不同干燥条件对小球藻细胞成分的影响
自养小球藻培养条件的优化
联合 国粮农组织列为 ２１世纪人类健康食 品． 小 球藻作 为 光 能 自养 型生 物 ，可 利 用 ＣＯ 作 为
碳 源供 其生 长 ，虽 多数微 藻在 ＣＯ，环境 浓 度为 １％ ～ ５％时 生长 良好 ，但 现 已发现可 将微 藻驯化 为耐受 高 浓 度 ＣＯ 的藻种 ，由此 对 酒 精发 酵 工 艺 中排 出 的 高纯 度 ＣＯ：（每年 约 ５００万 吨 ）吸 收利 用 ，既 节约 了 资源 ，又减少 了温 室 效 应 的 发 生．基 于 小 球 藻 的上 述 特 点 ，美 国 、日本 、以 色 列 等 国 家 先 后 开 发 出 现 代 化 的 小 球 藻 培 养 技 术 并 成 为 小 球 藻 的 主 要 生 产 国 ． 目前该 领域在 我 国研究 较少 ，国内开展此 项工作 ，其 经济效 益和社 会效 益前 景广 阔 。。 ．
汪 苹 ，女 ，教 授 ，主要 从 事 水 污 染 控 制 工程 、废 水 生 物 处 理 及 反应 器 方 面 的研 究 ．通 讯 作 者
第 ２９卷 第 １期
张 正 洁 等 ：自养 小 球 藻 培 养 条 件 的优 化
５５
库 无 菌 普 通 小 球 藻 １０６８藻 株 （Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ ｖｌｇａｒｉｓ １０６８
第 ２９卷 第 １期
５４
２０１１年 １月
北 京 工 商 大 学 学 报 （自然 科 学 版 ） Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｂｕｓｉｎｅｓｓ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ）
文 章 编 号 ：１６７１—１５１３（２０１１）Ｏ１．００５４—０５
ｓｔｒａｉｎ）． １．１．２ 培 养 基 配 方
氮和铁对小球藻和微拟球藻油脂积累的影响
Ｋ ｅ ｗｏｒ ：ｈｏｅｌ ｐ； ｎ ｏ ｈｏｏ ｓｓ ．Ｏｉａ ｃ ｍｕａｉｎ ｇｏ ｈｃ ｎ ｉ ｏ ； ｅ Ｎ ｙ ｄｓｃ ｌｒｌａｓ ．Ｎａ ｎ ｃ ｌｒｐ ｉ ｐ ； ｌ ｃ ｕ ｌｔ ； ｗｔ ｏ ｄｔ ｎ Ｆ ； ｏ ｒ ｉ
Ｈ Ｎ１ ｓｐｒｔｄｉ Ｈ ｉａ ｓ ｈ ｅｅｒｈｍ ｔｒ ｌｔｅｅ ｅｔ ｆ ｎ ｅ ｏ ｅｃｌｌ ｉ ｃｕ ｕａｉ ａ ｔ— Ｎ ） ｅａａｅ ａｎｎａ ｅｒｓａｃ ａｅ ａ，ｈ ｆ ｃ ｏ ａ ｄＦ“ ｎｔ ｅ ｐｄａｃ ｍ ｌ ｏ ｗ ｓｓ ｎ ｔ ｉ ｆ Ｎ ｈ ｌｉ ｔｎ ｕ
第 ２ 卷第 １ ５ 期 ２１年 ３ ０２ 月
海南师范大学学报（ 自然科学版 ）
Ｊｕｎ ｌ ｆ ｉａ ｏｍａ Ｕ ｉｅｓ ｙ Ｎ ｔｒｌ ｃ ｎ ｅ ｏ ｒａ ｏ ｎ ｎＮ ｒ ｌ ｎｖｒｉ （ ａ ａ Ｓ ｉ ｃ ） Ｈａ ｔ ｕ ｅ
Ｖｏ ＿５ Ｎｏ １ Ｉ ． ２
ｄ ｃ ｄ Ｔ ｅｒ ｓ ｌ ｈ ｗ ｔ ａ ： ａ ｋ ｏ ｃ ｎ ｐ ｏ ｔ ｅｃ ｌ ｌ ｉ ｃ ｕ ｌｔ ｎ ｏ ｅ ｃ ｌ ｒｌ ｎ ｃ ｏ ａ ｇ ｅ ｂ ｔ ｈ ｉ ｅ ． ｈ ｅ ｕ ｔ ｓ ｏ ｔ Ｌ ｃ ｆ ｓ ｈ Ｎ ａ ｒ ｍｏｅ ｔ ｅ ｌ ｉ ｄ ａ ｃ ｍｕ ａ ｉ ｆ ｈ ｈ ｏ ｅｌ ａ ｄ ｍｉ ｒ— ｌ ａ ， ｕ ｅ ｈ ｐ ｏ ｔ ａ ｔ
ｇ ｏ ｈ ｗ ｓｉ ｈ ｂ ｔ ｄ Ｃｏ ａ ｅ ｉ ｈ ｏ ｔｏ， ａ ｋ ｏ ｅ ｉ ｈ ｄ ｕ ｉ ｈ ｂ ｔｄ ｔ ｅ ｇｏ ｔ ｆ ｈ ｏ ｅｌ ｎ ｉ ａ — ｒｗｔ ａ ｎ ｉ ｉ ． ｍｐ ｒ ｄ ｗ ｔ ｔ ｅ ｃ ｎ ｒ ｌ ｌｃ ｆ “ ｎ ｔ ｅ ｍｅ ｉ ｍ ｉ ｉ ｈ ｒ ｗ ｈ ｏ ｌｒ ｌ ａ ｄ ｏ ｌ ｃ ｅ ｈ Ｆ ｎ ｅ Ｃ ａ ｃ ｍｕ ａｉ ｎｌ ｃ ｔＦ “ ｉ ｈ ｂ ｔｄ ｔ ｅｌ ｉ ｃ ｕ ｌｔ ｎ ｏ ｃ ｏ ａ ｇ ｅ ｂ ｔｈ ｄ ｎ ｆ ｃ ｎ ｔ ｅ ｒ ｒ ｗ ｈ Ｒｉ ｈＦｅ ｃ ｎ ｕ ｌ ｔ ； ｋ ｏ’ ｅ ｎ ｉ ｉ ｉ ｄ ａ ｃ ｍｕ ａ ｉ ｆｍｉｒ — ｌ ａ ， ｕ ａ ｏｅ ｆ ｔ ｈ ｉ ｏ ｔ ， ｃ ａ ｏ ａ ｅ ｈ ｐ ｏ ｅ ｏ ｇ
通气培养对小球藻生长及生物组成的影响
通气培养对小球藻生长及生物组成的影响卢碧林;付艳;祁亮【摘要】采用小球藻进行了静置培养和通气培养试验，研究了通气条件对小球藻生长速度、生物量、生物组成及脂肪酸组成的影响。
结果表明：相对于静置培养(不通气)，通气培养条件下，小球藻在稳定期的生长速度、生物量及其单位产量上高出10倍以上，差异极显著；小球藻的蛋白质含量、总糖含量明显较高，而总脂含量、淀粉含量则较低；小球藻饱和脂肪酸含量显著降低，不饱和脂肪酸特别是多不饱和脂肪酸含量升高。
不同通气量对小球藻的生长也存在差异，其较适宜的通气条件为1 L/ min。
在小球藻的培养过程中，可通过适宜的通气措施来改善培养效果和获得较高的目标产物。
