睡眠剥夺对小鼠免疫的影响 共20页
睡眠剥夺小鼠海马组织氧化应激水平及血红素加氧酶-1表达的研究
【摘要】 目的 研究睡眠剥夺小鼠海马组织的氧化应激水平及血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）表达情况。
方法 采用多平台睡眠剥夺方法在小鼠睡眠剥夺的24 h 、48 h 、72 h 进行取材，检测小鼠海马组织超氧化物歧化酶（superoxide dismutase ，SOD ）的活性和丙二醛（malondialdehyde ，MDA ）水平，采用半定量逆转录聚合酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction ，RT-PCR ）检测HO-1 mRNA 的表达水平。
结果 睡眠剥夺48 h ，小鼠海马组织SOD 活性显著增强，HO-1 mRNA 表达明显上调；睡眠剥夺72 h ，小鼠海马组织MDA 表达有增高趋势，SOD 活性下降，HO-1 mRNA 仍持续高表达。
结论 睡眠剥夺可影响小鼠海马组织氧化应激水平，且伴随小鼠海马组织HO-1表达上调。
【关键词】 睡眠剥夺；氧化应激；血红素加氧酶-1；超氧化物歧化酶；丙二醛Study on the level of oxidative stress and the expression of heme oxygenase-1 in hippocampus of sleep deprivation miceZhai Lei 1, Chen Jun 2, Feng Zijing 2 (1. Intensive Care Unit, Beijing Bo'ai Hospital, Beijing 100086, China; 2. Laboratory of Neurology, Beijing Friendship Hospital, Capital Medical University, Beijing 100050, China)Correspondingauthor:ZhaiLei,E-mail:***************【Abstract 】 Objective To validate the level of oxidative stress and the expression of heme oxygenase-1 (HO-1) in hippocampus of sleep deprivation mice. Method The activity of superoxide dismutase (SOD) and the level of malondialdehyde (MDA) in hippo-campus of mice were detected by multi-platform sleep deprivation method at 24 h, 48 h and 72 h after sleep deprivation, the expr e ssion level of HO-1 mRNA was detected by semi-quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Result After 48 h of sleep deprivation, the activity of SOD and the expression of HO-1 mRNA in hippocampus of mice were significantly increased; after 72 h of sleep deprivation, the expression of MDA in hippocampus tended to increase, the activity of SOD decreased, and the expression of HO-1 mRNA remained at a high level. Conclusion Sleep deprivation can affect the level of oxidative stress in the hippocampus of mice, and the expression of HO-1 in the hippocampus of mice is up-regulated.【Key words 】 Sleep deprivation; Oxidative stress; Heme oxygenase-1; Superoxide dismutase; Malondialdehyde睡眠剥夺小鼠海马组织氧化应激水平及血红素加氧酶-1表达的研究翟蕾1，陈珺2，冯子敬2（1．北京博爱医院 ICU ，北京 100086；2．首都医科大学附属北京友谊医院神经内科实验室，北京 100050）通信作者：翟蕾 E-mail ：***************近年文献报道睡眠障碍广泛存在于颅脑损伤患者中，尤其是轻度颅脑损伤患者较常见。
睡眠剥夺对小鼠学习记忆能力及焦虑行为的影响初探
睡眠剥夺对小鼠学习记忆能力及焦虑行为的影响初探作者：唐子涵来源：《魅力中国》2018年第23期摘要：睡眠对动物的生理活动具有不可忽视的重要作用，睡眠剥夺（sleep deprivation SD）被认为是对动物脑认知能力有明显的损害，但是其具体效果却各有不同的说法。
中华行为医学与脑科学杂志上的《睡眠剥夺对小鼠学习记忆和海马pCREB水平的影响》[1]一文中所用的睡眠剥夺方法是“轻触法”，而本实验所用的睡眠剥夺方法是“转轮法”，并且该文中睡眠剥夺历时三十天，本研究由于学业的紧张，时间不是很充裕，所以只是睡眠剥夺了一天；此外，由于实验设备有限，本研究中所用的迷宫为自制迷宫，多数文献中所用到的检测学习记忆能力的装置都是水迷宫，本研究运用另一种不同的迷宫想要找出其中是否会有差异。
另外，有实验表明，慢性不完全剥夺睡眠导致小鼠的空间学习记忆能力明显下降，出现该结果的原因是动物睡眠剥夺后出现代谢紊乱，这时的脑组织出现慢性缺氧状态，智能活动所需要的血液供应和能量供应相应减少而致使记忆获得功能受损[2]。
本实验通过运用转轮装置完全剥夺睡眠一天观察睡眠剥夺对小鼠学习记忆能力以及焦虑行为的影响，探讨睡眠剥夺对小鼠正常生理活动的影响。
经实验以及对文献的阅读，在本研究中，关注指标分别为小鼠的学习记忆能力和焦虑行为的改变。
本文旨在研究以小鼠受到睡眠剥夺后的身体状况并由此进行推测。
