葡萄糖OF试验标准操作规程
葡萄糖测定方法操作规程
葡萄糖(GLu)测定方法操作规程【产品名称】通用名称:葡萄糖(GLu)测定试剂盒(葡萄糖氧化酶法)使用说明书【摘要】糖是人体的主要供能物质,也是组织细胞的主要成分。
血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定,当这些调节失去原有的相对平衡时,则出现高血糖或低血糖症状。
1.病理性高血糖:(1)原发性糖尿病(2)内分泌疾病:嗜铬细胞瘤、甲状腺毒瘤、肢端肥大症、巨人症、Cushing综合征、高血糖素细胞瘤;(3)胰腺疾病:急性或慢性胰腺炎、流行性腮腺炎引起的胰腺炎、胰腺囊性纤维化、血色病(血红蛋白沉着症)等;(4)抗胰岛素受体抗体与有关疾病:棘皮症、Wernicke’s脑病。
2.病理性低血糖:(1)胰岛细胞瘤、高血糖素缺乏;(2)对抗胰岛素的激素分泌不足,如垂体前叶功能减退、肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长激素、肾上腺皮质激素和甲状腺素分泌减少;(3)严重肝病患者,肝细胞糖原储存不足及糖原异生功能低下,肝脏不能有效地调节血糖。
【预期用途】该试剂盒采用葡萄糖氧化酶法,用于体外定量测定人血清或血浆中葡糖糖的含量。
【检验原理】葡糖糖被葡萄糖氧化酶氧化后生成过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下,与4-氨基安替比林和对羟基苯甲酸钠缩合,生成醌系色素,通过测定此反应的吸光度可求得葡糖糖的含量。
D-2葡萄糖氧化酶D-葡萄糖醛酮+H2O22 H2O2 + 4-APP ++ H3O+POD醌系色素+ 5H2O【主要组成成份】试剂1(R1):磷酸盐缓冲液100 mmol/L抗环血酸氧化酶4700 U/L葡糖糖氧化酶4000 U/L试剂2(R2):磷酸盐缓冲液100 mmol/L过氧化物酶6700U/L4-氨基安替比林0.7 mmol/L对羟基苯甲酸钠 1.3 mmol/L校准品:葡萄糖溶液。
*不同批号试剂盒各组分请勿混用。
【试剂准备】R1:即用液体试剂R2:即用液体试剂【储存条件与有效期】未开启的试剂盒避光保存于无腐蚀性气味和通风良好的室内,在2℃~8℃有效期为一年。
微生物生化和血清学试验标准操作规程
触酶试验标准操作规程1.目的规范触酶试验标准操作规程。
2.原理具有触酶(过氧化氢酶)的细菌,能催化过氧化氢,放出新生态氧,继而形成分子氧,出现气泡。
3.试剂3%过氧化氢溶液。
4.质控金黄色葡萄球菌ATCC 25923阳性,肺炎链球菌ATCC 4961 9阴性。
5.操作步骤取3%过氧化氢溶液0.5 ml,滴加于不含血液的细菌琼脂培养物上,或取1~3 ml滴加入盐水菌悬液中。
6.结果判断培养物出现气泡者为阳性。
7.注意事项7.1细菌要求新鲜。
7.2不宜用血琼脂平板上的菌落作触酶试验,因红细胞内含有触酶,可能出现假阳性。
7.3需用已知阳性菌和阴性菌作对照。
8.临床意义在革兰阳性球菌中,链球菌触酶试验阴性,葡萄球菌及微球菌均阳性,因此可用于革兰阳性球菌的初步分群。
氧化酶试验标准操作规程1.目的l规范氧化酶试验标准操作规程。
{2.原理氧化酶(细胞色素氧化酶)是细胞色素呼吸酶系统的酶。
具有氧化酶的细菌,首先使细胞色素C氧化,再由氧化型细胞色素C使对苯二胺氧化,生成有色的醌类化合物。
3 . 试剂盐酸二甲基对苯二胺(或四甲基对苯二胺)0.1g,加蒸锱水10ml,置于棕色瓶内可用一周。
冰箱保存,或分装于棕色瓶内密封。
4. 质控铜绿假单胞菌ATCC27853阳性,大肠埃希菌ATcc 25922阴性。
5.操作步骤去洁净的滤纸一小块,蘸取菌苔少许,加1滴10g/L盐酸二甲基对苯二胺溶液于菌落上,观察颜色变化。
6.结果判断立即呈粉红色并迅速转为紫红色者为阳性。
7. 注意事项7.1 试剂在空气中易氧化,故应经常更换新试剂,或配置时试剂内加入0.1%维生素c以减少自身氧化。
7. 2 不宜采用含葡萄糖培养基上的菌落(葡萄糖发酵可抑制氧化酶活性)。
7.3实验时应避开含铁的培养基等含铁物质,因本实验过程中,遇铁时会出现假阳性。
8 . 临床意义8. 1 用于奈瑟菌属﹑非发酵等细菌的鉴定。
如果肠杆菌科不进行本试验,则可能将氧化8.2所有的革兰阴性菌均应进行氧化酶试验,如果肠杆菌科不进行本试验,则可能将氧化酶阳性的嗜水气单胞菌错误地鉴定为大肠埃希杆菌或沙雷菌。
无水葡萄糖检验标准操作规程
范围:无水葡萄糖职责:检验室对本规程的实施负责正文:1.性状——本品为无色结晶或白色结晶性粉未;无臭,味甜。
本品在水中易溶,在乙醇中微溶。
1.1比旋度——取本品约10g,精密称定,置50ml容量瓶中,加水适量与氨试液2.0ml溶解后,用水稀释至刻度,摇匀,放置60分钟,在25℃依法测定并计算,比旋度为+52.6°至+53.2°。
1.1.1执行SOP-QM-419《旋光度测定标准操作规程》。
1.1.2执行SOP-EM-302《WZZ-2B型自动指示旋光仪标准操作规程》。