%Chlorella sp. was cultured under stationary condition and aeration condition respectively. The effects of aeration on the growth rate, biomass, biological component and fatty acid composition of Chlo-rella sp. were studied. The results showed that comparing with stationary cultivation, the growth rate, bi-omass and productivity of Chlorella sp. in stationary phase under aeration condition were ten times high-er; the contents of protein and total sugar increased significantly, while the contents of total lipid and starch reduced; the saturated fatty acids became less, while unsaturated fatty acids, especially polyunsat-urated fatty acids went up; different aerations had different effects on the growth of Chlorella sp. , and the suitable aeration condition was 1 L/ min. The proper aeration measure could be used to improve cultiva-tion efficacy and obtain higher desired product during the cultivation of Chlorella sp. .【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】2014(000)008【总页数】3页(P75-77)【关键词】小球藻;通气;生物量;生物组成;脂肪酸组成【作者】卢碧林;付艳;祁亮【作者单位】长江大学农学院，湖北荆州 434025;长江大学地球环境与水资源学院，武汉 430100;长江大学地球环境与水资源学院，武汉 430100【正文语种】中文【中图分类】TS222;Q936藻类具有繁殖快、光合作用效率高、生长周期短、生物质产量高以及不需占用农业用地等优点，同时微藻在生长过程中能吸收利用二氧化碳, 对缓解温室效应具有不可忽视的作用，使得微藻生物质能源开发利用得到了国内外的广泛重视[1-5]。
小球藻固定化培养的初步研究
小球藻固定化培养的初步研究小球藻（Chlorella）是一类单细胞绿藻，广泛应用于食品、饲料、化妆品和生物燃料等领域。
然而，传统的小球藻培养方法存在生产成本高、污染环境等问题。
因此，固定化培养成为研究的热点，通过固定化培养，可以提高小球藻的生长速率和产量，减少对环境的污染。
固定化培养是将细胞固定在材料表面或内部，使其能够稳定地生长和繁殖。
与传统的悬浮培养相比，固定化培养具有以下优势：提高生长速率和产量、降低生产成本、减少废水、废气和废物的排放等。
在小球藻的固定化培养中，最常用的固定化材料包括藻球、藻膜和藻肉等。
这些材料具有良好的吸附性能和生物相容性，适合于小球藻的生长。
研究表明，固定化培养可以增加小球藻的光合作用效率，提高光能利用率，从而增加生长速率和产量。
此外，固定化培养还可以有效地控制营养物质的供应和废物的排放，减少对环境的负荷。
固定化培养的操作方法主要包括以下几个步骤：固定化材料的制备、小球藻的选择和接种、固定化系统的构建和优化，以及培养条件的控制和调节。
首先，固定化材料需要进行预处理，包括消毒、洗涤和干燥等步骤。
然后，在适宜的培养基中选择合适的小球藻菌株，并进行接种。
接种后，将小球藻固定在材料表面或内部，构建固定化系统。
固定化系统的构建需要考虑固定化材料的形状、密度和分布等因素，以及固定化材料与小球藻之间的相互作用。
最后，通过调节培养条件如光照、温度和营养物浓度等，优化固定化培养的效果。
例如，增加光照强度和光照时间可以提高小球藻的光合作用效率，加快生长速率。
固定化培养的初步研究已取得一些进展。
一些研究发现，固定化培养可以显著提高小球藻的生长速率和产量。
例如，使用藻球作为固定化材料，将小球藻固定在藻球表面，可以增加小球藻的光合作用效率，提高生长速率和产量。
此外，固定化培养还可以降低小球藻的营养物质浓度要求，减少废水的排放，并且方便后续的收获和提取。
然而，固定化培养仍然面临一些挑战和问题。
首先，固定化材料的选择和制备仍需要进一步研究。
温度对小球藻影响
老公：我写完啦！！！
采用梯度法研究小球藻生长量的影响，结果表明小球藻对温度的适应范围较广，5ºC到30ºC之间小球藻均可正常生长，25ºC为小球藻生长的最适温度，此时小球藻的生长速度达到最大。
实验材料：
实验用小球藻：采用由哈尔滨工业大学提供的普通小球藻。
实验用水：去离子水和自来水。
实验药品：MnSO4 溶液，.NaOH----KI溶液，浓硫酸。
实验用的环境培养箱：采用国产HPG---280型光照培养箱，温度范围5ºC——50ºC,温差范围+-0.5ºC,
实验设备：分光光度计，离心机等。
实验方法：
将生长至一定浓度的小球藻用虹吸管抽取到溶氧瓶，在光照培养箱中进行培养。
温度设定：将用于培养的小球藻溶液置于培养箱中，分别在5，10，15，20，25，30，35等不同温度下进行培养，每隔两小时测量其浓度。
光照强度为8000lx.