关键词：睡眠剥夺；学习；记忆；焦虑行为引言夜间睡眠对于维持人体的正常生理活动有着极大的作用，作为影响人类日常工作学习的重要因素，“熬夜会对人体产生负面影响”的说法也在社会上广为流传。
尽管负面影响的说法的确与事实相符，而其具体效果却众说纷纭。
身为中学生，身边也有许多同学总是熬夜，第二天在学校的时候就会表现出不同的反应，有些同学认为熬夜对自己的学习生活影响不大，而另外一些同学认为熬夜会很大程度地影响自己第二天的在校的学习生活，在这些人当中有些人认为熬夜直接对自己的学习记忆能力有所影响，还有一些同学认为熬夜对学习生活的不良影响其实是来源于它对人心情的不好的影响，有可能会使我们的情绪低落、心情烦闷，容易急躁。
睡眠剥夺的动物实验研究
马及视 丘的ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 达 明显减少 。但是 Ｓ ２ Ｄ ４小 时 的大 鼠
同对 照 组 相 比表 达 无 明 显 差 异 。 Ｏ’ ｒ Ｈａａ等 以摇 动 笼 子 及 用 手 拨 动 的 方 法 进 行
由于 Ｓ Ｄ能导致 生化 功 能的改 变 ，而其 中的一 些重 要递质 如 Ｄ Ａ，５ＨＴ， － ＮＥ， ｃ Ａ ｈ等与学 习和记 忆的关 系非 常密切 ，因此人们 认 为 Ｓ Ｄ后 学习 记忆 能力下 降 可能 与 Ｓ Ｄ后 脑 内神 经递 质的 改变 有 关 。 但 睡眠 及 Ｓ Ｄ对学 习记忆 的影 响机 制究竟 如何 ， 目 前 尚不清楚
中随 和脑桥 区未受影 响 ， 延髓 完全正 常 并认 为 ，Ｄ Ｓ 影 响的主要是 与那些 同体温调 节 、内分泌调节及 睡 眠机制有关 的脑 区 ，并 以能量代 谢障碍 为特征 。
Ｓ Ｄ对 动物 的行 为也 有 影 响 ：７ ～ ９ ２ ６小 时 Ｓ Ｄ
改善 突触 传递 ， 增强对获取 的信息进 行处理 和加工 、
ＩＧ Ｅ ｓ水 平 。 。发 现 Ｓ 后 所 有 检 测 脑 区 ｃｆｓｍＲ 。 Ｄ — ｏ
ＮＡ 水 平升高 ，小脑 最明显 。桥 脑和小脑在 Ｓ Ｄ后 ３
各 种应 激 可 引起 神 经细 胞 即刻 早期 基 因 （ ｉ ｍ— ｍｅ ｉｔ ｅ ｒ ｅ ｅ ， Ｅ ｓ ｄａｅ ａｌ ｇ ｎ ｓ Ｉ Ｇ ）的表达 ，这种表 达具有 ｙ
在 特 定 脑 区 发 现 Ｆ Ｉ 胞 “ 下 丘 脑 视 前 核 、 联 Ｌ 细 ： 侧
影 响记忆 的形 成 ，但不 能完 全妨碍记忆 的形成 。
研 究还 发现 ，Ｓ 对学 习 和记 忆能 力 的影 响可 Ｄ 能有 另一方 面的作用 。 例如在 条件性味觉厌 恶 （ｏ — ｃ ｎ ｄｔ ｎｄｌｓｅａ ｅｓ ｎ Ｃ ｉｏ ｅ ａｔ ｖ ｒｉ ， ＴＡ） ｉ ｏ 试验 中发现 ， 虽然短 期的 Ｓ （ ２ｈ Ｄ ＜ ４ ）显示学 习能力完 全下降 ，但 大 于
睡眠剥夺对小鼠免疫的影响
谢
谢 ！
对照组
实验组
用特定病毒抗 原对两组小鼠 进行免疫，一 定的时间后抽 取小鼠血液制 成血清滴在反 应板上，用特 定病毒进行滴 加，观察血液 凝剂情况并记 录
对已经免疫的A 组小鼠进行不同 程度的睡眠剥夺， B组不做睡眠剥 夺，然后对实验 小鼠进行上述血 凝操作，观察血 凝情况
96孔微量反应板的清洗
睡眠剥夺对小鼠 免疫能力的影响
主讲人：辛凯悦 指导老师：朱艳媚
组员：杜晨阳、辛凯悦、 李毅、朱灵凤、舒文静
动物模型的建立
统计 正文 参考文献
研究对象
睡眠剥夺对小鼠 免疫能力的影响
免疫功能测定
讨论
实验预期
研究目的
睡眠是一种生理现象，睡眠 充足与否与人体健康有着密 切联系。长期睡眠剥夺可引 起人或动物产生不良情绪反 应、免疫功能下降等等。随 着生活节奏的加快，越来越 多的儿童与成年面临睡眠不 足的危害，这已足够引起人 们的注意。本小组通过一种 慢性不完全剥夺小鼠睡眠实 验来观察睡眠不足对小鼠免 疫功能的影响。
3.红血球凝集实验 在反应板上可以直观地观察到：对照组红细 胞不凝集，在反应板的微孔中红细胞沉底呈 点状，经过免疫的小鼠体内产生较多的抗体， 可以与加入的流感病毒反应而抑制鸡血红细 胞的凝集作用；实验组的红细胞凝集，在反 应板的微孔中平铺呈网状，即经过睡眠剥夺 的小鼠免疫能力会下降，产生的流感病毒抗 体减少，流感病毒与鸡血红细胞产生凝集作 用要强于对照组。
睡眠剥夺是指由于某种原因导致的睡眠数量被迫减 少，它对机体的影响是十分明显的。它可以造成机 体疲劳、作业能力降低、免疫力下降、警觉水平降 低，并引起情绪改变、精神不振、粗心、注意力不 集中、食欲下降、记忆力下降、工作效率低等不良 反应。 不完全睡眠剥夺可导致免疫功能的下降. 机体内过 量的自由基可对机体产生伤害,其重要原因是产生脂 质过氧化物,造成对细胞结构和功能的破坏,从而导 致衰老和各种疾病,机体内超氧化物歧化酶(SOD) 的 功能是清除体内的氧自由基,从而对机体起到保护作 用 ,增强免疫力. 有研究表明,长期睡眠较差的人的 血清过氧化脂质明显偏高,红细胞SOD 活性明显偏低, 从而导致机体免疫力下降.。本实验的预期结果是慢 性不完全睡眠剥夺会对小鼠的免疫器官产生伤害,其 机制可能与上述因素有关。
睡眠剥夺实验实验报告
一、实验目的1. 了解睡眠剥夺对生物体的影响。
2. 探究睡眠剥夺对小鼠生理和心理状态的影响。
3. 分析睡眠剥夺对小鼠免疫系统的影响。
二、实验方法1. 实验动物：选用健康、体重相近的小鼠30只，随机分为3组，每组10只。
2. 实验分组：A组：正常睡眠组，小鼠在正常睡眠环境中生活；B组：短期睡眠剥夺组，小鼠睡眠剥夺时间为48小时；C组：长期睡眠剥夺组，小鼠睡眠剥夺时间为96小时。
3. 实验操作：（1）A组：保持小鼠在正常睡眠环境中生活，记录其睡眠时间和睡眠质量。
（2）B组：将小鼠置于无光、无噪音的环境中，限制其睡眠时间为48小时，期间提供充足的食物和水。
（3）C组：将小鼠置于无光、无噪音的环境中，限制其睡眠时间为96小时，期间提供充足的食物和水。
4. 实验指标：（1）生理指标：观察小鼠的体重、心率、体温等生理指标的变化。
（2）心理指标：通过观察小鼠的行为、情绪等心理指标的变化，评估睡眠剥夺对小鼠心理状态的影响。
（3）免疫系统指标：检测小鼠血液中的细胞因子水平，评估睡眠剥夺对小鼠免疫系统的影响。
三、实验结果1. 生理指标：（1）A组：小鼠体重、心率、体温等生理指标基本稳定；（2）B组：小鼠体重略有下降，心率加快，体温略有升高；（3）C组：小鼠体重明显下降，心率明显加快，体温明显升高。
2. 心理指标：（1）A组：小鼠行为正常，情绪稳定；（2）B组：小鼠表现出焦虑、紧张等情绪，活动量增加；（3）C组：小鼠出现明显的抑郁、焦虑、攻击性等情绪，活动量减少。
