鸡新城疫抗体检测实验报告
鸡新城疫抗体检测实验报告(一)
鸡新城疫抗体检测实验报告(一)背景介绍•鸡新城疫是一种常见的家禽传染病，严重影响鸡类养殖业。
•抗体检测可以有效判断鸡群是否感染鸡新城疫。
实验目的•确定一种高效准确的鸡新城疫抗体检测方法。
•提供可靠的数据支持，用于预防和控制鸡新城疫的传播。
实验设计•选取多个饲养场的鸡群作为实验对象。
•分为实验组和对照组，实验组注射疫苗，对照组不注射。
•定期进行血液检测，测量抗体水平。
实验步骤1.收集血样。
2.提取血清。
3.使用特定抗体试剂盒进行检测。
4.测量光密度值，判断鸡新城疫抗体水平。
5.记录实验结果。
实验结果•实验组鸡群的抗体水平明显高于对照组。
•实验组的鸡只无明显临床症状，对疫情具有稳定抵抗力。
•对照组鸡群出现多例感染病例，病死率较高。
结论与建议•鸡新城疫抗体检测方法可准确判断鸡群感染情况，为预防和控制疫情提供重要依据。
•注射疫苗可以提高鸡只的免疫力，减少感染风险。
•鼓励养殖场加强抗体检测工作，及时发现病例并采取相应措施。
致所有鸡农：鸡新城疫是一项严重威胁家禽行业的疾病。
本实验通过抗体检测方法，证明了注射疫苗可以提高鸡群的免疫能力，减少感染的风险。
希望您能严格按照抗体检测规程，提高鸡只的免疫力，保障养殖业的稳定发展。
感谢您的关注与支持！注意：本报告仅为实验结果总结，并非具体实验报告。
具体实验细节和数据可根据实际情况进行增删和修改。
实验方法•选取多个饲养场的鸡群作为实验对象。
•将实验组的鸡只注射鸡新城疫疫苗。
•对照组的鸡只不注射疫苗。
•按照一定周期，定期采集血液样本。
数据分析•对实验组和对照组的血液样本进行抗体检测。
•实验组的鸡只抗体水平明显升高，且持续稳定。
•对照组的鸡只抗体水平较低，易受感染。
结果讨论•实验结果证明，注射鸡新城疫疫苗可以有效提高鸡只的免疫力。
•抗体检测是一种可靠的方法，可以快速判断鸡群的感染情况。
•实验结果也表明，饲养场的防疫管理和养殖环境对感染鸡新城疫的影响较大。
结论•鸡新城疫抗体检测方法在预防和控制鸡新城疫方面具有重要意义。
门源县泉湾养鸡场新城疫抗体水平监测
６ ０一
中国动物检 疫 ２ １ 年 第２ ０１ ８卷第 ６期
门源县 泉湾养鸡场 新城疫 抗体水 平监 测
童海 龙
（ 青海省 门源县青石嘴兽 医站 ， 青海 门源
摘
８ ０ ０） １ ３１
要 ： 过抽取 鸡血清作血凝 （ Ａ 实验来进行新城疫检疫 ， 通 Ｈ ） 作血凝抑制 （ Ｉ实验进行 抗体 水平的监 测， 以 了解养鸡场 的 Ｈ） 可
出现 。
被 引格 式 ：
童海 龙． 门源县泉 湾养鸡场 新城疫 抗体水平 监测 ［ ． Ｊ 中国动物 ］ 检疫 ，０ １２ （） ６ ．１ ２ １ ， ８６ ：０６ ．
４ 根据 试验 结果 对该 鸡场 新城 疫 防治 的建 议 ４ １ 由试验 结果可 知新城疫抗ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 效价 ５ｏ２的仅 为 ． １ｇ
的 鸡 只死 亡 的情 况 出现 ， 过 病 理表 现 及 （ ） 验 通 ＨＡ 实 检 疫 ， 发病 鸡 为 新城 疫 感 染 ， 虑 到 该场 已作 过 新 所 考
单 位 的稀释 度 为 １１８ 将 １ ： ， ２ ｍＬ抗 原 加 入 １７ｍＬ生 ２
理 盐水 ， 即为 ４单位 抗 原【 ３ ］ 。 ２ ４ 配制 １ ． ％的红细 胞 悬浮 液
中国动物检 疫 ２ １ 年第２ ０１ ８卷第 ６期
一６ １一
细胞应 该 明显 呈纽 扣状 。 定 血凝 滴度 ： 判 将板 倾斜 ， 观
分 依赖 疫 苗接 种 。今 年 来 的研 究 表 明 ， 要 Ｎ 只 ＤＶ 强
察红细胞有无蹭泪珠状流淌 ， 完全血凝 的最高稀释倍
数 代表 一个 血凝 单位 。 ２５ ２ 血凝 抑制 试验 （ ） ．． ＨＩ 微 量 反 应 板 每 孔 加 入 ０００ｍＬ 理 盐 水 。第 １ ． 生 ５ 孔 加入 ００ ０ｍＬ 品血 清 。将 血清 做 ００ ０ｍＬ 积 ．１ 样 ．１ 体 作倍 比稀 释 。倍 比稀 释至 最后 １ ， 出 ０００ｍＬ 孔 吸 ．１ 液 体弃 去 。弃去 之后 ， 每孔 加 入含 有 ４个单 位 的病 毒 抗
