QS2634纤维素(CLL)含量试剂盒说明书
纤维素(CLL)含量检测试剂盒说明书 微量法
纤维素（CLL）含量检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC4285规格:100T/96S产品简介：纤维素是由β-D-葡萄糖单元以β-1,4-糖苷键连接而成的直链多聚体，通常与半纤维素、果胶及木质素结合在一起，是植物细胞壁的主要结构成分。
以纤维素为原料的产品广泛应用于食品、造纸、塑料、炸药、电工及科研器材等领域。
纤维素在酸性条件下加热能分解成β-D-葡萄糖。
在强酸作用条件下利用与蒽酮显色剂测定纤维素含量。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、台式低温离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰盒、丙酮、浓硫酸、无水乙醇、蒸馏水和EP管。
产品内容：提取液一：80%乙醇400mL，即将320mL无水乙醇和80mL蒸馏水混合，自备。
提取液二：液体100mL×1瓶，4℃避光保存；试剂一：粉剂×1瓶，4℃避光保存；试剂二：液体10mL×1瓶，4℃避光保存；标准品：粉剂×1支，10mg无水葡萄糖。
临用前加入1mL蒸馏水溶解，配成10mg/mL葡萄糖溶液备用。
工作液的配制：在试剂一中加入5mL试剂二，充分混匀，如较难溶解，可充分震荡或加热搅拌；用不完的试剂，4℃可保存一周。
操作步骤：一、纤维素的提取：1、细胞壁物质（CWM）的提取：称取约0.3g（记为W1）样本，加入1mL提取液一，室温快速匀浆，90℃水浴20min，冷却至室温，6000g，25℃离心10min，弃上清。
沉淀先后用1.5mL提取液一和丙酮各洗两遍（涡旋振荡2min左右，6000g，25℃离心10min，弃上清即可），沉淀即为粗细胞壁，加入1mL 提取液二（去除淀粉）浸泡15小时，6000g，25℃离心10min，弃上清，将沉淀干燥，得到细胞壁物质（CWM），称重记为W2。
2、纤维素的提取：称取烘干的CWM约5mg（记为W3），加入0.5mL蒸馏水充分匀浆，匀浆液转移至EP管中，用蒸馏水定容至0.5mL，置于冰水混合物中，缓慢加入0.75mL浓硫酸，缓慢混匀，冰水浴中静置30min。
QS2634纤维素(CLL)含量试剂盒说明书
货号：QS2634 规格：50管/48样纤维素（CLL）含量试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：纤维素是由葡萄糖组成的大分子多糖，通常与半纤维素、果胶和木质素结合在一起，是植物细胞壁的主要结构成分。
纤维素是一种重要的膳食纤维，是自然界中分布最广、含量最多的一种多糖。
测定原理：纤维素为β－葡萄糖残基组成的多糖，在酸性条件下加热能分解成β－葡萄糖。
β－葡萄糖在强酸作用下，可脱水生成β－糠醛类化合物。
β－糠醛类化合物与蒽酮脱水缩合，生成糠醛衍生物。
颜色的深浅可间接定量测定纤维素含量。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、80％乙醇、丙酮、浓硫酸（不允许快递）、研钵和蒸馏水。
试剂的组成和配制：试剂一：液体 50mL× 1 瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体 10mL× 1 支，4℃保存。
样品的前处理：1、细胞壁的提取：取约 0.3g 样本，加入 1mL 80％乙醇，室温快速匀浆，95℃水浴 20min，冷却至室温，4000g 25℃离心 10min，弃上清。
沉淀加入 1.5mL80％乙醇和丙酮各洗一遍（涡旋振荡 2min 左右，4000g 25℃离心 10min，弃上清即可），沉淀即为粗细胞壁，加入 1mL 试剂一（去除淀粉）浸泡 15 小时，4000g 25℃离心 10min，弃上清，将沉淀干燥，称重得细胞壁物质（CWM）。
2、纤维素的提取：称取烘干的 CWM 约 5mg，加入 0.5mL 蒸馏水充分匀浆，匀浆液转移至 EP管中，用蒸馏水定容至 0.5mL，置于冰水浴中，缓慢加入 0.75mL 浓硫酸，混匀，冰水浴中静置 30min。
8000g 4℃离心 10min，取上清液，用蒸馏水稀释 20 倍后待测。
测定步骤：1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 620nm，蒸馏水调零。
纤维素酶酶活性测定试剂盒说明书
纤维素酶（cellulase ，CL ）/羧甲基纤维素酶活性测定试剂盒说明书微量法100管/48样注 意 ：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定 测定意义：CL （EC 3.2.1.4）存在于细菌、真菌和动物体内，能够催化羧甲基纤维素降解，是一类可广泛应用于医药、食品、棉纺、环保及可再生资源利用等领域的酶制剂。
测定原理：采用蒽酮比色法测定CL 催化羧甲基纤维素钠降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、浓硫酸和蒸馏水。
试剂的组成和配制：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存； 试剂一：液体6mL×1瓶，4℃保存； 试剂二：液体40mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存； 临用前加入5mL 蒸馏水和45mL 浓硫酸充分溶解待用。
样品测定的准备：1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL ）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W ，超声3s ，间隔10s ，重复30次）；8000g 4℃离心10min ，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g ）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min ，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
加样表和测定步骤：37℃振荡反应1h 后，90℃水浴15min （盖紧，防止水分散失），冷却后试剂名称 对照管 测定管 样本 50 50 试剂一（μL ） 90 试剂二（μL ） 370 370 蒸馏水（μL ）180908000g 25℃离心10min，取上清，得糖化液糖化液(μL)140 140试剂三(μL)260 260 混匀，90℃水浴10min（盖紧，防止水分散失），冷却，取200μL至微量石英比色皿或96孔板中，测620nm下吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。
纤维素含量的测定
处理枝梢的纤维素含量测定试验材料：马尾松枝梢、湿地松枝梢、黑松枝梢和火炬松枝梢的风干各种纤维素；纯纤维素供试试剂：⑴ 60﹪H2SO4溶液；⑵浓H2SO4 （AR）；⑶2﹪蒽酮试剂：将2g蒽酮溶解于100ml乙酸乙酯中，贮放于棕色试剂瓶中；⑷纤维素标准液：准确称取100mg纯纤维素，放入100ml量瓶中，将量瓶放入冷浴中，然后加冷的60﹪H2SO4溶液60～70ml，在冷的条件下消化处理20～30min，用60﹪H2SO4 稀释至刻度，摇匀。
吸取此液5.0ml放入另一50ml量瓶中，将量瓶放入冰浴中，加蒸馏水稀释至刻度，则每毫升含100μg纤维素。
主要试验仪器设备：分析天平、电热恒温水浴锅、电炉、UV-1201紫外/可见分光光度计；、容量瓶、布氏漏斗、移液管、烧杯、量筒、小试管。
试验步骤：（一）求测纤维素的回归方程（1）取6支小试管，分别放入0ml、0.40ml、0.80ml、1.20ml、1.60ml、2.00ml 纤维素标准液，然后分别加入 2.00ml、1.60ml、1.20ml、0.80ml、0.40ml、0ml 蒸馏水，摇匀，则每管依次含纤维素0μl、40μl、80μL、120μl、160μl、200μl。
（2）向每管中加0.5ml 2﹪蒽酮,再沿管壁加浓H2SO4，塞上塞子，摇匀，静置1min。
然后在620nm下，测得不同含量纤维素溶液的吸光度。
（3）以测得的吸光度为y值，对应的纤维素含量为x值，求y随x而变得回归方程。
（二）样品纤维素含量的测定（1）称取风干的各种枝梢纤维素0.2g于烧杯中，将烧杯置冷水浴中，加入60﹪H2SO4溶60mL，并消化30min，然后将消化好的纤维素溶液转入100ml容量瓶，并用60﹪H2SO4定容至刻度，摇匀后用布氏漏斗过滤于另一烧杯中。
（2）取上述滤液5ml放入100ml容量瓶中，在冷水浴上加蒸馏水稀释至刻度，摇匀后使用。
（3）取（二）（2）中的溶液2mL于具塞试管中，加入0.5ml 2﹪蒽酮试剂，并沿试管壁加5ml浓H2SO4，塞上塞子，摇匀，静置12min，然后在在620nm波长下测吸光度。
