液相色谱柱使用说明
液相色谱柱的使用
液相色谱柱的使用1、Hamilton离子排斥色谱柱中应封存淋洗液保管,保管温度4—10摄氏度,使用温度20—60摄氏度。
2、Hamilton离子排斥色谱柱应在pH2—12范围内使用,淋洗液及样品浓度均不能超出此范围。
进口ShodexIC色谱柱应在pH3—12范围内使用,淋洗液及样品浓度均不能超出此范围。
3、Hamilton离子排斥色谱柱大使用压力不能超出15MPa。
4、拆下Hamilton离子排斥色谱柱时,应在色谱柱温度降至室温后拆下,拆下后立刻以堵头密封。
5、含有重金属的样品,应以阳离子交换树脂处置后,去除重金属才略进样。
6、含有有机物的样品,应过C18固相萃取柱后进样。
7、样品硬度较高时,应先去除样品中的钙镁离子。
8、样品进样前必须以0.22m微孔滤膜过滤或一次性针头过滤器过滤。
9、室温保管色谱柱时,应每周通淋洗液一次。
10、杭州亚莱博为您供给Hamilton离子色谱柱的售前售后服务。
液相色谱柱的使用色谱柱在使用前,可以进行柱的性能测试,并将结果保管起来,作为今后评价柱性能变更的参考。
但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是依照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是较佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。
1、样品的前处置:a、可以使用流动相溶解样品。
b、使用予处置柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
c、使用0.45?m的过滤膜过滤除去微粒杂质。
2、流动相的配制:液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而实现分别的目的,因此要求流动相具备以下的特点:a、流动相对样品具有肯定的溶解本领,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保管在柱中)。
b、流动相具有肯定惰性,与样品不产生化学反应(特别情况除外)。
c、流动相的黏度要尽量小,以便在使用较长的分析柱时能得到好的分别效果;同时降低柱压降,延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。
液相色谱柱的正确安装和使用说明
液相色谱柱的正确安装和使用说明液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。
被过滤广告一、液相色谱柱的安装:1、液相色谱柱的结构:a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。
柱接头采用低死体积结构,柱接头是两端螺纹组件,一端是为7/16英寸外螺纹,另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。
7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接,中间放置压坏用于密封。
3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ1.57mm)的连接管连接,中间也放置压环用于柱接头的密封。
为了尽量减少柱外死体积,在安装色谱柱时,用Φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底,然后再拧紧空心螺钉。
压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上(连接管通过压环后露出的管长度应严格控制在2.5mm长或其他固定尺寸)。
在两端柱接头内,柱管两端各放置一片不锈钢滤片(或滤网),用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。
空柱各组件均为316#不锈钢材质,能耐受一般的溶剂作用。
但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性,故使用时要注意,柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂,以避免腐蚀。
b、柱填料:液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的,柱子的分类是依据填料类型而定。
正相柱:多以硅胶为柱填料。
根据外型可分为无定型和球型两种,其颗粒直径在3—10µm的范围内。
另一类正相填料是硅胶表面键合—CN,-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。
反相柱:主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。
也有无定型和球型之分。
常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10µm之间。
2,色谱柱的安装:a、拆开柱包装盒,确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。
b、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。
液相色谱柱的使用及保养
C18, C18, C18, C18,
phenyl, CN, NH2, Silica C8, phenyl, CN, Silica C8, Silica C4 C18, C8
色谱柱的清洗
对所做的样品要有充分的了解
用对该样品洗脱能力最强的流动相清洗
硅胶柱的一般方法
先用甲醇洗去极性杂质
回收率低,不出峰
“不可逆”吸附 固定相过强或流动相过弱 非特异性吸附
色谱柱以外的因素(一)
“柱效”问题,不一定是色谱柱问题!
仪器问题:连接不好造成死体积
进样器
检测器
管路,连接口 保护柱 在线过滤器堵塞
流动相问题:色谱柱未平衡好 进样量太大
