[整理]中药注射剂指纹图谱研究的技术要求.
中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)
中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)关于印发《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》的通知国药管注[2000]348号2年8月15日发布各省、自治区、直辖市药品监督管理局：为加强中药注射剂质量管理，我局在《关于加强中药注册管理有关事宜的通知》(国药管注［2000］157号)中要求“中药注射剂应固定药材产地，建立药材和制剂的指纹图谱标准，具体要求另行发布”。
据此，我局在组织专家论证的基础上制定了《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》，现予发布，并就有关事宜通知如下：一、新的中药注射剂指纹图谱标准复核，临床试验用药品，其药材和制剂的指纹图谱标准由省级药品检验所复核；生产用药品，其制剂的指纹图谱标准由中国药品生物制品检定所进行二次复核。
二、已批准生产的中药注射剂，其质量标准若缺乏内在质量控制指标和无严格工艺条件，应提高和完善并起草试行标准，在此基础上制订药材和制剂的指纹图谱标准，试行标准起草管理要求同《中药仿制药品试行标准管理规定》，此项工作由国家药典委员会组织实施。
三、已批准多家生产的中药注射剂，各生产厂家可根据实际情况单独或联合起草药材和制剂的指纹图谱。
联合起草工作由国家药典委员会牵头组织进行。
四、已批准生产的中药注射剂，其药材和制剂的指纹图谱标准复核由省级药品检验所进行，需二次复核的品种由国家药典委员会组织完成。
五、制定指纹图谱所需的对照品(单一化合物或提取物)，由生产单位向中国药品生物制品检定所提供对照品原料及有关技术资料，经标定合格后统一发放。
附件：《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》国家药品监督管理局二○○○年八月十五日中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）为了加强中药注射剂的质量管理，确保中药注射剂的质量稳定、可控，中药注射剂在固定中药材品种、产地和采收期的前提下，需制定中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。
一、注射剂用中药材指纹图谱研究的技术要求中药材指纹图谱系指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药材特性的共有峰的图谱。
指纹图谱技术要求
中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）为了加强中药注射剂的质量管理，确保中药注射剂的质量稳定、可控，中药注射剂在固定中药材品种、产地和采收期的前提下，需制定中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。
一、注射剂用中药材指纹图谱研究的技术要求中药材指纹图谱系指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药材特性的共有峰的图谱。
如原药材需经过特殊炮制（如醋制、酒制、炒炭等），则应制定原药材和炮制品指纹图谱的检测标准。
(一)指纹图谱的检测标准包括名称、汉语拼音、拉丁名、来源、供试品和参照物的制备、检测方法、指纹图谱及技术参数。
有关项目的技术要求如下：1.名称、汉语拼音按中药命名原则制定2.来源包括原植、动物的科名、中文名、拉丁学名、药用部位、产地、采收季节、产地加工、炮制方法等，矿物药包括矿物的类、族、矿石名或岩石名、主要成分、产地、产地加工、炮制方法等。
动、植物药材均应固定品种、药用部位、产地、采收期、产地加工和炮制方法，矿物药应固定产地和炮制、加工方法。
供试品的取样参照《中国药典》2000年版中规定的中药材的取样方法，以保证供试品的代表性和均一性。
3.供试品的制备应根据中药材中所含化学成分的理化性质和检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备。
制备方法必须确保该中药材的主要化学成分在指纹图谱中的体现。
对于仅提取其中某类或数类成分的中药材，除按化学成分的性质提取各类成分制定指纹图谱外，还需按注射剂制备工艺制备供试品，制定指纹图谱，用以分析中药材与注射剂指纹图谱的相关性。
4.参照物的制备制定指纹图谱必须设立参照物，应根据供试品中所含成分的性质，选择适宜的对照品作为参照物，如果没有适宜的对照品，可选择适宜的内标物作为参照物。
参照物的制备应根据检测方法的需要，选择适宜的方法进行。
5.测定方法包括测定方法、仪器、试剂、测定条件等。
应根据中药材所含化学成分的理化性质，选择适宜的测定方法。
建议优先考虑色谱方法。
中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)
中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）为了加强中药注射剂的质量管理，确保中药注射剂的质量稳定、可控，中药注射剂在固定中药材品种、产地和采收期的前提下，需制定中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。