小球藻浓度的测量方法：血球计数板法。
实验结果：将小球藻以不同温度处理，每隔一段时间测量其浓度，并计算其平均增长量，结果如图所示：
表一：温度处理前后藻液浓度的变化
经分析图中小球藻增值量，小球藻浓度在5~30 ºC温度范围内均有不同程度的增长，温度在5~15ºC,和30~35 ºC,区间内小球藻繁殖增长量较小，表明在这两个温度区间内小球藻的生长受到抑制，繁殖速度受到影响，温度在20~25 ºC,小球藻生长速度最快，说明此段温度比较适合小球藻生长。
综合以上实验数据得出：小球藻培养的最适温度为25 ºC.。
温度波动对浮游藻类生长及多糖组成的影响
The effect of temperature fluctuation on the growth and polysaccharide composition of phytoplankton
QIN Baoli1 ，YANG Zhou1 ＆ ZHANG M in2
（ 1 ： School of Biological Sciences ，Nanjing Normal University，Nanjing 210023 ，P． Ｒ． China） （ 2 ： State Key Laboratory of Lake Science and Environment，Nanjing Institute of G eography and Limnology，Chinese Academy of Sciences ，Nanjing 210008 ，P． Ｒ． China） Abstract ： To investigate the influence of fluctuating temperature on the growth and polysaccharide composition of Microcystis aeruginosa ，Chlorella pyrenoidosa and Cyclotella meneghiniana were cultured under two temperature patterns： diurnal fluctuating temperature of 20 ± 5℃ and constant temperature of 20℃ ． In the present experiment we determined the growth curve ， growth rate and the content of different polysaccharide compositions． Ｒesults show that growth curves of C． pyrenoidosa under two temperature patterns had no significant differences，while those for both M． aeruginosa and C． meneghiniana under fluctuating temperature were significantly inhibited，and the latter suffered the prominently stronger inhibition． As the experiment proceeded ，the growth rates for the three algae under the two temperature treatments gradually tend to be no obvious differences，but their responses to the two treatments had significant differences in the middle of experiment． Therefore ，temperature fluctuation posed a remarkable inhibitory effect and a short significant inhibitory impact，respectively，to the growth rates of C． pyrenoidosa and C． meneghiniana，whereas it had no obvious effect on M． aeruginosa，revealing that M． aeruginosa showed a stronger ability to adapt to the short term （ 36 d） temperature fluctuation． As for polysaccharide，temperature fluctuation markedly promoted the increase of the soluble extracellular polysaccharide content and decreased the bound polysaccharide content and total polysaccharide content of M． aeruginosa，indicating that temperature fluctuation may not facilitate the bound polysaccharide accumulation of M． aeruginosa． Therefore，relative
不同温度和pH对小球藻USTB_01生长和品质的效应
不同温度和pH 对小球藻USTB-01生长和品质的效应王子敬,景建克,许倩倩,杨 帅,闫 海(北京科技大学应用科学学院生物科学与技术系,北京100083)摘要:采用50L 全自控发酵罐,在不同温度和pH 对小球藻UST B-01的异养生长和品质效应方面进行了研究。
发现在24～28℃内,随温度的升高,小球藻的生长速度明显加快,培养48h 最终生物量(OD 680nm )从4518提高到12214,但代表小球藻品质的蛋白含量却从1815%降低到1416%,叶绿素含量从25mg/g 降低到18mg/g 。
进一步研究表明,与pH 615和715相比,pH 710不仅能够支持小球藻的异养快速生长,而且可以获得较高的蛋白含量,但叶绿素含量却低于生长于pH 615的小球藻,尚未见有文献报道。
关键词:小球藻UST B-01;温度;pH ;生长;蛋白质;叶绿素中图分类号:Q914182 文献标识码:A 文章编号:0253-4320(2009)S2-0210-04E ffects of di fferent temperature and pH on the grow th and quality ofChlorella USTB 201WANG Zi 2jing ,JING Jian 2ke ,XU Qian 2qian ,Y ANG Shuai ,Y AN Hai(Department of Biological Science and T echnology ,School of Applied Science ,University of Science andT echnology Beijing ,Beijing 100083,China )Abstract :E ffects of different tem perature and pH on the growth and quality of Chlorella UST B 201are investigated in a 50L fermentor.I t show that with the increase of tem perature from 24℃to 28℃,the growth of Chlorella UST B 201is prom oted and the biomass of microalgae (OD 680nm )is increased from 4518to 12214at 48h.H owever the protein and chlorophyll contents,which represent the quality of microalgae ,declines from 1815%to 1416%and from 25mg/g to 18mg/g ,respectively.Further studies indicate that ,com pared with those grown at pH 615and 715,both the growth and protein content of Chlorella UST B 201are much im proved at pH 710,however chlorophyll content in microalgal cells is lower than that at pH 615.K ey w ords :Chlorella UST B 201;tem perature ;pH ;growth ;protein ;chlorophyll 收稿日期:2009-08-24 基金项目:中国石油科技创新基金(2009D -5006);北京科技大学冶金工程研究院研究基金(2009-05)资助项目 作者简介:王子敬(1985-),男,硕士生;闫海(1962-),男,博士,教授,主要从事微生物和微藻的研究工作,通讯联系人,haiyan @ 。
小球藻培养的初步研究
耿晓玲：小球藻培养的初步研究
·３５·
小球藻培养的初步研究
耿晓玲
（江阴职业技术学院 化学纺织工程系，江苏 江阴 ２１４４３３）
摘要：小球藻 Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｚｏｆｉｎｇｅｎｓｉｓ为绿藻门小球藻属单细胞绿藻，生态分布广，易于培养，生长速度快，应用价值高。小球藻的生长受 到很多因素的影响，本实验主要通过研究光强，培养基的组分来了解对小球藻生长的影响。实验结果表明：氮浓度对小球藻的生长速率 有着显著的影响；Ｆｅ３＋和磷浓度的变化对其生长没有显著影响；盐度为 ０．４ｍｏｌ／Ｌ时，小球藻的生长速率达到最高。在光照对比实验中 发现全光照有利于小球藻的生长，小球藻在全光照条件 ３０００～５０００ｌｕｘ之间生长情况良好，光照强度过低或更高不利于小球藻的生长。 关键词：培养基；生长速率；光照强度 中图分类号：Ｑ９４９．２１７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８－０２１Ｘ（２０１８）０２－００３５－０３
剂原料，在污水处 理，水 产 养 殖 饵 料 以 及 畜 牧 饲 料 添 加 剂 的 生 产等方面也被广泛应用 。 ［４－５］ 小球藻的培养方式主要有开放 式培养和封闭式培养。开放式培养由于受到自然条件如阳光、 温度等的影响和限制，产量不稳定，易受到他种生物的污染甚 至取食，引 起 培 养 藻 液 的 退 化。 封 闭 式 培 养 相 对 而 言 便 于 控 制、能抗污染、可提高产率，整个系统稳定性好［６］。本文研究了
设备名称
型号或容积
功率 ／Ｗ
备注
电热恒温鼓风干燥箱
１０１－３－５
４０００
上海跃进医疗器械厂
紫外分光光度计
Ｔｕ－１８１０
１５０
北京普析通用仪器有限责任公司
低速台式大容量离心机
１
氮和铁对小球藻和微拟球藻油脂积累的影响
2 结果与分析
2.1 氮对小球藻、微拟球藻生长的影响 试验采用可见分光光度计观测小球藻和微拟
球藻的生长，用公式 y=2×107x[8] R2=0.993 p<0.05， 可以将紫外吸光值（OD500）转换成细胞数目，x 为 OD500 值，y 为 1 mL 藻液的细胞数目，经转换得出 微藻的生长状况见图 1.