色谱柱与仪器的联接
影响实验结果好坏的最重要因素
是决定性的步骤
样品预处理常用的方法
高速离心 过滤、超滤 选择性沉淀 衍生反应 液-固萃取 其他
/ 液-液萃取
Sep-Pak样品处理小柱
样品预处理的过程
去除微粒
过滤
过滤膜/过滤装置
有机(0.5m)/无机(0.45m)
膜片可更换
流速∶1.0 ml/min 纸速∶20 cm/min (用记录仪时,接检测器10mV档) 检测器灵敏度∶0.5-1.0AUFS (用记录仪时) 检测器时间常数∶小于0.2
谱带展宽(ml) =1000×W(cm)/20 (记录仪) =1000×W(min) (工作站)
液相色谱实用技术(二)
样品衍生∶氨基酸分析
PT法 IA CG O方 NS C
R
-
N C H O CO ຫໍສະໝຸດ 2氨 基 酸异酯 硫 氢 酸 苯
S R N H O H C C H NC O
液相色谱柱的使用和维护保养
液相色谱柱的使用和维护保养液相色谱柱是一种广泛使用的分离技术,可用于分离和测定复杂混合物中的组分。
由于液相色谱柱具有精确分离、操作简便、分离效率高等特点,因此,越来越多的实验室都开始使用该技术。
在使用液相色谱柱时,正确的维护保养非常关键。
本文将介绍液相色谱柱的使用方法和维护保养技巧,以便确保您的分离实验能够得到最佳的结果。
一、液相色谱柱的使用1. 准备工作使用液相色谱柱之前,必须先进行预备工作。
这包括:清洗和准备液相色谱柱以免携带有污染物。
准备需要分离和测定的样品。
准备适当的流动相。
流动相必须符合样品的性质。
液相色谱柱的流动相应该是无色的,纯净的水或相应的缓冲液,并具有必要的缓冲能力。
根据柱的尺寸来选择适当的样品注射量。
2. 柱的装配通常情况下,液相色谱的柱是由管状的柱壳、填充柱节、柱端固定件和柱段之间的密封件组成。
在对柱进行装配的时候,对组件应该加强检查以保证每一个元件的质量。
柱被放置在可控压力的色谱装置中,直到达到设定的温度,流动相通过柱床高度。
在样品通过柱床的过程中,要确保流动相的速度恰好足够将所有的组分都分开并在规定的时间内溶出。
3. 分析过程准备工作完成后,可以开始进行样品的分离实验。
在整个过程中,以下措施应予以注意:在样品从样品室进入色谱柱之前,流动相必须在柱中流动。
否则,在注入样品时,将有空气囤积在柱床中,会在透射检测器处产生噪音。
更换液相色谱柱的流动相时需要小心,因为对于一些化学品来说,即使是微量的杂质也会对结果产生影响。
如果发现柱床粘住或困住,不应使用力量来拉动柱子,而应该使用相反方向的流动相,以使样品回到某一个位置,并反向流动一会,这样可以避免样品损坏柱子床。
二、液相色谱柱的维护保养液相色谱分析的成功与否,除了预备工作和分析过程外,还与样品的制备、取样位置以及样品进入液相色谱柱中的流动相的条件等因素有关。
因此,经常做好液相色谱柱的保养工作,可以有效防止柱子损坏,延长其寿命并保证实验结果的准确。
液相色谱柱使用说明
液相色谱柱使用说明液相色谱柱是一种常见的色谱技术应用于分离和分析化合物的工具。
本文将为您详细介绍液相色谱柱的使用说明,包括如何选择合适的柱子、柱子的安装步骤、样品的准备和加载、柱子的使用注意事项以及柱子的保养和储存方法。
1.选择合适的液相色谱柱在选择液相色谱柱之前,需要考虑以下几个因素:-样品的性质和分离要求:不同的柱子对不同性质的化合物有着不同的分离效果。
根据样品的极性、大小和稳定性等因素,选择合适的柱子(例如反相柱、正相柱、离子交换柱等)。
-流动相的选择:根据样品溶解度和分离要求,选择合适的流动相(溶剂、缓冲液等)。
2.液相色谱柱的安装步骤-将柱床冲洗干净:使用纯溶剂(如甲醇、乙醇等)反复冲洗柱床,直至流出的溶液无色透明。
-将液相色谱柱连接至色谱仪:在连接针嘴前,先用一根塑料贴纸封住柱子的两端,然后将针嘴旋入液相色谱柱的出口。
-将柱子连接到色谱仪:将柱子放入色谱仪的支架上,并确保柱子的连接口与色谱仪的进样器连接正确。
3.样品的准备和加载-样品的准备:将样品溶解在适当的溶剂中,使其达到合适的浓度,并在必要时进行过滤或稀释。
-样品的加载:使用自动进样器或手动进样器,将样品加载到液相色谱柱中。
避免过量的样品装载和过高的进样速度。
确保样品溶液完全进入柱子,并记录样品加载的详细信息。
4.液相色谱柱的使用注意事项-避免干涸:始终保持柱子中的液相色谱柱湿润,避免出现干涸和损坏的情况。
在使用完毕后,必要时用合适的溶剂进行洗脱,然后用空气或氮气进行保护。
-遵循柱子的使用范围:柱子通常有推荐的温度和压力范围。
超出这些范围可能会导致柱子性能下降或甚至损坏。
-避免高浓度的盐类溶液:高浓度的盐类溶液可能对柱子产生不良影响,导致柱子的损坏或压力升高。
5.液相色谱柱的保养和储存方法-定期清洗:根据使用频率,定期清洗液相色谱柱。
使用纯溶剂进行冲洗,以去除残留的样品和杂质。
-保持柱子湿润:柱子在存储期间应保持湿润。
用合适的溶剂进行洗脱,并用盖子密封柱子的两端,以避免柱床干燥。
thoermo acclaim trinity p1色谱柱说明书
Thermo Acclaim Trinity P1色谱柱是一种高性能的液相色谱柱,适用于多种分析应用,包括药物分析、环境分析、食品安全和临床分析等。
以下是Thermo Acclaim Trinity P1色谱柱的一般使用说明,具体操作可能需要根据实际应用和仪器配置进行调整。
一、色谱柱基本特性- 色谱柱类型:液相色谱柱- 填料类型:高纯度硅胶基质的键合相- 适用范围:适用于多种有机化合物的分离和分析- pH范围:通常适用于pH 1-8的溶液- 温度范围:通常适用于室温至60°C的温度范围内二、安装和连接- 在使用前,请确保色谱柱已经正确安装并与其他液相色谱系统组件(如进样器、泵、检测器等)正确连接。
- 根据色谱柱的接口类型(如LC-10、LC-20等),选择合适的连接件进行连接。
- 确保连接无泄漏,并按照仪器制造商的指南进行操作。
三、色谱柱平衡和校准- 在首次使用色谱柱之前,需要进行平衡和校准。
通常,使用纯水或适当的流动相冲洗色谱柱至少30分钟,直到基线稳定。
- 在每次分析之前,使用适当的流动相平衡色谱柱至少15分钟。
四、流动相选择- 根据分析物的性质和分离需求选择合适的流动相。