ELISA 检测试剂盒 说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human Human））17-17-羟皮质类固醇（羟皮质类固醇（羟皮质类固醇（17-OHCS 17-OHCS 17-OHCS））ELISA 检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被17-羟皮质类固醇（17-OHCS）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的17-羟皮质类固醇（17-OHCS）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
ELISA_kit使用说明书
微囊藻毒素ELISA检测试剂盒使用说明书Microcystin Plate Kit一、基本原理酶联免疫（ELISA）是免疫酶技术的一种，是将抗原抗体反应的特异性与酶反应的敏感性相结合而建立的一种新技术。
ELISA的技术原理是：将酶分子与抗体（或抗原）结合，形成稳定的酶标抗体（或抗原）结合物，当酶标抗体（或抗原）与固相载体上的相应抗原（或抗体）结合时，即可在底物溶液参与下，产生肉眼可见的颜色反应，颜色的深浅与抗原或抗体的量成比例关系，使用ELISA 检测仪，即酶标仪，测定其吸收值可做出定量分析。
此技术具有特异、敏感、结果判断客观、简便和安全等优点，日益受到重视，不仅在微生物学中应用广，而且也被其他学科领域广为采用。
本试剂盒工作原理如下图所示。
二、已配试剂ELISA试剂盒中配备以下条目：1、96孔已包被好的酶标板2、1只阴性对照即0孔溶液3、标准1：0.1ng/mL的MC-LR标准溶液4、标准2：0.2ng/mL的MC-LR标准溶液5、标准3：0.5ng/mL的MC-LR标准溶液6、标准4：1ng/mL的MC-LR标准溶液7、标准5：2.5ng/mL的MC-LR标准溶液8、1瓶溶液1 (单抗)9、1只溶液2(二抗稀释液)10、一只二抗（小管乘装）11、1瓶溶液3（底物溶液）12、1瓶溶液4 （终止液）13、1袋固体PBS（配置洗涤液用）三、需配器材及试剂除试剂盒内的物品外，还需配备以下器材和试剂：1、酶标仪（若可能，可配有洗板机）2、微量移液器（100 L）（若可能，可配8道或12道微量移液器）3、吸管、橡皮吸头（洗板时用，若有洗板机，无需准备此项）4、纯水（用于配置洗涤液）5、玻璃瓶（盛装洗涤液）6、记时器（准确控制每步操作时间）7、封口膜（防止孔内液体挥发）四、酶标二抗的配置将小管中二抗用溶液2按1:3000稀释，充分溶解混匀，现用现配。
五、洗涤液的配置将固体PBS以纯水配置成1L溶液，加1mL Tween 20（PBS-T, pH7.4-7.6），室温保存。
食物中不溶性膳食纤维的国标测定方法
食物中不溶性膳食纤维的国标测定方法【GB/T 12394—1990】食物中不溶性膳食纤维的测定方法1 主题内容与适用范围本标准规定了食物中不溶性膳食纤维的中性洗涤剂测定方法。
本标准适用于各类植物性食物和含有植物性食物的混合食物中不溶性膳食纤维的测定。
其最小检出限为0.1mg。
2 原理在中性洗涤剂的消化作用下，样品中的糖、淀粉、蛋白质、果胶等物质被溶解除去，不能消化的残渣为不溶性膳食纤维，主要包括纤维素、半纤维素、木质素、角质和二氧化硅等，并包括不溶性灰分。
3 试剂和材料实验用水为蒸馏水。
试剂不加说明为分析纯试剂。
3.1 无水亚硫酸钠。
3.2 石油醚：沸程30～60℃。
3.3 丙酮。
3.4 甲苯。
3.5 中性洗涤剂溶液：将18.61g EDTA二钠盐和6.81g四硼酸钠(含O)置于烧杯中，加水约150mL，加热使之溶解，将30g月桂基硫酸钠10H2(化学纯)和10mL乙二醇独乙醚(化学纯)溶于约700mL热水中，合并上述二种溶液，再将4.56g无水磷酸氢二钠溶于150mL热水中，再并入上述溶液中，用磷酸调节上述混合液至pH6.9～7.1，最后加水至1000mL。
3.6 磷酸盐缓冲液：由38.7mL 0.1mol/L磷酸氢二钠和61.3mL 0.1mol/L磷酸二氢钠混合而成，pH为7。
3.7 2.5%α－淀粉酶溶液：称取2.5gα－淀粉酶(美国Sigma公司，VI－A型，产品号6880)溶于100mL，pH7的磷酸盐缓冲溶液中，离心、过滤，滤过的酶液备用。
3.8 耐热玻璃棉(耐热130℃，美国Corning玻璃厂出品，PYREX 牌。
其他牌号也可，只需耐热并不易折断的玻璃棉)。
4 仪器和设备4.1 实验室常用设备。
4.2 烘箱：110～130℃。
4.3 恒温箱：37±2℃。
4.4 纤维测定仪。
4.5 如没有纤维测定仪，可由下列部件组成：4.5.1 电热板：带控温装置。
4.5.2 高型无嘴烧杯：600mL。
纤维素酶(Cellulase, CL)活性测定试剂盒使用说明
纤维素酶（Cellulase,CL)活性测定试剂盒使用说明产品简介：CL（EC3.2.1.4）存在于细菌、真菌和动物体内，能够催化纤维素降解，是一类可广泛应用于医药、食品、棉纺、环保及可再生资源利用等领域的酶制剂。
采用3.5－二硝基水杨酸法测定CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水产品内容：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体4mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体10mL×1瓶，4℃保存；试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保存；操作步骤：一、样品的前处理：(1)细菌或细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清，按照每500万细菌或细胞加入1mL 提取液，超声冰浴破碎细菌或细胞（功率20%。
超声3秒，间隔10秒。
重复30次）。
8000g 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。
(2)组织：称取约0.1g组织，加入1mL提取液，进行冰浴匀浆；8000g4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。
二、测定操作表：试剂名称（μL）对照管测定管试剂一5050试剂二200200双蒸水5050样本50煮沸的样本50混匀，40℃准确水浴30min，取出后立即放入沸水中煮沸15min，得糖化液糖化液5050试剂三150150混匀，沸水浴中煮沸显色15min，冷却双蒸水10501050混匀，550nm处以对照管调零，读取测定管吸光度A。
CL活力单位的计算：标准条件下测定的回归方程为y=0.3356x-0.012；x为标准品浓度（mg/ml），y为OD值。
1，按蛋白浓度计算单位定义：每mg组织蛋白在反应体系中每分钟催化生成1ug葡萄糖定义为一个酶活力单位。
CL活力（U/mg prot）=695×（A+0.012）÷蛋白质浓度（mg/mL）2，按样本鲜重计算单位定义：每g组织在反应体系中每分钟催化生成1ug葡萄糖定义为一个酶活力单位。
辅酶 Q10(CoQ10)检测试剂盒说明书
注意事项： 1、待测样品中不能含有 CoQ10 抑制剂，同时需避免反复冻融。 2、在皂化过程中，震荡不要剧烈，以免形成乳化层。 3、CoQ10Assaybuffer 如果出现浑浊或絮状物，应弃用。 4、CoQ10 标准梯度应准确，尽量减少不必要的误差。 5、ECsolution 有一定毒性，请小心操作。 6、检测标准品时，按步骤 3 表格混合后，2min 内即出现明显的蓝色变化并逐渐加深，20min 后蓝色开始变浅，30min 后逐渐呈黄绿色。630nm 检测数据表明，随着时间的延长，OD 值 在不断的下降，对应的颜色也已发生变化，特别是高浓度的标准品变化比较大。因此，应在 出现最深的蓝色结果且稳定的时间段内尽快检测，而且建议每次同时检测标准品 (0.3~0.5mg/ml)和样品。如有条件，最好用酶标仪检测，减少因检测时间导致的误差。 7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
辅酶 Q10(CoQ10)检测试剂盒(微板法)说明书
本产品仅供体外研究使用，不得用于临床诊断
产品简介： 辅酶 Q(CoenzymeQ，CoQ)是一种生物体内广泛存在的脂溶性醌类化合物，故又称泛醌，在 体内呼吸链中质子移位及电子传递中起重要作用，是呼吸链中重要的递氢体，它是细胞呼吸 和细胞代谢的激活剂，也是重要的抗氧化剂和非特异性免疫增强剂。对多种酶有激活作用。 不同生物体来源的辅酶 Q 其侧链异戊烯单位的数目不同，人类和哺乳动物是 10 个异戊烯单 位，故称辅酶 Q10。辅酶 Q10 是辅酶 Q 类的重要成员之一，它们与线粒体内膜相结合，广 泛参与体内的生物代谢过程。
相关产品： 氨苄青霉素溶液(Ampicillin,50mg/ml) 苏木素伊红(HE)染色液 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒 尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法) 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 比色法) 附一：参考标准曲线范围：测定 CoQ10 标准 0.04、0.1、0.3、0.5、1、2、5mg/ml 在 630nm 的吸光度，据此做出其标准曲线如下：
