色谱法概论 PPT课件
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色谱法概论PPT课件
能。
色谱法与其他技术的联用
色谱-质谱联用（GC-MS, LC-MS）
通过将色谱的分离能力与质谱的高灵敏度检测相结合，可实现对复杂样品中目标化合物 的定性和定量分析，广泛应用于药物代谢、环境监测等领域。
色谱-光谱联用（GC-IR, LC-UV/Vis）
色谱与光谱技术的联用可以提供更丰富的化合物结构和组成信息，有助于深入了解化合 物的性质和行为。
实验材料
确保色谱柱、试剂、溶 剂等材料的质量和纯度，
以满足实验要求。
实验设备
检查色谱仪、检测器、 注射器等设备的运行状 况，确保实验过程中设
备正常工作。
实验设计
根据实验目的和要求， 设计合理的色谱条件和
实验方案。
实验安全
注意实验过程中的安全 问题，如使用有毒有害
试剂时的防护措施。
实验操作步骤
色谱柱安装与条件设置
数据整理
整理实验过程中记录的数据，包括 色谱图、峰面积等。
结果分析
对实验结果进行深入分析，探究可 能的原因和影响因素。
03
02
结果判断
根据实验目的和要求，判断实验结 果是否符合预期。
结论总结
总结实验结果，得出结论，并提出 进一步改进和完善的建议。
04
04 色谱法在分析化学中的应 用
在食品分析中的应用
食品成分分析
色谱法用于分离和检测食品中的营养 成分，如脂肪、蛋白质、碳水化合物、 维生素和矿物质等，以确保食品质量 和安全。
食品添加剂分析
食品污染物分析
色谱法用于检测食品中的有害物质， 如农药残留、重金属、霉菌毒素等， 以防止食品污染和保障食品安全。
色谱法用于检测食品中添加的防腐剂、 色素、香料等成分，以控制食品添加 剂的使用量，保障消费者健康。
色谱分析法概论经典PPT课件
t t t'
tR=t0(1+ k)
V
tR=t0(1+K
s
V
k
)
R
t 0
0
R
t
0
m
色谱过程方程
分配系数与色谱分离
（三）色谱分离的前提
KA≠KB 或kA≠kB或r2 ,1 ≠1是色谱分离的前提
推导过程：
tV
RA
=
t0(1+KA
s
Vm
)
tRB
=
t0(1+KB
Vs Vm
)
tR=
t0
(KA－KB)
Vs Vm
分配系数(容量因子)不等是分离的前提。
(三) 理论塔板高度和理论塔板数 (height equivalent to a theoretical plate或plate height, H) (plate number, n)
是色谱柱效参数。
理论塔板高度
H =L/n
注意： 1、计算n时使标准差（峰宽或半峰宽） 和保留时间单位一致 2、n的单位
tR≠0
KA≠KB kA≠kB
第二节 色谱法的分类和发展
一、色谱法的分类
按流动相的分子聚集状态分类: GC、LC、SFC 等
按固定相的分子聚集状态分类: GSC、GLC、LSC、LLC等
按操作形式分类: 柱色谱法、平面色谱法、毛细管电泳法等
按色谱过程的分离机制分类: 分配色谱法、吸附色谱法、离子交换色谱法、
分配色谱法
分离原理 利用被分离组分在固定相或流 动相中的溶解度差别而实现分离。
K＝ Cs X s Vs Cm X m Vm
•溶质分子在固定相中溶解度越大，或在流动相 中溶解度越小，则K越大。在LLC中K主要与流 动相的性质 (种类与极性) 有关；在GLC中K与 固定相极性和柱温有关。
《色谱法概述》课件
分类
色谱法可根据流动相的性质和 分离机理进行分类，如气相色 谱法和液相色谱法。
常见的色谱技术
气相色谱法
利用气相作为流动相进行分离，适用于挥发性和热稳定 的分子。
液相色谱法
利用液相作为流动相进行分离，适用于非挥发性和热敏 感的分子。
应用领域
1 化学分析
色谱法在药物分析、环境分析等领域起到关键作用。
2
分析技术示例
使用色谱法确定药物的纯度、成分和含量。
3
结果解读
解读色谱法获得的数据，确定药物的品质和有效成分。
总结
色谱法在分析领域的重要性
色谱法是一种高效、可靠的分离技术，在药物分析、环 境监测和科学研究中发挥着重要作用。
对学习和研究的建议
细致学习色谱法原理和技术，持续实践并不断探索创新， 在科学研究和分析工作中取得更好的成果。
《色谱法概述》PPT课件
本课程将介绍色谱法及其在分析领域的重要性。通过详细的概述、分析技术 和案例分析，学习者将全面了解这一强大的分离技术并获得相关建议。
概述
定义
色谱法是一种基于溶液中溶质 与固定相间的分配和吸附现象 实现分离的技术。
