食品中阪崎肠杆菌原始记录
微生物检验结果报告注意事项
微生物检验结果报告注意事项
一、涉及定性项目的检验结果报告
沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠杆菌O157：H7、空肠弯曲杆菌、副溶血性弧菌（定性）等，如果检样是称重取样，则最后检测结果一定报告为检出/25g或未检出/25g。如果检样是体积取样，则最后检测结果一定报告为检出/25mL或未检出/25mL。检测标准要求g必须要小写，mL中m必须小写，L则必须大写。记录中所有有用的信息必须填上，无法填充的用“/”划掉。
二、菌落总数检验结果报告
1.菌落总数小于100CFU时，按“四舍五入”原则修约以整数报告，如80.5CFU可修约报告为81CFU;80.4CFU则修约报告为80CFU。
2.菌落总数大于等于100CFU时，左边数第3位数字采用四舍五入原则修约后，取前2位数字，后面位数用0代替，也可用10的指数形式表示：如10-2两平板平均菌落数为238CFU/g，可修约为240CFU/g，最后报告为24000CFU/g或2.4×104CFU/g。
3.霉菌、酵母菌、乳酸菌、蜡样芽孢杆菌、产气荚膜梭菌报告形式和菌落总数一样。
4.称重取样以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/mL为单位报告。
三、大肠菌群检验结果报告。
LST初发酵，产酸产气，接种BGLB复发酵后仍产酸产气，则证明样品受到了大肠菌群污染，可检索MPN表，得出相应结果。检测时如果采用（10-1，10-2,10-3）三个稀释度，最后BGLB产气管为（2，0，0），查MPN表可得出大肠菌群检测值为9.2MPN/g；检测时如果采用（100，10-1,10-2）三个稀释度，最后BGLB产气管仍为（2，0，0），查MPN表可得大肠菌群检测值为0.92MPN/g；如果采用（10-2，10-3,10-4）三个稀释度，最后BGLB产气管仍然为（2，0，0），查MPN表可得大肠菌群检测值为92MPN/g。称重取样以MPN/g为单位报告，体积取样以MPN/mL为单位报告。大肠杆菌、粪大肠群群、副溶血性弧菌（定量）、总大肠菌群当检出阳性结果时，都会涉及查MPN表，其规律和大肠菌群一样。四、饮用天然矿泉水中铜绿假单胞菌检验结果报告
微生物原始记录表填写
微生物原始记录表填写
菌株原始记录
菌株编号：W20-01
物种名称：大肠杆菌
菌丝体形态及细胞壁形态：大肠杆菌形态变化很大，通常有长条状、假短条状、球状以及螺旋形等。细胞壁是有囊的，由多种细胞外多肽组成，呈树状或六边形。
菌落形态：大肠杆菌形成的菌落具有圆形、点阵状和似蜂窝状等不同形态。
气味：无明显气味。
生长温度和环境：该菌属于热带厌氧菌，生长温度一般为30-37 ℃，最高可达45℃，最低可达4℃，极度为0℃。
PH状态：生长最适宜于PH值在6.0-9.0之间。
胞外多糖：大肠杆菌外披有多种糖蛋白，例如LPS、聚合型多糖、多糖结合体以及混合的多糖结构物。
检测厌氧菌：根据大肠杆菌的厌氧特性，可利用其他厌氧菌培养抗性
选择出它，如使用抗氧剂或投入生物物质抑制它。
生长特性：大肠杆菌为葡萄球菌形式，在琼脂培养基、拉丁培养基等
可广大生长。而且可在耐涨酸和酊剂等化合物的存在下相对容易生长。
胞外酶：大肠杆菌的胞外酶类型丰富，其中包括脱氧核糖核苷酸酶和
变性酶、碳酸酶、酸性磷酸酶活性最强。
天然免疫：大肠杆菌具有高效的天然免疫力，其可以通过DAO(多细胞脂类酶)、HNRP(核糖蛋白)以及由细菌抗原组成的抗原衡量被动抗原抵
抗性来抵抗外来感染。
食品克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验原始记录
食品克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）检验原始记录
