EGF联合HGF诱导BMSCs向神经元样细胞分化

合集下载

VEGF在人胚胎干细胞向神经元分化中作用的研究

作者单位:430030 武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科V EGF 在人胚胎干细胞向神经元分化中作用的研究焦淑洁许慧芳许杰张苏明湛彦强摘要目的观察血管内皮生长因子(vascular endothelia l g row th factor ,V EGF)在人胚胎干细胞分化为神经元过程中是否发挥作用及相关机制。

方法人胚胎干细胞经拟胚体向神经元分化,分为3组:A 组为常规诱导组,B 组为常规诱导+VEGF (10ng/mL )作用组,C 组为常规诱导+V EGF (10ng/mL)+V EG FR 2/Fc 嵌合体(10ng/mL)作用组;用RT -P CR 、免疫荧光法检测各阶段细胞标志物,计算并用流式细胞仪检测各组不同阶段细胞阳性率。

结果用RT -PCR 分别检测到OCT 4、N estin 、M AP 2表达;免疫荧光法检测显示B 组产生神经干细胞、分化为神经元的阳性率明显高于A 、C 两组,差异有统计学意义(P <0.01),A 、C 两组之间无显著性差异(P >0.05);流式细胞仪检测与免疫荧光法相似。

结论人胚胎干细胞体外分化过程中血管内皮生长因子通过血管内皮生长因子受体2来促进神经干细胞增殖及向神经元分化。

关键词人胚胎干细胞神经分化血管内皮生长因子血管内皮生长因子受体2 中图分类号 R 741 文献标识码 A 文章编号 1007-0478(2009)03-0134-04Effect of VEGF on Neural Differentiation of Human Embryonic Stem Cells in vitro J iao S huj ie,X u H ui -f ang,X u J ie,et al.D ep ar tment of N eurol ogy ,T ongj i H osp ital ,H uaz hong Univer sity of Science and T ech -nology ,W uhan 430030Abstract Objective T o obser ve the effect of V EG F on neural differ entiat ion of human embry onic stem cells(hESCs)in v itr o .Methods After embr yonic body for matio n,hESCs w ere differentiated int o neural cells thro ug h selection and ex pansio n pro cedures.hESCs w ere div ided into three gr oups:g roup A ,ro utine induc -tio n;gr oup B,ro utine inductio n +10ng/mL V EGF t reated and g roup C,r outine induction +10ng /mL V EG F +10ng/mL V EGF R 2/Fc tr eated.T he cellular mor pho lo gy was observed by co ntr ast phase micr oscope.T he marker s o f every stage of induct ion w ere detected t hr ough R T -PCR.N estin and M AP 2ex pressing cells w ere det ected via immunof luor escence method.T he percentages of the imuno st aining positive cells w ere deter mined by flow cytometer (F CM ).Results OCT 4、Nestin and M A P 2w ere detected by RT-PCR.T he per centage of N est in and M A P 2po sitiv e cells in g roup B w ere much hig her than in g r oup A and g roup C(P <0.01).T here w as no difference between g ro up A and gr oup C(P >0.05).T he r esults of FCM wer e r oughly sim ilar.C onclu -sions VEGF ,v ia V EGF R 2,stimulates the neur al cells pr oliferat ion and differentiation o f human embr yonic stem cells in v itro .Key words Human embry onic stem cells I nduction V ascula r endothelial gr ow th factor V ascular endot helial gr ow th facto r r eceptor 2近年来研究发现,哺乳动物的神经发生过程与血管发生相耦联,增生活跃的血管内皮细胞在时间空间上都与神经发生相互关联[1]。