原理
色谱法利用固定相与流动相之 间的源自互作用，实现溶质的分 离和纯化。2 生物医药
用于分离和纯化药物、蛋白质和其他生物分子。
3 环境监测
可以分析环境中的有机物、无机物和污染物。
色谱法的优势和局限性
优势
高分离能力、快速分析速度、广泛适用性、高检测灵 敏度。
局限性
复杂的样品制备、需要专业知识和经验、某些样品难 以分离。
案例分析
1
色谱法在药物分析中的应用
通过实际案例，展示了色谱法在制药行业及药物分析中的重要价值。
色谱法概论PPT课件
（9）调整保留时间(tR’)：扣除死时间后的组分实际被固定相所
保留的时间,即tR’= tR-t0 = tR-tm
意义：
组分随流动相移动的时间都是相同的，都是死时间。它与固定相、组 分的性质均无关，只与流动相的流动速度有关，对分离不起作用。
tR’即为组分在固定相中出现的（保留的）时间，即组分被固定相所 滞留的时间，与组分和固定相之间的作用力有关。
11
高效液相系统
液体样品
液体传输
高效液相色谱柱 高效液相系统
检测器
数据处理 12
高效液相系统和色谱柱
Agilent 1100 高效液相系统
高效液相色谱柱
可更换卡套
液体医药样品 溶剂
色谱柱
硅胶填料
以不同速率 流出的组分
结果 检测器
色谱图
13
气相-质谱系 统
色谱柱
14
气相色谱系统
气源
进样器
检测器
流出曲线是柱内组分分离结 果的反映，是研究色谱分离 过程机理的依据，也是定性、
32
定量的依据。
色谱流出曲线的意义：
色谱峰数=样品中单组分的最少个数； 色谱保留值——定性依据； 色谱峰高或面积——定量依据； 色谱保留值或区域宽度——色谱柱分离效能评价
指标； 色谱峰间距——固定相或流动相选择是否合适的
5
在分析化学领域，色谱法是一个相对年轻的分支学科。早期的色谱技 术只是一种分离技术而已，与萃取、蒸馏等分离技术不同的是其分离效率 高得多。当这种高效的分离技术与各种灵敏的检测技术结合在一起后，才 使得色谱技术成为最重要的一种分析方法，几乎可以分析所有已知物质， 在所有学科领域都得到了广泛的应用。
色谱法起过关键作用的诺贝尔奖研究工作
第16章 色谱分析法概论(共82张PPT)
KAVs Vm
)
tR B
t0
(1
KBVs Vm
)
tR
tR A
tR B
t0(KA
KB
)
Vs Vm
t0(kA kB)
色谱别离的前提
——组分在两相间分配系数 K 不同或分配
第三节 色谱别离机制
一、吸附色谱法 二、分配色谱法
三、 离子交换色谱法 四、空间排阻色谱法
一、吸附色谱法
✓ 别离机制： ✓ 利用吸附剂对不同组分吸附能力差异实现别离
诺贝尔化学奖： 1948年，瑞典Tiselins，电泳和吸附分析 1952年，英国Martin和Synge，分配色谱。
展望：
新型固定相和检测器 联用仪器：GC-MS，HPLC-MS 智能化开展
第一节 概 述
一、定义
色谱法(chromatography)： 对于液相色谱，因Dm 较小，B 项可勿略。
三、色谱法的特点
✓ 缺点：
对未知物分析的定性专属性差
需要与其他分析方法联用(GC-MS,LC-MS)
第二节 色谱法的根本原理
实现色谱分析的根本条件
相对运动的两相——流动相、固定相
各组分与固定相的作用存在差异
一、色谱过程
色谱过程是物质分子在相对运动的两相分配 “平衡〞的过程。
两个组分被流动相携带移动的速度不同
物质对别离的两种情况
C
C
t
t
提高别离度R
增加tR
பைடு நூலகம்
减小w
第四节 色谱理论根底
组分保存时间：色谱过程的热力学因素控制； 〔组分和固定液的结构和性质〕
色谱峰变宽：色谱过程的动力学因素控制；
〔两相中的运动阻力，扩散〕
第十六章色谱分析法概论PPT课件
tRA
t0( 1
K
A
Vs Vm
)
tRB t0 ( 1
tR tRA
KtRBBVVms t)0(KAKB)V Vm s
tRt0(kAkB)
20
例：在1m长的填充色谱柱上，某镇静药物A及其异构体B 的保留时间分别为5.80min和6.60min；峰底宽度分别为 0.78min及0.82min，空气通过色谱柱需1.10min。
10
保留值
相对保留值
2,1
tR2 tR1
VR 2 VR 1
（ 难 分 离物 2， 1）质 用
（只与柱温及固定相的性质有关）
保留指数
Ix100znllgtgtR R ((z xn ))llgtgtR R ((zz))
Ix为待测组分的保留指数 z与z n为 正 构 烷 烃 对 的 碳数原 子