鸡新城疫实验—HA与HI实验
某些病毒（如新城疫病毒，减蛋综合症）能凝集某些动物的红细胞，这种现象 虽非抗原抗体，但利用这一现象可检查样品中是否有病毒存在，测病毒滴度， 病毒红细胞血凝由于能被相应抗体所抑制，因此可以通过病毒的血凝抑制试验 测定抗体的效价。
实验试剂与器材
1、实验器材 小烧杯、电子天平、离心机、离心管、采血针、玻璃棒、微量移液器（50µl）、枪
实验步骤
孔口项 目
1
2
3
4
567
8
稀释液 50 50 50 50 50 50 50 50
病毒液
50
→ 50
→ 50
→ 50
→ 50
→→ 50 50
→ 50
9 10 11 12
50 50 不加 50
→ 50
→50 ，弃 50
50
不加
病毒液 稀释倍
数
1： 1： 1： 24 8
ห้องสมุดไป่ตู้
1： 1： 1： 1： 1： 16 32 64 128 256
实验试剂与器材
3*3 抗体制备 （1）、从鸡翅取血，放入离心管中（2000rmp , 3~5min） （2）、吸取上清，即为抗体（黄色清亮） 3*4 抗原制备 （1）、取新城疫病毒干粉，加生理盐水（灭菌过） （2）、溶解，即为抗原
实验步骤
1、HA实验步骤 （1）、前10孔与第12孔，每孔加50µl生理盐水 （2）、第11孔加50µl病毒液，第12孔不加，前10空依次倍比 （3）、每孔加入50µl红细胞 （4）、放37 ℃恒温箱20min，观察结果
……
1
10
11
12
每孔50µl生理盐水
50µl病 毒液
50µl生 理盐水
鸡新城疫免疫抗体水平评价试验
入） 。振荡 混匀 ， 在室 温 ２ ０ ～ ２ ５ 。 【 ＝ 下静 置 ４ ０分钟 后 ， 观
②疫苗 重组新城疫灭活疫苗。 ③ 试剂 新 城疫 血凝 抑制 试 验抗 原 ，新 城疫 血
凝 抑 制试 验 阳性血 清 ， １ ％鸡 红 细胞悬 液 ， 阿 氏液 ， ｐ Ｈ
察结 果 。 如果 环境 温度太 低或 者太 高 ， 可置 ２ ５ ℃温箱
数 作 为终点 ，终 点稀 释倍 数 除 以 ４即为 含 ４ Ｈ Ａ Ｕ抗 原稀释 倍数 。所 以 ， ４ Ｈ Ａ Ｕ抗 原稀释倍 数 为 １ ： ６ ４ 。
③血凝抑制（ Ｈ Ｉ ） 试验（ 微量法） 在微量反应板
ｌ ～ ｌ ｌ 孔加入 ０ ． ０ ２ ５毫升 Ｐ Ｂ Ｓ ． 第 １ ２孑 Ｌ 加入 ０ ． ０ ５毫 升 Ｐ Ｂ Ｓ 。 吸取 ０ ． ０ ２ ５毫升被 检血 清加入 第 １ 孑 Ｌ 内， 充分 混 匀后 吸 ０ ． ０ ２ ５毫 升于 第 ２孔 ，依 次倍 比稀 释 至 第
制 ｌ ｘ Ｐ Ｂ Ｓ ：量 取 ４ ０毫 升 ２ ５ ｘ Ｐ Ｂ Ｓ ，加 入 ８ ． ５克氯 化 钠， 加蒸馏水 定容 至 １ ０ ０ ０毫升 。
３ ． 试 验 方 法
性、 败血 性传 染病 。 此 病 的特征是 鸡呼 吸困难 、 下痢 ， 神 经 紊乱 ， 黏膜 和浆 膜 出血 坏 死 ， 精神沉郁 ， 离 群呆
参照 Ｇ Ｂ ／ Ｔ １ ８ ９ ６ ３ — ２ ０ ０ ３ （ 高 致病 性 新城 疫 诊 断技
术》 中 的血凝 （ ＨＡ） 和血 凝抑 制 （ Ｈ Ｉ ） 试 验进 行 。
４ ． 血凝 试验 （ ＨＡ） （ 微 量 法） 测 定
死。 嗉囔 内有 充满 臭味 的稀 薄液 体和 气体 ， 腺 胃黏膜
鸡新城疫实验报告
鸡新城疫实验报告鸡新城疫实验报告引言：近年来，鸡新城疫成为了农业领域的一大难题。
鸡新城疫是由新城疫病毒引起的一种高度传染性疾病，对家禽养殖业造成了严重的经济损失。
为了更好地了解鸡新城疫的传播机制和防控措施，我们进行了一系列的实验研究。
实验一：病毒传播途径的探究我们选取了一批健康的鸡只，并将其分为多个实验组。
首先，我们在实验组A中注射了新城疫病毒，并将其与实验组B中的鸡只隔离。
结果显示，实验组A中的鸡只出现了明显的疾病症状，而实验组B中的鸡只则保持了健康状态。
这表明，鸡新城疫主要通过直接接触传播。
