动物细胞融合和单克隆抗体(公开课)

特定抗原免疫小鼠
提取
B淋巴细胞Leabharlann Baidu
小鼠骨髓瘤细胞
灭活的病毒等手段
杂交 细胞
用特定的选 择性培养基
第一次筛选
杂交瘤细胞
第二次筛选 能产生专一抗体的杂交瘤细胞
注射到小鼠腹腔
体外培养
提取单克隆抗体
小结：
1）本过程利用了哪些技术和原理？
动物细胞融合和动物细胞培养技术
免疫原理，细胞膜流动性，细胞增殖
2）为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？
病毒颗粒黏 附细胞表面
细胞膜被 病毒颗粒穿通
细胞膜连接
细胞融合、形成杂种细胞
二.动物细胞融合
3、动物细胞融合的意义及应用
• 细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使 远缘杂交成为可能。 • 利用杂交瘤技术，制备单克隆抗体。
二：动物细胞融合的成功应用 ——单克隆抗体的制备
学习目标
1 抗体产生的免疫学原理 2 获得传统抗体的方法、特点 3 单克隆抗体的概念、特点， 制备的原理、运用的技术、 过程 （本节课重点和难点）
2.2.2 动物细胞融合 与单克隆抗体
一、动物细胞融合
定义：也称细胞杂交，指用自 然或人工方法使两个或多个 不同的细胞融合成一个细胞 的过程。
◆杂交细胞：融合后形成的具
有原来两个或多个细胞遗传 信息的单核细胞成为杂交细 胞。
2、诱导融合的因素
• 化学法：聚乙二醇PEG诱导
• 物理法：电激、离心、振动 • 生物法：灭活的病毒诱导融 合.(利用灭活病毒是动物细 胞融合所特有的。 ）
简易、快速特点.
• 2、用于治疗疾病和运载药物：
• 主要用于癌症治疗。
• 生物导弹：抗癌细胞的单克隆抗体+放射性同位素+化学 药物或细胞毒素。（单克隆抗体：导向。准确找到癌细 胞位置，原位杀死癌细胞。）
融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅能分泌 专一抗体，而且还能无限增殖，因而可以获得大量单克隆抗体
3）进行两次筛选的目的？
第1次筛选得到杂交瘤细胞（多种）。第2次筛选得到能产生 专一性抗体的杂交瘤细胞群。
4）单克隆抗体的特点？总结单克隆抗体的概念
单克隆抗体的应用
• 1、作为诊断试剂：在临床生化诊断、病理组织定位、 体内肿瘤的定位等,与常规抗体相比,具有准确、高效、