一、注射剂用中药材指纹图谱研究的技术要求中药材指纹图谱系指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药材特性的共有峰的图谱。
如原药材需经过特殊炮制（如醋制、酒制、炒炭等），则应制定原药材和炮制品指纹图谱的检测标准。
(一)指纹图谱的检测标准包括名称、汉语拼音、拉丁名、来源、供试品和参照物的制备、检测方法、指纹图谱及技术参数。
有关项目的技术要求如下：1.名称、汉语拼音按中药命名原则制定。
2.来源包括原植、动物的科名、中文名、拉丁学名、药用部位、产地、采收季节、产地加工、炮制方法等，矿物药包括矿物的类、族、矿石名或岩石名、主要成分、产地、产地加工、炮制方法等。
动、植物药材均应固定品种、药用部位、产地、采收期、产地加工和炮制方法，矿物药应固定产地和炮制、加工方法。
供试品的取样参照《中国药典》2000年版中规定的中药材的取样方法，以保证供试品的代表性和均一性。
3.供试品的制备应根据中药材中所含化学成分的理化性质和检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备。
制备方法必须确保该中药材的主要化学成分在指纹图谱中的体现。
对于仅提取其中某类或数类成分的中药材，除按化学成分的性质提取各类成分制定指纹图谱外，还需按注射剂制备工艺制备供试品，制定指纹图谱，用以分析中药材与注射剂指纹图谱的相关性。
4.参照物的制备制定指纹图谱必须设立参照物，应根据供试品中所含成分的性质，选择适宜的对照品作为参照物，如果没有适宜的对照品，可选择适宜的内标物作为参照物。
参照物的制备应根据检测方法的需要，选择适宜的方法进行。
5.测定方法包括测定方法、仪器、试剂、测定条件等。
应根据中药材所含化学成分的理化性质，选择适宜的测定方法。
中药注射剂指纹图谱研究的技术要求
中药注射剂指纹图谱研究的技术要求中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）为了加强中药注射剂的质量管理，确保中药注射剂的质量稳定、可控，中药注射剂在固定中药材品种、产地和采收期的前提下，需制定中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。
一、注射剂用中药材指纹图谱研究的技术要求中药材指纹图谱系指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药材特性的共有峰的图谱。
如原药材需经过特殊炮制（如醋制、酒制、炒炭等），则应制定原药材和炮制品指纹图谱的检测标准。
(一)指纹图谱的检测标准包括名称、汉语拼音、拉丁名、来源、供试品和参照物的制备、检测方法、指纹图谱及技术参数。
有关项目的技术要求如下：1.名称、汉语拼音按中药命名原则制定。
2.来源包括原植、动物的科名、中文名、拉丁学名、药用部位、产地、采收季节、产地加工、炮制方法等，矿物药包括矿物的类、族、矿石名或岩石名、主要成分、产地、产地加工、炮制方法等。
动、植物药材均应固定品种、药用部位、产地、采收期、产地加工和炮制方法，矿物药应固定产地和炮制、加工方法。
供试品的取样参照《中国药典》2000年版中规定的中药材的取样方法，以保证供试品的代表性和均一性。
3.供试品的制备应根据中药材中所含化学成分的理化性质和检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备。
制备方法必须确保该中药材的主要化学成分在指纹图谱中的体现。
对于仅提取其中某类或数类成分的中药材，除按化学成分的性质提取各类成分制定指纹图谱外，还需按注射剂制备工艺制备供试品，制定指纹图谱，用以分析中药材与注射剂指纹图谱的相关性。
4.参照物的制备制定指纹图谱必须设立参照物，应根据供试品中所含成分的性质，选择适宜的对照品作为参照物，如果没有适宜的对照品，可选择适宜的内标物作为参照物。
参照物的制备应根据检测方法的需要，选择适宜的方法进行。
5.测定方法包括测定方法、仪器、试剂、测定条件等。
应根据中药材所含化学成分的理化性质，选择适宜的测定方法。
中药注射剂指纹图谱的建立与应用 [兼容模式]
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中药注射剂指纹图谱的建立与应用王祥红2015-6-4201564wch835@C ONTENTS目录1指纹图谱概念、特性与应用指纹图谱的历史与作用意义4指纹图谱相关注射剂指纹图谱25法规要求的建立TLC VS HPLC6研究实例TLC VS HPLC 3一、指纹图谱的概念与特性•运用现代分析技术对中药（注射剂）化学信息以图形（图像）的形式进行表征并加以描术以描术。
•特性：整体性模糊性指纹图谱的历史与作用意义萌芽与提出1970-1990年代指纹1热火研究期2000年-2005图谱2退烧期2005年-2010年的过3沉淀与应用期2010年至今去与现在4二、指纹图谱的作用与地位---试说中药质量控制的几个阶段5m335nm270nm 版药典--DNA 分子条码15DNA指纹图谱的局限图谱局1、检测能力有限-高分子糖类及蛋白2、对于安全性项目如：不溶性微粒、无菌、热原（内毒素）等项目基本无帮助3、谱效结合难度大4、如何与中医理论结合（四气五味、性味归经？）如何与中医理论结合（四气五味性味归经？）指纹图谱相关法规关于加强中药注册管理有关事宜的通知(2000-04-14)针对已批准生产中药注射剂不良反应发生较多、原因复杂的情况，为加强中药注射剂的质量管理，决定：情况为加强中药注射剂的质量管理决定暂停中药注射剂的仿制审批（一）暂停中药注射剂的仿制审批。