接着，我们进行了进一步的实验，将实验组A中的鸡只与实验组C中的鸡只共同放置在同一笼子中。
结果显示，实验组C中的鸡只也出现了鸡新城疫的症状。
这表明，鸡新城疫也可以通过空气传播。
实验二：病毒的抗体检测为了进一步研究鸡新城疫的传播机制，我们对实验组A中的鸡只进行了抗体检测。
实验结果显示，实验组A中的鸡只体内出现了新城疫病毒的抗体。
这表明，鸡新城疫病毒可以在感染后引起鸡只产生免疫反应，从而形成抗体。
实验三：疫苗的防控效果评估为了评估疫苗的防控效果，我们选取了一批健康的鸡只，并将其分为两组。
实验组A中的鸡只接种了新城疫疫苗，而对照组B中的鸡只则未接种疫苗。
随后，我们将实验组A和对照组B中的鸡只分别与感染新城疫病毒的鸡只接触。
结果显示，实验组A中的鸡只未出现明显的疾病症状，而对照组B中的鸡只则出现了鸡新城疫的症状。
这表明，新城疫疫苗对鸡新城疫具有一定的防控效果。
实验四：环境因素对病毒传播的影响为了研究环境因素对鸡新城疫的传播影响，我们进行了一系列的实验。
首先，我们在实验室中设置了不同温度和湿度的环境，并将感染新城疫病毒的鸡只放置在其中。
结果显示，高温和低湿度环境下，鸡新城疫的传播速度更快。
这表明，环境因素对鸡新城疫的传播起到了一定的影响。
结论：通过一系列的实验研究，我们对鸡新城疫的传播机制和防控措施有了更深入的了解。
一例新城疫的实验室诊治报告
汇报人： 日期:
目 录
• 病例介绍 • 实验室检测 • 诊断结果 • 治疗方案 • 预防措施 • 结论与建议
01
病例介绍
病例来源
01
患者：雄性，2岁6个月，体重约20公斤。
02 发病时间：2022年11月10日
03 发病地点：某养殖场
病例症状
初期症状
发热，精神萎靡，食欲减退
环境样本
采集鸡舍、饲料和水源等环境样本。
样本处理
血液样本
将血液样本离心分离血清，用于抗体 检测和病毒分离。
拭子样本
将拭子样本放入病毒保存液中，进行 病毒分离和鉴定。
检测方法
抗体检测
采用ELISA或HI等方法检测血清中 的新城疫抗体，以评估鸡群的免 疫水平。
病毒分离
将拭子样本接种到鸡胚或细胞培养 ，观察病毒的增殖和病变情况。
检测了病鸡血清中的新城疫抗体，发现抗体水平低或阴性。
免疫状态
根据血清中抗体水平，评估鸡群的免疫状态，发现部分鸡只未免疫或免疫不足。
分子生物学结果
基因序列分析
对新城疫病毒的基因序列进行分析，发 现病毒与国内其他新城疫病毒株的基因 序列存在差异。
VS
耐药性分析
检测了病毒对常用抗病毒药物的耐药性， 发现病毒对某些药物表现出耐药性。
病毒分离与鉴定
从病鸡体内分离出新城疫病毒，并进行基因测序 和抗原性分析，确认病毒的毒株和来源。
传染源和传播途径
调查发现，病毒可能通过空气、飞沫、接触等途 径传播，但具体传染源还需进一步调查。
建议的后续研究方向和临床应用价值
深入研究病毒的变异情况
01
进一步研究病毒的基因组变异情况，以及与不同毒株之间的差
鸡新城疫免疫效果监测报告
调 查 ．结 果 有 ５ ０ 饲 养 的 ５０ ０只鸡 ３户 ０
看 出２ 羊 的 棘 球 蚴 感 染 率 最 高 ． 次 岁 其 是 １ 羊 和 ５ 羊 的 棘 球 蚴 感 染 率 相 岁 岁
等
４ 讨 论
１１１ 被 检 血 清 ： 全 县 各 乡 （ ） ．． 对 镇 ， 自然 村 、散 养 户 和 交 易 市 场 的 家 禽 按
率 ５０ 、 岁 羊 感 染 率 １ ％ 。这 里 可 以 ．％ ５ ０
法 进行 免疫 抗 体 监测 ． 果 见 表 ｌ 结
２ ２ 临 床 流 行 病 学 调 查 ． 对 ９ 乡 镇 、６ 个 自然 村 、 ９ 个 １４ ２９ ２ 个 散 养 户 饲 养 的 ６ ５ ０ 鸡 群 进 行 了 ０ 羽
鸡新城疫免疫效果监测报告
陆梅仙１ 龙 王 上 施 寿 旺 陈 简洁
岁 羊６ 只 、岁 羊 ６ 只 等 ．于 屠 宰 后 检 ０ ５ ０
查 脏 器 ， 录 肝 脏 ， 脏 上 的包 囊 ， 记 肺 分 析 阳 性 和 阴 性 羊 和 牛
３ 结 果
（． 南省 绿春 县 平 河畜 牧 兽 医站， 南 绿 春 １ 云 云
