第四章 动物干细胞..
普通动物学第四版目录
普通动物学第四版目录第一章：绪论• 1.1 什么是动物学• 1.2 动物学的研究对象• 1.3 动物分类学• 1.4 动物的起源和进化第二章：细胞与组织• 2.1 动物的细胞结构与功能• 2.2 组织学概述• 2.3 干细胞与组织再生第三章：动物的皮肤与体表结构• 3.1 真皮与表皮• 3.2 皮肤的结构与功能• 3.3 体表结构的多样性与适应性第四章：动物的骨骼与肌肉• 4.1 骨骼的结构与功能• 4.2 肌肉组织与运动• 4.3 骨骼和肌肉的协同作用第五章：动物的循环系统• 5.1 开放型循环系统与闭合型循环系统的区别• 5.2 心脏的结构与功能• 5.3 血液的成分与功能• 5.4 循环系统与气体交换的关系第六章：动物的呼吸系统• 6.1 呼吸器官的分类与结构• 6.2 气体交换的过程• 6.3 呼吸系统的调节机制第七章：动物的消化系统•7.1 消化器官的分类与结构•7.2 消化过程与消化液的作用•7.3 消化系统的调节机制第八章：动物的泌尿系统•8.1 泌尿器官的分类与结构•8.2 尿液的形成与排泄•8.3 其他排泄方式与调节机制第九章：动物的神经系统•9.1 神经元的结构与功能•9.2 中枢神经系统与外周神经系统•9.3 感觉器官的分类与功能第十章：动物的生殖系统与生殖行为•10.1 性别与性别决定•10.2 雌性生殖系统的结构与功能•10.3 雄性生殖系统的结构与功能•10.4 生殖行为与繁殖策略第十一章：动物的进化与适应•11.1 进化与自然选择的基本概念•11.2 进化的驱动力与机制•11.3 动物的适应性进化第十二章：动物的行为与社会性•12.1 行为的基本概念与分类•12.2 动物的行为模式与行为习性•12.3 动物的社会行为与社会结构第十三章：动物的环境与生态•13.1 动物的栖息地与分布•13.2 动物的种群生态学•13.3 动物的群落生态学•13.4 动物对环境的适应与保护以上是《普通动物学第四版》的目录。
苏教版高中生物目录
必修一第一章生命科学和我们1、身边的生物科学2、生物科学的学习过程第二章细胞的化学组成1、细胞中的原子和分子2、细胞中的生物大分子第三章细胞的结构和功能1、生命活动的基本单位——细胞2、细胞的类型和结构3、物质的跨膜运输第四章光合作用和细胞呼吸1、A TP和酶2、光合作用3、细胞呼吸第五章细胞增殖、分化、衰老和凋1、细胞增殖2、细胞的分化、衰老和凋亡3、关注癌症必修二第一章生物科学和我们1、身边的生物科学2、生物科学的学习过程第二章减数分裂和有性生殖1、细胞的减数分裂2、有性生殖第三章遗传和染色体1、基因的分离定律2、基因的自由组合定律3、染色体变异及其应用第四章遗传的分子基础1、探索遗传物质的过程2、DNA的结构和DNA的复制3、基因控制蛋白质的合成4、基因突变和基因重组5、关注人类遗传病第五章生物的进化1、生物进化理论的发展2、生物进化和生物多样性必修三第一章生物科学和我们1、身边的生物科学2、生物科学的学习过程第二章内环境稳态的重要性1、人体的稳态第2节人体生命活动的调节3、动物生命活动的调节4、植物生命活动的调节第三章生物群落的演替1、生物群落的基本单位——种群2、生物群落的构成3、生物群落的演替第四章生态系统的稳态1、生态系统和生物圈2、生态系统的稳态第五章人与环境1、人类影响环境2、创造人与自然和和谐选修一第一章无茵操作技术实践1、微生物的培养和应用2、植物组织培养技术第二章发酵技术实践1、运用发酵技术加工食品2、测定发酵食品中的特定成分第三章酶的应用技术实践1、酶的制备和应用2、制备和应用固定化酶第四章生物化学与分子生物学技术1、生物成分的分离与测定技术2、分子生物学技术选修二第一章生物科学与现代农业1、繁殖与育种技术2、植物病虫害和动物疾病的防治3、现代农业第二章生物科学与工业1、发酵工程与食品生产2、酶工程3、生物技术与生物工程制药第三章生物科学与健康1、人类辅助生殖技术2、基因诊断与基因治疗3、人体器管移植第四章生物科学与环境保护1、生物污染与生物净化2、合理利用生物资源选修三第一章基因工程1、基因工程概述2、基因工程的应用3、蛋白质工程第二章细胞工程1、细胞工程概述2、植物细胞工程3、动物细胞工程第三章胚胎工程1、动物的胚胎发育和胚胎工程2、胚胎干细胞的研究及其应用第四章生态工程1、生态工程的原理及类型2、关注生态工程的建设。