11
第十七章 色谱分析法概论
Chromatography
第一节 第二节 第三节
色谱过程和基本原理 基本类型色谱方法及其分离机制 色谱法基本理论
1
色谱法是一种分离分析方法 各物质在两相中具有不同的分配系数，当
两相作相对运动时，在两相中进行多次反 复的分配达到分离。
2
薄 层 色 谱
柱色谱
纸色谱
第一节 色谱过程和基本原理
计算：载气的平均线速度；组分B的分配比；A及B的分 离度。
解： (1) l 100 90.90cmmin1
t0 1.10
( 2 )k tR (6.601.10) 5.00
t0
1.10
( 3)R 2( tR2 tR1 ) 2(6.605.80) 1.00
W1 W2
0.780.82
色谱法概论一.ppt
1、用已知物对照定性 一定操作条件下，各组分保留时间是一定 具体做法： 1）分别以试样和标准物进样 2）对照：试样中某峰的保留时间和标样中某峰重 合，则可初步确定试样 中含有该物质。 3）样品中加入标准物，峰增加来确定。
2. 据经验式定性
1）碳数规律：lgtr’=An+C (n3) 2）沸点规律：lgtr’=ATb+C 3. 据相对保留值 ri,s 定性：温度一定
fm
f' i( m )
f' s( m )
As mi Ai ms
2.摩尔校正因子（Molar calibration factor fM ）
fM
f' i( M )
f' s( M )
Asmi M s Ai ms M i
fm
Ms Mi
注：检测器不同而标准物不同
校正因子只与试样、标准物和检测器类型有关，
三. 定量分析方法
5. 双柱或多柱定性
6. 与其它方法结合定性
如GC-MS，GC-IR，GC-MS-MS
正构烷烃碳数
2.7 色谱定量方法
• 色谱定量的依据：对于同一组分，峰值与进入检测器的量
成正比。
峰面积 A A=1.065 h W1/2
• 峰值 峰高 h
A=1/2 h (W0.15+W0.85)
•由于检测器对各个组分的灵敏度是不一样的，因此计算某组 分的质量分数时，应将测得的峰值校正后方可进行。
调整保留时间 tr’, min
4. 保留指数(Kovats指数)定性(重现性较好的定性指标)
I
100Z
logtR,i logtR,Z logtR,z1 logtR,Z
求出未知物 Ix，
色谱分析法概论PPT课件
分进行色谱定性的指标。
7.3色谱分离的基本理论>>
7.3.2等温线
➢ 等温线： 在一定温度条件下，组分在固定相和流动相的分配
达到平衡时，在两相中的浓度之比值K为常数，由 此绘制出的cs与cm的关系曲线称为等温线。
c
cs
b
a
b前延峰
K=cs/cm
c
a正常峰
c拖尾峰
cm
俄国植物学家 茨维特
7.1概述>>
7.1.1色谱法的起源和发展
➢ Tswett植物色素分离 实验图示：
样 品：植物色素
固定相：CaCO3颗粒 流动相：石油醚
色谱柱
固定相 碳酸钙
流动相 石油醚
混合色素 叶绿素 叶黄素 胡萝卜素
分离组分
年代
1906 1931
1938
1941 1944 1949 1952 1956 1957 1958 1959 1964 1965
7.2色谱过程与术语>>
7.2.1色谱过程
色谱过程的实质
(1)色谱过程是吸附与 解析的过程；
(2)不同组分极性的差 异导致吸附与解析 的差异；
(3)不同组分向前移动 的过程是差异不断 累积过程，是在动 态中由量变到质变 的过程。
B
A B
BA
B A
B
B
A
B
A
t
流动相 样品液 色谱柱 固定相 检测器 c
年代 1937 1938 1939 1950 1951 1955 1958 1961
1970
1972
表7-2 色谱法起过关键作用的诺贝尔奖研究工作
获奖学科
获奖研究工作
化学
胡萝卜素化学，维生素A和B
7.3色谱分离的基本理论>>
7.3.2等温线
➢ 等温线： 在一定温度条件下，组分在固定相和流动相的分配
达到平衡时，在两相中的浓度之比值K为常数，由 此绘制出的cs与cm的关系曲线称为等温线。
c
cs
b
a
b前延峰
K=cs/cm
c
a正常峰
c拖尾峰
cm
俄国植物学家 茨维特
7.1概述>>
7.1.1色谱法的起源和发展
➢ Tswett植物色素分离 实验图示：
样 品：植物色素
固定相：CaCO3颗粒 流动相：石油醚
色谱柱
固定相 碳酸钙
流动相 石油醚
混合色素 叶绿素 叶黄素 胡萝卜素
分离组分
年代
1906 1931