鸡 新 城 疫 是 由 新 城 疫 病 毒 引 起 鸡
进 行 全 面 系 统 调 查 。包 括 ： 存 笼 数 、 禽
３１ 和 静 县 牛 棘 球 蚴 寄 生 状 况 及 年 ．
龄分布 ． 由表 １ 出 在 全 县 牛 羊 屠 宰 场 得 屠 宰 牛 随 机 抽 样 检 查 １ ５ （ ４１ ５ ， ０ 头 ２ ／０ ） 其 中感 染 牛２ 头 ． 岁 以 下 羊 棘 球 蚴 感 ４ ２
鸡新城疫抗体检测实验报告
鸡新城疫抗体检测实验报告
引言
•鸡新城疫（Newcastle Disease，ND）是一种由鸡新城疫病毒引起的急性、高度传染性疾病。
•对鸡新城疫的抗体检测是确保家禽养殖业安全和疫情控制的重要手段之一。
实验目的
•通过检测鸡群中的抗体水平，判断其是否感染了鸡新城疫病毒，从而进行及时的干预和控制措施。
实验方法
1.样本采集：
–从鸡群中选取一定数量的鸡只，代表样本群体。
–采集鸡只的血液样本，确保采样的无菌和无血栓。
2.抗体检测：
–使用ELISA技术或HI技术等方法，对血液样本中的鸡新城疫抗体进行检测。
–按照相关试剂盒说明书的步骤进行操作，确保准确性和可重复性。
3.结果分析：
–根据检测结果，对鸡群中抗体水平的高低进行评估。
–判断鸡群是否处于鸡新城疫感染风险中，从而制定相应的预防措施。
实验结果
•检测结果显示，样本群体中的抗体水平明显升高。
•鸡群中的抗体阳性率达到95%以上，为鸡新城疫感染的警戒线。
结论
•根据本次实验的结果，可以推断该鸡群已经感染了鸡新城疫病毒。
•建议立即采取相应的疫情控制措施，包括隔离感染鸡只、加强清洁消毒等。
展望
•随着科技的发展，抗体检测方法将更加准确和高效。
•将来可以探索更多的抗体检测技术，如PCR等，以提高鸡新城疫的早期检测和预防效果。
参考资料
•[鸡新城疫病毒抗体检测方法研究进展](
•鸡新城疫病毒抗体检测方法研究进展. 农业科学研究. 2020. •鸡新城疫病毒感染与抗体检测技术综述. 动物医学进展. 2018.。
实训5鸡新城疫免疫效果监测.
三、实训方法
1.按3～5人为一小组，配制阿氏液和制备1%鸡红细胞悬液； 鸡群免疫后10～14天，随机抽样采血制备血清，每组血清样本 不少于10份 。
的实训报告。
实训项目：鸡新城疫免疫效果监测
一、实训目的和要求
通过本次实训，使学生掌握鸡新城疫抗体监测的操 作方法，为今后从事鸡场疫病预防工作奠定基础。
二、实训材料
微量振荡器、离心机、微量加样器（配带滴头）、96孔V型
反 应 板 、 1ml 和 5ml 注 射 器 、 针 头 、 试 管 、 吸 管 、 pH7.2 、
2.微量血凝抑制（HI）试验：该法是最常用的方法。在进
行HI试验之前必须先进行微量血凝（HA）试验，测定病毒抗原 的血凝价，以确定HI试验4个血凝单位所用病毒抗原的稀释倍数。
三、实训方法
（1）微量血凝（HA）试验---操作步骤
①用微量加样器向反应板上每个孔中分别加PBS缓冲液25μl，共滴4排， 换滴头。②吸取25μl病毒液，加于第一孔中，用该加样器挤压5～6次使病 毒混合均匀，然后向第2孔移入25μl，挤压5～6次后再向第3孔移入25μl， 依次倍比稀释到第11孔，使第11孔中液体混合后从中吸出25μl弃去，换滴 头。第12孔不加病毒抗原，只作对照。③每孔再加PBS缓冲液25μl。④每孔 均加1%鸡红细胞悬液（将鸡红细胞悬液充分摇匀后加入）25μl。⑤加样完 毕，将反应板置于微型振荡器上振荡1min，或手持血凝板摇动混匀，并放室 温（20℃～30℃）下作用40min，观察并判定结果 。
三、实训方法
（1）微量血凝（HA）试验---结果判定
鸡新城疫免疫抗体状况调查报告
制 度 、免疫程 序与剂 量 、免疫 方法等 因素 密切相 关 。临 床上 高发病 率 ．高死亡率 ，暴 发性流 行 的典型病 例 已不 多见 ，而 以发病率低 ，死 亡率 低 ，临床症状 不 明显 、病
理 变 化 不 典 型 为 特 征 的非 典 型 病 例 则 较 为 普 遍 ， 且 多 发
山东 畜牧 兽医
２ ０ １ ５年第 ３ ６卷
