鱼粉中组胺的测定

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鱼粉组胺标准

鱼粉组胺标准
鱼粉组胺标准是指对鱼粉中组胺含量的限制标准。

组胺是一种生物胺，可以在食品中产生，尤其是在腐败的鱼类中。

组胺含量过高会对人体健康造成危害，如引起头痛、头晕、恶心、呕吐等症状，严重时可导致过敏反应、休克等。

以下是鱼粉组胺标准的历史发展：
1. 欧盟标准：欧盟对鱼粉中组胺含量的限制标准为200mg/kg。

2. 美国标准：美国FDA对鱼粉中组胺含量的限制标准为500mg/kg。

3. 中国标准：中国对鱼粉中组胺含量的限制标准为400mg/kg。

4. 日本标准：日本对鱼粉中组胺含量的限制标准为100mg/kg。

以上标准均是针对鱼粉中组胺含量的限制标准，不同国家和地区的标准存在差异，但都是为了保障人体健康而制定的。

鱼粉中组胺的测定

鱼粉中组胺的测定原理简介:鱼粉中组胺用三氯乙酸提取，之后调PH=9，将游离的组胺用正戊醇提取出，之后再用HCL反萃取，用偶氮试剂显色。

组胺+三氯乙酸盐（溶于水）--PH=9--组胺（溶于正戊醇）--HCl--正戊醇（组胺溶于稀HCl）1试剂与溶液1.1偶氮试剂的配制甲液：称取0.5g对硝基苯胺，加5ml盐酸（1+1）溶解，再加水释到200ml，置冰箱中（2~8度）保存。

乙液：亚硝酸钠溶液5g/l，临用现配甲液5ml、乙液40ml混合后立刻使用。

1.2三氯乙酸100 g/L1.3氢氧化钠250g/L1.4盐酸1mol/L1.5正戊醇分析纯1.6碳酸氢钠溶液50g/L1.7磷酸组胺（Sigma公司）步骤2.1样品处理称取1--3克鱼粉于具塞三角瓶内，加入25.0ml三氯乙酸（100g/L）每隔30分钟摇动一次，提取3小时，过滤，取滤液1.00ml或2.00ml于15ml试管内，加氢氧化钠（250g/L）5滴，振荡一下，再加5ml正戊醇振荡2分钟，静止分层（如出现乳化现象可滴加2--3滴无水乙醇），用移液枪小心吸取上清液（正戊醇层）于50ml分液漏斗内，下层沉淀再下层沉淀再分别用正戊醇5ml、3ml、3ml反萃取3次。

将正戊醇全部收集到50ml分液漏内,分别用盐酸（1mol/L）6ml、6ml、3ml反萃取3次,收集水相（下层）于20ml刻度试管内，用水定容至刻度（20.00ml），摇匀，吸取1.00ml（或2.00ml）盐酸提取液于10ml比色管中，加入碳酸氢钠溶液（50g/L）3.0ml摇匀，振荡下加入偶氮试剂3.0ml，用水定容到刻度，室温下显色10min，用1cm比色皿于480nm下测定吸光度。

2.2标准曲线称取磷酸组胺样品（Sigma公司）2.7671mg，置于100ml容量瓶内，用水溶解并定容到刻度，此液组胺含量为10ug/ml，分别取此标液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00ml于5支10ml比色管内，各加盐酸（1mol/L）1.0ml，加入碳酸氢钠溶液（50g/L）3.0ml摇匀，振荡下加入偶氮试剂3.0ml，振荡，用水定容到刻度，摇匀后放置10min（室温下），用1cm比色皿于480nm下测吸光值。

HPLC 法检测海水鱼中组胺含量

Mar. 2020 CHINA FOOD SAFETY 113分析与检测生物胺是生物活性物质中含氮的低分子有机化合物的总称，生物胺一般包括脂肪类、芳香类和杂环类3大类，组胺是其中的一种杂环类生物胺，存在在各种动物和植物当中。

海水鱼体内含有一定的游离组氨酸，如果海水鱼新鲜，就不会受细菌污染，但是，当海水鱼腐烂变质时，会受到大量微生物感染，这时在一定条件下就会产生化学反应，分解组氨酸形成组胺。

组胺在正常情况下是无色无味的，人的肉眼是无法分辨出组胺的。

组胺是一种不发挥的有机胺，如果人体食入了不新鲜腐烂变质的海水鱼，就会出现相对应的中毒症状，并且会引起一系列的慢性病变，从而影响人的各大神经系统、消化系统以及心血管系统，严重的还会导致水肿、皮肤发红、头晕头痛等各种中毒症状，甚至会出现呼吸困难、发热、死亡，对于人体健康有非常大的影响。

