PI_3K在H_2O_2诱导的PC12细胞凋亡中的作用
PI-3K转导通路在Ⅱ型糖尿病发病机制中作用的研究进展
Ⅱ型 糖 尿 病 （ ｙ ｅ２ Ｄ ａ ｅ ｌｔｓ Ｔ Ｄ Ｔ ｐ ｉ ｔ Ｍｅ ｉ ， ２ Ｍ） ｂｅ ｌｕ
Ｔ Ｄ 主要 的信 号转 导途 径有 三 条 ： 一 条是 磷 脂 ２Ｍ 第 酰肌 醇． 酶 （ Ｉ Ｋ） 路 ， 通 路 主 要 涉 及 糖 、 ３激 Ｐ． 通 ３ 该
是 一种 广泛 流行 的代谢 紊乱性 疾病 ， 目前 已成 为威
２ ｄ ａ ｅ ｅ ｌ ｔ ｓｉ ｅ ｉ ｗｅ ｙ ｄ ｓ ｕ ｓｎ ｈ ａｈｏ ｅ ｅ ｉ ｆｔ ｅ ｉ ｓ ｌ ｅ ｉｔ ｎ ｅ，ｈ ａ ｔｒａｆ ｃｉ ｇ Ｐ － ， ｉｂ ｔｓ ｍｅｌ ｕ ｓｒ ｖｅ ｄ ｂ ｉｃ ｓ ｉ ｇｔ ｅ ｐ ｔ ｇ ｎ ｓｓｏ ｈ ｎ ｕ ｉ ｒ ｓｓａ ｃ ｔ ｅ ｆｃ ｏ ｆｅ ｔｎ Ｉ３Ｋ ｉ ｎ
ｔａ ｓ ｃｉ ｎ， ｎ ｈ ｎ ｕ ｉ ｅ ｉｔｎ ｅ ｅ ｕ ｔｎ ｒｍ ｈ ｉｏ ｄ ｒ ｏ ｈ ｎｓ ｉ ｉｎ ｌｔａ ｓ ｕ ｔｏ ｔ ｗａ ｓ ｒ ｎ ｄｕ ｔｏ ａ ｄ ｔ ｅ ｉ ｓ ｌｎ ｒ ｓｓａ ｃ ｒｓ ｌｉ ｇ ｆｏ ｔ ｅ ｄ ｓ ｒ ｅ ｆｔ ｅ ｉ ｕｌ ｓｇ ａ ｒ ｎ ｄ ｃｉ ｎ ｐａｈ ｙ ｉ ｎ ｖ ｒ ｍｐ ｒａ ｔｉ ｈ ｒ ａｍｅ ｆｔｐｅ２ ｄ ａ ｅｅ ｌ ｔ ｓ Ｔｈ ｍｐ ｒａ ｔｒ ｌ ｆＰＩ３Ｋ ｎ ｔ ｅ ｐ ｔ ｏ ｅ ｅ ｉ ｆｔｐ ｅ ｙ ｉ ｏ ｔ ｎ ｎ ｔ ｅｔｅ ｔ ｎｔｏ ｙ ｉ ｂ ｔ ｓｍｅｌ ｕ ． ｅ ｉ ｏ ｎ ｏｅ ｏ － ｉ ｈ ａ ｈ ｇ ｎ ｓｓｏ ｅ ｉ ｔ ｙ
胁 人类 生命 的重 大公共 卫生 问题 之一 ． Ⅱ型糖 尿病
脂 肪 、 白质 的代 谢 ； 二 条 是 促 分 裂 原 活化 蛋 白 蛋 第 激 酶 （ Ｐ 通 路 ， 与 细 胞增 殖 分 化 相 关 ； 三 ＭＡ Ｋ） 其 第
H2O2诱导PC12细胞凋亡的作用机制
H2O2诱导PC12细胞凋亡的作用机制曲喜英;祝其锋【期刊名称】《中国药理通讯》【年(卷),期】2005(022)003【摘要】目的探讨H2O2诱导PC12细胞凋亡的作用机制。
方法用MTT比色法分析细胞存活率，Hoechst—PI荧光染色和流式细胞仪检测分析细胞凋亡情况；通过RT—PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测par-4、NF—KB、caspase-3基因表达水平的变化；用比色法检测Caspase-3相对活性。
结果（1）用终浓度分别为0～400nmol／L H2O2处理PC12细胞8h，随H2O2浓度从25～400nmol／l。
增加，PC12细胞存活率逐渐降低（P〈0．05）：【总页数】1页(P56)【作者】曲喜英;祝其锋【作者单位】广东医学院生物化学与分子生物学研究所,湛江524023【正文语种】中文【中图分类】R282.71【相关文献】1.生地黄水煎剂对H2O2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用研究 [J], 陆韵薇;于顾然;符布清2.红景天苷通过抑制NOX2-ROS-MAPKs信号途径保护H2O2诱导的PC12细胞凋亡 [J], 戚之琳;刘银华;齐世美;凌烈锋;冯遵永;李强3.酰化4-羟基查耳酮对H2O2诱导的PC12细胞凋亡的抗氧化保护作用及初步机制 [J], 王亚男;梁广;沈莱莱;王占坤;周嘉蓓;程婵婵;胡琼琼;方鹏程;仇佩虹;吴建章4.尼莫地平对H2O2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用 [J], 李辉然5.TLR4对H2O2诱导的PC12细胞凋亡及β-catenin、c-myc蛋白表达的影响[J], 陈南耀;余丹;陈晓东因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
过氧化氢诱导C_2C_12_细胞凋亡的机制初探
・论著・过氧化氢诱导C2C12细胞凋亡的机制初探Ξ肖卫民 蒋碧梅 石永忠 刘梅冬 唐道林 肖献忠(中南大学湘雅医学院病理生理学教研室,湖南 长沙 410078) [摘要]【目的】探讨氧化应激诱导小鼠胚胎肌原细胞株C2C12细胞凋亡的分子机制。
【方法】采用0.5mmol/L过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)作用于C2C12细胞;通过Hoechst荧光染色检测C2C12细胞凋亡,Caspase活性定量分析及Western2blot检测Caspase23,28,29活化情况,Western2blot及间接免疫荧光检测细胞色素C在细胞内的分布情况。
【结果】本实验发现H2O2能明显诱导C2C12细胞凋亡,同时Caspase23,28,29被激活,而细胞色素C从线粒体释放入胞浆。
【结论】氧化应激可通过同时激活线粒体通路与死亡受体通路导致C2C12细胞凋亡,这为临床防治凋亡相关的心血管疾病提供了新的信息。
[关键词] 脱噬作用; 过氧化氢; 小鼠Preliminary I nvestig ation on the Mech anism of C2C12C ell Apoptosis induced by H ydrogen Peroxide XIA O Wei2min, JIA N G Bi2mei, S HI Yong2zhong,et al(Department of Pathophysiology,Xiangya School ofMedicine,Central South University,Changsha410078,Hunan,China) [Abstract]【Objective】To investigate the molecular mechanism that a poptosis of mouse embryonic myogenic cellline C2C12cells was induced by oxidative stress.【Methods】Apoptosis of mouse C2C12cells was induced by exposure to0.5mmol/L hydrogen peroxide(H2O2)for different durations,and their a poptotic changes were detected byHoechst33258fluorescence staining.The activities of cas pase23,28,29were examined by caspase colorimetric as2say kit and Western2blotting.The intracellular distribution of cytochrome C and its release from mitochondria wereobserved by indirect immunofluorescence and Western2blotting.