3. 免疫系统指标：（1）A组：小鼠血液中细胞因子水平基本稳定；（2）B组：小鼠血液中细胞因子水平略有升高；（3）C组：小鼠血液中细胞因子水平明显升高，出现细胞因子风暴。
四、实验分析1. 睡眠剥夺对小鼠生理指标的影响：睡眠剥夺会导致小鼠体重下降、心率加快、体温升高，表明睡眠剥夺对小鼠的生理状态有不良影响。
2. 睡眠剥夺对小鼠心理指标的影响：睡眠剥夺会导致小鼠出现焦虑、紧张、抑郁、攻击性等情绪，表明睡眠剥夺对小鼠的心理状态有不良影响。
REM睡眠剥夺对小鼠海马tau蛋白磷酸化的影响
灌注阻力 ， 心肌血供减少 ， 诱发 急性 心肌缺血性损伤。 目前认 为 这些 反 应 可 能是 远 隔器 官 在 应 激状 态 下 的一 种 自身保护机制。 本研 究发 现 ， 在 Ｓ ｈ ａ ｍ组中， Ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ一 ３蛋 白的表 达
量 明显低 于其 他各 组 （Ｐ ＜ ０ ． ０ ５ ） ； 而Ｉ ／ Ｒ组 Ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ一 ３
Ｂｉ ｏ ｓ ｃ ｉ ．２ ０ ０ ４． ９： ３ ３ ９ ２ —３ ３ ９ ８ ．
团标 基于睡眠剥夺致免疫力低下小鼠模型的免疫力评价方法
团标基于睡眠剥夺致免疫力低下小鼠模型的
免疫力评价方法
近年来，睡眠质量越来越引人关注。
睡眠剥夺不仅会导致身体疲
劳和认知能力下降，还会增加人们对各种疾病的敏感性。
团标基于睡眠剥夺致免疫力低下小鼠模型的免疫力评价方法，就
是一种能够准确、科学地评估小鼠免疫力的方法。
这种方法是如何实
现的呢？
首先，研究者需要通过特定的实验操作，使小鼠产生睡眠剥夺状态。
通常采取的方法是将小鼠放置于一个水平不平整的转动的盘子上，以防止它们入睡。
这样的实验需要有针对性地进行，确保小鼠没有受
到生理、心理上的过分刺激。
其次，研究者需要对小鼠进行免疫力评价。
这种评价可以采用不
同的方法，如测量小鼠体内一些关键免疫指标的含量、测定它们的免
疫细胞增殖能力等等。
这些指标的变化可以反应小鼠在睡眠剥夺状态
下免疫力的变化。
最后，研究者需要分析评价结果，统计各项指标的变化情况，从
而得到最终的结论。
这个过程需要综合考虑小鼠的体重、饮食、环境
等各种因素，确保统计结果具有可靠性和科学性。
团标基于睡眠剥夺致免疫力低下小鼠模型的免疫力评价方法，为
科学研究提供了一个可靠和方法。
它可以为深入研究睡眠与免疫力之
间的关系提供帮助，同时也可以帮助我们更好地理解各种疾病与睡眠
不足之间的联系。
小鼠睡眠剥夺实验方法
小鼠睡眠剥夺实验方法引言：睡眠是生命中不可或缺的一部分，对于人类和动物的健康和生存至关重要。
睡眠剥夺实验是一种常用的研究方法，用于探究睡眠对生理和心理功能的影响。
本文将重点介绍小鼠睡眠剥夺实验的方法和应用。
一、实验目的小鼠睡眠剥夺实验的主要目的是通过剥夺小鼠正常的睡眠时间，观察其对生理和行为的影响，以进一步了解睡眠对小鼠的重要性和其对生物体的整体影响。
二、实验方法1. 小鼠选择：选择健康、成年的小鼠，一般选择同一品系、同一性别的小鼠，以减少变异因素的干扰。
2. 实验组和对照组的设定：将小鼠随机分为实验组和对照组。
实验组进行睡眠剥夺实验，对照组则保持正常的睡眠。
3. 睡眠剥夺方法：常用的睡眠剥夺方法有以下几种：a. 简单机械干扰法：通过制作特殊的装置，如水平移动鼠笼或旋转鼠轮，以阻止小鼠进入睡眠状态。
b. 人工唤醒法：通过人工干预，如触摸小鼠的尾巴或轻拍鼠笼，以唤醒小鼠，阻止其进入睡眠状态。
c. 低温暴露法：将小鼠置于低温环境中，使其产生寒冷感，以促使小鼠保持清醒状态。
4. 实验时间的控制：根据实验需要，可以进行不同时间长度的睡眠剥夺，如短期剥夺（几小时）或长期剥夺（数天或更长时间）。
5. 实验数据的记录：记录小鼠的行为表现、生理指标和神经活动等数据，以便后续分析和比较。
三、实验应用小鼠睡眠剥夺实验在科学研究中具有广泛的应用价值，主要体现在以下几个方面：1. 睡眠与认知功能：通过睡眠剥夺实验，可以研究睡眠对小鼠认知功能的影响，如学习记忆、决策能力等。
2. 睡眠与情绪行为：睡眠剥夺实验可以探究睡眠对小鼠情绪行为的影响，如焦虑、抑郁等。
3. 睡眠与免疫功能：通过睡眠剥夺实验，可以研究睡眠对小鼠免疫功能的影响，如炎症反应、免疫调节等。
4. 睡眠与代谢调节：睡眠剥夺实验可以揭示睡眠对小鼠代谢过程的调节作用，如食欲调控、能量平衡等。
结论：小鼠睡眠剥夺实验是一种常用且有效的研究方法，可以通过剥夺小鼠正常的睡眠时间，揭示睡眠对小鼠生理和行为的重要影响。
两种睡眠剥夺模型对小鼠情绪和学习记忆的影响
陕西师 范 大学 学报 （自然科 学版）
ＶｏＩ＿４６ ＮＯ．５
２０１８年 ９ 月 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｈａａｎｘｉ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ （Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ） Ｓｅｐ．，２Ｏ１８
引用 格 式 ：刘 陶 ，郁 婧 ，钱 召 强 ，等 ．两 种 睡 眠 剥 夺 模 型 对 小 鼠 情 绪 和 学 习 记 忆 的影 响 ＥＪ］．陕 西 师 范 大 学 学 报 （自然 科 学 版 ）， ２０１８，４６（５）：７７—８２．［－ＬＩＵ Ｔ ，ＹＵ Ｊ，ＱＩＡＮ Ｚ Ｑ ，ｅｔ ａ１．Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｗｏ ｓｌｅｅｐ ｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｎ ｍｏｏｄ，ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ ｏｆ ｍｉｃｅＥＪ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｈａａｎｘｉ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ），２０１８，４６（５）：７７—８２．］ＤＯＩ：ｉ０．１５９８３／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｓｎｕ．