样品编号：检验开始时间：年月日
样品名称：检验完成时间：年月日
检测项目：克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）检测依据：GB 4789.40-2016 第一法 第二法
一、克罗诺杆菌属定性检验
无菌操作称（量）取样品100g或ml置于灭菌锥形中，加入900mL已预热至44℃的缓冲蛋白胨水，摇动充分溶解，36±1℃培养18±2h，移取1mL转种于10mLST-Vm肉汤，44±0.5℃培养24±2h。轻轻混匀培养物，各取1环，分别划线于两个阪崎杆菌显色培养基平板，36±1℃培养24±2h。挑取可疑菌落，划线于TSA平板，25±1℃培养48±4h。观察，挑取可疑菌落进行生化鉴定。
二、克罗诺杆菌属平板计数法
无菌操作称（量）取样品100g（ml）、10g（ml）、1g（ml）置于灭菌锥形中，加入900mL、90mL、9mL已预热至44℃的缓冲蛋白胨水，摇动充分溶解，36±1℃培养18±2h，移取1mL转种于10mLST-Vm肉汤，44±0.5℃培养24±2h。轻轻混匀培养物，各取1环，分别划线于两个阪崎杆菌显色培养基平板，36±1℃培养24±2h。挑取可疑菌落，划线于TSA平板，25±1℃培养48±4h。挑取可疑菌落进行生化鉴定。
注：+生长或有可疑菌落；-未生长或无可疑菌落。
计算及结果：定性检验：得100g(mL) 计数法，查MPN检索表，得MPN/g,mL
电子天平编号：使用状况试验前：试验后：
培养箱编号：使用状况试验前：试验后：
检测人：校核人：审核人：
阪崎肠杆菌污染途径
DFI培养基存在的问题 培养基存在的问题
更快的检测方法? 更快的检测方法
• PCR • Q-PCR
DFI培养基存在的问题 培养基存在的问题
荧光PCR结果 结果 荧光
1.4其他肠杆菌属的检验 其他肠杆菌属的检验
• E-M-S法 • 所需培养基： • EMB • MacConKey • SorbitolMacConKey
1.2 流行病学特征 • CRAVEN et al. (2010) 和 HEIN et al. (2009)调查了阪崎肠杆菌在奶粉工厂的非 加工和加工环境的空间分布，流行特点和 持久性。 • 调查结果显示空气是阪崎肠杆菌潜在污染 来源，并确认阪崎肠杆菌在奶粉工厂广泛 的分布
• 阪崎肠杆 菌在乳粉 加工设备 中的分布 • ○：阳性 样品分离 处
1.3 分离方法 加拿大法:1997年 – Nazarowec-White 年 加拿大法 and Farber
• 对 Dr. Muytjens’的方法进行了修改: – ①Dried infant formula suspended in sterile water. – ②Suspect colonies from VRBG plates
• 样品修复培养（前增菌）： 样品修复培养（前增菌）：无菌称取100g乳粉加 ）： 入500ml预热45℃BP中，混匀，经36℃±1℃培 养18-24h。 • 样品肠道增菌培养 样品肠道增菌培养：移取10ml 加入90mlEE肉 汤中，于36℃±1℃培养18-24h。 • 样品分离培养：取EE增菌肉汤培养物1环，分别 样品分离培养： 划线接种EMB、MacConKey、 SorbitolMacConKey琼脂平板各1块，置 36℃±1℃培养18-24h。观察3种平板上的菌落 形态及不同的生物学特性反应及其差异比较。
食品商业无菌检验原始记录
食品商业无菌检验原始记录
样品编号：检验开始时间：年月日样品名称：检验完成时间：年月日检测项目：商业无菌检测依据：GB 4789.26-2013
如上述项目有一项异常，进行接种培养：
注：○+生长、产酸产气；+ 生长；-未生长。G-b革兰氏阴性杆菌；G+b革兰氏阳性杆菌；G+c革兰氏阳性球菌；
G-c革兰氏阴性球菌；M霉菌；Y酵母菌。