1.1.3计算公式旋光度×50比旋度=称样量×(1-水份)2.鉴别2.1取本品0.2g,加水5ml溶解后,缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中,即生成氧化亚铜的红色沉淀。
2.2本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集702图)一致。
2.2.1执行SOP-QM-421《红外分光光度法标准操作规程》。
2.2.2执行SOP-EM-309《TJ270-30A型红外分光光度计标准操作规程》。
3.检查3.1酸度——取本品2.0g,加水20ml溶解后,加酚酞指示液3滴与 0.02mol/L氢氧化钠溶液0.2ml,应显粉红色。
3.2溶液的澄清度与颜色——取本品5g,加热水溶解后,放冷,用水稀释至10ml,溶液应澄清无色;如显浑浊,与1号浊度标准液比较,不得更浓;如显色,与对照液 ( 取比色用氯化钴液3ml,比色用重铬酸钾液3ml与比色用硫酸铜液 6ml加水稀释至50ml) 1.0ml加水稀释至10ml比较,不得更深。
3.3乙醇溶液的澄清度——取本品1.0g,加乙醇20ml,置水浴上加热回流约40分钟,溶液应澄清。
3.4氯化物——取本品0.60g,依法检查,与标准氯化钠溶液6.0ml制成的对照液比较不得更浓(0.01%)。
第 1 页共2页3.5硫酸盐——取本品2.0g,依法检查,与标准硫酸钾溶液2.0ml制成的对照液比较,不得更浓(0.01%)。
葡萄糖检验操作规程
目的:为检验葡萄糖辅料规定一个标准的程序,以便获得准确的实验数据。
范围:适用于葡萄糖的检验。
职责:检验员,检验室主任。
规程:1.性状:本品为无色结晶或白色结晶性或颗粒性粉末,无臭;味甜。
本品在水中易溶,在乙醇中微溶。
1.1 比旋度:精密称取本品约10g,置100ml量瓶中,加水适量与氨试液0.2ml溶解后用水稀释至刻度,摇匀,放置10分钟,在25℃时,按旋光度测定法(SOP-QC-310-00)测定。
比旋度应在+52.5°至+53.0°范围内为符合规定。
2.鉴别2.1 试剂与仪器2.1.1 碱性酒石酸铜试液 2.1.2 试管2.1.3 IR-470型红外光谱仪2.2 项目与步骤2.2.1 称取本品约0.2g,置试管中,加水5ml溶解后,缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中,即生成氧化亚铜的红色沉淀。
2.2.2 红外分光光度法:本品按红外光光度法测定法(SOP-QC-302-00)测定,本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致为符合规定。
3.检查3.1 试剂与仪器3.1.1 酚酞指示液 3.1.2 氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)3.1.3 1号浊度标准液 3.1.4 90% 乙醇3.1.5 标准氯化钠溶液 3.1.6 标准硫酸钾溶液3.1.7 碘试液 3.1.8 磺基水扬酸溶液(1→5)3.1.9 硝酸 3.1.10 硫氰酸铵溶液(30→100)3.1.11 标准铁溶液 3.1.12 醋酸盐缓冲液3.1.13 稀硫酸 3.1.14 溴化钾溴试液,盐酸3.1.15 烧杯 3.1.16 滴管3.1.17 回流管,三角烧杯瓶 3.1.18 比色管3.1.19 电炉 3.1.20 直热式电热恒温干燥箱3.1.21 坩埚 3.1.22 小型三用水箱3.2 项目与步骤3.2.1 酸度:称取本品2.0g,置烧杯中,加水20ml溶解后,加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)0.20ml,应显粉红色为符合规定。
葡萄糖检测标准操作规程SOP
葡萄糖1.目的规范葡萄糖测定的操作程序,确保葡萄糖测定结果准确。
2.检验方法氧化酶法(两点终点法) 3.检验原理 葡萄糖+O 2+H 2O 葡萄糖酸+H 2O 2H 2O 2+4-AAP+苯酚红色醌亚胺+4H 2O在波长505nm 处比色,计算出GLU 浓度。
4.临床意义临床检测GLU 浓度主要用于糖尿病诊断、昏迷鉴别诊断及糖代谢研究。
血糖增高主要见于:①生理性高血糖:可见于饭后1-2小时或情绪紧张肾上腺分泌增加时;②病理性高血糖:可见于内分泌功能障碍引起的糖尿病、颅外伤、颅内出血、脑膜炎引起的颅内高压、脱水引起的高血糖、急慢性胰腺炎、肝功能障碍等。
血糖降低主要见于:①生理性低血糖:常见于饥饿和剧烈运动后。
②病理性低血糖:可见于高胰岛素血症、非胰性肿瘤、糖原累积症、自身免疫性疾病、半乳糖血症和肾脏疾病等。
5.标本采集及干扰因素 5.1标本要求空腹不抗凝静脉血2~3ml 。
5.2标本保存室温保存,及时送检。
血清ALT 在20-25℃可稳定24小时,在2-8℃储存可稳定7d ,-20℃冰冻保存可稳定30d 。