TGF—β和BDNF联合诱导成年大鼠BMSC向神经样细胞分化的研究

ＭＥＩＸｉａ，ＬＶｎｆｎＧａｇ，ＷＡＮＧｎｏｇＹａｓｎ２
，
Ｌｕｎｈａｇ，ＵｈｎｅｇＩａｓｕｎＧＯＺａｐｎＱ
（ｅａｔｎｆｒｏａｄｃ，ｔｅＦｒ￣ＤｐｒｔｔｐｅｉｓｈｉｔｍｅｏＯｈｓ
ａｅｏｐａ，Ｌａｎｎｄｃｌｎｖｒｔ，Ｊｍｈｕ１１０ｈａｔＨｓｉｌｉｉｇＭｅｉｉｅｉｄｔｏａＵｓｙｉｏ２００Ｃｉ）ｎ
ＡｄｕｔＲａｎｅＭａｒｗｔｏａｌｅｅＩｕｃｄｉｔｕｏｓｂｌｔＢｏｒｏＳｒｍｌＣｅｌＷｒｎｄｅｎｏＮｅｒｎｙｓ
ＴａｓｏｍｉｇＧｒｗｔａｔｒ—１ａｄＢａｎ— ｅｉｅｕｏｒｐｉａｔｒｒｎｆｒｎｏｈＦｃｏ — ｎｒｉ — ｒｄＮｅｒｔｏｈｃＦｃｏ３ｄｖ
胞的可能性，为神经再生及脊髓损伤的治疗提供一种新方法。方法诱导前２ｈ先用含１
性标志物。结果
长因（ＤＦ子ＢＮ）作诱导剂，观察细胞形态的变化，并采用免疫组织化学法检测诱导后的细胞表达Ｎ，Ｓ，ＧＡＦＮＥＦＰ等特异
诱导后５ｈ，部分细胞的形态已发生改变，１大部分细胞不仅在形态上表现为神经元样特征，而目２ｈ后转化因子Ｂ（ＧＴＦ—Ｂ）和脑源性神经生长因子ＮＦ及ＮＥ等特异性抗体呈阳性表达，而ＧＡＳＦＰ抗体表达呈阴性。结论
ｔｐｉｆｔ，ｏｅｓｓｏｅｏｈｌｃｈｎｅ，ａｄ１ｏｒｌｔ，ｍａｙＢＣｅａｅｒｎ—Ｈｅｃｌｄｗｒｒｈｅａｏｓｍｅｃｌｈｗｄｍｒｏｏａｃａｇｓｎ２ｈｕｓａｒｏｃｒｌｐｉｇｌｅｎＭＳｓｂｃｍｅｎｕｏｋｅｓａｅｌｎｅ

诱导MSCs转分化为视网膜神经样细胞的应用

诱导M SC s转分化为视网膜神经样细胞的应用诱导MSCs转分化为视网膜神经样细胞的应用福建医科大学附属第一医院,福建省眼科研究所白月徐国兴庄华谢茂松郭健王婷婷[摘要]近年来，人们研究发现骨髓间充质干细胞（m esenchym al s t emcel l s,M SC s）在体外可经生长因子诱导，抗氧化剂诱导，中药诱导，增加细胞内cA M P等不同途径的诱导方法，分化为神经外胚层来源的神经元及神经胶质细胞，因此一些研究者尝试以上诱导途径使M SC s分化为视网膜神经样细胞，用于体内相关疾病的细胞替代治疗，为多种疾病带来了新的治疗思路。

[关键词]骨髓间充质干细胞体外诱导视网膜神经样细胞胚胎干细胞具有发育全能性，理论上可诱导分化为机体所需的任何组织或器官，但涉及伦理学问题，以往受到很大限制，发展缓慢。

应用眼色素上皮缘的视网膜干细胞[1]及鼠脑神经先祖细胞移植[2]也由于供体组织有限性及安全性问题，不利于治疗视网膜疾病的开展。

于是有人把目光投向成体干细胞中的MSCs，成年动物骨髓有2类干细胞群：造血干细胞和间充质干细胞。

最初因其容易贴壁呈成纤维细胞样克隆生长，被称为成纤维细胞集落形成单位（CFU-F）[3],后来研究发现它是骨髓造血微环境的重要组成部分，在体内外均具支持和调控造血的作用，且具有多向分化潜能，故又称其为间充质干细胞[4]。

也称为骨髓基质细胞[5]。

MSCs的特点为:①来源于中胚层，可以跨系统甚至跨胚层分化为3个胚层来源的细胞，特别是中胚层和神经外胚层来源组织的细胞（视网膜来源于胚胎期神经外胚层），并且经过20~30次细胞分裂后，这种分化特性也不会消失[6]。