第四章 实验动物的育种繁殖
是指以实验方法导入的外源基因在 其染色体基因组内稳定整合并能稳定表 达遗传给后代的一类动物。
Gordon等人首次成功地将含有HSV(单纯疱疹病 毒)和SV40(猴空泡病毒40) DNA片段的重组质粒 DNA以显微注射法导入小鼠受精卵的雄原核内，得 到了带有这种外源DNA顺序TGM。 1982年Palmiter等运用此法得到的所谓“超级巨 鼠”,曾引起整个生物学界的轰动。 到目前为止，人类已获得转基因鱼、鼠、羊、猪、 兔、牛等等大小动物。
四、繁殖方法
近亲繁殖： 即近亲交配，指血缘关系极为相近 的个体之间或遗传组成极相似的个体之间进行的交 配繁殖。常有全同胞兄妹交配、父女或母子交配、 堂兄妹交配等。用于近交系育种繁殖。 异系杂交： 两个不同的近交系品系之间进行的 交配。用于杂种一代育种繁殖。 随机繁殖： 群体中每个个体都有同样的机会同 另一性别中的任何一个个体进行交配（即随机进 行的交配）。用于封闭群育种繁殖。
一、杂种一代的育种繁殖
二、重组近交系的育种繁殖
一、杂种一代的育种繁殖
C57BL/6 ♀× DBA/2 ♂ ↓ B6D2F1
DBA /2 ♀ × C57BL/6♂ ↓ D2B6F1
二、重组近交系的育种繁殖
第五节 携带特定基因品系的育种繁殖
一、突变基因的培育和保持
二、同源导入近交系的育种繁殖
三、分离近交系的育种繁殖
一、突变基因的培育和保持
裸鼠的繁殖生产
二、同源导入近交系的育种繁殖
用回交系统培育同源导入近交系
（目的基因为常染色体显性或共显性）
用杂交—互交系统培育同源导入近交系
（目的基因为常染色体隐性基因）
三、分离近交系的育种繁殖
用于分离近交系培育的回交（A）和互交系统（B）
生物技术Biotechniques.pdf
细胞培养制药工艺
细胞系
3、蛋白质糖基化与分泌表达
蛋白质合成场所：粗糙内质网上的核糖体
糖基化场所：内质网合成各种糖类，粗糙内质 网腔内和高尔基体，加工修饰。
不同细胞系糖基化特征不同，选择适宜细胞 系。
对于分泌型蛋白，分泌泡与细胞膜融合，释放 到胞外，完成了蛋白质的分泌表达。
细胞培养制药工艺
细胞系
4.1.3 生产用细胞系
1. 人源细胞系
Namalwa：
类淋巴母细胞，非整体，悬浮生长。
英国Wellcome公司：Sendai病毒诱导，大规模生产 α干扰素，批准上市。产品逐渐淘汰。
细胞培养制药工艺
细胞系
动物细胞培养的应用
作为反应器用于制药：EPO，tPA 作为宿主细胞用于制药：病毒性疫苗 杂交瘤细胞：单克隆抗体，诊断、治疗 组织再生与器官移植（个体克隆）： 本身作为产品：皮肤移植，干细胞治疗 药学研究应用：分子与细胞药理、毒理、代谢 生命科学研究：器官发生，细胞、分子、遗传学
细胞培养制药工艺
细胞系
3.有限细胞系Finite cell line
概念:生长和寿命有限的细胞系。二倍体细胞系 特点：多次传代培养，失去增殖能力，老化死亡。 寿命：取决于细胞来源的物种和年龄、器官。 人细胞最高培养次数为50－60代。 胚成纤维细胞：人，50代；鸡胚，30代；小鼠，8代。
细胞培养制药工艺
生产特征
3.天然结构与活性的药物
完善的翻译后蛋白质修饰功能 游离核糖体：合成细胞质基质内的蛋白质。 与膜结合的核糖体：合成分泌性和膜整合蛋 白，多数为糖蛋白。 修饰：内质网加工，高尔基体加工、转运、分 泌，糖链。糖基化、磷酸化、酰胺化等。 活性分子：装配折叠形成精确的三维结构。
生物技术制药概论
生物技术制药概论教学大纲（药学专业）四川大学华西药学院生物技术药物学系2015年9月一、课程基本信息课程名称：生物技术制药Biotechnological Pharmaceutics课程号（代码）：505013020L课程类别：限选学时：32 学分：2二、教学目的及要求现代生物技术是一门以现代生命科学为基础，由多学科综合而形成的崭新学科，而生物技术制药则是以现代生物技术为主要手段来研究制造药物。
通过本课程的教学，可以使学生掌握现代生物制药的基本知识、基本理论和基本技能，了解21实际生物制药工业的发展及药物生物技术的新进展，为学生应用现代生物技术研究新药和从事生物药物的研究开发及生产奠定基础。
三、教学内容第一章绪论（3学时）1.生物技术的定义和组成2.生物技术制药的概念和研究范围3.生物技术制药在药学中的重要性。