用可见分光光度计（722 型）测定藻液在 500 nm 处的吸光值，根据公式 y=2×107x 计算细胞数[8]. 1.2.2 总脂含量测定
油脂积累的测定，脂质与尼罗红荧光染色溶液 结合能发出荧光检测信号，脂质的量与荧光强度成 正比可以快速、可靠地测定活体细胞内脂质的量. 研究结果表明，经尼罗红染色后的小球藻在 480 nm 光激发下，位于 580 nm 的荧光峰的强度与称质 量法测定的总脂含量呈线性正相关[6-11]. 因此，本实 验采用同样荧光分光光度法直接测定细胞的中性 脂含量. 具体方法为：2 mL 藻液加 0.01 mL 的尼罗 红染料（质量浓度为 0.1 g/L 丙酮）染色 5 min，然后 用荧光分光光度计（MC960），用 480 nm 光激发，测 定荧光发射光谱，以波长为 580 nm 的荧光强度减 去藻细胞和尼罗红在该波长处的荧光值，所得相对 荧光强度与细胞中总脂含量呈线性关系. 1.2.3 统计分析
（College of Ocean，Hainan University，Haikou 570228，China）
Abstract：Taking the algae Chlorella HNC1（Chlorella sp. HNC1） and micro-algae HNN1（Nannochloropsis sp.
温度_光照_氮含量对微绿球藻生长及脂肪酸组成的影响
或冰袋控制 。培养时间 7 d ,试验设 3 个平行组 ,各采 双样 ,用血球计数板计数 ,取平均值 。生长速率以下式 计算 : K= (ln Nt2ln N0) T 21 , 其中 N0 为起始时细胞密 度 , Nt 为培养第 t 天时细胞密度 。
1. 3 藻体收集和保存
取一定体积藻液 , 4 000～4 800 r/ min 离心 5～10 min , 再用消毒淡水清洗 2～3 次 , 经冷冻干燥 , 低温 ( - 4 ℃) 保存 。
1. 2 微藻的培养
静止培养 , 培养用海水均经脱脂棉过滤 , 煮沸消 毒 ,培养容器为 100 ml 的三角烧瓶 ,培养水体 80 ml 。 培养液采用 MAV 配方 (表 1) 。营养盐试验培养液采用 缺氮的 MAV 配方 ,加 KNO3 贮液 ;光强试验用 40 W 日 光灯盏数和照射角度控制 ; 温度试验用水浴加电热棒
2. 2 光照强度对微绿球藻生长速率和脂肪 酸组的影响
采用 MAV 培养液 ,在盐度为 34 ,p H 为 8. 03 ,温度 为 20 ℃, 对微绿球藻进行光照强度 (1 000 , 2 000 , 3 000 , 4 000 , 5 000 , 6 000 , 7 000 lx) 单因子试验 ,光暗周 期 12h ∶12h。结果表明 (图 1 b) ,该藻在 1 000～7 000 lx 范围内 , 藻细胞都能繁殖生长 , 低光照对生长不 利 。经方差分析得 F = 53. 50 > F0 .01 (6 ,7) = 7. 19 ,说明 光强度对微绿球藻有显著影响 。经多重比较得出在 5 000～7 000 lx 的光强下 , 均有较高的 K值 , 且相互间 差异不显著 , 说明该藻在 1 000～5 000 lx 范围内随着 光照强度的增强生长速率加快 , 至 5 000 lx 达到高 峰 , 以后至 7 000 lx 变化不明显 。但随着光照强度的 增强 , PUFAs ( n23) 和 EPA 呈下降趋势 ,1 000 lx 光强组 EPA 达最高值 (36. 57 %) 。与此相反 , 饱和脂肪酸 (14 ∶0 , 16 ∶0 , 18 ∶0) 含量随着光照强度的增强而上 升 , 尤其是 16 ∶0 更为显著 ; 光照强度对微绿球藻的 SUFA 影响不显著 (表 2) 。光强对微藻的不饱和脂肪 酸的积累 ,不同的藻有不同的规律 。Thompson 发现大
毕业论文 脱落酸和水杨酸对9号淡水小球藻生长及总脂含量的影响研究
SHANDONGＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ毕业论文脱落酸和水杨酸对9号淡水小球藻生长及总脂含量的影响研究学院：专业：学生姓名：学号：指导教师：年月摘要微藻中的油脂是一种很有前途的用于生产生物柴油的原料。
外源激素对9号淡水小球藻的生长及油脂积累的影响已有所研究。
本文通过向9号小球藻细胞培养液中添加不同量的激素，研究不同浓度的激素对9号小球藻细胞生长及油脂积累的调控作用。
脱落酸组与水杨酸组分别设置了6个不同浓度的量，其中各有一个空白对照组。
实验结果表明，9号小球藻细胞在激素浓度为500μg/L时生长最好，生物量最大。
高浓度的激素促进细胞中油脂的合成与积累，50mg/L浓度的脱落酸最能促进9号小球藻细胞中油脂的合成与积累，且单位油脂含量最高，是对照组的1.8倍；20mg/L浓度的水杨酸最能促进小球藻细胞中油脂的合成与积累，且单位油脂含量最高，是对照组的1.6倍。
但是高浓度的激素抑制9号小球藻的生长，微藻细胞的高生长率与高油脂含量是相矛盾的，他们很难同时兼备。