由于海水鱼是人们日常生活当中经常使用的食物，经常被人们搬上餐桌，所以重视海水鱼中组胺含量的检测，对于人们的身体健康具有非常重要的意义[1]。

1　海水鱼中组胺的检测方式组胺的检测方式主要有分光光度法、高效液相色谱法、薄层色谱法、气相色谱法和电化学生物传感器等方式。

简单来说，分光光度法是利用提取液进行提取，通过显色剂作用显色，并与标准系列溶液进行比较定量，从而进行组胺的检测。

这种处理方式比较节约时间，但是重现性较差，线性关系也不够稳定。

薄层色谱法检测组胺的原理是利用吸附剂吸附能力的不同，从而达到将每一种不同的成分分离的效果，但是这种方式在高温下容易发生各种物质变化，整体的实验结果并不准确。

若采用气相色谱法来进行检验，在检测过程当中容易出现峰拖尾的现象，整体的灵敏度较低。

如果采用电化学生物传感器的方式进行分析，速度比较快，灵敏度高，但是生物固定化膜不够稳定。

采用高效液相色谱法来进行分析的话，分析速度更快，重现性比较高，灵敏度和柱效都比较好，拥有定量分析准确的优点，比较适合日常的海水鱼组胺检测[2]。

氨基酸分析仪测定鱼粉中的氨基酸

赵志辉、雷萍，单位及通讯地址同第一作者。收稿日期：2010-08-26
除特殊说明，所用试剂均为分析纯。实验用水为超纯水。 1.2.2 氨基酸混合标准储备液
含天门冬氨酸、苏氨酸等 17 种常规蛋白水解液分析用层析纯氨基酸，各组分浓度 C (氨基酸)=
50
林淼等：氨基酸分析仪测定鱼粉中的氨基酸
检测技术
4 结论
使用氨基酸分析仪测定鱼粉中的氨基酸的方法，快
52
林淼等：氨基酸分析仪测定鱼粉中的氨基酸
检测技术
吸光度（AU/mV）
mV 600
540
480
420
360
300
240
180
120
60
0
7
14
氨基酸胱氨酸蛋氨酸天门冬氨酸苏氨酸丝氨酸谷氨酸脯氨酸甘氨酸丙氨酸缬氨酸异亮氨酸亮氨酸酪氨酸苯丙氨酸组氨酸赖氨酸精氨酸总氨基酸
箱中，（110±1）℃下水解 22~24 h；取出浓缩管，冷却，用水将内容物定量地转移至 50 ml 容量瓶中，定容；过 0.22 μm 滤膜后即可上机。 1.4.2 色谱分析
色谱条件：氨基酸柱(安米诺西斯公司生产)；柱温：采用程序升温，58 ℃(0~38 min)、70 ℃(38~43 min)、75 ℃(43~75 min) 和 58 ℃(75~82 min)；流动相流速：0.2 ml/ min；检测波长：440 nm/570 nm 双波长同时检测；反应器温度：115 ℃；分别取标准溶液及试样 20 μl 进样。根据保留时间及标准加入法定性，试样峰面积与标准峰面积比较定量。 2 结果与讨论 2.1 氨基酸的色谱分析
表 1 流动相梯度洗脱
缓冲液 A 27.00 80.00 5.00 10.00 26.50 0 0 0 0.10 1 000

近红外光谱分析技术测定鱼粉中三聚氰胺含量

近红外光谱分析技术测定鱼粉中三聚氰胺含量一、实验背景：近红外光谱技术被誉为90年代以来发展最快的光谱分析技术[1]，是光谱测量技术与化学计量学学科的有机结合，采用化学计量学方法分析处理实验数据，从而对样品进行定性和定量分析测定，是一种快速、无损的新型检测技术。

近红外光谱技术直接由近红外光谱，通过不同的数学模型，在极短时间内测定样品中的多种成份或与其有关的多种物理、化学或生物学性质。

二、实验目的：1．掌握利用近红外光谱作定性分析的基本原理。

2．掌握利用近红外光谱进行定性鉴定的基本过程。

3．掌握使用近红外光谱仪的主要操作步骤。

三、实验原理：近红外光谱分析技术是光谱测量技术与化学计量学学科的有机结合，光谱分析中红外光谱一般用于定性分析，其与分子结构关系密切，而紫外光谱多用于物质定量分析，基于溶液对其吸收满足的朗伯比尔定律，近红外光在波长上介于紫外与红外之间，其兼有定性和定量分析的作用。

近红外光谱分析需建立数学模型，其分析依赖于编程及数学模型的建立，利用标准方法提供的大量数据用化学计量学及统计学理论建立数学模型，建立模型前需进行合格性测试，聚类分析，初拟定性模型并验证，比对模型进行修正与维护、更新等。

在建立校正曲线或数据库之前, 把测试样品先作近红外扫描, 然后再用传统分析法(如：GC、HPLC、TKN、FIA、折光仪等) 准确测定出样品的数值, 具有不同指标的样品在近红外光谱中将产生不同强度的吸收图谱，将数据信号平滑与归一化处理后，再利用专用软件处理, 便可得到校正曲线或数据库，分析人员可利用该校正曲线或数据库方便快速地通过测定未知样品的近红外谱图得知其被测指标的数据即通过模式识别（计算比较光谱间距离）与偏最小二乘回归，多元线性回归，主成分回归等进行定性、定量分析。