流动相通常由有机溶剂(如甲醇、乙腈、四氢呋喃等)和水组成,可能还需要添加酸、碱或盐以调节pH值和离子强度。
- 流动相的pH值应在色谱柱的适用范围内。
五、样品准备和进样- 样品应先进行适当的前处理,如过滤、稀释等,以确保样品不会污染色谱柱或影响分析结果。
- 进样量应根据色谱柱的容量和分析物的浓度进行调整。
避免过量的样品进入色谱柱,以免影响分离效果。
六、色谱柱的清洗和维护- 分析完成后,使用适当的流动相清洗色谱柱,以去除残留的样品和溶剂。
- 定期更换色谱柱的过滤器和密封件,以保持色谱柱的性能和延长其使用寿命。
- 避免将色谱柱暴露在极端温度、湿度或化学腐蚀性物质中。
七、注意事项- 使用过程中,避免色谱柱受到机械冲击或过度弯曲。
液相色谱仪柱温控制说明书
液相色谱仪柱温控制说明书一、介绍液相色谱仪柱温控制是现代液相色谱仪中常见的功能之一。
本说明书将详细介绍液相色谱仪柱温控制的原理、操作方法以及注意事项,帮助用户正确使用和维护色谱仪。
二、原理柱温控制是通过加热或冷却色谱柱来控制柱温。
在液相色谱分析中,柱温的稳定对保证分析的准确性和重复性非常重要。
柱温控制可以提高样品的分离度,缩短分析时间,并减少色谱图的峰宽。
三、操作方法1. 打开液相色谱仪的控制软件,在指定位置选择"柱温控制";2. 设置目标温度:根据分析方法要求或实验需要,设置柱温的目标温度。
注意,柱温应在柱的允许温度范围内设置;3. 开启柱温控制:点击"开启"按钮,系统将自动调节柱温,使其稳定在目标温度;4. 关闭柱温控制:实验结束后,点击"关闭"按钮,停止柱温控制功能。
四、注意事项1. 柱温应根据实际需要进行调节,但应在柱的允许温度范围内操作;2. 当更换柱子时,应等待柱子达到室温后再进行操作;3. 柱温控制应在样品进样、分析等操作之前完成;4. 高温操作时,要注意防止烫伤,避免直接接触热表面;5. 液相色谱仪的柱温控制功能需要与温度传感器配合使用,确保温度的准确测量和控制;6. 长时间高温操作可能会使柱子老化、退化,建议定期更换柱子。
五、维护保养1. 在关闭柱温控制功能后,应断开电源,并等待柱子冷却后再取下或更换;2. 清洗和保养柱子时,应根据柱子的要求和操作手册进行操作;3. 定期检查和校准温度传感器,确保温度的准确性;4. 柱子存放时,应放置在干燥、通风的环境中,避免受到湿气或灰尘的影响;5. 如发现柱子老化、退化或异常情况,应立即更换柱子。
六、总结液相色谱仪柱温控制是现代液相色谱仪中的重要功能之一,通过控制柱温可以提高分析结果的准确性和重复性。
本说明书详细介绍了柱温控制的原理、操作方法和注意事项,希望能对用户正确使用液相色谱仪柱温控制功能起到指导作用。
液相色谱柱安装与使用说明
液相色谱柱安装与使用说明1.准备工作:事先准备好所需的色谱柱和色谱条件,选择适当的流动相和检测方法。
2.检查色谱柱:检查色谱柱的包装是否完好,确认柱头和底部不受损。
查看柱子的规格型号和有效期,确保符合实验要求。
3.柱连接:将色谱柱与液相色谱仪的柱接口相连接。
柱接口通常有螺纹接口和快速连接接口,按照仪器的要求选择合适的接口。
4.柱连接密封:使用适当的柱接口垫片来保证柱与柱接口之间的严密密封,以防止漏液和杂质污染。
5.流动相装填:根据实验需求选择合适的流动相,并根据仪器的要求装填到流动相贮箱中。
6. 流速设置:根据实验要求设置合适的流速,一般应在0.5-2.0mL/min的范围内。
7.初始温度设置:根据样品的性质和分析方法,选择合适的柱温度,并进行预热。
柱温度对于保证分离效果和保护液相色谱柱起到关键作用。
1.不要轻易触摸色谱柱的柱头和底部,以免造成污染或损坏。
2.在使用液相色谱柱之前,应用流动相洗涤柱子,以去除悬浮在柱子内的杂质和残留物。
3.色谱柱在长时间使用后会产生杂质沉积,应定期进行反向冲洗和再生。
4.柱温度的设置应根据样品的性质和方法进行优化,一般来说,越高的温度有助于加快分析速度,但也可能导致分离效果下降。
5.不同的流动相和检测方法可能对色谱柱造成不同程度的腐蚀和损害,需要根据实验要求选择合适的条件。
6.注意保持流动相的纯净度,避免使用未经过滤的溶剂。
7.使用完毕后,及时将色谱柱和流动相贮箱进行清洗和保存,以免柱子受到污染和损坏。
总结:液相色谱柱的正确安装和使用对于保证分析结果的准确性和重现性非常重要。
在安装液相色谱柱之前,必须仔细检查柱子的包装和品质,保证柱子的完好和有效期。
在使用过程中,要注意保持良好的实验操作和仪器维护,定期进行柱子的清洗和再生。
通过正确的安装和使用,可以有效延长柱子的使用寿命,保持分析结果的稳定性和准确性。
博纳艾杰尔色谱柱
2、正相色谱柱的再生: 正相色谱柱用以下溶剂至少各50mL冲洗色谱柱(分析柱) 50%甲醇+50%三氯甲烷→100%乙酸乙酯 除有另有特别说明,博纳艾杰尔科技的液相色谱柱在柱头发生堵塞时可以低流速反冲。
博纳艾杰尔科技液相色谱柱产品服务指南
一 色谱柱的选择 如果您需要选择色谱柱或开发新的分析方法,请进入,于“资料”-“下载专区”处,下载《方法开发申请
色谱柱经过一段时间的使用,会出现柱压升高,柱效下降,一种可能是烧结滤片被堵塞;另一种可能是大分子进入柱内,使
Proteonavi 高效液相色谱柱使用说明书
Proteonavi高效液相色谱柱使用说明书在此,非常感谢您选购我公司的Proteonavi色谱柱。
Proteonavi是采用在多孔球形硅胶填料表面键合丁基(C4)的高性能蛋白质·多肽分析专用色谱柱。
该填料既具有硅胶类填料的高分离能力和耐压性,又具有耐酸性、抑制蛋白质的吸附等特长。
为了能够长期且稳定地使用Proteonavi色谱柱,请在熟读该使用说明书后进行正确使用。
1.色谱柱的使用1.强烈撞击可能会造成色谱柱劣化,请小心谨慎使用。
2.请在压力指示为0时进行色谱柱的安装和拆卸。
3.色谱柱最大使用压为20MPa。
2. 色谱柱的安装1.色谱柱的接头使用了外径1/16英寸配管的螺头(MALE NUT)。
请确保装置的配管接头正确连接,并且锥箍的顶端已插入接头内侧(参照图1)。
2.安装色谱柱之前,请将装置配管内的液体置换成所用的流动相。
※请确认色谱柱出厂时的溶剂(记录在色谱柱附带的报告中),并注意盐析现象等。
3.请按照色谱柱标签上的箭头方向来安装色谱柱。