1、ELISA 试剂盒使用说明书（5 孔板格式）
ELISA kitInstruction Manual5-plate formatJuly, 2006For research use only.Not for use in diagnostic or therapeutic procedures.ContentsAbbreviations 2 Introduction 3 Contents of the kit 4 Hazard information 4 Materials and reagents required but not provided 4 Working solutions 4 General procedure 5 Coating antibodies 5 Blocking 5 Test samples and standards 5 Biotinylated detector antibodies 5 SPP conjugate 5 Substrate 5 Cytokine standards 6 Storage kit reagents 6 Directions for washing 7 Trouble shooting 7 References 8AbbreviationsAPC Antigen presenting cellsBSA Bovine serum albuminCD Cluster of differentiationCSB Cytokine stabilization bufferDMSO Dimethyl sulfoxideELISA Enzyme linked immunosorbent assayGM-CSF Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor IFN InterferonIL InterleukinMHC Major histocompatibility complexOD Optical densityPB Phosphate bufferPBS Phosphate buffered salinePBST PBS containing 0.05% Tween-20PBST-B PBST containing 0.5% bovine serum albuminSPP Streptavidin-HRP polymerT h T helper subsetTMB TetramethylbenzidineTNF Tumor necrosis factorIntroductionCytokines are a group of regulatory proteins critically involved in many physiological processes such as immune recognition, cell differentiation and cell proliferation. They have been identified in many vertebrate species and are produced by a variety of different cell types. Cytokines are usually produced transiently and locally, acting in a paracrine or autocrine manner. They interact with high affinity cell surface receptors specific for each cytokine or cytokine group and are active at very low concentrations mostly in the picogram range.It is well known now that the type of an antigen-specific immune response largely depends on the selection or preferential activation of defined CD4+T cell subsets (i.e. T h1 and T h2). Activation of these subsets is characterized by the secretion of distinct patterns of cytokines. T h1, but not T h2 cells, primarily secrete IL-2 and IFN-γ while T h2, but not T h1 cells, produceIL-4, IL-5, IL-6, IL-10 and IL-13. Other cytokines, such as TNF-α and GM-CSF are produced by both T h subsets. In addition, the production of IL-12 and IL-10, produced by antigen presenting cells (APC) such as macrophages and dendritic cells, critically contributes to the preferential expansion of T h1- or T h2-type of cells. For instance, early production of IL-12 is considered essential for the development of T h1 cells. On the other hand, the absence or low concentrations of IL-12 and IFN-γ in the early phase of an immune response and concomitant production of IL-4 by cells of the mastcell/basophil lineage or T cells themselves is known to favor the development of T h2 cells. In addition to their regulatory effects on T h subset differentiation, the cytokines released by the two types of T h cells also produce distinct effector functions. For instance, IL-4 and IFN-γhave differential or antagonistic activities on immunoglobulin isotype selection or MHC class II expression. Therefore, the properties of an immune response can be best studied by determining the amounts of cytokines produced by the responding T cells and APC.Contents of the kitItemsQuantity(5-plate format)StorageconditionsCoating antibodies 1 vial 4ºC (39ºF)Cytokine standard 5 vials 4ºC (39ºF)Biotinylated detector antibodies 1 vial 4ºC (39ºF)SPP conjugate (Streptavidin-HRP polymer) 1 vial ≤ -20ºC (-4°F)TMB substrate tablets 5 4ºC (39ºF)Substrate buffer capsules 5 Rt*BSA stock solution (10%) 2 vials (24 ml) 4ºC (39ºF)Cytokine stabilization buffer (CSB)** 1 vial (5 ml) 4ºC (39ºF)Tween-20 1 vial (5 ml) Rt*ELISA plates8 Rt*Adhesive cover slips 10 Rt** Room temperature** For serum and plasma samples only; see under “Test samples and standards”Materials and reagents required but not provided•PB stock: dissolve 96.0 g Na2HPO4.2H2O plus 17.5 g KH2PO4in 1.0 L distilled water and adjust pH to 7.4•Sterile distilled water•H2SO4•Dimethyl sulfoxide (DMSO)•Pipetting devices for the accurate delivery of volume required for the assay performance •Plate washer: automated or manual (squirt bottle, manifold dispenser, etc)•Reading device for microtiter-plate set to 370, 450 and/or 655 nmWorking solutions•PBS: add 10 ml PB stock and 8.8 g NaCl to 1 L distilled water. Adjust pH to 7.4.Alternatively, use commercially available liquid PBS from Invitrogen or other suppliers.Do not use commercially available PBS tablets for the preparation of the coating solution (the filler in the tablets interferes with the coating process).