四、实验步骤：实验用近红外光谱分析法测定鱼粉三聚氰胺含量，实验具体应包含检测模型的建立（即合格性测试，聚类分析，建立模式识别模型等），而实验采用已建立的模型为基础，所以直接将未知样品的近红外图谱与数据模型通过专用软件比较处理，得出定性、定量结果。

鱼粉中组胺含量检测的协作研究——高效液相色谱法

中图分类号：９３￥６文献标志码：Ａ文章编号：９２５—１３（０１００６００８３２１）２— ０７— ４
鱼粉是以鱼、、类等水产动物及其加工的废虾蟹
弃物为原料，蒸煮、榨、干、碎等工序制成的经压烘粉粉状物，一种优质的蛋白质饲料。组胺是评价鱼粉是蛋白质新鲜度的一个重要指标。
量定量加入组胺标准溶液，常温下充分混合成均匀浆状，于鼓风干燥箱中，Ｏ℃烘干１，出充分混置５２ｈ取
匀后分装，随机编号后一２Ｏ℃保存。样品进行均匀性和稳定性检验，验合格后检使用。
显色，与标准系列比较定量。分光光度法相较于ＨＬＰＣ
１２组织方式．
对于检测方法不做明确规定，除统一采用高效液
相色谱法进行鱼粉中组胺含量的测定外，６家实验ｌ
室所采用的均为其１常所用方法。３
１３统计方法．
（ｄａ）标准四分位数间距（ｏｍＩＲ）稳健的变Ｍｅｉ、ｎＮｒＱ、
异系数（ｏｕｔＣ、小值（ｎｍｕ、大值ＲｂｓＶ）最Ｍｉｉｍ）最（ｘｍｍ）极差（ａｇ）计算实验室间Ｚ比分Ｍａｉｕ和Ｒｎｅ，数。ｚ值的大小代表某实验室的结果与中位值的偏
本次协作实验的结果采用稳健（ｏｕｔ统计方Ｒｂｓ）

偶氮比色法测定鱼类组胺含量实验报告

偶氮比色法测定鱼类组胺含量实验报告
偶氮比色法测定鱼类组胺含量实验报告
本实验旨在使用偶氮比色法测定鱼类中组胺的含量。

组胺是一种
常见的生物胺，其含量高会对人体健康造成危害。

因此，对食品中组
胺含量的检测十分必要，本实验将使用偶氮比色法对鱼类中组胺含量
进行测定。

实验材料：鱼类样品、无水乙醇、氯化钠、三氯乙酸、偶氮二甲苯、去离子水、标准组胺溶液等。

实验步骤：
1.取适量鱼类样品，用无水乙醇将其浸泡3小时，摇匀后离心10分钟。

取上清液置入容量瓶中，加去离子水至刻度线。

2.取5ml上清液放入离心管中，加入氯化钠和三氯乙酸，离心10分钟，取上清液备用。

3.取出0.5ml上清液置于试管中，加入偶氮二甲苯溶液和氯化钠
溶液，摇匀，静置10分钟。

4.加入去离子水至刻度线，摇匀后立即测定吸光度。

5.将标准组胺按照上述方法进行操作，测定吸光度，并以标准曲
线计算出样品中组胺的含量。

实验结果：
本实验使用偶氮比色法对鱼类样品进行测定，得出样品中组胺的
含量为50mg/kg。

实验结论：
本次实验使用偶氮比色法成功测定了鱼类样品中组胺的含量。

通
过实验结果可以看出，该样品中组胺含量较高，需要加以注意。

同时，该方法简单易操作，可用于食品中组胺含量的检测。

总结：
本次实验使用的偶氮比色法是一种常见的检测组胺含量的方法，
操作简单，结果可靠。

通过该方法可以快速准确地测定食品中的组胺
含量，对于保障人们的健康非常重要。

同时，在实验中还需要加强对化学试剂的储存和使用，避免误操作造成危险。

分子印迹固相萃取-酶联免疫分析法检测鱼肉中组胺

Keywords：histamine; molecular imprinted polymer; solid-phase extraction; immunoassay
中图分类号：R115
组胺是一种肉类、高蛋白食品腐败产生的生物胺，超量摄入组胺会引起组胺中毒，威胁人们的身体健康 [1]。美国 FDA 限定进口水产品中的组胺残留不能超过 50 mg·kg-1[2]。因此加强对食品中组胺的检测非常有必要。以抗原 - 抗体特异性反应为基础的免疫检测技术具有分析时间短、操作便捷、灵敏性高、特异性
关键词：组胺；分子印迹聚合物；固相萃取；免疫分析
Abstract：In this study, a molecular imprinted polymer (MIP) was developed by using histamine as template molecule, divinylbenzene as cross-linking agent, azodiisobutyronitrile as initiator, methacrylic acid and diallylamine as mixed functional monomers. The molecularly imprinted polymer could specifically adsorb histamine in aqueous solution, and the imprinting factor was 2.07. It was used as solid phase extraction material to enrich and purify histamine in fish samples, and combined with enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to achieve rapid detection of histamine. The recoveries of samples were 84% ～ 106%, and the coefficients of variation were 7.4% ～ 12.2%.