【Results】Exposure to0.5mmol/L H2O2for24hours markedly induced C2C12cell apoptosis as shown by Hoechst33258fluorescence staining.The activities of cas2pase23,28,29significantly increased after4hours of H2O2treatment,and reached their peaks at8～12hour.Therelease of cytochrome C from mitochondria to cytoplasm was detected after exposure to H2O2for1～2hours.【Con2clusions】Oxidative stress can induce apoptosis of C2C12cells through simultaneous activation of mitochondria anddeath receptor signal pathways.This result provides new information for clinical prophylaxis and treatment of apop2tosis related cardiovascular diseases. [K ey w ords] apoptosis; hydrogen peroxide; mice[中图分类号] R329.2 [文献标识码] A [文章编号] 167127171(2004)1121288204 心肌细胞凋亡在心肌缺血,心肌再灌注损伤等 [作者简介] 肖卫民(19712),男,湖南省辰溪县人,讲师,病理生理学博士研究生,主要从事心血管内源性保护的分子机制的研究。
卷柏总黄酮对H_2O_2所致PC12细胞损伤的保护作用
原则是扶 正祛邪 ，软坚消结 ，其 中熟附子补火助 阳、散寒 除湿为君 ， 韭子补肝 肾，暖腰膝 ，壮 阳固精为 臣，诸药合 用，有 温肾固精壮 阳之功 效 。③阴虚 火旺型。方 中熟地益髓填精 ，龟 甲潜 阳，二者共 为君药 ， 知母黄柏 ，滋阴凉金 ，清热泻火，共为臣药，诸药合用，有清热降 火 ，滋 阴填 精之功效。 ④湿热蕴结型 。方中革薜为君 ，有 利湿 ，分清 化浊之功效 ，茯苓益脾和 胃，利水渗 湿，为臣。诸药合用 ，有 利尿通 淋 ，清热解毒之功效。
综上 所述 ，中医在治疗 前列 腺 炎的研 究上 取得 了很大 的进 展 ， 特 别在 经方 、验方上 ，但在 今后 的临 床研究 上仍有 一些 亟待解 决 的 问题 ，如 思路 过为单 一 ，缺乏 同病 异 治思路 ；辨证 分型 缺乏量 化指 标 和 临界征候 指标 ；用药 剂型 单一 ，多为汤 剂 ，给长期 用药 患者 造 成 不便 等等 。因此 ，应对 前列腺 炎的 临床研 究做 适 当改 进 ，如制 定 全 国统 一的 中医辨证 及疗 效评定 标准 ，着重 总结辨 证论 治指 导下 的 系统 方药 ，开 发新 型品种 的 中药 ，拓展 异病 同治 思维 等等 ，只有这 样 ，才会提 高治疗 前列腺 炎 的疗效 ，为前 列腺 炎的 临床研 究提供 更 大的发展 空间。 参考 文献 ［１】 李 祖广 ，孙荣 生．前 列腺增 生 合 并前列腺 炎 患者 前列腺 液 中尿 酸
究 ，２０１１，９（１７）：６６． 【４］ 王德华，李畅．清热利湿逐瘀汤联合灌肠治疗慢性前列腺炎临床
胰岛素对MK801诱导PC12细胞凋亡的影响的开题报告
胰岛素对MK801诱导PC12细胞凋亡的影响的开题
报告
背景说明：
胰岛素是人体内一种重要的调节激素，可参与细胞的生长、代谢和
能量调节等许多生命过程。
而MK801则是NMDA受体拮抗剂，可以引起神经系统的异常反应，特别是可诱导神经元的细胞凋亡。
因此，研究胰
岛素对MK801诱导PC12细胞凋亡的影响，对于深入了解细胞死亡机制
以及神经退行性疾病的发生机理具有重要意义。
研究目的：
通过观察胰岛素在不同浓度和时间下的处理对MK801诱导PC12细
胞凋亡的影响，探究胰岛素在神经细胞凋亡过程中的作用机制。
研究方法：
利用PC12细胞，在MK801作用下建立细胞模型，针对不同的胰岛
素浓度和处理时间，对细胞的形态、生长情况及凋亡率进行观察和测定，同时对体内胰岛素与生长因子等相关蛋白的表达进行分析。
预期结果：
通过本次研究，预计可以发现胰岛素可以通过一定的机制、缓解
MK801对神经元的毒性作用，调节胰岛素/生长因子信号通路，从而减少细胞凋亡率，保护神经细胞的生长和再生。
研究结果可能对于深入探究
神经退行性疾病的发生机理和开发相关治疗策略具有一定参考价值。
PI3KAKT通路介导H_2O_2预处理减轻PC12细胞氧化损伤
2011年8月第31卷第8期基础医学与临床Basic ＆Clinical Medicine August 2011Vol．31No．8收稿日期：2010－08－31修回日期：2011－01－17基金项目：广州医学院博士启动基金（200922）；广州市教育局科研基金（10A178）*通信作者（corresponding author ）：fengjq －sums@163．com文章编号：1001-6325（2011）08-0894-06研究论文PI3K /AKT 通路介导H 2O 2预处理减轻PC12细胞氧化损伤张梅，李卫2，郭瑞鲜3，罗健东1，冯鉴强3*（1.广州医学院药理教研室，广东广州510082；2.暨南大学附属第一医院神经外科，广东广州510630；3.中山大学中山医学院生理教研室，广东广州510080）摘要：目的探讨PI3K /AKT 信号通路是否参与H 2O 2预处理诱导的适应性细胞保护作用。
方法体外培养PC12细胞，建立H 2O 2预处理对抗高浓度H 2O 2诱导细胞损伤的实验模型。
应用甲氮甲唑蓝（MTT ）法测定细胞的存活率，比色法测定乳酸脱氢酶（LDH ）的活性，碘化丙啶（PI ）染色流式细胞术检测细胞凋亡率，免疫印迹法（Western blot ）测定AKT 的表达。
结果100μmol H 2O 2预处理PC12细胞90min 可显著地抑制300μmol H 2O 2引起的损伤，使细胞存活率从50.2%ʃ4.6%升高至83.8%ʃ3.5%，LDH 活性由103%ʃ10.2%下降至68.5%ʃ5.3%，细胞凋亡率由65.5%ʃ4.1%下降至37.1%ʃ2.3%（P ＜0.01）。
100μmol H 2O 2预处理诱导p-AKT 的表达，PI3K 抑制剂ly294002阻断了H 2O 2预处理引起的p-AKT 表达。