1938
1941 1944 1949 1952 1956 1957 1958 1959 1964 1965
7.2色谱过程与术语>>
7.2.1色谱过程
色谱过程的实质
(1)色谱过程是吸附与 解析的过程；
(2)不同组分极性的差 异导致吸附与解析 的差异；
(3)不同组分向前移动 的过程是差异不断 累积过程，是在动 态中由量变到质变 的过程。
B
A B
BA
B A
B
B
A
B
A
t
流动相 样品液 色谱柱 固定相 检测器 c
年代 1937 1938 1939 1950 1951 1955 1958 1961
1970
1972
表7-2 色谱法起过关键作用的诺贝尔奖研究工作
获奖学科
获奖研究工作
化学
胡萝卜素化学，维生素A和B
色谱分析法色谱法概述PPT(完整版)
气液色谱的固定相: 固定液对试样中各组分的溶解能力的不同。
第五节 色谱定性、定量方法
由 担体和固定液所组成。
第四节 气相色谱操作条件选择
不不适适用用于于高高沸沸点点、、难难固挥挥发发定、、热热液不不稳稳对定定物物试质质的的样分分析析中。。 各组分的溶解能力的不同。
适用于沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。
分配系数 K的讨论
组分在固定相中的浓度 K 组分在流动相中的浓度
ª一定温度下，组分的分配系数K越大，出峰越慢； ª试样一定时，K主要取决于固定相性质； ª每个组份在各种固定相上的分配系数K不同； ª选择适宜的固定相可改善分离效果； ª试样中的各组分具有不同的K值是分离的基础； ª某组分的K = 0时，即不被固定相保留，最先流出。
气相色谱：流动相为气体（称为载气）。
用K 表示，即： 一定温度下，组分的分配系数K越大，出峰越慢；
不适用于高沸点、难挥发、热不稳定物质的分析。 试样一定时，K主要取决于固定相性质； 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。 固定液对试样中各组分的溶解能力的不同。 不适用于高沸点、难挥发、热不稳定物质的分析。
组分在固定相中的浓度 九十年代快速发展、特别适合生物试样分析分离的高效分析仪器。
固体吸附剂对试样中各组分的吸附能力的不同。 按分离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱；
K 按固定相的不同又分为：气固色谱和气液色谱 组分在流动相中的浓度 复杂混合物，有机同系物、异构体。
按分离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱；
色谱法
当流动相中携带的混合物流经固定相时， 其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组 分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生 的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移 动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡 ，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而 按一定次序由固定相中流出。与适当的柱后检 测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检 测。 ¨ 两相及两相的相对运动构成了色谱法的基础
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谱分析需试样量极少(g或ng). 3.分析速度快 4.应用范围广
缺点：对未知物的定性分析比较困难。 方向：高选择性检测器；联用技术（ GC-MS、 GC-FTIR、LC-MS、LC-NMR等）。
9.2 色谱分离原理
一、分离过程
特点：不同组分在柱中移动速度不等； 各组分沿柱子扩散分布。
二、色谱图及常用术语
Wb = 4
（四）保留值 1.保留值的定义
(1)死时间tM 不被固定相吸附或溶解的物质进入色谱柱时，从进样到出现
峰极大值所需的时间称为死时间.
tM
L u
L为柱长(cm) ū为流动相平均线速度(cm/s)
(2) 保留时间tR
试样从进样到柱后出现峰极大点时所经过的时间，称为保留
时间.