鱼粉中掺入铵盐的检验

鱼粉中掺入铵盐的检验
3.2.1原理：
铵盐一般都含有氨态氮，奈斯勒试剂能与含氨态氮物质产生黄褐色沉淀，尿素在碱性条件下，由于尿素酶的催化作用，可生成氨态氮。

3.2.2检验方法：
取鱼粉试样1-2g于试管中，加10ml水振摇2min，静置20min，取上清液2ml到蒸发皿中，加入1mol/l氢氧化钠溶液1ml置水浴上蒸干，再加水数滴和生豆粉约10mg，静置2-3min，加奈斯勒试剂2滴。

如试样有黄褐色沉淀产生则表
明有尿素存在。

鱼粉中掺有铵态氮物质的检验方法：取鱼粉1-2g，加水10ml，振摇2min，静置20min，取上清液2ml加1mol/l氢氧化钠1ml，加奈斯勒试剂2滴。

如试样有黄褐色沉淀表明有NH4+存在。

组胺含量的测定5

实验五组胺含量的测定一、实验目的：学习比色法测定组胺含量的原理和方法二、实验原理：鱼肉中的组胺用正戊醇提取，与偶氮试剂反应显橙色，与标准系列比较定量，即可求出组胺含量三、实验原料：鱼肉四、实验试剂与仪器：Na2CO3、NaOH、对硝基苯胺、正戊醇、三氯乙酸、盐酸、组胺标准品、具塞锥形瓶、分液漏斗、721分光光度计等五、实验方法：1、组胺标准曲线的制定：称取25mg于105℃干燥至恒重的磷酸组胺定容至100ml 得到250ug/ml，再稀释配制成100ug/ml的组胺标准液，取上述标准使用液0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0于10ml容量瓶中，并用1mol/LHCl补足至3ml，然后加15%Na2CO3溶液3ml及偶氮试剂3ml，加蒸馏水至10ml混匀，放置10min后于480nm处测其吸光度。

作出标准曲线。

2、样品中组胺的提取：取10.0g左右切碎的鱼肉于具塞锥形瓶中，加入20ml 0.1g/ml三氯乙酸浸泡2—3h过滤小烧杯中，用NaOH跳PH为9—10，取1ml滤液于分液漏斗中，再加入3.0ml正戊醇振摇5min，吸取上层液，重复操作3次，合并上层液于10ml容量瓶，用正戊醇定容至10ml，取1.0ml正戊醇提取液于分液漏斗中提取，再加1mol/LHCl3ml振荡5min，取下层液，重复操作3次，合并下层液于10ml容量瓶中，再用盐酸定容3、取1ml上述提取液于10ml离心管中，分别加入15%Na2CO3及偶氮试剂各3ml，加入至10ml摇匀，放置10min于480nm处测吸光度4、计算：样品中组胺含量（mg/kg）＝1000×(A/m)×V六、思考题用正戊醇提取前为什么要调PH为9~10？为什么还要用HCl提取3次？。

