光谱法研究高铁肌红蛋白活性中心与一氧化氮的配位反应

合集下载
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
合过程 [ 1 ] ,以动力学方法和理论计算方法居多 。
Baidu Nhomakorabea
肌红蛋 白( my o g l o b i n ,Mb ) 除在 肌 肉中具 有存储 氧气 功
能外 ,还具 有调节细胞 内 NO浓度 的功能 ,是心 脏和具有 氧 化性骨骼 细胞 中重要 的 N O“ 清 道夫 ” _ 3 ] 。所 以,探讨 血红 素 类蛋 白与 N 0 的作用对于生命活动正 常进行有着重要 的生理 意义 。近年来 , 关 于 Mb与 NO的报 道非 常活跃 ,但 大都 是 集 中在 M b ( Ⅱ) 与 N0 的研 究 L 4 ’ 5 1 ,而 对 于 Mb ( 1 1 1 ) 与 N0 的 研究相对较少 ,有关 外界 因素对 Mb ( 1 1 1 ) 与 NO配位 平衡 影 响 的研究 ,国 内 尚未 见 报道 ,国外 的研 究 也 多 集 中 在 Mb
文献标识码 :A D OI :1 0 . 3 9 6 4  ̄. i s s n . 1 0 0 0 — 0 5 9 3 ( 2 0 1 5 ) 0 7 — 1 9 6 7 — 0 6 ( 1 ] I ) 与 NO配位的动力学[ 6 ] 研究 。
中图分类号 : 06 5 7 . 3
引 言
1 1 6 6 2 2


蛋 白质与 配体 作 用 的瞬 时性对 调 节 生物 功能 的正 常发 挥 至关 重要 。采 用 紫外一 可 见 吸收 光谱 法
( UV - Vi s ) 和圆二色光谱法 ( C D) 研究 了高铁肌红蛋 白( me t My o g l o b i n , me t Mb ) 与一氧化 氮 的配位反应过 程 , 论证 了 me t Mb与 N 0配位反应机理 以及影 响配 位反应 的因素 。结果表 明 : me t Mb能与 N 0发 生配位反 应 , 4 2 0 , 5 3 4和 5 6 8 n I n处特征峰 的出现 ,表明 me t Mb与 NO结合并生 成一种新 的配合 物——亚 硝基 高铁 肌红
仪器厂) 。 试剂: 马心肌红蛋 白样 品 ( 纯度 在 9 6 以上 ,购 于美 国
S i g ma 公 司) ,Uv_ vi s吸 收光 谱 特征 峰 表 明其 几 乎 全部 为 me t Mb [ ,使用时将 其配制成 1 ×1 0 t oo l ・L 的储备 液 ,
收稿 日期 : 2 0 1 4 — 0 4 — 1 5 。 修订 日期 :2 0 1 4 — 0 8 — 1 5
仪器 : 7 - 5 6 0型紫外一 可见光谱仪 ( 日本 J AS C O公 司) ; J 一 8 1 0型圆二色光谱仪 ( 日本 J AS C O公司 ) ; 制冷和加热循环器 ( F - 1 2 , 德国J u l a b o 公 司) ;p H计 ( P HS J 一 4 A,上海 雷磁分析
第3 5 卷, 第7 期
2 0 1 5年 7月








Vo 1 . 3 5 , No . 7 , p p 1 9 6 7 — 1 9 7 2
S p e c t r o s c o p y a n d S p e c t r a l An a l y s i s
的 铁 原 子 发 生 配 位 反 应 而 对 蛋 白二 级 结 构 影 响甚 微 。探 讨 me t Mb与 NO配 位 反 应 机 制 对 于 进 一 步 研 究 生 物
体 内 N0功能的发挥有着重要 的指导意义 。
关键词
高铁肌红蛋 白; 一 氧化 氮 ; 亚硝基高铁肌红蛋 白;配位反应
蛋 白质 是生命 体最基本的结构和功能基础 , 是各 种生命
活 动的首要 “ 执行者” 和终极“ 控制者 ” , 几乎 参与并影 响生物
采用光谱法研究 me t Mb与 NO 的配位 反应 过程 ,同时 考察不同的外界因素对 me t Mb和 NO配位反应平衡 的影响 ,
找出 me t Mb与 NO配位反 应 的最佳条 件 ,并根 据实 验数据 提出一种 me t Mb与 N O配 位反 应机理 。本 实验 可为 生物体 内 Mb ( 1 ] I ) 对 NO活性 的调节 ,提供可靠的实验基 础。
J u l y,2 0 1 5
光谱 法研 究 高铁 肌 红 蛋 白活 性 中心 与一 氧化 氮 的 配位 反应
唐 乾L ,张 越 ,曹洪玉 ,史珊珊 ,郑学仿
1 .辽宁省生物有机化学重点实验室 ,辽宁 大连
2 .大 连 大 学 生命 科 学 与技 术 学 院 ,辽 宁 大 连
1 1 6 6 2 2
体 内所有 生命 活动 。 蛋 白质与配体作用 的瞬时性对调 节生物 功 能的正常发挥至关 重要 。 生命体 内蛋 白质 与配体 的研究备
受关 注 , 关 于血 红素 类 蛋 白质 与生 物 活性 小 分 子 ( 02 ,C O
1 实验部分
1 . 1 仪 器 与 试 剂
等) 的研 究 已成为焦点 ,研究 多集 中在 配体 的光解离 与再 结
蛋 白( n i t r o s y l me t my o g l o b i n ,me t Mb NO) 。随着时间的推移 , 溶液 中 NO浓度逐渐 减小 , me t Mb N O配合物 中
F e —N配位键在大量 H 0分 子的进攻 下断裂 , N O慢慢地脱离 , me t Mb N O配合物完成解离过程并重新生成
me t Mb 。 实验 中还发现 me t Mb与 N O配位反应 的进行受到缓 冲介质类型 、 离子强度 、p H及温度等外界 因素 的影响 。 并且在 0 . 0 1 mo l ・ L 磷酸盐缓 冲液近 中性条件时 ,me t Mb与 NO配位反应最先达到平衡 ;当温度 较低为 2 8 0 K时 , 更易于 me t Mb与 N 0配位反应 的进行 。此外 ,C D数据 表明 NO只与 me t Mb血红素 中心
相关文档
最新文档