5.3注意事项推荐选用血清,避免溶血,红细胞中ALT 比血浆高约7倍,溶血时红细胞内ALT 可进入血浆,导致测定结果偏高。
标本应避免溶血、脂血、黄疸。
6.检测仪器日立7180全自动生化分析仪,使用具体要求和校准程序详见《仪器GOPOD操作规程》。
7.试剂 7.1试剂品牌美康生物 7.2包装规格200mL (R1:2×65mL+R2:1×70mL ) 7.3主要组成成分 试剂成分含量(最终反应体系) 试剂1 磷酸盐缓冲液 0.1mol/L 苯酚0.01×10-3mol/L 试剂2葡萄糖氧化酶 16000u/L 过氧化物酶 1000u/L 4-氨基安替比林0.02×10-3mol/L不同批次的试剂不推荐混合使用 7.4储存条件有效期试剂在2-8℃保存可稳定1年,试剂开瓶后于2-8℃可稳定1个月。
葡萄糖测定标准操作规程
葡萄糖测定标准操作规程1.检验原理:(葡萄糖氧化酶法)葡萄糖氧化酶(GOD )利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸,并释放出过氧化氢。
过氧化物酶(POD )在色原性氧受体4-氨基安替比啉(4-AA )和对羟基苯甲酸钠去氢缩合为红色醌类化合物,即Trinder 反应。
红色醌类化合物的生成量成正比。
D-葡萄糖+2O +O H 2−−→−GOD 葡萄糖酸+22O H222O H +4-AA+对羟基苯甲酸钠−−→−POD 红色醌类物质+4O H 2 2.试剂组成成分3.样本要求:新鲜无溶血血清或用草酸钾-氟化钠抗凝的血浆。
在22~25℃保存8小时,2~8℃保48小时,-20℃保存7天,样本不可反复冻融!4.检验方法:仪器法(详见DF-603/DI-600标准操作规程)5.参考范围:6.检验结果的解释:6.1在给定的样本/试剂比例和条件测定时,本试剂线性范围可达25mmol/L。
样本含量超出线性范围时,建议用0.9%(W/V)的氯化钠溶液稀释样本,最大稀释倍数为10.6.2.单位换算:mg/dl=mmol/L×187.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊或以水空白在500nm处吸光度大于0.200时不能使用。
8.试剂性能指标8.1试剂外观:R1:无色或淡红色透明液体,无悬浮物及沉淀;R2无色透明液体,无悬浮物及沉淀。
8.2装量:不低于标识值。
8.3空白吸光度:在500nm处,光径1cm时,空白吸光度A≤0.2008.4线性范围:试剂的线性区间为[2.2-25]mmol/L,在此线性区间内:a)线性相关系数r应不小于0.9900;b)[2.2-4.7]mmol/L区间内,线性绝对偏差不超过±10U/L;(4.7-25)mmol/L区间内,线性相对偏差不超过±10%。
8.5准确度:使用参考物质测定时,当浓度≤4.16mmol/L,实测值与标识值偏差应不超过±0.833mmol/L,当浓度>4.16mmol/L,实测值与标识值偏差应在±20%范围内。
糖耐量(OGTT)试验操作规程(SOP)
糖耐量(OGTT)试验操作规程(SOP)1.目的:检测人体对糖的耐量(OGTT)试验。
2.原理:2.1试验方法:口服葡萄糖耐量试验(OGTT)。
2.2试验原理:当一次给予健康人大剂量葡萄糖后(口服或静脉注入),即可引起血糖浓度的明显升高,高血糖可刺激胰岛β细胞释放胰岛素,同时抑制α细胞释放胰高血糖素,于是在一定时间内血糖下降,并恢复正常。
这种血糖浓度对摄入糖的反应即为糖耐量试验的基础。
如将不同时间的血糖浓度绘成曲线即得葡萄糖耐量曲线。
在糖尿病和某些疾病时,由于神经或内分泌功能紊乱或其他因素的影响,使糖代谢发生异常,可反映为糖耐量曲线的变化,故用糖耐量试验可了解糖代谢的情况,确定一些临床诊断中尚不能确诊的轻度糖尿病或疑有糖尿病的患者,并对许多疾病的诊断也有一定的意义。
3.方法:3.1.空腹抽静脉血2ml,再将无水葡萄糖75g 溶于250ml 温开水中,令受验者5min 内服完。
服后0.5h、1h、2h、3h 各抽静脉血2ml。
每次采集的样本必须尽快送实验室作葡萄糖浓度的测定。
3.2.实验室将各次所测血糖浓度以数值或曲线形式报告给临床医生。
4.参考值:正常人空腹血糖低于 7.70 mmol/L (120mg/dl),口服糖后 0.5~1h 血糖上升达高峰,一般在8.78~9.89mmol/L 之间;2h 降至空腹水平。
静脉注射法血糖高峰出现于注射后0.5h,多在12.2~14mmol/L 之间,1.5h 后降至空腹水平以下,2h 恢复注射前水平。
各次尿糖均为阴性。
5.注意事项:5.1.本法用口服葡萄糖的方法增加血糖浓度,观察机体在空腹以及增加葡萄糖负荷后分泌胰岛素的能力。
凡有消化道疾病或做过胃肠道手术者,不宜采用口服法,以防因吸收率改变而影响结果,可改用静脉注射法(静注法)作耐量试验。
静注法与口服法不同的是,在空腹取血后,按每千克体重0.5g 计算注糖量,再折算成50%葡萄糖注射液的毫升数,在3~4min内由静脉推注,然后在1h内每10min 取一次静脉血,共7次,测定各次的血糖水平。