电子天平编号：使用状况试验前：试验后：培养箱编号：使用状况试验前：试验后：检测人：校核人：审核人：
食品中阪崎肠杆菌原始记录
PITC/JJ01-WJ-0005/1-1
食品中阪崎肠杆菌原始记录
样品编号：样品名称：
样品状态：□定型包装□散装□液态□固态
收样日期：检验日期：
检验项目/方法：阪崎杆菌GB 4789.40-2010
仪器设备：恒温箱（36℃）PITC-411WJ-148 恒温箱（44.5℃）PITC-403WJ-140
恒温箱（30℃）PITC-221WJ-104 恒温箱（26℃）PITC-221WJ-104 ATB微生物鉴定仪PITC-171
步骤过程结果
前增菌
阳对：□NG □G 取检g/mL加入
900mL以预热44℃的缓
冲蛋白胨水增菌液中混
匀℃培养h
空白：□NG □G
样品-1：□NG □G
样品-2：□NG □G
样品-3：□NG □G
样品-4：□NG □G
样品-5：□NG □G
增菌
阳对：□NG □G 移取1mL处理液转种于
10mL mLST-Vm肉汤
℃培养h
空白：□NG □G
样品-1：□NG □G
样品-2：□NG □G
样品-3：□NG □G
样品-4：□NG □G
样品-5：□NG □G
分离分别划线接种2个阪崎
显色平板
℃培养h
阳对：□NG □G
空白：□NG □G 样品-1：□NG □G典型菌落特征按照产品
说明进行判定。
样品-2：□NG □G
样品-3：□NG □G
样品-4：□NG □G
样品-5：□NG □G
挑取1~5个可疑菌落划线接种于TSA平板
℃培养h
阳对：□NG □G
空白：□NG □G 样品-1：□NG □G典型菌落为黄色菌落。样品-2：□NG □G
样品-3：□NG □G
样品-4：□NG □G
样品-5：□NG □G
食品中大肠埃希氏菌检验原始记录
食品中大肠埃希氏菌检验原始记录
样品编号：检验开始时间：年月日
样品名称：检验完成时间：年月日
检测项目：大肠埃希氏菌检测依据：GB4789.38-2012
一、MPN计数法（第一法）：
1.样品稀释：无菌操作称（量）取样品25g加入盛有225ml的无菌磷酸盐缓冲液的无菌均质杯中，8000r/min~10000r/min均质2分钟，做成1∶10样品液；若样品为液态，吸取25ml 样品至盛有225ml无菌磷酸盐缓冲液的锥形瓶（预置适当数量的无菌玻璃珠）中，震荡混匀，作为1:10的样品匀液。调样品匀液pH至6.5~7.5。
取1∶10样品匀液1ml加入到盛有9ml磷酸盐缓冲液稀释管中，混匀，做成1∶100样品均液。根据对样品污染状况的估计，按上述操作，依次制成十倍递增系列稀释样品匀液。每递增一次，换用1支1ml无菌吸头。
2.初发酵：每个样品，选取3个适宜的连续稀释度的样品匀液（液体样品可选择原液），每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管接种1ml（接种量超过1ml，则用双料LST肉汤），36±1∶培养24±2h，观察倒管内是否有气泡产生，对于24±2h产气者进行复发酵。对于未产气者，则继续培养48±2h，观察，产气者进行复发酵实验。如所有LST肉汤管均未产气，即可报告大肠埃希氏菌结果。
3.复发酵：用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于提前预温至45∶EC 肉汤管中，放入带盖的4
4.5±0.2∶水浴箱中。水浴的水面应高于肉汤培养基页面，培养24±2h，检查小导管是否有气泡产生，如未有气泡产生则继续培养至48±2h。记录24h和48h内产气的EC肉汤产气管数，如所有EC肉汤管均为产气，即可报告大肠埃希氏菌MPN结果；如有产气，则进行EMB平板分离。
食品大肠菌群检验原始记录表
食品大肠菌群检验原始记录
样品编号：检验开始时间：年月日
样品名称：检验完成时间：年月日