(3)调整保留时间tR´ tR´= tR tM
使用的定性数据。
从色谱流出曲线中，可得许多重要信息：
(1) 根据色谱峰的个数，可以判断样品中所含组分的最少个数； (2) 根据色谱峰的保留值，可以进行定性分析； (3) 根据色谱峰的面积或峰高，可以进行定量分析； (4) 色谱峰的保留值及其区域宽度，是评价色谱柱分离效能的依据； (5) 色谱峰两峰间的距离，是评价固定相（或流动相）选择是否合
k ' p csVs K Vs K
q cmVm
Vm
t' R2
k2'
K2
t' R1
k1'
K1
(k '
t' R2
)
tM
α是两个组分平衡常数或容量因子之比，是两组分在色谱
体系中平衡分配差异的量度，是热力学参数。它是柱温、组
分的性质、固定相和流动相的性质的函数。而与其它实验条
件，如柱径、柱长、填充情况及流动相流速等无关。是广泛
后再求其它峰（i）对这个峰的相对保留值 i / s 。
在多元混合物分析中，通常选择一对最难分离的物质对，
将它们的相对保留值作业重要参数，称选择因子，用符号表示，
即
t' R2
t' R1
式中tR (2)为后出峰的调整保留时间ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ所以总是大于1的。 可作为衡量固定相选择性的指标。
越大，越容易分离。=1，分离不能实现。
（二）峰高
色谱峰顶点与基线之间的垂直距离，以（h）表示。
（三）区域宽度
用于衡量柱效率及反映色谱操作条件的动力学因素。 表示色谱峰区域宽度通常有三种方法: 1)标准偏差---即0.607倍峰高处色谱峰宽的一半。 2)半峰宽W1/2---即峰高一半处的峰宽度。它与标准偏差的关系 为: W1/2=2.354 3)峰底宽度Wb--即色谱峰两侧拐点上的切线在基线上截距间的 距离。它与标准偏差的关系是
2. 保留值与平衡常数K 的关系
根据物料平衡： VRcm Vmcm Vscs
两边同除以cm:
VR
Vm
cs cm
Vs
平衡常数K＝cs/cm，且Vm≈VM: 或:
VR VM KVs VR' KVs
该式是色谱过程的基本方程，它将反映色谱行为的 保留值（ VR、 V'R 、 VM）与反映物质性质的热力学常 数K联系起来。
3. 保留值与容量因子的关系
k ' K 1 K Vs K Vs
Vm
VM
将色谱过程基本方程代入：
k ' VR VM Vs
Vs VM
可得： k' VR VM VR' tR' tR tM
VM
VM tM
tM
将该式改为： VR VM (1 k ')
tR tM (1 k ')
tR
L u
VM = Fc·tM
Fc:流动相平均体积流速,（单位:cm3·min-1）.