4.生物药物的概念与生物医药产业第二章基因工程制药（4学时）1.基因工程的概念与原理2.基因工程药物的概念及基本过程3.基因工程制药的关键技术第三章蛋白质工程制药（2学时）1.蛋白质工程的定义与研究内容2.蛋白质工程基本特征3.蛋白质工程实施的主要条件4.蛋白质工程药物第四章动物细胞工程制药（4学时）1.动细胞的培养和融合的基本原理及方法2.干细胞技术3.动物细胞的大规模培养第五章植物细胞工程制药（4学时）1.植物细胞工程的产生和发展2.植物细胞工程原理3.植物细胞大规模培养技术4.转基因动植物技术与植物细胞工程制药第六章发酵工程技术（4学时）1发酵工程的基本原理2发酵工程的基本过程与工艺控制的关键因素2发酵工程技术的应用第七章酶工程技术（4学时）1.酶工程概述与发展2.固定化酶、固定化细胞生物反应器的制备3.生物反应工程的设计及生物反应器4.酶工程技术在制药工业的应用第八章抗体工程与抗体药物（3学时）1. 抗体工程与抗体药物2. 单克隆抗体技术第九章合成生物学（2学时）1.合成生物学的概念与发展2合成生物学技术与在医药领域应用第十章生物技术药物的质量控制与安全性评价（2学时）1. 生物技术药物的质量控制2. 生物技术药物的安全性评价复习、考试（3学时）四、教材姚文兵主编.生物技术制药概论. 第3版中国医药科技出版社，2015五、主要参考资料1.夏焕章熊宗贵主编《生物技术制药》（第2版）高等教育出版社20062..王凤山主编《生物技术药物》人民卫生出版社20103..Nature Reviews: Drug discovery4.4Nature biotechnology六、成绩评定理论考核70% 平时考察30%。
动物干细胞技术简介
1.带间充质干细胞：大量存在于脐带组织中，具有胚胎干细 胞类似的增殖能力和多向分化潜能，来源丰富、取材方便、 无道德伦理争议，可获取的细胞数量多、活力强，疗效显著， 可以扩增和传代，同时又没有配型、排斥等问题，不但能够 成为骨髓间充质干细胞的理想替代物，也是最具临床应用前 景的多能干细胞。
2.骨髓间充质干细胞：人体骨髓干细胞细胞数量及增殖分化 潜能随年龄的增大而下降，从自体骨髓提取间充质干细胞， 虽然技术门槛比较低，但需要抽取病人大量骨髓（往往难以 做到），其干细胞数量也难以稳定满足临床治疗的要求。因 此骨髓间充质干细胞有一定的局限。
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3.脐带血干细胞：脐带血除了包含正常血液的红细胞、白细胞，淋巴 细胞外，还包含单个核细胞、造血干细胞。目前最具应用价值的是利 用脐血中的造血干细胞治疗白血病（骨髓移植）。利用脐带血所含的 单个核细胞和造血干细胞治疗血液病以外的疾病，由于所含干细胞数 量稀少（仅占脐血细胞的0.98%），虽然有一定的治疗效果，但不能 等同于真正意义上的间充质干细胞治疗，可作为间充质干细胞治疗的 补充。
ES细胞的多能性是指ES细胞具有发育成多种组织的能力，参与部分 组织的形成。将ES细胞培养在不含分化抑制物的培养基上，可以形 成类胚体。
将ES细胞在特定培养基进行培养，可以定向分化成特定组织，如ES 细胞在含有白血病抑制因子（LIF）和维生素A酸（RA）的培养基上， 可以分化形成全壁内胚层，将ES细胞与胚胎细胞共培养或将ES细胞
分化抑制物的选择和培养基的设计 早期胚胎的选择及培养 分离及培养过程 ES细胞的鉴定 ES细胞的冷冻保存 ES细胞系的建立及保存
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第四节 胚胎干细胞的定向分化
动物细胞——干细胞
问 题 免 疫 排 斥
:
组织工程构成元件
种子细胞
组织工程三大元件 :
三维空间支架 (可降解)
讯号
种子细胞种类
已分化完全的「成熟细胞」
具有分化成其他细胞能力的「干细胞」
方
法
1.种子细胞的体外分离、培养扩增
2.种子细胞接种于三维支架上
3.诱导细胞分化
4.维持分化状态的培养
组织工程化骨骼（人工关节-软骨再生）
全能干细胞:具有形成完整个体的分化潜能 的干细胞. 多能干细胞:具有分化多种细胞组织的潜能, 但却失去了发育成完整个体的能力的干细胞.
专能干细胞:只能向一种类型或密切相关的两 种类型的细胞分化的干细胞.