②分离培养方便。

③由于不表达T细胞识别的细胞表面标志，植入后不会发生免疫排斥反应。

④易于转染和稳定高效表达外源基因优点[7],因此可把利于定向分化的生长因子基因转入MSCs，促使其定向分化。

MSC的纯化方法有贴壁筛选法，流式细胞仪分选法，密度梯度离心法，免疫磁珠法。

诱导成人骨髓基质细胞成为神经干细胞及其分化的实验研究

诱导成人骨髓基质细胞成为神经干细胞及其分化的实验研究张卉;王纪佐;孙红宇;张文治【期刊名称】《中风与神经疾病杂志》【年(卷),期】2002(019)002【摘要】目的体外诱导成人骨髓基质细胞 (BMSCs)转化为神经干细胞(NSCs)进而分化为神经元和胶质细胞.方法以含有碱性成纤维细胞生长因子 ( bFGF)或表皮生长因子(EGF)加 bFGF或 bFGF、 EGF 加全反式维甲酸 (ATRA)的培养液培养BMSCs ,进行显微镜观察,纤维连接蛋白 (fibronectin)、I型胶原(collagen Ⅰ)和神经上皮干细胞蛋白 (nestin)免疫组织化学染色和神经元特异烯醇化酶 (NSE), 胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫荧光染色.结果经诱导物诱导72h后,fibronectin和collagen I免疫阳性细胞减少. nestin免疫阳性细胞增多.7d后,其又减少.同时NSE和 GFAP免疫阳性细胞增多.细胞分化后, NSE阳性细胞最多占细胞总数的24.76%±2.72% ,同时GFAP阳性细胞占细胞总数的36.58%±3.26%.结论 EGF、bFGF、ATRA及适宜的培养液可使 BMSCs定向,转化为 NSCs,进而分化为神经元和胶质细胞.【总页数】3页(P79-81)【作者】张卉;王纪佐;孙红宇;张文治【作者单位】天津市脑系科中心医院神经内科,天津,300060;天津医科大学第二医院神经内科,天津,300211;天津医科大学总医院神经外科,天津,300052;天津市脑系科中心医院神经内科,天津,300060【正文语种】中文【中图分类】R741.02【相关文献】1.脑源性神经营养因子诱导大鼠骨髓基质细胞成为神经干细胞及其分化作用的实验研究 [J], 宋玉成;刘永海;张尊胜;沈霞2.成鼠骨髓基质细胞向神经干细胞诱导分化的实验研究 [J], 姚维成;孟庆海;赵英杰3.脑源性神经营养因子诱导大鼠骨髓基质细胞成为神经干细胞及其分化作用的实验研究 [J], 宋玉成;刘永海;张尊胜;沈霞4.兔骨髓基质细胞体外培养、诱导及分化成神经干细胞的实验研究 [J], 代广辉;徐如祥;姜晓丹;邹雨汐;杜谋选;蔡颖谦5.兔骨髓基质细胞源性神经干细胞诱导分化及移植修复脊髓损伤实验研究 [J], 刘德虎因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

脂肪源性基质细胞特性及其向神经细胞分化的研究进展

ＣＤｌ６、ＣＤｌ８，ＣＤ３１，ＣＤ４５，ＣＤ５０，ＣＤ５６，ＣＤ６２，ＣＤｌ０４，
ｃｅｌｌｓ，ＡＤＳＣ）。由于ＡＤＳＣ具有来源丰
富、体外扩增容易及低免疫原性等优点。同时，可避免胚胎干、神经干细胞等应用产生的伦理及严重移植物排斥反应的问题，因此，更有利于神经移植研究。本文就ＡＤＳＣ的生物学特性、电生理特性、免疫原性及向神经细胞分化进展进行综述。
万方数据
・１３７２・
植后１４ｄ发现２％ＡＤＳＣ迁徙到同侧皮质损伤区域，以梗死周边区为主，动物缺失的躯体感觉、运动功能有所恢复，而经脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）转染ＡＤＳＣ后神经恢复更明显。由于表达成熟神经元及星形胶质细胞标志的ＡＤＳＣ仅占１０％。且移植细胞的电生理情况亦不明确，故症状改善可能并非细胞转化及细胞融合的直接结果。此外，仅仅依靠少量存活尚且功能不明确的ＡＤＳＣ替代脑损伤的脑组织亦远远不够。
干细胞移植治疗中枢神经系统损伤和变性疾病已成为研究热点，广泛应用于基础研究及临床治疗。其中研究较多的是骨髓基质细胞（ｂｏｎｅｍａｒ—ｌｏｗ
ｓｔｌｏｍａｌ
ｃｅｉｌｓ，ＢＭＳＣ），但骨髓基
质细胞的获取给病人带来一定的痛苦，且数量有限，不利于大规模的实验研究及临床应用。近年来发现脂肪组织中存在一些类似于骨髓基质细胞的细胞，此类细胞具有干细胞特征，可自我复制，高度增殖，并具备多向分化潜能。在特定培养条件下，可向不同胚层分化，称之为脂肪组织源性干细胞（ａｉｄｐｏ－
ＡＤＳＣ及其诱导分化的神经样细胞在脑缺血疾病的临床应
用前景随着对ＡＤＳＣ体外神经分化的研究进展，人们设想将ＡＤ－Ｓｃ植入中枢神经系统进行脑缺血疾病的治疗，然而这些植入细胞能否存活并发挥功能，许多学者对其作用机制进行了大量研究。７．１细胞移植后能在宿主体内存活、迁移，并向神经元样细胞分化Ｓａｆｆｏｒｄ等¨＂将ＡＤＳＣ及其诱导分化的神经细胞分别定向注入鼠脑海马ＣＡｌ区，发现诱导后植入的ＡＤＳＣ沿胼胝体和纹状体嘴尾轴迁徙，最远可达２ｍｍ，并至少可存活１２周。存活的ＡＤＳＣ类似神经细胞形态，表达早期神经元标记神经元特异性烯醇化酶（ＮＳＥ）、ＮｅｕＮ，而未经体外神经诱导的ＡＤＳＣ则无上述现象发生，提示体外神经诱导为ＡＤＳＣ移植后能否在神经微环境中生存所必需。然而，移植后ＡＤＳＣ能否表达神经元及神经胶质细胞的全部标记，其最终表型在移植前就已决定还是因局部神经微环境而改变，它们能否替代缺失神经元发挥神经功能，包括神经电位诱发、神经突触建立、递质合成传递等功能目前尚无相关文献报道。Ｋａｎｇ等口１将成人ＡＤＳＣ以腺病毒标记，经侧脑室立体定向移植入鼠ＭＡＣＯ模型，移

