CD46和雌激素受体在乳腺癌组织中的表达及临床意义

【摘要】
癌患者预后的临床ห้องสมุดไป่ตู้义。 方法 意义。结果
CD46、ER的表达，并分析该表达与不同临床病理特征之间的关联性，以及采用生存分析CD46、ER的表达对患者预后的临床 乳腺癌组织CD46阳性率（81.67%）明显高于乳腺良性肿瘤（58.33%）和正常乳腺组织（46.67%）；ER阳性率 （50.00%）明显高于乳腺良性肿瘤（33.33%）和正常乳腺组织（26.67%），差别均有统计学意义（P<0.05）；CD46表达阳性 率与临床分级、肿瘤直径、有无淋巴结转移、血管浸润、TNM分期等呈正相关（P<0.05）；ER表达阳性率与患者年龄、临床 分级、肿瘤直径等呈正相关（P<0.05）；CD 46、ER阳性表达均可致患者的生存预后变差，浸润程度、有无淋巴结转移、临床 分期、CD46、ER的表达是乳腺癌5年生存率独立的危险因素（P<0.05）。结论 征相关，并对较差的预后具有提示作用。 CD46、ER阳性表达与更严重的乳腺癌病理特
乳腺癌（n=60） 乳腺良性肿瘤（n=60） 正常乳腺组织（n=30） χ 2值 P值
2.3 CD46、ER 表达与浸润性乳腺癌病理参数的相关 性分析 CD46 表达阳性率与临床分级、肿瘤直径、有 无淋巴结转移、 血管浸润、 TNM 分期呈正相关 （P<0.05） ； ER 表达阳性率与年龄、临床分级、肿瘤直径呈正相关 （P<0.05） 。见表 2。
年龄 临床分级 肿瘤直径 淋巴结转移 血管浸润 TNM分期 ER
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A
B
C
图1 CD46、ER阳性表达，A为正常乳腺组织，B为 CD64阳性表达，C为ER阳性
表1 CD46、ER在各组标本中的表达［n（%）］
CD46表达 阳性 阴性 49（81.67） 11（18.33） 35（58.33） 25（41.67） 14（46.67） 16（53.33） 12.981 0.002 ER表达 阳性 阴性 30（50.00） 30（50.00） 19（33.33） 41（66.67） 8（26.67） 22（73.33） 6.324 0.042
CD46
雌激素受体（ER）
预后
【Key words】 Breast cancer CD46 Estrogen receptor（ER） Prognosis 乳腺癌是女性常见恶性肿瘤之一，近年来发病呈 增长趋势，且趋年轻化［1］ 。目前对乳腺癌的治疗主张 采取个性化方案（包括肿瘤直径、 病理分型、 临床分级、 淋巴结转移情况、年龄、免疫状况等） 。随着分子生物 学的发展，一系列新的影响乳腺癌患者生存预后的因 素被发现，这对更好地了解肿瘤的多样性，制定更合 理的治疗方案大有帮助。CD46 和雌激素受体（Estrogen Receptor，ER）是这类新发现的典型因素。CD46 水平
临床流行病学资料表明雌激素受体水平增高是乳腺癌 的重要危险因素之一，雌激素受体信号途径和雌激素 本身代谢产物途径均可增大患乳腺癌的风险，并对乳 腺癌的治疗、预后产生重要影响［4，5］ 。本研究旨在进 一步了解 CD46 和雌激素受体水平对患者生存预后的影 响，为乳腺癌个性化治疗方案的制定提供参考。
基金项目： 沧州市科技计划项目（编号：131302136） 作者单位：061000 河北省沧州市中心医院肿瘤外二科
【关键词】
乳腺癌
【Abstract】 Objective To analysis the expression and clinical significance of CD46，estrogen receptor（ER）in invasive breast
cancer，benign breast tumors and normal breast tissues. Methods Immunohistochemistry was used to detect the expression of CD46 and ER in 60 cases invasive breast cancer，60 cases benign breast tumor and 30 cases normal breast tissue samples，and to analyze relationships between the expression and clinicopathological characteristics and the clinical significance of CD46，ER expression. Results CD46-positive rate（81.67%）of breast cancer was significantly higher than that of benign breast tumor（58.33%）and normal breast tissue（46.67%）； ER-positive rate（50.00%）was significantly higher than benign breast tumor（33.33%）and normal breast organizations（26.67%） （P<0.05）； CD46 positive expression rate and clinical grade，tumor diameter，lymph node professional，vascular invasion，TNM stage and so has a positive correlation（P<0.05）；ER expression was associated with age，clinical stage，tumor diameter，and so has a positive correlation（P<0.05）；the expressions CD46 and ER can be caused by poor survival prognosis，invasion，lymph node metastasis，clinical stage，the expressions of CD46 and ER were independent risk factors（P<0.05）in breast cancer 5-year survival. Conclusion CD46，ER positive rate in more severe breast cancer is higher and is associated with poor prognosis.