3.分析3-1流动相1.可用流动相的种类与一般化学键合型硅胶类色谱柱中所使用的流动相相同。
2.Proteonavi的可用pH范围为2~10。
可用pH范围是以保留时间和理论塔板数不会提早减少为评价基准的。
为防止色谱柱的早期劣化,请注意流动相的pH不要超过上述范围。
如果pH发生大幅度的变化,会引起重现性变差、色谱柱提前劣化等问题。
在有机溶剂含量少、色谱柱温度高等条件下,耐酸耐碱性能会降低。
3.请过滤(0.45μm以下滤膜)流动相去除杂质后再进行充分脱气。
4.为防止由异物导致的色谱柱入口处过滤筛板堵塞,建议使用线上过滤器。
5.新色谱柱使用色谱柱报告中标示的流动相封存。
若要置换成含无机盐的流动相,请注意置换程序,不要造成盐析出。
6.使用含有离子对试剂等表面活性剂的流动相,色谱柱的寿命会变短。
7.使用100%水相作为流动相时,根据条件不同,可能会出现寿命极度缩短的情况。
OSAKA SODA CAPCELL PAK SCX液相色谱柱说明书(原资生堂)
CAPCELL PAK SCX色谱柱使用说明书在此,非常感谢您选购我公司的聚合物包被型CAPCELL PAK SCX色谱柱。
CAPCELL PAK SCX 是采用在多孔球形硅胶填料表面包覆单层有机硅聚合物薄膜,进而在其上键合磺酸基的色谱柱。
该填料既具有硅胶类填料的高分离性能和耐压性,又具有聚合物填料的耐久性,是结合了这些优点的、有划时代意义的填料。
物性值如下表所示。
官能团孔径粒径比表面积2C% 密度2pH范围耐压USP为了能够长期且稳定地使用色谱柱,请在熟读该使用说明书后进行正确使用。
1.色谱柱的启用每一根色谱柱在出厂前,都经过了严格的出厂测试,只有满足出厂标准方可出售。
每一根CAPCELL PAK SCX系列色谱柱的柱盒内均含有色谱柱的性能测试报告。
性能测试报告包含了色谱柱柱号,色谱柱规格,填料批次号,理论塔板数和所用的测试条件。
为了保证色谱柱的正常使用,建议在使用前检查以下事项:1.检查色谱柱包装盒是否完整,有无拆封和碰撞痕迹。
2.色谱柱标签是否与包装上的柱号、柱型相符,色谱柱两端堵头是否完整。
3.色谱柱包装盒内是否有色谱柱性能测试报告。
2.色谱柱的安装2.1安装色谱柱之前,请使用不含有缓冲盐、强酸或强碱的流动相对液相色谱系统进行冲洗置换。
2.2为尽量减少死体积,色谱柱的接头使用了外径1/16英寸配管的螺头(MALE NUT)。
请确保装置的配管接头正确连接,并且锥箍的顶端已插入接头内侧(参照图1)。
若配管不匹配,特别是直接使用其他类型色谱柱所用配管时,锥箍前端的配管长度(图1中的V)与色谱柱尾端接头的长度(图1中的L)经常会不同,因而引发故障。
若L>V,会产生死体积,甚至出现色谱峰展宽或拖尾现象,并且分离变差。
若L<V,由于锥箍无法密封,所以会导致漏液。
※频繁更换色谱柱,可能会导致螺头的锥箍损坏而发生漏液现象。
这种情况下若进一步拧紧,螺母的头部可能会发生断裂。
图1 色谱柱安装示意图2.3新色谱柱的保存液请参看色谱柱的性能测试报告,SCX色谱柱为纯乙腈。
behc8色谱柱使用说明
behc8色谱柱使用说明摘要:一、色谱柱简介1.色谱柱的作用2.beHC8 色谱柱的特点二、色谱柱使用前的准备1.检查色谱柱包装及外观2.色谱柱的安装3.色谱柱的平衡三、色谱柱使用过程中的注意事项1.流动相的选择与配制2.样品处理3.色谱柱的清洗与保养四、色谱柱使用后的处理1.色谱柱的拆卸2.色谱柱的清洗与保存正文:色谱柱是一种在色谱分析过程中用于分离和检测化合物的装置,对于保证分析结果的准确性和重复性具有重要作用。
其中,beHC8 色谱柱是一种广泛应用于液相色谱分析的色谱柱,具有良好的分离效果和稳定性。
在开始使用beHC8 色谱柱之前,需要对其进行检查以确保其质量和完整性。
首先,需要检查色谱柱包装是否完好,无破损,并确认色谱柱外观无明显划痕、杂质等不良现象。
然后,按照安装说明正确安装色谱柱,注意不要使用过大的力量以免损坏色谱柱。
安装完成后,需要进行色谱柱的平衡,以去除流动相中的气泡和柱内残余的空气,确保色谱柱内部充满流动相。
在色谱柱使用过程中,需要注意以下几点:1.流动相的选择与配制:根据样品性质和分析要求选择合适的流动相,注意流动相的配制比例和pH 值。
2.样品处理:确保样品均匀、稳定,避免样品的降解和吸附。
3.色谱柱的清洗与保养:定期清洗色谱柱,去除柱内的残留物和污染,以保持柱子的分离效果和使用寿命。
使用完毕后,需要正确拆卸色谱柱,将色谱柱从仪器上取下,并使用适当的溶剂进行清洗。
清洗后的色谱柱应垂直放置,并储存在干燥、阴凉的地方,避免阳光直射和高温环境。
总之,正确使用和维护beHC8 色谱柱对于保证液相色谱分析结果的准确性和重复性至关重要。
液相色谱柱的使用注意事项及再生
液相色谱柱的使用注意事项及再生1、色谱柱的使用说明:(1)、色谱柱使用前注意事项:色谱柱的储存液无特殊说明,均为评价报告所示的流动相。
在使用前,一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。
在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出,堵塞色谱柱。
(2)、流动相:流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯,配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。
如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好,尤其是含盐的流动相。
另外,装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。
以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0,BDS C18适合于碱性化合物,PH值适用范围为2.0-10.0。
当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时,每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗,并完全置换掉原来所使用的流动相。