鼠神经生长因子诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的实验研究

鼠神经生长因子诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的实验研究陈再丰;许信龙;魏晓捷;傅小君;潘红松;谢青松【期刊名称】《中国临床药理学与治疗学》【年(卷),期】2012(17)2【摘要】目的:观察鼠神经生长因子(mNGF)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经细胞分化的影响。

方法:4周龄健康SD大鼠60只,按随机数字表法分为治疗组(n=30)和正常对照组(n=30)。

治疗组在常规培养的基础上加入浓度为0.1μg/mL mNGF作为诱导液。

将培养的第3代BMSCs制成单细胞悬液,诱导后3d,观察细胞形态变化,行神经元特异性烯醇酶(NSE)免疫荧光检测,计算阳性率。

结果:正常对照组细胞仅有少量NSE的表达,治疗组细胞表达NSE阳性率较对照组细胞显著增加(P<0.01)。

结论:mNGF可诱导大鼠BMSCs向神经元样细胞分化。

【总页数】4页(P137-140)【关键词】鼠神经生长因子;骨髓间充质干细胞;细胞分化【作者】陈再丰;许信龙;魏晓捷;傅小君;潘红松;谢青松【作者单位】浙江省慈溪市人民医院神经外科【正文语种】中文【中图分类】R965.2【相关文献】1.大鼠脊髓匀浆上清诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究 [J], 吴金生;李鑫;王晓萃;付文玉;丁洁;魏德全2.天然脑活素定向诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的实验研究 [J], 李映红;吴正治;吴伟康;李明;王济国;杨敏;陈蔓茵3.大鼠骨髓间充质干细胞的培养及其向神经元样细胞诱导分化的实验研究 [J], 宋杰;王丽;冯宁;何涛4.体外诱导树鼩骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的实验研究 [J], 苗雨润;李娜;匡德宣;宋庆凯;袁圆;王璇;张志成;陆彩霞5.三磷酸胞苷二钠诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究 [J], 王宇;魏书艳;史小琴;王燕;张明艳;陈玉敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

定向诱导为神经元样细胞的间充质干细胞对大鼠坐骨神经损伤的修复作用及生物力学评价

化遥将80只SD大鼠分为假手术组、模型组、普通细胞组和定向诱导组遥除假手术组外,其余三组用钳夹法建立大
鼠坐骨神经挤压伤模型。普通细胞组和定向诱导组大鼠在坐骨神经损伤处分别注射BM-MSCs或神经元样定向
诱导分化的BM-MSCs遥假手术组和模型组注射等量生理盐水遥测定坐骨神经功能指数(SFI),Bsso-Beatlie-
Bresnahan(BBB)评分方法评价大鼠运动功能，利用坐骨神经电生理检测和坐骨神经单向拉伸实验对其生物力学
进行评价。Western blol法检测神经组织脑源性神经营养因子(BDNF)、髓磷脂碱性蛋白(MBP冤与和生长关联蛋白
43(GAP-43)的表达水平。结果与假手术组相比，模型组大鼠的坐骨神经SFI指数和BBB评分均降低,BDNF、
［基金项目］浙江省医药卫生科技计划项目(2016KYB291)；浙江省嘉兴市科技计划项目(2017AY33009) 银通讯作者
CHINA MODERN DOCTOR Vol. 59 No. 15 May 2021 |27
•基础医学-
中国现代医生2021年5月第59卷第15期
外伤性周围神经损伤是一种重要的临床和公共卫生问题［1］，尤其以臀部坐骨神经损伤最难处理且预后最差罠这与周围神经系统的再生和修复能力有限有关，易导致与之相关的器官结构和功能的永久性损伤［3］o近年来，骨髓间充质干细胞(Bone marrow stro mal stem cells,BM-MSCs)已被用作 Schwann 细胞的替代品,在治疗周围神经损伤方面显示出巨大的潜力［4］o 刘峰等［5］研究表明,在特定诱导剂的作用下,骨髓间充质干细胞在体外亦可定向向神经细胞分化。因此，本研究将大鼠骨髓间充质干细胞在体外定向诱导为神经元样细胞,继而回植入大鼠体内，研究其对大鼠坐骨神经损伤的治疗作用及机制,以期为坐骨神经损伤的治疗提供新的治疗方法及依据。