表2 CD46、ER表达与浸润性乳腺癌病例参数的关联性分析
CD46表达 <60岁(n=31) ≥60岁(n=29) I(n=21) II-III(n=39) ≤4cm(n=23) >4cm(n=37) 无(n=25) 有(n=35) 无(n=30) 有(n=30) I-II(n=25) III-IV(n=35) 阳性(n=32) 阴性(n=28) 7 4 10 1 10 1 8 3 11 0 6 5 6 5 + 10 7 6 11 8 9 9 8 12 5 8 9 7 10 ++ 12 10 4 18 3 19 8 14 7 15 10 12 12 10 +++ 2 8 1 9 2 8 0 10 0 10 1 9 7 3 -0.164 0.210 0.240 0.065 0.668 0.000 0.445 0.000 0.521 0.000 0.532 0.000 R值 0.240 P值 0.067 ER表达 20 8 15 13 15 13 15 13 17 11 13 15 0 28 + 5 18 5 18 6 17 7 16 8 15 10 13 23 0 ++ 6 1 1 6 2 5 3 4 5 2 2 5 7 0 +++ 0 2 0 2 0 2 0 2 0 2 0 2 2 0 R值 0.266 0.362 0.286 0.222 0.145 0.142 P值 0.040 0.004 0.027 0.089 0.170 0.278
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·临床研究·
CD46和雌激素受体在乳腺癌组织中的表达及临床意义
李杰 李静 杨猛 孙凤莉 张博 戴殿禄
目的 探讨CD46、雌激素受体（ER）在浸润性乳腺癌、乳腺良性肿瘤及正常乳腺组织中的表达水平及其对乳腺 采用免疫组化的方法检测 60 例浸润性乳腺癌、 60 例乳腺良性肿瘤及 30 例正常乳腺组织标本
［2， 3］ 增高与肿瘤细胞的主动自我保护有密切关联 。 另外，
1 临床资料
1.1 对 象 及 标 本 随 机 双 盲 法 选 取 2004 年 1 月 至 2006 年 6 月在本院接受治疗的 60 例浸润性乳腺癌组 织、60 例乳腺良性肿瘤组织，以及 30 例正常乳腺组 织标本，三类标本均经病理证实。150 例患者均为女 性，年龄（48.36±10.36）岁。乳腺癌组 60 例，平均 年龄（52.22±8.56）岁，其中 45 例证实为浸润性导管 癌， 15 例证实为浸润性小叶癌； 乳腺良性肿瘤组 60 例， 平均年龄（34.33±12.35）岁 ；正常乳腺组 30 例，平 均年龄（45.36±6.52）岁。上述三组标本于手术切除 后立即将标本采用 10% 福尔马林固定，经脱水机处理 后用石蜡包埋。详细记录患者年龄、肿瘤直径、淋巴 结转移、浸润程度等信息，依据美国癌症联合委员会 1997 年制定的 TNM 分期标准对标本进行分期。随访 期≥ 5 年。 1.2 实验方法 （1）主要仪器及试剂： 轮转切片机（徕 卡公司， 德国） ， 全自动组织脱水机（徕卡公司， 德国） ， 包埋机（湖北泰康医疗设备有限公司） ， 烤箱， 孵箱（北
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京第二仪器厂， 中国） ， 光学显微镜（上海光学仪器厂） ， 高清晰度病理图片采集系统 （上海茸研仪器有限公司） ； 试验用鼠抗人 CD46、ER 单克隆抗体（Invitrogen，美 国） ，PBS 缓冲液、抗原修复液、DAB 显色液、过氧 化氢由上海生工有限公司提供，苏木素、伊红、中性 树胶、二甲苯等由北京鼎国昌盛生物技术有限责任公 司提供。 （2）免疫组化（SP 法） ： 检测标本 CD46、ER 表达水平，并设阳性对照和阴性对照，所有标本均在 相同条件下进行染色。用切片机将标本组织蜡块切成 5um 厚的组织切片，每个标本切取 3 张切片，置于洗 净的载玻片， 于 65℃烤箱烘烤 2h 后， 于二甲苯中脱蜡， 15min/ 次，共 2 次。之后分别在无水乙醇中、95% 乙 醇、70% 乙醇中静置 10min，蒸馏水冲洗玻璃片 3min， 共 3 次。将切片放入抗原修复液（PH 值 6.0）中煮沸 3min 后在 H2O2（3%）浸泡 20min。BSA 孵育 1h，PBS 冲洗 3 次。滴加 CD46、ER 一抗，4℃湿盒孵育过夜， 倾去一抗，PBS 缓冲液洗 3 次 ； 分别滴加二抗，室温 孵育 30min，PBS 缓冲液冲洗 3 次。每张玻璃片上滴 加 50μl 的 DAB 液， 孵 育 4~6min， 自 来 水 冲 洗。 然 后苏木素中复染 5~10min，自来水冲洗，再于盐酸酒 精中浸 3s，清水冲洗 10min 反蓝。50%、75%、85%、 95%、100% 梯度酒精脱水，二甲苯透明后行中性树胶 封片。 （3）染色结果判断 ： 无染色为 0 分，弱染色记 为 1 分，中等染色为 2 分，强染色为 3 分 ； 同时根据 染色阳性细胞占细胞总数的百分比计分，0%~9% 为 0 分，10%~49% 为 1 分，50%~89% 为 2 分， ≥ 90% 为 3 分。然后将每一标本的上述两个指标相乘除以 3 求 平均值，四舍五入到最接近的整数即为免疫组化染色 强弱的最终结果（阴性、弱阳性、阳性和强阳性） ，本 研究将结果评定为阴性和阳性（含弱阳性、阳性和强 阳性）两个等级。 1.3 统计学处理 数据采用 SPSS 18.0 统计软件进行处 理，率的比较采用 χ2 检验，生存分析采用 Kaplan-Meier 法行 Log-rank 检验。以 P<0.05 为差异有统计学意义。