(3)、样品:样品也要尽可能清洁,可选用样品过滤器或样品预处理柱(SPE)对样品进行预处理;若样品不便处理,要使用保护柱。
在用正相色谱法分析样品时,所有的溶剂和样品应严格脱水。
2、色谱柱的保存(1)、反相色谱柱每天实验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。
注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
(2)、长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。
对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。
储存的温度最好是室温。
3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说可能是柱效下降。
色谱柱的安装,设置,老化和维护
色谱柱的安装,设置,老化和维护液相色谱柱的使用方法:1、色谱柱的使用说明:(1)、色谱柱使用前注意事项:色谱柱的储存液无特殊说明,均为评价报告所示的流动相。
在使用前,一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。
在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出,堵塞色谱柱。
(2)、流动相:流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯,配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。
如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好,尤其是含盐的流动相。
另外,装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。
以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0,BDS C18适合于碱性化合物,PH值适用范围为2.0-10.0。
当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时,每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗,并完全置换掉原来所使用的流动相。
(3)、样品:样品也要尽可能清洁,可选用样品过滤器或样品预处理柱(SPE)对样品进行预处理;若样品不便处理,要使用保护柱。
在用正相色谱法分析样品时,所有的溶剂和样品应严格脱水。
2、色谱柱的保存(1)、反相色谱柱每天实验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。
注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
(2)、长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。
对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。
储存的温度最好是室温。
3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说可能是柱效下降。
waters xbridge protein beh色谱柱使用说明
waters xbridge protein beh色谱柱使用说明一、引言Waters XBridge Protein BEH色谱柱是一种用于分离和纯化蛋白质的高效液相色谱柱。
本文将详细介绍该色谱柱的使用方法,并说明如何充填和平衡柱子,以及优化分离条件和储存建议。
二、色谱柱的充填与平衡1. 初始准备在充填色谱柱之前,需确认柱子和其他设备已进行有效的清洗和消毒。
请确保所有操作都在洁净和无尘的实验环境中进行。
2. 色谱柱的底部连接将色谱柱的底部与液相色谱系统连接,确保连接紧密无漏。
确认柱子与系统的兼容性以及接口的完整性。
3. 柱子的充填使用适当的方法将柱子充填物均匀地充入色谱柱中。
充填时要小心谨慎,以避免产生气泡或不均匀的充填物分布。
4. 床高检查充填完成后,使用适当的工具测量柱子的床高。
确保床高符合规定,并进行必要的校正。
5. 柱子的平衡连接柱子至液相色谱系统,使用流动相进行柱子的平衡。
按照柱子说明书中的建议流速和平衡时间进行操作。
确保柱子完全平衡以获得稳定和可重复的色谱分离结果。
三、优化分离条件1. 流动相配制根据待分离蛋白质的性质和需求,选择合适的流动相。
通常包括溶剂体系、添加剂和缓冲剂的选择。
确保流动相的配制和pH值调整符合实验要求。
2. 流速优化通过改变流速来优化对待分离蛋白质的分离度和分离时间。
一般来说,较高的流速可提高分离速度,但可能会牺牲分离的分辨率。
根据实际需要进行适当的调整。
3. 温度控制对于某些蛋白质的分离,温度的调控也是必要的。
根据实验要求,选择适当的工作温度和温度控制方法。
4. 采集条件根据分析和应用的不同,选择适当的采集条件来获取所需的色谱峰。
根据具体实验目的,灵活选择分析和监测方法。
四、储存建议1. 柱子的保养每次使用后,根据色谱柱说明书中的建议进行柱子的保养和清洁。
遵循正确的操作规程,确保柱子处于最佳状态。
2. 储存条件当柱子不使用时,将其储存在干燥、阴凉和无尘的环境中。
常用液相色谱柱使用与维护保养
常用液相色谱柱使用与维护保养液相色谱柱是分离和分析中常用的仪器配件之一,它的使用和维护保养对于实验结果的准确性和可靠性有着至关重要的作用。
本文将介绍常用液相色谱柱的使用和维护保养方法。
一、液相色谱柱的使用方法1.准备工作:在使用前,需要对液相色谱柱进行准备工作。
首先,检查柱的外观是否完好无损,如果发现任何损坏或污染,应立即更换。
其次,检查柱装置是否牢固,连接是否紧密。
最后,将固定相和移动相装入柱中,确保固定相充分均匀地填充在柱内。