（二）新药中药注射剂应固定药材产地，建立药材和制剂的指纹图谱标准，具体要求另行发布。
指纹图谱标准具体要求另行发布(暂行)》《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(2000-08-15)主要内容：主要内容1、药材：其指纹图谱的记录时间一般为1小时根据10批次以供试品的检测结果所给出的相关参数，制定指纹图谱以上供试品的检测结果所给出的相关参数，制定指纹图谱。
共有指纹峰面积的比值。
中药材供试品的图谱与指纹图谱比较，非共有峰总面积不得大于总峰面积的10％。
％2、成品及中间体：根据10批次以上供试品的检测结果，标定共有指纹峰。
中药指纹图谱研究技术要点
中药指纹图谱研究技术要点中药指纹图谱是指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段和仪器检测得到的，能够标示该中药及其制剂中的各种组分群体特性的共有峰的图谱。
通过指纹图谱整体特征峰的相对保留时间及含量或比例的制定和比对，可有效地控制中药材及中药产品质量，保证产品质量的相对稳定。
目前，指纹图谱已成为国际公认的控制中药或天然药物质量的最有效手段。
实施中药指纹图谱难免会有一个提高、完善的过程。
从技术上说，中药指纹图谱的建立是完全可行的，但在实际应用中，还要解决诸多问题。
中药指纹图谱研究的技术要点主要有以下几个方面。
■中药材来源及样品处理对制作指纹图谱的动、植物药材必须做到固定品种、药用部位、产地、采收期、产地加工和炮制方法。
对矿物药应固定产地和炮制、加工方法，这是制定合格指纹图谱的先决条件。
对供试样品的取样应注意样品的代表性与均匀性，以保持实验室取样与实际生产应用药材一致。
除此之外，还必须做到组方和用量固定，生产工艺稳定。
■检测方法作为一张合格的指纹图谱必须具有特征明显、专属性强、重现性好的特点，而且要求做到操作和应用方便。
目前最常采用的制备中药指纹图谱的检测方法有光谱法和色谱法。
光谱方法如紫外光谱和红外光谱在实际应用中能提供识别的信息较少，往往当同类化合物其取代基团发生变化时，对应的光谱却难以体现出来，建议尽量不要采用。
色谱法最大特点在于可进行复杂组分的成分分离，特别是新的高效、通用检测器的发展和引入，使得采用色谱法检测可得到足够多的图谱识别信息，是目前制备指纹图谱的主流方法。
尤其是薄层色谱(TLC)、气相色谱(GC)和高效液相色谱(HPLC)技术已成为3种公认常用的指纹图谱分析手段。
其中特别又以HPLC分离效率高、分析速度快、样品适应性广、检测器种类多、灵敏度高、稳定性、重复性好而备受推崇，成为制备指纹图谱的首选方法。
参照物的选择：以色谱法制备得到的特征指纹图谱识别信息，主要是色谱峰的相对保留时间和相对峰面积比值。
国家局关于指纹图谱的定义(精)
国家药品监督管理局二○○○年八月十五日为了加强中药注射剂的质量管理，确保中药注射剂的质量稳定、可控，中药注射剂在固定中药材品种、产地和采收期的前提下，需制定中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。
一、注射剂用中药材指纹图谱研究的技术要求中药材指纹图谱系指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药材特性的共有峰的图谱。
如原药材需经过特殊炮制（如醋制、酒制、炒炭等），则应制定原药材和炮制品指纹图谱的检测标准。
(一)指纹图谱的检测标准包括名称、汉语拼音、拉丁名、来源、供试品和参照物的制备、检测方法、指纹图谱及技术参数。
有关项目的技术要求如下：1.名称、汉语拼音按中药命名原则制定。
2.来源包括原植、动物的科名、中文名、拉丁学名、药用部位、产地、采收季节、产地加工、炮制方法等，矿物药包括矿物的类、族、矿石名或岩石名、主要成分、产地、产地加工、炮制方法等。
动、植物药材均应固定品种、药用部位、产地、采收期、产地加工和炮制方法，矿物药应固定产地和炮制、加工方法。
供试品的取样参照《中国药典》2000年版中规定的中药材的取样方法，以保证供试品的代表性和均一性。
3.供试品的制备应根据中药材中所含化学成分的理化性质和检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备。
制备方法必须确保该中药材的主要化学成分在指纹图谱中的体现。
对于仅提取其中某类或数类成分的中药材，除按化学成分的性质提取各类成分制定指纹图谱外，还需按注射剂制备工艺制备供试品，制定指纹图谱，用以分析中药材与注射剂指纹图谱的相关性。
4.参照物的制备制定指纹图谱必须设立参照物，应根据供试品中所含成分的性质，选择适宜的对照品作为参照物，如果没有适宜的对照品，可选择适宜的内标物作为参照物。
参照物的制备应根据检测方法的需要，选择适宜的方法进行。
5.测定方法包括测定方法、仪器、试剂、测定条件等。
应根据中药材所含化学成分的理化性质，选择适宜的测定方法。
建议优先考虑色谱方法。
中药指纹研究技术
☆ 品种鉴别--真伪☆ 基源鉴别--产地☆ 药用部位的鉴别--根、茎、叶、花、 果☆ 提取工艺☆ 药材炮制☆ 限量成分的控制☆ 一致性--不同批次的产品.