GDNF基因修饰的BMSCs向神经元样细胞的分化及神经营养因子的表达

Ａｂｓｔｒａｃｔ０ｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＧＤＮＦｇｅｎｅ — ｍｏｄｉｉｆｅｄｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ
关键词ＧＤＮＦ；神经元样细胞；骨髓间充质干细胞；ＮＧＦ中图分类号Ｒ７４１．０５文献标识码Ａ文章编号１０００ — ２６６９（２０１３）２ — ０１２４ — ０５
ＤｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＧＤＮＦｇｅｎｅ－ｍｏｄｉｉｅｆｄｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ
Ｄｅａｎ￣Ｏｆｉｆｃｅ，ＲｅｓｅａｒｃｈｃｅｎｔｅｒｆｏｒＰｒｅｃｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ，２ＤｅｐｒｔａｍｅｎｔｏｆＡｎａｔｏｍｙ，ＬｕｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ
杜杰，高小青，郭侃，邓莉，常能彬
（泸』Ｉ、１医学院：教务处，医学基础研究中心２人体解剖学教研室，四川泸州１６４６０００）
摘要
目的：探讨胶质细胞源性神经营养因子（ｇｈａｌｃｅｌｌｌｉｎｅ－ｄｅｒｉｖｅｄｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ，ＧＤＮＦ）基因修饰的骨髓间充质干细

HGF及G-CSF诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞的开题报告

HGF及G-CSF诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞的开题报告一、选题背景骨髓间充质干细胞（BMSCs）是一种多潜能干细胞，在体外可分化为多种细胞类型。

BMSCs来源广泛，易于提取和扩增，具有低免疫原性和良好的生物学特性，因此在组织修复和再生医学领域具有广泛应用前景。

近年来，众多研究表明，通过针对干细胞的诱导因子可将BMSCs定向分化为肝细胞样细胞（HLCs），为肝脏疾病的治疗提供了新思路。

HGF及G-CSF是两种重要的生长因子，对于肝细胞的增殖、增生、分化和修复有着重要的作用。

研究发现，这两种因子可以诱导肝干细胞分化为成熟的肝细胞。

但目前关于HGF及G-CSF对BMSCs分化为HLCs 的影响研究还较少。

因此，本研究旨在探究HGF及G-CSF对大鼠BMSCs分化为HLCs的影响，并为肝脏组织修复和再生医学的发展提供基础性研究支持。

二、研究内容与方法1、研究内容本研究将大鼠BMSCs进行体外诱导，通过观察细胞形态学变化、酸性磷酸酶染色、G6Pase、CYP450和AFP等肝细胞标志物检测，评价HGF及G-CSF对BMSCs分化为HLCs的影响。

2、研究方法采集新鲜的大鼠骨髓，采用酶消化法将BMSCs分离培养，经过两代至三代的扩增后，进行诱导分化实验。

在诱导分化实验中，将BMSCs分为4组，分别为对照组、HGF处理组、G-CSF处理组和HGF+G-CSF处理组，不同组别分别加入相应的诱导因子，通过流式细胞术检测细胞表面标志物CD29、CD44、CD45、CD90、CD105和CD106等，评价BMSCs纯度。

细胞形态学变化将通过倒置显微镜观察，酸性磷酸酶染色、G6Pase、CYP450和AFP等肝细胞标志物检测将通过免疫荧光染色、实时荧光定量PCR和Western blot等技术进行分析和检测。

三、预期结果和意义预计通过本研究，探讨HGF及G-CSF对大鼠BMSCs分化为HLCs的影响，初步验证这些诱导因子对BMSCs的作用机制，为肝脏组织修复和再生医学的发展提供基础性研究支持。

TGF-β1诱导的BMSCs外泌体促进软骨修复的研究

TGF-β1诱导的BMSCs外泌体促进软骨修复的研究TGF-β1诱导的BMSCs外泌体促进软骨修复的研究摘要：本研究主要探究了通过TGF-β1诱导的BMSCs外泌体在软骨修复方面的作用。

我们将培养的大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）分为TGF-β1诱导组和非诱导组，分别获得了TGF-β1诱导的BMSCs和非诱导的BMSCs外泌物，并用于软骨细胞的培养和实验组。

结果表明，TGF-β1诱导后的BMSCs外泌物中含有大量的生长因子，如TGF-β1、TIMP-1等，可促进软骨细胞的增殖。

使用TGF-β1诱导的BMSCs外泌物治疗软骨损伤模型，发现在TGF-β1诱导组中软骨修复效果更好，同时修复后的组织中蛋白多样性较大。

本研究证实，TGF-β1诱导的BMSCs外泌物含有促进软骨细胞增殖的生长因子，具有促进软骨修复的作用。

关键词： TGF-β1诱导、BMSCs外泌体、软骨修复、生长因子Abstract:This study aimed to explore the role of TGF-β1-induced BMSCs exosomes in cartilage repair. Rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) were culturedand divided into TGF-β1 induction group and non-induction group, respectively obtaining TGF-β1-induced BMSCs exosomes and non-induced BMSCs exosomes for cartilage cell culture and experimental group. The results showed that TGF-β1-induced BMSCs exosomes contained a large amount of growth factors, such as TGF-β1 and TIMP-1, which could promote proliferation of cartilage cells. Using TGF-β1-induced BMSCs exosomes to treat cartilage injury model, we foundthat the repair effects were better in TGF-β1 induction group, and the protein diversity in the repaired tissues was greater. This study proved that TGF-β1-induced BMSCs exosomes contained growthfactors that promoted proliferation of cartilage cells and had the ability to promote cartilage repair.Keywords: TGF-β1 i nduction, BMSCs exosomes, cartilage repair, growth factors。