2.柱的条件调节:根据实验需要,调节液相色谱柱的柱温、流速和柱压等参数。
在调节柱温时,应注意避免温度过高或过低对柱的损害。
调节流速时,应根据样品性质和分离效果选择合适的流速。
控制柱压时,要确保柱内压力稳定在可接受范围内,避免超过柱的承压能力。
3.样品进样:将待测样品注入进样口或进样器中,注意避免空气进入柱,避免对柱的污染。
可以选择外部进样或直接进样的方法,具体方法根据实验要求和样品性质进行选择。
4.运行柱:在启动液相色谱仪前,先将柱进行预冲洗。
预洗液可以选择与移动相相同的溶剂。
启动液相色谱仪后,根据实验要求设定好运行条件,开始进行实验。
在实验过程中,要及时观察色谱图的变化,根据实验需要调节柱温、流速等参数。
5.柱的保存:在柱使用完毕后,将固定相充分冲洗干净,保证柱内固定相的干燥和保存。
然后,将柱装入保护柱架中,避免碰撞和损坏。
柱的保管环境要保持清洁、干燥、避光和稳定的温度。
二、液相色谱柱的维护保养方法1.柱的清洗:在使用液相色谱柱之前,需要先清洗柱以去除可能存在的污染物。
清洗方法包括预洗和后洗。
预洗可以选择与移动相相同的溶剂,将溶剂通过柱时,将固定相表面的杂质冲洗掉。
后洗可以选择与前一个样品不同的溶剂,将固定相和样品残留物进行清洗。
2.避免柱的干燥:柱在使用过程中,应尽量避免柱的干燥,因为柱的干燥会对固定相造成损害。
在柱停用时,应及时用溶剂进行冲洗并封存起来,以保持柱内的湿润状态。
液相色谱柱的使用及再生
液相色谱柱的使用及再生一、液相色谱柱的使用方法1.准备工作:在使用液相色谱柱之前,需要先进行柱前洗涤。
首先,将色谱柱和相关装置安装到系统中,并连接好进样器。
然后,使用纯溶剂通过色谱柱,将柱内的固定相洗涤干净。
这可用于去除残留的杂质和吸附在固定相上的杂质。
2.样品进样:将待分析样品溶解在合适的溶剂中,通过自动进样器或手动进样器将样品进样到柱中。
在进样过程中,要保证样品与液相色谱柱内的固定相充分接触,以获取准确的分析结果。
3.溶剂梯度:对于复杂的样品混合物,通常需要使用溶剂梯度来实现目标物质的分离。
溶剂梯度可以通过改变溶剂的组成比例或流速来实现。
在液相色谱仪中,可以使用梯度装置来实现自动的溶剂梯度。
4.分析条件控制:在进行液相色谱分析时,需要根据目标物质的特性来选择合适的分析条件,如流速、温度、检测器类型等。
这些条件将直接影响分析结果的准确性和重复性。
5.数据分析和解释:分析结束后,可以通过数据处理软件对所得数据进行处理和解释。
常见的数据处理方法包括峰面积计算、质量浓度计算、波长选择等。
二、液相色谱柱的再生技术1.清洗:随着柱使用时间的增加,固定相表面可能会积累附着物质,影响分离效果。
这时可以使用一些溶剂来清洗柱。
选择的清洗溶剂应该与分析柱内的固定相相溶,但不会溶解固定相。
常用的清洗溶剂包括醇类、有机溶剂和酸碱溶液等。
清洗过程中要保持流速适中,以充分冲洗柱内的固定相。
2.修饰:一些情况下,固定相表面可能出现活性减弱的情况,导致分离能力下降。
这时可以使用修饰剂来修复柱的活性。
修饰剂通常是一种能与固定相反应的化学物质,可以局部刷新固定相表面,恢复柱的活性。
3.再生:当固定相活性无法恢复,或者由于固定相老化等原因,完全更换液相色谱柱是常见的再生方法。
再生过程包括柱前洗涤、柱后洗涤、柱填充等多个步骤,需要根据具体柱的特性和使用情况来进行。
总结:液相色谱柱的使用方法和再生技术对于液相色谱分析的准确性和重复性具有重要意义。
液相色谱柱的使用注意事项及再生
液相色谱柱的使用注意事项及再生1、色谱柱的使用说明:(1)色谱柱使用前注意事项:色谱柱的储存液无特殊说明,均为评价报告所示的流动相。
在使用前,一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。
在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出,堵塞色谱柱。
(2)流动相:流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯,配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。
如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好,尤其是含盐的流动相。
另外,装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。
以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0,BDS C18适合于碱性化合物,PH值适用范围为2.0-10.0。
当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时,每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗,并完全置换掉原来所使用的流动相。
(3)样品:样品也要尽可能清洁,可选用样品过滤器或样品预处理柱(SPE)对样品进行预处理;若样品不便处理,要使用保护柱。
在用正相色谱法分析样品时,所有的溶剂和样品应严格脱水。
2、色谱柱的保存(1)反相色谱柱每天实验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。
注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
(2)长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。
对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。
储存的温度最好是室温。
3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说可能是柱效下降。
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液相色谱柱使用说明科瑞公司以其高品质填料结合高水平填装技术为广大用户提供性能优良、价格合理的高效液相色谱柱。