全能干细胞
多能干细胞 专能干细胞
1.定义 2.来源与特点 3.胚胎干细胞的生物学特征 4.胚胎干细胞的培养建系 5.胚胎干细胞的鉴定 6.胚胎干细胞的应用前景与面临的难题
研究概况 定义 种类 组织工程
干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。
增殖
分化
干细胞的分类
全能干细胞 按分化潜能分类 多能干细胞 专能干细胞 胚胎干细胞 按发育阶段分类 成体干细胞
细胞的发育潜能
•全能性：细胞含有使后代细胞形成完整个体的 潜能,称为细胞的全能性。 •多能性：细胞虽具有分化出多种组织的潜能,但 却失去发育成完整个体的能力，细胞 的这种发育潜能称为细胞的多能性。 •单能性：细胞只能分化出一种细胞，细胞的这 种分化 潜能称为细胞的单能性。
显微外科方法
2.胚胎干细胞的分离培养
•细胞分化抑制物的选择和饲养层的制备 饲养层细胞 分化抑制因子 分化抑制培养基 •早期胚胎与原始生殖细胞的培养
培养条件： (1) 特殊的培养液：DMEM培养液+胎牛血清+非 必须氨基酸+β-巯基乙醇。 (2) 饲养细胞 (3) 分化抑制因子:LIF
动物细胞工程—干细胞技术
• 全能性或多能性 • 种系传递性 • 体外遗传可操作性 • 无限扩增(自我更新)
干细胞技术
面临问题
扩增变 异
来源问题
（宗教、法律及文 化背景）
技术普 及
干细胞技术
成体干细胞
成体干细胞是指存在于一种已经 分化组织中的未分化细胞，这种细胞 能够自我更新并且能够特化形成组成 该类型组织的细胞。
动物生物技术
干细胞技术
第一章
干细胞技术
干细胞技术
干细胞定义及分类
干细胞是一类具有无限的或者永生的自我更新能力的细胞,能够产生至 少一种类型的、高度分化的子代细胞。
胚胎
干细胞
按来
分
源分 类
成体
干细胞
全能 干细胞
按分化 潜能分
多能 干细胞
单能 干细胞
干细胞技术
胚胎干细胞（ES细胞）
胚胎干细胞（Embryonic stem cell，ESCs， 简称ES、EK或ESC细胞）是早期胚胎（原肠胚期 之前）或原始性腺中分离出来的一类细胞。
诱导性多能干细胞(Induced pluripotent stem cells, iPSCs或iPS) 技术是指通过导入特定的转录因子将终末分化的体细胞重编程为多能性 干细胞。
优点分析
分离和培 养宿主细
胞
基因导入 宿主细胞
细胞种植 及重编程
出现及鉴 定ES样
克隆
• 没有伦理学的问题 • 不会有免疫排斥的
➢生物学特性 •多能ห้องสมุดไป่ตู้ •迁移性 •可调控性 •广泛性
优点分析
• 相对容易获取 • 不存在组织相容性 • 致瘤风险很低，伦理学争议
较少 • 多向分化潜能
安立国第二版动物细胞工程思考题参考答案
哺乳动物的克隆方法：胚胎干细胞核移植、胚胎细胞核移植、胎儿成纤维细胞核移植、体细胞核移植。
第一章绪论课后习题答案1. 动物细胞工程主要有哪些内容？这些技术有何用途？答：1. 组织和细胞培养技术2. 细胞融合与单克隆抗体技术3. 细胞核移植技术4. 胚胎工程技术5. 干细胞技术6. 转基因技术7. 染色体工程细胞工程的应用有：A. 单克隆抗体的应用：疾病诊断与治疗、微量大分子物资的检测、贵重生物活性物的分离与提纯、特殊疾病治疗、与药物交联治疗疾病；B. 转基因技术的应用：建立疾病的动物模型、品种改良和抗病育种、“乳腺生物发应器”、基因代替治疗、异种器官移植、基因功能研究；C. 细胞与组织替代治疗；D. 治疗人类不孕症；E. 优良品种繁育；F. 生产转基因家畜；G. 保护濒危动物。
2.追踪动物细胞工程研究与应用的最新进展，并预测其发展趋势。
第二章细胞培养1、体外培养细胞有哪些类型？其生长特点有什么区别？答：体外培养的细胞根据其生长方式，主要分为贴壁生长型细胞和悬浮生长型细胞。
离体细胞必须贴附于底物上才能生长的细胞称为贴壁生长型细胞。
有机体的绝大部分细胞必须贴附在某一固相表面才能生存和生长。
动物细胞培养中，大多数细胞必须贴附在固相表面才能生长，当细胞布满表面后即停止生长。
从生长表面脱落进入液体得细胞通常不再生长而逐渐退化，这种细胞称为单层附壁细胞。
贴壁生长的细胞在活体体内时，形态各异，而体外培养状态下则在形态上比较单一而失去其在体内时原有的特征。
按照培养细胞的形态，主要可分为以下几类：成纤维细胞型、上皮型细胞、游走型细胞、多形型细胞；少数细胞类型在体外培养时不需要附着于底物而于悬浮状态下即可生长，包括一些取自血、脾或骨髓的培养细胞，如血液白细胞、淋巴组织细胞、某些肿瘤细胞、杂交瘤细胞、转化细胞等，这些细胞在悬浮中生长良好，可以是单个细胞或为细小的细胞团，观察使细胞呈圆形。