关键词：9号淡水小球藻，脱落酸，水杨酸，生长特性，油脂积累IAbstractMicroalgae lipid is a promising feedstock for biodiesel production. Effect of Exogenous hormones on the growth and accumulation properties of microalgae Chlorella 9 was studied. This thesis have studied the regulation effects on microalgae Chlorella 9, which was added different amounts of hormones by the culture liquid. Abscisic acid and salicylic acid group, respectively, set up the quantity of 6 different concentrations, which each have a blank control group. The experimental results show that the microalgae Chlorella 9 cells in hormone concentration for 500 μg/L grow best when the biomass maximum. High concentrations of the hormone can promote the lipid synthesis and accumulation in the microalgae cells, 50mg/L abscisic acid can promote the most microalgae Chlorella 9 cells in the synthesis and accumulation of liquid, the liquid per content is highest and 1.8 times that of the control group; 20mg/L salicylic acid contributes most to the microalgae Chlorella 9 cells synthesis and accumulation of liquid, and the liquid per content is highest, 1.6 times that of the control group. However, high concentrations of hormone suppression on the microalgae Chlorella 9 cells growth, the high growth rate and high lipid content of microalgae are in contradiction, they can hardly be both high simultaneously.Key words: microalgae Chlorella 9, abscisic acid, salicylic acid, growth property, lipid accumulationII目录摘要 (I)ABSTRACT（英文摘要） (II)目录 (III)第一章引言 (1)1.1课题的背景和意义 (1)1.29号小球藻 (2)1.3脱落酸与水杨酸概况 (4)1.3.1 不同植物激素对小球藻的生长影响 (4)1.3.2 脱落酸（ABA） (4)1.3.3 水杨酸（SA） (5)1.4微藻油脂提取技术 (6)第二章实验方法 (8)2.19号小球藻的培养 (8)2.1.1 藻种 (8)2.1.2 藻种培养 (8)2.2实验材料 (8)2.2.1 药品与试剂 (8)2.2.2 仪器 (9)2.3实验方法 (9)2.3.1 激素的配置 (9)2.3.2 9号小球藻的诱导 (10)2.3.3 实验培养条件 (10)2.3.4 9号小球藻细胞生长的测定 (11)2.3.5 9号小球藻细胞的收集 (11)2.3.6 总脂含量的测定 (11)第三章结果与讨论 (13)III3.1激素对9号小球藻细胞生长特性的影响 (13)3.1.1 9号小球藻细胞形态的观察 (13)3.1.2 9号小球藻细胞生长的测定 (13)3.1.3 9号小球藻细胞生长的讨论 (14)3.29号小球藻细胞的总脂含量 (15)3.2.1 外源脱落酸对9号小球藻细胞总脂含量的影响 (15)3.2.2 水杨酸对9号小球藻细胞总脂含量的影响 (17)第四章结论 (19)参考文献 (20)致谢 (23)附录 (24)IV第一章引言1.1 课题的背景和意义当今世界，石油是一个国家的经济和社会发展的命脉。
初始营养条件对小球藻生长影响的研究_图文(精)
SHJ W0,z-jing。LI Yuan-sheng
(Department of Biochemical Engineering,Fushun Petroleum-Chemical Engineering
2010年6月师文静等:初始营养条件对小球藻生长影响的研究・33・
培养温度为32"(3,光照强度为5000Lx,光暗反应周期为24h,光暗反应时间比为12:12,摇床转速为140r/min。
1.2.2实验方法
实验选取无机氮、有机氮、磷、初始浓度4种因素,起初每种因素设置9个水平,研究3种因素对小球藻生长的影响及其间可能的交互作用。有机氮选用硝酸钠,无机氮选用尿素,磷盐为磷酸二氢钾,实验选用均匀设计表U9安排实验Ⅲ,实验因素水平如表1。
本实验采用淡水普通小球藻,在已获得的基本培养条件进行研究的基础上,进一步对影响小球藻初始条件进行了研究。按常规的正交设计,在多水平多因素的情况下,实验次数比较多,花费时间比较长,成本也比较高,因此将均匀设计应用到小球藻初始营养条件考查实验上,以获得普通小球藻自养生长的最佳营养条件。
l实验部分
1.1实验材料和方法
图2OD与生物量之间的标准曲线
裹2不同浓度的藻液的OD值和生物量
3.2均匀设计实验结果及回归模型分析
选用最终生物量作为考察指标(结果如表3,利用均匀设计软件进行各因素的逐步回归分析,考虑各因素之间可能存在着交互作用。选用2次曲线
・34・精细与专用化学品第18卷第6期
方程作为回归方程。所得回归方程为:y_--2.46812 --0.494449X2--0.00255592Xl 2--0.00562255Xl x3+ 0.456887X】(1—0.0890807X22十3.10681X2x一0.860364您(.