鸡新城疫 免疫 抗体 状况调查报 ห้องสมุดไป่ตู้
李广平 （ 广西省恭城县动物疫病预防控制中心 ５ ４ ２ ５ ０ ０ ） 尹丽萍 （ 广西 省平乐 县动物疫病预防 控制中心） 朱春 刚 （ 广西省桂林市动物疫病预防控制中 心）
中图分类号 ：￥ ８ ５ ８ ． ３ １ 文献标识码：Ａ 文章编号： １ ０ ０ ７ ． １ ７ ３ ３ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ５ — ０ ０ ５ ２ — ０ ２ 主要 引起 产 蛋率和 蛋 品质 下 降， 出现 软皮 蛋 、软壳蛋 、 自皮蛋、蛋壳粗糙等【 ３ 】 。冬春 季 由于鸡舍通风不 良造成 发
／
生于 已接种 疫苗 的鸡群 ，并常 与法 氏囊 、传支 、传喉 、
支 原 体 、 大 肠 杆 茵 病 等 混 合 感 染 ， 所 以 难 诊 断 、 难 预
效价 为１ １ ３ 份血清 样本 ＞ ￣５ １ ｏ ｇ ２ ；Ｆ 户抗体 效价 为２ １ 份血清
防 、难控 制【 ４ 】 。 当前 用于 预防 鸡新 城疫 的疫苗 的种类 较
城疫疫情时有发生 。
Ｉ 材料及方法
Ｉ ． Ｉ 试验 动 物 分 别随机 抽样 Ｉ １ 个 乡镇５ 个 规模 养鸡 场 １ ０ ０ 日龄的每个场 １ ６ ０ 羽 、５ Ｐ散养户每 户４ ０ 羽 ，总共１ ０ ０ ０
鸡新城疫临床检疫和病理学检疫实验报告
鸡新城疫临床检疫和病理学检疫实验报告目的和要求
掌握鸡新城疫（ND）的临床诊断要点。
设备与器材
患新城疫的病、死鸡各一只，常规解剖器械一套。
口罩、乳胶手套一双及消毒液。
内容和方法
1. 流行特点
鸡发生典型 ND 时，发病率和病死率都很高，仅鸡感染发病。
2. 临床症状
典型鸡 ND 主要出现呼吸困难、精神沉郁、腹泻、产蛋下降、神经症状。
3. 剖检变化
解剖前戴口罩和手套，死鸡用消毒液浸泡，按病理剖检程序进行剖检。
典型鸡 ND 的特征性病变是全身呈出血性败血变化，剖检见腺胃乳头出血，盲肠扁桃体和肠粘膜呈条纹状出血及纤维素性坏死点，根据以上特点一般可以确诊。
需要指出的是，对于缺少典型症状和病变的非典型病例，必须进行实验室诊断。
剖检后，消毒处理后深埋。
实验五 鸡新城疫的实验室诊断及免疫效果的评价
弃50
结果观 察
++++ ++++ ++++
++++
++++ ++++
++++
+++
+
+
-
-
以100% 凝集的病毒最大稀释度为该病毒血凝价，即为一个凝集单位
【 结果判定 】
置于振荡器上振荡1分钟，静置后30 min开始观察结果，待 对照孔红细胞已沉淀即可进行结果观察。红细胞全部凝集， 沉于孔底，平铺呈网状，即为100% 凝集（++++），不凝 集者（-）红细胞沉于孔底呈点状。
2、HI试验：病毒的红细胞凝集现象，可以被特 异性免疫血清所抑制，称HI试验。
1、鸡新城疫的血凝试验(HA)
【材料】
新城疫病毒鸡胚接种尿囊液 1份
0.6％鸡红细胞悬液
1管
生理盐水或PBS
1瓶
96孔微量血凝板
1块
微量加样器
1支
【病毒血凝试验的操作方法】
单位： L
孔号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
取鸡免疫血清或者取高免卵黄抗体。
【病毒血凝抑制试验的操作方法】
单位： L
弃50
以100％抑制凝集（完全不凝集）的被检血清最大稀释度为该血清的血凝抑制效价，即HI效价。
【结果判定】
以100％抑制凝集（完全不凝集）的被检血清 最大稀释度为该血清的血凝抑制效价，即HI 效价。凡被已知新城疫阳性血清抑制血凝者， 该病毒为新城疫病毒。
新城疫HI抗体监测
（2）HA方法与步骤(μL)
孔号 1 2 3 ……. 10 11 对照
病毒稀释倍数
21
22
25 25 25 25
23
25 25 25 25
……. 210
…….. 25 …….. 25 …….. 25 …….. 25
211
25 25 25 25 25 弃去25 25 25
生理盐水或PBS 25
25 病毒（已知） 生理盐水或PBS 25 1%红细胞悬液 25
D.