由于悬浮生长于培养液中，因此其生存空间大，具有能够提供繁殖大量细胞、传代方便、易于收获细胞等优点，易于大规模生产，便于过程的控制。
细胞工程(动物部分)
绪论1.细胞培养与组织培养：属于体外培养，是指生物细胞和组织在离体条件下的生长和增值。
细胞的离体培养称为细胞培养，组织的离体培养称为组织培养。
2.细胞融合：又称细胞杂交，是指两个或两个以上的细胞融合形成一个细胞的过程。
3.细胞核移植：是利用显微镜操作技术将细胞核与细胞质分离，然后再将不同来源的核与质重组，形成杂合细胞的过程。
4.干细胞：是动物体内具有分化潜能、并能自我更新的细胞，分为胚胎干细胞和组织干细胞。
5.转基因动物：是通过基因工程技术将外源的目的基因导入受体动物染色体内，外源基因与动物基因整合后随细胞的分裂而扩增，在体内表达并能稳定地遗传给后代的动物。
第一章1.细胞工程实验室与其他一般实验室的区别：要求保持严格无菌环境、避免微生物及其他有害因素的影响。
2.细胞工程能进行的六方面工作：无菌操作、培养、制作、清洗、消毒灭菌处理和储藏。
3.植物细胞工程实验室特殊的设置：光照条件的培养箱、试管苗需要温室和移植驯化室。
4.细胞工程实验室通用的仪器设备：超净工作台、二氧化碳培养箱、倒置显微镜、电热干燥箱、水纯化装置、低温装置、高压蒸汽消毒器。
5.实验室的生物安全分为p1，p2 ，p3 和p4四个生物安全等级，其中P4生物安全实验室等级最高。
第二章1.清洗的主要目的是清除培养器皿中的杂质和微生物等影响细胞生长的成分。
2.细胞培养过程中主要使用两类消毒方法:物理灭菌法法和化学消毒法。
物理法灭菌法：a.紫外线法适用于无菌室或超净工作台的台面等大面积消毒。
紫外线照射工作台面的距离不应超过1.5cm,照射时间以30min左右为宜。
（注意：紫外灯关闭5min后方可进入使用）b. 湿热消毒:适用于含有不耐热成分的培养基和试剂的消毒，为121.3℃，20min .（注意点：加足水、排尽气、气压降到0时才能打开盖）c.干热消毒法:适用于消毒玻璃仪器，160℃以上，并保持90~120min，以杀死细菌和芽孢 d.过滤除菌：是将液体或气体用微孔薄膜过滤,薄膜0.22~0.45um直径。
细胞工程复习资料
绪论1、细胞工程：按照一定的设计方案，通过在细胞、亚细胞或组织水平上进行实验操作，获得重构的细胞、组织、器官以及个体，创造优良品种和产品的综合性生物工程。
2、体外培养：指生物细胞和组织在离体条件下的生长和增殖。
3、细胞融合或细胞杂交：指两个或两个以上的细胞融合形成一个细胞的过程。
（单克隆抗体技术）4、细胞核移植：利用显微操作技术将细胞核与细胞质分离，然后再将不同来源的核与质重组，形成杂合细胞。
（克隆羊“多利”）5、染色体工程：把单个的染色体或染色体组转入或移出受体细胞，从而形成新的染色体组合和遗传构成。
（植物育种）6、胚胎工程：指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。
包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。
（畜牧优良品种繁殖技术）7、组织工程：将干细胞与材料科学相结合，将自体或异体组织的干细胞经体外扩增后种植在预先构建好的聚合物骨架上，在适宜的生长条件下干细胞沿聚合物骨架迁移、铺展、生长和分化，最终发育形成具有特定形态及功能的工程组织。
（人工软骨）8、转基因动物：通过基因工程技术将外源的目的基因导入生殖细胞或早期胚胎，并整合到受体细胞的基因组中，经发育形成所有细胞都包含目的基因的动物个体。
9、动物生物反应器：将目的基因在器官或组织中进行特异性高表达的转基因动物称为动物生物反应器。
（乳腺生物反应器）10、转基因植物：通过基因工程技术将外源的目的基因导入植物细胞直接进行诱导培养所形成的再生植株。
11、植物生物反应器：能够生产某些重要蛋白质和次生代谢产物的转基因植物。
第一章细胞培养的设施与基本条件1、细胞工程实验室应能进行六方面的工作：无菌操作、培养、制备、清洗、消毒灭菌处理和储藏2、超净工作台分为侧流式（垂直式）和外流式（水平式）：原理：将室内空气经粗过滤器初滤，由离心机压入静压箱，再经高效空气过滤器精滤，由此送出的洁净气流以一定的、均匀的断面风速通过无菌区，从而形成无尘无菌的高洁度工作环境。
《动物繁殖学》慕课答案