诱导人脐血神经干细胞向神经细胞分化的研究

诱导人脐血神经干细胞向神经细胞分化的研究季旭东;高超;杨月景;刘计荣【期刊名称】《河南医学研究》【年(卷),期】2005(14)3【摘要】目的:体外诱导人脐血单个核细胞(mononuclear cells,MNCs)中的神经干细胞(neural stem cells,NSCs)向神经细胞分化的研究.方法:体外培养中用表皮生长因子(epithelium growth factor,EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)诱导人脐血NSCs向神经细胞的分化.结果:在EGF 和bFGF作用下,实验组Nestin阳性细胞数量显著增多;在EGF和bFGF作用下,Nestin的mRNA表达PCR条带变量两组间有显著性差异.结论:细胞因子EGF 和bFGF在体外能促进脐血MNCs中NSCs的分化,联合应用较单独应用具有更强的促进脐血MNCs向神经样细胞分化作用.【总页数】5页(P215-219)【作者】季旭东;高超;杨月景;刘计荣【作者单位】郑州大学口腔医学院口腔内科,河南,郑州,450052;郑州市儿童医院神经内科,河南,郑州,450053;郑州大学第二附属医院消化内科,河南,郑州,450003;郑州大学基础医学院,河南,郑州,450052【正文语种】中文【中图分类】R329.2【相关文献】1.正常成人脑脊液诱导人胚来源的神经干细胞分化的实验研究 [J], 卞林;惠国桢;陆华;蒋云召;苗宗宁;王玲;蒋震伟2.EGF和bFGF联合诱导人脐血MSCs向神经细胞分化过程中端粒酶活性的变化[J], 秦洁;曹孟德;许予明;邢莹;陈宗德;鄢文海;韩雪飞;许燕;龚光明3.VEGF,b-FGF诱导人脐血单个核细胞向血管内皮祖细胞分化的研究 [J], 凌瑞;孙宝华;王廷;易军;王辉;王新友4.人脐血间质干细胞向神经元样细胞分化的诱导因素 [J], 赵林娜;李建斌;单泓;段艳丽;焦红亮;宁晓琳;马会娟;杨朋辉;龚桂玲5.人脐血单个核细胞体外定向诱导向神经干细胞分化 [J], 李晓丰;侯萍;李革飞;赵冬阳;刘显智;李剑平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

不同浓度HGF及EGF体外诱导兔BMSCs向肝细胞分化的研究的开题报告

不同浓度HGF及EGF体外诱导兔BMSCs向肝细胞分化的研究的开题报告一、研究背景近年来，骨髓间充质干细胞（BMSCs）已被广泛应用于细胞治疗领域。

BMSCs的异种移植可作为一种潜在的治疗肝脏损伤和疾病的方法。

BMSCs向肝细胞分化是重要而具有挑战性的研究领域。

肝细胞分化需要复杂的胚胎发育过程，同时需要调节多种信号通路。

生长因子（growth factors）在BMSCs向肝细胞分化的过程中也扮演着关键的角色。

在众多的生长因子中，肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）和表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）具有很强的细胞增殖和分化作用，可以明显地促进BMSCs向肝细胞的分化。