编写葡萄糖检验操作规程
编写葡萄糖检验操作规程1. 引言本操作规程用于指导实验人员进行葡萄糖检验的操作步骤和注意事项。
2. 实验目的本实验的主要目的是检测样本中的葡萄糖浓度,以便进行相关疾病的诊断和治疗。
3. 实验材料•葡萄糖检测试剂盒•试管架•试管•移液器•吸光度计•离心机•电子天平4. 实验步骤4.1 样本提取1.获取待测样本,并记录样本来源和样本编号。
2.密闭保存样本,并迅速送入实验室。
4.2 样本处理1.取出存储的样本,并将其均匀摇匀。
2.使用电子天平称量10mL待测样本,并记录称量值。
4.3 反应液制备1.按照葡萄糖检测试剂盒说明书中的比例,将试剂与稀释剂加入一个干净的试管中。
2.轻轻摇匀试管,直到试剂和稀释剂充分混合。
4.4 反应体积设定1.使用移液器在每个试管中分别加入不同体积的反应液(通常为1mL)。
2.记录每个试管中反应液的体积。
4.5 预热吸光度计1.打开吸光度计,并将其设置至葡萄糖检测模式。
2.预热吸光度计至适当的工作温度。
4.6 吸收值测量1.将含有反应液的试管放入试管架中。
2.使用移液器将待测样本均匀地滴入每个试管中,并立即开始计时。
3.在规定的反应时间后,将试管从试管架中取出,并放入吸光度计中进行吸收值测量。
4.记录每个试管的吸收值,并确保测量结果的准确性。
4.7 数据处理和分析1.将吸收值数据整理并计算样本中葡萄糖的浓度。
2.使用适当的统计方法对数据进行分析,并生成实验结果报告。
5. 实验注意事项1.所有实验操作前需佩戴手套和实验服,以防止污染样本和受到伤害。
2.实验过程中,避免与其他化学药品接触,以免产生意外反应。
3.注意样本的标记,确保样本的来源和编号清晰可辨。
4.操作时要准确、迅速地吸取和加入试剂和样本,以确保结果的准确性。
5.注意吸光度计的预热和校准,以获得准确的吸收值测量结果。
6.所有实验后的废液和废品都要进行正确的处理,以保护环境和实验室安全。
6. 实验结果分析根据实验数据分析结果,我们可以得出样本中葡萄糖的浓度。
无水葡萄糖检验实用标准操作规程
实用标准目的PURPOSE本操作规程目的在于建立规范的无水葡萄糖质量检测方法,为操作人员提供规范的操作依据,保证无水葡萄糖质量的检验准确,数据可靠。
范围SCOPE本标准操作规程适用于凯惠睿智生物科技(上海)有限公司GMP工厂QC 部。
职责RESPONSIBILITYQC负责检验仪器及器具INSTRUMENT AND APPLIANCE分析天平、旋光度测定仪、红外分光光度计、恒温干燥箱、恒温水浴箱、三角瓶、比色管、试管、酒精灯、吸管、移液管、容量瓶、蒸发皿、坩埚、酸式滴定管、马弗炉、称量瓶等。
试剂及其配制方法REAGENT AND PREPARATION试剂:乙醇、硝酸、比色用氯化钴液、比色用重铬酸钾液、比色用硫酸铜液、硫酸试剂配制方法:氨试液:取浓氨溶液400ml,加水使成1000ml,即得。
碱性酒石酸铜试液(甲液):取硫酸铜结晶6.93g,加水使溶解成100ml。
碱性酒石酸铜试液(乙液):取酒石酸钾钠结晶34.6 g与氢氧化钠10g,加水使溶解成100ml。
碱性酒石酸铜试液:临用时,将碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合,即得。
酚酞指示液:取酚酞1g,加乙醇100ml使溶解,即得。
氢氧化钠饱和水溶液:取氢氧化钠适量,加水振摇使溶解成饱和溶液,冷却后,置聚乙烯塑料瓶中,静置数日,澄清后备用。
氢氧化钠滴定液(0.1mol/L):取澄清的氢氧化钠饱和溶液5.6ml,加新沸过的冷水使成1000ml,摇匀。
氢氧化钠滴定液(0.02mol/L):取氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)加新沸过的冷水稀释制成。
稀硝酸:取硝酸105ml,加水稀释至1000ml,即得。
本液含HNO3应为9.5%~10.5%。
标准氯化钠溶液(贮备液):称取氯化钠0.165g,置1000ml量瓶中,加水适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,作为贮备液,(每1ml相当于100μg的氯)。
标准氯化钠溶液(使用液):临用前,精密量取贮备液10ml,置100ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml相当于10μg的氯)。
细菌生化反应鉴定及其它试验操作规程
细菌生化反应鉴定及其它试验操作规程1、氧化-发酵试验(O-F试验)原理:细菌在分解葡萄糖的过程中,必须有分子氧参加的,称为氧化型。
可以进行无氧降解的,称为发酵型(发酵型细菌在有氧无氧的条件下均能分解葡萄糖)。
不分解葡萄糖的细菌称为产碱型。
方法:将待检细菌同时穿刺接种两支Hugh-Leifson 培养基,其中一支培养基滴加无菌石蜡(或其它矿物油),高度不少于lcm。
35C, 24小时或更长。