鱼粉的品控

鱼粉的品控1 ：常规指标粗脂肪：按照GB/T 6433-2006《饲料中粗脂肪的测定》规定，鱼粉的粗脂肪含量在14%以内。

粗脂肪含量高容易造成氧化酸败而降低营养价值。

同时脂肪氧化升温是造成鱼粉自燃的原因之一。

在生产实践中，一般饲料厂家将鱼粉的粗脂肪控制在12%左右。

粗灰分：灰分高表示骨多肉少，灰分低表示骨少肉多。

优质鱼粉灰分在16%以下，灰分在23%以上则表明不是全鱼粉，可能还有鱼排粉。

同时灰分高表明有可能掺沙或廉价钙原料。

砂分：优质鱼粉砂分在2%以下，若砂分高则表明捕鱼的船在浅海作业或是含有捕虾的副产品。

水分：鱼粉的水分不宜高于10%，过高不宜储藏，容易发生霉变。

盐分：优质鱼粉盐分在2%以下，鱼粉的盐分含量最高不超过5%，盐分高表明鱼粉不太新鲜或掺有小干鱼。

钙和磷：鱼粉中钙含量在3.5%~4.5%，磷含量约1.5%～3%，钙磷比1.5:1～2:1，如果鱼粉中钙和磷的含量过高，说明鱼粉中骨的含量较多。

粗纤维：对粗纤维的指标要求，国家标准没有明确的规定，根据文献资料，鱼粉的粗纤维含量在0.5%以内。

如果鱼粉中掺入其他高蛋白质植物原料，则粗纤维的含量就会明显提高。

真蛋白质/粗蛋白质：粗蛋白质的含量是检验鱼粉质量的主要指标之一，国家行业标准以粗蛋白质的含量作为衡量鱼粉等级的指标。

一般要求进口鱼粉真蛋白质/粗蛋白质比为80%～85%，国产鱼粉真蛋白质/粗蛋白质之比要大于75%。

2 ：挥发性盐基氮（VBN）VBN是指动物性原料由于酶和细菌的作用，在腐败过程中，使蛋白质分解而产生氨以及胺类含氮物质，VBN适合于鱼粉中微生物繁殖初期的检测。

VBN含量越高，鱼粉的新鲜度越差，氨基酸被破坏的越多，特别是蛋氨酸和酪氨酸，鱼粉的营养价值受到很大的影响。

在生产实践中，一般要求蒸汽鱼粉VBN的含量在130mg/100g以内。

3 ：组胺组胺是鱼粉中组氨酸经微生物脱羧反应转变而成的一种胺类物质。

在生产实践中，一般要求红鱼粉组胺含量低于300mg/kg。

分光光度法快速测定水产品中组胺的含量

分光光度法快速测定水产品中组胺的含量赵宇明【摘要】摘要：用三氯乙酸提取水产品中的组胺，再与偶氮试剂反应生成红色化合物，其吸光度与样品中的组胺含量成正比，依此建立了快速测定水产品中组胺的方法。

方法的检出限为2.0μg/mL，RSD（n=10）为2.6%，10次测定的平均回收率为99.5%，在0～40μg/mL范围内，r为0.9998。

该方法具有快速、稳定的特点，与国标方法所得测定结果基本一致。

【期刊名称】食品研究与开发【年(卷),期】2014(000)008【总页数】3【关键词】组胺；水产品；紫外可见分光光度法组胺是一种生物碱，广泛存在于动植物体内。

鱼类等水产物的机体在腐败过程中组胺酸通过微生物的作用，脱羧产生有毒性的组胺。

当人体摄入组胺超过100mg时，即出现不良反应和中毒症状。

水产品中组胺的测定方法有生物学法、薄层层析法、液相色谱法、荧光法、分光光度法[1-6]等。

我国测定水产品中组胺的方法为国标法（GB/T5009.45-2003《水产品卫生标准的分析方法》）。

国标法操作繁琐、费时，存在较多缺陷。

研究快速测定组胺含量的方法，对水产品中组胺含量进行有效的实时监测与评价，可以为新检测方法标准的建立提供科学依据。

1 材料与方法1.1 原理用三氯乙酸提取水产品中的组胺，再与偶氮试剂反应生成红色化合物，其吸光度与样品中的组胺含量成正比。

样品与标准系列比较后定量。

1.2 主要试剂和仪器FK-A组织粉碎机：江苏环宇；MX-S涡旋振荡器：美国SCILOGEX；UV-2550紫外可见分光光度计：日本岛津；HM-120型电子天平：广东东华；Arium611型超纯水器：德国Sartorius公司；THZ-82B恒温水浴：常州智博瑞；PHS-3C型pH计：上海伟业。

正戊醇、三氯乙酸、碳酸钠、氢氧化钠、盐酸、组胺标准储备液、对氨基苯磺酸钠、亚硝酸钠等试剂均购自于商业渠道。

1.3 方法1.3.1 样品测定液的提取去除样品中不可食用部分，用组织粉碎机捣碎并混匀，准确称取5.00 g左右的试样于具塞三角瓶（或体积适合的聚四氟乙烯离心管）中，加入20mL三氯乙酸溶液（100 g/L），在涡旋振荡器上涡旋约5min后，过滤。

HPLC法检测海水鱼中组胺的含量

HPLC法检测海水鱼中组胺的含量作者：梁立广李绮敏雷艳来源：《食品安全导刊·下旬刊》2019年第01期摘要：本实验建立了检测海水鱼中组胺含量的高效液相色谱法，为检测海水鱼中组胺提供有效、快速定量的方法。

色谱柱条件为：C18柱（4.6 mm×100 mm，粒径5μm）;紫外检测波长254nm;以90%甲醇/10%（含0.1%乙酸的0.01mol/L乙酸铵溶液）和10%甲醇/90%（含0.1%乙酸的0.01mol/L乙酸铵溶液）作为流动相;流速0.8mL/min。

结果显示：该方法标准曲线良好稳定，组胺在1.0～50.0mL/L范围内线性系数为0.9996，出峰时间在21.654min附近，定量限为50mg/kg，平均回收率在99.8%附近，精密度RSD为5.2%。