6. 指纹图谱研究目的
品种多、产地多;采收、加工不一致 －化学组分与含量不同 （产品品质优劣不同） 有效组分种类繁多、含量相对少；非有效组分成 分复杂、含量高 －分析检测困难 （质量控制指标不统一） 基础研究薄弱 药材GAP建设滞后
内 容
一、中药指纹图谱技术概述二、中药指纹图谱研究指导原则三、指纹图谱研究的相似度计算四、中药指纹图谱的研究方法与思路五、中药指纹图谱研究示例演示（实验）
一、中药指纹图谱技术概述
（一） 中药指纹图谱与中药质量（二） 中药指纹图谱研究方法学（三） 中药指纹图谱技术的发展
（二）、样品的选择与收集
要求： 10个批次 道地药材与GAP基地药材 典型性与代表性 离散样品的剔除
（三）、供试品的制备
依据： 有效组分的物理化学性质 生产或提取工艺 检测方法的需要
（四）、指纹图谱色谱条件研究的思路
Lichosorb
Polaris
Kromasil
Diamonsil
Carbosorb
（5） 检测成分的选择 （重点）
示
何首乌生品的液相色谱图（局部放大图）
图9 上海制首乌指纹图谱
北京良方药业制首乌
指 纹 图 谱
稳 定 性
可 控 性
安 全 性
有 效 性
1. 中药指纹图谱与中药安全、有效、稳定的关系
（一） 中药指纹图谱与中药质量
2. 国内中药质量评价现状
植物学方法： 原植物鉴定，显微鉴定等植物化学方法： 理化鉴定分析化学方法： 仪器分析，色谱分析等药理学方法： 生物鉴定法，生物等效等分子生物学方法: DNA指纹鉴定
最新中药注射剂指纹图谱研究的技术要求
中药注射剂指纹图谱研究的技术要求中药注射剂指纹图谱研究的技术要求为了加强中药注射剂的质量管理，确保中药注射剂的质量稳定、可控，中药注射剂在固定中药材品种、产地和采收期的前提下。
需制定中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。
一、注射剂用中药材指纹图谱研究的技术要求中药材指纹图谱系指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药材特性的共有峰的图谱。
如原药材需经过特殊炮制(如醋制、酒制、炒炭等)，则应制定原药材和炮制品指纹图谱的检测标准。
(一)指纹图谱的检测标准包括名称、汉语拼音、拉丁名、来源、供试品和参照物的制备、检测方法、指纹图谱及技术参数。
有关项目的技术要求如下：1.名称、汉语拼音按中药命名原则制定。
2.来源包括原植、动物的科名、中文名、拉丁学名、药用部位、产地、采收季节、产地加工、炮制方法等，矿物药包括矿物的类、族、矿石名或岩石名、主要成分、产地、产地加工、炮制方法等。
动、植物药材均应固定品种、药用部位、产地、采收期、产地加工和炮制方法，矿物药应固定产地和炮制、加工方法。
供试品的取样参照《中国药典》2000年版中规定的中药材的取样方法，以保证供试品的代表性和均一性。
3．供试品的制备应根据中药材中所令化学成分的理化性质和检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备。
制备方法必须确保该中药材的主要化学成分在指纹图谱中的体现。
对于仅提取其中某类或数类成分的中药材，除按化学成分的性质提取各类成分制定指纹图谱外，还需按注射剂制备工艺制备供试品，制定指纹图谱，用以分析中药材与注射剂指纹图谱的相关性。
4．参照物的制备制定指纹图谱必须设立参照物，应根据供试品中所合成分的性质，选择适宜的对照品作为参照物，如果没有适宜的对照品，可选择适宜的内标物作为参照物。
参照物的制备应根据检测方法的需要，选择适宜的方法进行。
5．测定方法包括测定方法、仪器、试剂、测定条件等。
应根据中药材所合化学成分的理化性质，选择适宜的测定方法。
中药指纹图谱操作技巧指南
中药指纹图谱操作指南说明：本实验研究规程指南为在原技术要求的基础上规范中药注射剂色谱指纹图谱试验研究而制订。
本指南未能概括的内容，通过实践可自行补充调整，但申报资料或复核资料中须有相应的说明和申述。
指南中的"色谱指纹图谱"指采用柱色谱及薄层色谱等各种色谱技术实验研究的指纹图谱。
光谱指纹图谱将另行规定。
一、供试品收集供试品收集是研究指纹图谱最初也是最关键的步骤，由于不可能对一个药材的所有样本进行试验，而且生长环境条件对药材代谢产物有影响，所以要收集有代表性的供试品。
收集不少于10批供试品的含义是指样本的数和量要有足够的代表性。
(一) 原料药材：在药材的化学成分与中医临床疗效的之间的关联尚未能阐明的现阶段，基本上是在承认其传统的功能主治及临床验证的基础上进行指纹图谱的实验研究。
原料药材的指纹图谱主要是反映其自然状态的内在质量情况，研究其指纹图谱是以此作为选择原药材投料或混批提取的依据，同时作为研究注射剂成品指纹图谱相关性的基础。
由于自然条件的变化，药材个体之间指纹图谱的差异是正常的，在品种鉴定无误的基础上，力争药材有较为固定和稳定的来源，个体之间的指纹图谱主要特征大致相似即可，使成品指纹图谱特征的稳定有起码的保证。
药材的"批" 不是工业生产的"批"，是指相互独立的供试品，即不能将同一地点或同一渠道同一时间获得的供试品分成若干份供试品，以保证试验结果的代表性。
由于收集药材供试品受主观和客观的条件限制，供试验的供试品严格讲均没有统计学的意义，所以供试品数越多越好，10批是最低的要求。