二、研究目的本研究旨在探究不同浓度HGF及EGF对兔BMSCs向肝细胞分化的影响，评估其分化效率，并探究其作用机制。

三、研究方法1. BMSCs的培养：收集兔骨髓，从中筛选出BMSCs，并进行培养、传代。

2. 生长因子的诱导：将培养好的BMSCs分别加入不同浓度的HGF及EGF培养基中进行诱导处理。

设置对照组和生长因子处理组。

3. 细胞分化效果的检测：检测BMSCs的形态变化、酶活性、分泌物含量和指标的表达情况。

通过传真荧光染色和免疫荧光染色方法进行鉴定。

4. 数据处理和统计：将实验结果进行统计学分析，并用图形展示出来。

四、研究意义本研究将有助于深入了解HGF和EGF对BMSCs向肝细胞分化的作用机制，为临床应用提供理论基础。

同时，该研究在BMSCs的分化过程中可以为治疗肝脏疾病提供新的治疗方案，具有很高的实际应用价值。

HGF+EGF联合诱导大鼠BMSCs分化肝样细胞的研究

化；在诱导第７２天行免疫细胞化学染色检测肝细胞标志ＡＰ和Ｃ１。结果在加入各种诱导成分、１ＦＫ８后，形或成纤维细胞样细胞随着诱导时问的延长，成纺锤形、规则圆形或多角形细胞，量逐渐变梭变不数多，似肝细胞。在诱导分化第７天和２天免疫细胞化学染色各诱导组均可检测出ＡＰ和Ｃ８表达，形１ＦＫ１图像分析表明ＨＧＦ＋ＥＦ联合诱导分化的ＡＰＣ１ＧＦ、Ｋ８阳性率最高，Ｆ次之，ＧＨＧＥＦ则较弱。结论ＨＦＥＦＨＧＥＦ均能诱导大鼠骨髓问充质千细胞分化为肝样细胞，Ｇ、Ｇ、Ｆ＋Ｇ分化后的肝样细胞能分泌肝细
供）。
１２方法．
ＡＦ（：２）兔抗大鼠Ｃ１（：４０）未分化组为阴性对Ｐ１３０、Ｋ８１１０，照。免疫组化阳性为胞浆内有棕黄色颗粒。 ① １％水合氯醛腹腔注０１３统计学方法．将实验所得数据以均数．标准差（４－ｘ±ｓ）表示，利用ＳＳ２０软件包行单因素方差分析或行ｔＰＳ１．检验，Ｐ
后收集，０ｒｍ离心８ｍｎ弃上清，ＤＭ培养基（１％１０ｐ０ｉ；用ＭＥ含５
２１ＢＣ形态学特征原代培养２即可观察到在大量．ＭＳｓ４ｈ内悬浮小圆形细胞之间出现呈梭形、菱形、三角形的细胞，这些细胞呈贴壁生长。第一次换液后，小圆形细胞数量明显减少，贴壁细胞增殖加快，态渐趋一致，形呈长梭形。培养７—９ｄ，

促大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的研究

促大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的研究朱福良;景成伟【期刊名称】《中国实用医药》【年(卷),期】2008(003)033【摘要】目的探讨成年大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs) 的体外培养和向神经元样细胞分化的方法.方法通过梯度分离获得成年大鼠MSCs ,在细胞因子和氧化剂作用下对其诱导分化为神经元样细胞,免疫细胞化学方法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE) 、神经丝蛋白(NF) 、胶质纤维酸性蛋白( GFAP) 和神经巢蛋白(Nestin) 的表达情况,流式细胞仪检测分析诱导率.结果 BMSCs被转化神经元样细胞并表达Nestin.应用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、叔丁基对羟基茴香醚(BHA)所获得的神经元样细胞诱导率高(49. 7%).结论 bFGF、BHA能促进大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞.【总页数】2页(P33-34)【作者】朱福良;景成伟【作者单位】300211,天津医科大学第二医院骨科;300211,天津医科大学第二医院骨科【正文语种】中文【中图分类】R6【相关文献】1.天然脑活素定向诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的实验研究 [J], 李映红;吴正治;吴伟康;李明;王济国;杨敏;陈蔓茵2.不同补肾法在脑梗死大鼠体内促骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的作用[J], 刘永琦;王倩;颜春鲁;苏韫;张毅;范萍;吴晓晶;董介正3.大鼠骨髓间充质干细胞的培养及其向神经元样细胞诱导分化的实验研究 [J], 宋杰;王丽;冯宁;何涛4.雪旺细胞促进大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的效应研究 [J], 智晓东;吕刚5.三磷酸胞苷二钠诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究 [J], 王宇;魏书艳;史小琴;王燕;张明艳;陈玉敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