本方法测定海水鱼中组胺含量，简单、快速、易操作，检测可靠方法，适用于样品数目较多检测。

关键词：HPLC;组胺;海水鱼生物胺是有生物活性含氮的低分子量有机化合物的总称，分为脂肪类、芳香类和杂环类[1]。

组胺为一种杂环类的生物胺，存在许多动植物当中。

海水鱼内含有一定游离组氨酸，海水鱼不新鲜或变质腐烂时，受到大量微生物细菌污染，在一定的条件下分解组胺酸形成组胺，组氨酸脱羧酶的脱羧作用而生成[2]。

组胺无味无色，肉眼无法辨别，是不挥发的有机胺，人体摄入变质或不新鲜的海水鱼，就会出现急性中毒症状或引起慢性病变，影响人体的神经系统、消化系统和心血管系统，分别会导致出现水肿、皮肤发红、头晕头痛、麻疹、腹泻、呼吸困难、发热、高血压等中毒症状[3-4]，严重是甚至会死亡，对人类健康有较大影响。

海水鱼常常作为餐桌上的美食，因此，针对海水鱼中组胺的含量检測具有重要的意义。

组胺的检测方法有分光光度法、高效液相色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、电化学生物传感器法等[5-6]，分光光度法[7-8]利用提取液提取，通过显色剂作用与标准系列比较定量，处理时间快，但重现性较差，线性不稳定。

一种检测鱼粉中组胺含量的方法[发明专利]

专利名称：一种检测鱼粉中组胺含量的方法
专利类型：发明专利
发明人：史莹,吴振洲,张淑枝,王玥,李晓丽,张磊,赵彦,刘宇彤申请号：CN202011455737.4
申请日：20201210
公开号：CN112684085A
公开日：
20210420
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供了一种检测鱼粉中组胺的茚三酮柱后衍生化法，包括：待测样品溶液制备、标准曲线建立、利用氨基酸分析仪检测。

本发明利用柱后衍生法，通过设定缓冲溶液种类、PH值以及相关参数对组胺含量进行检测，相比现有技术中的柱前衍生法，前处理操作简单，检测耗时短，重复性好，具有良好的推广前景。

申请人：辽宁禾丰牧业股份有限公司
地址：110000 辽宁省沈阳市沈北新区辉山大街169号
国籍：CN
代理机构：大连东方专利代理有限责任公司
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HPLC 法检测海水鱼中组胺的含量

科技文苑
HPLC 法检测海水鱼中组胺的含量
□ 梁立广李绮敏雷艳广东省食品工业公共实验室广东省食品工业研究所有限公司广东省食品质量监督检验站
摘要：本实验建立了检测海水鱼中组胺含量的高效液相色谱法，为检测海水鱼中组胺提供有效、快速定量的方法。色谱柱条件为：C18 柱（4.6 mm×100 mm，粒径 5μm）；紫外检测波长 254nm；以 90% 甲醇 /10%（含 0.1% 乙酸的 0.01mol/L 乙酸铵溶液）和 10% 甲醇 /90%（含 0.1% 乙酸的 0.01mol/L 乙酸铵溶液）作为流动相；流速 0.8mL/min。结果显示：该方法标准曲线良好稳定，组胺在 1.0~50.0mL/L 范围内线性系数为 0.9996，出峰时间在 21.654min 附近，定量限为 50mg/kg，平均回收率在 99.8% 附近，精密度 RSD 为 5.2%。本方法测定海水鱼中组胺含量，简单、快速、易操作，检测可靠方法，适用于样品数目较多检测。
达到各成分分离，但在高温及挥发性（0.01mol/L），加入 100mL 甲醇。
时间 A（90% B（10% 流速序号（min）甲醇甲醇（mL
/10%） /90%） /min）
1
0.0
60
40
0.8
2
22
85
15
0.8
3
25
100
0
0.8
4
32
100
0
0.8
5 32.01 60
40
0.8
检测具有重要的意义。
2.1 衍生剂溶液配制
254nm；梯度洗脱程序见表 1。
组胺的检测方法有分光光度法、

微生物对鱼粉中组胺含量的影响

微生物对鱼粉中组胺含量的影响作者：王啸宇徐铭沈思思郭君宁丁小涵李俊成付晚涛来源：《现代农业科技》2020年第11期摘要; ; 我国鱼粉产品质量参差不齐，鱼粉中组胺含量普遍高于国际水平，过高的组胺含量易造成食品安全问题。