结果:培养基变黄表示细菌分解葡萄糖产酸,两支培养基均无变化为产碱型或不分解糖型;两支培养基均均产酸为发酵型。
若仅不加石蜡的培养基产酸为氧化型。
应用:主要用于肠杆菌科细菌与非发酵细菌的鉴别,前者均为发酵型,而后者均为氧化型或产碱型。
也可用于葡萄球菌与微球菌问的鉴别。
2、B -半乳糖苷酶(ONPG)试验原理:细菌产生半乳糖苷酶,分解邻-硝基酚卩-D- 半乳糖苷(无色)生成邻-硝基酚(黄色)。
结果:菌悬液呈现黄色为阳性反应,一般在20-30分钟内显色应用:主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。
3、七叶苷水解试验原理:有的细菌可将七叶苷分解成葡萄糖和七叶素,七叶素与培养基中的枸橼酸铁的二价铁离子反应,生成黑色的化合物。
结果:培养基变黑为阳性,不变色为阴性。
应用:主要用于D 群链球菌与其它链球菌的鉴别。
前者为阳性,后者为阴性。
也可用于革兰阴性菌与厌氧菌的鉴别。
4.甲基红试验原理:某些细菌在糖代谢过程中,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸进一步分解,产生甲酸、乙酸、乳酸等,使培养基pH 值降至4.5 以下,加入甲基红呈现红色为阳性。
若细菌分解葡萄糖产生的酸少,或产生的酸进一步转化为其他产物,则培养基pH 值仍在6.2 以上,加入甲基红呈现黄色为阴性。
结果:呈现红色为阳性,橘红色为弱阳性。
黄色为阴性。
应用:主要用于鉴别大肠杆菌与产气杆菌,前者阳性,后者阴性。
此外肠杆菌科中变形杆菌属、沙门菌属、枸橼酸杆菌属和志贺菌属等阳性,而肠杆菌属、哈夫尼亚菌属则为阴性。
检验科生化葡萄糖测定的标准操作规程
葡萄糖测定的标准操作规程【目的】体外检测血清中葡萄糖(GLU )的含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP,室负责人监督落实。
2.本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况。
孕妇应在产后或终止哺乳3个月后检验。
此外,有无服用影响的药物以及采血的季节都应做相关记录。
2.静脉采血除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪,低速离心机一、检测原理本试剂所采用的反应式如下:葡萄糖ATP HK葡糖糖6磷酸ADP葡萄糖 6 磷酸 NAD G 6 PDH 6 PG NADH H式中:ATP为三磷酸腺苷;ADP为二磷酸腺苷;HK为己糖激酶;G-6-PDH为葡萄糖-6-磷酸脱氢酶;6-PG为6-磷酸葡萄糖酸上述反应中,NADH的生成量与样本中葡萄糖的浓度成正比,通过在340nm处测定吸光度的变化值,即可测得样本中葡萄糖的浓度。
、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司HDL-C试剂盒,为液体双试剂,各组分如下:试剂1(R1)三磷酸腺苷0.75mmol/L葡萄糖-6-磷酸脱氢酶375U/LNAD15mmol/L哌嗪-N,N’ -双(2-乙磺酸)缓冲液 50 mmol/L试剂2(R2)己糖激酶60KU/L哌嗪-N,N’ -双(2-乙磺酸)缓冲液 50 mmol/L2.校准要求2.1校准品:使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清(货号:449 5 0/4 5 9 5 0对测定进行校准。
2. 2校准间隔2. 2. 1试剂批号变更时使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清对测定进行校准后再对临床病人样本进行测定。
葡萄糖注射液检验标准操作规程
范围:葡萄糖注射液职责:检验室对本规程的实施负责正文:1.性状——本品为无色或几乎无色的澄明液体。
2.鉴别——取本品,缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中,即生成氧化亚铜的红色沉淀。
3.检查3.1pH值——取本品,依法检查,应为3.2--5.5。
3.1.1执行SOP-QM-418《pH值测定标准操作规程》。
3.1.2执行SOP-EM-304《pHS-3C型酸度计标准操作规程》。
3.25-羟甲基糠醛——精密量取本品适量(约相当于葡萄糖1.0g),置100ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,依法在284nm的波长处测定,吸收度不得大于0.32。
3.2.1执行SOP-QM-420《紫外分光光度法标准操作规程》。
3.2.2执行SOP-EM-303《UV-1600型紫外分光光度计标准操作规程》。
3.3重金属——取本品适量(约相当于葡萄糖3g),必要时蒸发至约20ml,放冷 ,加醋酸盐缓冲液(PH3.5)2ml与水适量使成25ml,依法检查,按葡萄糖含量计算,含重金属不得过百万分之五。