同时ly294002拮抗了H 2O 2预处理诱导的抗细胞损伤和凋亡作用。
PI3K／Akt通路在芍药苷抗Aβ25—35诱导PC12细胞凋亡中的作用
PI3K／Akt通路在芍药苷抗Aβ25—35诱导PC12细胞凋亡中的作用目的：研究PI3K/Akt通路在芍药苷对PC12细胞神经保护中的作用。
方法：芍药苷组（5，10，20 μmol·L-1）预处理30 min，然后加入Aβ25-35（20 μmol·L-1）共同作用24 h；抑制剂LY294002（10 μmol·L-1）于芍药苷（10 μmol·L-1）作用前预处理30 min。
用MTT比色法检测细胞存活率，Annexin-V/PI双染检测细胞凋亡率，以及Western blot法检测p-Akt，Bax，Bcl-2，cleaved caspase-3蛋白表达。
结果：芍药苷可抑制Aβ25-35所诱导的PC12细胞毒性和凋亡，其保护作用可能是通过上调Akt磷酸化水平，增加Bcl-2蛋白表达、降低Bax蛋白表达、抑制caspase-3等的激活而实现的；抑制剂LY294002可减弱上述芍药苷的保护作用。
结论：芍药苷可通过激活PI3K/Akt信号通路对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤具有保护作用。
标签：β淀粉样蛋白；芍药苷；阿尔茨海默病；PI3K/Akt 信号通路阿尔茨海默病（Alzheimer′s disease，AD）是一种以脑内胆碱能神经元的大量缺失和死亡为特点的神经退行性病变。
Aβ淀粉样蛋白沉积是引起AD发病的主要因素，其引起的细胞凋亡在AD的发病机制中起重要作用。
PI3K/Akt信号转导通路是一条重要的细胞存活信号通路，参与调节许多细胞凋亡的过程。
Akt是原癌基因c-Akt的表达产物，它参与磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol-3-kinase，PI3K）介导的信号过程，Akt的激活受PI3K调控。
Akt处于这一通路的中心环节，是神经元存活、神经和血管新生、轴突以及树突形成、突触结构形成和突触间信息传递所必需[1]。
当细胞面临氧化损伤时，PI3K/Akt通路的活化对细胞存活非常重要。
二氢杨梅素通过下调jnk信号拮抗高糖诱导的pc12细胞凋亡
二氢杨梅素通过下调JNK信号拮抗高糖诱导的PC12细胞凋亡摘要：【背景】血糖是指血液中含有的葡萄糖，它可被机体组织直接利用并提供能量，对维持人体正常生理功能起重要作用。
低血糖时可见一系列综合征，如：头晕、头昏、心跳加速、饥饿、嗜睡、视力模糊等等。
高血糖也能使机体代谢紊乱，它是糖尿病最基本的特征，且长期的高血糖可诱导神经细胞凋亡导致糖尿病认知障碍。
二氢杨梅素（Dihydromyricetin, DHM）是一种天然药草藤茶的提取物，其主要活性成分为双氢黄酮类化合物。
它具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、降糖、降脂、改善胰岛素抵抗等药理作用，可通过血脑屏障。
近期有研究发现它对神经系统疾病疗效显著。
本课题组也已经证实DHM对STZ 联合高糖高脂诱导的2型糖尿病小鼠的认知功能障碍有一定改善作用。
本课题进一步探究，DHM能否改善高糖诱导的PC12细胞凋亡及其可能机制。
c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase, JNK）又称应激活化蛋白激酶，可被氧化应激、炎症等因素激活。
有研究发现糖尿病状态下，JNK高表达，且JNK可介导大鼠海马神经元凋亡。
另有文献报道，DHM在改善小鼠肝细胞损伤[1]、促进癌细胞凋亡[2]等作用中都与JNK信号有关。
由此，我们推测DHM是否可通过JNK 信号拮抗高糖诱导的PC12细胞凋亡?【目的】本实验拟观察DHM是否对高糖诱导神经细胞凋亡具有保护作用，且保护作用的机制是否与JNK信号有关，为治疗糖尿病认知障碍提供新的思路和方向。
I【方法】电镜观察PC12细胞形态；四甲基偶氮唑盐法（MTT比色法）检测PC12细胞活力；流式细胞仪检测PC12细胞早、晚期凋亡及死亡细胞率； Hoechst 33258染色观察凋亡细胞的胞核变化。
Western blot检测PC12细胞中凋亡相关蛋白（Bax、Bcl-2、Cleaved-Caspase-3）和p-JNK蛋白的表达。
【结果】PC12细胞被不同浓度的葡萄糖（4.5, 9, 13.5, 18mg / mL）分别处24, 48, 72, 96h后，经检测发现13.5mg/mL的高糖处理72 h时可明显改变细胞形态，降低细胞活力、增加凋亡率，促凋亡蛋白（Bax、Cleaved-Caspase-3）表达增加、抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低，表明长时间高糖处理可诱导PC12细胞凋亡。
盐酸米托蒽醌通过PI3K途径诱导人鼻咽癌CNE-2细胞凋亡
盐酸米托蒽醌通过PI3K途径诱导人鼻咽癌CNE-2细胞凋亡
近年来，盐酸米托蒽醌作为一种新型的化疗药物广泛应用于肿瘤治疗领域。
研究表明，盐酸米托蒽醌可以通过不同的途径诱导癌细胞凋亡。
其中，PI3K途径是一条非常重要的信号通路，与肿瘤细胞的存活、增殖和凋亡密切相关。
而人鼻咽癌CNE-
2细胞则是一种常见的鼻咽癌细胞系。
本研究旨在探究盐酸米托蒽醌通过PI3K途径诱导人鼻咽癌CNE-2细胞凋亡的作用机制。
首先，我们采用MTT法测定了
盐酸米托蒽醌对CNE-2细胞的细胞毒性。
结果表明，盐酸米
托蒽醌以时间和剂量依赖性方式抑制CNE-2细胞增殖。
其次，我们运用流式细胞术检测了CNE-2细胞的细胞周期和凋亡情况。
结果显示，盐酸米托蒽醌显著诱导了CNE-2细胞的G2/M 期阻滞和凋亡，且凋亡率随着时间和剂量的增加而增加。
进一步研究发现，盐酸米托蒽醌可以下调CNE-2细胞内PI3K
信号通路相关蛋白的表达，例如PI3K、PDK1和p-AKT。
同时，盐酸米托蒽醌也抑制了Bcl-2和MMP-9的表达，且提高
了Bax的表达。
这些结果表明，盐酸米托蒽醌通过PI3K途径
下调抗凋亡蛋白的表达，促进凋亡相关蛋白的表达，最终导致CNE-2细胞凋亡。
综上所述，我们的研究证明了盐酸米托蒽醌可以通过PI3K途
径诱导人鼻咽癌CNE-2细胞凋亡的作用机制，为进一步利用
这种化疗药物用于肿瘤治疗提供了重要的理论依据。
p35基因对MnCl_2诱导PC12细胞凋亡的作用
p35基因对MnCl_2诱导PC12细胞凋亡的作用曾季平;王立祥;胡晓燕;秦文;孔峰;杨玲玲;崔行;刘新垣【期刊名称】《山东大学学报：医学版》【年(卷),期】2004(42)6【摘要】目的:探讨p35基因对氯化锰(MnCl2)诱导的PC12细胞凋亡的作用。