收 稿 日期 ：２０１８—０２—０７ 基 金 项 目 ：国 家 自然 科 学 基 金 （８１７７１２２７）；教 育 部 科 学 技 术 研 究 项 目（１１３０５６Ａ） ＊通 信 作 者 ：韩 静 ，女 ，教 授 ，硕 士 生 导 师 ，主要 从 事 大 麻 素 成 瘾 及其 对 学 习记 忆影 响 的研 究 。Ｅ－ｍａｉｌ：ｊｈａｎ２０１２＠ ｓｎｎｕ．ｅｄｕ．ｅｎ
（Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｍ ｏｄｅｒｎ Ｔｅａｃｈｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｈａａｎｘｉ Ｎｏｒｍ ａｌ Ｕ ｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｘｉ ａｎ ７１００６２，Ｓｈａａｎｘｉ，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｌｅｅｐ ｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎｓ（ＳＤ） ｏｎ ｔｈｅ ｍｏｏｄ，ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ ｏｆ ｍ ｉｃｅ，ｂｏｔｈ ｍ ｕｌｔｉｐｌｅ ｐｌａｔｆｏｒｍ ｍ ｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｓｌｅｅｐ ｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ ｔａｎｋ ｍ ｅｔｈｏｄ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｆａｃｔｏｒｓ ｏｎ ｔｈｅ ａｎｘｉｅｔｙ—ｌｉｋｅ ｂｅｈａｖｉｏｒ，ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍ ｅｍ ｏｒｙ．Ｔｈｅ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗ ｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ．１ ２ ｈ ＳＤ ａｎｄ ２４ ｈ ＳＤ ｄｉｄ ｎｏｔ ａｆｆｅｃｔ ａｎｘｉｅｔｙ—ｌｉｋｅ ｂｅｈａｖｉｏｒ，ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍ ｅｍ ｏｒｙ ｉｎ ｅｉｔｈｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ａｂｏｖｅ ｐａｒａｄｉｇｍｓ． Ｔｈｅ ａｎｘｉｅｔｙ—ｌｉｋｅ ｂｅｈａｖｉｏｒ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｉｎ ｍｉｃｅ ｓｕｂｊ ｅｃｔｅｄ ｔｏ ４８ ｈ ＳＤ ｖｉａ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｐｌａｔｆｏｒｍ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｓｐａｔｉａｌ ｍｅｍｏｒｙ ｗａｓ ｎｏｔ ａｆｆｅｃｔｅｄ，ｂｕｔ ｓｌｅｅｐ ｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ ｔａｎｋ ｄｉｄ ｎｏｔ ｍ ａｋｅ ｍ ｉｃｅ ａｐｐｅａｒ ａｎｘｉｅｔｙ—ｌｉｋｅ ｂｅｈａｖｉｏｒ ａｎｄ ｓｐａｔｉａｌ ｍ ｅｍ ｏｒｙ ａｂｉｌｉｔｙ ａｆｔｅｒ ４８ ｈ ＳＤ． Ｉｎ ｔｈｅ ｓｌｅｅｐ ｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ ｔａｎｋ ｅｘｐｅｒｉｍ ｅｎｔ，ａ ｌｏｎｇ—ｔｉｍｅ ＳＤ ｃｏｕｌｄ ｉｎｄｕｃｅ ａｎｘｉｅｔｙ—ｌｉｋｅ ｂｅｈａｖｉｏｒ，ｗｈｅｒｅａｓ ｔｈｅ ｌｅａｒｎｉｎｇ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍｉｃｅ ｓｌｏｗｅｄ ｄｏｗｎ ａｎｄ ｓｐａｔｉａｌ ｍｅｍｏｒｙ ｗａｓ ｉｍ ｐａｉｒｅｄ ａｆｔｅｒ ３ ｗｅｅｋｓ ＳＤ．Ｔｈｕｓ，ｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ ｔａｎｋ ｉＳ ａｄｖａｎｔａｇｅｏｕｓ ａｓ ａｎ ＳＤ ｍｏｄｅｌ ｆｏｒ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｈｕｍ ａｎ ｌｏｎｇ—ｔｅｒｍ ｓｌｅｅｐ ｉｎｓｕｆｆｉｃｉｅｎｃｙ． Ｋ ｅｙｗｏｒｄｓ：ｓｌｅｅｐ ｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ；ａｎｘｉｅｔｙ—ｌｉｋｅ ｂｅｈａｖｉｏｒ；ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍ ｅｍ ｏｒｙ
睡眠剥夺后休息不同时间小鼠脑体功能变化的研究
睡眠剥夺后休息不同时间小鼠脑体功能变化的研究作者：孟辉来源：《中国实用医药》2013年第09期【摘要】目的观察小鼠睡眠剥夺（sleep deprivation SD）后休息不同时间学习记忆及体质的变化。
方法用小平台水环境法建立小鼠SD模型，并测定其空间学习记忆能力和体能。
观察小鼠SD后休息不同时间的Y迷宫成绩、爬坡成绩及体重变化。
结果小鼠SD24 h后Y迷宫正确率R0h组、R2h组、R4h组、R8组和R8h组较CC组显著下降（P0.05）爬坡成绩R0h 组、R2h组较CC组稍下降（P>0.05），R4h组、R6h组较CC组下降明显（P0.05）。
体重R4h组、R6h组和R8h组下降明显（P【关键词】睡眠剥夺； Y迷宫；爬坡；体重；休息睡眠是机体不可缺少的生理需要，具有维持个体发育、易化学习、形成记忆等功能。
睡眠剥夺（sleep deprivation SD）即减少受试者的睡眠时间。
长期严重的SD可引起动物或人产生不良情绪、学习记忆受损、免疫功能下降、体质下降[1，2]。
而在特殊职业中（如医务人员、船员、话务员、军人等）睡眠剥夺不可避免。
本研究试图了解SD24 h休息不同时间学习记忆和体质恢复情况，为合理安排连续性作业后休息时间提供依据。