供试品应保证其真实性，应有完整采样原始记录，内容包括：药材名称供试品来源（真实记录供试品来自何处：传统产地收集或是资源丰富的产地收集，或者来自GAP基地供应；还是产地购买、市场购买或委托购买，等，以便于生产原料的采购选择和测试数据的可追溯）。
收集时间（购买时间）及收集人货源情况调查（货源是否充足和稳定）基原鉴定及鉴定人：产地或GAP基地收集的药材结合植物形态鉴定品种。
中药指纹图谱的研究
中药指纹图谱的研究中药是中医防病治病的物质基础，其质量直接影响中医的临床疗效和中药的实验研究，也是关系到用药安全的大事。
因此，中药的质量控制一直是中药研究和生产领域里的重要研究课题。
建立科学、合理和可行的中药质量控制体系对中药事业的发展具有重要的意义。
一、开展中药指纹图谱研究的必要性从中药的实质上讲，它们是完全由非常多的化学物质按照特定的相对含量比例组合而成的复杂的复方制剂。
从化学的角度出发，要实现这一复杂的复方制剂的质量控制，除主成分含量测定等相关项目的检查外，理论上应将其全部的化学物质的结构和相对组成方式完全阐明；并且由于中药药效是多种化学物质综合作用的结果，因此，各化学成分的相对含员的阐明非常重要。
但是 捎谥幸┗ С煞值母丛有裕 沟谜庖焕砺凵柘朐谀壳吧胁痪弑缚尚行浴?BR>对于不同的中药（包括药材和中药复方制剂），它们本质上的差别是所含化学成分（主要是特征性化学成分）及其相对组合方式的不同。
一般地讲，由于特征性化学成分的结构特殊，因此多具有某方面的牛理活性，它们的整体组成往往决定了中药的质量。
通过对植物化学成分的共性和特性分析，采用现代分析手段，我们可以用一定的提取分离程序去除那些存在于中药中的非特征性成分，获取每种中药的具有特征性的化学成分的总提取物（称其为植物中药特征总提物或植物中药特征性标准提取物）；再根据不同的化合物具有不问的谱学特征，通过测定这种特征总提物的各种色谱和光谱图谱（这就是中药特征性总成分的指纹图谱）来达到表征其相对化学组成和结构等化学特征的目的。
我们认为，这种中药特征总提物的色谱和光谱指纹图谱给出了其特征性化学成分的结构和相对组成方式等多方面重要的信息，用规范的操作程序获得的标准样品的指纹图谱可以代表中药的整体化学特征。
对于中药的质量控制来说，如果将这种中药特征总提物的指纹图谱与现有其它各种中药质控方法结合起来，综合分析，就能更加客观地从整体上评价中药的内在质量。
中药注射剂色谱指纹图谱实验研究技术指南(试行)
(二) 半成品(提取物)：药材所含成分的个体差异是难以避免的，指纹图谱研究用的半成品应来自生产车间通过药材混批调整及规范的生产工艺生产的实际样品。关键技术及相应参数填写于表二，并附试验完毕后指纹图谱。
表二（推荐）
半成品（提取物）名称
混批前批号
日期
提取方法（关键技术）
中药注射剂色谱指纹图谱实验研究技术指南（试行）
国家药典委员会
2002年4月27日
说明：本实验研究规程指南为在原技术要求的基础上规范中药注射剂色谱指纹图谱试验研究而制订。本指南未能概括的内容，通过实践可自行补充调整，但申报资料或复核资料中须有相应的说明和申述。指南中的"色谱指纹图谱"指采用柱色谱及薄层色谱等各种色谱技术实验研究的指纹图谱。光谱指纹图谱将另行规定。
如以中药饮片或炮制品为起始原料，应采用符合中国药典或饮片炮制规范的供试品。
申报资料可将关键内容扼要填写于表一中：
表一（推荐）
药材名称
供试品编号
供试品来源
收集时间（购买时间）及收集人
货源情况调查
基原鉴定及鉴定人
学名： 鉴定人：
质量评估
供试品留样
数量： 容器： 贮藏地点及条件：
标签
原始记录保存处
附一：药材外形照片。
(二)参照物溶液的制备：精密称取，用适宜的溶剂制成标示浓度的溶液，备用。
四、实验
常用的色谱技术有薄层色谱、液相色谱、气相色谱及其他色谱技术。须注意各种色谱技术的特点和不足，结合实际选用。不论何种色谱技术，选用的原则是必需具有良好的专属性、重现性和可行性。
专属性：建立的指纹图谱必须能够表达该品种的特征，即唯一性。
药材名称
供试品来源（真实记录供试品来自何处：传统产地收集或是资源丰富的产地收集，或者来自GAP基地供应；还是产地购买、市场购买或委托购买，等，以便于生产原料的采购选择和测试数据的可追溯）。
中药指纹图谱操作指南
中药指纹图谱操作指南说明：本实验研究规程指南为在原技术要求的基础上规中药注射剂色谱指纹图谱试验研究而制订。
本指南未能概括的容，通过实践可自行补充调整，但申报资料或复核资料中须有相应的说明和申述。
指南中的"色谱指纹图谱"指采用柱色谱及薄层色谱等各种色谱技术实验研究的指纹图谱。
光谱指纹图谱将另行规定。
一、供试品收集供试品收集是研究指纹图谱最初也是最关键的步骤，由于不可能对一个药材的所有样本进行试验，而且生长环境条件对药材代产物有影响，所以要收集有代表性的供试品。
收集不少于10批供试品的含义是指样本的数和量要有足够的代表性。
(一) 原料药材：在药材的化学成分与中医临床疗效的之间的关联尚未能阐明的现阶段，基本上是在承认其传统的功能主治及临床验证的基础上进行指纹图谱的实验研究。
原料药材的指纹图谱主要是反映其自然状态的在质量情况，研究其指纹图谱是以此作为选择原药材投料或混批提取的依据，同时作为研究注射剂成品指纹图谱相关性的基础。
由于自然条件的变化，药材个体之间指纹图谱的差异是正常的，在品种鉴定无误的基础上，力争药材有较为固定和稳定的来源，个体之间的指纹图谱主要特征大致相似即可，使成品指纹图谱特征的稳定有起码的保证。