多年以来科瑞公司资深专家针对传统气动装柱机脉冲大的弱点研制出以端面凸轮大流量泵为主体的装柱机,其脉冲小、压力高的优点必然使科瑞色谱柱具有柱床均匀,柱效高、分离度好和对称性佳的特点。
我们拥有各种规格柱,从常规分析到半制备/制备柱,还有窄径快速分析柱,如需要特殊规格还可以根据用户的要求专门订做,我们的宗旨是:尽全力服务于用户,用户的支持与信任是我们得以发展的根本。
科瑞HPLC色谱柱是通用型、高惰性的C18 、C8柱,可同时分离酸、碱和中性化合物,峰形尖锐而对称,选择性良好,严格保证的柱间和批间重现性,实现从方法开发到常规分析的无缝转移。
当今分析化学的领域,色谱分析占据了半壁江山,尤其是在药物分析方面更是如此。
例如《中国药典》2005年版二部收载的药物已有近43.1%的药品质量标准不同程度的采用了高效液相色谱分析方法。
尤其是复方制剂、杂质或辅料干扰因素多的品种多采用高效液相色谱法。
应该指出的是与欧美国家占主流的化学制药不同,中国的制药产业一直由传统中药和现代西药组成。
因此在中国,对作为药物分析的有力手段的HPLC色谱柱,提出了更高的要求:一方面要满足中药复杂成分的分离;另一方面能够分离西药中各种酸性和碱性化合物。
2005版的《中国药典》一部也大量增加了HPLC含量测定的品种,达479种,约占41.8%。
面对法规的需要和竞争日趋激烈的药物市场,科瑞公司从广大用户的利益出发,适时推出了物美价廉的高效液相色谱柱,以满足这样一种市场的需求。
科瑞色谱柱适合分离各种中药和西药。
同时具备良好的重现性和耐用性,科瑞色谱柱必将以其较高的性能价格比和良好的技术支持深受广大用户的欢迎。
液相色谱柱的安装:1、液相色谱柱的结构:空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。
在两端柱接头内,柱管两端各放置一片不锈钢滤片(或滤网),用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。
空柱各组件均为316#不锈钢材质,能耐受一般的溶剂作用。
但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性,故使用时要注意,柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂,以避免腐蚀。
2、色谱柱的安装:a、拆开柱包装盒,确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。
b、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。
c、按柱管上标示的流动相流向,将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如条件允许,建议在柱前使用保护柱);柱的出口与检测器连接。
连接管是外径为1.57mm、内径为0.1-0.3mm的不锈钢管。
在接管时一定要设法降低柱外死体积。
连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底,然后顺时针拧紧空心螺钉,直到拧不动为止,切记不要用力过大。
如色谱柱通过流动相加压后有漏液现象,请用扳手继续顺时针拧1/4圈,直至不漏液为止。
液相色谱柱的使用:色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。
但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。
高效液相色谱柱的选择现代高效液相色谱中,分离效果好坏的一个重要指标是色谱填料的选择。
但是目前市场上有多种色谱填料可供选择,因此就必须对此有一定的认识和了解。
一、硅胶基质填料1、正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团,如胺基和氰基的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基或其他极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如正已烷,氯仿,二氯甲烷等。
2、反向色谱反向色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合极性相对较弱的官能团。
反向色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出,而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反向填料有:C18、C8、C4等。
二、聚合物填料聚合物填料多为聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂等,其重要优点是在PH值为1~14均可使用。
相对于硅胶基质的C18填料,这类填料具有更强的疏水性;大孔的聚合物对蛋白质等样品的分离非常有效。
现有的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效较低。
三、其它无机填料其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化由于其特殊的性质,一般仅限于特殊的用途。
如,石墨化碳黑正逐渐成为反向色谱柱填料。
这种填料的分离不同于硅胶基质烷基键合相,石墨化碳黑的表面即是保留的基础,不再需其它的表面改性。
该柱填料一般比烷基键合相硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强。
石墨化碳黑可用于分离某些几何异构体,由于在HPLC流动相中不会被溶解,这类柱可在任何PH与温度下使用。
氧化铝也可以用于HPLC。
氧化铝微粒刚性强,可制成稳定的色谱柱柱床,其优点是可以在PH高达12的流动相中使用。
但由于氧化铝与碱性化合物的作用也很强,应用范围受到一定限制,所以未能广泛应用。
新型色谱氧化锆基质填料也可用于HPLC。