培养条件对小球藻生长及油脂积累的影响研究
２ ０ １ ５ 年６ 月
生 物 学 杂 志
Ｊ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＢＩ ＯＬ ＯＧＹ
、 ， ０ｌ － ３ ２ ＮＯ． ３
Ｊ ｕ ｎ． ２ ０１ ５
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． ２ ０ ９ ５ － １ ７ ３ ６ ． ２ ０ １ ５ ． ０ ３ ． ０ ４ ６
Ｔｈｅ ｉ ｍ ｐａ ｃ ｔ ｏ ｆ ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎｔ ｃ ｕｌ ｔ ｕｒ ｅ ｃ ｏ ｎｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎｓ ｏ ｎ ｔ ｈ ｅ ｃ ｈ ｌ ｏ ｒ ｅ ｌ ｌ ａ ｓ ｇ ｒ ｏ ｗｔ ｈ ａ ｎ ｄ ｆ ａ ｔ ａ ｃ ｃ ｕ ｍ ｕｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ
要
随着化石能 源枯竭 ， 微 藻生物柴油 日益成为研 究热点， 不 同的培 养条件对 小球藻的生长及油脂积 累有很 大
的影响 。因此考察 了温度 、 光强和水体 ｐ Ｈ值等 因素对 小球 藻的生长及 油脂积 累的影 响。结果表 明 ， 不同温度 下小 球藻的生长情况和油脂含量不 同。在 ２ ５ ＂ Ｃ时， 小球 藻细胞密度最大， 油脂积累量 最高， 达到 了２ ６ ５ Ｏ ％土 ４ ％； 光照强度 对 小球藻 生长及油脂积 累也有很 大影响 ， ５ ０ ０ ０ ｌ ｕ ｘ时小球 藻细胞 密度 最大， 油脂含量最 高； 同时ｐ Ｈ值 对小球 藻生长 及油脂积 累也有 显著作用 ， 在ｐ Ｈ值为 ７ 时小球藻细胞密度和 油脂积 累量最大， 其 中油脂积 累量为（ ２ ３ ． ９ ６ ￣ ４ ＿ ３ ） ％。 关键词 培养条件 ； 小球 藻 ； 油脂含 量 文献标识码 Ａ 文章编号 ２ ０ ９ ５ —１ ７ ３ ６ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ３ —０ ０ ４ ６—０ ５ 中图分类号 ￥ ９ ６ ８ ． ４ ９ ； Ｑ ９ ４ ９ ． ２
小球藻培养过程中流加碳源与氮源对其生长的影响
逐渐增加到19.8 g／L，此后逐渐降低到48 h的1.4/L的先增加后降低的变化过程，
但始终维持在20.0 g／L以内。实验48 h结束时葡萄糖已经基本消耗利用完,既保
证了小球藻生长的碳源所需，又没有对小球藻生长产生明显的抑制，因此采用分
pH基本稳定。
参考文献
1.周华伟.林炜铁.陈涛小球藻的异养培养及应用前景-氨基酸和生物
资源2005(04)
2.闫海.张宾.王素琴小球藻异养培养的研究进展[期刊论文]-现代化工2007(04)
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7.白秀峰．发酵工艺学．北京：中国医药科技出版社，2003
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致 谢
光阴似箭，岁月如梭。三年的大学生活即将划上圆满的句号。这三年里，我
硝酸钾全部加入到初始培养基中2种不同条件下,小球藻的生长、发酵液中葡萄糖
浓度和硝酸钾浓度的变化过程。
（a）
图1(a)显示了流加与不流加葡萄糖2种条件下,发酵液中葡萄糖浓度的变
化。采用不流加方式培养,初始葡萄糖质量浓度达到78/L，培养48 h后降低到
40/L，较高的葡萄糖浓度严重抑制了小球藻的生长，而根据小球藻不同生长期，
长沙环境保护职业技术学院毕业论文
小球藻培养过程中流加碳源与氮源对其生长的影响
姓 名：
学 号：6060立获生物技术部主管
浙江普洛家园医药科技有限公司
系部名称：环 境 科 学系
专业名称：生物技术及应用
班级名称：0731班
论文提交日期：2010年6月12号
2g/L；比不流加生长速度提高l倍。在流加的培养条件下，56h以内均获得了质
量浓度40 g／L以上的藻细胞干重，因此在发酵过程中流加碳源与氮源的培养方
小球藻的风干致死及干燥保护研究
小球藻的风干致死及干燥保护研究李会，李环*，韦萍 (南京工业大学生物与制药工程学院，江苏南京210009)【摘要】摘要［目的］研究小球藻的风干致死及干燥保护方法。
［方法］比较7种保护剂对处于对数生长期的小球藻细胞的保护作用。
［结果］海藻糖对藻细胞的保护效果最好，当海藻糖用量为5%时，藻细胞存活率提高了50%。
［结论］该研究结果对淡水微藻的诱变育种具有重要指导意义。
【期刊名称】安徽农业科学【年(卷),期】2011(039)001【总页数】3【关键词】关键词小球藻;干燥，保护剂;海藻糖小球藻含有丰富的蛋白质、脂质、多糖、食用纤维、维生素、微量元素和活性代谢产物，其多糖及糖蛋白已被证明具有抗肿瘤活性、抗病原菌、抗病毒感染及增强免疫力等活性［1－2］，其中CGF(小球藻生长因子)能提高机体免疫力，迅速恢复机体造成的损伤［3］，同时藻细胞内含有丰富的叶绿素，光合作用较强，能有效固定空气中以及工业废气和可溶性碳酸盐中的CO2［4］。
在某些情况尤其是逆境条件下(如氮短缺等)这些微藻细胞会大量积累油脂，已有研究证明利用富油微藻生产生物柴油完全可行［5］，因此小球藻正成为近些年来研究的热点。
为了提高微藻产品价值，选择具有活力强、生长快和繁殖迅速以及抗逆境胁迫和特殊活性物质累积含量高等优良性状的藻种，必须选择适当的育种方法。