3.3.1执行SOP-QM-402《重金属检查标准操作规程》中的第一法。
3.4不溶性微粒——取本品1瓶,依法检查,应符合规定。
即≥10µm的微粒数应≤10粒/ml,≥25µm的微粒数应≤1粒/ml。
3.4.1执行SOP-QM-412《不溶性微粒检查标准操作规程》。
3.4.2执行SOP-EM-301《GWJ-3型注射液微粒仪标准操作规程》。
3.5细菌内毒素——取本品,依法检查,每1ml中含内毒素量应小于0.5EU。
3.5.1执行SOP-QM-415《细菌内毒素检查标准操作规程》。
3.6装量——取本品,依法检查,应符合规定。
3.6.1执行SOP-QM-401《最低装量检查标准操作规程》。
3.7澄明度——取本品,依法检查,应符合规定。
3.7.1执行SOP-QM-413《澄明度检查标准操作规程》。
3.8无菌——取本品,依法检查,应无菌。
血清葡萄糖测定标准操作规程
葡萄糖测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请:空腹血清葡萄糖测定(缩写GLU),餐后2h葡萄糖测定,各种体液葡萄糖测定;组合项目申请:葡萄糖耐量试验(缩写OGTT)。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml,不抗凝,置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml的全血标本,或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4抽血后室温放置超过4h以上的标本。
2.1.5.5静脉滴注大剂量维生素C后立即抽血的标本。
2.1.5.6其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清,并及时将血清与血球分离。
2.2.2标本保存时间:不抗凝血标本如血清未与血块分开,共存同一试管中,室温(15~25℃)下血清葡萄糖很不稳定,普通冰箱中(2~8℃)稳定1天。
加氟化钠的血液标本室温(15~25℃)下稳定4h。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,单独分离出血清后,密闭置4~8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
检查空腹血清葡萄糖的须在禁食12h以上早晨抽血。
2.3.2餐后2h葡萄糖检查,受检者于餐后2h准时抽血。
2.3.3葡萄糖耐量试验检查的血液标本,在服用75克葡萄糖后,分别于0.5h、1h、2h及3h准时抽血。
2.3.4为了避免葡萄糖被酵解,单独测定葡萄糖时,血标本可氟化钠-草酸钾抗凝,氟化钠用量为1.5mg/ml血。
葡萄糖检验标准操作规程
范围:葡萄糖职责:检验室对本规程的实施负责正文:1.性状——本品为无色结晶或白色结晶性或颗粒性粉末,无臭,味甜。
本品在水中易溶,在乙醇中微溶。
1.1比旋度——取本品约10g,精密称定,置100ml量瓶中,加水适量与氨试液0.2ml,溶解,用水稀释至刻度,摇匀,放置10分钟,在25℃时依法测定并计算,比旋度为+52.5°至+53.0°。
1.1.1执行SOP-QM-419《旋光度测定标准操作规程》。
1.1.2执行SOP-EM-302《WZZ-2B型自动指示旋光仪标准操作规程》。
1.1.3计算公式旋光度×100比旋度=称样量×(1-水份)2.鉴别2.1取本品约0.2g,加水5ml溶解后,缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中,即生成氧化亚铜的红色沉淀。
2.2本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集464图)一致。
2.2.1执行SOP-QM-421《红外分光光度法标准操作规程》。
2.2.2执行SOP-EM-309《TJ270-30A型红外分光光度计标准操作规程》。
3.检查3.1酸度——取本品 2.0g,加水20ml溶解后,加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)0.20ml,应显粉红色。
3.2溶液的澄清度与颜色——取本品5g,加热水溶解后,,放冷 , 用水稀释至10ml,溶液应澄清无色;如显浑浊,与1号浊度标准液比较,不得更浓;如显色,与对照液(取比色用氯化钴液 3ml,比色用重铬酸钾液3ml与比色用硫酸铜液6ml,加水稀释成50ml)1.0ml 加水稀释至10ml比较,不得更深。
3.2.1执行SOP-QM-413《澄清度检查标准操作规程》。
3.2.2执行SOP-QM-410《溶液颜色检查标准操作规程》。
3.3乙醇溶液的澄清度——取本品1.0g,加90%乙醇 30ml,置水浴上加热回流约10分钟,溶液应澄清。
3.3.1执行SOP-QM-411《澄清度检查标准操作规程》。
001 葡萄糖检验标准操作规程