第一单元 绪论测试题单元作业1、简述动物繁殖学研究内容答：1、繁殖生理2、繁殖技术3、繁殖障碍及防治4、繁殖管理2、动物繁殖学的研究意义答：1、动物繁殖学是研究动物生殖活动及其调控规律和调控技术的一门学科，是加速畜禽品质改良、种畜扩繁、保证畜牧业快速发展的重要手段。
动物繁殖学在动物生产中占有重要地位，育种措施的落实、遗传规律的揭示、饲养对象的产出均离不繁殖学。
2、动物繁殖是种族延续的基础，是动物生产的关键性环节，是动物品种改良、生命科学研究、医疗与组织修复等的重要手段。
3、动物繁殖学在畜牧生产中的广泛应用可以有效的提高生产效率、提高畜种质量并减少生产资料的占有量。
第二章 动物生殖器官及机能测试题慕课《动物繁殖学》测试题答案第三章生殖激素测试题动物繁殖学国家精品王锋 、茆达干 、杭苏琴 、张艳丽 、万永杰 、王子玉查看我的评价雄性动物生殖生理单元测验已经超过规定的测试次数或提交截止时间已过。
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得A.不会出现第二性征B.没有性行为C.有生育力但会将隐睾遗传给后代D.没有生育能力2.00/2.002单选(2分)下列种公畜中单次射精量最多的是（ ）。
得A.猪B.牛C.马D.羊3单选(2分) 精细管中的（ ）是直接形成精子的细胞。
得A. 支持细胞B.生精细胞C.间质细胞D.足细胞4单选(2分)家畜精液的正常颜色为（ ）。
得A.淡绿色B.淡红色C.黄色D.乳白色5单选(2分) 睾丸中精子密度最大的部位是（ ）。
动物干细胞实验报告
一、实验目的1. 探讨动物干细胞在生物学研究和临床应用中的潜力。
2. 学习动物干细胞分离、培养和鉴定等基本实验技术。
3. 分析动物干细胞在不同培养条件下的生长特性。
二、实验原理动物干细胞是一类具有自我更新和分化能力的细胞，能够分化成多种细胞类型。
动物干细胞的研究在再生医学、疾病治疗和药物研发等领域具有广泛的应用前景。
本实验主要涉及以下原理：1. 干细胞的自我更新：干细胞具有自我更新的能力，能够通过有丝分裂产生更多的干细胞。
2. 干细胞的分化：干细胞在特定信号的作用下，可以分化成特定类型的细胞。
3. 干细胞的鉴定：通过检测干细胞表面标志物和功能特性，可以鉴定干细胞的类型。
三、实验材料1. 实验动物：小鼠、大鼠或兔等。
2. 培养基：DMEM/F12、DMEM、RPMI-1640等。
3. 细胞因子：表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、胰岛素、转铁蛋白、硒等。
4. 试剂：胰蛋白酶、抗凝剂、磷酸盐缓冲盐溶液（PBS）、DMSO、抗生素等。
5. 仪器：超净工作台、离心机、显微镜、酶标仪等。
四、实验方法1. 动物干细胞分离：（1）取实验动物的组织（如肝脏、骨髓等），用胰蛋白酶消化组织细胞。
（2）收集消化后的细胞悬液，用抗凝剂处理，离心分离细胞。
（3）用PBS洗涤细胞，调整细胞浓度。
2. 动物干细胞培养：（1）将分离得到的细胞接种于培养瓶中，加入含细胞因子的培养基。
（2）将培养瓶置于37℃、5%CO2的培养箱中培养。
（3）定期更换培养基，观察细胞生长情况。
3. 动物干细胞鉴定：（1）通过检测干细胞表面标志物（如CD34、CD44、CD90等）来鉴定干细胞的类型。
（2）通过检测干细胞的功能特性（如细胞增殖、分化等）来鉴定干细胞的活性。
4. 动物干细胞生长特性分析：（1）采用MTT法检测细胞增殖情况。
（2）采用集落形成实验检测细胞克隆形成能力。
（3）通过流式细胞术检测细胞表面标志物和功能特性。
细胞工程课件六动物干细胞
细胞工程课件六动物干细胞动物干细胞是具有自我更新和分化潜能的一类细胞，可以分化为不同类型的细胞，包括各种骨骼肌、神经元、肝细胞、心肌细胞等。
干细胞的特性使得它们成为生物医学和生物技术领域的重要研究对象。
本文将详细介绍动物干细胞的来源、类型、特性及应用。
一、干细胞的来源动物干细胞可从不同来源获得，包括胚胎干细胞、成体干细胞和诱导多能干细胞。
1.胚胎干细胞胚胎干细胞（Embryonic stem cells，ESCs）是从早期胚胎内膜（inner cell mass）中分离得到的一类细胞，具有自我更新和分化为所有细胞类型的潜能。
胚胎干细胞被广泛用于研究和治疗不同的疾病，如糖尿病、帕金森病、心脏病等。
但是，胚胎干细胞的获得和使用存在一些伦理和法律问题，如对胚胎的破坏和人类胚胎实验的限制。
因此，科学家们开始寻找其他来源的干细胞。
2.成体干细胞成体干细胞（Adult stem cells，ASCs）是存在于成体组织中的一类细胞，具有一定的自我更新和分化潜能。
成体干细胞包括骨髓干细胞、脂肪干细胞、皮肤干细胞等。