等离子束诱变比传统诱变方法具有高的突变率和诱变效率，具有损伤轻、突变普广、遗传稳定等优点，在微生物及动植物诱变育种中取得了显著成效［6－7］。
除了古绍彬［8］等初步探讨了该诱变技术在海洋微藻培育中的可行性外，没有等离子束诱变在淡水微藻诱变育种方面的研究报道。
为了防止高速离子束引起空气中一些分子的解离，离子注入诱变需在真空条件下进行。
离子注入诱变预处理选用对数生长期的藻细胞，配成菌悬液后涂布于无菌的空平皿制成干菌膜再用于诱变［9］。
小球藻是水生单细胞植物，在干燥环境下细胞非常脆弱，藻细胞制成干菌膜后，在干燥、营养贫瘠的条件下菌体死亡率较高，大大影响了离子束诱变的效率。
过氧化氢对小球藻干质量和油脂含量的影响
过氧化氢对小球藻干质量和油脂含量的影响王元琮;何冰【摘要】以小球藻(Chlorella sorokiniana)LS-2作为研究材料,用不同浓度过氧化氢(H2 O2)进行处理.结果表明,所有处理均会抑制LS-2的生长.当H2 O2浓度较低时,对干质量并没有明显影响,只有当H2 O2浓度达到1.5 mmol/L时,LS-2的最大干质量才会显著降低,1.5、2.0 mmol/L H2 O2处理的LS-2最大干质量分别下降了9.6％、17.3％.H2 O2处理对LS-2的油脂总量影响不显著,但是当H2 O2浓度达到2.0 mmol/L时,藻细胞的油脂含量显著增加,上升了28.6％.实时荧光定量PCR结果显示,尽管2 mmol/L H2 O2处理使得Rubisco转录发生上调,但是其下游参与卡尔文循环的基因PKa、ALDO的转录水平均下降了50％,说明卡尔文循环受到抑制.参与油脂合成通路的基因ACCase变化不显著,其下游的ACPa、ACPb 的转录水平是对照的2倍,暗示油脂合成途径获得了增强.在糖酵解通路中,ENL上调显著,但其下游的PKa、PKb转录水平的变化不明显,说明糖酵解途径没有受到抑制.由基因表达数据可知,当微藻处于胁迫环境中时,能够将用于生长的能量转化用于合成油脂并存储起来.【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2017(045)024【总页数】4页(P161-164)【关键词】小球藻;过氧化氢;干质量;油脂【作者】王元琮;何冰【作者单位】江苏省农业科学院种质资源与生物技术研究所,江苏南京210014;江苏省农业科学院种质资源与生物技术研究所,江苏南京210014【正文语种】中文【中图分类】S188利用微藻生产生物能源越来越受到人们的重视。
微藻是一种可以高效利用光能和二氧化碳合成油脂的单细胞或简单多细胞微生物，具有适应性强、生长快速、产油量高等特点。
与植物类似，微藻可以通过光合作用将太阳能转化为化学能并以糖、蛋白和油脂的形式存储起来[1]。
小球藻发黄沉淀
小球藻发黄沉淀小球藻是一种常见的浮游植物，它在水中生长繁殖，但有时会出现发黄沉淀的现象。
这种发黄沉淀可能会给水质和环境带来一定的影响。
我们来了解一下小球藻的特点和生态习性。
小球藻属于绿藻门，是一种单细胞的浮游植物。
它的细胞体呈球形，直径一般在10-20微米之间。
小球藻是一种光合作用生物，它通过吸收光能将二氧化碳和水转化为有机物质，同时释放出氧气。
这种光合作用的特性使得小球藻在水体中可以大量繁殖，形成一片绿色的藻华。
然而，当水体中的小球藻数量过多时，就可能出现发黄沉淀的情况。
这是因为小球藻在寿命结束或环境条件不利时，会释放出一种黄色的色素。
这种色素会与水中的颗粒物质结合，形成黄色的沉淀物。
这种沉淀物不仅会让水体变得混浊，还可能对水生生物造成一定的影响。
发黄沉淀的现象在水体富营养化的环境中尤为常见。
当水体中富含氮、磷等营养物质时，会促进小球藻的生长，导致其数量急剧增加。
同时，富营养化的水体也容易滋生其他藻类，如蓝藻、硅藻等。
这些藻类与小球藻共同存在，会相互竞争养分和光能资源，从而影响小球藻的生长和代谢活动。
当养分过剩时，小球藻细胞内的色素合成过程可能会受到影响，导致色素的积累和释放，进而形成黄色的沉淀物。
发黄沉淀除了对水体透明度和观赏价值的影响，还可能对水生生物和生态系统产生一定的影响。
首先，黄色的沉淀物会阻碍水中的光照透过，减少水中的光合作用，从而影响水生植物的生长。
其次，沉淀物中的有机物质和营养物质可能会被细菌分解，产生大量的废气，如二氧化碳和硫化氢等。
这些废气的释放会对水体的氧气含量和酸碱平衡产生一定的影响，给水生生物带来不利影响。
为了解决发黄沉淀的问题，我们可以采取一些有效的措施。
首先，需要控制水体中的养分输入，尤其是氮、磷等富营养物质的输入量。
可以通过减少农业、工业和生活废水的排放，以及加强污水处理等措施来控制养分的输入。
其次，可以通过生物调控的方式来减少小球藻的数量。
例如，可以引入一些食草性或食藻性的水生生物，如鲤鱼、草鱼、淡水虾等，来控制小球藻的生长。
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８ ０℃ ， 进样速度 ８ ０ ｍ Ｌ ／ ｈ ， 干燥结束后 收集藻粉 ， 置于干燥器 （ Ｃ ａ Ｃ １ ： 为干燥剂 ） 中至室温 。这 ４种干燥方法均是将样 品在
各 自的处理条件下干燥至恒重 ， 再将样品置于 自封袋 中， 室温 条件下避光保存 。
高 振 ， 尹丰伟 ， 郑洪立 ， 郑艳萍 ， 黄 和
（ １ ． 南京工业大学生物与制药工程学院 ， 江苏南京 ２ １ ０ ０ ０ ９ ； ２ ． 材料化学工程国家重点实验室 ， 江苏南京 ２ １ ０ ０ ０ ９ ）