方法:将p35基因转染PC12细胞得到可稳定表达p35基因的PC12/p35细胞株,使用相差显微镜观察、MTT染色和流式细胞分析等方法检测p35基因对MnCl2诱导的PC12细胞凋亡的作用。
结果:p35基因在PC12细胞中的稳定表达可以有效地抑制MnCl2诱导的PC12细胞凋亡。
结论:p35基因对MnCl2诱导的PC12细胞具有保护作用。
【总页数】4页(P625-628)【关键词】氯化锰;PC12细胞;基因,p35;细胞凋亡【作者】曾季平;王立祥;胡晓燕;秦文;孔峰;杨玲玲;崔行;刘新垣【作者单位】山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所;山东大学医学院药理学研究所;山东大学西校区医院;中国科学院上海生化细胞所【正文语种】中文【中图分类】Q786;R994.6【相关文献】1.cdk5、p35和p53基因在砷诱导的神经细胞凋亡中的改变 [J], 李新;张红梅;牛侨;原福胜2.转染PHGPx基因对Aβ及H2O2诱导PC12细胞凋亡的保护作用 [J], 付振涛;杨玲玲;郝建荣;曾季平;孔峰;钟华;崔行3.谷氨酸诱导转Bax基因PC12细胞凋亡及rn神经生长因子的保护作用 [J], 康静琼;阮旭中;王伟;张苏明4.Cdk5及p35在NGF撤退诱导的已分化PC12细胞凋亡中的作用研究 [J], 沈晗;吴少波;张百芳;彭芳芳;武栋成5.抗抑郁剂对皮质酮诱导的PC12细胞凋亡的对抗作用及其相关基因的研究 [J], 李云峰;罗质璞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
槲皮素对H_2O_2损伤PC12细胞的保护效果与机制
槲皮素对H_2O_2损伤PC12细胞的保护效果与机制刘红亮;胡磊;王靖凯;刘彬;李金菊;邓锦波【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2014(30)3【摘要】目的研究槲皮素(quercetin)对PC12细胞增殖的影响以及降低H2O2损伤PC12的效果并初步探讨其机制。
方法通过MTT比色法检测槲皮素对PC12细胞增殖的影响,并用H2O2诱导PC12细胞建立氧化损伤模型,通过MTT和LDH比色法以及TUNEL法检测分析槲皮素保护PC12细胞免受H2O2损伤的效果;对比分析槲皮素保护组和对照组PC12细胞内ROS水平和MDA的含量检测抗氧化的效果;比较分析SOD、CAT、GSH-PX活性初步探讨槲皮素的抗氧化机制。
结果检测浓度范围内槲皮素对PC12细胞没有毒性;通过提高细胞内SOD、CAT和GSH-PX活性,槲皮素能够降低细胞内活性氧水平,减少MDA的产生,保护H2O2对PC12细胞的氧化损伤。
结论槲皮素对PC12细胞没有毒性,能够通过减弱H2O2产生的活性氧保护PC12细胞。
【总页数】5页(P77-81)【关键词】槲皮素;H2O2;PC12细胞;抗氧化功能;活性氧;抗氧化酶【作者】刘红亮;胡磊;王靖凯;刘彬;李金菊;邓锦波【作者单位】河南大学药学院神经生物学研究所;河南大学护理学院【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R329.24【相关文献】1.槲皮素对H2O2损伤PC12细胞的保护效果与机制 [J], 刘红亮;胡磊;王靖凯;刘彬;李金菊;邓锦波2.槲皮素对Aβ25-35致PC12细胞损伤的雌激素样保护作用及分子机制 [J], 王翠; 郭童林; 沈丽霞3.槲皮素对H2O2诱导PC12细胞损伤的保护作用及机制研究 [J], 易鹏吉;张哲宇;彭伟军4.HO-1介导H_2O_2预处理对PC12细胞氧化应激损伤的适应性细胞保护作用[J], 唐小卿;陈容前;李玉娟;何剑琴;尹蔚兰;胡弼;冯鉴强5.原花青素对H_2O_2引起PC12细胞的内质网应激损伤的保护作用 [J], 马玉红;张梦莹;所起凤;钟民;吕坤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
3-羟基丁酸衍生物对PC12细胞凋亡的保护作用
3-羟基丁酸衍生物对PC12细胞凋亡的保护作用邹湘辉;刘博聪;庄东红;查广才;吴云影【摘要】Objective To investigate the protective effect of 3-hydroxybutyrate derivate( methyl-3-hydroxybutyrate and ethyl-3-hydroxybutyrate)on the apoptosis of PC12 induced by FBS deficiency. Methods Methyl-3-hydroxybutyrate and ethyl-3-hydroxybutyrate were prepared by chemical degradation. PC12 cells were divided into different groups:medium with FBS as negative control,medium without FBS as positive control,medium with different concentrations of methyl-3-hydroxybutyrate or ethyl-3-hydroxybutyrate without FBS as sample groups. The shape and viability of cells in each group were analyzed by optical microscope and MTT. Results Compared with the negative control,cells in the positive control group demonstrated a large number ofapoptosis,smaller and thinner morphology,and lower activity. However,the activity of cells was improved in the sample groups.Low concentration(0. 01 and 0. 001 mg·mL-1)of methyl-3-hydroxybutyrate and ethyl-3-hydroxybutyrate showed a protective effect on cell apoptosis,and 1mg · mL-1 had the best protection effect. Conclusion High purity methyl-3-hydroxybutyrate and ethyl-3-hydroxybutyrate can be produced by chemical method,and both chemicals present good effect on protecting the PC12 from apoptosis.%目的：观察3-羟基丁酸甲酯和3-羟基丁酸乙酯对PC12缺血清诱导凋亡细胞的保护作用。