(5) 保留体积VR
指从进样开始到被测组分在柱后出现浓度极大点时所通过 的流动相的体积。保留时间与保留体积关系：
VR = Fc·tR (6)调整保留体积VR
某组分的保留体积扣除死体积后，称为该组分的调整保留体 积。
VR = VR VM = tR Fc
{ 根据流动相的
气相色谱(GC) 气-液色谱(GLC)
物态可分为
液相色谱(LC) 液-固色谱(LSC)
液-液色谱(LLC)
按固定相的固 定方式分类
填充柱色谱 柱色谱 毛细管柱色谱
平板色谱 纸色谱 薄层色谱
平板色谱
根据分离机理 可分为
吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 排阻色谱
色谱法的特点和应用
1.分离效能高 2.灵敏度高 可检测10-11~10-13g,适于痕量分析.色
适的依据。
9.3 色谱基本理论
分配系数和容量因子 塔板理论 速率理论 分离度
9.3 色谱基本理论 一、分配系数和容量因子
1. 分配系数（平衡常数）K
指在一定和温度和压力下，组分在两相间达到 分配平衡时，组分在固定相中的浓度cs与组分在流 动相中的浓度cm之比。
K cs cm
K： 与温度、压力有关外，还与组分性质、固定相
第9章 色谱法概论
概述
一、 “色谱法” 名称的由来
碳酸钙
(固定相)
石油醚(流动相)
色
}谱 带
植物色素分离图示
色谱法
是利用混合物不同组分在固定相和流 动相中分配系数(或吸附系数、渗透 性等)的差异，使不同组分在作相对 运动的两相中进行反复分配，实现分 离的分析方法。
9.1 色谱法的分类
气-固色谱(GSC)
由于组分在色谱柱中的保留时间tR包含了组分随流动相通过
柱子所需的时间和组分在固定相中滞留所须的时间，所以tR ´实
际上是组分在固定相中保留的总时间。
保留时间是色谱法定性的基本依据. 但同一组分的保留时间常受到流动相流速的影响，因此色谱 工作者有时用保留体积来表示保留值。
(4)死体积VM
不被保留的组分通过色谱柱所消耗的流动相的体积.
(1
k
')
4.相对保留值 2,1
某组分2的调整保留值与组分1的调整保留值之比，称为相对
保留值。
'
t R2
2,1
'
t R1
V' R2
V' R1
由于相对保留值只与柱温及固定相性质有关，而与柱径、柱 长、填充情况及流动相流速无关，因此，它在色谱法中，特别是 在气相色谱法中，广泛用作定性的依据。
在定性分析中，通常固定一个色谱峰作为标准（s），然
由检测器输出的信号强度对时间作图，所得 曲线称为色谱流出曲线。曲线上突起部分就是 色谱峰。
如果进样量很小，浓度很低，在吸附等温线 （气固吸附色谱）或分配等温线（气液分配色 谱）的线性范围内，则色谱峰是对称的。
（一） 基线
当没有待测组分进入检测器时,在实验操作条件下， 反映检测器噪声随时间变化的曲线称为基线，稳定的基 线应该是一条水平直线。
缺点：对未知物的定性分析比较困难。 方向：高选择性检测器；联用技术（ GC-MS、 GC-FTIR、LC-MS、LC-NMR等）。
9.2 色谱分离原理
一、分离过程
特点：不同组分在柱中移动速度不等； 各组分沿柱子扩散分布。
二、色谱图及常用术语
Wb = 4
（四）保留值 1.保留值的定义
(1)死时间tM 不被固定相吸附或溶解的物质进入色谱柱时，从进样到出现
峰极大值所需的时间称为死时间.
tM
L u
L为柱长(cm) ū为流动相平均线速度(cm/s)
(2) 保留时间tR
试样从进样到柱后出现峰极大点时所经过的时间，称为保留
时间.
(3)调整保留时间tR´ tR´= tR tM
使用的定性数据。
从色谱流出曲线中，可得许多重要信息：
(1) 根据色谱峰的个数，可以判断样品中所含组分的最少个数； (2) 根据色谱峰的保留值，可以进行定性分析； (3) 根据色谱峰的面积或峰高，可以进行定量分析； (4) 色谱峰的保留值及其区域宽度，是评价色谱柱分离效能的依据； (5) 色谱峰两峰间的距离，是评价固定相（或流动相）选择是否合
k ' p csVs K Vs K
q cmVm
Vm
t' R2
k2'
K2
t' R1
k1'
K1
(k '
t' R2
)
tM
α是两个组分平衡常数或容量因子之比，是两组分在色谱
体系中平衡分配差异的量度，是热力学参数。它是柱温、组
分的性质、固定相和流动相的性质的函数。而与其它实验条
件，如柱径、柱长、填充情况及流动相流速等无关。是广泛
后再求其它峰（i）对这个峰的相对保留值 i / s 。
在多元混合物分析中，通常选择一对最难分离的物质对，
将它们的相对保留值作业重要参数，称选择因子，用符号表示，
即
t' R2
t' R1
式中tR (2)为后出峰的调整保留时间ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ所以总是大于1的。 可作为衡量固定相选择性的指标。
越大，越容易分离。=1，分离不能实现。
（二）峰高
色谱峰顶点与基线之间的垂直距离，以（h）表示。
（三）区域宽度
用于衡量柱效率及反映色谱操作条件的动力学因素。 表示色谱峰区域宽度通常有三种方法: 1)标准偏差---即0.607倍峰高处色谱峰宽的一半。 2)半峰宽W1/2---即峰高一半处的峰宽度。它与标准偏差的关系 为: W1/2=2.354 3)峰底宽度Wb--即色谱峰两侧拐点上的切线在基线上截距间的 距离。它与标准偏差的关系是
2. 保留值与平衡常数K 的关系
根据物料平衡： VRcm Vmcm Vscs
两边同除以cm:
VR
Vm
cs cm
Vs
平衡常数K＝cs/cm，且Vm≈VM: 或:
VR VM KVs VR' KVs
该式是色谱过程的基本方程，它将反映色谱行为的 保留值（ VR、 V'R 、 VM）与反映物质性质的热力学常 数K联系起来。
3. 保留值与容量因子的关系
k ' K 1 K Vs K Vs
Vm
VM
将色谱过程基本方程代入：
k ' VR VM Vs
Vs VM
可得： k' VR VM VR' tR' tR tM
VM
VM tM
tM
将该式改为： VR VM (1 k ')
tR tM (1 k ')
tR
L u
VM = Fc·tM
Fc:流动相平均体积流速,（单位:cm3·min-1）.