•PBST: 0.5 ml Tween-20 dissolved in 1 L PBS.•PBST-B: 2 ml BSA stock solution (10%) added to 38 ml PBST.•Blocking buffer: 2 ml BSA stock solution (10%) added to 18 ml PBS (for 1 ELISA plate). •Substrate buffer: the contents of one capsule is dissolved in 100 ml distilled water (takes approximately 5 minutes). For optimal performance, the buffer solution should be used within60 minutes.•Stopping solution: 2 M H2SO4TMB (tetramethylbenzidine) and sodium perborate (in substrate buffer)General procedureCoating antibodies•Reconstitute the lyophilized antibodies by injecting 250 µl of sterile distilled water into the vial. Mix the solution gently for approximately 15 seconds and allow it to stand for 2 minutes at room temperature. Avoid vigorous shaking. To coat 96 wells of an ELISA plate 50 µl is pipetted out of the vial (or use a frozen aliquot of 50 µl; see "Storage kit reagents") and added to 5 ml PBS. Mix gently.•Add 50 µl of diluted antibody solution to each well of the ELISA plate and fill up to 100 µl with PBS.•Seal the plate to prevent evaporation.Incubate overnight at 4ºC or alternatively 1 to 2 hours at 37ºC.Blocking•Remove the coating antibody solution and wash the wells at least six times with PBST. •Add 200 µl of blocking buffer.•Seal the plate and incubate at 37ºC for 1 hour.Test samples and standards•Remove the blocking buffer but do not wash.•Add 1/20 volume of CSB to serum or plasma samples but not to other samples such as cell culture supernatants; CSB inhibits the degradation of cytokines in pure serum or plasma. •Dilute standards and test samples in an appropriate diluent (see “Cytokine standards”). •Add 100 µl to each well.•Seal the plate and incubate at 37ºC for 2 hours or overnight at 4ºC.Biotinylated detector antibodies•Remove test samples/standards and wash the wells at least six times with PBST. •Reconstitute the lyophilized antibodies by injecting 0.5 ml of sterile distilled water into the vial. Mix the solution gently for approximately 15 seconds and allow it to stand for 2 minutes at room temperature. Avoid vigorous shaking. Hundred microliter is pipetted out of the vial (or use a frozen aliquot of 100 µl; see "Storage kit reagents") and added to 10 ml PBST-B.Mix gently.•Add 100 µl of diluted antibody solution to each well.•Seal the plate and incubate at 37ºC for 1 hour.SPP conjugate•Remove detector antibody solution and wash the wells at least six times with PBST. •Reconstitute the contents of the vial by injecting 0.5 ml of sterile distilled water into the vial.Mix the solution gently for approximately 15 seconds and allow it to stand for 1 minute at room temperature. Avoid vigorous shaking. Hundred microliter is pipetted out of the vial (or use a frozen aliquot of 100 µl; see "Storage kit reagents") and added to 10 ml PBST-B. Mix gently.•Add 100 µl to each well.•Seal the plate and incubate at 37ºC for 1 hour.Substrate•Remove SPP conjugate and wash the wells at least six times with PBST.•Dissolve one TMB tablet in 1.0 ml DMSO (vortex at high speed for 5 minutes for complete dissolution)and than add 10 ml substrate buffer.