紫铆因通过抑制p53信号通路对抗丙酮醛诱导的PC12细胞凋亡
紫铆因通过抑制p53信号通路对抗丙酮醛诱导的PC12细胞凋亡乐亮;徐江;姜保平;许利嘉;胡克平;陈士林;肖培根【摘要】Aim To study the effect of butein on apop-tosis of PC12 cells induced by methylglyoxal (MG) and its mechanism. Methods Being pretreated with different concentrations of butein, PC12 cells were damaged by 1.5 mmol·L-1MG. Cell viability and cell toxicity were evaluated by MTT and LDH assay. Cell apoptosis and death were analyzed by PI and Ho-echst 33342. The antioxidant gene and proapoptotic gene expressions were determined by RT-PCR. The protein expression of p53 was detected by Western blot. Results Being pretreated with 2.5~10 μmol· L-1butein for 1 h significantly increased the cell via-bility,decreased LDH release,and protected from cell nuclei shrinkage, condensation and cleavage by MG. Meanwhile, butein increased the gene expression of SOD2, decreased the gene expression of proapoptotic genes p53 and caspase-9, and lowered the protein ex-pression of p53. Conclusion Butein can protect ap-optosis of PC12 cells from MG in a dose-dependent manner,which is linked with antioxidation and inhibi-ting p53 and caspase-9 gene expression.%目的探讨紫铆因对丙酮醛诱导的PC12细胞凋亡的影响及作用机制.方法采用不同剂量的紫铆因预处理1h后,1.5 mmol·L-1丙酮醛诱导PC12细胞凋亡,MTT及LDH比色法分析细胞存活率及细胞毒性;PI及Hoechst 33342双染法分析细胞凋亡及坏死;逆转录 PCR 检测促凋亡基因p53、caspase-9和抗氧化基因SOD2的表达;免疫印迹法检测p53、caspase-9的蛋白表达.结果不同剂量的紫铆因预处理PC12细胞1 h后,可明显对抗丙酮醛引起的细胞凋亡,提高细胞存活率,减少细胞核固缩、碎裂,抑制促凋亡基因p53、caspase-9的过表达,提高抗氧化基因SOD2的表达.结论紫铆因能明显对抗丙酮醛诱导的PC12细胞凋亡,作用机制与其抗氧化活性,降低促凋亡基因p53、caspase-9的表达有关.【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2018(034)005【总页数】7页(P620-626)【关键词】紫铆因;丙酮醛;PC12细胞;凋亡;p53;caspase-9【作者】乐亮;徐江;姜保平;许利嘉;胡克平;陈士林;肖培根【作者单位】中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所,北京 100193;中国中医科学院中药研究所,北京 100700;中国中医科学院博士后科研流动站,北京100700;中国中医科学院中药研究所,北京 100700;中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所,北京 100193;中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所,北京 100193;中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所,北京 100193;中国中医科学院中药研究所,北京 100700;中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所,北京 100193【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R329.25;R394.2;R977.6糖尿病脑病是一种糖尿病引起的脑部病变，主要包括糖尿病性酮症酸中毒昏迷及糖尿病性高渗性非酮症性昏迷[1]。
褪黑素对氧自由基诱导的PC12细胞凋亡的保护作用
褪黑素对氧自由基诱导的PC12细胞凋亡的保护作用杨玲玲;付振涛;孔峰;胡晓燕;曾季平;崔行【期刊名称】《山东大学学报：医学版》【年(卷),期】2004(42)6【摘要】目的:探讨氧自由基在阿尔茨海默病(AlzheimerDisease熏AD)发生中的作用及可能机制,评价褪黑素(Melatonin熏MT)的临床应用价值。
方法:采用超氧自由基产生系统黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶系统(X/XO)作用于PC12细胞,以褪黑素拮抗其作用,观察细胞的形态学变化;MTT法检测细胞存活率,DNA电泳和流式细胞术分析细胞凋亡情况,RT鄄PCR技术测定凋亡相关基因bcl鄄2、bax的表达。
结果:X/XO作用后,PC12细胞出现凋亡特征性改变,凋亡率增加,电泳呈现DNAladders,凋亡相关基因bax上调;而10-5M褪黑素即能改善凋亡情况。
结论:氧自由基可诱导神经元凋亡从而促进AD发生,其机制与促凋亡相关基因Bax表达增高有关;褪黑素可减缓神经元凋亡,可用于临床预防与治疗。