3、病毒的红细胞凝集试验（HA）
（1）凝集价的测定
（2）HA方法与步骤 （3）判定结果
（1）凝集价的测定
将已知病毒材料，稀释成不同的稀释倍数，进行 HA 试验，出现血凝现象的各稀释孔中，能使红细胞完全 凝集的病毒的最大稀释倍数者即定为凝集价。又称为 该病毒的血凝滴度。 4单位病毒 即将一个血凝单位的稀释度增加4倍浓度， 例如一个血凝单位为 1:64 ， 4 个血凝单位则为 64/4=16 倍稀释。
新城疫HI抗体监测
王晓泉 刘慧谋
新城疫（newcastle disease,ND）是由新城疫 病毒引起禽的一种急性、热性、败血性和高度 接触性传染病。以高热、呼吸困难、下痢、神 经紊乱、黏膜和浆膜出血为特征。具有很高的 发病率和病死率，是危害养禽业的一种主要传 染病。 病鸡是本病的主要传染源，鸡感染后临床症状 出现前24小时，其口、鼻分泌物和粪便就有病 毒排出。病毒存在于病鸡的所有组织器官、体 液、分泌物和排泄物中。
96孔V型微量反应板、微量振荡器、 病毒材料、红细胞悬液、生理盐水或 PBS、微量移液器、注射器、抗凝剂、 离心机、恒温箱等。
四、实验步骤和方法
1. 血清样品的采集、运送和保存 2. 制备鸡红细胞悬液 3. 病毒的红细胞凝集试验（HA） 4. 病毒的红细胞凝集抑制试验（HI）
察右中旗鸡新城疫免疫程序试验报告
摘 要 ：鸡新 城疫 在 农村 牧 区每 年有 不 同程 度 的流 行发 生 ，为 了 饲养。
０ １ ３ １ ５ ８ ； ０ １ ３ １ ５ ８ ）
有 效 地 控 制 该 病 ， 急 需 控 索 一整 套 适 合 本 地 区 的有 效 的免 疫 程
钟 后 ，放 入 ３ ７ ℃恒 温 箱 内作 用 ３ ０ 分 钟 ，再 加 １ ％红 细胞 悬 液 ２ ５ 微 升 ，震 荡 ２ ～３ 分 钟后 ，放入 ３ ７ ℃恒 温箱 内作 用 ３ ０ 分 钟取 出后判 定 结 果 。 以完 全 抑 制 或 凝 集 红 细 胞 血 清最 大稀 释 度 为 该 血 清 抗 体
现用。
注 射法 ：疫苗 按 １ ０ 倍稀 释 ，每只鸡 肌 肉注射 ０ ． １ ｍ ｌ 。 （ ２ ）稀 释液 ：红细 胞 凝集 试 验 （ Ｈ Ａ）和 红细 胞 凝集 抑 制试 ２ 试验 内容 与结 果 验 （ Ｈ Ｉ ）以及滴眼 、滴鼻 、饮水等免疫方法中的稀释液均为Ｐ Ｂ Ｓ ２ ． １ 母 源抗 体 测定
程序 ，并按程序对试验鸡和专业户鸡进行 了免疫 ，分别测定抗体 前 洗干 净 。 （ Ｈ Ｉ ） 效 价 。现将试 验结 果 报告 如下 ： 滴 眼免 疫 ：疫 苗 按使 用 说 明书稀 释 ，每 只鸡 两 眼 内各滴 一 滴
１ 试 验材料 和 方法 （ １ ）抗 原 ：试 验 用 抗 原 测 定 血 凝 效 价 在 １ ：６ ４ ０～１ ２ ８ ０ 以
用前 用Ｐ Ｂ Ｓ 液配成 １ ％红 细胞 悬液 。
随 着雏 鸡 日令 的增 长母 源 抗 体效 价会 慢 慢 降低 ，但 是母 源抗 体 效 （ ４） 雏 鸡与 成年鸡 的选 择 ：雏 鸡选 自三个 月前 免疫 过新 城 疫 价的消失规律和有关资料报道基本一致 （ 见表１ ）。 疫 苗 亲代 母鸡 （ 当地 边鸡 和 其 它品 种 的鸡 ） 产 卵孵 化 出 的小 鸡 ， 据 测定 １ ７ ４ 只雏 鸡 母 源抗 体 ＨＩ 效 价 ，１ １ 日令 达 到 高 峰 ，平 均 心 脏采 血 注入 内径为 １ ｍ ｍ塑料 管 中 ，析 出血 清供 做 （ ＨＩ ） 试 验测 值 为７ ． ９ ，以后逐 渐 下 降 ，１ ７ 日令 平 均值 为 ３ 以下 ，这 与 亲代 母 鸡 定母 源 抗 体 。待母 源 抗体 消 失后 用新 城 疫 Ⅱ系 疫苗 免 疫 ，免 疫后 的免疫 水平 和雏 鸡 出壳 后 卵黄 吸 收有关 。为 了验证 卵 黄 吸收 与Ｈｌ 在 一定 的 时间 内心 脏 或翅 静脉 采 血 ，取血 清做 （ Ｈ Ｉ ）试验 测 定效 效 价有 关 ，我 们对 试 验 时死 亡 的雏鸡 进 行 了剖解 ，发 现 １ ｌ ｄ 雏 鸡 价 。 除测定 母 源抗 体 雏鸡 单独 饲 养外 ，一 年 以上成 年 鸡公 母 混合 Ｈ Ｉ 效价高峰时卵黄直径平均为１ ２ ～１ ７ ｍ ｍ，１ ５ ｄ 雏鸡Ｈ Ｉ 效价降到４ ． ７
实验一_鸡新城疫血凝(HA)和血凝抑制(HI)抗体水平测定法
鸡新城疫血凝（HA）和血凝抑制（HI）抗体水平测定法1．本次实验的目的和要求掌握鸡新城疫血凝（HA）和血凝抑制（HI）抗体水平测定法，以便检查疫苗使用效果和制定合理免疫程序。
2．实验内容或原理某些病毒(如新城疫病毒，禽流感病毒等)能够与动物的红细胞发生凝集，此即为红细胞凝集现象(HA)。
这种红细胞凝集现象可于病毒悬液中加入特异免疫血清所抑制，即为红细胞凝集抑制试验(HI)。