摘要： 探 究烘 干、 冷冻干 、 晒干和喷雾干燥等 ４种干燥 条件对小球藻细胞成分 的影响。结果表 明 ： 不同干燥条件对 小球藻粗蛋 白含量 的影响不显著 ， 喷雾干燥和冷冻干燥条件下 的粗 油脂、 色素和碳 水化合物含量较 高 ， 晒干和烘干条 件对粗 油脂 和色素 的影响较大 ， 但烘 干条件下灰分和矿质元素含量最高。因此 ， 不同干燥条件对小球藻细胞成分 的影 响较 大。综合考虑小球藻细胞成分 的应用途径 ， 喷雾干燥是一种可行的小球 藻细胞 干燥条件 ， 具有工业化应用潜力 。
小球 藻生长至稳定期 后 ， 将藻 液在 ４℃、 ６ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍ ｉ ｎ条
件下离心 １ ０ ｍ ｉ ｎ ， 收集 ， 并用蒸馏水 洗涤 ３次 ， 收集后的藻泥 平均分成 ４份作为干燥的初始原料 。
１ ． ３ 小球 藻 细 胞 的 干燥
小球藻 的细胞壁 比较 坚韧 ， 在油脂 萃取前首先需 要经过
破壁处理 。本试验以液 氮破壁处理提 油 ， 所得 的结果如 图
１ 所示 ， 不 同干燥条件下 小球藻 细胞 中的油脂 含量从 大到小 依次为喷雾 干 燥 （ ２ ４ ． ５ ５ ％ ）＞冷 冻 干燥 （ ２ １ ． １ ３ ％ ）＞烘干 （ １ ５ ． ９ ０ ％） 晒干（ １ ５ ． １ ９ ％） ， 说 明不同的干燥条件会造成小
．－—
—
２ ３ ６－ － — —
江苏农业科学
２ ０ １ ３年第 ４ １ 卷第 ７期
高
振， 尹丰伟 ， 郑洪立 ， 等． 不 同干燥条件对小球藻细胞成分的影响［ Ｊ ］ ．江苏农 业科学 ， ２ ０ １ ３ ， ４ １ （ ７ ） ： ２ ３ ６ — ２ ３ ９
不 同干燥条件对小球藻细胞成分 的影 响
藻于 ２ ０ ｍ Ｌ水解管 中， 加１ ０ ｍ Ｌ６ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ Ｈ Ｃ Ｉ ， 于１ ２ ０℃下水解
喷雾 干燥 等 ， 本试 验拟考察 上述不 同干燥 条件对小球 藻细 胞 主要成分 的影响 ， 为小球藻干燥工艺 的选择提供依据 。
１ 材 料 与 方 法 １ ． １ 小球 藻 细胞 的 生 产
２ ４ ｈ ， 氨基 酸的分析条件参 照文献 ［ ７ ］ 。碳水化合物含量 的测 定采用硫酸 一蒽 酮法 ］ 。色素 的提取与分 析参 照文献 ［ ９ ］ 。
灰分含量 的测 定参 照 Ｇ Ｂ ５ ０ ０ ９ ． ４ ＿ － ２ Ｏ １ ０ 《 食 品 中灰分 的测 定》 。矿质元素含量的测定 ： 小球藻灰化后以体积 比 １： ４ ９的
关键词 ： 小球藻 ； 烘干 ； 冷冻 干 ； 晒干 ； 喷雾干燥 ； 细胞成分 中图分 ห้องสมุดไป่ตู้号 ： Ｑ ９ ４ ７ ． ８ 文献标 志码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ ２— １ ３ ０ ２ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ７— ０ ２ ３ ６— ０ ４
随着环境 、 资源 、 能源等问题突 出， 对可再生生物质资源
小球 藻（ Ｃ ｈ ｌ ｏ ｒ ｅ Ｕ ａ ｖ ｕ ｌ ｇ ａ ｒ ｉ ｓ ） 来源 于 中国典 型培养 物保 藏 中心 ， 小球藻的培养参照文献 ［ ６ ］ 。
１ ． ２ 小球 藻 细胞 的采 收
硝 酸溶解 ， 后进行 Ｉ Ｃ Ｐ分析 。
２ 结 果 与分 析 ２ ． １ 不 同干燥 条 件 下 的 油脂 含 量
的利用成为社会可 持续发展 的关键 。微 藻具有分布广 泛、 生
置于干燥器 （ Ｃ ａ Ｃ １ ： 为 干燥 剂） 中至室温。（ ４ ） 喷雾 干燥 。将
藻泥加蒸馏水 配成浓 度 约为 ８ Ｏ ｇ ／ Ｌ的藻液 ， 喷雾 干燥 使用 Ｙ Ｃ一 ０ １ ５试 验型 喷雾 干 燥机 。进 风 温度 ２ ０ ０℃ ， 出风 温度
（ １ ） 烘干。将 藻泥 平 摊 于玻 璃皿 中， 置 于 烘箱 （ Ｇ Ｚ Ｘ一
９ １ ４ ０ ＭＢ Ｅ， 上海博迅 ） 中， 于８ ０℃ 下烘 干 １ ２ ｈ 。干燥 结束后
取出 ， 置于干燥 器 （ Ｃ ａ Ｃ １ 为干燥 剂 ） 中至 室温。 （ ２ ） 冷 冻干 燥 。将藻泥平摊 于玻璃皿 中 ， 置于 一 ４℃下冰箱 中冷冻 ２ ｈ ， 样品结冰后 ， 置 于真 空冷冻 干燥机 （ Ｆ Ｄ一１ Ａ一５ ０ ， 北京 博 医
长速度快 、 营养价值高等优点 ， 在食 品、 能源和养殖方面都有 广泛 的应用前景。采 收 （ 如离 心） 后 的微 藻 中约含 ８ ０ ％ 的水 分， 水 分的 存在 不 利 于胞 内物 质 的 提取 …、 生 物 柴 油 的生 产 和生物质 的储存 ， 因此 ， 在微藻 的生产过程 中， 干燥是其
１ ． ４ 小球 藻 细 胞成 分 分 析
产成本 的 ３ ０ ％ 。一种方 便高效 的干燥方 法对降低 小球 藻
的生产成本 、 延长小球藻 的储存 时间和后续 的加工具有重要 意义 。 目前 ， 常 用 的干燥方 法有 烘干 、 冷 冻干 …、 晒干 、
油脂的提取与脂肪酸分析参照 文献 ［ ６ ］ 。蛋 白质含 量的 测定采用 Ｇ Ｂ ５ ０ ０ ９ ． ５ —２ ０ ｌ ０ 《 食 品中蛋 白质 的测定》， 以６ ． ２ ５ 作为总氮换算为总蛋 白质 的系数 。氨基 酸分 析 ： 称取 ０ ． ０ ２ ｇ