【总页数】4页(P629-632)【关键词】活性氧;阿尔茨海默病;细胞凋亡【作者】杨玲玲;付振涛;孔峰;胡晓燕;曾季平;崔行【作者单位】山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所;山东省疾病预防控制中心【正文语种】中文【中图分类】R741.02【相关文献】1.氧自由基引起PC12细胞凋亡及白果内酯的保护作用 [J], 周利军;朱兴族2.尼莫地平对谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡的保护作用 [J], 及时雨;曾旭东;齐平建;陈洋;沈风彪;蒋国梁3.鸡豆黄素A对MPP+诱导PC12细胞凋亡的保护作用 [J], 俞益桂;薛海霞;韩俊辉;尹艳艳4.延龄草苷对过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及机制 [J], 唐鲜娥;何一多;陈颖;夏德尧;覃晓莉;赵方毓;王凤杰;陈显兵5.延龄草苷对过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及机制 [J], 唐鲜娥;何一多;陈颖;夏德尧;覃晓莉;赵方毓;王凤杰;陈显兵因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
抗抑郁剂对皮质酮诱导的PC12细胞凋亡的对抗作用及其相关基因的研究
抗抑郁剂对皮质酮诱导的PC12细胞凋亡的对抗作用及其相
关基因的研究
李云峰;罗质璞
【期刊名称】《中国药理学会通讯》
【年(卷),期】2001(018)004
【总页数】1页(P16)
【作者】李云峰;罗质璞
【作者单位】军事医学科学院毒物药物研究所，北京100850;军事医学科学院毒物药物研究所，北京100850
【正文语种】中文
【中图分类】R971.43
【相关文献】
1.人参皂苷Rg1对抗多巴胺对PC12细胞凋亡的诱导作用 [J], 陈晓春;朱元贵;王小众;朱理安;黄春
2.PI3K/Akt/GSK-3β信号通路在6-姜酚保护PC12细胞对抗β淀粉样蛋白诱导细胞凋亡的作用 [J], 曾高峰;宗少晖;傅松文;农梦妮;李柯柯;严芳娜
3.西红花对皮质酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用研究 [J], 李萌;马致洁;章从恩;章前;于卫东;陈熹;赵奎君
4.无毒棉籽水提物对皮质酮诱导的PC12细胞损伤的对抗作用 [J], 李云峰;杨明;赵毅民;栾新慧;罗质璞
5.L-dopa诱导PC12细胞凋亡及相关基因表达的实验研究 [J], 韩燕;陈俊抛;田时雨;王洛伟;陆小红;陈继术
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山楂叶总黄酮对H_2O_2诱导PC12细胞凋亡的保护作用及机制的研究
山楂叶总黄酮对H_2O_2诱导PC12细胞凋亡的保护作用及机制的研究纪影实;李红;杨世杰【期刊名称】《哈尔滨医科大学学报》【年(卷),期】2006(40)2【摘要】目的探讨山楂叶总黄酮(flavone mixture of crataegus leaves,FMCL)对H2O2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及其分子机制。
方法用H2O2刺激PC12细胞使其发生凋亡,用流式细胞仪检测PC12细胞凋亡率,用Westernblot法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3P20蛋白及用RT-PCR法检测Bcl-2、Bax mRNA表达量的变化。
结果与模型组比较FMCL 100μg/ml剂量组PC12细胞凋亡率下降,Bcl-2蛋白及mRNA表达量明显升高,而Bax、Caspase-3P20蛋白及BaxmRNA表达量明显降低(P<0.05或P<0.01),且在一定范围内存在剂量依赖关系。
结论山楂叶总黄酮可抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与调节凋亡相关基因及蛋白的表达从而抑制Caspase-3活化有关。
【总页数】4页(P110-112)【关键词】山楂叶总黄酮;PC12细胞;H2;O2;凋亡;半胱天冬蛋白酶【作者】纪影实;李红;杨世杰【作者单位】吉林大学基础医学院药理学教研室【正文语种】中文【中图分类】R966【相关文献】1.基于Nrf2信号通路的三七总皂苷对Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡的保护作用机制研究 [J], 赵静宇;汪梦霞;赵自明;孟祥宝;孙桂波;孙晓波2.山楂叶总黄酮对H2O2诱导PC12细胞凋亡的保护作用 [J], 纪影实;李红;杨世杰3.骨碎补总黄酮的富集工艺及其对Aβ25-35诱导PC12损伤细胞保护作用研究[J], 刘婷婷;顾婷;葛雅南;耿放4.山楂叶黄酮通过Nrf-2/ARE信号通路对H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用研究 [J], 孙涛;邓婷;秦涛;谢丹妮;徐颖5.蒺藜皂苷对H_2O_2诱导PC12细胞凋亡保护作用及其机制研究 [J], 姜恩平;苏学今;李红;杨世杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
过氧化氢预处理对抗氧化应激诱导的PC12细胞凋亡(英文)
过氧化氢预处理对抗氧化应激诱导的PC12细胞凋亡(英文)唐小卿;陈静;唐二虎;冯鉴强;陈培熹【期刊名称】《生理学报》【年(卷),期】2005(57)2【摘要】氧化应激可明显地诱导细胞凋亡。
本研究旨在探讨H2O2。
预处理能否对H2O2诱导的PC12细胞凋亡产生保护作用及ATP 敏感性K+(ATP-sensitive potassium,KATP)通道在其中的作用。
采用PI染色流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测PC12细胞凋亡。
结果表明,经10 μmol/L H2O2预处理90 min的PC12细胞,分别在20、30、50和100 μmol/L H2O2作用24 h后,其细胞凋亡率明显下降,与未经H2O2预处理的PC12细胞相比,差异极显著(P<0.01),表明H2O2预处理对H2O2诱导PC12细胞凋亡具有保护作用。
用10μmol/L的KATP通道激动剂pinacidil(Pin)可显著减少30和50μmol/L H2O2诱导的PC12细胞凋亡,10 μmol/L的KATP通道拮抗剂glybenclamide(Gly)则可显著地抑制甚至取消KATP通道激动剂Pin对H2O2诱导PC12细胞凋亡的保护作用,但并不影响H2O2预处理对H2O2诱导PC12细胞凋亡的保护作用;然而,当联合应用H2O2预处理与Pin时,对PC12 细胞凋亡的保护作用明显大于各自的抗凋亡作用。
提示KATP通道开放不仅对H2O2诱导PC12细胞凋亡具有保护作用,而且与H2O2预处理一起产生抗PC12细胞凋亡的协同作用,但KATP通道开放可能不参与H2O2预处理的适应性保护作用。