与胚胎干细胞相比，成体干细胞获得和使用较为容易，并且不存在伦理和法律问题。
3.诱导多能干细胞诱导多能干细胞（Induced pluripotent stem cells，iPSCs）是通过基因重编程技术将成体细胞向多能干细胞方向重新分化而得到的细胞。
iPSCs表现出与胚胎干细胞相似的自我更新和分化能力，但不需要使用胚胎，因此具有更广泛的研究价值和应用前景。
多能干细胞（pluripotent stem cells，PSCs）包括胚胎干细胞和诱导多能干细胞，具有分化为所有三个胚层（内胚层、中胚层和外胚层）的细胞类型的能力。
多能干细胞对于研究生物学、疾病诊断和治疗等领域具有重要价值。
祖细胞（multipotent stem cells，MSCs）是一类具有有限分化潜能的干细胞，能分化为特定的细胞类型，如骨骼肌、心肌、神经细胞等。
干细胞在宠物方面的应用
干细胞在宠物方面的应用随着人类对健康和科技的不断追求，干细胞技术已经成为了一项备受关注的研究领域。
据统计，干细胞技术不仅可以用于医学领域，而且在宠物领域也有着重要的应用前景。
那么，干细胞在宠物方面的应用有哪些呢？本文将为您详细分析。
一、干细胞在宠物医学中的应用1. 治疗运动损伤运动损伤是宠物常见的情况之一，常常导致宠物的运动能力下降，尤其是年老的宠物。
然而，干细胞能够通过分化为成骨细胞、软骨细胞或肌肉细胞等，在运动损伤治疗中发挥特殊的作用。
经过干细胞治疗后的动物表现出更早的运动恢复和局部肿胀、疼痛等症状的缓解。
2. 治疗消化系统疾病在动物肠道炎症或肠穿孔等情况下，干细胞也可以刺激肠道细胞的生长和再生，从而缩短动物的康复时间。
而引发这种治疗效果的原因是因为干细胞具有类似于免疫细胞的功能，可以有效产生一系列的细胞因子，结合体内的细胞即可恢复肠道的生理环境。
3. 治疗神经系统疾病在应用中，干细胞已经被证明能够重建一些神经细胞类型，在神经系统退行性疾病中具有可靠的治疗效果。
同时，通过干细胞治疗，可以释放出许多生长因子和细胞信号，刺激生长和修复神经细胞。
二、干细胞在宠物生殖方面的应用1. 干细胞在动物繁殖中的应用干细胞可以分化为多种助孕细胞类型，如生殖细胞，胚胎干细胞和间充质干细胞等，在动物辅助生殖中发挥重要作用。
同时，干细胞还可以用于繁殖高质量种马、牛等动物，提高其生产性能，从而在宠物繁殖中发挥出其巨大的应用潜力。
2. 干细胞用于抗衰老领域研究干细胞还可以用于宠物抗衰老领域研究。
随着宠物保健意识的日益提高，越来越多的宠物主人开始重视宠物长寿和健康。
而在干细胞领域中，研究人员已经证实了干细胞有延缓衰老，恢复细胞活力等重要作用。
三、干细胞在宠物化妆品领域中的应用因为在动物斑点、皮肤病等问题中，在动物化妆品中加入个性化的干细胞制剂可以提高这些化妆品的效果。
在紧肤、保湿、修复等方面，干细胞的应用有效帮助宠物获得更好的肤质。
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第ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ节 胚胎干细胞
• 通过建立体外培养的方法，获得保持增殖且 不分化的胚胎干细胞系的技术称为胚胎干细 胞的建系。 • 一、胚胎来源的干细胞系（p132 图6-1） • 1. 囊胚阶段的内细胞团（ICM） • 2. 来源于生殖嵴部位的原始生殖细胞（PGC） • 3. 来源于畸胎瘤组织（EC）
二、胚胎干细胞的建系
生化特征
• 具有碱性磷酸酶和端粒酶活性；
•
•
表达SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60等表面标志；
表达OCT-4蛋白；
人胚胎干细胞的表面标志
Otc4基因
• Otc4基因被认为在整个卵子生成和囊胚附 殖前以及早期外胚层中都表达，是受精卵 全能性的关键。 • Otc4基因只能在胚胎中才能得到完全表达， 而在成体动物体细胞中的表达基本上被关 闭。这就意味着克隆人技术的第一步就存 在很大问题。所以Otc4也被称为克隆人终 结者。
二、胚胎干细胞的鉴定方法
• 1. 形态鉴定： • 核质比大，体积小，细胞集落小鼠呈鸟巢状， 牛、猪等呈馒头状，人呈扁平、松散聚合体。 • 2. 核型分析： • 二倍体核型，染色体受损情况等。
• 3. ESC特异性表面抗原表达的鉴定： • 小鼠ESC以SSEA-1为主，人以SSEA-3、 SSEA-4为主。此外，ALP、Otc-4等都可作 为表面标志。 • 4. 端粒酶活性鉴定： • 端粒长度及端粒酶活性检测。 • 5. 体内外分化能力鉴定：体内外分化能力 鉴定：胚胎小体（EB，或称拟胚体）