商品化的只有聚合物涂层的多孔氧化锆微球色谱柱,应用PH1-14,温度可达100℃。
由于氧化锆填料是最近几年才开始研究,加之面临的实验难度,其重要用途与优势尚在进行之中。
目前,商品化的色谱填料粒度从1um到超过30um均有销售,而目前分析分离主要用3和5um填料。
填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。
粒度越小,柱压越大,柱压的增加限制了粒度小于3 um的填料应用。
在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是唯一的因素。
如果固定相选择是正确,但是分离度不够,那么选用更小的粒度的填料是很有用的。
3um填料填充柱的柱效比相同条件下的5u m填料的柱效提高近30%;然而,3um的色谱柱的背压却是5um的2倍。
与此同时,柱效提高意味着在相同条件下可以选用更短的色谱柱,即相同的塔板数或分离能力,但是柱长更短,以缩短分析时间。
另外,可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度,比如用乙腈代替甲醇,以降低色谱柱的压力。
如何选择保护柱?怎样选择保护柱,但又不影响分离分析?通常,在选择保护柱之前首先要考虑的是样品是否清洁,对于大部分分析工作者来说,一只1cm长的保护柱便能提供充分的保护作用。
但是,如果样品非常不清洁,或工作中发现经常要更换1cm的保护柱,那么就应该选用2cm或3cm的保护柱,保护柱越长自然所装填的色谱填料就越多,则其保护性能越好,当然随着保护柱长度的增加,样品的保留时间也相应增加,一般来说,保护柱的内径与分析色谱柱的内径相同或相当即可。
另一种保护柱结构其实质是缩短了色谱分析柱,设计方式上有直连式/手紧式或整体式。
整体式设计是由色谱柱的生产厂商直接安装在色谱分析柱上的,必须与色谱分析柱一同订货,可以非常方便的使用,但不能被修改。
直连式结构设计可以在任何时候由色谱工作者来安装连接,可以与任何品牌的色谱柱连接使用,而且可以根据不同的样品选择合适的保护柱长度。
手紧式保护柱从结构上讲是与直连式保护柱一样,只是在连接时不用借助扳手等工具,直接用手上紧即可。
另外从保护柱结构的角度看,保护柱结构又分为是否可以更换保护柱柱芯。
现在大多数的保护柱均可以更换柱芯,可以降低保护柱的使用成本。
大多数人是根据色谱分析柱的填料来选择保护柱的填料,正常情况下可以选择与分析色谱柱一样的色谱填料。
但是,根据实际的分析工作,也可不必与分析色谱柱的填料完全匹配。
对于选择保护柱的原则是:在满足分离分析要求的前提条件下,尽可能的选择较短的保护柱,尽可能选择对分离样品小一些保留性的填料。
色谱柱使用中的常见问题1、色谱柱中的流动相是否会排干不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形:不慎未及时补充流动相,泵将溶剂瓶中的流动相吸干了,HPLC系统由此而停止工作了。
如此情况是否会损坏色谱柱?泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了?色谱柱还能使用吗?事实上,如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干,并不会造成色谱柱的损坏。
即使泵中充满了空气,泵也不会将空气排入色谱柱。
因为泵只能输送液体,而不能输送空气。
相比之下,另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。
同样,整个色谱柱干涸的情况不太容易发生,多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了,因挥发掉所有溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。
即使色谱柱真的变干了,也不一定就不可救药了。
可以尝试用一种完全脱气的、表面张力低的溶剂(如经氦气脱气的甲醇)冲洗色谱柱以除去气体。
较低的表面张力有助于浸润填料表面;已脱气的溶剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。
色谱柱大约需要(以1mL/min的流速)冲一个小时或更多的时间被彻底浸润,恢复到正常状态。
2、使用PEEK(polyetheretherketone)管路和接头需要注意什么问题如果经常需要改变流路或更换不同品牌的色谱柱,使用PEEK材料制成的管路和接头会非常方便。
PEE K管路容易连接;PEEK接头不仅无需工具,手拧即可固定,而且容易调节锥箍之外的管路长度,方便与不同品牌或规格的色谱柱相连接。
使用此类材料的管路需要注意的是:PEEK对卤代烷烃和四氢呋喃的兼容性不好。
虽然未观察到上述溶剂溶解PEEK材料的明显迹象,但PEEK遇到上述溶剂会变脆。
另一个西药考虑的因素是压力限。
不锈钢管可耐受6000psi的压力,但PEEK管只能耐受近4000psi(但多数HPLC应用系统压力不会超过3000psi)。
使用PEEK接头时则无需担心接头耐溶剂性能,因为接头几乎或很少与溶剂直接接触。
但手拧固定的PEEK接头压力限低于不锈钢管,因而压力太高时,可能会使接头在管路上滑动而产生死体积或漏液。
3、色谱柱的平衡时间如果我们观察到保留时间漂移,首先应考虑色谱柱是否已用流动相完全平衡。
通常平衡需要10-20个柱体积的流动相,但如果在流动相中加入少量添加剂(如离子对试剂)则需要相当长的时间来平衡色谱柱。
流动相污染也可能是原因之一。
溶于流动相中的少量污染物可能慢慢富集到色谱柱上,从而造成保留时间的漂移。
应注意:水是很容易污染的流动相成分。
4、固定相稳定性固定相的稳定性都是有限的,即使在推荐的PH范围内使用,固定相也会慢慢水解。
例如,硅胶基质在p H4时水解稳定性最好。
水解速度与流动相类型和配体有关。
双官能团配体和三官能团配体比单官能团配体的键合相要稳定;长链键合相比短链键合相稳定;烷基键合相比氰基键合相稳定的多。
经常清洗色谱柱亦会加速色谱柱固定相的水解。
其他硅胶基质键合相在水溶液环境中也可以发生水解,如氨基键合相等。