【总页数】6页(P211-216)【关键词】预处理;H2O2;PC12细胞;凋亡;ATP-敏感性钾通道【作者】唐小卿;陈静;唐二虎;冯鉴强;陈培熹【作者单位】中山大学中山医学院生理学教研室【正文语种】中文【中图分类】Q257;Q256【相关文献】1.川芎嗪对过氧化氢诱导PC12细胞氧化应激的作用 [J], 林文新;马阮昕;冯真英2.亲环素A保护PC12细胞对抗β-淀粉样蛋白诱导的氧化应激损伤和凋亡 [J], 葛宇松;尹琳3.姜黄素对过氧化氢诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用 [J], Li Jinwen;Xu Yueying;Cao Tiansou;Liang Qifeng;Li Li4.延龄草苷对过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及机制 [J], 唐鲜娥;何一多;陈颖;夏德尧;覃晓莉;赵方毓;王凤杰;陈显兵5.莫达非尼抑制过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡(英文) [J], 易宏伟;刘国卿因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
三氟拉嗪对过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡的保护作用
三氟拉嗪对过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡的保护作用
李州;杨卓
【期刊名称】《天津医药》
【年(卷),期】2011(39)3
【摘要】许多研究表明,氧化应激诱导的细胞损伤与生理老化过程和许多神经退行性疾病如阿尔茨海默病和帕金森病等有关。
既往研究认为,氧化代谢和抗氧化剂不
足引起的过氧化氢（H2O2）清除率过低，从而导致H2O2和活性氧物质（ROS）水平的增高，
【总页数】1页(P207-207)
【关键词】PC12细胞凋亡;过氧化氢;保护作用;三氟拉嗪;神经退行性疾病;阿尔茨海默病;活性氧物质;帕金森病
【作者】李州;杨卓
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】R282.71
【相关文献】
1.丹皮酚对过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡的抑制作用 [J], 徐道华;周晨慧;吴铁;许碧连
2.7,8-二羟基黄酮对过氧化氢诱导PC12细胞损伤的保护作用 [J], 华洁;魏祥;王丽娜;孟晓文;金晓红;杨建平
3.延龄草苷对过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及机制 [J], 唐鲜娥;何一多;陈颖;夏德尧;覃晓莉;赵方毓;王凤杰;陈显兵
4.延龄草苷对过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及机制 [J], 唐鲜娥;何一多;陈颖;夏德尧;覃晓莉;赵方毓;王凤杰;陈显兵
5.阿魏酸钠对过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡保护作用的研究 [J], 曲喜英;祝其锋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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第27卷第2期2007年4月杭州师范学院学报(医学版)J ou rna l o f Ha ngzhou Te a che rs Co ll e ge (M e di ca l Ed iti o n )Vol .27No .2Ap r .2007收稿日期:2007-01-09作者简介:陈 辉(1968-),女,吉林通化人,医学硕士,讲师。
P I -3K 在H 2O 2诱导的PC12细胞凋亡中的作用陈 辉(杭州师范大学基础医学部人体解剖教研室,浙江杭州310036)摘要:目的 研究磷脂酰肌醇-3激酶(P I -3K )在H 2O 2诱导PC12细胞凋亡中的作用。
方法 采用H 2O 2诱导PC12细胞制作凋亡模型,通过M TT 法、Hoechst/P I 荧光双染及流式细胞术分析使用P I -3K 特异抑制剂LY294002预处理对H 2O 2诱导PC12细胞凋亡作用的影响。
结果 100μMH 2O 2处理PC12细胞24h,细胞出现明显凋亡;LY294002预处理1h 后凋亡细胞数增多(P <0.05)。
结论 P I -3K 对H 2O 2诱导的PC12细胞凋亡具有抑制作用。
关键词:P I -3K;LY294002;H 2O 2;凋亡;(PC12细胞中图分类号:R361+.3 文献标识码:A 文章编号:1008-4894(2007)02-0069-03Effect of PI -3K on apoptosis i n duced by H 2O 2i n PC12cellsCHEN Hui(Depart m ent of Hu m an Anato m y,School of B asic M edicine,Hangzhou N or m al University,Hangzhou,Zhejiang 310036,China )Abstract:O bjecti ve T o investigate the effect of phos phatidylinosit ol 3kinase (P I -3k )signal path way on apop t osis in 2duced by H 2O 2in rat pheochr omocyt oma (PC12)cells .M ethods Pretreated with or without LY294002which is the s pe 2cific inhibit or against P I -3k,PC12cells were used as the H 2O 22induced apop t osis model in vitr o by MTT,fluorescence m icr oscopy using Hoechst33342/P I nuclei staining and fl ow cyt ometry .Results Apop t osis t ook p lace after PC12cells hadbeen treated with 100μM H 2O 2f or 24hr .LY294002,a s pecific inhibit or of P I -3K,enhanced H 2O 22induced PC12cellapop t osis .Conclusi on P I -3K p lays a crucial r ole in p r ohibiting PC12cell apop t osis induced by H 2O 2.Key words:P I -3K;LY294002;H 2O 2;apop t osis;PC12cells 脊髓损伤是危害严重的中枢神经系统损伤。
