E 处理，其它处理的pH 值均上升至8．0 9．0，达到了腐熟有机肥对pH 值的条件要求（朱凤香等，2010），而5ħ条件下，各处理猪粪pH 值整体呈下降变化．说明5ħ条件下有机质矿化产生的铵态氮少，同时硝态氮的积累使H +增加（高红梅，2011），导致猪粪pH 值降低．E 处理由于所添加的EM 菌剂中含有大量的乳酸菌，在发酵过程中产酸较多，故pH 一直保持较低值（周海柱等，2010）．氮作为微生物的主要营养物质，其含量变化可直接反映微生物的活动和有机质的分解状况（Zucconi et al ．，1981）．本研究中，无论是在5ħ还是25ħ条件下，全氮和铵态氮含量均大体呈现先下降后上升的变化．铵态氮变化与堆肥中铵态氮先升高后降低的变化规律不相一致（曹喜涛等，2004；霍培书等，2013；江志阳等．2008．；马开星等，2011；牟克珺，2008），其原因可能是前人的研究方式是堆肥，升温和高温阶段促进了氨的挥发，而本研究中猪粪发酵是在恒温和封口的发酵罐中进行，不利于氨的挥发．中前期由于猪粪中微生物的固氮作用、铵的硝化作用及部分氨的挥发损耗了铵（鲍艳宇等，2008；曹喜涛等，2004），后期微生物氨化作用和有机质矿化作用增强，同时部分有机碳仍在转化为CO 2，使NH 3的挥发损失减少，铵态氮含量增加，全氮含量也上升．值得注意的是，25ħ中对照和E 处理中铵态氮含量变化较平缓且高于其他处理，这是由于两个处理中pH 值低，减少了氨的挥发，此外，对照中微生物数量少，减少了微生物对氮的固定．研究表明（张桥等，2004），当有机肥NH +4-N 含量低于400mg ·kg －1时，可认为有机肥发酵腐熟．本研究中，发酵终期不同温度下所有处理猪粪中铵态氮含量均远高于400mg ·kg －1，这与发酵罐透气量少，使氨挥发受阻有很大关系．此外，温度恒定也杜绝了高温对氮素挥发的激发（鲍艳宇等，2008）．有机质是畜禽粪便发酵的影响因素之一，其含量变化也作为有机肥腐熟的参考指标．本研究中，不同发酵温度下各处理有机质变化情况差异明显．5ħ试验中各处理有机质含量在发酵前后变化不明显，而25ħ试验中各处理有机质含量在发酵结束时降至70%，达到了腐熟有机肥对有机质含量的要求．说明5ħ低温抑制了微生物的生长，不利于猪粪发酵．理论上堆肥过程中随着有机物的降解有机质应先下降而后慢慢稳定，但本研究与之不符，这主要是由于自然温度条件下，堆肥过程中有机质含量变化主要分为升温期、高温期、降温期、稳定期四个阶段，其中升温期和高温期均是有机碳分解的关键时期（贾月慧等，2008），而本研究是在5ħ和25ħ恒温条件下于发酵罐中进行发酵，低温和常温对有机质的分解作用不及高温．碳、氮分别作为微生物的能源物质和营养物质，其比值C /N 是评价粪便发酵腐熟度常用的方法之一．C /N 指总有机碳与全氮的比（文启孝，1984）．本研究中，5ħ和25ħ发酵中C /N 变化呈相反的趋势，发酵终期前者C /N普遍高于后者．在大多数堆肥研究中（曹喜涛等，2004；胡红伟等．2013；霍培书等，2013；马开星等，2011；沈根祥等．2009），随着有机肥的腐熟，C /N 呈一路下降的趋势变化，而本研究结果与之不相符，其原因如上述全氮和有机质含量的变化原因所述．Morel 等（Morel et al ．，1985）指出，当堆肥原料初始碳氮比值较低时，宜采用T =（终点C /N ）/（初始C /N ）来评价粪便发酵的腐熟度，且T 值小于0．6时堆肥达到腐熟．本研究中，发酵终期5ħ和25ħ中所有处理猪粪T 值均大于0．6，5ħ中T 值均高于25ħ（表2），所有处理猪粪并未达到完全腐熟．畜禽粪便腐熟是微生物参与的结果，因此分析3613环境科学学报34卷粪便中微生物数量的变化对于了解粪便发酵进程至关重要（马开星等，2011；Tuomela et al．，2000）．本研究中，25ħ发酵条件下，各处理细菌、真菌、放线菌数量均明显高于5ħ，且25ħ条件下猪粪中微生物数量上升明显比5ħ快，添加发酵剂的处理微生物数量明显高于对照，发酵剂组合处理微生物数量高于单种发酵剂处理．说明添加发酵剂可明显提高猪粪微生物数量，而微生物之间具有生长代谢协调促进作用，发酵剂组合处理比单种发酵处理更能促进微生物的生长，而在5ħ的低温条件下，微生物生长繁殖会受到强烈抑制，微生物数量低，不利于快速启动粪便发酵．研究还发现，无论5ħ或25ħ条件下，各处理猪粪中均是细菌数量最多，这与刘婷（2002）和刘佳（2011）的研究结果相似．粪便发酵中细菌数量占优势可能与细菌比表面积大便于快速吸收可溶性底物进行大量生长繁殖有关（刘善江等，2011；刘婷等，2002）．值得注意的是，发酵过程中未添加真菌或放线菌的处理中仍检测出一定数量的真菌和放线菌，这可能是由于猪粪115ħ灭菌不够彻底或细菌在发酵过程中分解糖类、淀粉、蛋白质等营养物质，促进了其他微生物生长繁殖，也可能是在发酵过程中猪粪受到其它菌物的感染．5结论（Conclusions）低温（5ħ）明显抑制微生物的生长繁殖，微生物数量低，发酵结束时，猪粪的铵态氮含量≥5000 mg·kg－1，有机质含量≥70%，pH值低于发酵初始值7．63；25ħ发酵中，猪粪微生物数量高，接种微生物能明显促进猪粪有机物的降解，发酵结束时各处理pH升高至8．0 9．0之间，有机质含量降至70%左右，在总接种量相同的条件下，KE、XE、XK、XKE处理发酵效果好于只添加一种微生物的X、K、E处理，尤其是含纤维素酶的XE、XK、XKE处理对猪粪发酵的效果较为突出．责任作者简介：徐卫红（1969—），女，教授，从事植物营养与农产品安全的研究．E-mail：xuwei_hon g@163．com．参考文献（Ｒeferences）：Avni melech Y，EilatＲ，Porat Y，et al．2004．Factors affecting the rate of window composting in field studies［J］．Compost Science＆Utilization，12（2）：114-119Bach P D，Schoda M，Kubota H．1984．Ｒate of composting of dewatered sewages ludge in continuously mixed isothermal reactor［J］．Journal of Fermentation 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