1. 目的:建立食用葡萄糖检验标准操作规程,为食用葡萄糖的质量控制提供依据,确保产品质量。
2. 范围:适用于食用葡萄糖。
3. 责任:QC 主管、QC 人员。
4. 内容:4.1 检品名称 分子式 分子量 规格 食用葡萄糖 C 6H 12O 6 180 食用级 4.2 取样方法:执行《物料取样管理规程》。
4.3 检验标准:执行《食用葡萄糖质量标准》。
4.4 检验项目与方法 4.4.1 感官要求4.4.1.1 外观:结晶性粉末,无肉眼可见杂质。
4.4.1.2 气味:无异味。
4.4.1.3 滋味:甜味温和、纯正、无异味。
4.4.1.4 颜色:白色或无色。
4.4.2 理化要求 4.4.2.1 比旋光度 4.4.2.1.1 测定原理平面偏振光通过含有某些光学活性化合物液体或溶液时,能引起旋光现象,使偏振光的平面向左或右旋转,旋转的读数,称为旋光度。
而比旋度则是指偏振光通过长1dm 且每1ml 含旋光物质1g 的溶液,在一定的波长和温度下的旋光度称为比旋度。
旋光度与偏振光通过待测液的路径长度 L 和待测液浓度c 的积成正比。
4.4.2.1.2 仪器4.4.2.1.2.1 旋光仪:精度0.01°。
4.4.2.1.2.2 分析天平:感量0.1mg 。
4.4.2.1.2.3 容量瓶:100ml 。
复 印 号: / 题目:食用葡萄糖检验标准操作规程 版 本 号:00 编写人: 审核人: 审核人: 批准人:日 期:日 期:日 期: 日 期:颁发部门 品控部生效日期分发部门:品控部、中心化验室 文件编写/修订:2012年04月05日编写4.4.2.1.3 试液氨试液。
4.4.2.1.4 操作过程取供试品约10g ,精密称定,置100ml 容量瓶中,加水适量溶解,加氨试液0.2ml ,用水稀释至刻度,摇匀,放置10分钟,于20℃,依《WZZ-1型自动旋光仪标准操作规程》测定旋光度。
4.4.2.1.5 计算)1(100][水分-⨯⨯⨯=L m aa t D式中:[α]—比旋光度(°); t —温度20℃;D —钠光谱的D 线(589.3nm ); α—旋光度(°); m —供试品的质量(g ); L —旋光管的长度(dm ); 所得结果保留一位小数。
血清葡萄糖测定标准操作规程
⾎清葡萄糖测定标准操作规程葡萄糖测定标准操作规程1 检验申请单独检验项⽬申请:空腹⾎清葡萄糖测定(缩写GLU),餐后2h葡萄糖测定,各种体液葡萄糖测定;组合项⽬申请:葡萄糖耐量试验(缩写OGTT)。
临床医⽣根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采⾎约2 ml,不抗凝,置普通试管中。
或采⽤含分离胶的真空采⾎管。
2.1.2检验申请单和⾎标本试管标上统⼀且唯⼀的标识符。
2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单⼀起及时运送⾄检验科。
专⼈负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不⾜:少于0.3ml的全⾎标本,或少于0.1ml的⾎清或⾎浆。
2.1.5.2对反应吸光度有⼲扰的标本,包括严重溶⾎、严重浑浊的标本。
2.1.5.3⽆法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4抽⾎后室温放置超过4h以上的标本。
2.1.5.5静脉滴注⼤剂量维⽣素C后⽴即抽⾎的标本。
2.1.5.6其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离⼼分离出⾎清,并及时将⾎清与⾎球分离。
2.2.2标本保存时间:不抗凝⾎标本如⾎清未与⾎块分开,共存同⼀试管中,室温(15~25℃)下⾎清葡萄糖很不稳定,普通冰箱中(2~8℃)稳定1天。
加氟化钠的⾎液标本室温(15~25℃)下稳定4h。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,单独分离出⾎清后,密闭置4~8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采⾎前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
检查空腹⾎清葡萄糖的须在禁⾷12h以上早晨抽⾎。
2.3.2餐后2h葡萄糖检查,受检者于餐后2h准时抽⾎。
2.3.3葡萄糖耐量试验检查的⾎液标本,在服⽤75克葡萄糖后,分别于0.5h、1h、2h及3h准时抽⾎。
2.3.4为了避免葡萄糖被酵解,单独测定葡萄糖时,⾎标本可氟化钠-草酸钾抗凝,氟化钠⽤量为1.5mg/ml⾎。
市妇幼保健血液葡萄糖测定技术操作规程
市妇幼保健血液葡萄糖测定技术操作规程
1.检测目的
检测血清或血浆中葡萄糖的含量为临床对相关疾病的诊断观察疾病的变化及治疗效果以及对健康人群正常生理指标的监测提供重要的参考价值
2.标本要求
1.病人准备空腹12小时