检测项目：大肠菌群检测依据：GB4789.3-2016(第二法)
平板计数法，按菌落总数测定方法制备l00、10-1、10-2、10-3、10-4……稀释液。选择2-3个适宜的连续稀释度，每个稀释度接种2个无菌平板，每皿1ml，同时取1ml生理盐水加入两个无菌平皿内作空白对照，及时将15-20ml冷至46℃的VRBA倾注平皿，小心旋转平皿混合均匀，待琼脂凝固再加3-4mlVRBA覆盖，36±1℃培养18-24h,观察，可疑菌落分别移种BGLB肉汤管中，进行证实实验，36±1℃培养24-48h,观察，产气者记为大肠菌群阳性。
注：○+产气；+有可疑菌落；-不产气或无可疑菌落；
电子天平编号：使用状况试验前：试验后：培养箱编号：使用状况试验前：试验后：
检测人：校核人：审核人：
食品菌落总数检验原始记录
样品编号：检验开始时间：年月日
样品名称：检验完成时间：年月日
检测项目：菌落总数检测依据：GB4789.2-2016
无菌操作称（量）取样品25g或ml加入225ml的无菌生理盐水中，均质2分钟，做成1℃10样品液。取1℃10稀释液1ml加入到9ml生理盐水中，混匀，做成1℃100样品均液。以上法制备10倍系列稀释样品均液。选择2-3个适宜稀释度的样品均液，吸取1ml样品均液于无菌平皿内，每个稀释度做2个平皿。同时，分别吸取1ml空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照，及时将15-20ml冷至46℃的平板计数培养基倾注平皿，转动平皿使其混合均
微生物检验原始记录范本
微生物检验原始记录范本
样品名称：生产日期：样品规格：产品批号：抽样数量：检测依据：□ GB □ GB □ GB 使用仪器：天平□电热恒温培养箱□水浴箱□环境条件：室温℃
结果： cfu/ MPN/100 计数cfu/ 计数cfu/ 检测者：审核者：
阪崎肠杆菌微生物检测原始记录表-
受控编号：
阪崎肠杆菌检测原始记录表
检测项目：☑阪崎肠杆菌检测依据：☑GB 4789.40-2016
样品状态：□液态☑固态□完好□已开封□其他：检测日期： 2023.12.4-12.6 环境条件： 25 ℃ 47 ％ RH
存放条件：□室温□冷藏☑冷冻检测仪器：☑生化培养箱WTHF1010A1-002 □电热恒温培养箱 WTHK1001A-1001
样品处理：1.阪崎肠杆菌检验平板法：操作称取100g（ml）样品，加入900mL已预热至44℃的缓冲蛋白胨水中，缓缓摇动充分混匀，置36℃恒温培养18h，移取上述增菌液1mL接种至10mL ST-Vm肉汤中，置44℃恒温培养24h。
2.阪崎肠杆菌检验MPN法:称取样品100g、10g、1g各三份,分别加入900mL、90mL、9mL已预热至44℃的BPW,轻轻振摇使充分溶解,制成1∶10样品匀液,选取合适的梯度试验，置36℃±1℃培养18h±2h。分别移取1mL转种于10mLmLST-Vm 肉汤,44℃±0.5℃培养24h±2h。
委托单编号：
备注：1.“+”表示选择性平板上有可疑或典型菌落生长或生化试验呈阳性，“-”表示选择性平板上无可疑或典型菌落生长或生化试验呈阴性。
2.“ND”表示未检出。
检验员：复核人：审核人：
GB478940坂崎肠杆菌检验
• ESIA:蓝色，1-3mm
2020/1/31
18
选择性增菌肉汤的选择
• FDA方法选择EE肉汤，ISO方法选择mLST-Vm ，即在LST中加入Nacl和Vm。本标准使用 mLST-Vm。
• EE肉汤适合所有肠道菌群的生长繁殖，这就可能 对ES的生长产生竞争性抑制作用，降低检出率。
• 研究证明与其他肠杆菌科细菌（如沙门氏菌，大 肠埃希氏菌等）相比，ES具有较高的耐渗透压能 力。加入0.5M的Nacl在保证ES良好生长的同时 ，可以有效地抑制上述其他细菌的生长。
成团 肠杆菌
日勾维 肠杆菌