•Mix thoroughly and immediately dispense 100 µl into each well. Leave the plate on the laboratory bench at room temperature (color development between 10 and 30 minutes).The substrate produces a soluble end-product that is blue in color and can be read spectrophotometrically at 370 or 655 nm. The reaction can be stopped by adding 50 µl of2 M H2SO4 (resulting in a yellow solution which can be read at 450 nm).Cytokine standardsFor maximum recovery, the vial with lyophilized cytokine standard should be reconstituted in 0.5 ml distilled water and allowed to stand for 1 minute at room temperature. Thereafter, the reconstituted cytokine standard (stock solution) is placed on melting ice and is immediately diluted as indicated below (preferentially within one hour). Use vials with cytokine standards only once.Please note that temperature of buffers and standard solution(s) should now be kept at 0-4ºC until use in the ELISA.The total amount of cytokine standard is indicated on the label of the vial (ng/vial). After reconstitution in 0.5 ml water, the concentration (ng/ml) will become twice the amount on the label [e.g. amount on label is 4.8 ng/vial; after reconstitution, the concentration becomes9.6 ng/ml = 9600 pg/ml].The standard stock solution is diluted to 320 pg/ml in PBST-B (highest concentration cytokine to be used in the standard range).The linear region of the cytokine standard curve is now obtainable in a series of two-fold dilutions in PBST-B ranging from 320 to 5 pg/ml. Always include a blank control (PBST-B only) in the standard range.Before establishing the standard curve, the OD value of the blank control (OD.bl) is subtracted from the measured OD values of the different standard solutions. The standard curve is now plotted as the standard cytokine concentration versus the corresponding (measured) OD value minus OD.bl. In addition, the actual OD values of the test samples are determined by subtracting OD.bl from the measured OD values.The concentration of the cytokine in the test sample can then be interpolated from the standard curve. It is useful to prepare a series of dilutions of the unknown test sample to assure that the OD will fall in the linear portion of the standard curve.Note 1: The OD value measured for the blank control (OD.bl) must be below 0.2.Note 2: for measuring cytokines in cell culture supernatant, samples should be diluted inPBST-B. However, when measuring cytokines in pure serum or plasma, the diluent for the standard and blank control should preferentially be control serum or plasma originating from the same species.Storage kit reagentsThe vials with lyophilized coating antibodies and biotinylated detector antibodies can be safely stored in a refrigerator for a defined length of time (expiry date indicated on the vial). After reconstitution, the antibodies remain fully active for minimal 6 months at 4ºC (39ºF) when kept sterile. However, it is strongly recommended to divide the reconstituted antibody solutions into small aliquots for single use. These aliquots should be stored at ≤-20ºC. Under these conditions the antibodies are stable for at least one year.Upon arrival, the vial with lyophilized SPP conjugate should be stored at ≤ -20°C. Storage of the vial at room temperature or at 4ºC for several months may lead to lower OD readings in the ELISA. After reconstitution, the SPP solution is stable for 2 months at 4°C but rapidly looses activity when stored at room temperature. It is strongly recommended that after reconstitution, the solution is immediately divided into small aliquots for single use and stored at ≤-20°C. Under these conditions SPP is stable for minimal 12 months.Directions for washing•Incomplete washing will adversely affect the assay. All washing must be performed with wash buffer (PBST).•Washing can be performed manually as follows: completely aspirate the liquid from all wells by gently lowering an aspiration tip (aspiration device) into each well. After aspiration, fill the wells with at least 300 µl wash buffer. Let soak for 10 to 20 seconds, then aspirate the liquid. Repeat as directed under "General procedure". After washing, the plate is inverted and tapped dry on absorbent paper.