1 材料与方法1.1 动物及分组取昆明种健康小鼠48只（天津试验动物中心提供）应用随机数目表随机分成CC组、R0h组、R2h组、R4h组、R6h组R8h组、R10h组和R12h组共八组，每组6只，实验前小鼠适应环境3天，SD前记录每只小鼠的体重。
1.2 实验方法1.2.1 动物训练 Y迷宫有3个相连通的臂，底面为可通电的铜栅，四壁为绝缘塑料板，亮灯区为安全区，暗臂为危险区。
实验时三臂轮流作为安全区和危险区。
训练开始时，将小鼠放入安全区适应环境10 s，然后转换灯源，直到小鼠逃到安全区，结束一次训练。
在安全区适应10 s后再次转换灯源，依此类推进行训练，以转换灯源后小鼠1次性跑到安全区为正确，否则为错误。
睡眠剥夺后休息不同时间小鼠脑体功能变化的研究
睡眠剥夺后休息不同时间小鼠脑体功能变化的研究【摘要】目的观察小鼠睡眠剥夺（sleep deprivation sd）后休息不同时间学习记忆及体质的变化。
方法用小平台水环境法建立小鼠sd模型，并测定其空间学习记忆能力和体能。
观察小鼠sd后休息不同时间的y迷宫成绩、爬坡成绩及体重变化。
结果小鼠sd24 h后y迷宫正确率r0h组、r2h组、r4h组、r8组和r8h组较cc组显著下降（p0.05）爬坡成绩r0h组、r2h组较cc组稍下降（p>0.05），r4h组、r6h组较cc组下降明显（p0.05）。
体重 r4h 组、r6h组和r8h组下降明显（p0.05）。
sd24 h后r0h组、r2h组、r4h组、r6h组r8h组迷宫正确率较cc组均显著下降（p0.05）。
2.2 sd后休息不同时间对小鼠体质的影响。
（见表1）sd后r0h组和r2h组的爬坡能力较cc组稍有下降（p>0.05），r4h组和r6h的爬坡角度则大幅度下降（p0.05），体重r4h组、r6h 组和r8h组下降明显（p0.05）。
3 讨论sd是研究睡眠的重要方法。
本研究采用小平台水环境法进行sd，各组结果均表明了sd对学习记忆和体能的影响，由于sd后仍有一定的应激作用，兴奋性较高，故r0h组小鼠学习记忆和体能保持在一个较高的水平。
由于应激水平的消退，r4h组各项指标降到最低，以后逐渐回升，r10h组基本恢复。
体重是衡量机体生长发育的重要指标。
运动能力是人体进行活动的基础，包括力量、速度、耐力、柔韧性以及学习掌握和完成动作的能力。
过多的自由基会导致核酸主链的断裂，碱基缺失、氢键破坏、蛋白交联或多肽链的断开，使一些重要的代谢酶因交联聚会而失活，产生一系列的病理反应。
自由基攻击细胞生物膜上的不饱和脂肪酸，使脂质过氧化并造成生物膜结构和功能的改变，细胞膜的通透性增加，胞内物溢出，线粒体膜流动性降低，功能紊乱，atp 生成减少，供能不足，肌浆网受损，不能正常摄取钙离子，造成肌浆钙离子堆积，溶酶体膜破裂，放出大量水解酶，加重组织的损伤，而致运动能力的下降[5]。
睡眠剥夺应激对幼鼠海马和视上核中谷氨酸受体及转运体表达的影响
ｐ ｅ ｓｏ ｓ ｏ ｒ ｓ ｉｎ ｆＮＭＤＡＲ２ ａ ｄ ＧＬ Ｔ ｎ Ｓ ｎ ＡＳ ｉ ＯＮ ｎ ｉ ｐ ｃ ｍｐａ ｒ ｓ ｕｎ ｅ ｌ ｅ ｅ ｒｖ ｔｏ ｎ ｙ ｕｎ ｅ ａ ｄ ｈｐ ｏ ａ ｌｇ ｕ ｄ ｒ ｓｅ ｐ ｄ ｐ ｉａ ｉｎ ｉ ｏ ｇ ｒ ｙ
Ｅ ｐｅｓ ｎ ｆ ＭＤ Ｒ ｎ Ｌ Ｓ ｐ ａｐｉ ｎ ｃ ｕ ｎ ｘ ｒｓｏ ｓ ｉ ｏ Ｎ Ａ ２ａｄＧ Ａ Ｔｉ ｓ ｒｏｔ ｕｌ ｓ ｄ ｎｕ ｃ ｅ ａ
ｈｐ ｏａ ａ ｙｎ ｎ ｅ ｌｅ ｅ ｒ ａｉｎｉ ｏ ｎ ａｓ ｉｐ ｃｍｐｌ ｒ ｕ ｄｒｓ ｐｄ ｐｉ ｔ ｙ ｕ ｇｒｔ ｇ ｓ ｅ ｖ ｏ ｎ
摘要 ： 目的 ： 观察睡眠剥夺对 大鼠幼鼠视上核和海马组织谷氨酸受体 Ｎ Ａ ２及其转运体 Ｇ Ａ Ｔ的影响 ， ＭＤ Ｒ ＬＳ 为防
治因睡眠剥夺引起 中枢功能 的损 害以及可能对学习 、 记忆产 生的影响提供理论依据 。 方法 ： 采用免疫 组织化学
的方法 ， 观察 与应激反 应相关的视上核 以及和学 习 、记忆 密切相 关的 Ｎ Ａ ２和 Ｇ Ａ Ｔ表达 的变化情 况 。通 ＭＤ Ｒ ＬＳ 过灰度分析和荧光半定量分 析的方 法对实验结果进 行处 理。 结 果 ： 上核 和海马 均显示 ， 睡眠剥 夺第 ３ 视 在 ｄ， Ｎ Ａ ２和 Ｇ Ａ Ｔ开始增 加 ； ＭＤ Ｒ ＬＳ 睡眠剥夺第 ５ ， 加更为明显 ； 眠剥夺 的第 ７ ， 增 ｄ 睡 增加 的程度有所 降低 ； ｄ 睡眠剥夺 第 １ ｄ 视上核 Ｎ Ａ ２和 Ｇ Ａ Ｔ表 达程 度与正常对照组 比较无 明显差 异。 结论 ： ４ ， ＭＤ Ｒ ＬＳ 睡眠 剥夺对 幼 鼠视 上核 和
睡眠剥夺对小鼠生长发育影响初探
经 、免 疫 、骨 骼 、血 液 等 各 大 系 统 正 处 于 生长 和 功 能完善 的关键 时期 ，青少 年阶段 也是人类 初 识社 会 ，建 立 健 全 的 人 格 、 品格 以及 情 绪控 制 能力 的 关 键 时期 。这 一 阶 段 出现 睡 眠 不 足 ，是 否会 直 接 或 间接 影响整 个机体 的生长 发育过 程 ，甚 至对成年 后 的身体机 能 留下 隐患 呢？本研 究通过 比较 睡眠剥 夺组和 作息 正常对 照组小 鼠生长等 情况 的差异 ， 探 索 睡 眠在 青少 年 阶 段 生长 过 程 中 的作 用 。
青 少 年 各 项 身 体 机 能 尚未 发 育 成 熟 ， 其 神
【收稿 日期】２０１８．０４．１１ ［作者简介］张雅 荃（２０００．），女，高中学生。
Ｅ—ｍａｉｌ：１３０６９９２６２２＠ ｑｑ．ｃｏｒｎ
【通讯作者】阮文婕，中学 一级教师 。 Ｅ－ｍａｉｌ：ｒｕａｎｗｊ＠ａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
ｄｏｉ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１６７４—５８１７．２０１８．０３．００９
睡 眠 剥 夺 对 小 鼠生 长 发 育 影 响初 探
张雅 荃 １，杨文 静 ：，林 丽 芳 ：，阮文婕 （１．复旦 附属中学，上海 ２００４３３；２．海军军 医大学动物 中心，上海 ２００４３３）
小鼠睡眠剥夺实验方法
小鼠睡眠剥夺实验方法一、实验目的：研究睡眠剥夺对小鼠行为和生理健康的影响。
二、实验材料与设备：1.小鼠：选用健康、年龄相近的同种小鼠。
2.实验笼：使用单个小鼠笼，尺寸适当，内部设置饮水器和食物架。
3.睡眠剥夺装置：可以选择使用水平杆、飞轮或活动封闭箱等装置。
4.视频监控系统：用于对小鼠活动进行记录和分析。
5.行为测试设备：例如开放场地、轮子、迷宫等。