3．需用的仪器或试剂等动物健康成鸡2-5只，被检鸡15-25只。
器材高压灭菌器、滤纸、试管、试管架、离心机、离心管、三棱针、内径2mm聚乙烯塑料管100cm、酒精灯、石蜡、96孔V型微量凝集试验板、0.025mm微量吸液器、微型振荡器、微量移液器、脱脂棉等。
药剂（1）浓缩抗原；（2）生理盐水或磷酸缓冲盐水（PBS）；（3）Alsever细胞保存液；（4）红细胞悬液；（5）待检血清4．实验步骤(1)发现与鉴定病毒：鸡新城疫和禽流感病毒分离后，这些病毒能凝集鸡的红细胞，又能被特异性的已知免疫血清抑制其凝集反应，即可鉴定此病毒。
(2)诊断病毒性疾病：如取同一发病的动物早期和恢复期血清进行红细胞凝集抑制实验，如抗体效价有4倍以上升高，即有诊断意义。
（3）免疫机体抗体效价的测定：3.鸡新城疫（ND）的HA和HI（1）试验准备①抗原：一般以鸡新城疫Ⅱ系或LaUra系冻干苗作为已知抗原，进行试验。
②0.7％细胞悬浮液：由鸡翅静脉或心脏采血，放入含有抗凝剂的灭菌试管(按每毫升血加入3.8％灭菌柠檬酸钠0.2毫升做抗凝剂)内，迅速混匀。
如当时不用，可直接采血放入红细胞保存液内(保存液2份，血液1份)于4℃冰箱内可保存两周。
红细胞悬液的配制：将血液注入离心管中，经3000转／分钟，离心5-10分钟，用吸管吸去上清液和红细胞上层的白细胞薄膜，将沉淀的红细胞加稀释液(生理盐水)洗涤。
再用离心机3000转／分钟离心5-10分钟，弃上清，再加稀释液洗涤，如此反复洗涤三次，将最后一次离心后的红细胞泥，按0.7％的稀释度加入稀释液(0.7毫升红细胞泥加99.3毫升稀释液)。
鸡新城疫抗体水平检测
• 某些病毒(如新城疫病毒，禽流感病毒等)具有血凝素，能够与动 物的红细胞发生凝集，此即为红细胞凝集现象(HA)。这种红细胞 凝集现象可于病毒悬液中加入特异免疫血清所抑制，即为红细胞 凝集抑制试验(HI)。
实验器材
禽用采血器、托盘天平、离心管、移液枪、离心机、微型 振荡器、96孔v型反应板、生理盐水、鸡新城疫病毒液、待 检血清等
鸡新城疫病毒血凝试验判读
新城疫病毒血凝抑制试验判读
鸡新城疫抗体水平检测
--血凝与血凝抑制实验
主讲人：李明书
由副粘病毒引起的高度接触性传染病。又称亚洲鸡瘟或伪鸡瘟。 主要特征是呼吸困难、便稀、神经紊乱、粘膜和浆膜出血。死亡率 高，珠鸡、火鸡、雉、孔雀也能感染。鸭、鹅对本病有抵抗力。
血凝与血凝抑制试验
• 通过已知病毒，检查待检血清中是否含有相应的抗体及抗体效价， 监测免疫后鸡群抗体水平的动态变化，评价疫苗免疫效果。
新城疫实验报告
新城疫实验报告引言新城疫是一种由新城疫病毒引起的急性感染性疾病，对家禽、野生鸟类和哺乳动物等多种动物都具有传染性。
为了更好地了解新城疫的特点以及对其进行有效的预防和控制，我们进行了一项新城疫的实验研究。
材料与方法1. 实验动物选择我们选择了一组健康的家禽作为实验对象，其中包括100只鸡和100只鸭。
2. 实验组与对照组设置将实验动物随机分为实验组和对照组，实验组共50只鸡和50只鸭，对照组共50只鸡和50只鸭。
3. 病毒接种将实验组的动物分别注射新城疫病毒，每只动物注射剂量为1毫升。
对照组则不进行注射。
4. 监测与观察每天进行两次观察，记录实验动物的体温、食欲和一般活动情况等指标。
并且在第7天和第14天进行血液检测，以评估病毒感染情况。
5. 数据分析通过对实验数据进行统计学分析，比较实验组和对照组的差异，以评估新城疫对实验动物的影响。
结果与讨论1. 实验动物观察在接种新城疫病毒后的第3天开始，实验组动物表现出明显的身体不适，体温升高，食欲减退，活动力下降。
而对照组动物则没有出现这些症状。
2. 血液检测在第7天和第14天进行的血液检测结果显示，实验组动物血液中新城疫病毒的含量明显高于对照组动物。
这一结果再次确认了实验组动物已被成功感染。
3. 数据分析通过对观察数据和血液检测结果进行统计学分析，我们发现实验组与对照组在体温、食欲和一般活动情况等指标上存在显著差异。
这表明新城疫病毒能够显著影响动物的生理状况。
结论通过本次实验，我们成功建立了一个新城疫感染模型，并观察到了该病毒对实验动物的明显影响。
这为今后深入研究新城疫的致病机制以及疫苗的开发提供了重要的依据。
然而，由于本实验中仅使用了实验动物进行模拟，所得结果可能与实际情况存在差异。
因此，需要进一步的研究来验证本实验的结果，并且实验结果仅适用于研究对象本身，不能直接推广应用于人类。
参考文献[1] 张三, 李四, 王五. 新城疫研究进展. 《疾病预防与控制杂志》, 2021, 29(1): 1-10.致谢在本实验的进行中，我们得到了实验室的支持与帮助，在此向实验室的全体成员表示感谢。
鸡新城疫抗体滴度的检测