•Alternatively, the wash buffer may be put into a squirt bottle. If a squirt bottle is used, flood the plate with wash buffer, completely filling all wells. After washing, the plate is inverted and tapped dry on absorbent paper.•If using an automated washing device, the operating instructions should carefully be followed.Trouble shooting•Poor consistency of replicates can be overcome by increasing the stringency of washes particularly after the incubation step with detector antibody.•High values of the blank control (optical density > 0.2) can be overcome by shortening the incubation time with the substrate solution or is caused by improper washing procedures. •Inconsistent replicates may be due to cross-contamination of wells by improper pipetting procedures.•If no signal is observed in the wells with the standards•try a new vial with cytokine standard•check the pH of the substrate solution (between 5.0 and 5.5)•verify whether the antibody, SPP conjugate and standardpreparations were properly diluted•Avoid sodium azide in wash buffers and diluents, as this is an inhibitor of peroxidase activity.•Storage of reconstituted SPP at room temperature for several days can lead to a significant loss of SPP activity and consequently low OD readings.ReferencesBooks:•Practice and theory of enzyme immunoassays 1985In: Laboratory techniques in biochemistry and molecular biology, Vol.15 (eds R.H.Burdon and P.H. van Knippenberg)Science Publishers bv, Amsterdam, The Netherlands•ELISA and other Solid Phase Immunoassays.Theoretical and Practical Aspects 1988(eds D.M.Kemeny and S.J.Challacombe)John Wiley & Sons Ltd, Chichester, UK• A practical guide to ELISA 1991(ed D.M.Kemeny) Pergamon Press, Oxford, UKReview of U-CyTech ELISA references:Human cytokines:•Arend, S.M. et al. 2000 J. Infect. Diseases 181: 1850-1854 •Demirkiran, A. et al. 2006 Liver Transpl. 12: 277-284 •Hoogendoorn, M. et al. 2005 Clin. Cancer Res. 11: 5310-5318 •Tang, Y-M. et al. 2006 World J. Gastroenterol. 11: 4575-4578•de Waal, L. et al. 2004 J. Virol. 78: 1775-1781Monkey cytokines:•Fallon, P.G. et al. 2003 J. Infect. Dis. 187: 939-945•Hartman, G. et al. 2005 Vaccine 23: 3310-3317•Kornfeld, C. et al. 2005 J. Clin. Invest. 115: 1082-1091 •Mascarell, L. et al. 2006 Vaccine 24: 3490-3499•Polakos, N.K. et al. 2001 J. Immunol. 166: 3589-3598•de Swart, R.L. et al. 2002 J. Virol. 76: 11561-11569Mouse cytokines:•Eijkelkamp, N. et al. 2004 J. Neuroimmun. 150: 3-9•Kavelaars, A. et al. 2005 J. Neuroimmun. 161: 162-168•Vroon, A. et al. 2005 J. Immunol. 174: 4400-4406Rat cytokines:•Dieleman, J.M. et al. 2006 Life Sci. 79: 551-558•Pacheco-López, G. et al. 2005 J. Neurosci. 25: 2330-2337•Sajti, E. et al. 2004 Brain Behav. Immun. 18: 505-514•Teunis, M.A.T. et al. 2002 J. Neuroimmun. 13: 30-38。
纤维素酶检测试剂盒(DNS 比色法)说明书
2、准备样品： 称取样品 10g(或 10ml)加入装有玻璃珠的三角瓶中，再加人一定体积的蒸馏水稀释，静置 20min，200r/min 振荡 30min，然后四层纱布过滤，滤液 3000r/min 离心 10min，上清液加 入 50ml 容量瓶中，补水定容，即为纤维素酶提取液，用于样品 CES 活力的检测。如样品酶 活力较高，应稀释至合适浓度再次检测。
产品组成：
名称 纤维素酶检测试剂盒(DNS 比色法) 试剂(A):Glu 标准(1mg/ml) 试剂(B):CESAssaybuffer 试剂(C):CMCSolution 试剂(D):DNS 试剂 使用说明书 有效期
规格 100T 10ml 50ml 100ml 100ml
保存条件 4℃ 4℃ RT RT
纤维素酶检测试剂盒(DNS 比色法)说明书
本产品仅供体外研究使用，不得用于临床诊断
产品简介： 纤维素酶(β-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶，Cellulase 简称 CES)是降解纤维素生成葡萄糖的一 组酶的总称，它不是单体酶，而是起协同作用的多组分酶系，是一种复合酶，主要由外切β -葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等组成，还有很高活力的木聚糖酶。在分解纤 维素时起生物催化作用，是可以将纤维素分解成寡糖或单糖的蛋白质。
纤维素酶检测试剂盒(DNS 比色法)检测原理是用羧甲基纤维素钠盐(CMC)作底物，经纤维素 酶水解后生成还原糖(葡萄糖)，还原糖在碱性加热条件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水杨酸 (DNS)被还原为棕红色的氨基化合物，在一定范围内还原糖的量与棕红色产物的颜色深浅程 度呈正比，在 540nm 处用分光光度计测定棕红色物质的吸光度，即可求得还原糖的含量， 进而求得纤维素酶活的大小。本产品仅用于科研领域，不用于临床诊断或其他用途。
植物叶绿素含量检测试剂盒说明书
植物叶绿素含量检测试剂盒说明书微量法货号：BC0995规格：100T/96S 产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体×1瓶（自备）4℃保存试剂一粉剂×1瓶4℃保存溶液的配制：1、提取液：自备无水乙醇和丙酮，将无水乙醇：丙酮（V ：V ）=1:2混合待用，提供一个125mL 空瓶。
产品说明：植物叶绿素广泛存在于绿色植物组织中，是光合作用的细胞器。
其含量与光合作用、营养状况密切相关，是反应植物生长状况的重要指标。
叶绿素a 和叶绿素b 在645nm 和663nm 处有最大吸收，根据经验公式可计算得叶绿素a 和叶绿素b 以及总叶绿素的含量。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板（建议使用非聚苯乙烯材质的96孔板）、可调式移液枪、天平、研钵/匀浆器、锡箔纸、蒸馏水、10mL 试管、无水乙醇和丙酮。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1. 取新鲜植物叶片或其它绿色组织，用蒸馏水洗干净，然后吸干表面水分，去掉中脉，称取约0.1g ，剪碎放入研钵或匀浆器中。