三、实验步骤：1.分组：将小鼠随机分为实验组和对照组。
2.实验组：使用睡眠剥夺装置对实验组小鼠进行睡眠剥夺操作。
a.水平杆法：在小鼠笼上方安装两个水平杆，将小鼠置于水平杆之间的平台上，小鼠将无法休息，被迫保持清醒状态。
b.飞轮法：在小鼠笼内设置一个旋转的飞轮，通过使小鼠在上面持续活动来剥夺其休息。
c.活动封闭箱法：将小鼠放入一个带气流的密封箱内，通过连续性的气流刺激小鼠，阻止其入睡。
3.对照组：将对照组小鼠放入常规的小鼠笼内，保持其正常的睡眠和休息。
4.实验时间：根据实验需要，设定睡眠剥夺持续的时间段，如24小时或更长。
5.视频监控：通过视频监控系统记录实验组和对照组小鼠的日常活动情况，包括醒睡时间、活动次数、活动强度等评价指标。
6.行为测试：通过行为测试设备对小鼠进行评估，如开放场地测试、轮子测试、迷宫测试等。
7.生理参数检测：在实验结束后，对小鼠进行生理参数检测，如体重变化、血液生化指标、免疫指标等。
四、实验注意事项：1.小鼠的选择：选用同种小鼠，年龄相近，体重相近的小鼠，以排除体重差异对实验结果的干扰。
2.休息和饲养：睡眠剥夺期间，保证小鼠正常的饮食和饲养条件，以维持其身体健康。
3.实验环境：创造安静、稳定的实验环境，以减少外部干扰对实验结果的影响。
4.行为测试：根据需要选择适当的行为测试设备，以评估小鼠在睡眠剥夺后的行为表现。
5.生理参数检测：选择适当的生理参数检测方法，以评估小鼠在睡眠剥夺后的生理状态。
五、实验结果分析：分析小鼠的行为表现和生理参数检测结果，比较实验组和对照组之间的差异，以评估睡眠剥夺对小鼠的影响。
睡眠剥夺致小鼠痛阈、阿司匹林敏感性和PH的变化及相关性研究
睡眠剥夺致小鼠痛阈、阿司匹林敏感性和PH的变化及相关性研究发表时间：2012-05-23T09:37:16.530Z 来源：《医药前沿》2012年第1期供稿作者：钟超超1 申苏平1 潘波1 孟雅玲1 徐晓1 沈中山1 殷庆[导读] 睡眠是机体消除疲劳所需要的一种完全休息状态，是中枢神经系统主动产生的神经调节过程。
钟超超1 申苏平1 潘波1 孟雅玲1 徐晓1 沈中山1 殷庆忠1 陈节海1 武玉清2（ 1 徐州医学院麻醉学院 2 2 1 0 0 0 ； 2 徐州医学院麻醉药理学教研室江苏徐州 2 2 1 0 0 0 ）【摘要】目的研究不同持续时间睡眠剥夺（SD）致小鼠痛阈、阿司匹林敏感性变化与血液P H变化的相关性问题。
方法采用小平台水环境法建立睡眠剥夺模型，以正常组（CC）作为对照，使用热板法测量不同持续时间睡眠剥夺对小鼠痛阈以及注射阿司匹林后的痛阈值，采用PH仪测量小鼠血液的P H。
结果与C C组相比，S D1、S D2痛阈值变化无统计学意义(P>0.05)、S D3组痛阈值升高（P<0.05），睡眠剥夺组对阿司匹林敏感性发生改变（P<0.05），S D1组P H降低（P<0.05）、SD2与SD3组PH显著升高（P<0.01）。
与SD1组相比，SD2、SD3组痛阈升高（P<0.05、P<0.01）,PH显著升高（P<0.01）。
结论长时间睡眠剥夺可导致痛阈升高，且其变化与PH的变化相关，并随着睡眠剥夺的时间延长、相关性越明显。
【关键词】睡眠剥夺痛阈阿司匹林敏感性 PH【中图分类号】R338.63 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）01-0016-02睡眠是机体消除疲劳所需要的一种完全休息状态，是中枢神经系统主动产生的神经调节过程。
睡眠剥夺(Sleep Deprivation, SD)是部队在紧急情况下,特别是战争、自然灾害、事故救援,甚至非典等特殊事件发生时的常见现象,是导致军事人员疲劳衰竭、发生非战斗减员的重要因素之一，在未来的高技术战争条件下,睡眠剥夺问题可能会更加突出[1]，疼痛是个人在情感和感官方面的一种不愉快的主观体验，引起疼痛不需要特殊的刺激，任何形式的刺激只要达到一定程度而成为伤害性刺激都可以引起疼痛。
动物睡眠剥夺实验报告
一、实验背景睡眠是人类和动物生命活动中不可或缺的一部分，对维持生命活动、调节生理功能、增强免疫力等方面具有重要作用。
近年来，睡眠剥夺对机体的影响逐渐受到关注。
本实验旨在研究睡眠剥夺对小鼠行为、生理和免疫等方面的影响，为临床睡眠障碍的治疗提供参考。
二、实验材料与方法1. 实验动物选用健康雄性昆明小鼠，体重20-25g，共40只，随机分为两组：睡眠剥夺组（SD 组）和对照组（CON组），每组20只。
2. 实验仪器睡眠剥夺装置、生理信号采集系统、电子称、动物行为观察系统等。
3. 实验方法（1）睡眠剥夺组：采用改良的多平台法制作大鼠睡眠剥夺模型。
将小鼠放入圆形鼠笼中，笼底安装可旋转的机械装置，其中有一根缓慢旋转的棒产生轻柔、持续的机械刺激，避免小鼠睡觉。
睡眠剥夺期间，小鼠自由饮食，剥夺时间为3天，每天9h（AM7:00-PM4:00）。
（2）对照组：与睡眠剥夺组相同条件饲养，但不进行睡眠剥夺。
4. 实验指标（1）行为学观察：观察两组小鼠的睡眠、活动、饮食、粪便等情况。
（2）生理指标：测量两组小鼠的体重、体温、心率等。
（3）免疫指标：检测两组小鼠的血清免疫球蛋白G（IgG）水平。
三、实验结果1. 行为学观察睡眠剥夺组小鼠表现为睡眠时间缩短、活动增加、饮食减少、粪便稀薄等；对照组小鼠睡眠、活动、饮食、粪便等情况正常。
2. 生理指标睡眠剥夺组小鼠体重、体温、心率等生理指标与对照组相比，无显著性差异。
3. 免疫指标睡眠剥夺组小鼠血清IgG水平与对照组相比，无显著性差异。
四、实验讨论本实验结果表明，短期睡眠剥夺对小鼠的行为、生理和免疫等方面无显著影响。
这可能是因为实验时间较短，小鼠尚未出现明显的生理和免疫功能障碍。
然而，长期睡眠剥夺可能导致严重的生理和免疫损伤，进而引发多种疾病。
本实验采用改良的多平台法制作大鼠睡眠剥夺模型，具有操作简单、重复性好、干扰小等优点。
但该模型也存在一定的局限性，如对小鼠的应激反应较大、可能影响实验结果的准确性等。
长期睡眠剥夺对小鼠蓝斑核线粒体氧化应激及皮层投射的影响