2.标本类型血清或NaF抗凝的血浆采血后及时分离以避
免血清或血浆中葡萄糖被细胞利用而降低
3.设备和试剂
1.仪器设备全自动生化分析仪
2.试剂材料四川迈克公司试剂
参与反应成份
R1酚120mmolL
R2GOD≥35KULPOD≥5KUL4-AAP120mmolL
3.试剂的贮存
2~8℃密闭避光贮存至标签所注失效期
2~8℃避光稳定30天
试剂混浊变色或空白吸光度值 0150时不能继续使用
4.注意此试剂为体外诊断用禁止入口吞下有害试剂含有
叠氮化钠误入眼口中或沾染到皮肤上请立即用清水彻底冲洗必要时到医院就诊叠氮化钠可以和铜铅等金属反应形成爆炸性化合物故废弃时请充分稀释废液和冲洗排水管
5.试剂准备即开即用的无需特殊准备
4.质量控制
1.质控物RANDOX多项人基质血清
2.质控措施
3.质控每日日常工作前进行
4.质控参加焦作临床检验中心临床化学室间质评
5.参考区间及可报区间
1.参考范围空腹389~611mmolL
餐后1小时778~889mmolL
餐后2小时389~778mmolL
2.可报范围000~2230mmolL样品GLU含量超过线性范围应
用生理盐水稀释重做结果乘以稀释倍数
6.危急值及处理方法
22.2mmol/L及时与临床联络。
血气分析葡萄糖测定标准操作规程
血气分析葡萄糖测定标准操作规程1 检验申请一般为组合项目申请:血气分析测定,临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1血标本采集2.1.1采集动脉血1-2ml,也可采用动脉化毛细血管血或静脉血,但静脉血所测结果不适用于了解体内O2的运输状态,故PO2及有关推算数据仅供参考,对pH及PCO2等酸碱平衡指标是适用的。
2.1.2采血后立即将针头插入一个小橡胶塞子中以隔绝空气,同时轻轻转动注射器使血液与抗凝剂充分混合。
2.1.3标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。
2.1.4下列标本为不合格标本2.1.4.1有气泡、凝块、溶血的标本。
2.1.4.2无法确认标本与申请单对应关系的标本。
2.1.4.3其他如标识涂改、标本容器未严格与隔绝的标本等。
2.2标本保存血气分析的标本应在采取后30min内检测,如30min内不能检测,应将标本置于冰水中保存,最多不超过2h。
2.3注意事项2.3.1采血操作不当:采血不当指患者情绪不稳、吸氧,在患者循环不良部位采血或患者输液侧采血等。
患者情绪不稳时采血,测得的pH会升高,PCO2会降低。
吸氧时采血,测得的PO2会升高。
在患者循环不良部位采血,测得的PCO2会升高,pH、PO2降低。
在患者输液侧采血,测得的pH会受患者所输液体酸碱度的影响。
2.3.2气泡的影响:可使pH 、PO2升高,PCO2降低。
原因系空气中氧和二氧化碳含量与血液存在明显差异,根据弥散原理,若血液中混入气泡,两者间的氧和二氧化碳必然发生交换,平衡后会出现pH 、PO2升高,PCO2降低。
2.3.3肝素的影响:随着肝素对血液比例的加大,血气分析结果中的pH 、PO2升高,PCO2降低。
肝素与血液最适比例在1:20。
建议使用专用血气采集针,其采用肝素锂干粉为抗凝剂,特别是将血气与电解质测定配套进行。
2.3.4标本溶血、凝血的影响:血液溶血,会使PO2,PCO2升高,pH降低。
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葡萄糖OF试验标准操作规程
1.目的
规范O∕F试验标准操作规程。
2.原理
又称氧化∕发酵(O∕F)试验,观察细菌对葡萄糖分解过程中是利用分子氧(氧化型),还是无氧酵解(发酵型),或不分解葡萄糖(产碱型)。
3.试剂
3.1 O∕F基础培养基成分
葡萄糖10g 溴甲酚紫(1.6%水溶液)1.0ml
蛋白胨20g 琼脂3g
磷酸氢二钾0.2g 氯化钠5g
蒸馏水1000ml
3.2 制备上述成分除指示剂外加热溶解后校正pH 至7.1,加入指示剂并分装13×100mm的试管,每管2~3ml,置高压灭菌器内,经115℃15分钟的灭菌,即为O∕F基础培养基。
最终糖浓度为1%。
4.质控
铜绿假单胞菌ATCC27853开放管为黄色,封闭管为紫色;大肠埃希菌ATCC25922开放管、封闭管均为黄色。
5.操作步骤
从平板上或斜面培养基上挑取少量细菌,同时穿刺接种于2支O∕F试验管,其中1支用滴加溶化的无菌凡士林(或液体石蜡)覆盖培养基液面0.3~0.5cm高度。
经37℃培养48小时后,观察结果。
6.结果判断
仅开放管产酸为氧化反应,两管都产酸为发酵反应,两管均不变为产碱型。
7.注意事项
有些细菌不能在O∕F培养基上生长,若出现此类情况,应在培养基中加入2%血清或0.1%酵母浸膏,重做O∕F试验。
8.临床意义
葡萄糖O∕F试验可用于葡萄球菌与微球菌的鉴别,前者为发酵型细菌,后者为氧化型细菌。
更重要的是用于革兰阴性杆菌的鉴别,肠杆菌科的所有细菌为发酵型细菌,而绝大多数的非发酵菌则为氧化型或产碱型细菌。