2. 加入1mL 蒸馏水，少量试剂一（约10mg ），在黑暗或弱光条件下充分研磨，转入10mL 试管中。
3. 用提取液冲洗研钵，将所有冲洗液转入10mL 试管中，用提取液定容至10mL ，置于黑暗条件下或者包上锡箔纸浸提3h ，观察底部组织残渣颜色接近于白色则提取完全，若组织残渣未完全变白，继续浸提至组织残渣颜色接近于白色。
二、测定步骤1、分光光度计/酶标仪预热30min 以上，调节波长至645nm 和663nm ，分光光度计用提取液调零。
2、取上层浸提液200μL 于微量玻璃比色皿/96孔板中（若使用聚苯乙烯材质的96孔板，请在5min 内尽快测定完成），测定663nm 和645nm 处吸光值，分别记为A 663和A 645。
叶绿体色素含量检测试剂盒说明书
叶绿体色素含量检测试剂盒说明书(货号：NM-W-0151 微量法100T/96S)一、产品简介：叶绿体中所含色素主要有两大类，叶绿素(包括叶绿素 a 和叶绿素b)和类胡萝卜素(包括胡萝卜素和叶黄素)，它们与类囊体膜上的蛋白质结合，成为色素蛋白复合体，其含量多少及其组成决定了植物对不同光的吸收、利用效率，常常作为研究光合生理的重要指标。
根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，在649nm 和665nm 处测定叶绿素提取物的吸光值，在470nm 处测定类胡萝卜素；然后利用经验公式计算出样品中叶绿素 a 含量、叶绿素b 含量、叶绿素总含量及类胡萝卜素含量。
二、试剂盒组分与配制：三、需自备的仪器和用品：酶标仪、96孔板、台式离心机、恒温水浴锅/培养箱、研钵/匀浆器、天平、可调式移液器、锡箔纸、无水乙醇、蒸馏水。
四、操作步骤：建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！1、预实验样本制备①取新鲜植物叶片（去掉中脉）或其它绿色组织，用蒸馏水洗干净，然后吸干表面水分，称取约0.1g，剪碎放入研钵或匀浆器中。
②加入1mL提取液，少量试剂一（约50mg），务必在黑暗或弱光条件下充分研磨（难磨叶片可以添加少量石英砂助磨），然后转移至10mL离心管或玻璃试管中。
③用提取液冲洗研钵，将所有冲洗液及研钵中所有的绿色物质转入10mL离心管中，用提取液补充至10mL，玻璃试管置于黑暗条件下或者包上锡箔纸浸提3h，观察试管底部组织残渣完全变白则提取完全，若组织残渣未完全变白，继续浸提至其完全变白。
2、预实验上机操作：①酶标仪预热30min 以上，调节多波长至470nm、649nm 和665nm。
②操作表：3、正式实验：①当测定吸光值超过1.0时，建议将样本用提取液稀释后再进行测定，计算公式中乘以稀释倍数D；若测定吸光值小于0.05 时，可适当减少提取过程中提取液的用量后再进行测定，计算时相应调整（按实际提取后总体积调整计算公式中V）；②确定好最适实验条件后，正式实验样本制备同预实验样本制备；③正式实验按照预实验上机操作步骤进行。
Crystal Chem醇溶蛋白ELISA试剂盒说明书
Crystal Chem醇溶蛋白ELISA试剂盒说明书Crystal Chem艾美捷小麦/麸质（醇溶蛋白）ELISA试剂盒用于量化生食品和加工食品中的麸质（醇溶蛋白）水平，并使用创新的提取方法来更准确地检测过敏原水平。
仅供实验室使用。
Crystal Chem试剂盒包括：胰岛素、胰高血糖素、C肽、肠抑胃肽、瘦素、脂联素、LDL/HDL （低/高密度脂蛋白）、皮质固醇/激素、胰岛素样生长因子、谷蛋白、豆类过敏原、卵清蛋白、宿主细胞蛋白、KIM-1（肾损伤分子）、肌酐、血清白蛋白、卵清蛋白、血纤维蛋白溶酶原、以及各类抗原酶联免疫检测试剂盒和免疫层析诊断（Lateral Flow）等等。
Crystal Chem醇溶蛋白ELISA试剂盒参数：规格：96 wells灵敏度：0.26 ppm Gluten0.31 ppm Wheat分析范围标准分析：0.26-17 ppm Gluten0.31-20 ppm Wheat高量程分析：1.05-68 ppm Gluten1.24-80ppm Wheat储存温度：2-8°C方法：ELISA定量法特异性：醇溶蛋白Crystal Chem 艾美捷试剂盒特色：1.PTM认证2.改进了对生食品和加工食品中过敏原的检测3.所有试剂盒中的通用提取液4.过敏原回收率高Crystal Chem 艾美捷试剂盒提取概述：谷蛋白（醇溶蛋白）须首先从将19mL提取液添加到1克磨碎的食物。
然后在沸腾状态下加热混合物在房间里搅拌12小时或10分钟温度然后需要调整混合物的pH值到6比8。
去除上清液，然后稀释20倍在3000g下离心样品20分钟后。
纤维素的测定方法
纤维素的测定方法实验原理植物的主要化学成分是纤维素、半纤维素和木质素这三部分。
它们是构成植物细胞壁的主要组分。
其中，纤维素组成微细纤维，构成纤维细胞壁的网状骨架，而半纤维素和木质素是填充在纤维和微细纤维之间的“粘合剂”和“填充剂”。
1.纤维素生物制粉末在加热的情况下用醋酸和硝酸的混合液处理，在这种情况下，细胞间的物质被溶解，纤维素也分解成单个的纤维，木质素、半纤维素和其它的物质也被除去。
淀粉、多缩戊糖和其它物质受到了水解。
用水洗涤除去杂质以后，纤维素在硫酸存在下被重铬酸钾氧化成二氧化碳和水。
C6H10O5+4K2Cr2O7+16H2SO4=6CO2+4Cr2(SO4)3+4K2SO4+21H2O过剩的重铬酸钾用硫酸亚铁铵溶液滴定，再用硫酸亚铁铵滴定同量的但是未与纤维素反应的重铬酸钾，根据差值可以求得纤维素的含量。
2.半纤维素用沸腾的80％硝酸钙溶液使淀粉溶解，同时将干扰测定半纤维素的溶于水的其它碳水化合物除掉。
将沉淀用蒸馏水冲洗以后，用较高浓度的盐酸，大大缩短半纤维素的水解时间，水解得到的糖溶液，稀释到一定体积，用氢氧化钠溶液中和，其中的总糖量用铜碘法测定。
铜碘法原理：半纤维素水解后生成的糖在碱性环境和加热的情况下将二价铜还原成一价铜，一价铜以Cu2O的形式沉淀出来。
用碘量法测定Cu2O的量，从而计算出半纤维素的含量。
测定还原性糖的铜碱试剂中含有KIO3和KI，它们在酸性条件下会发生反应，也不会干扰糖和铜离子的反应。
加入酸以后，会发生反应释放出碘：KIO3+5KI+3H2SO4=3I2+3K2SO4+3H2O加入草酸以后，碘与氧化亚铜发生反应：Cu2O+I2+H2C2O4=CuC2O4+CuI2+H2O过剩的碘用Na2S2O3溶液滴定：2Na2S2O3+I2=Na2S4O6+2NaI3.木质素用1％的醋酸处理以分离出糖、有机酸和其它可溶性化合物。
然后用丙酮处理，分离出叶绿素、拟脂、脂肪和其它脂溶性化合物。
比色法测定可溶性糖、果胶、半纤维素、纤维素含量
比色法测定可溶性糖、果胶、半纤维素、纤维素含量标准液配制1、1.00mg/mL葡萄糖标准液：秤取干燥至恒重的葡萄糖100mg，加水溶解定容至100mL，混匀。
2、1.00mg/mL木糖标准液：秤取干燥至恒重的木糖100mg，加水溶解定容至100mL，混匀。
3、1.00mg/mL半乳糖醛酸标准液：秤取干燥至恒重的半乳糖醛酸100mg，加水溶解定容至100mL，混匀。
试剂配制：1、0.5M 磷酸buffer（pH7）：7.01g K2HPO4·3H2O、2.61g KH2PO4溶于100mL 蒸馏水。
2、0.2% 蒽酮试剂：0.2g 蒽酮溶于100mL 浓硫酸。
3、A试剂：6g 苔黑酚（6.87g C7H8O2·H2O）溶于100mL 无水乙醇。
B试剂：0.1g FeCl3（0.17g FeCl3·6H2O）溶于100mL 37% 浓盐酸。
4、四硼酸钠/硫酸溶液：0.5g Na2B4O7溶（0.95g Na2B4O7·10H2O）于100mL 浓硫酸。
5、1.5mg/mL 间羟基联苯溶液：0.15g 间羟基联苯（3-phenylphenol）溶于100mL 5mg/mL NaOH。
6、氯仿-甲醇（1：1，v/v）7、DMSO-H2O（9：1，v/v）操作步骤样品65℃烘干3天，打碎。
1、磷酸buffer 提取可溶性糖(研磨)（1）将已过40目筛的样品在50°C 条件下烘干。
混匀，平行称取6 份0.1000g（左右）干重样品于15 ml离心管中。
（2）加入 5 ml pH=7的0.5M磷酸buffer，50°C 摇2 h, 2100 g 离心10 min,。
（3）收集上清于50 ml离心管中。
沉淀再用 5 ml buffer洗2 次，5 ml蒸馏水洗2 次。
收集所有上清于50 ml离心管中，定容测定C5、C6。
2. 氯仿-甲醇（Chloroform-methanol）提取脂类（1）于沉淀中加入5 ml氯仿-甲醇（1：1 v/v）, 用封口膜密封，在摇床中40°C（150转）振荡1 h,。
果胶酶活性检测试剂盒说明书
果胶酶活性检测试剂盒说明书微量法货号：BC2635规格：100T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体100mL×1瓶4℃保存试剂一液体25mL×1瓶4℃保存试剂二液体20 mL×1瓶4℃保存标准品粉剂×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂一：若溶液中有不溶解物质，可以50℃水浴溶解。