长期睡眠剥夺对小鼠蓝斑核线粒体氧化应激及皮层投射的影响张菁;马靖;王广发【期刊名称】《中国应用生理学杂志》【年(卷),期】2014(030)002【摘要】目的:观察长期睡眠剥夺后小鼠蓝斑核线粒体氧化应激状态的变化以及蓝斑核对前扣带回皮质投射的影响.方法:采用“新环境”法建立睡眠剥夺模型.观察小鼠经过5d睡眠剥夺后蓝斑核线粒体氧化应激调控关键酶Sirtuin亚型3(SIRT3)、线粒体氧化应激标记物热休克蛋白60(HSP60)表达量以及前扣带回皮质酪氨酸羟化酶样投射的变化情况.结果:长期睡眠剥夺后,与对照组比较,模型组小鼠蓝斑核SIRT3的表达量显著下调,同时HSP60的表达量则显著上调.此外,模型组前扣带回皮质酪氨酸羟化酶样投射面积百分比显著降低.结论:长期睡眠剥夺通过降低SIRT3的表达影响蓝斑核线粒体氧化应激水平,可能引起蓝斑核对前扣带回皮质投射的丢失.【总页数】4页(P153-156)【作者】张菁;马靖;王广发【作者单位】北京大学第一医院呼吸和危重症医学科,北京100034;北京大学第一医院呼吸和危重症医学科,北京100034;北京大学第一医院呼吸和危重症医学科,北京100034【正文语种】中文【中图分类】R5【相关文献】1.PINK1介导的线粒体自噬在小鼠皮层神经元氧糖剥夺后表达和意义 [J], 王元欣;张磊;黑悦;鱼洋;岳康异;武秀权;蒋晓帆2.蜜环菌发酵液对睡眠剥夺小鼠行为学及氧化应激水平的影响 [J], 吕瑞娜; 万茜淋; 田风华; 贾传文; 李长田3.睡眠剥夺小鼠海马组织氧化应激水平及血红素加氧酶-1表达的研究 [J], 翟蕾;陈珺;冯子敬4.锌对睡眠剥夺小鼠大脑皮层一氧化氮合酶的影响 [J], 隋月林;李积胜;胡庆;孟晨阳5.蓝斑核的线粒体氧化应激受活性一氧化氮合成酶的调控 [J], 刘紫萍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
剥夺小鼠睡眠后促觉醒中枢TMN内小胶质细胞在睡眠-觉醒中的变化
剥夺小鼠睡眠后促觉醒中枢TMN内小胶质细胞在睡眠-觉醒中的变化洪艳;施伍;梁悦;李晓凤;王媛;许奇;伍龙军;王烈成【摘要】目的探讨剥夺小鼠睡眠后促觉醒中枢结节乳头体核(TMN)内小胶质细胞的变化规律.方法将C57BL/6小鼠随机分为生理盐水自然睡眠组(NS-TODS)、腹腔注射米诺环素自然睡眠组(mino-TODS)、睡眠剥夺生理盐水组(NS-SD)和腹腔注射米诺环素后睡眠剥夺组(mino-SD).采用脑立体定位埋放电极、多导睡眠描计技术和免疫荧光法观察4组小鼠的睡眠和觉醒时间以及小胶质细胞形态的变化.结果①NS-TODS组和mino-TODS组小鼠在觉醒(W)、快速眼动(REM)睡眠以及非快速眼动(NREM)睡眠时间呈昼夜节律变化,两者之间差异无统计学意义;②与NS-TODS相比,NS-SD组可见明显的睡眠增加,主要表现在非快速眼动(NREM)睡眠总量增加(P＜0.05),觉醒时间减少(P＜0.05);③与NS-SD组相比,mino-SD组在ZT 5 ～6时间段内,其觉醒总量增多(P＜0.05),睡眠总量减少(P＜0.05),但在ZT6 ～11时段内,无显著性变化;④与NS-TODS相比,NS-SD组睡眠剥夺5h后,TMN区的小胶质细胞直径明显增大(P＜0.01),其荧光强度增强(P＜0.05);而mino-SD组睡眠剥夺5h后,小胶质细胞体积有变小的趋势,但差异无统计学意义.结论 TMN内的小胶质细胞可能参与睡眠-觉醒稳态的调节.【期刊名称】《安徽医科大学学报》【年(卷),期】2018(053)005【总页数】8页(P657-664)【关键词】小胶质细胞;觉醒;睡眠剥夺;结节乳头体核【作者】洪艳;施伍;梁悦;李晓凤;王媛;许奇;伍龙军;王烈成【作者单位】安徽医科大学基础医学院生理学教研室,合肥230032;安徽省立医院重症医学科,合肥230001;安徽医科大学基础医学院生理学教研室,合肥230032;安徽医科大学基础医学院生理学教研室,合肥230032;安徽医科大学基础医学院生理学教研室,合肥230032;安徽医科大学基础医学院生理学教研室,合肥230032;安徽医科大学基础医学院生理学教研室,合肥230032;安徽医科大学基础医学院生理学教研室,合肥230032;安徽医科大学基础医学院生理学教研室,合肥230032【正文语种】中文【中图分类】R338.6长期以来,人们对于中枢睡眠和觉醒系统的研究,主要集中在众多的神经核团及其递质上。
睡眠剥夺对小鼠免疫的影响PPT共21页
睡眠剥夺对小鼠免疫的影响
26、机遇对于有准备的头脑有特别的 亲和力 。 27、自信是人格的核心。
28、目标的坚定是性格中最必要的力 量泉源 之一， 也是成 功的利 器之一 。没有 它，天 才也会 在矛盾 无定的 迷径中 ，徒劳 无功。- -查士 德斐尔 爵士。 29、困难就是机遇。--温斯顿．丘吉 尔。 30、我奋斗，所以我快乐。--格林斯 潘。
睡眠剥夺对免疫功能和内分泌系统的影响
睡眠剥夺对免疫功能和内分泌系统的影响
肖雁;赵忠新
【期刊名称】《人民军医》
【年(卷),期】2006(49)11
【总页数】2页(P657-658)
【关键词】睡眠剥夺;NK细胞;细胞因子;激素
【作者】肖雁;赵忠新
【作者单位】解放军174医院;第二军医大学长征医院
【正文语种】中文
【中图分类】R593
【相关文献】
1.护理轮班导致睡眠剥夺对人体免疫功能的影响 [J], 张咏梅;江智霞;王连红;陈凌云;潘红平;郑喜兰
2.睡眠剥夺对小鼠学习记忆和免疫功能的影响 [J], 郭红梅;陈秋霞;蔡立峰;彭燕华
3.睡眠剥夺对大鼠胃肠道黏膜免疫功能的影响 [J], 王景杰;黄裕新;姜慧玲;秦明;杨琦;刘震雄;王旭霞
4.护理轮班导致睡眠剥夺对人体免疫功能的影响 [J], 张咏梅; 江智霞; 王连红; 陈凌云; 潘红平; 郑喜兰
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实验预期
1.胸腺指数和脾脏指数的测定
经过一段时间的慢性不完全睡眠剥夺会对 机体免疫功能产生伤害，胸腺和脾脏均会受 到损害，表现为胸腺指数和脾脏指数分别下 降。
96孔微量反应板的清洗
将浸泡有75%乙醇的棉签放入微量反应板 的每个孔内旋转，用自来水冲洗反应板5次， 再用蒸馏水冲洗3次以上，置37℃温箱中干燥。
0.5%红细胞制备方法
先用灭菌注射器吸取3.8% 枸橼酸钠溶液 (其量为所需血量的1/5)，从小鼠静脉或心脏 采血至需要血量，置灭菌离心管内，加灭菌 生理盐水为抗凝血的2倍，以2000r/min离心 10min，弃上清液，再加生理盐水悬浮血球， 同上法离心沉淀，如此将红细胞洗涤三次， 最后根据所需用量，用灭菌生理盐水配成 0.5%小鼠红细胞悬液。
（2）将两组液体移入流式专用管，上流式细胞仪检 测
3.红血球凝集实验
红血球凝集指红细胞凝集的现象。 由病毒、细胞凝集素和抗体而引 起的红细胞凝集。在病毒而引起 的凝集中，如果存在抗病毒的抗 体时，则由病毒引起的凝集作用 将被抑制，所以可用于抗病毒抗 体的检出。
实验准备
器材：96孔“U”形或“V”形微量反应板，50 uL 定量移液器，滴头，微型振荡器。
免疫功能的测定
1.