近年研究表明[1],活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS )过量生成致使神经细胞处于氧化应激状态,是脊髓继发性损伤过程中重要病理变化之一,氧化应激使神经细胞受损乃至死亡,严重影响脊髓功能的恢复。
ROS 作为重要的信号调控分子,可激活多条信号通路[2],磷脂酰肌醇-3激酶(phos phatidylinos 2it ol 3kinase,P I -3K )信号通路即是存活信号通路之一,该通路是否参与ROS诱导的神经细胞凋亡保护作用,其作用机制如何尚不清楚。
LY294002是P I-3K特异性抑制剂,可抑制P I-3K的活性而阻断下游激酶Akt磷酸化,从而阻断P I-3K通路信号转导[3]。
PC12细胞是大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞克隆化细胞株,具有神经内分泌细胞特性,国内外广为用作研究神经元的体外模型。
本研究以H2O2诱导PC12细胞凋亡为模型,观察使用LY294002预处理对凋亡细胞的影响,了解P I-3K在H2O2诱导PC12细胞凋亡中的作用,为进一步探讨P I-3K/Akt信号通路在H2O2诱导PC12细胞凋亡中的作用机制奠定基础。
1 材料与方法1.1 主要试剂 RP M I-1640培养液(美国Gibco2 brl);新生牛血清(兰州民海生物公司);H2O2(天津市化学试剂三厂);LY294002、MTT、Hoechst、P I(美国Sig ma公司);其它试剂均为国产分析纯。
1.2 细胞培养和处理 PC12细胞株由昆明医学院重点实验室提供。
按密度为1×106将细胞种植于含15%新生牛血清和双抗(100U/m l青霉素、100mg/L链霉素)的RP M I21640培养液中常规培养。
培养24h使细胞贴壁,再将PC12细胞换成含有2.5%新生牛血清RP M I21640培养液,24h后加不同终浓度的H2O2为H2O2处理组,加H2O2前20μMLY294002预处理1h为抑制剂组,以0剂量H2O2为对照组,只加等量培养液的为空白组,继续培养不同的时间点,收集细胞进行实验,每次实验均分为H2O2处理组、抑制剂组和对照组,每个实验至少重复3次。
1.3 MTT法检测细胞增殖抑制率 参照文献[4],稍加改良。
以不同终浓度H2O2处理PC12细胞24h,加MTT(5mg/m l),4h后加三联液(10%S DS、5%异戊醇、0.012mol/L盐酸常规方法配制),12-20h后进行酶标仪(G5031型国营华东电子管厂)检测各组OD值(检测波长570nm,参考波长630nm),计算细胞增殖抑制率。
细胞增殖抑制率=[1-(处理组OD值-空白组OD值)/(对照组OD值-空白组OD值)]×100%1.4 Hoechst/P I荧光双染法观察并量化凋亡细胞 各因素处理后,收集5×106细胞于37℃与Ho2 echst33342(5ug/m l)孵育15m in,P BS漂洗1次,重悬细胞密度大约为2.5×107/m l,上镜检测前加入P I (50ug/m l)混匀后荧光显微镜(O ly mpus,UV-2A滤光器,激发波长330～380n m,吸收波长420n m)下观察。
细胞分类特征如下[5]:活细胞核均匀蓝染;早期凋亡细胞核蓝染但染色质凝聚成块并趋周边;晚期凋亡细胞核红染,染色质片断化呈荧光较强的球状颗粒,即凋亡小体;坏死细胞:核红染且肿胀。
每个处理组至少计数200个细胞,实验至少重复3次。
1.5 流式细胞术(FC M)检测细胞凋亡 收集5×106已处理好的细胞,P BS漂洗一次;预冷70%乙醇在4℃固定24h,P BS再次漂洗;加入1%Trit onX-100摇匀后静置10m in,离心去上清;加入0.01% RNase消化10m in,离心去上清;加入0.05%P I4℃避光染色30m in;300目筛网过滤,细胞置激发光为480n m波长的EP I CS XL流式细胞仪检测。
1.7 统计学分析 所有数据以 x±s表示,两样本均数比较采用t检验,以P<0.05为检验显著性水平标准。
2 结 果2.1 LY294002预处理可增强H2O2对PC12细胞增殖的抑制作用 通过MTT法测定各浓度H2O2处理对PC12细胞增殖抑制率及20μM LY294002预处理1h对细胞抑制率的影响。
分别用20、50、100、200、400和500μM处理PC12细胞24h,结果显示, 50-200μMH2O2处理PC12细胞,细胞增殖抑制率递增,由(2.65±0.13)%增加到(62.83±5.1)%(P <0.05),LY294002预处理后细胞抑制率明显高于相应的H2O2处理组,且以100μM和200μM组最明显,超过400μM抑制率达(90±3.2)%以上(图1)。
图1 LY294002预处理对H2O2处理PC12细胞增殖抑制作用的影响2.2 Hoechst33342/P I双染荧光显微镜观察并量化抑制剂预处理对细胞凋亡的影响 经过处理的细胞07杭州师范学院学报(医学版)2007年 用核染料Hoechst33342/P I双染,于荧光显微镜下观察,正常细胞和凋亡早期的细胞核被Hoechst染成蓝色,坏死和凋亡晚期的细胞核被P I染成红色。
加或不加抑制剂预处理,用100μM和200μM H2O2处理细胞24h,荧光显微镜下观察结果(见封二图2):100μM和200μM H2O2组部分细胞核呈现典型的凋亡特征,LY294002预处理凋亡细胞数增加;通过细胞计数,100μM和200μMH2O2处理PC12细胞24h,LY294002预处理前后比较凋亡细胞比率,结果凋亡细胞比率由(17.5±1.02)%和(29±1.47)%分别增加到(31±2.06)%和(44±3)% (p<0.05)。
2.4 流式细胞术 流式细胞术是定量检测细胞凋亡较敏感、可靠的方法[6]。
100μMH2O2处理PC12细胞24h,流式细胞仪检测在正常的G0/G1峰前出现典型的凋亡峰,凋亡比例为(16.8±1.09)%; 20μMLY294002预处理1h后再行100μM H2O2处理24h,凋亡比例为(33.6±2.42)%;正常对照PC12细胞凋亡数为(1.71±0.12)%(见封二图3)。
3 讨论低剂量ROS是正常细胞有氧代谢过程的副产品,发挥重要的生理功能,同时体内防御系统可以清除ROS,不至使其堆积产生危害。
但如果环境损伤使细胞ROS过量生成,机体防御机制则不足以抵御ROS的过量产生,致细胞处于氧化应激状态,此时,超氧离子、H2O2及羟自由基等ROS的形式可引起细胞膜脂质、蛋白质及DNA氧化损伤,最终导致细胞受损乃至死亡[7,8]。