两种体系下诱导多潜能干细胞定向分化为运动神经元前体细胞的差异

两种体系下诱导多潜能干细胞定向分化为运动神经元前体细胞的差异李哲;方明珠;陈红;郭钢花;范家宏;毛志娟【摘要】目的将人诱导多潜能干细胞(iPSCs)定向分化为脊髓运动神经元前体细胞(MNP),并比较在有无饲养层两种体系下的分化效率.方法分别在鼠胚胎成纤维细胞饲养层和无饲养层体系中培养人iPSCs.诱导6 d获得神经上皮前体细胞(NEP),诱导12 d获得MNP细胞.倒置显微镜下观察细胞形态变化,免疫荧光染色鉴定iPSCs、NEP、MNP标记物,实时定量聚合酶链反应检测NEP相关基因SOX1、HOXA3,MNP相关基因OLIG2、PAX6,及多能性基因SOX2、OCT4的转录水平.结果两种体系中iPSCs均表达多能性标记物,NEP及MNP均高表达神经相关标记物,低表达多能性标记物,有饲养层体系中NEP细胞SOX1、HOXA3,MNP细胞OLIG2、OCT4基因表达明显高于无饲养层,PAX6和SOX2表达无显著性差异.结论 iPSCs在两种培养体系均可有效分化为MNP细胞,在有饲养层体系中分化效率较高.%Objective To induce human-induced pluripotent stem cells(iPSCs)to differentiate into spinal motor neuron precursor (MNP)and compare the induction efficiency in systems of feeder and feeder-free. Methods iPSCs cultured on mouse feeder cells or in feeder-free condition were induced into neuroepithelial progenitors (NEP) on the sixth day and MNP on the twelveth day.Their morphology was observed under inverted micro-scope,and the markers of iPSCs,NEP,MNP were detected with immunofluorescence.NEP-related genes SOX1 and HOXA3,MNP-related genes OLIG2 and PAX6,and pluripotency genes SOX2 and OCT4 were detected with real-time quantitative polymerase chain reaction. ResultsiPSCs expressed pluripotency markers,while NEP and MNP expressed high levels of neural related markers and low levels of pluripotency markers in two systems. The expression of the genes SOX1, HOXA3, OLIG2 and OCT4 was higher in the feeder system,and there was no significant difference in the expression of genes SOX2 and PA X 6. Conclusion iPSCs can differentiate into MNP in culture systems of feeder and feeder-free,and the induction efficiency is higher in the feeder system.【期刊名称】《中国康复理论与实践》【年(卷),期】2018(024)003【总页数】8页(P269-276)【关键词】人诱导多潜能干细胞;运动神经元;神经分化【作者】李哲;方明珠;陈红;郭钢花;范家宏;毛志娟【作者单位】郑州大学第五附属医院,河南郑州市450052;郑州大学第五附属医院,河南郑州市450052;华中科技大学同济医院,湖北武汉市430030;郑州大学第五附属医院,河南郑州市450052;郑州大学第五附属医院,河南郑州市450052;华中科技大学同济医院,湖北武汉市430030【正文语种】中文【中图分类】R741.05人诱导多潜能干细胞(human-induced pluripotent stem cells,iPSCs)是将特定的多能遗传基因导入体细胞获得的一种类似胚胎干细胞的多能干细胞。

SDF-1促进BMSCs迁移的研究进展

SDF-1促进BMSCs迁移的研究进展刘想忠;李章华;许海甲【摘要】骨髓中主要包括两种多能干细胞, 即造血干细胞 (hematopoietic stem cells, HSCs) 和骨髓间充质干细胞 (bone marrow derived mesenchymal stem cells, BMSCs).BMSCs具有多种分化潜能, 在一定条件下可向多种细胞方向分化, 并且具有免疫调节能力.由于取材方便, 不会违背伦理问题.因此近年来, 其在免疫调节及组织工程学方面的应用有着越来越重要的作用.基质细胞衍生因子-1 (stromal cell-derived factor 1, SDF-1) 属于趋化因子家族, 与其受体CXCR4 (C-X-C Chemokine Receptor 4) 相互作用后对BMSCs具有明显定向趋化作用, 虽然近年来有很多研究对其作用机制进行了探讨, 但具体机制仍不十分清楚.本文对近年来SDF-1及其受体对BMSCs的趋化作用机制进行总结, 旨在为后续进一步研究提供参考.%Bone marrow stem cells mainly include hematopoietic stem cells (HSCs) and bone marrow derived mesenchymal stem cells (BMSCs). BMSCs not only have multiplex potential of differentiation, but also have immunomodulatory properties. They can differentiate into various cells. Recently, BMSCs have been increasingly used in the field of immunomodulatory and tissue engineering because of easily available and no ethnic violation. Stromal cell-derived factor 1 (SDF-1) is a member of chemokine family. It has obvious migration effect on BMSCs after binding to its receptor CXCR4 (C-X-C Chemokine Receptor 4). Although there are many studies about the migration mechanism of BMSCs, the detail has not been explanted clearly. This paper summarizes the mechanism of themigration of BMSCs by SDF-1 and its receptors in recent years. We hope that this could provide a reference for further research.【期刊名称】《中国骨质疏松杂志》【年(卷),期】2019(025)003【总页数】8页(P408-415)【关键词】骨髓间充质干细胞;基质细胞衍生因子;迁移【作者】刘想忠;李章华;许海甲【作者单位】武汉大学附属同仁医院(武汉市第三医院), 湖北武汉 430000;武汉大学附属同仁医院(武汉市第三医院), 湖北武汉 430000;武汉大学附属同仁医院(武汉市第三医院), 湖北武汉 430000【正文语种】中文【中图分类】R329.2骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells，BMSCs)是近年来发现的多能干细胞，存在于骨髓之中，含量在0.01%以下，属于成体干细胞的一种，具有多种分化能力及自我更新能力，在不同的诱导环境下可分化成种细胞，如成骨细胞，软骨细胞，心肌细胞及脂肪细胞等。