• 培养基的准备： • 用DMEM（高糖）培养液，其中胎牛血清的 浓度和质量很重要，还要加非必须氨基酸； β -巯基乙醇。 • 常采用添加LIF等抑制ESC的分化潜能；添 加EGF等生长因子来促进ESC的增殖。
LIF抑止胚胎干细胞分化的信号通路
LIF 干细胞表面的LIF受体和gp130蛋白形成异二聚体 激活JAK酪氨酸激酶系统 激活MAP激酶ERK级联反应和STAT3蛋白 STAT3形成同型二聚体入核 激活核内靶基因转录
第四章 动物干细胞
• 第一节 干细胞的概念和分类 • 一、概念
干细胞（Stem cell）是一类具有自我更新和分化潜能的细胞,能产 生表型和基因型与自己完全相同的子细胞，并具有不同分化潜能。
胚胎干细胞
干细胞的主要生理特征：
• 形态特征：圆形或椭圆形，体积小，核质比大； • 生化特征：较高的端粒酶活性；一般都有独特的表 面标志； • 增殖特征: 自稳定性：单细胞或无脊椎动物——不对称分裂 哺乳动物——种群意义上的不对称分裂 • 分化特征：是干细胞最重要的特征。干细胞本生不 是终末分化细胞，具有再分化的潜力。
表达相应蛋白抑止ESC的分化
• 2. 胚胎的采集 • 一般囊胚期胚胎或后桑葚胚。 • 3. ICM的获取 • 1）直接分离法：囊胚于饲养层上自行发育成孵化 囊胚，待ICM扩大增殖时挑取。或使用链霉蛋白 酶处理ZP，获得裸胚培养。 • 2）免疫分离法：链霉蛋白酶去除囊胚晚期胚泡 ZP，依次转移至补体灭活和未灭活的抗血清中， 去除滋胚层细胞后，吸取ICM，移至饲养层培养。
• 4. ICM的离散 • 胰蛋白酶消化即可离散ICM。 • 5. 胚胎干细胞建系
三、胚胎干细胞的应用
研究意义
人胚胎发育机制及影响因素的研究。 用于药物机理及毒性实验的研究，减少人体 和动物的实验及临床研究。 将胚胎干细胞定向分化的细胞用于制造人体 细胞、组织和器官。
第三节、胚胎干细胞的生物学特性 与鉴定方法
鼻咽畸胎瘤
淋巴管瘤
生殖嵴与PGC（原始生殖细胞）
成体干细胞：神经干细胞
• • • • •
二）根据分化潜能分类 全能干细胞：如ESC 多能干细胞：如造血干细胞、间充质干细胞 定向祖细胞：如造血母细胞等。 专能干细胞：皮肤干细胞，成肌细胞等
• • • • • • •
三）根据干细胞存在的组织器官分类 胚胎干细胞 造血干细胞 神经干细胞 肝脏干细胞 皮肤干细胞 肌肉干细胞等
• 一、生物学特性 • 增殖与分化特征：
• 永生化(immortal)； • 能维持稳定的正常的二倍体染色体结构； • 有稳定的发育潜能，能被诱导增殖或分化； • 能参与胎儿所有组织的发育过程；
形态特征
• • 体积小、核大，有一个或多个核仁； 胚胎干细胞克隆紧密堆积，细胞之间无明显的 界限，细胞克隆有一定形状规律。
胚胎干细胞的诱导分化：
胎牛血清，骨髓基质细胞共培养
胚胎干细胞－－－－－－－－－－－－－－－造血细胞
• • • • • • 主要步骤包括： 1. 培养体系的选择和准备 2. 胚胎采集 3. ICM的获取 4. ICM的离散 5. ESC的建系
1. 培养体系的选择和准备
• 饲养层细胞的准备： • 饲养层细胞一方面对ESC细胞帖壁起支持作用， 另一方面其分泌蛋白可抑制ESC分化，维持其增 殖特性和多能性。 • 常用饲养层细胞为成纤维细胞（如STO成纤维细 胞系）、子宫内皮细胞、3T3细胞株等。 • 为了阻断饲养层细胞的分裂，而不影响其分泌蛋 白的产生，通常采用γ射线或丝裂霉素C处理之。
• 二、分类 • 一）根据发生来源分类 • 胚胎干细胞： 来自早期胚胎（ESC）、原始生殖细胞
（PGC）、或畸胎瘤组织（EC）等
• 成体干细胞：（MSC），神经干细胞（NSC）
如骨髓造血干细胞（HSC），间质干细胞
• ESC
什么是畸胎瘤
• 如果在胚胎不同时期，某些多能细胞从整体 上分离或脱落下来，使细胞基因发生突变， 分化异常，则可发生胚胎异常。 • 一般认为，这种分离或脱落发生于胚胎早 期，则形成畸胎；而如发生于胚胎后期，则 形成了具有内胚层、中胚层和外胚层三个胚 层的异常分化组织，即形成了畸胎瘤。
三、胚胎干细胞定向诱导分化的方 法
• 改变细胞的培养条件: 改变细胞的培养条件是ES细胞定向分化的基本 策略,常用的方法有:与辅助细胞共培养;在半固体培 养基中原位生长分化;添加生长因子、化学诱导剂等。
• 导入外源性基因,使其分化为某一特定类型的细胞。
• 体内定向分化,使ES 细胞多数分化为该组织特异性 的细胞。