药材的"批" 不是工业生产的"批"，是指相互独立的供试品，即不能将同一地点或同一渠道同一时间获得的供试品分成若干份供试品，以保证试验结果的代表性。
由于收集药材供试品受主观和客观的条件限制，供试验的供试品严格讲均没有统计学的意义，所以供试品数越多越好，10批是最低的要求。
供试品应保证其真实性，应有完整采样原始记录，容包括：药材名称供试品来源（真实记录供试品来自何处：传统产地收集或是资源丰富的产地收集，或者来自GAP基地供应；还是产地购买、市场购买或委托购买，等，以便于生产原料的采购选择和测试数据的可追溯）。
收集时间（购买时间）及收集人货源情况调查（货源是否充足和稳定）基原鉴定及鉴定人：产地或GAP基地收集的药材结合植物形态鉴定品种。
中药注射剂指纹图谱研究的技术要求共115页文档
中药注射剂指纹图谱研究的技Fra bibliotek要求16、自己选择的路、跪着也要把它走 完。 17、一般情况下)不想三年以后的事， 只想现 在的事 。现在 有成就 ，以后 才能更 辉煌。
18、敢于向黑暗宣战的人，心里必须 充满光 明。 19、学习的关键--重复。
20、懦弱的人只会裹足不前，莽撞的 人只能 引为烧 身，只 有真正 勇敢的 人才能 所向披 靡。
6、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。——斯宾诺莎 7、自知之明是最难得的知识。——西班牙 8、勇气通往天堂，怯懦通往地狱。——塞内加 9、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。——赫尔普斯 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。——笛卡儿
中药注射剂的指纹图谱
溶于水
溶于水
1-3%
0.25-0.5 %
偏碱性药液
偏酸性药液
调节pH
一般要求
pH4.0-9.0
酸 碱 缓冲液
减轻疼痛
苯甲醇
1-2%，兼抑菌，吸收差，产生硬块，影响吸收
盐酸普鲁卡因
0.2-1%，作用时间短，有过敏反应
0.3-1%，兼抑菌 0.2-0.5%，止痛作用较强、持久，过敏反应率低
酸碱破坏
重铬酸钾+浓硫酸
检查方法
ห้องสมุดไป่ตู้
化学方法：无
无恒定的MW，无法得到标准对照品
生物测定法：常用 家兔致热实验法：药典法定方法
一定剂量的药品，iv
规定时间内家兔体温变化 灵敏度：0.001ug内毒素
鲎试验法
Limulus amebocyte lysate(LAL) test
原理
鲎试剂 + 细菌内毒素 — 凝聚反应
鲎试剂：东方鲎的血液变形细胞溶解物的冻干品 其中有能被内毒素激活的凝固酶原/蛋白原 灵敏度：0.0001ug内毒素 对G-以外的内毒素不敏感
方法敏感
10.3 注射剂的溶剂
注射溶剂
水
质量要求 制备 贮存 注射用油 其他溶剂
偏酸性药液
对铁及一般生物碱 都有配伍禁忌，最 佳适于偏酸性溶液
氯甲酚 Chlorocresol
三氯叔丁醇 Chlorobutanol 苯甲醇 Benzyl Alcohol 苯乙醇 Phenethanolum
极微溶于水
中药质量评价及中药注射剂指纹图谱的技术要求实例解析
中药质量评价及中药注射剂指纹图谱的技术要求实例解析果德安
【期刊名称】《中国药品标准》
【年(卷),期】2000(001)004
【摘要】中药的质量评价一直是中药研究与应用中的难点与重点问题，中药虽然已有上千年实际应用历史，但如何有效地评价中药的质量，如何保证中药的疗效是一个越来越需要迫切解决的问题。
随着中国进入世贸组织步伐的加快，作为医药界为数不多的具有自主知识产权的中药产品，如何被世界所认同和接受，已经成为医药产业面临的重要课题。
【总页数】5页(P29-33)
【作者】果德安
【作者单位】北京大学药学院北京100083
【正文语种】中文
【中图分类】R286
【相关文献】
1.关于印发《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》的通知 [J], 国家药品监督管理局
2.中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行) [J], 国家药品监督管理局
3.中药注射剂指纹图谱技术要求研讨会 [J], 钱忠直;翟为民
4.先实践，通过实践再完善在“实施中药注射剂指纹图谱标准管理及技术要求工作研讨会”开幕式上的讲话（摘要） [J], 任德权
5.团结协作勇于开拓在“实施中药注射剂指纹图谱标准管理及技术要求工作研讨会”闭幕式上的讲话 [J], 王志清
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中药注射剂指纹图谱研究的技术要求为了加强中药注射剂的质量管理，确保中药注射剂的质量稳定、可控，中药注射剂在固定中药材品种、产地和采收期的前提下。
需制定中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。
一、注射剂用中药材指纹图谱研究的技术要求中药材指纹图谱系指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药材特性的共有峰的图谱。
如原药材需经过特殊炮制(如醋制、酒制、炒炭等)，则应制定原药材和炮制品指纹图谱的检测标准。
(一)指纹图谱的检测标准包括名称、汉语拼音、拉丁名、来源、供试品和参照物的制备、检测方法、指纹图谱及技术参数。