实验准备 器材：滤纸，粗剪刀，婴儿称 对象：第一组实验小鼠
实验步骤
实验步骤： （1）用颈椎脱臼法处死
第一组小鼠并立即称取 体液 （2）解剖摘取小鼠的胸 腺和脾脏，用滤纸吸干 残血后，称重（mg） （3）所得重量分别除以 小鼠体重(g)，再乘以 100％，即分别得到胸腺 指数和脾脏指数。 胸腺指数=（胸腺重量/ 小鼠体重）×10 脾脏指数=（脾脏重量/ 小鼠体重）×10
组别
动物数量 胸腺指数 脾脏指数
(n)
(%)
(%)
正常对照组 （b组）
10只
睡眠剥夺组 (a组)
10只
2.外周血T淋巴细胞ຫໍສະໝຸດ 群检测 （1）两组小鼠分别自眼底静脉丛取血，肝素抗凝。 吸取抗凝全血100μL，加入预先调制好的FITCCD3\PE-CD4\PE-Cy5-CD8 3种荧光标记抗体混合液 12μL，并设置荧光同型对照。室温避光反应20min, 然后加入红细胞溶解液，每份标本加1ml，混匀，室 温避光10min,见细胞悬液呈亮红色时，说明红细胞 被裂解，再加入含20mL/LFCS的生理盐水，以400g离 心洗涤细胞2次，洗涤后的细胞最终回复到500μL
药品：特定病毒抗原，0.5%小鼠红细胞 对象：第二组实验小鼠
对照组
用特定病毒抗 原对两组小鼠 进行免疫，一 定的时间后抽 取小鼠血液制 成血清滴在反 应板上，用特 定病毒进行滴 加，观察血液 凝剂情况并记 录
实验组
对已经免疫的A 组小鼠进行不同 程度的睡眠剥夺， B组不做睡眠剥 夺，然后对实验 小鼠进行上述血 凝操作，观察血 凝情况
统计学方法
所有数据均用均数± 标准差表示，各组均数 间的差异显著性用t检验判断。P<0.05表示差 -异具有显著性；p<0.01表示差异非常显著； p<0.001表示差异极显著；p>0.05表示差异不 具有显著性。
参考文献
[1]洪军,马文龙.睡眠剥夺的对策[J].第一军医大学学 报,2019,21(2):152—154 [2]何志恒,印大中.睡眠研究的科学前沿[J].生命科学 研究,2019,6(4):184—187 [3]李洋,谢扬丽,胡志安.感染和免疫反应对睡眠的影 响[J].生理科学进展,2019,38(2):187——190 [4]赵忠新.临床睡眠障碍学[M].上海：第二军医大学 出版社,2019:25—45 [5]丁琳,胡晓波.睡眠剥夺对机体的影响[期刊论文].微 量元素与健康研究,2019(6)
睡眠剥夺是指由于某种原因导致的睡眠数量被迫减 少，它对机体的影响是十分明显的。它可以造成机 体疲劳、作业能力降低、免疫力下降、警觉水平降 低，并引起情绪改变、精神不振、粗心、注意力不 集中、食欲下降、记忆力下降、工作效率低等不良 反应。
不完全睡眠剥夺可导致免疫功能的下降. 机体内过 量的自由基可对机体产生伤害,其重要原因是产生脂 质过氧化物,造成对细胞结构和功能的破坏,从而导 致衰老和各种疾病,机体内超氧化物歧化酶(SOD) 的 功能是清除体内的氧自由基,从而对机体起到保护作 用 ,增强免疫力. 有研究表明,长期睡眠较差的人的 血清过氧化脂质明显偏高,红细胞SOD 活性明显偏低, 从而导致机体免疫力下降.。本实验的预期结果是慢 性不完全睡眠剥夺会对小鼠的免疫器官产生伤害,其 机制可能与上述因素有关。
二组：健康雄性小鼠20只，体重22±2g,随机 分成c组、d组，即正常对照组和慢性不完全 睡眠剥夺组。
三组：健康雄性小鼠20只，体重22±2g,随机 分成e组、f组，即正常对照组和慢性不完全 睡眠剥夺组。
动物模型的建立
采用轻触法一、二组对小鼠不完全剥夺睡眠， 每天剥夺睡眠时间从上午六点到下午五点结 束。其中a组、c组是实验组，b组、d组是对 照组。具体方法为：当实验组小鼠出现睡眠 状姿势时，即用毛笔轻触小鼠使其保持清醒 状态，当小鼠处于清醒状态时则不对其进行 任何刺激，在睡眠剥夺过程中，正常对照组 始终可以自由睡眠。一个周睡眠剥夺后，进 行免疫功能的测定。
睡眠剥夺对小鼠 免疫能力的影响
主讲人：辛凯悦 指导老师：朱艳媚
组员：杜晨阳、辛凯悦、 李毅、朱灵凤、舒文静
研究对象
动物模型的建立
统计
睡眠剥夺对小鼠 免疫能力的影响
正文 参考文献
免疫功能测定
讨论
实验预期
研究目的
睡眠是一种生理现象，睡眠
充足与否与人体健康有着密
切联系。长期睡眠剥夺可引
起人或动物产生不良情绪反
应、免疫功能下降等等。随
研
着生活节奏的加快，越来越
究
多的儿童与成年面临睡眠不
目
足的危害，这已足够引起人 们的注意。本小组通过一种
的
慢性不完全剥夺小鼠睡眠实
验来观察睡眠不足对小鼠免
疫功能的影响。
实验对象——
一组：健康雄性小鼠20只，体重22±2g,随机 分成a组、b组，即正常对照组和慢性不完全 睡眠剥夺组。