(5) 保留体积VR
指从进样开始到被测组分在柱后出现浓度极大点时所通过 的流动相的体积。保留时间与保留体积关系：
VR = Fc·tR (6)调整保留体积VR
某组分的保留体积扣除死体积后，称为该组分的调整保留体 积。
VR = VR VM = tR Fc
{ 根据流动相的
气相色谱(GC) 气-液色谱(GLC)
物态可分为
液相色谱(LC) 液-固色谱(LSC)
液-液色谱(LLC)
按固定相的固 定方式分类
填充柱色谱 柱色谱 毛细管柱色谱
平板色谱 纸色谱 薄层色谱
平板色谱
根据分离机理 可分为
吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 排阻色谱
色谱法的特点和应用
1.分离效能高 2.灵敏度高 可检测10-11~10-13g,适于痕量分析.色
适的依据。
9.3 色谱基本理论
分配系数和容量因子 塔板理论 速率理论 分离度
9.3 色谱基本理论 一、分配系数和容量因子
1. 分配系数（平衡常数）K
指在一定和温度和压力下，组分在两相间达到 分配平衡时，组分在固定相中的浓度cs与组分在流 动相中的浓度cm之比。
K cs cm
K： 与温度、压力有关外，还与组分性质、固定相
第9章 色谱法概论
概述
一、 “色谱法” 名称的由来
碳酸钙
(固定相)
石油醚(流动相)
色
}谱 带
植物色素分离图示
色谱法
是利用混合物不同组分在固定相和流 动相中分配系数(或吸附系数、渗透 性等)的差异，使不同组分在作相对 运动的两相中进行反复分配，实现分 离的分析方法。
9.1 色谱法的分类
气-固色谱(GSC)
由于组分在色谱柱中的保留时间tR包含了组分随流动相通过
柱子所需的时间和组分在固定相中滞留所须的时间，所以tR ´实
际上是组分在固定相中保留的总时间。
保留时间是色谱法定性的基本依据. 但同一组分的保留时间常受到流动相流速的影响，因此色谱 工作者有时用保留体积来表示保留值。
(4)死体积VM
不被保留的组分通过色谱柱所消耗的流动相的体积.
(1
k
')
4.相对保留值 2,1
某组分2的调整保留值与组分1的调整保留值之比，称为相对
保留值。
'
t R2
2,1
'
t R1
V' R2
V' R1
由于相对保留值只与柱温及固定相性质有关，而与柱径、柱 长、填充情况及流动相流速无关，因此，它在色谱法中，特别是 在气相色谱法中，广泛用作定性的依据。
在定性分析中，通常固定一个色谱峰作为标准（s），然
由检测器输出的信号强度对时间作图，所得 曲线称为色谱流出曲线。曲线上突起部分就是 色谱峰。
如果进样量很小，浓度很低，在吸附等温线 （气固吸附色谱）或分配等温线（气液分配色 谱）的线性范围内，则色谱峰是对称的。
（一） 基线
当没有待测组分进入检测器时,在实验操作条件下， 反映检测器噪声随时间变化的曲线称为基线，稳定的基 线应该是一条水平直线。