有关项目的技术要求如下：1.名称、汉语拼音按中药命名原则制定。
2.来源包括原植、动物的科名、中文名、拉丁学名、药用部位、产地、采收季节、产地加工、炮制方法等，矿物药包括矿物的类、族、矿石名或岩石名、主要成分、产地、产地加工、炮制方法等。
动、植物药材均应固定品种、药用部位、产地、采收期、产地加工和炮制方法，矿物药应固定产地和炮制、加工方法。
供试品的取样参照《中国药典》2000年版中规定的中药材的取样方法，以保证供试品的代表性和均一性。
3．供试品的制备应根据中药材中所令化学成分的理化性质和检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备。
制备方法必须确保该中药材的主要化学成分在指纹图谱中的体现。
对于仅提取其中某类或数类成分的中药材，除按化学成分的性质提取各类成分制定指纹图谱外，还需按注射剂制备工艺制备供试品，制定指纹图谱，用以分析中药材与注射剂指纹图谱的相关性。
4．参照物的制备制定指纹图谱必须设立参照物，应根据供试品中所合成分的性质，选择适宜的对照品作为参照物，如果没有适宜的对照品，可选择适宜的内标物作为参照物。
参照物的制备应根据检测方法的需要，选择适宜的方法进行。
5．测定方法包括测定方法、仪器、试剂、测定条件等。
应根据中药材所合化学成分的理化性质，选择适宜的测定方法。
建议优先考虑色谱方法。
对于成分复杂的中药材，必要时可以考虑采用多种测定方法，建立多张指纹图谱。
以色谱方法制定指纹图谱所采用的色谱柱、薄层板、试剂、测定条件等必须固定；以光谱方法制定指纹图谱，相应的测定条件也必须固定。
6．指纹图谱及技术参数(1)指纹图谱根据供试品的检测结果，建立指纹图谱。
采用高效液相色谱法和气相色谱法制定指纹图谱，其指纹图谱的记录时间一般为l小时；采用薄层扫描法制定指纹图谱，必须提供从原点至溶剂前沿的图谱；采用光谱方法制定指纹图谱，必须按各种光谱的相应规定提供全谱。
对于化学成分类型复杂品种，必要时可建立多张指纹图谱。
指纹图谱的建立：根据10批次以上供试品的检测结果所给出的相关参数，制定指纹图谱。
(2)共有指纹峰的标定采用色谱方法制定指纹图谱，必须根据参照物的保留时间，计算指纹峰的相对保留时间。
根据10批次以上供试品的检测结果，标定中药材的共有指纹峰。
色谱法采用相对保留时间标定指纹峰，光谱法采用波长或波数标定指纹峰。
(3)共有指纹峰面积的比值以对照品作为参照物的指纹图谱，以参照物峰面积作为1，计算各共有指纹峰面积与参照物峰面积的比值；以内标物作为参照物的指纹图谱，则以共有指纹峰中其中一个峰(要求峰面积相对较大、较稳定的共有峰)的峰面积作为1，计算其它各共有指纹峰面积的比值。
各共有指纹峰的面积比值必须相对固定。
中药材的供试品图谱中各共有峰面积的比值与指纹图谱各共有峰面积的比值比较，单峰面积占总峰面积大于或等于20％的共有峰，其差值不得大于土20％；单峰面积占总峰面积大于或等于10％，而小于20％的共有峰，其差值不得大于土25％；单峰面积占总峰面积小于10％的共有峰，峰面积比值不作要求，但必须标定相对保留时间。
未达基线分离的共有峰，应计算该组峰的总峰面积作为峰面积，同时标定该组各峰的相对保留时间。
(4)非共有峰面积中药材供试品的图谱与指纹图谱比较，非共有峰总面积不得大于总峰面积的10％。
(二)起草说明目的在于说明制定指纹图谱检测标准中各个项目的理由，规定各项目指标的依据、技术条件和注意事项等，既要有理论解释，又要有实践工作的总结及试验数据。
具体要求如下：1．名称、汉语拼音阐明确定该名称的理由与依据。
2．来源(1)对于多来源的中药材，必须固定单一品种。
对于多药用部位的中药材。
必须固定单一药用部位。
已有国家标准(包括药典和部颁标准)的中药材，应引用国家标准；已有地方标准的中药材，除引用地方标准外，必须附标准的复印件。
(2)注射剂用中药材一般固定一个产地，如固定多个产地，需制定各产地中药材的指纹图谱。
(3)注射剂用中药材一般固定一个采收期，如固定多个采收期，需制定各采收期中药材的指纹图谱。
(4)在注射剂申报中，鼓励建立中药材规范化栽培基地或选用已有的规范化栽培基地生产的中药材。
(5)中药材的炮制必须固定一种方法，并制订严格的炮制技术标准操作规范。
应根据《中药材炮制加工规范》进行详细叙述。
3．供试品的制备应说明选用制备方法的依据。
如供试品需要提取、纯化，应考察提取溶剂、提取方法、纯化方法等，提取、纯化方法应力求最大限度地保留供试品中的化学成分：如供试品需要粉碎检测，应考察粉碎方法、粒度等。
4．参照物的制备应说明参照物的选择和试验样品制备的依据。
应根据供试品中所合成分的性质，选择适宜的对照品或内标物作为参照物。
参照物的制备应根据检测方法的需要，选择适宜的方法进行，并说明制备理由。
5．检测方法根据供试品的特点和所合化学成分的理化性质选择相应的检测方法。
应说明选择检测方法的依据和该检测方法的原理，确定该检测方法的方法学考察资料和相关图谱(包括稳定性、精密度和重现性)。
对于所合成分类型较多的中药材，如一种检测方法或一张图谱不能反映该中药材的固有特性，可以考虑采用多种检测方法或一种检测方法的多种测定条件，建立多张指纹图谱。
建立指纹图谱所采用的色谱柱、薄层板等必须固定厂家和型号、规格，试剂、测定条件等也必须相应固定。
采用光谱法建立指纹图谱，其相应的检测条件也必须固定。
稳定性试验：主要考察供试品的稳定性。