为了降低过高的组胺含量对鱼粉品质的影响，本试验通过使用微生物降解鱼粉产品中的组胺。

试验将降解时间与微生物添加比例作为变量，测试出较为适宜微生物降解组胺的条件以及该条件下的实际效果。

结果表明，24 h为较适宜的降解时间，降解时间为24 h时较适宜的微生物添加比例为10∶1。

此时鱼粉组胺含量为1 622 mg/kg，较未加入微生物处理的鱼粉组胺含量（5 298 mg/kg）降低69.38%。

试验结果证明了用微生物降解鱼粉中的组胺具有显著的效果，为鱼粉生产、储存技术的改良提供了参考依据。

关键词; ; 鱼粉;组胺;微生物中图分类号; ; S963.321; ; ; ; 文献标识码; ; A文章编号; ;1007-5739（2020）11-0223-02; ; ; ; ; ; ; ; ; ; 开放科学（资源服务）标识码（OSID）Effect; of; Microorganism; on; Histamine; Content; in; Fish; MealWANG Xiao-yu 1; ; XU Ming 1; ; SHEN Si-si 2; ; GUO Jun-ning 2; ; DING Xiao-han 2; ; LI Jun-cheng 1; ; FU Wan-tao 2，3 *（1 College of Fisheries and Life Science，Dalian Ocean University，Dalian Liaoning 116023;2 School of Marine Sciences and Environment，Dalian Ocean University;3 Liaoning University Key Laboratory of Coastal Marine Environmental Science and Technology）Abstract; ; The quality of fish meal products in China is uneven. The content of histamine in fish meal is generally higher than the international level. Excessively high histamine content can easily cause food safety problems. In order to reduce the effect of excessively high histamine content on the quality of fish meal，this experiment used microorganisms to degrade histamine in fish meal products. In the experiment，the degradation time and the ratio of microorganism addition were taken as variables to test the conditions suitable for the degradation of histamine by microorganisms and the actual effect under the conditions. The results showed that 24 h was the most suitable degradation time，and the most suitable microorganism addition ratio was 10∶1 in the suitable degradation time （24 h）. At this time，the histamine content in fish meal was 1 622 mg/kg，which was 69.38% lower than that of fish meal without microbial treatment（5 298 mg/kg）. The experimental results proved that the use of microorganisms to degrade histamine in fish meal had a significant effect，which provided references for the improvement of fish meal production and storage technology.Key words; ; fish meal;histamine;microorganism鱼粉是养殖业中主要的动物蛋白来源，目前其普遍生产工艺是将原材料经过蒸煮、压榨、油水分离、烘干以产出产品[1]。

水产品中组胺的快速检测

食品快速检验方法犓犑２０２１０２水产品中组胺的快速检测２０２１０１１３发布国家市场监督管理总局发布犓犑２０２１０２水产品中组胺的快速检测１　范围本方法规定了水产品中组胺的快速检测方法。

本方法适用于水产品（鱼类等）中组胺的快速测定。

第一法　胶体金免疫层析法２　原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理，样品中的组胺经提取（或提取衍生）后与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和检测卡中检测线（Ｔ线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。

通过检测线（Ｔ线）与控制线（Ｃ线）颜色深浅比较，对样品中组胺进行定性判定。

３　试剂与材料除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为ＧＢ／Ｔ６６８２规定的二级水。

３．１　试剂３．１．１　无水乙醇（Ｃ２Ｈ５ＯＨ）。

３．１．２　无水四氢呋喃（Ｃ４Ｈ８Ｏ）。

３．１．３　４硝基苯甲酰氯（Ｃ７Ｈ４ＣｌＮＯ３）。

３．１．４　三羟甲基氨基甲烷（Ｃ４Ｈ１１ＮＯ３），即Ｔｒｉｓ。

３．１．５　盐酸（ＨＣｌ，３７％）。

３．２　试剂配制３．２．１　７０％乙醇溶液（体积分数）：量取乙醇（３．１．１）７００ｍＬ，加水至１０００ｍＬ，混合均匀。

３．２．２　样品提取液：称取１２．１ｇＴｒｉｓ（３．１．４），加９５０ｍＬ７０％乙醇（３．２．１）溶解，充分混匀后，用盐酸（３．１．５）调节ｐＨ值至８．５，用７０％乙醇（３．２．１）定容至１０００ｍＬ。

或使用胶体金免疫层析检测试剂盒专用提取液。

３．２．３　样品稀释液：称取１２．１ｇＴｒｉｓ（３．１．４），加９５０ｍＬ水溶解，充分混匀后用盐酸（３．１．５）调节ｐＨ至７．０，用水定容至１０００ｍＬ。

或使用胶体金免疫层析检测试剂盒专用稀释液。

３．２．４　样品衍生剂（１００ｍｇ／ｍＬ）：称取１０ｇ４硝基苯甲酰氯（３．１．３），加９０ｍＬ无水四氢呋喃（３．１．２）溶解，用无水四氢呋喃（３．１．２）定容至１００ｍＬ。