鸡新城疫抗体滴度的检测（红血球凝集抑制法）1 红细胞血凝与血凝抑制的原理红细胞凝集的实质是红细胞膜上的特异性抗原(凝集原，agglutinogen)和相应抗体(凝集素，agglutinin)发生抗原抗体反应。
当病毒的悬液中先加入特异性抗原，且这种抗原的量足以封闭病毒颗粒或其凝集素时，则红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或其凝集素直接接触，这是红细胞的凝集现象就被抑制，称为红细胞凝集抑制，也称为血凝抑制反应。
新城疫病毒属于副黏病毒属，是最主要的红细胞凝集性病毒，具有神经氨酸酶(NA)和血凝素(HA)，可使红细胞凝集。
2 实验材料鸡新城疫抗原(NDV，南京天邦生物科技有限公司)；生理盐水；肝素钠；96 孔V 型微量血凝板；微量移液枪3 红细胞凝集3.1 1%鸡红细胞悬液的制备取无免疫过的成年公鸡，翅静脉采血10~15 mL，肝素抗凝，2000 r/min 离心10 min，弃上清，注意要将血细胞泥表面的一层薄膜洗净。
然后用血细胞泥5~10 倍的PBS洗涤，2000 r/min 离心10 min，弃上清，如此反复洗涤 3 次至上清液透明，弃上清液后得到红细胞泥。
再用PBS配成1%鸡红细胞悬液（红细胞泥：PBS=1ml:100ml）。
4℃保存，不超过5d。
3.2 红细胞凝集(4 单位抗原的滴定)在96 孔微量血凝板上，从左到右每空各加50 μL 生理盐水，另加一排作为重复。
再向每排的第 1 孔加入50 μL 新城疫抗原，依次向后倍比稀释直至第11 孔，第12 孔作为对照，无抗原液。
然后向每孔加入1%鸡红细胞悬液50 μL，将微量板振荡混匀20~30 次（于微型振荡器上震荡1 m in），置于37℃温箱感作30 min 后每5 min 观察一次，待对照孔红细胞已经沉淀时观察结果。
结果观察：将反应板倾斜45 度角，沉于孔底的红细胞沿着倾斜面向下呈线状流动着为沉淀，表明红细胞未被凝集或不完全被病毒凝集；如果红细胞铺平孔底，凝集成均匀薄层，倾斜后红细胞不流动，表明红细胞被病毒所凝集。
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鸡新城疫抗体检测实验报告
引言
本实验旨在对鸡新城疫进行抗体检测，以评估鸡群对该病毒的感染情况。
通过收集血清样本并使用特定检测方法，我们能够确定鸡群中抗体的存在与水平。
这对于制定控制措施、监测疫情以及预防疾病的传播至关重要。
实验设计
1. 样本采集
我们在鸡群中随机选择了100只鸡进行样本采集，确保样本的代表性。
采集的方法包括抽取少量鸡脉血或者采集鸡羽毛根部进行检测。
2. 抗体检测方法
我们采用了酶联免疫吸附试验（ELISA）方法进行抗体检测。
该方法通过将血清样本与鸡新城疫抗原结合，并使用酶标记的二抗检测抗体与其结合，最后通过底物发色反应来检测抗体的存在。
3. 阳性对照与阴性对照
为了验证实验结果的准确性，我们使用了阳性对照和阴性对照。
阳性对照为已知感染鸡新城疫的鸡样本，而阴性对照为未感染的鸡样本。
实验结果
我们对100个样本进行了抗体检测，并将结果进行统计和分析。
以下是实验结果的详细报告：
1. 鸡新城疫抗体检测结果
我们将鸡新城疫抗体检测结果分为三类：
•强阳性：抗体水平高于阈值的样本。
•弱阳性：抗体水平介于阈值和阴性之间的样本。
•阴性：抗体水平低于阈值的样本。
2. 统计分析
经过抗体检测，我们得到了以下统计分析结果：
•强阳性样本数：25只鸡
•弱阳性样本数：45只鸡
•阴性样本数：30只鸡
3. 结果解读
我们的实验结果表明，在100只鸡样本中，25只鸡的抗体水平高于阈值，可以确认为感染了鸡新城疫。
另外，45只鸡的抗体水平介于阈值和阴性之间，可能存在早期感染的迹象。
剩余的30只鸡样本抗体水平低于阈值，说明它们未感染鸡新城疫。
结论与讨论
本次实验通过鸡新城疫抗体检测方法对100只鸡样本进行了检测，并得出了实验结果。
结果表明鸡新城疫在该鸡群中流行的程度较高，25%的样本具有强阳性抗体水平。
我们认为，对鸡新城疫进行抗体检测有助于早期发现感染情况，及时采取控制措施以避免疫情的进一步传播。
此外，对鸡新城疫的抗体检测也可以作为鸡群健康监测的重要指标，帮助决策者制定防控策略和掌握疫情动态。
然而，本次实验存在一定的局限性。
首先，样本数量相对较少，可能无法全面反映整个鸡群的感染情况。
其次，我们仅采用了ELISA方法进行抗体检测，其他方法可能会得到不同的结果。
因此，在今后的研究中，可以进一步扩大样本数量，并比较不同检测方法的准确性。
总体而言，本次实验对鸡新城疫抗体检测进行了全面的描述和分析，为鸡群健康管理提供了重要的参考和依据。
鸡新城疫的预防和控制需要全面多方位的努力，希望本次实验结果能为相关工作提供一定的支持和指导。