取同一供试品，分别在不同时间检测，考察色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性，确定检测时间。
采用光谱方法检测的供试品，参照色谱方法进行相应考察。
，精密度试验：主要考察仪器的精密度。
取同一供试品，连续进样5次以上，考察色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性。
采用高效液相色谱和气相色谱制定指纹图谱，在指纹图谱中规定共有峰面积比值的各色谱峰，其峰面积比值的相对标准偏差RSD不得大于3％，其它方法不得大于5％。
采用光谱方法检测的供试品，参照色谱方法进行相应考察，相对标准偏差RSD不得大于3％。
重现性试验：主要考察实验方法的重现性。
取同一批号的供试品5份以上，按照供试品的制备和检测方法制备供试品并进行检测，考察色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性。
采用高效液相色谱和气相色谱制定指纹图谱，在指纹图谱中规定共有峰面积比值的各色谱峰，其峰面积比值的相对标准偏差RSD不得大于3％，其它方法不得大于5％。
采用光谱方法检测的供试品，参照色谱方法进行相应考察，相对标准偏差RSD不得大于3％。
6.指纹图谱及技术参数(1)指纹图谱根据供试品的检测结果制定指纹图谱，采用阿拉伯数字标示共有峰，用“S”标示参照物的峰。
采用高效液相色谱法和气相色谱法制定指纹图谱，应提供2小时的记录图，以考察l小时以后的色谱峰情况。
提供建立指纹图谱的有关数据，包括各共有峰的相对保留时间、各共有峰面积的比值。
采用光谱方法建立的指纹图谱，也必须提供相应的数据。
(2)共有指纹峰的标定应根据10批次以上供试品的检测结果，标定中药材的共有指纹峰。
说明标定共有指纹峰的理由，并附各批供试品的图谱。
(3)共有指纹峰面积的比值应根据10批次以上供试品图谱中各共有指纹峰面积的比值，计算平均比值，列出各批供试品的检测数据。
(4)非共有峰面积计算10批次以上供试品图谱中非共有峰总面积及占总峰面积的百分比，列出各批供试品的检测数据。
7．注射剂用中药材指纹图谱检测标准(草案)书写格式(1)中药材的名称、来源(2)供试品的制备(3)对照品溶液或内标物溶液的制备(4)测定方法(包括仪器、试剂、测定条件和测定方法)(5)指纹图谱及各项技术参数(6)起草说明二、中药注射剂及其有效部位或中间体指纹图谱的检测标准中药注射剂指纹图谱系指中药注射剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该注射剂特性的共有峰的图谱。
以有效部位或中间体投料的中药注射剂，还需制定有效部位或中间体的指纹图谱。
(一)指纹图谱的检测标准包括供试品和参照物的制备、检测方法、指纹图谱及技术参数。
有关项目的技术要求如下：1．供试品的制备应根据注射剂、有效部位或中间体中所合化学成分的理化性质和检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备。
制备方法必须确保该注射剂、有效部位或中间体主要化学成分在指纹图谱中的再观。
2．参照物的制备制定指纹图谱必须设立参照物。
应根据供试品中所合化学成分的性质，选择适宜的对照品作为参照物；如果没有适宜的对照品，可选择适宜的内标物作为参照物。
参照物的制备应根据检测方法的需要，选择适宜的方法。
3．测定方法包括测定方法、仪器、试剂、测定条件等。
应根据注射剂、有效部位和中间体所合化学成分的理化性质，选择适宜的检测方法。
建议优先考虑色谱方法。
对于成分复杂的注射剂、有效部位和中间体，特别是复方中药注射剂，必要时可以考虑采用多种检测方法，建立多张指纹图谱。
制定指纹图谱所采用的色谱柱、薄层板、试剂、测定条件等必须固定。
采用光谱方法制定指纹图谱，相应的测定条件也必须固定。
4．指纹图谱及技术参数(1)指纹图谱根据供试品的检测结果，建立指纹图谱。
采用高效液相色谱法和气相色谱法制定指纹图谱，其指纹图谱的记录时间一般为1小时；采用薄层扫描法制定指纹图谱，必须提供从原点至溶剂前沿的图谱；采用光谱方法制定指纹图谱，必须按各种光谱的相应规定提供全谱。
对于化学成分类型复杂的中药注射剂、有效部位和中间体，特别是中药复方注射剂，必要时建立多张指纹图谱。
指纹图谱的建立方法参见中药材部分。
(2)共有指纹峰的标定根据10批次以上供试品的检测结果，标定共有指纹峰。
色谱法采用相对保留时间标定指纹峰，光谱法采用波长或波数标定指纹峰。
色谱峰的相对保留时间根据参照物的保留时间计算。
(3)共有指纹峰面积的比值以对照品作为参照物的指纹图谱，以参照物峰面积作为l，计算各共有指纹峰面积与参照物峰面积的比值；以内标物作为参照物的指纹图谱，则以共有指纹峰中其中一个峰(要求峰面积相对较大、较稳定的共有峰)的峰面积作为1，计算其他各共有指纹峰面积的比值。
各共有指纹峰的面积比值必须相对固定。
供试品图谱中各共有峰面积的比值与指纹图谱中各共有峰面积的比值比较，保留时间小于或等于30分钟的共有峰：单峰面积占总峰面积大于或等于20％的共有峰，其差值不得大于土20％；单峰面积占总峰面积大于或等于10％，而小于20％的共有峰，其差值不得大于土25％；单峰面积占总峰面积大于或等于5％，而小于10％的共有峰，其差值不得大于士30％；单峰面积占总峰面积小于5％的共有峰，峰面积比值不作要求，但必须标定相对保留时间。