赖氨酸脱羧酶 精氨酸双水解酶 鸟氨酸脱羧酶 KCN生长 发酵:
蔗糖
－
－
＋
－
＋
＋
＋
－
－
－
＋
Baidu Nhomakorabea
＋
＋
－
＋
＋
＋
＋
v
＋
＋
＋
＋
(＋)
＋
卫矛醇
－
(－)
－
(－)
－
核糖醇
－
(－)
＋
－
－
棉子糖
＋
＋
＋
v
＋
D-山梨醇
－
＋
＋
v
－
χ-甲基-葡萄糖甙
阪崎肠杆菌
②分离
各取增菌培养物1 环，分 别划线接种于两个阪崎肠 杆菌显色培养基平板
挑取1 个～5 个可疑菌落，划 线接种于TSA 平板。 25 ℃±1 ℃培养48 h±4 h。
③鉴定
自TSA 平板上直接挑取黄色可疑菌落，进行生化鉴定。阪崎肠杆菌的主 要生化特征见表1。可选择生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统。
临床表现 多数患儿临床症状轻微且不典型， 易被忽略。严重者可引起 坏死性小肠结肠炎、
败血症、脑膜炎等。
阪崎肠杆菌的生物学特性
资料来源：《微生物学通报》 2006年06期 《阪崎肠杆菌 的生物学特性及其检测技术》
周生鞭毛、能 属肠杆菌科肠杆菌属 运动、无芽孢 的革兰氏阴性 细菌 阪崎肠杆菌 (Enterobacter sakazakii)
④结果与报告 • 综合菌落形态、生化特征，根据 证实为阪崎肠杆菌的阳性管数， 查MPN 检索表，报告每100 g （mL）样品中阪崎肠杆菌的 MPN 值（见附录Ｂ中表B.1）。
分别移取1 mL 转种于10 mL mLST-Vm 肉汤。 44 ℃±0.5 ℃培养24 h±2 h。
The end thank you
• ④结果与报告
• 综合菌落形态和生化特征，报告每100 g（mL）样品中检出 或未检出阪崎肠杆菌。
阪崎肠杆菌检验 GB/T 4789.40-2010
①样品的稀释
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PITC/JJ01-WJ-0005/1-1
食品中阪崎肠杆菌原始记录
样品编号：样品名称：
样品状态：□定型包装□散装□液态□固态
收样日期：检验日期：
检验项目/方法：阪崎杆菌GB 4789.40-2010
仪器设备：恒温箱（36℃）PITC-411WJ-148 恒温箱（44.5℃）PITC-403WJ-140
恒温箱（30℃）PITC-221WJ-104 恒温箱（26℃）PITC-221WJ-104 ATB微生物鉴定仪PITC-171
步骤过程结果
前增菌
阳对：□NG □G 取检g/mL加入
900mL以预热44℃的缓
冲蛋白胨水增菌液中混
匀℃培养h
空白：□NG □G
样品-1：□NG □G
样品-2：□NG □G
样品-3：□NG □G
样品-4：□NG □G
样品-5：□NG □G
增菌
阳对：□NG □G 移取1mL处理液转种于
10mL mLST-Vm肉汤
℃培养h
空白：□NG □G
样品-1：□NG □G
样品-2：□NG □G
样品-3：□NG □G
样品-4：□NG □G
样品-5：□NG □G
分离分别划线接种2个阪崎
显色平板
℃培养h
阳对：□NG □G
空白：□NG □G 样品-1：□NG □G典型菌落特征按照产品
说明进行判定。
样品-2：□NG □G
样品-3：□NG □G
样品-4：□NG □G
样品-5：□NG □G
挑取1~5个可疑菌落划线接种于TSA平板
℃培养h
阳对：□NG □G
空白：□NG □G 样品-1：□NG □G典型菌落为黄色菌落。样品-2：□NG □G
样品-3：□NG □G
样品-4：□NG □G
样品-5：□NG □G
生化鉴定
结果报告（每100g或每100 mL）样品-1样品-2样品-3样品-4样品-5
□ND □D□ND □D□ND □D□ND □D□ND □D
注：G生长 NG不生长 D检出 ND 未检出
检验者：校核者：完成日期：