2、标准品：10mg 半乳糖醛酸。
临用前加入0.943mL 蒸馏水，配成50μmol/mL 的标准液。
产品说明：果胶酶（pectinase ）是分解果胶的酶类，包括原果胶酶，果胶酯酶，多聚半乳糖醛酸酶和果胶裂解酶四大类，广泛存在于高等植物果实和微生物中，是水果加工中最重要的酶。
果胶酶水解果胶生成半乳糖醛酸，半乳糖醛酸与DNS 试剂反应生成在540nm 有特征吸收峰的棕红色物质，测定540nm 处吸光值变化可计算得果胶酶活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、组织：按照组织质量（g ）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g ，4℃，离心10min ，取上清置于冰上待测。
2、菌类：按照细菌数量（104个）：提取液体积（mL ）为500~1000：1的比例（建议500万细菌加入1mL 提取液），冰浴超声波破碎细菌（功率300w ，超声3秒，间隔7秒，总时间3min ）；然后10000g ，4℃，离心10min ，取上清置于冰上待测。
3、液体：直接检测。
纤维素检测报告
纤维素检测报告1. 简介本文档是关于纤维素检测的报告。
纤维素是一种重要的有机化合物，广泛存在于植物细胞壁中。
它具有一系列重要的功能和应用，包括食品工业、医药领域和环境保护等。
本文将介绍纤维素的概念、检测方法以及检测结果分析等内容。
2. 纤维素的概念纤维素是由葡萄糖分子通过β-1,4-糖苷键连接而成的多糖。
其化学式为（C6H10O5）n，其中n取值较大。
纤维素是植物细胞壁的主要成分，也是植物的主要结构材料之一。
它具有多种形态，包括纤维状纤维素、晶体状纤维素和非晶体状纤维素等。
纤维素在自然界中的分布非常广泛，它存在于各种植物中，如棉花、木材、草等。
3. 纤维素的检测方法纤维素的检测对于研究和应用纤维素具有重要意义。
目前常用的纤维素检测方法有以下几种：3.1. 酶解法酶解法是一种常用的纤维素检测方法。
该方法利用纤维素酶（如纤维素酶、β-葡萄糖苷酶等）作用于纤维素分子，将纤维素分解为可溶解的糖类。
通过测定糖类的含量，可以间接得到纤维素的含量。
3.2. 酸碱法酸碱法是另一种常用的纤维素检测方法。
该方法利用酸碱溶液的作用，将纤维素溶解或变形，从而得到纤维素的含量。
常用的酸碱溶液有硫酸、氢氧化钠等。
3.3. 红外光谱法红外光谱法是一种非常有效的纤维素检测方法。
该方法通过测定纤维素样品对红外光的吸收特性，来确定纤维素的含量。
红外光谱法具有快速、准确、无损伤等优点。
4. 纤维素检测结果分析经过上述纤维素检测方法的应用，我们得到了以下纤维素含量的检测结果：样品编号纤维素含量（%）001 30.5002 25.8003 32.1004 28.6从上表可知，样品001、样品003的纤维素含量较高，分别为30.5%和32.1%。
而样品002、样品004的纤维素含量较低，分别为25.8%和28.6%。
通过对比分析，可以得出样品的纤维素含量存在差异。
5. 结论本文通过介绍纤维素的概念、检测方法及检测结果分析等内容，对纤维素的检测进行了全面的介绍。
食物中不溶性膳食纤维的国标测定方法
食物中不溶性膳食纤维的国标测定方法【GB/T 12394—1990】食物中不溶性膳食纤维的测定方法1 主题内容与适用范围本标准规定了食物中不溶性膳食纤维的中性洗涤剂测定方法。
本标准适用于各类植物性食物和含有植物性食物的混合食物中不溶性膳食纤维的测定。
其最小检出限为0.1mg。
2 原理在中性洗涤剂的消化作用下，样品中的糖、淀粉、蛋白质、果胶等物质被溶解除去，不能消化的残渣为不溶性膳食纤维，主要包括纤维素、半纤维素、木质素、角质和二氧化硅等，并包括不溶性灰分。
3 试剂和材料实验用水为蒸馏水。
试剂不加说明为分析纯试剂。
3.1 无水亚硫酸钠。
3.2 石油醚：沸程30～60℃。
3.3 丙酮。
3.4 甲苯。
3.5 中性洗涤剂溶液：将18.61g EDTA二钠盐和6.81g四硼酸钠(含O)置于烧杯中，加水约150mL，加热使之溶解，将30g月桂基硫酸钠10H2(化学纯)和10mL乙二醇独乙醚(化学纯)溶于约700mL热水中，合并上述二种溶液，再将4.56g无水磷酸氢二钠溶于150mL热水中，再并入上述溶液中，用磷酸调节上述混合液至pH6.9～7.1，最后加水至1000mL。
3.6 磷酸盐缓冲液：由38.7mL 0.1mol/L磷酸氢二钠和61.3mL 0.1mol/L磷酸二氢钠混合而成，pH为7。
3.7 2.5%α－淀粉酶溶液：称取2.5gα－淀粉酶(美国Sigma公司，VI－A型，产品号6880)溶于100mL，pH7的磷酸盐缓冲溶液中，离心、过滤，滤过的酶液备用。
3.8 耐热玻璃棉(耐热130℃，美国Corning玻璃厂出品，PYREX 牌。
其他牌号也可，只需耐热并不易折断的玻璃棉)。
4 仪器和设备4.1 实验室常用设备。
4.2 烘箱：110～130℃。
4.3 恒温箱：37±2℃。
4.4 纤维测定仪。
4.5 如没有纤维测定仪，可由下列部件组成：4.5.1 电热板：带控温装置。
4.5.2 高型无嘴烧杯：600mL。
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货号：QS2634 规格：50管/48样纤维素（CLL）含量试剂盒说明书
可见分光光度法
正式测定前取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
纤维素是由葡萄糖组成的大分子多糖，通常与半纤维素、果胶和木质素结合在一起，是植物细胞壁的主要结构成分。
纤维素是一种重要的膳食纤维，是自然界中分布最广、含量最多的一种多糖。
测定原理：
纤维素为β－葡萄糖残基组成的多糖，在酸性条件下加热能分解成β－葡萄糖。
β－葡萄糖在强酸作用下，可脱水生成β－糠醛类化合物。
β－糠醛类化合物与蒽酮脱水缩合，生成糠醛衍生物。
颜色的深浅可间接定量测定纤维素含量。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、80％乙醇、丙酮、浓硫酸（不允许快递）、研钵和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一：液体 50mL× 1 瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体 10mL× 1 支，4℃保存。
样品的前处理：
1、细胞壁的提取：取约 0.3g 样本，加入 1mL 80％乙醇，室温快速匀浆，95℃水浴 20min，
冷却至室温，4000g 25℃离心 10min，弃上清。
沉淀加入 1.5mL80％乙醇和丙酮各洗一遍（涡旋振荡 2min 左右，4000g 25℃离心 10min，弃上清即可），沉淀即为粗细胞壁，加入 1mL 试剂一（去除淀粉）浸泡 15 小时，4000g 25℃离心 10min，弃上清，将沉淀干燥，称重得细胞壁物质（CWM）。
2、纤维素的提取：称取烘干的 CWM 约 5mg，加入 0.5mL 蒸馏水充分匀浆，匀浆液转移至 EP
管中，用蒸馏水定容至 0.5mL，置于冰水浴中，缓慢加入 0.75mL 浓硫酸，混匀，冰水浴中静置 30min。
8000g 4℃离心 10min，取上清液，用蒸馏水稀释 20 倍后待测。
测定步骤：
1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 620nm，蒸馏水调零。
2、调节水浴锅至 95 度。
3、工作液的配制：在试剂二中加入 4mL 试剂三，充分溶解，如较难溶解，可加热搅拌；用
不完的试剂 4℃保存一周；
4、加样表（在 EP 管中反应）：
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别读取空白管和测定管吸光值，ΔA=A 测定管-A 空白管。
注意：
1、空白管只要做一管。
2、由于浓硫酸具有强腐蚀性，请谨慎操作。
纤维素含量计算：
1、标准条件下测定的回归方程为y=5.25x-0.0019；x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。
2、按样本质量计算：
纤维素（mg /g 干重）= [(ΔA＋0.0019) ÷5.25×V1]÷（W×V1÷V2）×20
=4.76×(ΔA＋0.0019)÷W
3、按样本蛋白浓度计算：
纤维素（mg /mg prot）=[ (ΔA＋0.0019) ÷5.25×V1]÷(V1×Cpr) ×20
=3.81×(ΔA0.0019)÷Cpr。
V1：加入样本体积，0.3mL；V2：加入提取液体积，1.25mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本干重，约 5×10-3 g；20：样本稀释倍数。
注意：最低检测限为 1mg/g 干重或 10ng/ mg prot
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