或使用胶体金免疫层析检测试剂盒专用衍生剂。

３．３　参考物质组胺参考物质的中文名称、英文名称、ＣＡＳ号、分子式、相对分子质量见表１，纯度≥９７．０％。

鱼粉中组胺的纸电泳简易检测方法

Ａｂｔａｔｓｒｃ：ＨｉｔｍｉｓｅｔａｔｄｗｉＨＣｌｎｂＯｂｄｔａｅｓａｎｅｗａｘｒｃｅｔ０．１Ｎｈ，ａｄａＳｒｅｏａｐｐｒ—ｄｓｉｃ。ｗｈｃｓｓｔｏｈｌｅａｉｈｗａｅｎｔｅｆｔｒｐ — ｉｐｒｅ．Ｔｈｌｃｒｐｏｅｉａｅｏｔｉｎｈａｌｓｓｔｎｔｅｅｅｔｏｈｒｓｓｈｌｅｎｍｍｅｅｎｔｅｅｅｔｏｏｅｅｅｔｏｈｒｓｓｐｐｒｃｎａｎｉｇｔｅｓｍｐｅｗａｅｈｌｃｒｐｏｅｉｏｄｒａｄｉｏｓｒｄｉｈｌｃｒｐｈ — ｒｓｓｂｆｒｅｉｕｆ．Ｔｈｌｃｒｐｒｓｓｐｐｅｏｄｒｗａｅｎｏｔｅｅｅｔｏｈｒｓｓａａａｕｈｍｂｒｅｅｅｅｔｏｈｏｅｉａｒｈｌｅｓｓｔｉｔｈｌｃｒｐｏｅｉｐｐｒｔｓｃａｅ．Ｔｈｐａａｕａｔｅａｐｒｔｓｒｎａ８０Ｖｏ０ｍｉＴｅｐｐｒｗａｈｎｄｉｄ，ａｄｃｌｕｖｌｐｎｔＧｉｚｒｓｎｏｌｅｓｔｓａｔｒｌｅｅｔｄａｄ０ｆｒ１ｎ．ｈａｅｓｔｅｒｅｎｏｏｒｄｅｅｏｍｅ．ｚｅｏｉｅｃｕｄｂａｉｆｃｏｉｙｄｔｃｅｎｃｍｐｅｅｙｓｐｒｔｄｆｏｔｅｈｓｉｉｅａｄｏｈｒｉｔｒｅｅｔａｏｏｎｓｏｌｔｌｅａａｅｒｍｈｉｔｄｎｎｔｅｎｅｆｒｎｉｌｃｍｐｕｄ．Ｔｈｓｍｅｈｄｃｎｓｍｕｈｎｏｓｙｄｔｃｌｉｉｔｏａｉａｅｕｌｅｅｔｍｕｔ．ｐｅｓｍｐｅｎｈｏｓｏｃｎｒｔｏｆｔｅｄｔｃｉｎｏｓａｎｓ１ｉａｌｓａｄｔｅｌｗｅｔｃｎｅｔａｉｎｏｈｅｅｔｏｆｈｉｔｍｉｅｗａ０ｍｋ．ｇＫｅｒｙｗｏｄ：ｆｓａ；ｈｓａｎｉｈｍｅｌｉｔｍｉｅ；ｅｅｔｏｏｅｉ；ｄｔｒｎｔｎｌｃｒｐｈｒｓｓｅｅｍｉａｉｏ

(完整版)实验七鱼粉中组胺含量的测定

实验七鱼粉中组胺含量的测定1、实验目的：通过本实验，使学生掌握鱼粉中组胺测定方法。

2、基本技能训练内容：了解组胺含量对鱼粉品质评价的意义；鱼粉中组胺测定方法。

3、主要仪器设备和药品：正戊醇、三氯乙酸溶液(100g/L)、碳酸钠溶液(50g/L)、氢氧化钠溶液(250g/L)、盐酸(1＋11)、组织胺标准溶液（准确称取0.2767g于100±5℃干燥2h的磷酸组织胺，溶于水，移入100mL 容量瓶中，再加水稀释至刻度。

此溶液每毫升相当于1.0mg组织胺）、磷酸组织胺标准使用液（吸取1.0mL 组织胺标准溶液，置于50mL容量瓶中，加水稀释至刻度。

此溶液每毫升相当于20μg组织胺）、偶氮试剂：甲液（称取0.5g对硝基苯胺，加5mL盐酸溶液溶解后，再加水稀释至200mL，置冰箱中）、乙液（亚硝酸钠溶液(5g/L)，临用现配）甲液5mL、乙液40mL混合后立即使用。

4、实验方法：4.1样品处理称取5.00～10.00g切碎样品，置于具塞锥形瓶中，加入15～20mL三氯乙酸溶液(100g/L)，浸泡2～3h，过滤。

吸取2.0mL滤液，置于分液漏斗中，加氢氧化钠溶液(250g/L)使呈碱性，每次加入3mL正戊醇，振摇5min，提取三次，合并正戊醇并稀释至10.0mL。

吸取2.0mL正戊醇提取液于分液漏斗中，每次加3mL 盐酸(1＋11)振摇提取三次，合并盐酸提取液并稀释至10.0mL。

备用。

4.2测定吸取2.0mL盐酸提取液于10mL比色管中。

另吸取0、0.20、0.40、0.60、0.80、1.0mL组织胺标准使用液(相当于0、4、8、12、16、20μg组织胺)，分别置于10mL比色管中，加水至1mL，再各加1mL盐酸(1＋11)，样品与标准管各加3mL碳酸钠溶液(50g/L)，3mL偶氮试剂，加水至刻度，混匀，放置10min 后用1cm比色杯以零管调节零点，于480nm波长处测吸光度，绘制标准曲线比较，或与标准系列目测比较。